Name: וריד ביון דגם: מודל מתאים ללמוד patency מעקף (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-15T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 22 s
Description: למדו מודל השתלת וריד בעכברוש לחקר פתיחות שתלים מעקפים ותהליכים ביולוגיים בנימים. שיטה זו מאפשרת מחקר תרופות חדשניות ושיפור תוצאות ניתוחי מעקף.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים כריסטיאן Pahrmann לקבלת הסיוע הטכני שלה. מחקר זה מומן על ידי דויטשה Stiftung fuer Herzforschung (F / 28/14). DW נתמכה על ידי בפרס הנסיעות מן האגודה הבינלאומית לב והשתלות ריאה. TD קיבל מלגת הצטיינות קרונה אחר מן Else-קרונה-Fresenius-Stiftung (2012_EKES.04). SS קיבלו מענקי מחקר מן (DFG; DE2133 / 2-1, TD ו SCHR992 / 3- 1, SCHR992 / 4-1, ש.ש).

בעלי החיים קבלו טיפול הומאני באמות מורה העקרונות בחיות מעבדה, שהוכן על ידי מכון משאבים בחיות מעבדה ופורסם על ידי ה- National Institutes of Health. כל הפרוטוקולים החיים אושרו על ידי הרשות המקומית האחראית ( &quot;für Amt Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (משרד בריאות הגנת הצרכן) המבורג&quot;). 1. טיפול בבעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השג חולדות לואיס (Lew / CRL) חולדות וחולדות מהונדסות ROSA / בלוציפראז- Lew במשקל 300-350 גרם מהמכון בחיות מעבדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור על החולדות בתנאים קונבנציונליים בארונות מאווררים ולהאכיל אותם צ&#39;או עכברוש סטנדרטי כרצונך מי autoclaved. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע השתלת שתל באמצעות החולדות המהונדסות ROSA / Lew-בלוציפראז תורמי חולדות Lew / CRL syngenic כמו הנמענים. </li></ol> 2. הכנת העכברוש התורם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש ולהכשרהתא יון לטשטש עכברוש עם isoflurane (2.5-3%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החולדה על הגב שלה ולשמור על הרדמה עם facemask כיסוי הפה והאף. בדוק עומק מספיק של הרדמה על ידי צובט את הרגליים האחוריות ואימות בהעדר רפלקסים. החל משח וטרינר על העיניים כדי למנוע יובש לאחר הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מורחים את הרגליים האחוריות ולתקן את עמדתם באמצעות קלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את השיער מפשעתי עם גוזם שיער ולחטא את האזור כולו באמצעות יוד povidone ואחריו 80% אתנול. חזור על שלב החיטוי פעמים. הערה: אזור הניתוח, גזה, ומכשירי ניתוח צריכה להיות מעוקרות. יש לשמור על שדה סטרילי לאורך כל ההליך וללבוש-ליחד, כפפות כירורגי סטרילי, מסכות, וכובעים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת מיקרוסקופ, לבצע חתך אנכי לאורך inguinalis המנחה. השתמש בשני מלקחיים כדי להפריד את הרקמות התת עורית בעדינות ולחשוף את הווריד ברום הבטן השטחי מן האורים שלוג&#39;ין על וריד הירך. בזהירות לבודד את הווריד ברום הבטן השטחי מן הרקמות הסובבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפסיק את זרימת דם בווריד ברום הבטן השטחי באמצעות שני מלחציים מיקרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קציר פלח 0.5 עד 1 ס&quot;מ כ הווריד ידי הרמת וריד מבודד בזהירות עם מלקחיים חיתוך דרך כלי עם microscissors. השאירו את מהדק מיקרו על גדם כלי כדי למנוע אובדן דם. מניחים את פיסת הסיר של וריד על גזה סטרילי. בזהירות במקום מחט 30 G בתוך קצה אחד של הווריד שנקטף ולשטוף את הכלי עם הפרין (50 יחידות / מיליליטר). הערה: ידית הווריד בזהירות ולהימנע נזק במהלך הרמת, חיתוך, ו הסמקה. הקפד לשטוף את השתל עם הכמות הנכונה של הפרין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור במגזר כלי ב לידוקאין 1% על הקרח עד להשתלה לתוך עכברוש הנמען למנוע התכווצות כלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכברוש התורם על ידי הגדלת ההרדמה עד 5% isoflurane. לאחר 2-3 דקות, open הבטן לאורך alba Linea, לחתוך דרך הסרעפת, ולהסיר את הלב לעצור את זרימת הדם. </li></ol> 3. הכנת עכברוש הנמען <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים ולתקן החולדה הנמען באותה צורה כמו עכברוש התורם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הצד המדיאלי של הרגליים עם גוזם שיער ולחטא שלוש פעמים באמצעות יוד povidone ו -80% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג את עומק ההרדמה ולהבטיח שזה מספיק ידי אימות בהעדר רפלקסים כאשר צובט את הרגליים האחוריות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע חתך הירך החציוני מהברך אל חיק מפשעתי. תחת מיקרוסקופ, השתמש 2 מלקחיים כדי להפריד את עורק הירך