Name: הדגם הארנב של טרשת עורקים מואצת: מבט מתודולוגי הפגיעה בעורק Iliac בלון (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-03T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: למדו ליצור מודל טרשת עורקים בארנבים באמצעות פגיעה בלון בעורק ה-Iliac והזנת דיאטה אטרוגנית. שיטה זו מאפשרת חקר פיתוח כתמי שומן ומדידת נקודות קצה מורפומטריות ואנגיוגרפיות בבעלי חיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי השוויצרי הלאומי למדע קרן גרנט 150271.

פרוטוקול נסיוני זה אושרה על ידי המשרד הווטרינרי הקנטונים, פריבורג ומרכז השוויצרי הפדראלי וטרינרית Office, שוויץ (FR 2015/58).
 הערה: ארנבונים זכר NZW במשקל בין 2.8 ל 3.2 ק ג שימשו. החיות שוכנו בתנאים רגילים (אור 12 h ומחזור כהה, סיפק מזון ומים ad libitum). לפני חסיפה בלון, בעלי חיים היו שאמבטיה במשך שבוע, במהלכו הם האביסו דיאטה רגילה צ'או. אחרי שבוע 1 של הסתגלות, ארנבים הוחלפו לתזונה atherogenic המורכב של שומן גבוהה (8.6%), רווי חומצות שומן תזונה כולסטרול (1%) 205 מ"ג/ק"ג למשך כל המחקר. בלון פגיעה בעורק השמאלי iliac בוצעה 1 שבוע לאחר דיאטה החניכה, חיות הוקרבו לאחר 2 שבועות או 4 שבועות של בלון פציעה.
 1. הליכים לפני הניתוח <ol><li>לעקר כל מכשירי ניתוח לפני השימוש מעקר חרוז זכוכית או מכשיר מתאים אחרים.</li>
	<li>הכן לבדוק את מכלול קטטר בלון.
	<ol><li>צרף מנעול סכינים סטריליים 1 מ"ל מזרק מלא עם תמיסת מלח לחלק נעל-סכינים סטריליים של הקטטר בלון. בזהירות לפקח על ההיעדרות האוויר לכודה. בדוק את הדליפות ולהבטיח האינפלציה בלון נאותה על ידי לחיצה על הבוכנה של המזרק.</li>
	</ol></li> <li>שוקל את הארנב ותדליק את thermopad ל- 37 מעלות צלזיוס.</li>
	<li>להשתמש פתרון הבופרנורפין-ריכוז של 0.3 mg / ml. תזריק מנה של 0.01 מ"ג/ק"ג subcutaneously.</li>
	<li>Anesthetize הארנב עם 5% איזופלוריין ו- 5 L/דקה O 2 חדר אינדוקציה במשך 10-15 דקות</li>
	<li>הצב את הארנב anesthetized על כרית חימום שמרה על פלטפורמת כירורגי. מקם את התיקון ואת קליפים כדי לפקח על טמפרטורה, נשימה ו רל.</li>
	<li>לצרף את החוטם של הארנב מסיכת פנים מחובר למכונה אלחוש מתאימים. לשמור על ההרדמה עם איזופלוריין (4.0% עם 2.5 L/דקה O 2). לאשר ההרדמה המתאים (שצוין על-ידי חוסר טונוס שרירים ואובדן רפלקסים איסור פרסום ו- pinnae).</li>
	<li>להחיל משחה אופטלמולוגיות בשתי העיניים כדי למנוע ייבוש של הקרנית. לעטוף את הארנב עם סדין כירורגי סטרילי עם רק את האיבר התחתון חשוף.</li>
</ol> 2. פרוטוקול כירורגי <ol><li>להסיר השיער מאזור הגחון מתחת המפרקים בברך בעזרת קוצץ שיער בעלי חיים.</li>
	<li>לנגב את האזור עם חומר חיטוי מתאים כדי לנקות את העור ולהסיר ופזור.</li>
	<li>אתר העורק saphenous גדולות, עושים חתך קטן בעור של כ 1.5 ס מ אורך באמצעות אזמל.</li>
	<li>לחשוף רק חלק קטן של עורק saphenous גדולות עם מלקחיים קטנים מעוקלים מבלי להזיק את וריד הירך ואת העצב הירך.</li>
	<li>מקום שתי לולאות קשירה רופף (5-0 משי) מתחת העורק saphenous גדולות, קושרים לולאה אחת קשירה לקראת הקצה הדיסטלי של העורק. מניחים מעל הקשירה לעצור את זרימת הדם של העורק iliac מלחציים microvascular.</li>
	<li>Topically להחיל טיפה אחת של papaverine להתרחב העורק וכדי למנוע vasospasm.</li>
	<li>להרים את העורק saphenous בעזרת קשירה קשור ולהערכת לעשות חתך קטן arteriotomy שימוש בגודל 24 המחט.</li>
	<li>העלה את המדפים החתך עם מלקחיים בסדר ולהוסיף לאט איסוף וריד או מחט המנחה לתוך לומן של העורק.</li>
	<li>להכניס צנתר עורקי הכריתה פוגרטי צרפתית 2 העורק saphenous גדולות. להסיר את הווריד פיק, סוגרים microvascular.</li>
	<li>לקדם הקטטר עד הסימן השישי (20-25 ס מ) המתאים למיקום בערך 2-5 ס מ מעל ההסתעפות iliac.</li>
	<li>לנפח את הבלון עם 0.1 מ"ל תמיסת באמצעות מזרק 1 מ"ל או בלחץ נומינלי של 6 atm באמצעות וסת פרסיזיון ידנית מוסדר כפי שמתואר 16 , 22-</li>
	<li>החזק את הצנתר בלון עם מלקחיים וגרור עד 6 ס מ דרך arterytoward iliac את נקודת החדירה, תוך כדי סיבוב את הצנתר.</li>
	<li>השטחת קצה את הבלון על ידי למשוך בחזרה על הבוכנה של המזרק.</li>
	<li>חזור על שלבים 2.10 כדי 2.13 שלוש פעמים כדי לוודא חסיפה אנדותל מלאה.</li>
	<li>להסיר את הצנתר ועניבה מיד הלולאה קשירה מעל האתר arteriotomy כדי לעצור את הדימום.</li>
	<li>החל מתאימים חיטוי מסביב הפריפריה של הפצע, דגימה משם קרישי הדם. סגירת החתך בעור בתפר 5-0, ולחטא אתר הניתוח עם povidone יוד פתרון.</li>
	<li>חזור על שלבים 2.1 כדי 2.16-contralateral iliac באמצעות צנתר חדש.</li>
	<li>דגימה המשחה אופטלמולוגיות מעיני.</li>
</ol> 3. טיפול לאחר הניתוח <ol><li>לניהול sulfadoxine 40 מ"ג/ק"ג, ילדים מתחת לגיל 8 מ"ג/ק"ג או כל אנטיביוטיקה מתאימה אחרים מיד לאחר הליך כירורגי.</li>
	<li>במהלך תקופת התאוששות הרדמה, לשמור את הארנב מעל כרית החימום מניחים בתוך כלוב נקי בלוק.</li>
	<li>להסיר את תיקון ניטור ואת קטעי.</li>
	<li>לאחר התאוששות, להחזיר את הארנבים לכלובים שלהם הביתה. מזריקים subcutaneously הבופרנורפין 0.05 - 0.1 מ"ג/ק"ג פרסם - שמעשית כל 6-12 h עבור 48 ה המשך דיאטה atherogenic עוד שבועיים או ארבעה שבועות.</li>
</ol> 4. קצירת רקמות והרכב ניתוח של פלאק <ol><li>אחרי שבועיים (עבור לוח דק מוקדם) או שלושה שבועות של פגיעה בלון, עזים ומתנגד הארנב באמצעות איזופלוריין בצורה דומה, כפי שתואר לעיל.</li>
	<li>פתח את חלל בית החזה, המתת חסד הארנבים לדימום intracardial.</li>
	<li>לבודד את העורקים. iliac כמתואר ב- 23.
	<ol><li>בקצרה, לפתוח את הבטן ולחשוף את מקבץ. לאתר העורקים לכיוון ההסתעפות iliac ולקשור אותו מעל ההסתעפות. הסר בזהירות את הרקמות הסובבות לחשוף ולבודד את העורקים iliac שני.</li>
	</ol></li> <li>Dissect החוצה שני העורקים iliac, לטבול אותם קפואים פוספט buffered תמיסת מלח. הסר את הקרישים בעזרת מלקחיים. לחלק את העורק iliac כל 4-6 מקטעים כדי לאפיין את עובי הפלקיו לאורך העורק.</li>
	<li>מיד להטביע את מקטעי עורקי בתוך תבנית המכילה טמפרטורה אופטימלית חיתוך במתחם, snap-הקפאה בעזרת חנקן נוזלי ולשמור אותו ב-70 ° C. להכין 5 מיקרומטר עבה למקטעים באמצעות cryostat כמתואר ב- 24-</li>
	היסטולוגיה <li>בצע, immunofluorescence או immunohistochemical מכתים morphometry, פלאק השומנים של תכנים סלולריים כפי שמתואר 10 , 25- 
	הערה: בקצרה, לשטוף את הסעיפים עורקי בתמיסת פוספט buffered (PBS) ו permeabilize באמצעות 0.2% טריטון. לשטוף את הסעיפים עם PBS, לחסום אתרים שאינם ספציפיים עם אלבומין שור 2% במשך 30 דקות Incubate הסעיפים עבור h 1 ב 37 ° C עם אנטי-α-SM אקטין (1:200) או נוגדן RAM11 (1:200). לשטוף את הסעיפים עם PBS, דגירה אותם עם נוגדן המשני המתאים למשך 30 דקות ב- 37 מעלות צלזיוס. לשטוף שוב עם PBS ולהוסיף Hoechst (5 µg/mL) למשך 10 דקות לזהות גרעינים.</li>
</ol>

