Name: אינדוקציה של שבץ איסכמי ו איסכמיה reperfusion בעכברים באמצעות הטכניקה ויזואליזציה ספיגות עורקים התיכונים של אזור האוטם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-02T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 8 s
Description: חקור שיטה ניתוחית לאינדוקציה של שבץ איסכמי בעכברים תוך שמירה על עורק המוח החיצוני לצורך אינפוזיה ישירה של טיפולים. טכניקה זו מאפשרת חקר מנגנוני השבץ והערכת יעילות טיפולים בחוליות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו רוצים להודות לד"ר ליי צ'ן (בית הספר לרפואה של אייקן בהר סיני, ניו יורק) שהקים לראשונה את המודל הזה במעבדה שלנו. נתמך בחלקו על ידי HL126559, DA039576, MH098891, MH63022, MH072567, DA027569 ו- NSC 2015/17/B/NZ7/02985. ד"ר לוק ברטרנד נתמך בחלקו על ידי מלגת פוסט-דוקטורט מאיגוד הלב האמריקאי (16POST31170002).

כל ההליכים אושרו על ידי האוניברסיטה של ​​טיפול בבעלי חיים מוסדיים מיאמי ועדת שימוש (IACUC) בהתאם המכונים הלאומיים לבריאות (NIH) הנחיות. השימוש בציוד סטרילי וטכניקות ספטית נדרש. 1. הכנת ספיגת התפר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש תפר בקוטר 0.21 מ&quot;מ לעכברים בין 20 - 25 גרם ו 0.23 מ&quot;מ לעכברים בין 25 - 35 גרם של משקל גוף. הבחירה של הסוג של תפרים עבור הליך MCAO תלוי במשקל חיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות עט כסף, לסמן תפר בשעה 9 מ&quot;מ החל מהקצה מצופה סיליקון. זה ישמש כמדריך אורך כניסה. </li></ol> 2. הכנה לכירורגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים עכבר עם isoflurane מעורבב עם חמצן, באמצעות מערכת הרדמת מעבדה. השתמש isoflurane בשעה מוגדר 5 ותזרים חמצן 2 על מכונת המסחרי (ראה לוח חומרים). מעבירים את החיה אל surgery השטח ולקיים הרדמה באמצעות חרטומו (isoflurane השתמש בהגדרה 1.5 - 2.5 ו זרימת חמצן 2). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבטיח שמירה על קצב עכבר הנשימה היא סביב 1 - 2 נשימה לכל שניות בלי להתנשף. בנוסף, להבטיח כי בעל החיים לא להפגין תגובה לגירוי שפם רפלקס דוושה (קמצוץ בוהן). צג הנשימה שיעור ומאמץ במהלך הניתוח, לפחות כל 5 דקות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים טיפה של חומר סיכה עיניים על כל עין באמצעות ספוגית סטרילית כדי למנוע מהם מהתייבשות במהלך ההליך. לחלופין, להחיל משחת עיניים לעין משפופרת תרופות סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את התנין על גבו ועל לגלח את אזור החתך. אחר כך, ביסודיות לחטא את אזור הניתוח באמצעות אתנול 70%, ואחריו כלורהקסידין, ואת הספוגית הסופית עם 70% אתנול. מניח את החיה על משטח כירורגי חם תחת סטראו. </li></ol> 3. דיסקציה של עורק Common הראש הפנימי / External מסעף <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מספריים מלקחיים כירורגיים, לבצע חתך קו האמצע רדוד בצוואר, מלמעלה לעצם החזה כדי מתחת ללסת (כ 3 - 4 ס&quot;מ). יש למקם וילון כירורגי מסביב לאזור הניתוח, כדי למנוע מכשירים מלבוא במגע עם משטחים לא סטריליים. וילון הכירורגים הושמט בסרטון הנוכחי כדי לסייע צילומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים, שומן נפרד בזהירות ורקמות חיבור לחשוף את קנה הנשימה. רקמות צריכות בקלות ובאופן טבעי להפריד לשני הצדדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים כרית (חפץ עגול, כ -0.5 ס&quot;מ קוטר) על החלק האחורי של הצוואר של עכברים כדי להאריך את הצוואר, עוד חשיפת האזור לניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את החתך גם באמצעות מפשק רקמות או ווים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצד שמאל של החיה של קנה הנשימה, למרוט לגזרים את רקמת החיבור בזהירות כדי לחשוף את העורק הראשי משותף שמאל (CCA). היזהר שלא לפגוע בעצבים וורידים מרכזיים יחד עם המרכז לאמנות עכשווית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך חשיפת CCA, נזהר להתנתק הרקמה הבסיסית, ולחשוף את &quot;Y&quot; העליון הסתעפות של עורק המוח הפנימי (רשפ&quot;ת) ו עורק המוח חיצוני (ECA). כדי לסייע ניתוק CCA, הכנס את המלקחיים המעוקלים תחת CCA לנקב את רקמת חיבור ואז לאט לאט לאפשר להם לפתוח. </li></ol> 4. הכנת המרכז לאמנות עכשווית עבור החדרת תפר MCAO <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס 3 מגזרי ניילון תפר של כ -4 ס&quot;מ באורך תחת CCA. ודא כי CCA אינו מעוות זה יסבך ההחדרה דרסטי של התפר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בנקודה הנמוכה ביותר האפשרית, לסגור את התפר התחתון באמצעות פקעת קבע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור את התפר העליון ממש מתחת ICA / ECA הסתעפות באמצעות קשר להחליק נשלף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור את התפר באמצע באמצעות קשר להחליק נשלף, אבל שמור עליו פתוחה לרווחה. חשוב להשאיר מספיק מקום שלא לעכב החדרת תפר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש sci אביב microdissectionssors, לבצע חתך CCA בין החלק התחתון ותפרים באמצע. בצע את חתך 0.2 המ&quot;מ קרוב התפר התחתון. </li></ol> 5. עורקים תיכונים ספיג מוחות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים, הכנס את תפר MCAO לתוך החתך CCA, המנחה אותו עד לקצה. בצע פעולה זו במהירות לאחר שלב 4.5 כדי למנוע קרישה וסגירה של פתיחת המרכז לאמנות העכשווית. במקרה החדרת תפר חסום, השתמש טיפים של מלקחיים כדי לפתוח מחדש את החתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות לכבול תפר באמצע מצד סיליקון תפר MCAO באמצעות קשר להחליק כדי להגביל את זרימת הדם סביבו, אך רופף מספיק כדי לאפשר לו לנוע בחופשיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לבטל תפר העליון, ולוודא כי תפר MCAO לא יחליק החוצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את תפר MCAO ב הרשפ&quot;ת על ידי כמה מילימטרים ואז reclose התפר העליון, באותו אופן כפי שמתואר בשלב 5.2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדריך תפר MCAO לאזור החסימה. חיווי