Name: תולעת רקמות מבוססי חוט השדרה פגיעה בעמוד השדרה דגם עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-06-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 59 s
Description: למדו מודל פציעת חוט שדרה קונטוזיבית מבוסס תזוזת רקמות בעכברים בוגרים. שיטה זו מייצרת פציעות עקביות ושחזוריות לחקר מנגנוני פציעה וטיפולים ניסיוניים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה בחלקו על ידי NIH NS059622, NS073636, DOD CDMRP W81XWH-12-1-0562; סקירה פרסים סקירה I01 BX002356 של משרד החוץ של ארה&quot;ב לענייני; קרן קרייג נילסן 296749; אינדיאנה חוט השדרה ומחקר פגיעה במוח קרן ומרי הולמן ג &#39;ורג&#39; קרנות ההקדשה (XMX); נורטון בריאות, לואיוויל, KY (YPZ); מדינת אינדיאנה ISDH 13679 (XW); וקרן NeuroCures.

כל ההליכים הכירורגיים לטיפול בבעלי חיים בוצעו כפי שאושר תחת מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה (המועצה הלאומית למחקר) ואת הנחיות של אוניברסיטת אינדיאנה הספר לרפואה מוסדית טיפול בבעלי חיים ועדת שימוש. 1. הכנת בעלי חיים וביצוע T10 Laminectomy השדרה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את כלי ניתוח ומייצב עמוד השדרה מתכת החיטוי. נקו את שולחן הניתוח הניתוח. חם כרית חימום 37 מעלות צלזיוס. מניחים את כרית חימום על שולחן הניתוח לכסות אותו עם וילונות סטרילית כירורגית. השתמש בטכניקה סטרילית לאורך כל המבצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש נקבה צעירה C57 / 6J עכברים בגיל 10 שבועות עבור מחקר זה. להרדים כל חיה עם זריקה intraperitoneal (IP) של קטמין (87.7 מ&quot;ג / ק&quot;ג) ו xylazine (12.3 מ&quot;ג / ק&quot;ג) תערובת. לאשר הרדמה מלאה על ידי לא מעוררים שום תגובה גירוי נוקשות המושרה pow-puced. </stro<html> Ng&gt; <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תת עורית בופרנורפין (0.01-0.05 מ&quot;ג / ק&quot;ג), סוכן משכך כאבים, carprofen (5 מ&quot;ג / ק&quot;ג), תרופה נוגדת דלקת לא סטרואידים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את השיער על עמוד השדרה thoracolumbar באמצעות קליפר חשמלי. לשפשף את העור עם תמיסת betadine ו 70% אלכוהול מגבונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל משחה אופתלמית על הקרניות כדי להגן על העיניים מפני ייבוש במהלך הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם איזמל, לעשות 1.5 ס&quot;מ חתך העור קו האמצע על הגב של החיה לחשוף את 9 th 11 th thumic laminae חולני. לדחוף את רקמת השומן תת עורית rostrally. לנתח את השרירים paraspinal הרחק תהליכים ספינימי laminae, לעבר הצדדים לרוחב בכל צד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את העכבר על שוקת בצורת U של המייצב ( איור 2 א ו 2 ב ). Bilaterally מהדק את הזרועות נירוסטה מתחת להיבטים חשופים של החוליה T10 (G &quot;&gt; איור 4 א) ולהדק באמצעות ברגים האגודל המצורפת לזרועות ( איור 2 א ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את תהליך ספיני 10 ו lamina (laminectomy) באמצעות מיקרו rongeur שחושף מאטר דורה המכסים את חוט השדרה ( איור 4 ב ). </li></ol> 2. ביצוע פגם T10 פגיעה באמצעות LISA Impactor <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סובב את הידית של הרגולטור לחץ על מיכל חנקן כדי להגדיר את החנקן דחוס ל 20 PSI או 138 kPa ( איור 1 א ) עבור מחקר זה. הערה: הלחץ הוא מתכוונן מ 10-120 PSI. לחץ גבוה יותר יביא להשפעה של מהירות גבוהה יותר. המכשיר עצה SCI עם קוטר של 1.2 מ&quot;מ מיועד עכברים, ואת קצה עם קוטר של 2.2 מ&quot;מ מיועד חולדות. בעת שינוי מ עכברים חולדות, עצה קוטר גדול יכול להיווצר על ידי הוספת טבעת על קצה מתכת (id 1.2 מ&quot;מ / OD 2.2 מ&quot;מ). השתמשנו קצה 1.2 מ&quot;מ זה עכברים SCI sטיפש. לעקר את קצה SCI לפני השימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את המחשב כדי להפעיל את התוכנה. לחץ על כפתור 1 ( איור 1 ב ) כדי להפעיל את קצה impor למיקום מלא המורחבת ( איור 3 א -1 ). הערה: הפונקציה של לחצן 1 היא להפעיל או לבטל באופן ידני את הגליל הפנאומטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את המיכל בצורת U עם העכבר על הבמה ( איור 2 ב ). תקן את הבמה במקום על ידי הידוק הברגים האגודל של הר ( איור 2 ב ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתחת לאזור &quot;SET ZERO LEVEL&quot; (ירוק), הגדר את רמת האפס, עם חיישן לייזר למדידת המרחק אל קצה הבוכנה במלואה, על ידי לחיצה על כפתור &quot;התחל קריאה&quot; ( איור 3 א ). המרחק יוצג בפרמטר &quot;טווח&quot; באזור זה ( איור 3 א ). לחץ על כפתור &quot;SET ZERO&quot; למשל, 8.951 מ&quot;מ, שמוצג בתרשים 3 א ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על כפתור 1 ( איור 1 ב ) כדי למשוך את קצה impor ( איור 3B -1 , מסומן על ידי חץ עליון) ולפתוח את הידוק בורג 1 ( איור 2 ב ). משוך את הבורג למצב הנכון ( איור 3B -1 , מסומן על ידי חץ לרוחב) כדי להזיז את קצה הרחק מנתיב קרן הלייזר והפעל את בורג 90 מעלות בכיוון השעון כדי לנעול את הבורג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזיז את הבמה על ידי התאמת חזיתית ו לרוחב מיקרו נהגים ( איור 1 ג ) לכוון את קרן לייזר על מרכז חוט השדרה הגבי חשוף. לאחר מיקום הפציעה ממוקדת, למדוד את המרחק רקמות על ידי לחיצה על כפתור &quot;התחל קריאה&quot; תחת &quot;SET INJURY LEVEL &quot;(כחול) ( איור 3 ב ו 3 ב -1 ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט לאט את המרחק בין החיישן לבין חוט השדרה באמצעות הנהג מיקרו אנכי ( איור 1 ג ) כדי להגיע לפרמטר תזוזה הרצוי ( למשל, 0.500 מ&quot;מ, מוצג בתיבה &quot;פגיעה&quot; פרמטר) באזור &quot;רמת הפציעה רמה&quot; (כחול) ( איור 3 ב ). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר העקירה פציעה הרצוי הוא הגיע, להקליט את המרחק רקמות ( למשל, 8.451 מ&quot;מ, מוצג בתיבה &quot;טווח&quot; פרמטר) ( איור 3 ב ). הגדרת עקירה הרצוי (פגיעה) = מרחק עצה (אפס) - מרחק רקמות (טווח) ( איור 3 ב ). כאשר הפציעה הרצויה ( למשל, 0.500 תזוזה רקמה מ&quot;מ) הוא הגיע ( איור 3 ב ), לחץ על כפתור &quot;SET INJURY&quot; מתחת לאזור &quot;SET INJURY LEVEL&quot; ללהגדיר את הפציעה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל בורג 90 ° נגד כיוון השעון כדי לפתוח את הבורג, דחוף את קצה ההשפעה בחזרה אל מסלול קרן הלייזר) איור 3C -1 , כיוון המסומן בחץ (, ונעל את הברגה 1 על-ידי סיבובו 90 ° בכיוון השעון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על לחצן הפעלה תחת האדום &quot;RUN ניסיוני&quot; אזור ( איור 3 ג ) כדי לבצע את ההשפעה. תיבות פרמטר מתחת לאזור זה יציג את זמן הפציעה (ים), את הכוח (mV), את המהירות (m / s), ואת עקירה פגיעה (מ&quot;מ) ( איור 3 ג ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כל הנתונים הפציעה נרשמות ונשמר, להסיר את שוקת בצורת U עם העכבר מהבמה. ראייה לאשר את פגיעה בעמוד השדרה תחת מיקרוסקופ כירורגי ( איור 4 ג ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתפור את השרירים parvertebral, fascia שטחי, ואת העור באמצעות תפר רציף עם משי 3-0 (הנרי שיין, 776-SK). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק thE בעלי 1 מ&quot;ל של 0.9% מלוחים תת עורית עבור הידרציה ומניחים אותו על משטח טמפרטורה מבוקרת עד תודעה מלאה כבר recained. מניחים את העכבר לתוך כלוב עם מזון ומים נגיש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול שלאחר הניתוח, הביעו באופן ידני את שלפוחית ​​השתן עד שחוזרת שלפוחית ​​השתן הספונטנית תחזור. עבור כאבים, להזריק Buprenorphine (0.05-2.0 מ&quot;ג / ק&quot;ג, SQ) 8-12 שעות / יום במשך 2 ימים. אם דלקת בשלפוחית ​​השתן מתרחשת, להזריק Baytril (SQ, 5-10 מ&quot;ג / ק&quot;ג ב 0.1 מ&quot;ל, 1 מנה ביום) במשך 7-10 ימים. אם זיהום אזורי / מערכתי מתרחשת, להזריק Gentamycin (SQ, 5-8 מ&quot;ג / ק&quot;ג, בדילול מלא 1 מ&quot;ל סטרילי מלוחים, כל 8-12 שעות) במשך 4 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את חוטי תפר ב 14 ימים לאחר SCI. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום 42 שלאחר הפציעה לאחר, עכברים יוקרבו על ידי זלוף. לאחר הרדמה מתאימה כמו 1.2, הם יהיו perfused עם 30 מ&quot;ל (0.01M) פוספט שנאגרו מלוחים (PBS) ו 30 מ&quot;ל paraformaldehyde מ 0.01 M 0 PBS. סנטימטר אחד של חוט השדרה כולל אפוס הנגעהזן ייאסף ויעובד עבור חתך ניתוח היסטולוגית. </li></ol>