<ol><li>Mozaffarian, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2015+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 131, e29-e322 (2015).</li>
<li>Boone, L. R., Brooks, P. A., Niesen, M. I., Ness, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+resistance+to+dietary+cholesterol%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipids%22%5BJournal%5D)">Mechanism of resistance to dietary cholesterol.</a> J Lipids. 2011, 101242(2011).</li>
<li>Kapourchali, F. R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24868511">Animal models of atherosclerosis.</a> World J Clin Cases. 2, 126-132 (2014).</li>
<li>Carter, C. P., Howles, P. N., Hui, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+variation+in+cholesterol+absorption+efficiency+among+inbred+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr%22%5BJournal%5D)">Genetic variation in cholesterol absorption efficiency among inbred strains of mice.</a> J Nutr. 127, 1344-1348 (1997).</li>
<li>Kolodgie, F. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypercholesterolemia+in+the+rabbit+induced+by+feeding+graded+amounts+of+low-level+cholesterol.+Methodological+considerations+regarding+individual+variability+in+response+to+dietary+cholesterol+and+development+of+lesion+type%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Hypercholesterolemia in the rabbit induced by feeding graded amounts of low-level cholesterol. Methodological considerations regarding individual variability in response to dietary cholesterol and development of lesion type.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 16, 1454-1464 (1996).</li>
<li>Singh, V., Tiwari, R. L., Dikshit, M., Barthwal, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+to+study+atherosclerosis%3A+a+mechanistic+insight%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Vasc+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Models to study atherosclerosis: a mechanistic insight.</a> Curr Vasc Pharmacol. 7, 75-109 (2009).</li>
<li>Dornas, W. C., Oliveira, T. T., Augusto, L. E., Nagem, T. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20857052">Experimental atherosclerosis in rabbits.</a> Arq Bras Cardiol. 95, 272-278 (2010).</li>
<li>Baumgartner, H. R., Studer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5BEffects+of+vascular+catheterization+in+normo-+and+hypercholesteremic+rabbits%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Pathol+Microbiol+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">[Effects of vascular catheterization in normo- and hypercholesteremic rabbits].</a> Pathol Microbiol (Basel). 29, 393-405 (1966).</li>
<li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+activation+of+vascular+cells+and+leukocytes+in+the+rabbit+aorta+after+balloon+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Sustained activation of vascular cells and leukocytes in the rabbit aorta after balloon injury.</a> Circulation. 88, 1788-1803 (1993).</li>
<li>Phinikaridou, A., Hallock, K. J., Qiao, Y., Hamilton, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+robust+rabbit+model+of+human+atherosclerosis+and+atherothrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">A robust rabbit model of human atherosclerosis and atherothrombosis.</a> J Lipid Res. 50, 787-797 (2009).</li>
<li>Nakazawa, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-eluting+stent+safety%3A+findings+from+preclinical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Cardiovasc+Ther%22%5BJournal%5D)">Drug-eluting stent safety: findings from preclinical studies.</a> Expert Rev Cardiovasc Ther. 6, 1379-1391 (2008).</li>
<li>Aikawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+lowering+by+diet+reduces+matrix+metalloproteinase+activity+and+increases+collagen+content+of+rabbit+atheroma%3A+a+potential+mechanism+of+lesion+stabilization%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Lipid lowering by diet reduces matrix metalloproteinase activity and increases collagen content of rabbit atheroma: a potential mechanism of lesion stabilization.</a> Circulation. 97, 2433-2444 (1998).</li>
<li>Jeanpierre, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+lipid+lowering+modifies+plaque+phenotype+in+rabbit+atheroma+after+angioplasty%3A+a+potential+role+of+tissue+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Dietary lipid lowering modifies plaque phenotype in rabbit atheroma after angioplasty: a potential role of tissue factor.</a> Circulation. 108, 1740-1745 (2003).</li>
<li>Durand, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging+of+ruptured+plaques+in+the+rabbit+with+ultrasmall+superparamagnetic+particles+of+iron+oxide%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Res%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging of ruptured plaques in the rabbit with ultrasmall superparamagnetic particles of iron oxide.</a> J Vasc Res. 44, 119-128 (2007).</li>
<li>Stadius, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+and+cellular+characteristics+of+the+iliac+artery+response+to+acute+balloon+injury.+An+angiographic%2C+morphometric%2C+and+immunocytochemical+analysis+in+the+cholesterol-fed+New+Zealand+white+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb%22%5BJournal%5D)">Time course and cellular characteristics of the iliac artery response to acute balloon injury. An angiographic, morphometric, and immunocytochemical analysis in the cholesterol-fed New Zealand white rabbit.</a> Arterioscler Thromb. 12, 1267-1273 (1992).</li>
<li>Khanna, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol+diet+withdrawal+leads+to+an+initial+plaque+instability+and+subsequent+regression+of+accelerated+iliac+artery+atherosclerosis+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Cholesterol diet withdrawal leads to an initial plaque instability and subsequent regression of accelerated iliac artery atherosclerosis in rabbits.</a> PLoS One. 8, e77037(2013).</li>
<li>Zou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+resveratrol+on+intimal+hyperplasia+after+endothelial+denudation+in+an+experimental+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of resveratrol on intimal hyperplasia after endothelial denudation in an experimental rabbit model.</a> Life Sci. 68, 153-163 (2000).</li>
<li>Li, M., Zhang, Y., Ren, H., Zhang, Y., Zhu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+clopidogrel+on+the+inflammatory+progression+of+early+atherosclerosis+in+rabbits+model%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Effect of clopidogrel on the inflammatory progression of early atherosclerosis in rabbits model.</a> Atherosclerosis. 194, 348-356 (2007).</li>
<li>Nakazawa, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+polymer-based+comparator+drug-eluting+stents+using+a+rabbit+model+of+iliac+artery+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Evaluation of polymer-based comparator drug-eluting stents using a rabbit model of iliac artery atherosclerosis.</a> Circ Cardiovasc Interv. 4, 38-46 (2011).</li>
<li>Van Dyck, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolute+and+Xience+V+polymer-based+drug-eluting+stents+compared+in+an+atherosclerotic+rabbit+double+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Catheter+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Resolute and Xience V polymer-based drug-eluting stents compared in an atherosclerotic rabbit double injury model.</a> Catheter Cardiovasc Interv. 81, E259-E268 (2013).</li>