החדרה מוצלחת הואניכר על ידי הכמות הנמוכה של backflow דם מן חתך CCA וכי סימן מ&quot;מ כסף 9 ממוקם בין חתך CCA ואת הסתעפות ICA / ECA. אישור נוסף של חסימה מוצלחת ניתן להשיג באמצעות שיטות ניטור כגון מערכת ניטור זרימת הדם דופלר לייזר 15, 16. הערה: ירידה של 90% של זרימת דם לאזור המוח האמצעי בצד באזור המוסתר מציינת חסימה מוצלחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר חסימה מוצלחת, לכבול תפר הבינוני העליון בחוזקה. אם ביצוע הכניסה דמה, לא reclose התפרים אלא מיד דלג לשלב 7.3. </li></ol> סגירת חתך 6. שלאחר ניתוח טיפול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טאק התפרים לאזור החתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סור ווים מפשקים או רקמות כרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אזור תפר נקי באמצעות מי מלח סטרילית מקלון צמר גפן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגירת החתך באמצעות ניילון תפר / מחט מלקחיים. </li> &lt;li&gt; נהל אנטי דלקתיות (למשל, Carprofen 10 מ&quot;ג / ק&quot;ג, SC) משכך כאבים (למשל, עצירות 0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג SC, פעמיים ביום) תרופות להקלת אי נוחות לאחר הניתוח. מניחים את העכברים בכלוב מונח על משטח לוהט כדי למנוע היפותרמיה ולהנגיש המודעה labium למים ומזון התרכך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על התאוששות של בעלי חיים (5 - 10 דק &#39;) ואת סימני שבץ. הם יכולים להשתנות משיתוק לרוחב קל והקיפו להתכווצות חמורה של האגף הנגדי מתגלגל. נקודות הערכה כמה מפורטות בדיון. בעלי החיים מוצגים סימני מצוקה נשימתית או התקפים חמורים צריכים להיות מורדמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם לפרוטוקול reperfusion איסכמיה, לעזוב את תפר MCAO במקום מ -30 דקות ל -120 דקות או יותר. צמצום חסימת זמן מונע תמותה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור חסימה קבועה, לעזוב את תפר MCAO במקום במשך 24 שעות, אולם שיעור התמותה המשמעותי הוא צפוי. לאחר זמן לשגות זה, המשך STEעמ &#39;7. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם באמצעות מודל חסימה קבועה, לשמור עכברים בכלוב עד לנקודת הסיום. באותו הזמן, להסיר תפר (שלבים 7.1 כדי 7.8). הליך זה יכול להתבצע גם לאחר המתת חסד. </li></ol></li></ol> Reperfusion 7. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את החיה שוב (אחרי הוראות 2.1) ולהסיר תפרי סגירת פצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים ומפרידי רקמות, לפתוח מחדש את החתך ולחשוף את המרכז לאמנות עכשווית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוציאים בזהירות את תפר העליון ומשוך בעדינות על תפר MCAO עד החלק מצופה סיליקון ממוקם משכו את הקשר באמצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע שוב את הקשר העליון על התפר כדי למנוע מדם לזרום לעבור התפר (זה לא חייב להיות קשר להחליק). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות להתיר את הקשר באמצע ומשוך התפר על פני הקשר העליון, אבל לשמור את זה בתוך CCA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבשר ומהדקים את הקשר העליון לחסום את זרימת הדם בעורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך החוצה לחלוטין תפר MCAO ולסגור את הקשר באמצע בחוזקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר MCAO יכול להיותשימוש חוזר מספר פעמים. לאחר כל שימוש, נקו את תפר בקפידה באתנול 70% כדי להסיר מזהמים (למשל, דם או רקמות) באמצעות גזה סטרילי. לאחר מכן, למקם את התפר בתוך כיס מעקר לעקר אותה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 6.1 - 6.4 ואת לפקח התאוששות בעלי חיים. </li></ol> בדיקת רקמות 8. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לפקח נפח פעימה, לנתח את המוח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכבר באמצעות תהליך בן שני שלבים. ראשית, לחשוף את בעל החיים ממנת יתר של isoflurane עד נושם עצירות. עבור מכתים TTC, לערוף את העכבר באופן מיידי והמשך מיצוי המוח. עבור המוח חתך (למשל, עבור immunostaining מנתח), לבצע זלוף באמצעות לנקב לב לפני עריפת ראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Cut-off ראש בבסיס הגולגולת לחתוך את הקרקפת משני צידי הצוואר כדי העליון של הגולגולת עד בין העיניים. עם חשפה את הגולגולת, לחתוך את העצם לאורך שני הצדדים החל מפתיחת בסיס הגולגולתעד ארובת העין. הפוך זה לחתוך לאורך החלק הרחב של הגולגולת. היזהר שלא להגיע עמוק מדי עם מספריים כדי למנוע נזק למוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן, לחתוך את העצם בין שתי ארובות העיניים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים, להרים את החלק העליון של הגולגולת כדי לחשוף את המוח. לא צריך להיות רק התנגדות קטנה. אם זה לא להרים בקלות, חתכים בגולגולת עשויים להיות חלקיים. שחרר את המוח בעדינות בעזרת מלקחיים מעוקלים בוטים. המוח עדיין מוצמד על ידי מספר עצבים. להתקדם לאט, אפשרות להסיר קבצים מצורפים לאורך הדרך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את המוח הטרי במטריצת מוח 1 מ&quot;מ, להוסיף כמה טיפות של PBS, ופורס לאורך מטריקס באמצעות סכין גילוח או סכין cryostat. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את המוח על צלחת 100 מ&quot;מ ולהוסיף פתרון מכתים (2% כלוריד 2,3,5-triphenyltetrazolium [TTC] מומס PBS) כדי לכסות את החלק התחתון של המנה. השימוש בשני מלקחיים, נפרד כל פרוסות המוח (מול פונה כלפי מטה) ומניחות אותם על מנת בתחתית המנה. הערה: מכתים יהפוך קיימא רקמות אדומות, עם לא-ישימות רקמה נותרת לבנה. התחממות פתרון 37 ° C תאיץ מכתים. סימנים של אזור מוחי (לבן) ניתן לראות מהר ככל שבץ שלאחר 90 דקות נשארים גלויים במשך יותר מ -7 ימים. הדמיה צריכה להיעשות יחד עם סרגל כדי לאפשר חישוב של נפח פעימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תהליך גזור מוחות עבור חתך, מכתים חיסוני, בידוד חלבון, או מגוון של הליכים אחרים 17, 18, 19. </li></ol>