<ol><li>Young, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+contusion+models%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Spinal cord contusion models.</a> Prog. Brain Res. 137, 231-255 (2002).</li>
<li>Gale, K., Kerasidis, H., Wrathall, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+contusion+in+the+rat%3A+behavioral+analysis+of+functional+neurologic+impairment%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Spinal cord contusion in the rat: behavioral analysis of functional neurologic impairment.</a> Exp. Neurol. 88 (1), 123-134 (1985).</li>
<li>Gruner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+monitored+contusion+model+of+spinal+cord+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A monitored contusion model of spinal cord injury in the rat.</a> J. Neurotrauma. 9 (2), 126-128 (1992).</li>
<li>Scheff, S. W., Rabchevsky, A. G., Fugaccia, I., Main, J. A., Lumpp, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+modeling+of+spinal+cord+injury%3A+Characterization+of+a+force-defined+injury+device%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Experimental modeling of spinal cord injury: Characterization of a force-defined injury device.</a> J. Neurotrauma. 20 (2), 179-193 (2003).</li>
<li>Stokes, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+spinal+cord+injury%3A+a+dynamic+and+verifiable+injury+device%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Experimental spinal cord injury: a dynamic and verifiable injury device.</a> J. Neurotrauma. 9 (2), 129-134 (1992).</li>
<li>Young, W. MASCIS spinal cord contusion model. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYoung%2C+W+%22Animal+Models+of+Acute+Neurological+Injuries%22">Animal Models of Acute Neurological Injuries</a>. Chen, J., Xu, X. M., Xu, Z. C., Zhang, J. H. , Humana Press. 411-422 (2009).</li>
<li>Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Walters, P., Stokes, B. T. The Ohio State University ESCID spinal cord contusion model. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJakeman%2C+LB+%22Animal+Models+of+Acute+Neurological+Injuries%22">Animal Models of Acute Neurological Injuries</a>. Chen, J., Xu, X. M., Xu, Z. C., Zhang, J. H. , Humana Press. 433-448 (2009).</li>
<li>Scheff, S., Roberts, K. N. Infinite Horizon spinal cord contusion model. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aScheff%2C+S+%22Animal+Models+of+Acute+Neurological+Injuries%22">Animal Models of Acute Neurological Injuries</a>. Chen, J., Xu, X. M., Xu, Z. C., Zhang, J. H. , Humana Press. 423-433 (2009).</li>
<li>Sances, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/6373138">The biomechanics of spinal injuries.</a> Crit. Rev. Biomed. Eng. 11 (1), 1-76 (1984).</li>
<li>Zhang, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+contusion+based+on+precise+vertebral+stabilization+and+tissue+displacement+measured+by+combined+assessment+to+discriminate+small+functional+differences%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Spinal cord contusion based on precise vertebral stabilization and tissue displacement measured by combined assessment to discriminate small functional differences.</a> J. Neurotrauma. 25 (10), 1227-1240 (2008).</li>
<li>Walker, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+vertebral+stabilization+method+for+producing+contusive+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A novel vertebral stabilization method for producing contusive spinal cord injury.</a> J. Vis. Exp. (95), (2015).</li>
<li>Allen, A. R. <a target="_blank" href="http://jamanetwork.com/journals/jama/article-abstract/448138">Surgery of experimental lesion of spinal cord equivalent to crush injury of fracture dislocation of spinal column. A preliminary report.</a> J. A. M. A. 57, 878-880 (1911).</li>
<li>Jakeman, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+spinal+cord+injury+produced+by+controlled+contusion+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Traumatic spinal cord injury produced by controlled contusion in mouse.</a> J. Neurotrauma. 17 (4), 299-319 (2000).</li>
<li>Rivlin, A. S., Tator, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+duration+of+acute+spinal+cord+compression+in+a+new+acute+cord+injury+model+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Effect of duration of acute spinal cord compression in a new acute cord injury model in the rat.</a> Surg. Neurol. 10 (1), 38-43 (1978).</li>
<li>Zhang, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+cervical+laceration+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Controlled cervical laceration injury in mice.</a> J. Vis. Exp. (75), (2013).</li>
<li>Ma, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+controlled+spinal+cord+contusion+for+the+rhesus+macaque+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">A controlled spinal cord contusion for the rhesus macaque monkey.</a> Exp. Neurol. 279, 261-273 (2016).</li>
</ol>