<li>Abran, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validating+a+bimodal+intravascular+ultrasound+%28IVUS%29+and+near-infrared+fluorescence+%28NIRF%29+catheter+for+atherosclerotic+plaque+detection+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Validating a bimodal intravascular ultrasound (IVUS) and near-infrared fluorescence (NIRF) catheter for atherosclerotic plaque detection in rabbits.</a> Biomed Opt Express. 6, 3989-3999 (2015).</li>
<li>Kanamasa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recombinant+tissue+plasminogen+activator+prevents+intimal+hyperplasia+after+balloon+angioplasty+in+hypercholesterolemic+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+Circ+J%22%5BJournal%5D)">Recombinant tissue plasminogen activator prevents intimal hyperplasia after balloon angioplasty in hypercholesterolemic rabbits.</a> Jpn Circ J. 60, 889-894 (1996).</li>
<li>Pai, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+in-stent+restenosis+in+rabbit+iliac+arteries+with+photodynamic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Vasc+Endovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Inhibition of in-stent restenosis in rabbit iliac arteries with photodynamic therapy.</a> Eur J Vasc Endovasc Surg. 30, 573-581 (2005).</li>
<li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21356883">Cryosectioning tissues.</a> CSH Protoc. 2008, (2008).</li>
<li>Chaytor, A. T., Bakker, L. M., Edwards, D. H., Griffith, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connexin-mimetic+peptides+dissociate+electrotonic+EDHF-type+signalling+via+myoendothelial+and+smooth+muscle+gap+junctions+in+the+rabbit+iliac+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Connexin-mimetic peptides dissociate electrotonic EDHF-type signalling via myoendothelial and smooth muscle gap junctions in the rabbit iliac artery.</a> Br J Pharmacol. 144, 108-114 (2005).</li>
<li>Zhang, W., Trebak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+balloon+injury+and+intraluminal+administration+in+rat+carotid+artery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Vascular balloon injury and intraluminal administration in rat carotid artery.</a> J Vis Exp. (94), (2014).</li>
<li>Maillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+percutaneous+adenovirus-mediated+Gax+gene+delivery+to+the+arterial+wall+in+double-injured+atheromatous+stented+rabbit+iliac+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Effect of percutaneous adenovirus-mediated Gax gene delivery to the arterial wall in double-injured atheromatous stented rabbit iliac arteries.</a> Gene Ther. 7, 1353-1361 (2000).</li>
<li>Sharif, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene-eluting+stents%3A+adenovirus-mediated+delivery+of+eNOS+to+the+blood+vessel+wall+accelerates+re-endothelialization+and+inhibits+restenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene-eluting stents: adenovirus-mediated delivery of eNOS to the blood vessel wall accelerates re-endothelialization and inhibits restenosis.</a> Mol Ther. 16, 1674-1680 (2008).</li>
<li>Lee, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+rabbit+model+for+a+preclinical+comparison+of+coronary+stent+types+in-vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Korean+Circ+J%22%5BJournal%5D)">Development of a rabbit model for a preclinical comparison of coronary stent types in-vivo.</a> Korean Circ J. 43, 713-722 (2013).</li>
<li>Tulis, D. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18287662">Rat carotid artery balloon injury model.</a> Methods Mol Med. 139, 1-30 (2007).</li>
<li>Asada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+inflation+pressure+of+balloon+catheter+on+vascular+injuries+and+subsequent+development+of+intimal+hyperplasia+in+rabbit+aorta%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Effects of inflation pressure of balloon catheter on vascular injuries and subsequent development of intimal hyperplasia in rabbit aorta.</a> Atherosclerosis. 121, 45-53 (1996).</li>
<li>Dornas, W. C., Oliveira, T. T., Augusto, L. E., Nagem, T. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20857052">Experimental atherosclerosis in rabbits.</a> Arq Bras Cardiol. 95, 272-278 (2010).</li>
<li>Waksman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PhotoPoint+photodynamic+therapy+promotes+stabilization+of+atherosclerotic+plaques+and+inhibits+plaque+progression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">PhotoPoint photodynamic therapy promotes stabilization of atherosclerotic plaques and inhibits plaque progression.</a> J Am Coll Cardiol. 52, 1024-1032 (2008).</li>
<li>Fernandez-Parra, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetic+Study+of+Paclitaxel+Concentration+after+Drug-Eluting+Balloon+Angioplasty+in+the+Iliac+Artery+of+Healthy+and+Atherosclerotic+Rabbit+Models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Interv+Radiol%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetic Study of Paclitaxel Concentration after Drug-Eluting Balloon Angioplasty in the Iliac Artery of Healthy and Atherosclerotic Rabbit Models.</a> J Vasc Interv Radiol. 26, 1380-1387 (2015).</li>
<li>Dussault, S., Dhahri, W., Desjarlais, M., Mathieu, R., Rivard, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elsibucol+inhibits+atherosclerosis+following+arterial+injury%3A+multifunctional+effects+on+cholesterol+levels%2C+oxidative+stress+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Elsibucol inhibits atherosclerosis following arterial injury: multifunctional effects on cholesterol levels, oxidative stress and inflammation.</a> Atherosclerosis. 237, 194-199 (2014).</li>
<li>Manderson, J. A., Mosse, P. R., Safstrom, J. A., Young, S. B., Campbell, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Balloon+catheter+injury+to+rabbit+carotid+artery.+I.+Changes+in+smooth+muscle+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%22%5BJournal%5D)">Balloon catheter injury to rabbit carotid artery. I. Changes in smooth muscle phenotype.</a> Arteriosclerosis. 9, 289-298 (1989).</li>
<li>Miyake, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+neointimal+formation+after+angioplasty+using+nuclear+factor-kappaB+decoy+oligodeoxynucleotide-coated+balloon+catheter+in+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Prevention of neointimal formation after angioplasty using nuclear factor-kappaB decoy oligodeoxynucleotide-coated balloon catheter in rabbit model.</a> Circ Cardiovasc Interv. 7, 787-796 (2014).</li>
<li>Fulcher, J., Patel, S., Nicholls, S. J., Bao, S., Celermajer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+coherence+tomography+for+serial+in+vivo+imaging+of+aortic+plaque+in+the+rabbit%3A+a+preliminary+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Heart%22%5BJournal%5D)">Optical coherence tomography for serial in vivo imaging of aortic plaque in the rabbit: a preliminary experience.</a> Open Heart. 2, e000314(2015).</li>
<li>Abela, O. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plaque+Rupture+and+Thrombosis%3A+the+Value+of+the+Atherosclerotic+Rabbit+Model+in+Defining+the+Mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Atheroscler+Rep%22%5BJournal%5D)">Plaque Rupture and Thrombosis: the Value of the Atherosclerotic Rabbit Model in Defining the Mechanism.</a> Curr Atheroscler Rep. 18, 29(2016).</li>
<li>Yamashita, A., Asada, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rabbit+model+of+thrombosis+on+atherosclerotic+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">A rabbit model of thrombosis on atherosclerotic lesions.</a> J Biomed Biotechnol. 2011, 424929(2011).</li>
</ol>