<ol><li>Cuomo, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antithrombin+reduces+ischemic+volume%2C+ameliorates+neurologic+deficits%2C+and+prolongs+animal+survival+in+both+transient+and+permanent+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Antithrombin reduces ischemic volume, ameliorates neurologic deficits, and prolongs animal survival in both transient and permanent focal ischemia.</a> Stroke. 38 (12), 3272-3279 (2007).</li>
<li>Wauquier, A., Melis, W., Janssen, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+neurological+assessment+of+the+post-resuscitative+effects+of+flunarizine%2C+verapamil+and+nimodipine+in+a+new+model+of+global+complete+ischaemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Long-term neurological assessment of the post-resuscitative effects of flunarizine, verapamil and nimodipine in a new model of global complete ischaemia.</a> Neuropharmacology. 28 (8), 837-846 (1989).</li>
<li>Liu, F., McCullough, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Middle+cerebral+artery+occlusion+model+in+rodents%3A+methods+and+potential+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Middle cerebral artery occlusion model in rodents: methods and potential pitfalls.</a> J Biomed Biotechnol. 2011, 464701(2011).</li>
<li>Chiu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+tissue+plasminogen+activator+for+acute+ischemic+stroke%3A+feasibility%2C+safety%2C+and+efficacy+in+the+first+year+of+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Intravenous tissue plasminogen activator for acute ischemic stroke: feasibility, safety, and efficacy in the first year of clinical practice.</a> Stroke. 29 (1), 18-22 (1998).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li>
<li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="https://www.jstage.jst.go.jp/article/jstroke1979/8/1/8_1_1/_article">Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).</li>
<li>Liu, F., Schafer, D. P., McCullough, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TTC%2C+fluoro-Jade+B+and+NeuN+staining+confirm+evolving+phases+of+infarction+induced+by+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">TTC, fluoro-Jade B and NeuN staining confirm evolving phases of infarction induced by middle cerebral artery occlusion.</a> J Neurosci Methods. 179 (1), 1-8 (2009).</li>
<li>Liu, F., Yuan, R., Benashski, S. E., McCullough, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+experimental+stroke+outcome+across+the+life+span%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Changes in experimental stroke outcome across the life span.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 29 (4), 792-802 (2009).</li>
<li>Wang, R. Y., Wang, P. S., Yang, Y. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+age+in+rats+following+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Gerontology%22%5BJournal%5D)">Effect of age in rats following middle cerebral artery occlusion.</a> Gerontology. 49 (1), 27-32 (2003).</li>
<li>Baskerville, T. A., Macrae, I. M., Holmes, W. M., McCabe, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+gender+on+%27tissue+at+risk%27+in+acute+stroke%3A+A+diffusion-weighted+magnetic+resonance+imaging+study+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischaemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">The influence of gender on 'tissue at risk' in acute stroke: A diffusion-weighted magnetic resonance imaging study in a rat model of focal cerebral ischaemia.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 36 (2), 381-386 (2016).</li>
<li>Cai, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Co-transplantation+of+hippocampal+neural+stem+cells+and+astrocytes+and+microvascular+endothelial+cells+improve+the+memory+in+ischemic+stroke+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Co-transplantation of hippocampal neural stem cells and astrocytes and microvascular endothelial cells improve the memory in ischemic stroke rat.</a> Int J Clin Exp Med. 8 (8), 13109-13117 (2015).</li>
<li>Cheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenously+delivered+neural+stem+cells+migrate+into+ischemic+brain%2C+differentiate+and+improve+functional+recovery+after+transient+ischemic+stroke+in+adult+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Intravenously delivered neural stem cells migrate into ischemic brain, differentiate and improve functional recovery after transient ischemic stroke in adult rats.</a> Int J Clin Exp Pathol. 8 (3), 2928-2936 (2015).</li>
