January 15th, 2017
סרטון זה מדגים מודל לחקר התפתחות היפרפלזיה מיואינטימלית לאחר ניתוח אינטרפוזיציה ורידית בחולדות.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לחקור את סבלנות השתל המעקף במודל אינטרפוזיציה של וריד חולדה. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום ניתוחי המעקפים, כגון מסלול בסיסי של תהליכים ביולוגיים ופיזיולוגיים במהלך חסימת מעקפים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שההליך הכירורגי קל ומהיר, בעזרתו ניתן ללמוד טיפולים ומסכים חדשים in vivo.
מי שידגים את הטכניקה יהיה גריגול טדיאשווילי, מיקרו-כירורג מהמעבדה שלנו. לפני הניתוח, בדוק אם יש עומק מספיק של הרדמה על ידי צביטה בכפות הרגליים האחוריות של החולדה ווידוא היעדר רפלקסים. לאחר מכן, מרחו מעט משחה וטרינרית על העיניים כדי למנוע יובש בזמן ההרדמה.
לאחר מכן, פרשו את הרגליים האחוריות וקבעו את מיקומן באמצעות סרט. לאחר מכן, יש לגלח את השיער המפשעתי בעזרת גוזם שיער, ולאחר מכן לחטא את האזור באופן נרחב באמצעות פובידון-יוד ואחריו 80% אלכוהול. חזור על הפילינג לסירוגין בסך הכל שלוש פעמים.
כעת תחת מיקרוסקופ, בצע חתך אנכי לאורך קו המפשעה. לאחר מכן, השתמש בשני מלקחיים כדי להפריד בעדינות את הרקמות התת עוריות, ולחשוף את הווריד האפיגסטרי השטחי עד למקורו בווריד הירך. עשו זאת בזהירות רבה, מכיוון שהווריד שביר.
לאחר מכן, עצור את זרימת הדם דרך הווריד האפיגסטרי השטחי באמצעות שני מהדקים. כעת, קצרו קטע מהווריד. הרם בזהירות את הווריד המבודד וחתוך את הכלי בעזרת מספריים מיקרו.
לאחר מכן, הניחו את קטע הווריד על גזה סטרילית. שם, החלק בזהירות מחט בגודל 30 לקצה אחד ושטוף את הווריד בהפרין. לאחר מכן, העבירו את הווריד ל-1% לידוקאין, ושמרו אותו על קרח כדי למנוע עוויתות.
כעת, המתת חסד של החולדה התורמת על ידי הגדלת ההרדמה ל-5% איזופלורן. לאחר מכן, כהכנה לאנסטמוזות, הכינו את החולדה הנמענת באותו אופן כמו החולדה התורמת עד לשלב הגילוח. לאחר שתיים-שלוש דקות של איזופלורן 5%, פתחו את בטן החולדה התורמת לאורך הלינאה אלבה, חתכו את הסרעפת והוציאו את הלב כדי לעצור את זרימת הדם.
המשך להכין את החולדה הנמענת לניתוח. לגלח את הצד המדיאלי של הרגליים בעזרת גוזם שיער ולחטא את העור בשלושה קרצוף לסירוגין של פובידון-יוד ואתנול 80%. לפני שתמשיך הלאה, בצע צביטה נוספת בבוהן כדי לפקח על ההרדמה.
כעת, בצע חתך חציוני בעצם הירך מהברך לקפל המפשעה. תחת המיקרוסקופ, השתמש בשני מלקחיים כדי להפריד את עורק הירך מסביבתו. לאחר מכן, השתמש בשני מהדקי מיקרו כדי לעצור את זרימת הדם, והנח תחילה את המהדק הפרוקסימלי
.לאחר מכן, גזרו קטע קצר מעורק הירך המהודק והשליכו אותו. קצר את גדם העורק הנותר כדי להשאיר פער גדול במילימטר עד שניים משתל הווריד. לאחר מכן, שטפו את גדם העורקים עם הפרין ממחט בגודל 30.