המחברים מצהירים אין אינטרסים כלכליים מתחרים.

המודל של טרשת עורקים עורק iliac ארנב נעשה שימוש נרחב במחקר טרשת עורקים. עם פרוטוקול זה הארנבים התפתחה במהירות הפלאק קשות ומתקדמות יותר לעומת נגעים ספונטנית פיתח עם רק כולסטרול בתזונה. חשוב לציין, חיות להתאושש במהירות הניתוח.
הגירוי העיקריות של atherogenesis היא פגיעה מכנית הקטטר בלון פצעה את אנדותל, מחצה קיר הספינה26. הליך זה גורם לתגובה שיפוץ מאופיין על ידי דלקת עם גיוס מקרופאג והצטברות שומנים בדם כאשר המשויך דיאטה hypercholestorolemic, נדידת תאים השריר החלק בכלי הדם ו...

קרע של פגיעה הפלאק טרשת עורקים הוא אחד הגורמים המובילים. למוות המדינות המתועשות1. למרות מחקר במהלך העשורים האחרונים סעדנו מספר הסלולר המולקולריים המנגנונים המעורבים בהתקדמות פלאק, המשיכו מאמצי עדיין נדרשים לא רק לפענח מנגנון מורכב של התקדמות המחלה, אלא גם כדי לבדוק חדש טיפולית גישות. הוצעו מספר מודלים בבעלי חיים כדי ללמוד על טרשת עורקים. מניפולציה גנטית, כולסטרול האכלה או מכני אנדותל פגיעה הן האסטרטגיות סטנדרטי המשותפים ביותר חייתיים של טרשת עורקים לרבות עכברים, ארנבים או minipigs. בין אלה, NZW ארנבונים רגישים כולסטרול בתזונה בזמן רגיל חולדות ועכברים לא משמעותית לספוג כולסטרול תזונתיים-2,-3,-4. ארנבים לפתח באופן ספונטני אבי העורקים נגעים עשיר מקרופאגים עם רכיבים מסוימים סיבי כאשר נמאס כולסטרול-דיאטה עשירה-5,-6. אולם, הפעם זמן הכנה של 4-8 חודשים כדי לגרום plaquesby טרשת עורקים האכלה כולסטרול דיאטה לבד6,7 הוא חיסרון גדול עבור רוב ההגדרות ניסיוני. במרדף להשראת נגעים בזמן קצר יחסית, שילוב של תזונה כולסטרול גבוה ופציעות בלון פותחה על ידי Baumgarter ו Studer8. המטרה הכוללת של טכניקה זו היא זירוז טרשת עורקים הפלאק מורכב תאי קצף (בדומה פס שומני אצל בני אדם) בארנבים hypercholesterolemic בתוך 2 שבועות. הטכניקה הנוכחי מתאר את ההליך של פגיעה בקיר עורקים מבוסס על השיטה של Baumgarter באמצעות צנתר בלון התקדמו לתוך העורק iliac ארנבים hypercholesterolemic NZW.
יחד עם דיאטה עשירה כולסטרול, פגיעה הנובעת דה-endothelialization בלון המושרה יוביל טרשת עורקים. בלון פציעה מאיצה היווצרות טרשת עורקים, ומייצרת רובד של גודל אחיד והפצה. עיבוי intimal מעלה על פני תקופה של זמן ומתחיל חדירה לתא intimal בתוך כמה ימים בעקבות פגיעה. פסי שומן עם מקרופאגים ניכר מתחילים להופיע לאחר 7-10 ימים של פגיעה בלון, מיוצגים בתור הנגע מסוג II על פי הסיווג על ידי איגוד הלב האמריקאי. בלון פציעה על הארנב מבוצע לעתים קרובות באבי העורקים ללמוד קומפוזיציה פלאק. אנדותל neointimal מבטא רמות גבוהות של מולקולה אדהזיה המערכת. הפלאק משויכות לנתיחה המדיאלי ושינויים adventitial. טרשת עורקים מורכבים שומנים, מתרבים חלק תאי שריר (SMCs), סיבי קולגן ותאים דלקתיים להצטבר מתחת אנדותל regenerated, הם בעיקר מסוג II בטבע. התפלגות טופולוגי של הפלאק הארנב היה דומה לזה דיווח aortas האנושי 9,,10 , באופן עקרוני, אבי העורקים גדולה בהשוואה ל- iliac העורקים יפיק פלאק אורך גדול יותר. עם זאת, היתרון העיקרי של שימוש העורק iliac כמו האתר של טרשת עורקים בארנבים הוא הנגישות שלה, לכימיקל בתוכן שרירי האדם עורקים11, התפתחות הנגע אחיד12, רקמות גבוה גורם פעילות13 וממד כלי עקבי המקבילה האנושית העורק ומאפשר הערכת מיוצרים באופן מסחרי להתקני morphometric ונקודות קצה angiographic. השיטות פולשני ו פולשני נחקרו כדי לנתח את לוחות העורקים iliac ארנב החיה בשידור חי. בדו"חות קודמים לתאר את השימוש תהודה מגנטית הדמיה (MRI) בעזרת מערכת מר טסלה-2.35 14 בנוסף, אולטרסאונד קרישה תוך-כלית (IVUS) או אופטית קוהרנטית טומוגרפיה (אוקטובר) קטטרים יכולים להיות כראוי שהוחלו על התמונה לוחות טרשת עורקים העורקים iliac ארנב. העורק iliac נגיש עבור אולטראסאונד הדמיה בעת שימוש של echography ברזולוציה גבוהה, אבי העורקים ניתן לסייר גם בטכניקה זו.
בעשור האחרון, מודל זה ארנב הפגיעה בלון סייעה עוד יותר להבין את המנגנונים של פלאק התקדמות15ו פלאק רגרסיה16. בנוסף, הדגם שימש כדי לחקור את ההשפעה של הרומן סוכני טיפולית כמו סטטינים, טסיות סטנדרטי, נוגד חמצון סוכנים17,18 ו סטנטים משחררי כגון everolimus או zotarolimus eluting19,סטנט20 על עיבוי neointimal. מודל זה שימש גם לחקור קרישה תוך-כלית הדמיה של זריחה-סגול הדמיה קטטר21.