<li>Nagai, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+Administration+of+Cilostazol+Nanoparticles+Ameliorates+Acute+Ischemic+Stroke+in+a+Cerebral+Ischemia%2FReperfusion-Induced+Injury+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Intravenous Administration of Cilostazol Nanoparticles Ameliorates Acute Ischemic Stroke in a Cerebral Ischemia/Reperfusion-Induced Injury Model.</a> Int J Mol Sci. 16 (12), 29329-29344 (2015).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+PEP-1-GDNF+is+protective+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Intravenous PEP-1-GDNF is protective after focal cerebral ischemia in rats.</a> Neurosci Lett. 617, 150-155 (2016).</li>
<li>Hedna, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+of+Laser+Doppler+Flowmetry+in+Predicting+Outcome+in+Murine+Intraluminal+Middle+Cerebral+Artery+Occlusion+Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Interv+Neurol%22%5BJournal%5D)">Validity of Laser Doppler Flowmetry in Predicting Outcome in Murine Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion Stroke.</a> J Vasc Interv Neurol. 8 (3), 74-82 (2015).</li>
<li>Tajima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducibility+of+measuring+cerebral+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Biosci+%28Elite+Ed%29%22%5BJournal%5D)">Reproducibility of measuring cerebral blood flow by laser-Doppler flowmetry in mice.</a> Front Biosci (Elite Ed). 6, 62-68 (2014).</li>
<li>Fang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scutellarin+regulates+microglia-mediated+TNC1+astrocytic+reaction+and+astrogliosis+in+cerebral+ischemia+in+the+adult+rats%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Scutellarin regulates microglia-mediated TNC1 astrocytic reaction and astrogliosis in cerebral ischemia in the adult rats.</a> BMC Neurosci. 16, 84(2015).</li>
<li>Evilsizor, M. N., Ray-Jones, H. F., Lifshitz, J., Ziebell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primer+for+immunohistochemistry+on+cryosectioned+rat+brain+tissue%3A+example+staining+for+microglia+and+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Primer for immunohistochemistry on cryosectioned rat brain tissue: example staining for microglia and neurons.</a> J Vis Exp. (99), e52293(2015).</li>
<li>Kramer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TTC+staining+of+damaged+brain+areas+after+MCA+occlusion+in+the+rat+does+not+constrict+quantitative+gene+and+protein+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">TTC staining of damaged brain areas after MCA occlusion in the rat does not constrict quantitative gene and protein analyses.</a> J Neurosci Methods. 187 (1), 84-89 (2010).</li>
<li>Wu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Keep+warm+and+get+success%3A+the+role+of+postischemic+temperature+in+the+mouse+middle+cerebral+artery+occlusion+model%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Keep warm and get success: the role of postischemic temperature in the mouse middle cerebral artery occlusion model.</a> Brain Res Bull. 101, 12-17 (2014).</li>
<li>Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Stroke+Model+Guidelines+for+Preclinical+Stroke+Trials+%281st+Edition%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Stroke+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Rodent Stroke Model Guidelines for Preclinical Stroke Trials (1st Edition).</a> J Exp Stroke Transl Med. 2 (2), 2-27 (2009).</li>
<li>Tsuchiya, D., Hong, S., Kayama, T., Panter, S. S., Weinstein, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+suture+size+and+carotid+clip+application+upon+blood+flow+and+infarct+volume+after+permanent+and+temporary+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of suture size and carotid clip application upon blood flow and infarct volume after permanent and temporary middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Brain Res. 970 (1-2), 131-139 (2003).</li>
<li>Wolff, G., Davidson, S. J., Wrobel, J. K., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+maintains+blood-brain+barrier+integrity+during+early+stages+of+brain+metastasis+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Exercise maintains blood-brain barrier integrity during early stages of brain metastasis formation.</a> Biochem Biophys Res Commun. 463 (4), 811-817 (2015).</li>
<li>Wrobel, J. K., Wolff, G., Xiao, R., Power, R. F., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+Selenium+Supplementation+Modulates+Growth+of+Brain+Metastatic+Tumors+and+Changes+the+Expression+of+Adhesion+Molecules+in+Brain+Microvessels%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Trace+Elem+Res%22%5BJournal%5D)">Dietary Selenium Supplementation Modulates Growth of Brain Metastatic Tumors and Changes the Expression of Adhesion Molecules in Brain Microvessels.</a> Biol Trace Elem Res. , (2015).</li>
<li>Chen, L., Swartz, K. R., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel+microport+technique+for+applications+in+cerebrovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Vessel microport technique for applications in cerebrovascular research.</a> J Neurosci Res. 87 (7), 1718-1727 (2009).</li>
</ol>