מסביבתה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש מלחציים מיקרו לעצור את זרימת הדם. מניחים את מהדק הפרוקסימלית הראשון, ואחריו מהדק דיסטלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגזור קטע קצר של עורק הירך הדק עם microscissors וזורק אותו. לקצר את גדם עורקי נותרים עם microscissors, יצירת פער זה1-2 מ&quot;מ גדול יותר שתל הווריד. שטוף את הגדם עורקי עם הפרין באמצעות מחט 30 G. הערה: אם adventitia שבולט מעט מעבר גדם הכלי, להשתמש במלקחיים כדי למשוך אותו מעט מעל הקצה של הכלי ולהסיר חלק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את הווריד שנקטף מן הצעד 2.8 בין גדמי העורקים ולהתאים את האורך כך שהוא נכנס כראוי לתוך הפער. הערה לכיוון הווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע השקת הפרוקסימלי הראשון באמצעות תפר 10-0 prolene. לנהל תפרים יחידים לפי הסדר המוצג (1D איור). התחל עם תפר בכל צד לרוחב לפני הוספת שלושה תפרים יותר בצד הגחון. לאחר מכן, למקם שלושה תפרים בצד הגבי של הכלי להשלמת ההשקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את כלי דיסטלי עם שתל תוך שימוש באותה טכניקה כמו השקה הפרוקסימלי כמתואר בשלב 3.8. שוב, להתחיל עם תפר בכל צד לרוחב, ולאחר מכן למקם שלושה תפרים על sid הגחוןדואר ואת הצד הגבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען שני מזרקים 1 מ&quot;ל עם רכיב דבק הפיברין 1 ו -2 הרם בזהירות את השתל עם מלקחיים ושחרר כ 100 μl של רכיב דבק הפיברין 1 תחת השתל, ואחריו רכיב 2. הערה: ודא כי רכיבים 1 ו -2 מיושמים ביחס של 1: 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את השתל ן למקומו ושחרר 100 μl נוסף של רכיבים 1 ו -2 על גבי השתל. הקפד כי הדבק מכסה גם את השתל ואת השקה כדי למנוע אי ספיקה anastomotic ושוב-התנפחות של השתל הווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לפתוח את מהדק דיסטלי, ואחריו הפרוקסימלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אשר ניתוח מוצלח על ידי בדיקת דופק גלוי בווריד המושתל ועורקים הדיסטלי של השתל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר דבק מופרז, אשר מעכבת סגירת עור. שימוש במלקחיים כדי להרים את הדבק לרפא ולהסיר את העודפים עם microscissors. סגור את שכבות העור עם 5-0 תפרים prolene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק 4-5 מ &#39;g / ק&quot;ג Carprofen תת עורי לפני המאפשר החולדה להתעורר. אין להשאיר את החיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור שכיבה sternal. שמור את החיה בכלוב אחד עד שהוא התאושש לחלוטין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף דיפירון למי השתייה (50 מ&quot;ג דיפירון ל -100 מ&quot;ל) כמו משככי כאבים במשך 3 הימים הבאים ולפקח החיה יומי. </li></ol> 4. דופלקס sonography הערה: sonography השתמש duxplex לדמיין את זרימת הדם הלא פולשני בחולדות 14. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטשטש חולדה בתא אינדוקציה (2% isoflurane). מניחים את החולדה על הגב שלה ולשמור הרדמה עם facemask המכסה את האף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש קוצץ שיער הסרת שיער קרם להסרת שיער סביב האזור של הירך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל ג&#39;ל אולטרסאונד לירך. ודא שאין בועות אוויר. לרכוש תמונות sonography דופלקס באמצעות מתמר 400 MS (התדר המרכזי: 30 Mרץ) עם קצב פריימים של 230-400 מסגרות / sec. </li></ol> 5. Histopathology הערה: קציר להכתים את הכלי עם trichrome המכתים של מסון לניתוח morphometric 15. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את כלי שנקטפו 4% paraformaldehyde לילה ליבש אותו ריכוז גדל והולך של אתנול. שבץ מדגם פרפין ופצע אותו לתוך 5 מיקרומטר פרוסות עבות באמצעות microtome. הערה: Paraformaldehyde רעיל צריך להיות מטופלים עם טיפול מיוחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Deparaffinize השקופיות לפני השארתם trichrome פתרון מכתים. מייבשים את השקופיות מוכתמים, לנקות אותם עם קסילן, ולעגן אותם הרכבה בינונית. לאחר ייבוש שקופיות, להציג את הדוגמאות עם מיקרוסקופ. </li></ol> 6. הדמיה פליטת אור (BLI) הערה: שתל לאחר הניתוח הייתה במעקב לאורך זמן in vivo על ידי מדידת אות bioluminescent 16. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים 1 גרם של מלח אשלגן D-Luciferin ב 22 מ&quot;ל של PBS ו להזריק אותו intraperitoneally לתוך חולדה (375 מ&quot;ג / ק&quot;ג משקל גוף). חכה 15 דקות עבור luciferin להסתובב החיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את החולדה לתוך מערכת כימות bioluminescent בזמן אמת ולגשת אות פליטת האור. </li></ol>