כריסטופר ב שילדס, MD יש בעלות על לואיסוויל פגיעה במערכת מכשיר (LISA) המיוצר על ידי לואיסוויל Impactor מערכת, LLC.

בשנת 1911, תיאר אלן את מודל הירידה במשקל הראשון באמצעות משקל קבוע כדי לגרום לפציעות על חוט השדרה החשוף של הכלבים 12 . מודלים דומים לירידה במשקל פותחו על פי מודל אלן, כולל השפעת ה- NYU / MASCIS 3 , 6 , 13 , 14 . בנוסף לדגם ירידה במשקל, התקני SCI אחרים נוצרו. OSU / ESCID 5 , 7 מודל משתמש מנגנון עקירה רקמות כדי לשלוט בחומרה פגיעה, ואת מודל IH 4 , 8 משתמש בכוח כדי ליצור SCI מדורגת. במערכות אלה, ייצוב חוליות מתקבל על ידי clamping את התהליכים spinous מקורי זנב לאתר הפציעה. התקנים אלה מנצלים מהירויות פגיעה נמוכות, במיוחד 0.33 - 0.9 m / s (NYU / MASCIS), 0.148 m / s (OSU / ESCID)ו 0.13 m / s (IH). ייצוב תהליכים spinral מקורי ו הזנב עלול לגרום גמישות עמוד השדרה ואת עמוד השדרה התנועה במהלך ההשפעה, אשר עשוי להשפיע על פגיעה דיוק. שיטת LISA מנסה להתגבר על החסרונות של המודלים הקיימים, במיוחד בכל הנוגע לחוסר יציבות בעמוד השדרה ולמהירות פציעה נמוכה. שיטה זו משתמשת ביציבות פנים דו צדדית ונמנעת מרכבי התנועה הקשורים לפציעה. מכשיר זה מנצל מהירות גבוהה השפעה שניתן להגדיר בין 0.5-2 m / s 11 , 15 . חיישן הלייזר הוא מתקדם יותר מאשר ויברטורה לינג בשימוש במודל ESCID ומדויק בדיוק את המרחק מן פני השטח של חוט השדרה ללא צורך במגע רקמות. המודל פותח במקור כדי לייצר עכברוש SCI, וזה עכשיו כבר מותאם כדי לייצר SCI על עכברים על אדם לא פרימטים 16 , עם שינויים. שדרהAbilization מפחית את השונות בכל שיטות SCI ניסיוני, במיוחד מודלים תזוזה רקמות. חיישן מרחק הלייזר קובע את גודל עקירת הרקמות של חוט השדרה במהלך תנועות נשימה. חשוב כי הנקודה של חוט השדרה שבו לייזר ממוקדת צריכה להיות זהה נקודה פגע על ידי effector. שלב זה נעשה במהלך שלב כיול ( איור 3 ), כאשר קצה effor ואת קרן לייזר מיושרים. חולשה פוטנציאלית של מודל זה היא כי גודל של עקירת רקמות נמדדת על פני השטח dural. למרות עובי הדורה מהווה הבדל זניח בין בעלי חיים, השתנות משמעותית עשויה להתקיים בחלל subarachnoid מלא נוזל מוחי (CSF). שונות בתוצאות הפציעה עלולה להתרחש בעת הפקת פגיעה קלה מאוד בהפרעה באמצעות עירוי רקמות קטן. בסך הכל, עקביות של הפציעה תלויה בעיקרעל הדיוק של עקירה רקמות וגם על מהירות וזמן רקמות מגע של הבוכנה. טווח העקירה רקמות רחב (דיוק: 0-10 ± 0.005 מ&quot;מ). בהתבסס על נתוני פיילוט קודמים ומידע שפורסם במכרסמים ובפריטים שאינם אנושיים, תזוזה של 20% מקוטר אנטרופוסטוריור של ה- SC מניבה SCI קלה, תזוזה של 30-40% מפיקה מדד מתון, ועלייה של 50% מייצרת SCI חמור במהירות של 1 מ ש. יהיו הבדלים קלים בהתאם למינים של בעלי חיים. זמן השהייה הוא מתכוונן מ 0 ל 5 s באמצעות ממסר זמן. במחקר שלנו, זמן השהייה נקבע ב 300 ms. זה יכול להיות מותאם בקלות כדי לשכפל את זמן השהייה של מכשירים אחרים SCI, כולל מודלים NY ו IH. לסיכום, פיתחנו מודל תזוזה מבוסס של SCI contusive בעכברים בוגרים. המודל משתמש במייצב בצורת U כדי לייצב את פני השדרה הדו-צדדיים, תוך הימנעות מהכבלחפצי תנועה הקשורים למדידת הלייזר של משטח הכבל. מודל זה יכול לייצר במהירות גבוהה פגיעות חוט מ 0.5-2 m / s. חיישן הלייזר מדויק יותר מהשיטה הקונבנציונלית כדי לקבוע את המהירות ואת המרחק אל משטח ההשפעה. המודל יכול לייצר פציעות של חוט השדרה בכל הרמות, מתון עד חמור. כאשר שונה, מכשיר זה יכול גם לייצר פציעות בחולדות ובעלי חיים גדולים כגון פרימטים לא אנושיים.