לסופרים אין מתחרים או ניגודי אינטרסים.

הניצול המוצלח של שיטת MCAO תארה תלוי מאוד על הבנת האנטומיה זרימת דם במוח. מאז המיקום הנכון של התפר קשה להבחין בשל חוסר רמזים חזותיים ישירים, לחזור על התרגילים חשובים להשתלט על ההליך לפני השימוש בו ללימודי חקירה. נפח פעימה יש לנתח על מנת להבטיח תוצאות עקביות. התוספת של מערכת ליזר דופלר יכולה לעזור כדי לקבוע את החסימה המוצלחת של זרימת הדם אמור לשמש מעת לעת על מנת להבטיח כי ההליך נעשה בצורה נכונה. ניתוב תפר MCAO לאזור החסימה ניתן להקל על ידי מניפולציה של העורק. כדי לסייע בהכוונת התפר...

המחקר של מחלות לב וכלי דם, כגון שבץ, מסתמך על השימוש במודלים in vivo. כדי להבין את המשמעות האפשרית של איסכמיה, הרעלת סמים, ו / או טיפול, יש צורך להשתמש מודל מתאים, סטנדרטי, אמין, לשחזור של המחלה, המאפשרת מחקרים השוואתיים בין קבוצות טיפול. בכתב היד הזה, אנו משתמשים בעכברים, הרי שעל בסיס זמינות של מספר רב של עכברים טרנסגניים ומודלים להערכה סטנדרטיים. לגרף ציונים להעריך גירעונות מנוע והתנהגות לאחר שבץ איסכמי הניסיון ואת ההתאוששות שלהלן פותח 1, 2. מודלי שבץ איסכמי כמה זמינים, כגון איסכמיה מוחית העולמית מלאה, איסכמיה הגלובלית שלמה, איסכמיה מוחית מולטיפוקליות ו איסכמיה מוחית מוקדים. הקבוצה השנייה היא גם בקטגוריה של שבץ הנפוץ ביותר בחולים. רוב הערבnts מבוצע על ידי ההיווצרות של חסימת תסחיפים או טרומבוטיים ליד או עורק המוח האמצעי (MCA). בהתחשב בפרמטרים אלה, המודל שהוצג יחקה האטיולוגיה מחלת שבץ אדם ועושה תוצאות שהתקבלו ביותר 3 רלוונטיים. עם זאת, התרגום של תגליות מן במודלים של בעלי חיים לטיפול במחלה בבני האדם הוכיח להיות מאתגר. עד כה, רק את השימוש activator plasminogen רקמות thrombolytic אושר לטיפול בשבץ מוחי איסכמי 4. בין דגמים של איסכמיה מוחית מוקד עכבר, מודל שבץ מוחה זרימה אחורית ודגם פקק ורידי מוחות הם פולשני מאוד, הולכים ופוחת תחולתן והגבלת מגוון ניתוחים שניתן לבצע. עם זאת, טכניקות אחרות, כגון המודל תסחיפי, מודל photothrombosis, אנדותלין -1 המושרה מודל שבץ, חסימה בעורק המוח האמצעי תפר intraluminal (MCAO) מודל, זמין לשימוש ללא מגבלות כאלה. מודל MCAO הוא טכניקה מתוארת בפרוטוקול זה. הוא מציע שיטה אמינה של גרימת איסכמיה מוחית מוקדים שניתן reperfused בקלות ובצעה באופן תפוקה גבוהה. קיימות שתי גישות מודל זה, כלומר, Zea-Longa ו קואיזומי השיטות. הם נבדלים מעט בדרך תפר החסימה מוכנסת בכלי הדם. בטכניקת Zea-Longa, התפר מוכנס דרך עורק התרדמה החיצוני 5. הטכניקה המוצגת כאן היא שונה משיטת קואיזומי שבו תפר occluding מוכנס דרך עורק התרדמה המשותף 6. מודל MCAO יושם בהצלחה על מנת להעריך אירועים שונים המתרחשים במהלך שבץ איסכמי. בעקבות רה-פרפוזיה, בצקת במוח ניתן לצפות יחד עם פירוט של מחסום הדם-מוח. ומוות עצב שיא בדרך כלל הוא ציין 24 שעות; עם זאת, זה מחדשפונה לרמות הבסיס לאחר 7 ימים 7. אצל בני אדם, מין וגיל הם משתנים חשובים בקביעת התוצאה שבץ, זה גם הוא ציין עכברים וחולדות 8, 9, 10. מספר פרסומים השתמשו במודל MCAO להפגין יעילות הטיפול 11, 12, 13, 14.