<ol><li>Sabik, J. F., 3rd, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+saphenous+vein+graft+patency%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Understanding saphenous vein graft patency.</a> Circulation. 124, 273-275 (2011).</li>
<li>Goldman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+patency+of+saphenous+vein+and+left+internal+mammary+artery+grafts+after+coronary+artery+bypass+surgery%3A+results+from+a+Department+of+Veterans+Affairs+Cooperative+Study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study.</a> J Am Coll Cardiol. 44, 2149-2156 (2004).</li>
<li>Fitzgibbon, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+bypass+graft+fate+and+patient+outcome%3A+angiographic+follow-up+of+5%2C065+grafts+related+to+survival+and+reoperation+in+1%2C388+patients+during+25+years%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Coronary bypass graft fate and patient outcome: angiographic follow-up of 5,065 grafts related to survival and reoperation in 1,388 patients during 25 years.</a> J Am Coll Cardiol. 28, 616-626 (1996).</li>
<li>O'Brien, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+healing+around+and+within+saphenous+vein+bypass+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Wound healing around and within saphenous vein bypass grafts.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 114, 38-45 (1997).</li>
<li>El-Kurdi, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovine+femoral+artery+bypass+grafting+using+saphenous+vein%3A+a+new+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Ovine femoral artery bypass grafting using saphenous vein: a new model.</a> J Surg Res. 193, 458-469 (2015).</li>
<li>Yuda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin+II+receptor+antagonist%2C+L-158%2C809%2C+prevents+intimal+hyperplasia+in+dog+grafted+veins%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Angiotensin II receptor antagonist, L-158,809, prevents intimal hyperplasia in dog grafted veins.</a> Life Sci. 68, 41-48 (2000).</li>
<li>McCann, R. L., Hagen, P. O., Fuchs, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspirin+and+dipyridamole+decrease+intimal+hyperplasia+in+experimental+vein+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Aspirin and dipyridamole decrease intimal hyperplasia in experimental vein grafts.</a> Ann Surg. 191, 238-243 (1980).</li>
<li>Thomas, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+studying+vein+graft+failure+and+therapeutic+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal models for studying vein graft failure and therapeutic interventions.</a> Curr Opin Pharmacol. 12, 121-126 (2012).</li>
<li>Hu, Y., Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+mouse+model+of+vein+bypass+graft+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Lung+Circ%22%5BJournal%5D)">New mouse model of vein bypass graft atherosclerosis.</a> Heart Lung Circ. 11, 182-188 (2002).</li>
<li>Salzberg, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+neointimal+formation+after+surgical+vein+grafting+in+a+murine+model+of+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Increased neointimal formation after surgical vein grafting in a murine model of type 2 diabetes.</a> Circulation. 114, I302-I307 (2006).</li>
<li>Abbott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+animals%3A+the+Renaissance+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Laboratory animals: the Renaissance rat.</a> Nature. 428, 464-466 (2004).</li>
<li>Lindblad-Toh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+sequencing%3A+three%27s+company%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Genome sequencing: three's company.</a> Nature. 428, 475-476 (2004).</li>
<li>Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Campagna, C., Ozaki, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rationale+and+practical+techniques+for+mouse+models+of+early+vein+graft+adaptations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+vascular+surgery%22%5BJournal%5D)">Rationale and practical techniques for mouse models of early vein graft adaptations.</a> Journal of vascular surgery. 52, 444-452 (2010).</li>
<li>Olver, D. T., Lacefield, J. C., Shoemaker, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+bidirectional+flow+in+the+sciatic+vasa+nervorum%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+research%22%5BJournal%5D)">Evidence of bidirectional flow in the sciatic vasa nervorum.</a> Microvascular research. 94, 103-105 (2014).</li>
<li>Stubbendorff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducing+myointimal+hyperplasia+versus+atherosclerosis+in+mice%3A+an+introduction+of+two+valid+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2014).</li>
<li>Conradi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunobiology+of+fibrin-based+engineered+heart+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+cells+translational+medicine%22%5BJournal%5D)">Immunobiology of fibrin-based engineered heart tissue.</a> Stem cells translational medicine. 4, 625-631 (2015).</li>
<li>Dashwood, M. R., Tsui, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%27No-touch%27+saphenous+vein+harvesting+improves+graft+performance+in+patients+undergoing+coronary+artery+bypass+surgery%3A+A+journey+from+bedside+to+bench%5BTitle%5D)+AND+%22Vascular+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">'No-touch' saphenous vein harvesting improves graft performance in patients undergoing coronary artery bypass surgery: A journey from bedside to bench.</a> Vascular Pharmacology. 58, 240-250 (2013).</li>
<li>Bekler, H. I., Rosenwasser, M. P., Akilina, Y., Bulut, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+an+absorbable+collagen+cover+%28NeuraWrap%29+improves+patency+of+interpositional+vein+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+orthopaedica+et+traumatologica+turcica%22%5BJournal%5D)">The use of an absorbable collagen cover (NeuraWrap) improves patency of interpositional vein grafts.</a> Acta orthopaedica et traumatologica turcica. 44, 157-161 (2010).</li>
<li>Geurts, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Knockout+rats+via+embryo+microinjection+of+zinc-finger+nucleases%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases.</a> Science. 325, 433(2009).</li>
<li>Moreno, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creation+and+characterization+of+a+renin+knockout+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Creation and characterization of a renin knockout rat.</a> Hypertension. 57, 614-619 (2011).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