הנפגע השכיח ביותר בחוט השדרה (SCI) המתרחשים בבני אדם הוא SCI contusive 1 . כדי לחקור את מנגנוני הפציעה ואת אסטרטגיות טיפוליות שונות בעקבות SCI, מודל מדוייק מדויק, עקבי, לשחזור SCI במכרסמים יש צורך. מודלים רבים של פגיעה בחוט השדרה, עם מנגנוני הפציעה השונים, שימשו במחקר SCI ניסיוני 2 , 3 , 4 , 5 , 6 . שלושה דגמי SCI חמקמקים - במיוחד, המשקל הנגרם על-ידי אוניברסיטת ניו-יורק / ניו-יורק (NYU) / מולטיסינטר - פגיעה בחוט השדרה (MASCIS) , 3 , 6 , מכשיר ה- SCU אלקטרומגנטי של אוניברסיטת אוהיו (OSU) 7 , אD את האינסוף האינסופי (IH) effector 4 , 8 - מתקבלים נרחב בתחום המחקר SCI. אפקט ה- NYU / MASCIS או מקביל מייצר פגיעה על ידי הפלת משקל קבוע מגבהים שונים על חוט השדרה היעד כדי ליצור חומרת פגיעה מרובים 3 , 6 . OSU / ESCID גורם לפציעה על ידי גרימת עקירה רקמות 5 , 7 . גורם IH מייצר פגיעה על ידי הפעלת כוחות שונים על חוט השדרה 4 , 8 . כל אפקטור משתמש במהירות שונה, שהיא פרמטר חשוב המשפיע על תוצאות הפציעה. מנגנון ה- NYU / MASCIS מייצר מהירויות שבין 0.33-0.9 m / s. למכשיר IH יש מהירות מקסימלית של 0.13 מטר לשנייה. לחצני OSU / ESCID יש מהירות קבועה של 0.148 m / s 5 . יש לציין, את המהירות שלSE נמוך יותר מזה שנצפה במהירויות הקליניות, אשר בדרך כלל עולה על 1.0 m / s 9 . כאן, אנו מציגים התקן חדש המבוסס על עקירה SCI מבוסס על תזוזה, הנקרא לואיסוויל פגיעה במערכת מערכת (LISA), כדי לייצר SCI בעכברים עם מהירות גבוהה השפעה 10 . מערכת זו כוללת מייצב חוליות, אשר מייצבת בחוזקה את החוליה באתר של פגיעה, המאפשר ייצור קבוע, לשחזור SCI. חיישן הלייזר של המכשיר מבטיח את הקביעה המדויקת של עקירת רקמות ואת חומרת כתוצאה של SCI. מהירות הבוכנה בנקודת המגע עם חוט השדרה יכולה להיות מותאמת בין 0.5 ל -2 m / s. אלה פרמטרים פגיעה מקרוב לשכפל טראומטית SCI לראות קלינית.