<table><tbody><tr><td>תפר MCAO 0.23 מ"מ</td><td>Doccol</td><td>702345PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>תפר MCAO 0.21 מ"מ</td><td>Doccol</td><td>702145PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>סיכות</td><td>עט כסף</td><td>503205</td><td></td></tr><tr><td>מכונת הרדמה</td><td>Vetequip</td><td>901806</td><td></td></tr><tr><td>מספריים כירורגיים</td><td>כלי מדע עדין</td><td>14558-09</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים כירורגיים קצה ישר</td><td>בסדר כלי מדעי</td><td>00108-11</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים כירורגיים קצה זוויתי</td><td>כלי מדע עדין</td><td>00109-11</td><td></td></tr><tr><td>מספריים קפיצים</td><td>כלי מדע עדין</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>תפר ניילון</td><td>Braintree scintific</td><td>SUT-S 104</td><td></td></tr><tr><td>תפר סגירה</td><td>VWR</td><td>95057-036</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2,3,5- Triphenyltetrazolium chloride</td><td>FisherSci</td><td>50-121-8005</td><td></td></tr><tr><td>בלוק מוח</td><td>Braintree Scintific</td><td>BS-A 5000C</td><td></td></tr><tr><td>להב קריוסטט</td><td>VWR</td><td>89202-606</td><td></td></tr><tr><td>אופציונלי:</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>מערכת דופלר לייזר</td><td>Periflux Perimed</td><td>Periflux 5000</td><td></td></tr><tr><td>יחידת ניטור</td><td>Perimed</td><td>PF 5010 - LDPM</td><td></td></tr></tbody></table>

אינדוקציה של שבץ איסכמי ו איסכמיה reperfusion בעכברים באמצעות הטכניקה ויזואליזציה ספיגות עורקים התיכונים של אזור האוטם

Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

מחלת כלי דם במוח שכיחה מאוד באוכלוסייה העולמית וכוללת מספר סוגים של מצבים, כולל שבץ מוחי. כדי לחקור את ההשפעה של שבץ מוחי על פגיעה ברקמות ולהעריך את היעילות של התערבויות טיפוליות, פותחו מספר מודלים ניסיוניים במגוון מינים. הם כוללים איסכמיה מוחית גלובלית מלאה, איסכמיה גלובלית לא שלמה, איסכמיה מוחית מוקדית ואיסכמיה מוחית מולטיפוקלית. המודל המתואר בפרוטוקול זה מבוסס על חסימת עורק המוח האמצעי (MCAO) וקשור לקטגוריית האיסכמיה המוקדית. טכניקה זו מייצרת איסכמיה מוקדית עקבית באזור מוגדר בקפידה של חצי הכדור והיא פחות פולשנית משיטות אחרות. ההליך המתואר מבוצע על עכברים, בהתחשב בזמינותם של מספר וריאנטים גנטיים והמספר הגבוה של בדיקות סטנדרטיות לעכברים כדי לסייע בהערכה התנהגותית ונוירולוגית.

מסלול הכניסה עבור תפר החסימה מודגם באיור 1. תפר MCAO הוא להיות מוכרע לאזור החסימה, מתפצל ב הרשפ"ת. חסימה מוצלחת של MCA תוביל פגיעה ברקמות, גלויה על ידי מכתים TTC. איור 2 מציג תמונות של מכתים מן החי מטופלים דמה (איור 2 א) ו מבעל חיים reperfusion איסכמיה 60 דקות MCAO (מכתים ב 90 דקות או 24 שעות שלאחר חסימה, איור 2B). כדי לקבוע נפח פעימה, ראשון לחשב את שטח השבץ עבור כל מקטע, באמצעות ה...

אנו מתארים מודל עכבר של שבץ מוחי הנגרם על ידי חסימה של עורק המוח האמצעי באמצעות תפר מצופה סיליקון. ניתן ליישם את הפרוטוקול כדי לגרום לחסימה קבועה או איסכמיה זמנית, ואחריה רפרפוזיה.

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of ...