וידאו זה מדגים מודל ביון וריד עכברוש לחקור אובדן שתל וריד כדי לאפשר חקירה של תהליכים פתולוגיים הבסיס לבין בדיקות של תרופות חדשות או אופציות טיפוליות. הרדמה היא היבט חיוני של הליכים כירורגיים. מערכת ההרדמה inhalative רציפה מומלצת, שכן פעולה זו מהווה שיטה בטוחה וקלה, במיוחד במהלך פעילות ממושכת. זה יכול להיות בעל חשיבות רבה במהלך שלב ההכשרה, בתום המבצע לוקח יותר מ 1 hr. <p class="jove_content" style=";text-align...

מחלת לב כלילית והסיבוכים שלהם הם בין הגורמים המובילים למוות ברחבי העולם. אסטרטגיות טיפוליות נוכחי להתמקד לבסס מחדש את זרימת הדם, בין אם על ידי מתרחבים כלי הצטמצמו או על ידי יצירת מעקף. השתלת מעקפים (CABG) באמצעות autografts וריד תוארה לראשונה בשנת 1968 שוכללה במרוצת השנים. מלבד וסקולריזציה של הקדמי השמאלי היורד לב כלילית, תעלות וריד saphenous הם נפוצות ביותר 1. עם זאת, patency השתל נותר העקב אכילס של שתלי וריד saphenous (SVG). שנה לאחר הניתוח, patency השתל הוא 85%, יורד ל -61% לאחר עשר שנים 2,3. חשיפת המנגנונים והגורמים pathophysiological של אובדן patency SVG לכן משימה חשובה. וידאו זה מדגים מודל ביון וריד עכברוש לחקור אובדן שתל הווריד. מטרות העל של שיטה זו הן לחקור את pathobiological שבבסיסותהליכי -physiological במהלך התקדמות מחלה ואת לפתח מודל מתאים תרופה או בדיקת אופציה טיפולית. על ידי השתלת הווריד ברום הבטן השטחית לתוך מערכת העורקים, מודל זה יחקה את ההגדרה הקלינית של השתלת מעקפים. טראומה ניתוחית, איסכמיה, ומתח קיר הם גורמים חשובים של שינויים בכלי דם הפתולוגיים מחקות במודל המתואר. דגמים ומינים שונים זמינים לחקור אובדן patency וריד שתל. במודלים של בעלי חיים גדולים, כגון חזירים 4, כבשים 5, כלבים 6, וקופי 7, להידמות כלי אנושי מבנים אנטומיים ובכך לאפשר אסטרטגיות טיפוליות מורכבות, כגון סטנט מעקפים או טכניקות ניתוחיות חדשות, להיבדק 8. עם זאת, דיור מיוחד, ציוד, וצוות נדרש. בנוסף, מחיר גבוה והן בשל צורך מרדים נוסף במהלך הניתוח לעכב היישום הרחב יותר שלהם. Smהחיות כל, כוללים חולדות, קלות לטפל, אינו דורש דיור מיוחד, ויש להם עלויות לניהול. לעומת דגמי עכבר 9,10, במודלים של עכברים יש את היתרון של אפשרות לשוב ולבצע טוב יותר ולכן השתנות פחות בתוצאה. חולדות הן מבחינה פיזיולוגית וגנטית יותר דומים לבני אדם מאשר עכברים 11,12. בנוסף, עכברי-בר ביותר רק לפתח myointima המוגבל 13, ההופך במודלים של עכברים נוטים שגיאות מסוג ב&#39;. היסטולוגיה של ורידי העכבר העיקריים, כגון נחות הווריד הנבוב, מורכב רק של כמה שכבות תא הופכת 13 קשה הערכה המוקדמת. חסרון נוסף הוא הכמות הקטנה של רקמה זמינה לניתוח שלאחר מכן לאחר החלמת שתל. המודל המתואר בסרט הזה ניתן לשחזור, זול, וקל לביצוע, והוא ניתן להקים במהירות ובאופן אמין. זה מתאים במיוחד בהערכת סוכנים טיפוליים ניסיוני יקרים, כגון וקטורים ויראלייםעבור ריפוי גנטי, באופן חסכוני.