<table><tbody><tr><td>קטמין (7.2 מ"ג/מ"ל)/קסילזין (0.475 מ"ג/מ"ל)/אצפרומזין</td><td>פטרסון וטרינרי</td><td>07-890-8598/07-869-7632/07-808-1947</td><td>חומר הרדמה</td></tr><tr><td>בופרנורפין (0.03 מ"ג/מ"ל)פטרסון</td> <td>וטרינרי</td><td>07-891-9756</td><td>חומר לשיכוך כאבים</td></tr><tr><td>קרפרופן</td><td>פטרסון וטרינרי</td><td>07-844-7425</td><td>חומר אנטיביוטי</td></tr> מוצרי <tr><td>פרדו בטדין פילינג</td> <td>כירורגיפישר סיינטיפיק</td><td>19-027132</td><td>לעיקור עור</td></tr><tr><td>ספוגי גזה דוקאל</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-415-490</td><td>לעיקור עור</td></tr><tr><td>דקון אתנול 200 הוכחה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>04-355-450</td><td>לעיקור עור</td></tr><tr><td>1 מ"ל נורמה-זריקה</td><td>הנקה סאס וולף</td><td>D-78532</td><td>להרדמה/שיכוך כאבים/הזרקת חומר אנטיביוטי</td></tr><tr><td>10 מ"ל מזרק</td><td>TERUMO</td><td>REF SS-10L</td><td>להזרקת מי מלח</td></tr><tr><td>דמעות מלאכותיות משחת עיניים</td><td>וובסטר וטרינרי</td><td>07-870-5261</td><td>עיניים מוכחות</td></tr><tr><td>ממשחה אנטיביוטית יבשה</td><td>וובסטר וטרינרי</td><td>07-877-0876</td><td>ניתוח פרובנט חתוך מזיהום</td></tr><tr><td>אפליקטורים עם קצה כותנה</td><td>פישר 1006015 מדעי</td><td></td><td>להפסיק דימום</td></tr><tr><td>מכשיר סטריליזטור</td> כלים <td>מדעיים עדינים</td><td>18000-50</td><td>לכלי ניתוח עיקור</td></tr><tr><td>מלקחיים</td><td>עדינים כלי מדע עדינים</td><td>11223-20</td><td>לתפוס רקמה</td></tr><tr><td>אזמל</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>10003-12</td><td>להב אזמל חיתוך עור</td></tr><tr><td>#15</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>10015-00</td><td>חיתוך עור</td></tr><tr><td>Hemostat</td><td>Fine Science Tools</td><td>13004-14</td><td>לעצור דימום</td></tr><tr><td>Rongeur</td><td>Fine Science Tools</td><td>16021-14</td><td>כריתת למינקטומיה</td></tr><tr><td>Agricola Retractor</td><td>Fine Science Tools</td><td>17005-04</td><td>שמור את תצוגת הניתוח פתוחה</td></tr><tr><td>מספריים עדינים</td><td>Fine Science Tools</td><td>14040-10</td><td>לשריר מופרד מעמוד השדרה</td></tr><tr><td>תפרים סטריליים</td><td>Fine Science Tools</td><td>12051-10</td><td>סגירת עור</td></tr><tr><td>מייצב חוליות</td><td>עכבר לואיוויל מערכת אימפקטור</td><td>N/A</td><td>לייצב ולחשוף את החוליה</td></tr><tr><td>LISA</td><td>Louisville Impactor System</td><td>N/A</td><td>לייצר פגיעה ניסיונית של חוט השדרה בעכברים</td></tr></tbody></table>

תולעת רקמות מבוססי חוט השדרה פגיעה בעמוד השדרה דגם עכברים

A Tissue Displacement-based Contusive Spinal Cord Injury Model in Mice

הפקת פגיעה עקבית ושחזור של חוט השדרה (SCI) היא קריטית לצמצום ההבדלים ההתנהגותיים וההיסטולוגיים בין בעלי חיים ניסיוניים. כמה מודלים SCI contusive פותחו כדי לייצר פציעות באמצעות מנגנונים שונים. חומרת ה- SCI מבוססת על גובה שמשקל נתון יורד, כוח הפציעה או עקירה של חוט השדרה. במחקר הנוכחי, אנו מציגים עכבר חדשני עכבר SCI contusive, לואיסוויל פגיעה במערכת מכשיר (LISA) effector, אשר יכול ליצור SCI מבוסס תזוזה עם מהירות פגיעה גבוהה ודיוק. מערכת זו מנצלת חיישנים מרחק לייזר בשילוב עם תוכנה מתקדמת לייצר מדורגת מאוד לשחזור פציעות. ביצענו SCI contusive ב 10 חולית החזה (T10) רמת עכברים בעכברים כדי להדגים את ההליך צעד אחר צעד. המודל יכול להיות מיושם גם על רמות השדרה הצוואר הרחם המותני.