המטרה הכוללת של הליך כירורגי זה היא לגרום באופן רשמי ומהימן לשבץ איסכמי תוך השארת עורק המוח החיצוני שלם. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום חקר שבץ מוחי, כגון השפעת הטיפול על חומרת השבץ. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שלאחר השראת שבץ מוחי, עורק המוח החיצוני נשאר זמין להזרקת טיפול ישירות לחצי הכדור הפגוע.הנח עכבר מורדם באיזופלורן על משטח הניתוח המוכן והתאם חרוט אף למתן איזופלורן מעורבב בחמצן. ודא שקצב הנשימה הוא סביב נשימה אחת עד שתיים בשנייה מבלי להתנשף. בנוסף, ודא שהחיה אינה מפגינה תגובה לגירוי שפם או לרפלקס הדוושה.מרחו טיפה של חומר סיכה עיניים על כל עין, בעזרת ספוגית סטרילית כדי למנוע מהם להתייבש במהלך ההליך. לאחר גילוח אזור החתך, יש לחטא היטב את אזור הניתוח באמצעות אתנול 70% ותמיסה על בסיס כלורהקסידין. שמור את החיה על משטח כירורגי חם תחת מיקרוסקופ סטריאו.לאחר מכן, בעזרת מספריים ומלקחיים כירורגיים, בצע חתך רדוד בקו האמצע בצוואר מעל עצם החזה עד מתחת ללסת. בעזרת מלקחיים, הפרד בזהירות רקמות שומן וחיבור כדי לחשוף את קנה הנשימה. הרקמות צריכות להיפרד בקלות ובאופן טבעי משני הצדדים.לאחר מכן הניחו כרית או חפץ עגול אחר בקוטר של כ-0.5 סנטימטרים מתחת לחלק האחורי של הצוואר כדי להאריך את הצוואר ולחשוף עוד יותר את האזור לניתוח. פתח את החתך באמצעות מפסק רקמות או ווים. לאחר מכן, בצד שמאל של קנה הנשימה, יש להפריד בזהירות את רקמת החיבור כדי לחשוף את עורק הצוואר המשותף השמאלי מבלי לפגוע בעצבים הסמוכים ובוורידים הראשיים.לאחר מכן, הכניסו את המלקחיים המעוקלים מתחת ל-CCA כדי לנקב את רקמת החיבור ואז אפשרו להם להיפתח לאט כדי לשחרר את ה-CCA. נתק את ה-CCA מהרקמה הבסיסית וחשוף את הסתעפות ה-y העליונה של עורק המוח הפנימי ועורק המוח החיצוני. לאחר חשיפת ה-CCA, הכנס שלושה מקטעים של תפר ניילון מתחת ל-CCA.ודא שה-CCA אינו מעוות, מכיוון שהדבר יסבך באופן דרסטי את החדרת התפר. ואז בנקודה הנמוכה ביותר האפשרית, סגור את התפר התחתון באמצעות קשר קבוע. קשרו את התפר העליון ממש מתחת להסתעפות של ה-ICA וה-ECA באמצעות קשר נשלף.לאחר מכן, קשרו את התפר האמצעי באמצעות קשר נשלף, אך השאירו אותו פתוח לרווחה. לאחר מכן, בעזרת מספריים קפיציים של מיקרו דיסקציה, צור 0.2 מילימטר ב- CCA בין התפרים התחתונים והאמצעיים קרוב יותר לתפר התחתון. בעזרת מלקחיים, הכנס את תפר ה-MCAO לתוך חתך ה-CCA, והנח אותו לכיוון התפר העליון.לאחר מכן הדק בעדינות את הקשר של התפר האמצעי ב-CCA כך שהוא יגביל את זרימת הדם סביב תפר ה-MCAO, אך יהיה רופף מספיק כדי לאפשר לתפר ה-MCAO לנוע בחופשיות. כעת שחרר בזהירות את התפר העליון, וודא שתפר ה-MCAO לא יחליק החוצה. הכנס את תפר ה-MCAO כמה מילימטרים לתוך ה-ICA ולאחר מכן סגור מחדש את התפר העליון עם קשר כמו קודם.לאחר מכן, הנח את תפר ה-MCAO לאזור החסימה, תחילה על ידי ניתובו לתוך ה-ICA מעבר ל-ECA, ולאחר מכן על ידי הבטחה שהתפר נשאר ב-ICA, תוך עקיפת עורק הפטריגופלטין. ההחדרה מוצלחת אם יש מעט זרימת דם חוזרת מהחתך CCA ואם סימן תשעה המילימטר הכסוף ממוקם בין חתך ה-CCA לבין ההסתעפות של ה-ICA וה-ECA. לאחר חסימה מוצלחת, קושרים היטב את התפר האמצעי והעליון ואז מכניסים את התפרים לאזור החתך.לאחר הסרת המחזיר או ווי הטישו והכרית, נקו את אזור התפר באמצעות מי מלח סטריליים על צמר גפן. ואז סוגרים את העור בתפר ניילון. הנח את העכבר בכלוב נקי הממוקם על כרית מחוממת כדי למנוע היפותרמיה ולאפשר גישה אד ליביטום למים ולמזון מרוכך.עקוב אחר החיה לאיתור סימני שבץ מוחי למשך חמש עד 10 דקות לפחות. בהתאם לפרוטוקול הרפרפוזיה של איסכמיה, השאר את תפר ה-MCAO במקומו בין 30 דקות ל-120 דקות או יותר. לאחר הרדמת החיה כמו קודם והסרת התפרים הסוגרים את הפצע, השתמש במלקחיים ובמפרידי רקמות כדי לפתוח מחדש את החתך ולחשוף את ה-CCA.לאחר מכן הסר בזהירות את התפר העליון ומשוך בעדינות את תפר ה-MCAO עד שהחלק המצופה סיליקון ממוקם בקשר האמצעי. בצע מחדש את תפר הקשר העליון כדי למנוע זרימת דם מעבר לתפר MCAO. לאחר מכן שחרר בזהירות את הקשר האמצעי ומשוך את תפר ה-MCAO מעבר לקשר העליון, והשאר אותו בתוך ה-CCA.סגור היטב את הקשר העליון כדי לחסום את זרימת הדם בעורקים. לאחר מכן, משוך לחלוטין את תפר ה-MCAO וסגור היטב את הקשר האמצעי. סגור את הפצע והעניק טיפול לאחר הניתוח כמו קודם.סכימה זו מציגה את אזור החסימה הנובע מההליך המודגם בסרטון זה בכחול. אזור הניתוח ממוקם בתחתית הדמות, מסומן על ידי הצורה הסגלגלה, ומיקום התפרים מסומן בקווים שחורים. התמונות הבאות מראות את עמידת TTC של מקטעי המוח.תמונה זו מייצגת צביעה אופיינית לאחר הכנסת דמה. התמונה מייצגת את הנזק לרקמות שנגרם על ידי MCAO של 60 דקות, ואחריו 90 דקות של רפרפוזיה. נזק גדול יותר לרקמות נראה לאחר 24 שעות של עירוי מחדש, לאחר MCAO של 60 דקות.צביעה אימונו-פלואורסצנטית עבור הסמן העצבי MAP2 מאפשרת אובדן עצבי מ-60 דקות של חסימה, ולאחר מכן 23 שעות של רפרפוזיה, כדי לראות בבירור בתמונה מימין. אסטרוגליוזיס נראית לאחר צביעה אימונו-פלואורסצנטית עם GFAP. בתמונה מימין, האסטרוגליה מרוכזת באזור הסמוך לנזק לרקמות במוח הרפרפוזיה של איסכמיה, ואילו טפיחה מפוזרת של צביעה נראית בביקורת שניתנה לבושה.בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לעקוב אחר רווחת בעלי החיים וזמן החסימה. לאחר הליך זה, ניתן לבצע טכניקות אחרות כגון ניתוח התנהגות מוזרה ואימונופלואורסצנציה כדי לענות על שאלות נוספות על פגיעה ברקמות והתאוששות.