<table><tbody><tr><td>עכברוש LEW/Crl</td><td>צ'ארלס ריבר</td><td>מספר מלאי 004</td><td></td></tr><tr><td>חולדה LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1 luc)11Jmsk</td><td>המכון לחיות מעבדה, אוניברסיטת קיוטו, יפן</td><td>מספר חולדה NBPR 0299</td><td>http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/</td></tr> <tr><td>PFA 4%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>#157135S</td><td>20%</td></tr> <tr><td>קוצץ שיער</td><td>WAHL</td><td>8786-451A ARCO SE</td><td></td></tr><tr><td>Forene</td><td>AbbVie</td><td>PZN 10182054 Art.Nr.: B506</td><td>מהדק מיקרוכירורגי איזופלורן</td></tr><tr><td></td><td>Fine Science</td><td>Tools 18055-04</td><td>Micro-Serrefine -</td></tr><tr><td>מוליך מהדק</td> 4 מ"מ <td>Fine Science Tools</td><td>18056-14</td><td></td></tr><tr><td>קרם להסרת שיער</td><td>Rufin קוסמטי</td><td>27618</td><td></td></tr><tr><td>Povidone-Iodine</td><td>Betadine Purdue Pharma</td><td>NDC:67618-152</td><td></td></tr><tr><td>10-0 תפר אתילון Ethicon</td><td></td><td>2814G</td><td></td></tr><tr><td>5-0 תפר פרולן</td><td>Ethicon</td><td>EH7229H</td><td></td></tr><tr><td>רימאדיל</td><td>פייזר</td><td>400684.00.00</td><td>קרפרופן</td></tr><tr><td>Novaminsulfon</td><td>Ratiopharm</td><td>PZN 03530402</td><td>Metamizole</td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Rotexmedica</td><td>PZN: 3862340</td><td>25.000 כלומר / מ"ל</td></tr><tr><td>Xylocain 1%</td><td>AstraZeneca</td><td>PZN: 1137907</td><td>Lidocain</td></tr><tr><td>EVICEL</td><td>J& J Med.Ethicon Biosur</td><td>PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE</td><td>דבק פיברין</td></tr><tr><td>NaCl 0.9%</td> <td>B.Braun</td><td>PZN 06063042 Art. מס': 3570160</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 770 ברזולוציה גבוהה in vivo מערכת מיקרו-הדמיה</td><td>VisualSonics</td><td></td><td>סונוגרפיה דופלקס</td></tr><tr><td>Ecogel 100 ג'ל אולטרסאונד</td><td>Eco-med</td><td>30GB</td><td></td></tr><tr><td>D-Luciferin Firefly, מלח אשלגן</td><td>Biosynth</td><td>L-8220</td><td></td></tr><tr><td>PBS pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Xenogen Ivis 200</td><td>Perkin Elmer</td><td></td><td>bioluminescence הדמיה</td></tr><tr><td>ערכת המטוקסילין ברזל Weigerts Merck</td><td></td><td>1.15973.0002</td><td>צביעת טריכרום</td></tr><tr><td>Resorcine-Fuchsine Weigert</td><td>Waldeck</td><td>2.00E-30</td><td>טריכרום מכתים</td></tr><tr><td>חומצה פוקסין</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>F8129-25G</td><td>מכתים טריכרום</td></tr><tr><td>תמיסת Ponceau S Serva</td><td>Electrophoresis</td><td>33427</td><td>טריכרום מכתים</td></tr><tr><td>אזופלקסין</td><td>וולדק</td><td>1B-103</td><td>טריכרום מכתים</td></tr><tr><td>חומצה מוליבדטופוספורית הידראט</td><td>Merck</td><td>1.00532.0100</td><td>טריכרום מכתים</td></tr><tr><td>כתום G</td><td>Waldeck</td><td>1B-221</td><td>טריכרום מכתים</td></tr><tr><td>ירוק בהיר SF</td><td>Waldeck</td><td>1B-211</td><td>Trichrome צביעה</td></tr><tr><td>Vitro-Clud</td><td>Langenbrinck</td><td>04-0001</td><td></td></tr><tr><td>חומצה אצטית קרחונית</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>537020</td><td></td></tr><tr><td>37% HCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1758</td><td></td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Th. Geyer</td><td>3410</td><td></td></tr><tr><td>Paraffin</td><td>Leica biosystems</td><td>REF 39602004</td><td></td></tr><tr><td>אתנול אבסולוט</td><td>Th. Geyer</td><td>2246</td><td></td></tr><tr><td>אתנול 96%</td><td>Th. Geyer</td><td>2295</td><td></td></tr><tr><td>אתנול 70%</td><td>Th. Geyer</td><td>2270</td><td></td></tr><tr><td>מתלה שקופיות</td><td>Ted Pella</td><td>21057</td><td></td></tr><tr><td>צלחת מכתים</td><td>טד פלה</td><td>21075</td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen משחת עיניים</td><td>ואף Bayer</td><td>1578675</td><td>משחת עיניים</td></tr></tbody></table>