אם האדוונטיציה בולטת מעט מעבר לגדם הכלי, השתמש במלקחיים כדי למשוך את האדוונטיציה מעט מעל קצה הכלי, ולאחר מכן, הסר חתיכת אדוונטיטיה. כעת, הנח את קטע הווריד שנקטף בין גדמי העורקים בכיוון הנכון, והתאם את גודל הפער להתאמה טובה. כעת, בצע תחילה את האנסטומוזה הפרוקסימלית באמצעות תפר פרולן 10-0.
התחל בתפירת כל צד לרוחב, ולאחר מכן הוסף שלושה תפרים נוספים לצד הגחון. סיים עם שלושה תפרים בצד הגב. לאחר מכן, חבר את הכלים הדיסטליים באותה טכניקה, החל מתפר בכל צד לרוחב, ואחריו שלושה תפרים בצד הגחון, ולאחר מכן מסיים בצד הגב.
לאחר השלמת האנסטומוזות, טען שני מזרקים של מיליליטר אחד עם רכיבי דבק הפיברין. לאחר מכן, הרם בזהירות את השתל בעזרת מלקחיים, והחל כ-100 מיקרוליטר של רכיב אחד מתחת לשתל, ואחריו 100 מיקרוליטר של רכיב שני. תמיד יש להוסיף את שני הרכיבים באותם נפחים.
כעת, החזר את השתל למקומו, ומרח 100 מיקרוליטר מכל רכיב על השתל כדי לכסות לחלוטין את השתל ואת האנסטומוזיס. זה מונע אי ספיקה אנטומוטית והתרחבות יתר של שתל הווריד. כעת, פתח בזהירות את המהדקים החל מהמהדק הדיסטלי.
לאחר מכן, אשר ניתוח מוצלח על ידי בדיקת דופק גלוי בווריד המושתל ובעורק הדיסטלי של השתל. לפני סגירת העור, הסר כל דבק מוגזם שעלול לעכב את הסגירה. לאחר מכן, סגרו את שכבות העור באמצעות 5-0 תפרי פרולן.
לפני שהחולדה מתעוררת, הזריקו ארבעה עד חמישה מיליגרם קרפרופן לק"ג תת עורי. השגיחו על החיה עד שהיא תחזור להכרה מספקת כדי לשמור על שכיבה על עצם החזה. לאחר מכן, תנו לחולדה כלוב ביתי ללא בעלי חיים אחרים.
במשך שלושת הימים הבאים, ספקו מטמיזול במי השתייה, ובדקו את התאוששות החולדה מדי יום. לאחר ההתאוששות המלאה, ניתן לשכן את החולדה עם חולדות אחרות. בעלי חיים מתאוששים היטב מהניתוח והראו מצב גופני מצוין לאחר הניתוח.
שילוב מוצלח של הווריד בעורק הירך וסבלנות השתל לאחר ההשתלה אושר באופן לא פולשני באמצעות סונוגרפיה דופלקסית. על ידי השתלת וריד של חולדה חיובית ללוק לחולדה שלילית, נעשה שימוש בהדמיית ביולומינסנציה כדי לנטר את נוכחות השתל. נמצא כי היפרפלזיה מיואינטימלית מתפתחת בהדרגה בשתל לאורך זמן.
צביעה היסטולוגית עם הטריכרום של מאסון מדגימה היווצרות מיואינטימית בתוך הלמינה האלסטית הפנימית. כדי לאשר שהמודל משחזר את הדינמיקה של היפרפלזיה מיואינטימלית, נמדדה מחיקה לומינלית. אובדן הדרגתי של סבלנות השתל נצפה משבעה ימים עד 28 ימים לאחר הניתוח, מה שמתאים יפה למודל.
לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך 20 דקות אם היא מבוצעת כראוי. תודה על הצפייה, ובהצלחה בניסויים שלך.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
הסרטון הזה מדגים מודל לחקר התפתחות היפרפלזיה מיואיטימלית לאחר ניתוח החדרה ורידית בחולדות. הנוהל נועד לחקור את חסימות השתלת ההעקפה ואת התהליכים הביולוגיים המעורבים במהלך חסימת העקפה.