induction-ischemic-stroke-ischemia-reperfusion-mice-using-middle

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אינדוקציה כירורגי של נזק מוחי איסכמי בחולדה הוא מודל בשימוש נרחב עבור מחקר שבץ. כאן אנו מדגימים את האינדוקציה של איסכמיה מוחית המוקד על ידי חסימה של עורק המוח האמצעי. ויזואליזציה של האוטם שהתקבל על ידי צביעה היסטולוגית ו דימות בתהודה מגנטית מוצג גם.

דגם מרחק איסכמיה מוחית על ידי ספיגה תפר Endovascular של עורק המוח התיכון עכברוש

פילמנטיות חסימה של עורק המוח התיכון הוא מודל משותף לחקר שבץ איסכמי בעכברים.

דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה

אנו מדגימים את הוידאו שיטה לייצור באמצע חסימה בעורק המוח בעכברים בוגרים באמצעות monofilament intraluminal. כמו כן, אנו מראים כיצד להעריך את מידת אוטם מוחי על ידי מכתים 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד (TTC).

עכבר דגם ספיגה התיכון עורק מוחי

עורק המוח האמצעי intraluminal חסימה (MCAO) מודל הוא מודל בשימוש השכיח ביותר בקרב מודלים ניסיוניים שבץ איסכמי. להלן נדגים את המודל כולו בפירוט עם מדריך של flowmetry לייזר דופלר, והתוצאות מי מטעמה.

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

מודל intraluminal המוח האמצעי, החסימה בעכברים מוצג במסמך זה. ההיקף אוטם מוחית מחושב על ידי ציון נוירולוגים וכתמים סגולים cresyl, מכתים חלופה לTTC, להציע את היתרון הגדול לבדיקה בסמני ריבית רבים במקביל.

מודל עכבר של MCAO intraluminal: הערכת אוטם מוחית על ידי כתמים סגולים Cresyl

על מנת להבין את פתופיזיולוגיה של שבץ, חשוב להשתמש במודלים אמינים. מאמר זה יתאר את אחד דגמי שבץ הנפוצים ביותר בשימוש בעכברים, כינה את חסימת עורק המוח האמצעי (MCAo) המודל (המכונה גם נימת intraluminal או מודל תפר) עם reperfusion.

גישה ניתוחית עבור העורקים התיכון ספיגה מוחין ושבץ reperfusion מושרה של עכברים

Intraluminal סגר נימה של עורק המוח התיכון הוא הדגם הנפוצות ביותר בשימוש ב- vivo של שבץ ניסויים בחולדות. גישה כירורגית חלופיים כדי לאפשר תיקון עורק הראש נפוצות מתבצע כאן, מה שמאפשר את פגיעה reperfusion של עורק תרדמני, של פגיעה reperfusion מלא אל השטח עורק המוח התיכון.

חסימה בעורק האמצעי המאפשר פגיעה Reperfusion באמצעות תיקון עורק הראש נפוצות בעכברים

דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion הוקמה כדי לחקור הפתופיזיולוגיה של שבץ. אנו יש מאתרים ומפסיקים את עורק המוח התיכון נכון ולא נכון עורק תרדמני, להחזיר את זרימת הדם לאחר 10 או 40 דקות של איסכמיה.

שתיים, כלי סגר דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion

כאן אנו מתארים שיטה פשוטה וניתנת לשחזור שיכולה לגרום לאוטם שריר הלב או לפגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים על ידי קשירה מדויקת של העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי באמצעות מיקרומניפולציה.

השראת אוטם שריר הלב ופגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים

פרוטוקול זה מתאר את המודל של איסכמיה מוחית מוקדית חולפת בעכברים באמצעות חסימה תוך לומינלית של עורק המוח האמצעי. בנוסף, דוגמאות להערכת תוצאות מוצגות באמצעות הדמיית תהודה מגנטית ומבחני התנהגות.

מודל חולף של חסימת עורק מוחי אמצעי חולף

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לביסוס מודל חסימת עורק מוחי אמצעי דיסטלי (dMCAO) באמצעות אלקטרוקואגולציה טרנס-גולגולתית בעכברי C57BL/6J ומעריכים את ההתנהגות הנוירולוגית והתכונות ההיסטופתולוגיות שלאחר מכן.

השראת שבץ איסכמי חריף בעכברים באמצעות טכניקת חסימת העורק האמצעי הדיסטלי

חקור שיטה ניתוחית לאינדוקציה של שבץ איסכמי בעכברים תוך שמירה על עורק המוח החיצוני לצורך אינפוזיה ישירה של טיפולים. טכניקה זו מאפשרת חקר מנגנוני השבץ והערכת יעילות טיפולים בחוליות.

אינדוקציה של שבץ איסכמי ו איסכמיה reperfusion בעכברים באמצעות הטכניקה ויזואליזציה ספיגות עורקים התיכונים של אזור האוטם

גלה סרטונים נוספים