וריד ביון דגם: מודל מתאים ללמוד patency מעקף

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

השתלת מעקפים היא שיטת טיפול מבוססת למחלת עורקים כליליים. סבלנות השתל ממשיכה להיות עקב אכילס של השתלות ורידים ספניים. מודלים מחקריים לכישלון שתל מעקף חיוניים להבנה טובה יותר של תהליכים פתוביולוגיים ופתופיזיולוגיים במהלך אובדן סבלנות השתל. מודלים של בעלי חיים גדולים, כמו חזירים או כבשים, דומים למבנים אנטומיים אנושיים אך דורשים מתקנים וציוד מיוחדים. סרטון זה מתאר מודל התערבות ורידים של חולדה כדי לחקור אובדן סבלנות של השתלת ורידים. חולדות הן זולות וקלות לטיפול. בהשוואה לדגמי עכברים, הגודל הנוח של החולדות מאפשר יכולת פעולה טובה יותר ומאפשר להשיג כמות מספקת של חומר לניתוח מגוון נוסף. בקצרה, הווריד האפיגסטרי התחתון של חולדה תורמת נקצר ומשמש להחלפת קטע מעורק הירך. אנסטומוזה מתבצעת באמצעות תפרים בודדים ואטומה בדבק פיברין. ניתן לנטר את סבלנות השתל באופן לא פולשני באמצעות סונוגרפיה דופלקסית. היפרפלזיה מיואינטימלית, שהיא הגורם העיקרי לאובדן סבלנות השתל, מתפתחת בהדרגה עם הזמן וניתן לחשב אותה מחתכים היסטולוגיים.

המודל ביון עכברוש וריד מתאים ללמוד את הפיתוח של היפרפלזיה myointima ו לכישלון השתל הווריד. בעלי חיים לשחזר היטב מהניתוח ולהראות אחרי הניתוח בכושר גופני מצוין. איור 1 מציג את השלבים כירורגית המפתח. לאחר החתך בעור לאורך Linea inguinalis, וריד שטחי ברום הבטן ואת עורק הירך מזוהים (איור 1 א). קציר של השתל צריך להתבצע בזהירות, מבלי לפגוע השתל (איור 1B), כמו זה יכול להוביל לכישלון השתל מוקדם ואובדן patency. לאחר הצבת השתל בתוך החיה הנמען...

סרטון זה מדגים מודל לחקר התפתחות היפרפלזיה מיואינטימלית לאחר ניתוח אינטרפוזיציה ורידית בחולדות.