<table><tbody><tr><td>ניו זילנד ארנבים לבנים מעבדות</td><td>צ'ארלס ריבר, צרפת</td><td>Cre: KBL (NZW)</td><td></td></tr> <tr><td>תזונה עשירה בכולסטרול</td><td>Ssniff spezialdi&auml; עשרה</td><td>Ssniff EF K מעקר-נביט חרוזי זכוכית עתירי שומן וכולסטרול</td><td></td></tr><tr><td>500</td><td>VWR, לסטרשייר, בריטניה</td><td>101326-488</td><td></td></tr><tr><td>קטטרים לכריתת בלון פוגארטי, 2</td><td>צרפתי Edwards Lifesciences, שוויץ</td><td>120602F</td><td>לשימוש חד פעמי בלבד</td></tr><tr><td>Luer Lock מזרק</td><td>Becton, Dickinson and Company, ארה"ב</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Thermopad Type 226</td><td>Solis, Switzerland AG</td><td>397387</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine- Temgesic</td><td>Reckitt Benckiser AG, שוויץ</td><td>7.68042E+12</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Critical Care, Inc, Bethlehem, PA 18017</td><td>2667-46-7</td><td></td></tr><tr><td>מכונת הרדמה-משולב-וטרינר מערכת הרדמה בסיסית</td><td>Rothacher Medical GmbH, שוויץ</td><td>CV 30-301-A</td><td></td></tr><tr><td>מוניטור סימנים חיוניים וטרינריים מגע של Cardell</td><td>מידמרק, אוהיו, ארה"ב</td><td>8013-001</td><td></td></tr><tr><td>משחת עיניים-Humigel</td><td>Virbac, צרפת</td><td></td><td></td></tr><tr><td>קוצץ שיער לבעלי חיים</td><td>Aesculap AG, גרמניה</td><td>GT420</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת חיטוי-בטדין</td><td>MundipharmaMedicalCompany, שוויץ</td><td>14671-1203</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #7 מלקחיים</td><td>FST גרמניה</td><td>11274-20</td><td></td></tr><tr><td>בינוני וקטן מיקרומספריים</td><td>Medline International שוויץ S&agrave; rl</td><td>UC4337</td><td></td></tr><tr><td>מהדקים מיקרו-וסקולריים</td><td>FST, גרמניה</td><td>18051-28</td><td></td></tr><tr><td>פפאברין</td><td>ESCA כימיקלים, שוויץ</td><td>RE 356 803</td><td></td></tr><tr><td>Vein Pick</td><td>Harvard Device, קיימברידג', בריטניה</td><td>72-4169</td><td>לשימוש חד פעמי</td></tr> בלבד <tr><td></td><td>מעבדת מלח ד"ר G. Bichsel AG, , שוויץ</td><td>1330055</td><td></td></tr><tr><td>Polysorb 5-0 תפר</td><td>Covidien AG, שוויץ</td><td>UL 202</td><td>מונופילמנט</td></tr><tr><td>סולפדוקסין וטרימתופרים-טרימתזול</td><td>ורנר סטריקר AG, שוויץ</td><td>Swissmedic Nr. 50'361</td><td></td></tr><tr><td>חיטוי- אוקטניספט</td><td>Sch&uuml; לקה & Mayr AG, שוויץ</td><td>GTIN: 4032651214068</td><td></td></tr><tr><td>פוספט חוצץ</td><td>מי מלח Roth</td><td>1058.1</td><td></td></tr><tr><td>Isobutanol-2-methylbutane</td><td>Sigma-Aldrich, שוויץ</td><td>M32631-1L</td><td></td></tr><tr><td>טמפרטורת חיתוך אופטימלית תרכובת-רקמה-Tek</td><td>VWR כימיקלים, בלגיה</td><td>25608-930</td><td></td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Leica, Glattbrugg, שוויץ</td><td>Leica CM1860 UV</td><td></td></tr><tr><td>שקופית זכוכית- Superfrost Plus</td><td>Thermo Scientific</td><td>4951PLUS4</td><td></td></tr><tr><td>המטוקסילין סיגמא-אולדריץ' של</td><td>מאייר, שוויץ</td><td>MHS32-1L</td><td></td></tr><tr><td>Eosin 0.5% aq.</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>שמן אדום HT110232-1 ליטר</td><td></td></tr><tr><td>O</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>O0625-25G</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-נוגדן אקטין שריר חלק</td><td>Abcam, בריטניה.</td><td>ab7817</td><td></td></tr><tr><td>מקרופאג שיבוט RAM11 נוגדן</td><td>DAKO, שוויץ</td><td>M063301</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst</td><td>Abcam, בריטניה.</td><td>ab145596</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן משני פוליקלונלי עיזים (Chromeo 546)</td><td>Abcam, בריטניה.</td><td>ab60316</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488/547</td><td>Abcam, בריטניה.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מדיום הרכבה של גליצרג'ל, DAKO מימי</td><td>, שוויץ</td><td>C056330</td><td></td></tr><tr><td>המטוקסילין לצביעה של Movat pentachrome</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>H3136-25G</td><td></td></tr><tr><td>כלוריד ברזלי לצביעה של Movat pentachrome</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>157740-100 גרם</td><td></td></tr><tr><td>יוד לצביעה של Movat</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>207772-100G</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן יודיד לצביעת Movat pentachrome</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>60400-100G-F</td><td></td></tr><tr><td>כחול אלצ'יאני לצביעה של Movat</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>A5268-10G</td><td></td></tr><tr><td>אמוניה חזקה לצביעה של Movat pentachrome</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>320145-500 מ"ל</td><td></td></tr><tr><td>קרוצ'ין מבריק MOO לצביעה של Movat pentachrome</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>210757-50G</td><td></td></tr><tr><td>חומצה פוקסין לצביעה של Movat pentachrome</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>F8129-50G</td><td></td></tr><tr><td>נתרן תיוסולפט לצביעה של Movat pentachrome</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>72049-250G</td><td></td></tr><tr><td>חומצה פוספוטונגסטית לצביעה של Movat pentachrome</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>79690-100G</td><td></td></tr><tr><td>קרוצין עבור Movat pentachrome צביעת</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>17304-5G</td><td></td></tr><tr><td>EUKITT לצביעה מחומש של Movat</td><td>סיגמא-אולדריץ', שוויץ</td><td>03989-100 מ"ל</td><td></td></tr></tbody></table>