התקן זה מורכב מחמישה מרכיבים עיקריים: (1) גוף עם קצה Imporor ( איור 1 ג ), (2) מחשב עם תוכנה ( איור 1 ב ), (3) תיבת בקרה חשמלית ( איור 1 ב ), (4) מייצב חוליות ( איור 2 א ), ו (5) אוויר דחוס עבור מערכת בקרה פנאומטית ( איור 1 א ). כדי לעורר תזוזה מדויקת של הרקמה, המערכת מסתמכת על חיישן לייזר כדי למדוד את המרחק בין קצה הבוכנה המורחבת במלואה לבין משטח הגבי של חוט השדרה. התוכנה לוקחת את עובי 4 מ"מ של קצה בחשבון בשל העובדה כי קרן לייזר מגיע רק המשקף את פני השטח של impactor ( איור 2 ב ו איור 3 א -1 ). יש שתי עמדות שבהן ניתן להציב את קצה הבוכנה:) 1 (iN הנתיב של קרן הלייזר ( איור 3 א -1 ) או (2) במצב לרוחב הרחק קרן הלייזר ( איור 3B -1 ). כאשר הבוכנה נמצאת בנתיב קרן הלייזר ( איור 3 א -1 ), היא מודדת את המרחק מהטבעת האיפקטור ומפקחת על מהירות קצה הטייס במהלך תנועה בין הארכה לביטול. כאשר הבוכנה נמצאת במצב לרוחב הרחק הנתיב קרן הלייזר ( איור 3B -1 ), המרחק בין הלייזר לבין חוט השדרה נמדדת. ייצוב של חוליה T10 באמצעות מייצב החולייתי שלנו הוא מרכיב בלתי נפרד של ההליך ( איור 2 א ) 10 , 11 . מדידות המרחק אמין באמצעות חיישן לייזר תלויים sTability של היעד, אשר יכול להיות מעוות אם ההצעה קיימת. כדי לקבוע את הדיוק ואת עקביות של מערכת זו, 8 עכברים היו כפופים 0.5 מ"מ נזקי פציעות. בעלי חיים אלה הראו השתנות תזוזה של ± 0.001 מ"מ (± SD), דבר המעיד על כך שהמערכת מדויקת ביותר וניתנת לשחזור. איור 4 מדגים את חוליות המטרה משותקת מייצב ( איור 4 א ) ואת חוט השדרה T10 חשוף לפני ( איור 4 ב ) ואחרי ( איור 4C ) contusion תחת מיקרוסקופ כירורגי. לחץ האוויר הדחוס שולט במהירותו של המפגע ברגע הפציעה. הנתונים שלנו מראים כי מהירות ההשפעה היא 0.81 ± 0.0345 m / s (ממוצע ± SD) בלחץ של 138 kPa. כפתור ( איור 1B ) על פקדי תיבת חשמלאת משך הזמן של קשר כבל עצה (לשכון זמן) בעקבות הפציעה, והוא יכול להיות מותאם בין 0 ל 5,000 ms. עצה חוט שעת הזמן ברוב הניסויים נקבע ב 0.32 ± 0.0147 s (ממוצע ± SD) ( איור 5 ). שימוש במכשיר זה, ניתן לייצר פציעות קונוסיביות תלויות בחומרה עם התקפי רקמה של 0 מ"מ (בקרת דמה), 0.2 מ"מ (פגיעה קלה), 0.5 מ"מ (פגיעה בינונית) ו -0.8 מ"מ (פגיעה חמורה) בעכברים בוגרים ( איור 6 ). <img alt="איור 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54988/54988fig1.jpg"> איור 1: מערכת לואיסוויל פגיעה במערכת (LISA). ( א ) המערכת מורכבת מאפקט, ממערכת בקרה וממקור אוויר דחוס. ( ב ) מערכת הבקרה כוללת תיבת בקרה ומחשב נייד. התוכנה ואת לחצני הבקרה של תיבת הבקרה לאפשר למשתמש להקיםLish פרמטרים פגיעה. ( C ) חיישן הלייזר הוא מרכיב המפתח של המכשיר ומודד את המיקום של יעד הפגיעה, את המרחק מחוט השדרה אל החיישן ואת מהירות הפציעה. המהירות למטה- up- תנועה של קצה ההשפעה מופעל על ידי אוויר דחוס. מיקום הפציעה וחומרת תזוזה הרקמה מותאמים על ידי microdrivers, אשר שולטים התנועה בשלושה ממדים. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54988/54988fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54988/54988fig2.jpg"> איור 2: מייצב ומחזיק עכבר. ( א ) מייצב עמוד השדרה מורכב שוקת בצורת U ושתי זרועות מתכת להחזיק את החוליה עכבר. ( ב ) מייצב מותקן אז על המכשיר impor. Tהקו האדום מציין את נתיב קרן הלייזר. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54988/54988fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54988/54988fig3.jpg"> איור 3: שיטה לייצר SCI contusive. ( A - C ) תוכנת ממשק המשתמש הגרפי (GUI) עם שלושה פרמטרים / אזורי פגיעה מוצגים. ( A , A-1 ) האזור הירוק (SET ZERO LEVEL) קובע את המרחק של קצה הבוכנה. הקו האדום מציין את נתיב קרן הלייזר. ( B , B-1 ) האזור הכחול משמש לקביעת רמת הפציעה (רמת הזיהוי המוגדרת). אפקט הוא הרים והועלה רוחבית לצד ימין כדי לאפשר קרן לייזר להגיע אל פני הגבי של חוט השדרה כדי להגדיר את רמת האפס. הקו האדום מציין את הלייזר ב נתיב. ( C , C-1 ) לפני ההשפעה, קצה מועבר חזרה על נתיב קרן לייזר כדי לבצע את הפציעה (RUN). הפרמטרים הפציעה נמצאים תחת האזור האדום (RUN EXPERIMENT). הקו האדום מציין את נתיב קרן הלייזר. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54988/54988fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54988/54988fig4.jpg"> איור 4: חשיפת פגיעה והערכה. ( א ) זרועות המתכת של מייצב עמוד השדרה מייצבות את החוליה T10. ( ב ) laminectomy T10 לחשוף את חוט השדרה, עם כלי הגבי נראה בבירור. ( ג ) ההשראה המושרה על-ידי חץ (חץ) על המשטח הגבי של חוט השדרה מאשרת את הפגיעה. קנה מידה בר = 2 מ"מ.G4large.jpg "target =" _ blank "&gt; לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54988/54988fig5.jpg"> איור 5: פרמטרים של פגיעה. הפרעות פגיעה עקבית כוללים עקירה רקמות (מ"מ), מהירות פציעה (מ / ש), ואת קצה לשכון זמן (ים). N = 8, ממוצע ± SD. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54988/54988fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54988/54988fig6.jpg"> איור 6: הערכה היסטולוגית. חתכים מייצגים של חוט השדרה, מוכתמים עם Cresyl ויולט ו Eosin, להראות פציעה תלויי תזוזה פציעות בעקבות ( א ) sham (0 מ"מ), ( B ) קלה (0.2 מ"מ), ( C D ) חמור (0.8 מ"מ) SCIs contusive ב T10 באמצעות המכשיר LISA. התמונות צולמו במרכז הירי. סולם בר = 500 מיקרומטר. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54988/54988fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

אנו מציגים מודל תזוזה מבוסס חוט השדרה על חוט השדרה, שיכול לייצר פגיעה עקבית בחוט השדרה בעכברים מבוגרים.

Producing a consistent and reproducible contusive spinal cord injury (SCI) is critical to minimizing behavioral and histological variabilities between ...