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לחקור את סבלנות השתל המעקף במודל אינטרפוזיציה של וריד חולדה. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום ניתוחי המעקפים, כגון מסלול בסיסי של תהליכים ביולוגיים ופיזיולוגיים במהלך חסימת מעקפים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שההליך הכירורגי קל ומהיר, בעזרתו ניתן ללמוד טיפולים ומסכים חדשים in vivo.מי שידגים את הטכניקה יהיה גריגול טדיאשווילי, מיקרו-כירורג מהמעבדה שלנו. לפני הניתוח, בדוק אם יש עומק מספיק של הרדמה על ידי צביטה בכפות הרגליים האחוריות של החולדה ווידוא היעדר רפלקסים. לאחר מכן, מרחו מעט משחה וטרינרית על העיניים כדי למנוע יובש בזמן ההרדמה.לאחר מכן, פרשו את הרגליים האחוריות וקבעו את מיקומן באמצעות סרט. לאחר מכן, יש לגלח את השיער המפשעתי בעזרת גוזם שיער, ולאחר מכן לחטא את האזור באופן נרחב באמצעות פובידון-יוד ואחריו 80% אלכוהול. חזור על הפילינג לסירוגין בסך הכל שלוש פעמים.כעת תחת מיקרוסקופ, בצע חתך אנכי לאורך קו המפשעה. לאחר מכן, השתמש בשני מלקחיים כדי להפריד בעדינות את הרקמות התת עוריות, ולחשוף את הווריד האפיגסטרי השטחי עד למקורו בווריד הירך. עשו זאת בזהירות רבה, מכיוון שהווריד שביר.לאחר מכן, עצור את זרימת הדם דרך הווריד האפיגסטרי השטחי באמצעות שני מהדקים. כעת, קצרו קטע מהווריד. הרם בזהירות את הווריד המבודד וחתוך את הכלי בעזרת מספריים מיקרו.לאחר מכן, הניחו את קטע הווריד על גזה סטרילית. שם, החלק בזהירות מחט בגודל 30 לקצה אחד ושטוף את הווריד בהפרין. לאחר מכן, העבירו את הווריד ל-1% לידוקאין, ושמרו אותו על קרח כדי למנוע עוויתות.כעת, המתת חסד של החולדה התורמת על ידי הגדלת ההרדמה ל-5% איזופלורן. לאחר מכן, כהכנה לאנסטמוזות, הכינו את החולדה הנמענת באותו אופן כמו החולדה התורמת עד לשלב הגילוח. לאחר שתיים-שלוש דקות של איזופלורן 5%, פתחו את בטן החולדה התורמת לאורך הלינאה אלבה, חתכו את הסרעפת והוציאו את הלב כדי לעצור את זרימת הדם.המשך להכין את החולדה הנמענת לניתוח. לגלח את הצד המדיאלי של הרגליים בעזרת גוזם שיער ולחטא את העור בשלושה קרצוף לסירוגין של פובידון-יוד ואתנול 80%. לפני שתמשיך הלאה, בצע צביטה נוספת בבוהן כדי לפקח על ההרדמה.כעת, בצע חתך חציוני בעצם הירך מהברך לקפל המפשעה. תחת המיקרוסקופ, השתמש בשני מלקחיים כדי להפריד את עורק הירך מסביבתו. לאחר מכן, השתמש בשני מהדקי מיקרו כדי לעצור את זרימת הדם, והנח תחילה את המהדק הפרוקסימלי.לאחר מכן, גזרו קטע קצר מעורק הירך המהודק והשליכו אותו. קצר את גדם העורק הנותר כדי להשאיר פער גדול במילימטר עד שניים משתל הווריד. לאחר מכן, שטפו את גדם העורקים עם הפרין ממחט בגודל 30.אם האדוונטיציה בולטת מעט מעבר לגדם הכלי, השתמש במלקחיים כדי למשוך את האדוונטיציה מעט מעל קצה הכלי, ולאחר מכן, הסר חתיכת אדוונטיטיה. כעת, הנח את קטע הווריד שנקטף בין גדמי העורקים בכיוון הנכון, והתאם את גודל הפער להתאמה טובה. כעת, בצע תחילה את האנסטומוזה הפרוקסימלית באמצעות תפר פרולן 10-0.התחל בתפירת כל צד לרוחב, ולאחר מכן הוסף שלושה תפרים נוספים לצד הגחון. סיים עם שלושה תפרים בצד הגב. לאחר מכן, חבר את הכלים הדיסטליים באותה טכניקה, החל מתפר בכל צד לרוחב, ואחריו שלושה תפרים בצד הגחון, ולאחר מכן מסיים בצד הגב.לאחר השלמת האנסטומוזות, טען שני מזרקים של מיליליטר אחד עם רכיבי דבק הפיברין. לאחר מכן, הרם בזהירות את השתל בעזרת מלקחיים, והחל כ-100 מיקרוליטר של רכיב אחד מתחת לשתל, ואחריו 100 מיקרוליטר של רכיב שני. תמיד יש להוסיף את שני הרכיבים באותם נפחים.כעת, החזר את השתל למקומו, ומרח 100 מיקרוליטר מכל רכיב על השתל כדי לכסות לחלוטין את השתל ואת האנסטומוזיס. זה מונע אי ספיקה אנטומוטית והתרחבות יתר של שתל הווריד. כעת, פתח בזהירות את המהדקים החל מהמהדק הדיסטלי.לאחר מכן, אשר ניתוח מוצלח על ידי בדיקת דופק גלוי בווריד המושתל ובעורק הדיסטלי של השתל. לפני סגירת העור, הסר כל דבק מוגזם שעלול לעכב את הסגירה. לאחר מכן, סגרו את שכבות העור באמצעות 5-0 תפרי פרולן.לפני שהחולדה מתעוררת, הזריקו ארבעה עד חמישה מיליגרם קרפרופן לק"ג תת עורי. השגיחו על החיה עד שהיא תחזור להכרה מספקת כדי לשמור על שכיבה על עצם החזה. לאחר מכן, תנו לחולדה כלוב ביתי ללא בעלי חיים אחרים.במשך שלושת הימים הבאים, ספקו מטמיזול במי השתייה, ובדקו את התאוששות החולדה מדי יום. לאחר ההתאוששות המלאה, ניתן לשכן את החולדה עם חולדות אחרות. בעלי חיים מתאוששים היטב מהניתוח והראו מצב גופני מצוין לאחר הניתוח.שילוב מוצלח של הווריד בעורק הירך וסבלנות השתל לאחר ההשתלה אושר באופן לא פולשני באמצעות סונוגרפיה דופלקסית. על ידי השתלת וריד של חולדה חיובית ללוק לחולדה שלילית, נעשה שימוש בהדמיית ביולומינסנציה כדי לנטר את נוכחות השתל. נמצא כי היפרפלזיה מיואינטימלית מתפתחת בהדרגה בשתל לאורך זמן.צביעה היסטולוגית עם הטריכרום של מאסון מדגימה היווצרות מיואינטימית בתוך הלמינה האלסטית הפנימית. כדי לאשר שהמודל משחזר את הדינמיקה של היפרפלזיה מיואינטימלית, נמדדה מחיקה לומינלית. אובדן הדרגתי של סבלנות השתל נצפה משבעה ימים עד 28 ימים לאחר הניתוח, מה שמתאים יפה למודל.לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך 20 דקות אם היא מבוצעת כראוי. תודה על הצפייה, ובהצלחה בניסויים שלך.

vein-interposition-model-suitable-model-to-study-bypass-graft

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

היפרפלזיה Neointimal היא הגורם העיקרי להיצרות בעורקי arterialized. אנו מציעים פרוטוקול חדש שבו עורק הצוואר החיצוני הנכון מושתל באמצעות טכניקת השרוול בעורק הראשי המשותף של חולדות ספרג Dawley. שיעור ההישרדות היה 100% בנקודת הזמן של קרבה.