הדגם הארנב של טרשת עורקים מואצת: מבט מתודולוגי הפגיעה בעורק iliac בלון

The Rabbit Model of Accelerated Atherosclerosis: A Methodological Perspective of the Iliac Artery Balloon Injury

תסמונת כלילית חדה הנובע סגר התקף לב בעקבות התפתחות טרשת עורקים פלאק, הקרע הוא הגורם המוביל למוות בעולם המתועש. ניו זילנד הלבן (NZW) ארנבים נמצאים בשימוש נרחב כמודל בעלי חיים לצורך המחקר של טרשת עורקים. הם לפתח נגעים ספונטנית כאשר נמאס תזונה atherogenic; עם זאת, הדבר דורש זמן רב של 4-8 חודשים. עוד לשפר ולהאיץ atherogenesis, שילוב של דיאטה atherogenic ופציעה אנדותל מכני הוא מועסק לעיתים קרובות. ההליך הציג להשראת הפלאק טרשת עורקים בארנבים משתמש צנתר בלון כדי לשבש את אנדותל בעורק iliac השמאלי של ארנבים NZW נמאס תזונה atherogenic. כזו פגיעה מכנית בבלון הקטטר גורמת שרשרת של תגובות דלקתיות ייזום neointimal הצטברות שומנים בדם באופן תלוי זמן. טרשת עורקים פלאק בעקבות פציעה בלון הצג עיבוי neointimal עם חדירת שומנים נרחב, תוכן תא שריר חלק גבוה ונוכחות של מקרופאג נגזר תאי קצף. טכניקה זו פשוטה, לשחזור ומייצרת רובד של אורך מבוקרת בתוך העורק iliac. כל התהליך הושלם בתוך 20-30 דקות. ההליך הוא בטוח עם התמותה נמוכה וגם מציע הצלחה גבוהים בהשגת נגעים intimal משמעותי. ההליך של בלון קטטר המושרה גורמת פגיעה עורקים טרשת עורקים בתוך שבועיים. מודל זה יכול לשמש עבור חוקרים המחלה פתולוגיה, אבחון והדמיה והערכת אסטרטגיות טיפוליות חדשות.

בלון פציעה של העורק iliac בוצעה בהצלחה ללא סיבוך (איור 1). הזמן פעיל הכולל נע בין 20 ל 30 דקות עבור פציעות הופיעה על ציר iliac אחד בלבד, 35 עד 45 דקות עבור פציעות על שני העורקים. הארנב החלים בתוך 1 h לאחר פציעה בלון. כל בעלי החיים הופיעה בריא ללא ירידה משמעותית במשקל. המערכת נתקלה אין זיהום, קרדיוגני או קריש דם. אזור הפצע היה נורמלי חוץ הפיברוזיס מתון באתר תפר. בעקבות 4-שבועות של דיאטה atherogenic האכלה, ארנבים הציג היפרכולסטרולמיה של 44 ± 18 מ מ/l.
<p cl...

מודלים חייתיים של טרשת עורקים חיוניים כדי להבין את המנגנון וכדי לחקור גישות חדשות כדי למנוע התפתחות פלאק או קרע, סיבת המוות המובילה בעולם המתועש. פרוטוקול זה משתמשת בשילוב של בלון פציעות ותזונה עשירה כולסטרול לזירוז טרשת עורקים הפלאק בעורק iliac ארנב.