המטרה הכוללת של סרטון זה, היא להציג מודל חדש של פגיעה בחוט השדרה המבוסס על תזוזה של רקמות, שיכול לייצר פגיעה עקבית בחוט השדרה בעכברים בוגרים. מודל חבלה זה יכול לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הניסוי של פגיעות חוט השדרה. היתרון העיקרי של טכניקה זו, הוא שהיא מייצרת פגיעה עקבית מאוד בחוט השדרה.ההשלכות של טכניקה זו התרחבו לטיפול בפגיעה בחוט השדרה מכיוון שמודל זה מספק כלים אמינים וניתנים לשחזור לחקר מנגנוני הפגיעה וההשפעות של טיפולים ניסיוניים. בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו מכיוון שהם לא מכירים את ההשפעה החדשה. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית מכיוון שקשה ללמוד מספר שלבים בגלל פעולות ידניות ותוכנה.התחל בהבאת מכשירי הניתוח החיטוי ומייצב עמוד השדרה המתכתי לשולחן הניתוחים הנקי. מחממים כרית חימום ל -37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, הניחו את כרית החימום על שולחן הניתוחים וכסו בווילונות כירורגיים סטריליים.נקבה בת 10 שבועות, C57BL6J עכברים משמשים למחקר זה. לאחר מתן זריקה תוך-צפקית של קטמין וקסילזין, בדוק אם יש רמת הרדמה נאותה על ידי היעדר תגובה כלשהי לגירוי כאב המושרה על ידי צביטת כפות. יש לתת בופרנורפין, חומר משכך כאבים וקרפרופן, תרופה נוגדת דלקת לא סטרואידית תת עורית.השתמש בקוצץ חשמלי כדי לגלח את השיער מעל עמוד השדרה של בית החזה. שפשפו את העור בתמיסת בטדין ומגבוני אלכוהול 70%. מרחו משחה עיניים על הקרניות, כדי להגן על העיניים מפני התייבשות.לאחר ביצוע חתך עור בקו האמצע של 1.5 ס"מ בגב החיה מעל הלמינה של חוליות בית החזה התשיעית עד ה-11, דחוף את רקמת השומן התת עורית לכיוון הזרוע. בעזרת מספריים עדינים, מלקחיים עדינים ומחזיר אגריקולה, נתחו את שרירי עמוד השדרה הרחק מתהליכים קוצניים ולמינאה לכיוון הפסקטים הרוחביים מכל צד. מקם את העכבר על המיכל בצורת U של המייצב, מהדק את זרועות הנירוסטה מתחת לצדדים החשופים של חוליית t10 דו צדדית והדק את הזרועות עם ברגי האגודל המחוברים אליהן.השתמש במיקרו רונג'ר כדי להסיר את התהליך הקוצני t10 ואת הלמינה החושפת את מודל הדורה המכסה את חוט השדרה. הנח את המיכל בצורת U עם העכבר על ה-stagה של הפגיעה וקבע את ה-stage במקומו על ידי הידוק ברגי האגודל של התושבת. כדי להגדיר את הפגיעה, סובב תחילה את הכפתור של ווסת הלחץ על מיכל החנקן כדי להגדיר את החנקן הדחוס ל-20 פאונד לאינץ' רבוע או 138 קילו-פסקל למחקר.עקר את קצה הפגיעה של 1.2 מיליליטר עם 70% אלכוהול. לאחר מכן, פתח את חבילת התוכנה במחשב. לחץ על כפתור אחד של תיבת הבקרה כדי להפעיל את קצה הפגיעה למצב מורחב מלא.במסך המחשב, תחת הגדר רמת אפס, לחץ על התחל לקרוא, כדי למדוד את המרחק לקצה הבוכנה המורחב במלואו. המרחק יוצג כפרמטר הטווח באזור זה. לאחר מכן לחץ על הגדר אפס ומספר במיליליטר יופיע בתיבת הפרמטר אפס.לאחר מכן, לחץ על כפתור אחד בתיבת הבקרה, כדי למשוך את קצה הפגיעה. לאחר מכן, פתח את נעילת בורג ההידוק, משוך את הבורג כדי להרחיק את הקצה מנתיב קרן הלייזר וסובב את הבורג 90 מעלות בכיוון השעון כדי לנעול. כעת הזיזו את שלב ההרכבה, על ידי התאמת המיקרו-דרייברים הקדמיים והרוחביים כדי לכוון את קרן הלייזר למרכז חוט השדרה הגבי החשוף.לאחר שנקודת הפציעה ממוקדת, מדוד את מרחק הרקמה על ידי לחיצה על כפתור התחל קריאה תחת הגדרת רמת פציעה. השתמש בדרייבר המיקרו האנכי כדי לכוונן לאט את המרחק בין החיישן לחוט השדרה, עד להגעה לפרמטר התזוזה הרצוי. זה מתחת לרמת הפציעה שנקבעה, בתיבת פרמטר הפציעה.כאשר מגיעים לתזוזה הרצויה של הפציעה, רשום את מרחק הרקמה המוצג בתיבת פרמטר הטווח, ולאחר מכן, הגדר את התזוזה או הפציעה הרצויה על ידי הפחתת מרחק הרקמה או הטווח ממרחק הקצה באפס. לאחר מכן לחץ על הגדרת פציעה תחת הגדרת רמת פציעה. לאחר מכן, פתח את הבורג על ידי סיבובו 90 מעלות נגד כיוון השעון.דחוף את קצה הפגיעה בחזרה למסלול קרן הלייזר ונעל את הבורג על ידי סיבובו 90 מעלות בכיוון השעון, לחץ על כפתור ההפעלה תחת ניסוי הפעלה כדי לבצע את הפגיעה. תיבות הפרמטרים יציגו את זמן הפציעה בשניות, כוח במיקרו-וולט, מהירות במטרים לשנייה ותזוזה של פציעה במילימטרים. לאחר רישום ושמירה של כל נתוני הפציעה, הסר את השוקת בצורת U עם העכבר מהבמה.לאחר מכן, אשר חזותית את הפגיעה בחוט השדרה תחת מיקרוסקופ כירורגי. לאחר תפירת החתך בשכבות, יש להזריק לבעל החיים מילימטר אחד של 0.9% מלח תת עורי להתייבשות ולהניח אותו על כרית מבוקרת טמפרטורה עד להחזרת ההכרה. לאחר מכן הכניסו את העכבר לכלוב נקי עם מים ומזון נגישים בקלות.נתונים אלה מראים פרמטרי פציעה לא עקביים, מדגימים כי הפגיעה יכולה לייצר פגיעה אמינה וניתנת לשחזור. חתך מייצג זה מוכתם בקרסיל סגול-אאוזין, מראה את אזור t10 של חוט השדרה לאחר פציעה מזויפת עם תזוזה של 0 מילימטר. תמונה זו מציגה את מוקד הפגיעה הקלה בחוט השדרה ב-t10, באמצעות המכשיר עם תזוזה של 0.2 מילימטר.פציעה בינונית זו הושגה באמצעות תזוזה של 0.5 מילימטר. לבסוף, הפציעה הקשה הזו היא תוצאה של תזוזה של 0.8 מילימטר. תמונות אלה מדגימות כי פגיעה חדשה זו יכולה לייצר פגיעת חבלה מדורגת.לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך 30 דקות אם היא מבוצעת כראוי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להגדיר אפס עבור קצה הפגיעה במטרות חוט השדרה. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום פגיעות חוט השדרה, לחקור מנגנונים וטיפולים בעכברים, חולדות ופרימטים שאינם אנושיים.לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להשתמש בפגיעה זו כדי לייצר פגיעה בחוט השדרה.