אימון טכניקה מתוחכמת מייקרו: התערבותם של שתלי וריד צוואר חיצוניים בעורק התרדמה המשותף בחולדות

סרטון זה מדגים את האינטרפוזיציה של עורק התרדמה של הארנב עם וריד הצוואר כדי לגרום להגדלה אינטימית ורידית על ידי חשיפת הוורידים ללחץ עורקי. מודל זה יסייע לחקור התערבויות מולקולריות וגנטיות כדי להחליש את ההתקדמות של היפרפלזיה אינטימית לאחר ניתוחי רה-וסקולריזציה.

עורק התרדמה והווריד הצווארי: טכניקה לגרימת היפרפלזיה אינטימית ורידית במודל ארנב

Vascularized Composite Allotransplantations (VCA) הפכו למציאות קלינית. עם זאת, יישום קליני רחב של VCA מוגבל על ידי דיכוי חיסוני סמים רב כרוני. המחברים מציגים מודל חיה גדול אמין לשחזור לתרגם אסטרטגיות החיסונית רומן שיכול למזער או פוטנציאלי לבטל את הצורך של דיכוי חיסוני בVCA.

דגם השתלות Heterotopic החזירים הינד איבר השתנה לTranslational vascularized Composite Allotransplantation מחקר (VCA)

כדי לשפר את הידע של היווצרות neotissue תאית ומולקולרית שלנו, מודל עכברי של TEVG פותח לאחרונה. השתלים הושתלו שתלי כחציצת וריד נבוב infrarenal בעכברי C57BL / 6. מודל זה משיג תוצאות דומות לאלה שהושגו בחקירה הקלינית שלנו, אבל לאורך זמן כמובן הרבה מקוצר.

השתלה של וריד נבוב חציצת שתל נחותה בעכבר דגם

המנגנונים מובילים להתפתחות של היפרפלזיה אינטימה (IH) וכישלון שתל וריד עדיין לא נחקרו מספיק. מחקר זה מתאר מערכת ex vivo לינקב ורידי אדם תחת זרימה ולחץ מבוקרים. יתר על כן היעילות של חיזוק רשת חיצוני כדי להגביל את פיתוחה של י.ה. הוערך.

נוהל saphenous אדם הוורידים Ex Vivo זלוף וחיצוני חיזוק

שיטה זו מתארת את המיקום של שתלי העורק interposition בארנבים, את התמרה חושית של השתלים, ההישג של הביטוי transgene עמיד. דבר זה מאפשר החקירה של תפקידים פיזיולוגיים ופתולוגיים של transgenes ומוצרים שלהם חלבון בורידים המושתל, ובדיקות של ג'ין טיפולים למחלות שתל הווריד.

דגם ארנב של ביטוי Transgene עמיד ומוחלף כדי שתלי Interposition נפוצים של העורק הראשי

הפרוטוקול הנוכחי שואפת ניסויים ליצור היפרפלזיה של הוורידים ורידים על ידי הקרבת ורידים ללחץ דם עורקי לפיתוח אסטרטגיות להחליש את היפרפלזיה בתוך ורידים בעקבות ניתוח revascularization באמצעות שתלי וריד.

ורידי ארנב מודל האינטרפוזיציה מחקה ניתוח מחדש באמצעות שתלי וריד כדי להעריך את היפרפלזיה באמצעות לחץ דם עורקי

בפרוטוקול זה, השתלת מעקף ורידים חזיר חדשה בוצעה דרך חתך קטן בדופן החזה השמאלית ללא מעקף לב-ריאה. נעשה מחקר פתולוגי לאחר הניתוח, שהראה עיבוי אינטימי.

הקמה והערכה של מודל מחלת השתלת ורידים חזיריים

פרוטוקול זה מאפשר כימות in vivo של ציות ורידי ויכולת הרחבה באמצעות צנתור ואנגיוגרפיה תלת ממדית כהליך הישרדות המאפשר מגוון יישומים פוטנציאליים.

כימות תאימות ויכולת הרחבה של Vena Cava נחותה במודל שחלות in vivo באמצעות אנגיוגרפיה תלת-ממדית

מחקר זה מציג מודל חזירי להערכת שתלים בקוטר קטן בעורקי הירך. המודל מחקה את הדינמיקה של כלי הדם האנושיים ומעריך באופן מקיף את סבלנות השתל, המודינמיקה ושיפוץ כלי הדם. הוא מציע פלטפורמה רבת ערך לבדיקת שתלי כלי דם ולניטור שלהם באמצעות אולטרסאונד דופלר ואנגיוגרפיה.

השתלת שתל כלי דם בעצם הירך במודל חזירים לבדיקת שתלי כלי דם בקוטר קטן

למדו מודל השתלת וריד בעכברוש לחקר פתיחות שתלים מעקפים ותהליכים ביולוגיים בנימים. שיטה זו מאפשרת מחקר תרופות חדשניות ושיפור תוצאות ניתוחי מעקף.

וריד ביון דגם: מודל מתאים ללמוד patency מעקף

גלה סרטונים נוספים