הדגם הארנב של טרשת עורקים מואצת: מבט מתודולוגי הפגיעה בעורק Iliac בלון

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא להשרות היווצרות של פלאקים טרשחתיים בארנבים, על ידי פגיעה כירורגית באנדותל של העורקיים האיליאקיים השמאליים והאכלתם בתזונה אטרוגנית. בדרך כלל, פגיעה מבודדת בארנבים מבוצעת באורטה כדי לחקור את הרכב הפלאק. עם זאת, העורקי האיליאקי דומה מאוד לעורקי הכלילי של בני אדם, מה שהופך אותו למקום אטרקטיבי למידול של פלאקים טרשחתיים.התוכן השרירי, הנגעים האחידים, פעילות הגורם ברקמת העין וממדי כלי הדם העקביים של העורק האילי של השפן כולם דומים לעורק כלילי אנושי. בסופו של דבר, הדבר מאפשר להעריך מכשירים המיוצרים מסחרית ביחס לנקודות סיום מורפומטריות ואנגיוגרפיות. את הפרוצדורה ידגים Aurelien Frobert, שותף למחקר מהמעבדה שלי.יש לוודא כי כל כלי הניתוח עוקרו, למשל באמצעות סטריליזטור חרוזי זכוכית. לאחר מכן, הכינו ובדקו את שתי מערכות קטטר הבלון. חברו לכל אחת מהן מזרק Luer lock בנפח 1 mL המלא בתמיסת סלין נורמלית, ולאחר מכן בדקו אם קיימות בועות אוויר כלואות באמצעות מנגנון ניפוח הבלון.בשלב הבא, הגדירו את משטח החום בפלטפורמה הכירורגית ל-37 °C. לאחר מכן שקלו את הארנב. לאחר מכן, הגשו זריקה של buprenorphine והרדימו את הארנב באמצעות 5% isofluorane בקצב של חמישה ליטר לדקה למשך 10 עד 15 דקות.כעת, הנח את הארנב המורדם על משטח חימום על פלטפורמה כירורגית. חבר חיישנים לניטור טמפרטורת הגוף והנשימה של הארנב ולרישום אלקטרוקרדיוגרם. לאחר מכן, חבר מסכת פנים להגשת 4% isofluorane בקצב של 2.5 liters per minute.לאחר מכן, וודאו כי רמת ההרדמה נאותה על ידי בדיקה של אובדן רפלקס הבליעה ורפלקס העפעפיים. טונוס שרירים רפוי באופן גורף מהווה גם הוא אינדיקטור להרדמה עמוקה. לאחר מכן, מרחו משחה אטונית לשתי העיניים.בשלב הבא, הסרו את הפרווה מהאזור הבטני ממש מתחת למפרקי הברכיים באמצעות מכשיר גילוח לבעלי חיים. לאחר מכן, הסירו את הפרווה המשוחררת ונקו את העור החשוף באמצעות שלושה סבבי קרצוף לסירוגין של 70%ethanol ובטדין, וכסו את בעל החיים כך שרק הגפה התחתונה תהיה חשופה. כדי להתחיל בניתוח, איתרו את העורק הספני (saphenous artery) ובצעו חתך של 1.5 סנטימטר.לאחר מכן, בעזרת פינצטה קטנה ומעוקלת, חשוף בזהירות חלק קטן מעורק הספנוס (saphenous artery). הקפד להימנע מפגיעה וריד הפמור (femoral vein) או עצב הפמור (femoral nerve). ניקוי יסודי של העורק במהלך חשיפה זו הוא חשוב מאוד.בשלב הבא, מקמו שתי לולאות קשירה רפואיות (ligature loops) רפואיות רופפות מתחת לעורק הספני (saphenous artery) וקשרו לולאה אחת קרוב לקצה הדיסטלי של העורק. לאחר מכן, מקמו תלקטור מיקרו-וסקולרי (micro vascular clamp) לאורך העורק מעל הקשירה וסגרו את התלקטור כדי לעצור את זרימת הדם. מייד לאחר מכן, מרחו טיפה של papaverine כדי להרחיב את העורק ולמנוע עוויתות של כלי הדם.לאחר מכן, בעזרת הליגטורה, הרימו את העורק הספנוס (saphenous artery) ובצעו חתך ארטריוטומי קטן באמצעות מחט gauge 24. לאחר מכן, הרימו את שולי החתך והחדירו באיטיות פינצטה לוורידים (vein pick) או מחט מנחה לתוך לומן העורק. כעת, החדירו בזהירות קטטר לאמבולקטומיה עורקית לתוך העורק הספנוס.פעלו בעדינות כדי למנוע קרעים. לאחר מכן, הסירו את מחט הווריד ושחררו את התסבך המיקרו-וסקולרי מהעורק. כדי ליצור את הפגיעה, הזיזו תחילה את קטטר הבלון עד לסימון השלישי.פעולה זו אמורה להביא למיקום של כשני עד חמישה סנטימטרים מעל הפיצול האילי (iliac bifurcation). לאחר מכן, נפחו את הבלון עם 0.1 מיליליטר של סליין נורמלי. כעת, סגרו את הקטטר בעזרת תליב (clip) ומשכו אותו חזרה שישה סנטימטרים תוך כדי סיבוב כדי לגרום לנזק לרקמה.לאחר הנסיגה, יש להוציא את האוויר מהבלון. כדי להבטיח התרחבות מלאה של האנדותל, חזור על התהליך פעמיים נוספות. לאחר מכן, הוצא את הקטטר וקשור מיד את לולאת הליגטורה מעל לאתר הארטריוטומיה כדי לעצור את הדימום.בשלב הבא, מרחו חומר חיטוי מתאים מסביב לפתח הפצע ונגבו את קרישי הדם. לבסוף, סגרו את החתך בעור וחטאו את אזור הניתוח באמצעות תמיסת povidone-iodine. לאחר מכן, חזרו על כל ההליך הכירורגי בעורק האיליאקי הנגדי (contralateral iliac artery) באמצעות הקתטר השני.לאחר הניתוח, נקה תחילה את המשחה הבטונית מצדדיו של הארנב. לאחר מכן, ניתן sulfadoxine ו-trimethoprim. לאחר מכן, העבר את הארנב עם רפידת הראש לכלוב התאוששות נקי, והצמד מדבקת ניטור ותפסים.מרגע שהחיה חוזרת למצב של שכיבה חיצונית ומסוגלת ללכת, החזירו אותה לכלוב המגורים שלה. לניהול הכאב, ניתן buprenorphine. כעת, התחילו להזין את החיה בתזונה atherogenic למשך הזמן הדרוש.כדי לקצור פשתן דק מוקדם, שבועיים או ארבעה שבועות לאחר הניתוח, הרדימו תחילה את הארנב ולאחר מכן בצעו לו קטיל (euthanasia) באמצעות חתך בין-לבבי. לאחר מכן, פתחו את הבטן וחשפו את הרטרופריתוניום (המרחב הרטרו-פריטונאלי). לאחר מכן, עקבו אחר האורטה לכיוון ההתפצלות האיליאקית וקשרו אותה מעל ההתפצלות.לאחר מכן, הסיר בזהירות את הרקמות הסובבות ובודד את שני העורקים האיליאקים (iliac arteries). כעת, הוצא את שני העורקים טבע באמצעות דיסקציה ושקוע אותם ב-PBS קר מאוד. שם, הסר את הקרישים באמצעות פינצטה וחלק כל עורק ל-46 מקטעים.לאחר מכן, הטמיעו מיד את המקטעים בתבנית המכילה תרכובת OCT והקפיאו את הרקמות בהקפאה מהירה בחנקן נוזלי. אחסנו את הרקמות בטמפרטורה של 80- מעלות צלזיוס ובהמשך צבעו חתכים בעובי של 5 מיקרון באמצעות מתודולוגיה סטנדרטית. פגיעת בלון בעורקי השילח (iliac arteries) בוצעה בהצלחה ללא סיבוכים בתוך פחות משעה.הארנבבים התאוששו בתוך שעה אחת ו/או נראו בריאים ללא ירידה משמעותית במשקל. לא נצפו סיבוכים לאחר הניתוח. ולאחר ארבעה שבועות של תזונה אתרוגנית, בכל הארנבבים התפתחה היפרכולסטרולמיה.השילוב של פגיעה באמצעות בלון ותזונה עשירה בכולסטרול הוביל לשינויים מבניים בדופן כלי הדם, שהביאו להיווצרות פלאקים אתרוסקלרוטיים תוך שבועיים. עורקים איליאקים ללא פגיעה ועורקים עם פגיעת בלון בודדו מאותה חיה והושוו. הפלאקים אופיינו בחדירת ליפידים וכן בנדידה ובשגשוג של תאי שריר חלק.הפלאק ממשיך לגדול בכלי הדם הפגועים בעוד שגודל הלומן ממשיך להצטמצם. השינויים שהתרחשו היו בולטים מאוד לאחר ארבעה שבועות. לאחר שבועיים וארבעה שבועות, כימות מורפומטרי העלה עלייה בעובי האינטימה-מדיה, עלייה בשטח הפלאק, ירידה בשטח הלומן, ולבסוף עלייה בהצטברות ליפידים.צביעה עם נוגדן ל-alpha smooth muscle actin מגיבה עם אקטין של השריר, ובכך מזהה תאי שריר חלקים כליים. בעוד שצביעה עם נוגדן מונוקלונלי ל-more 11 חושפת את הציטופלזמה של מקפגוים. יחד, הצביעות חושפות את המידה שבה הן תאי שריר חלקים והן מקפגוים שגשגו אל תוך הפלאק האתרוסקלרוטי בכלי הדם הפגועים.לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה טובה בבטיחות עצמית ותוכלו לבצע בקלות פגיעה אלימה בעורקי השן (iliac arteries) של הארנב. פגיעה זו, בשילוב עם תזונה אתרוגנית, מובילה להיווצרות פלאקים בעורקי השן באופן הומוגני לאורך זמן.