a-tissue-displacement-based-contusive-spinal-cord-injury-model-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

באופן אמין לשחזור לייצר פגיעה בחוט השדרה הצווארי חד צדדית באמצעות impactor אופק אינסופי מתואר. השיטה מנצלת את מסגרת שנועדה מותאם אישית לצבוט לייצב את עמוד השדרה. הליך סטנדרטי ופגיעה פרמטרים ביומכנית לגרום פציעות די מתמשכת.

דגם Contusive של פגיעה בחוט השדרה באמצעות צוואר הרחם חד צדדית Impactor אופק אינסופי

מקור: Elzat, E. Y. Y., et al., הקמת מודל פגיעה בחוט השדרה של חבלת עכבר המבוסס על טכניקה זעיר פולשנית. J. Vis. Exp. (2022). סרטון זה מדגים את השיטה לגרימת פגיעת חבלה בחוט השדרה ברמת T9 במודל עכבר, באמצעות פלטפורמה קואקסיאלית של פגיעה בחוט השדרה. משקל נופל על חוט השדרה ברמת T9 שיוצר חבלה הגורמת מיד לשינוי צבע הרקמה ונפיחות.

גרימת חבלה בחוט השדרה במודל עכבר באמצעות פלטפורמה קואקסיאלית לפגיעה בחוט השדרה

מקור: Kumar, S., et. al. מודל עכבר של פצעי לחץ לאחר פגיעה בחוט השדרה. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים אינדוקציה מפורטת של פגיעה בחוט השדרה בעכברים. העכבר המורדם מנותח כדי לחשוף את חוליות T9-T10, והתהליכים הקוצניים שלהם מוסרים. לאחר מכן חוט השדרה החשוף עובר טרנסקטציה כדי לגרום לפציעה. לאחר מכן סוגרים את אזור הניתוח, והעכבר מורשה להתאושש.

יצירת מודל עכבר עם פגיעה בחוט השדרה

טכניקה חדשנית ליצירת...

פגיעה קריעת צוואר הרחם מבוקרת בעכברים

פגיעה בחוט השדרה היא מצב טראומטי שגורם לתחלואה קשה ותמותה גבוהה. בעבודה זו אנו מתארים בפירוט מודל חבלה של פגיעה בחוט השדרה בעכברים ואחרי השתלה של תאי גזע עצביים.

השתלת תאי גזע עצבית בדגם ניסיוני של Contusive פגיעה בחוט השדרה

מודלים של פגיעה בחוט השדרה צריכים להיות ניתנים לשחזור גבוה. אנו מדגימים כי מודל דחיסת המלקחיים המכויל של פגיעה בחוט השדרה הוא שיטה כירורגית קלה לשימוש ליצירת פגיעות הניתנות לשחזור בחוט השדרה של העכבר.

מכויל דגם מלקחיים של חוט השדרה דחיסת פגיעה

מאמר זה מתאר שיטה ליצירת פגיעת דחיסת חוט שדרה (SCI) הניתנת לשחזור בעכבר היילוד. המודל מספק פלטפורמה מועילה לחקר מנגנונים של פלסטיות אדפטיבית העומדים בבסיס התאוששות תפקודית ספונטנית.

חוט השדרה עכבר בילוד דגם פגיעה דחיסה

פרוטוקול זה מתאר כיצד ליצור כריתת למינקטוע מדויקת עבור אינדוקציה של פגיעה יציבה בחוט השדרה מסוג transection במודל העכבר, עם נזק משני מינימלי למחקר פגיעה בחוט השדרה.

אינדוקציה של פגיעה מלאה בחוט השדרה מסוג טרנס-פעולה בעכברים

טכניקות זעיר פולשניות ומכשיר מעבדה פשוט משפרים את יכולת השכפול של מודל הפגיעה בחוט השדרה על ידי הפחתת הנזק האופרטיבי לחיות הניסוי ומתן אפשרות לתחזוקה של המורפולוגיה האנטומית. השיטה כדאית משום שהתוצאות האמינות וההליך הניתן לשחזור מקלים על חקירת מנגנוני תיקון המחלה.

הקמת מודל פגיעה בעמוד השדרה של חבלה בעכבר המבוסס על טכניקה זעיר פולשנית

הפרוטוקול הנוכחי המדמה תסמונת חבל הטבור המרכזי (CCS) בעכברים שיפר את יכולת החזרתיות וממזער את הנזק הניתוחי לחיות הניסוי, תוך הימנעות משיבוש יתר של המבנה האנטומי. האסטרטגיה במחקר זה מועילה מכיוון שהיא מאפשרת מחקר של מנגנוני פציעה על ידי הפקת תוצאות עקביות.

הקמת מודל תסמונת חבל הטבור המרכזי בעכבר C57BL/6J

מוצג כאן מכשיר חדשני אוטומטי לפגיעה בחוט השדרה עבור עכברים, שיכול לייצר במדויק מודלים של פגיעה בחוט השדרה בדרגות שונות.

משפיען אוטומטי למודל פגיעה מתמשכת בחוט השדרה בעכברים

למדו מודל פציעת חוט שדרה קונטוזיבית מבוסס תזוזת רקמות בעכברים בוגרים. שיטה זו מייצרת פציעות עקביות ושחזוריות לחקר מנגנוני פציעה וטיפולים ניסיוניים.

תולעת רקמות מבוססי חוט השדרה פגיעה בעמוד השדרה דגם עכברים

גלה סרטונים נוספים