October 22nd, 2017
אנו מציגים מודל השתלת אבי העורקים orthotopic בטכניקה שרוול בעכברים. זו שיטה השקה מהירה מאוד, אשר יכול להיות מועסק במחקרים של מחלת כלי דם.
בהליך זה, אבי העורקים של התורם ממוקם במצב אורתופני ונשיכות שטחיות נלקחות בכלי ההזנה. להרדים את העכברים בתערובת של 1.5 אחוז נפח איזופלורן ו 100% חמצן דרך מסכת פנים. הניחו את העכבר על פלטפורמה במצב שכיבה והדביקו את כל הרגליים לשולחן הניתוחים.
יש להניח משחה עיניים על העיניים כדי למנוע יובש במהלך ההליך. בדוק רפלקסים, צבט את כפות הרגליים האחוריות כדי לוודא שהעכבר מורדם מספיק. הסר את כל השיער מהבטן.
מרחו קרם אפילציה או השתמשו במכונת גילוח. בצע את הפעולה בתנאים סטריליים. לחטא את הבטן.
כדי להסיר את אבי העורקים התורם, בצע חתך בטן בקו האמצע ומשוך את המעי ידנית ימינה. החזר בעדינות ידנית את המעיים לצד באמצעות כפפות ללא אבקה. הניחו את המעיים על פיסת גזה רטובה במי מלח כדי לשמור על לחותם.
נתח את אבי העורקים הבטני בזהירות רבה מהרקמה שמסביב באמצעות דיסקציה קהה עם פינצטה. נתח את קטע אבי העורקים בין עורק הכליה להתפצלות מהווריד הנבוב בעזרת הפינצטה. אבטח את כל הענפים הקטנים של קטע זה באמצעות תפר יחיד מונופילמנט 11-0.
לפני הסרת אבי העורקים, יש להזריק 0.5 מיליליטר של תמיסת מלח המכילה 50 יחידות הפרין לתוך הווריד הנבוב התחתון. תן לחיה התורמת להוציא לפני הסרת מקטע אבי העורקים. יש לשטוף את השתל במלואו במי מלח ולהניח אותו מיד לאחר מכן במיכל מי מלח קרים כקרח.
כדי להכין את הנמען, יש להרדים את החיה באמצעות מסכת פנים, להסיר את השיער ולחטא כאמור לעיל, ולבצע חתך בקו האמצע מהקסיפואיד לאגן בעזרת אזמל. החזר את דפנות הבטן בעזרת מחזירים. עטפו את המעיים בגזה לחה בתמיסת מלח והעבירו אותם בעדינות רבה לימין החיה.
נתח את אבי העורקים האינפרא כלייתי חופשי בין עורקי הכליה בסמוך וההתפצלות דיסטלית עם הפינצטה. אבטח את כל הענפים הקטנים של קטע זה באמצעות תפר יחיד מונופילמנט 11-0. מהדקים את החלקים הפרוקסימליים והדיסטליים של אבי העורקים באמצעות תפר משי יחיד 6-0.
מחלקים את אבי העורקים באמצע בין המהדקים ומשקים את הקצוות החתוכים במי מלח הפריניים כדי לשטוף את הלומן פתוח. הנח את השתל במצב אורטופני. בצע את האנסטומוזה בטכניקת השרוול עם תפרים באמצעות מונופילמנט 11-0.
בשיטה זו, קצה כלי ההזנה ממוקם בכלי המקבל. הנח את קצה אבי העורקים האינפרא כלייתי בתוך הקצה הפרוקסימלי של אבי העורקים התורם. בצע את האנסטומוזה הדיסטלית באותו אופן.
מקם את הקצה הדיסטלי של אבי העורקים התורם בתוך הקצה הדיסטלי של אבי העורקים המקבל. הקפד להימנע מכל פיתול של אבי העורקים על ידי הבטחת יישור מושלם של אבי העורקים התורם והמקבל. רגע שחרור המהדק הוא שלב חשוב מאוד בהליך ויש לבצע אותו בזהירות רבה.
לאחר שבדקתם שהאנסטומוזה תקינה, שחררו את המהדקים. ראשית שחרר את המהדק הדיסטלי בעדינות, ואחריו את המהדק הפרוקסימלי. באופן זה יש לחץ נמוך להחזיק את הקירות יחד לפני שחרור צד הלחץ הגבוה.
השתל מוחדר מיד ונראה דופק. הסר בעדינות את שאריות המשי. החזירו את תוכן הבטן לחלל הבטן וסגרו את הפצע באמצעות תפר חומצה פוליגליקולית 3-0.
יש לתת בופרנורפין 0.05 מיליגרם לק"ג לעכבר לפני הפסקת ההרדמה. אנו מציגים את הדוגמאות של תמונות הנתיחה של השתל שישה שבועות לאחר ההשתלה ואת תצוגת האולטרסאונד התלת מימדית ומצב B שלו. התמונות מראות את הסבלנות של השתל.
אין שינויים במידות הלומן המוצגות על ידי השתל. בנוסף, לא מצאנו היצרות או תצורות מפרצת. לא ראינו נגעים משמעותיים באבי העורקים המושתלים על ידי צביעה היסטולוגית ואימונוהיסטוכימית.
גרעינים הוכתמו נגדית על ידי DAPI. לסיכום, ניתן להשתמש בשיטת אנסטומוזה מהירה מאוד זו לחקר מחלות כלי דם בעכברים מהונדסים גנטית.
מאמר זה מציג מודל השתלת אבי העורקים האורתוטופית באמצעות טכניקת השרוול בעכברים, המאפשרת אנסטומזה מהירה. ניתן להשתמש בשיטה זו במחקרים של מחלות כלי דם.