the-rabbit-model-accelerated-atherosclerosis-methodological

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו פרט חדש קרוב אינפרא אדום (NIRF) קטטר פלואורסצנציה הדמיה 2 מימדי intravascular מולקולרית של ביולוגיה...

בשנת vivo קרוב אינפרא אדום דימות פלואורסצנטי intravascular (NIRF) מולקולרית של רובד דלקתיות, גישה multimodal כדי הדמיה של טרשת עורקים

וידאו זה מראה שני מודלים של פיתוח פלאק בעורקי intimal עכבריים ומדגיש את ההבדלים בהיפרפלזיה myointimal וטרשת עורקת.

גרימת Myointimal היפרפלזיה נגד טרשת עורקים בעכברים: מבוא של שני מודלים חוקיים

פרוטוקול זה משתמש קטטר בלון כדי לגרום לפציעה intraluminal על העורק הראשי חולדה ולהלן לעורר hyperplasia neointimal. זהו מודל מבוסס היטב לחקר המנגנונים של שיפוץ של כלי דם בתגובה לפציעה. כמו כן הוא משמש באופן נרחב כדי לקבוע את תוקפו של גישות טיפוליות פוטנציאליות.

כלי דם בלון פגיעה וIntraluminal מנהל בעורקי תרדמת העכברוש

מודל הפגיעה בבלון הצוואר של חולדה המתואר להלן מאפשר לחוקרים להעריך תרופות או טיפולים השוללים היפרפלזיה עורקית הנגרמת על ידי פציעה. מתוארים הכנה מפורטת לפני הניתוח, הליך כירורגי וטיפול לאחר ניתוח בבעל החיים.

פציעת בלון עכברוש ראש דגם כדי לבדוק Therapeutics שיפוץ אנטי-וסקולרית

מחקר זה מתאר הליך פולשני עבור אינדוקציה של טרשת עורקים מואצת בעכברים. בהשוואה לשיטות אחרות באמצעות פגיעה חשמלית או הקפאה, פציעה כתוצאה מכני מחקה את המצב האנושי של restenosis לאחר טיפולים revascularization והוא אידיאלי לחקר המנגנונים המולקולריים המעורבים.

אינדוקציה של טרשת עורקים מואצת בעכברים: מודל "פגיעת חוט"

מאמר זה מדגים מודל מאתר ללמוד על התפתחות היפרפלזיה myointimal (MH) לאחר פציעה בלון אבי העורקים.

מבוסס על בלון פציעה לזירוז היפרפלזיה Myointimal באבי העורקים בטן העכבר

אנו מתארים הליך כירורגי המשמש כדי לגרום איסכמיה היקפית בארנבים עם היפרליפידמיה וסוכרת. ניתוח זה משמש כמודל טרום קליני לתנאים המנוסים במחלות עורק היקפי בחולים. אנגיוגרפיה מתואר גם אמצעי כדי למדוד את היקף הוכנסו איסכמיה והתאוששות של perfusion.

המודל הקליני של איסכמיה הגפיים האחוריות בארנבים סוכרתית

הפציעה בבלון עורק התרדמה של החולדה מחקה את הליך האנגיופלסטיקה הקליני המבוצע כדי לשחזר את זרימת הדם בכלי טרשת עורקים. מודל זה גורם לתגובת פגיעה עורקית על ידי התנפצות דופן העורקים, ו denuding את השכבה האינטימית של תאי אנדותל, בסופו של דבר גורם שיפוץ ותגובה היפרפלסטית מולדת.

עכברוש עורק הראש מבוקר לחץ על פגיעה בבלון מגזרי עם יישום טיפולי Periadventitial

פיתוח ובדיקה של מכשירים אנדווסקולריים לטיפול במפרצת תוך גולגולתית הם עדיין בעלי חשיבות רבה. רוב דגמי המפרצת המשמשים כיום מפספסים את המאפיינים החשובים של דופן מנוונת עורקית או את ההמודינמיקה של ביפורקציה אמיתית. לכן, שמנו לנו למטרה לעצב מודל חדש של ביפורקציה של נרתיק עורקי בארנבים.

נרתיק עורקי מיקרו-כירורגי מודל מפרצת ביבכור בארנב

רישום לחץ דם עורקי רציף מאפשר לחקור השפעות של פרמטרים המודינמיים שונים. דו"ח זה מדגים את היישום של ניטור לחץ דם עורקי רציף במודל בעלי חיים גדולים של שבץ איסכמי לקביעת פתופיזיולוגיה של שבץ, השפעה של גורמים המודינמיים שונים והערכת גישות טיפול חדשניות.

ניטור ומודולציה בזמן אמת של לחץ דם במודל ארנב של שבץ איסכמי

יש צורך במודל מתאים של בעלי חיים כדי להבין את המנגנונים הפתולוגיים העומדים בבסיס היצרות מסתם אבי העורקים (AVS) ולהעריך את יעילותן של התערבויות טיפוליות. הפרוטוקול הנוכחי מתאר הליך חדש לפיתוח מודל ארנב AVS באמצעות פגיעה ישירה בבלון in vivo.

מודל היצרות של מסתם אבי העורקים של ארנב הנגרם על ידי פגיעה ישירה בבלון

למדו ליצור מודל טרשת עורקים בארנבים באמצעות פגיעה בלון בעורק ה-Iliac והזנת דיאטה אטרוגנית. שיטה זו מאפשרת חקר פיתוח כתמי שומן ומדידת נקודות קצה מורפומטריות ואנגיוגרפיות בבעלי חיים.

הדגם הארנב של טרשת עורקים מואצת: מבט מתודולוגי הפגיעה בעורק Iliac בלון

גלה סרטונים נוספים