הדגם הארנב של טרשת עורקים מואצת: מבט מתודולוגי הפגיעה בעורק Iliac בלון
October 3rd, 2017
מודלים חייתיים של טרשת עורקים חיוניים כדי להבין את המנגנון וכדי לחקור גישות חדשות כדי למנוע התפתחות פלאק או קרע, סיבת המוות המובילה בעולם המתועש. פרוטוקול זה משתמשת בשילוב של בלון פציעות ותזונה עשירה כולסטרול לזירוז טרשת עורקים הפלאק בעורק iliac ארנב.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לגרום להיווצרות פלאק טרשת עורקים בארנבים על ידי שיבוש כירורגי של האנדותל של עורקי הכסל השמאלי שלהם, והאכלתם בתזונה אטרוגנית. על ידי פציעה בודדת בארנבים מבוצעת לעתים קרובות באבי העורקים כדי לחקור את הרכב הפלאק. עם זאת, עורק הכסל דומה מאוד לעורק הכלילי האנושי, מה שהופך אותו למקום אטרקטיבי לדוגמנות פלאק טרשת עורקים.
תכולת השרירים, הנגעים האחידים, פעילות גורם רקמת העין וממדי כלי הדם העקביים של עורק הכסל הארנב דומים כולם לעורק הכלילי האנושי. בסופו של דבר, זה מאפשר הערכה של מכשירים המיוצרים באופן מסחרי לנקודות קצה מורפומטריות ואנגיוגרפיות. מי שתדגים את ההליך תהיה אורליאן פרוברט, משתפת פעולה מהמעבדה שלי.
הקפד לעקר את כל כלי הניתוח באמצעות, למשל, מעקר חרוזי זכוכית. לאחר מכן, הכן ובדוק את שני מכלולי צנתר הבלון. על כל אחד מהם, חבר מזרק נעילת Luer בנפח מיליליטר אחד מלא במי מלח רגילים, ולאחר מכן בדוק אם יש סמלים לכודים באמצעות מנגנון הניפוח של הבלון.
לאחר מכן, הגדר את הרפידה התרמית בפלטפורמת הניתוח ל-37 מעלות צלזיוס. ואז שקלו את הארנב. לאחר מכן, ספקו זריקה של בופרנורפין והרדימו את הארנב באמצעות איזופלואורן 5% בחמישה ליטר לדקה למשך 10 עד 15 דקות.
כעת, הניחו את הארנב המורדם על כרית החימום על משטח כירורגי. חבר חיישנים כדי לנטר את הטמפרטורה והנשימה של הארנב ולאסוף אלקטרוקרדיוגרמות. לאחר מכן, צרף מסכת פנים כדי לספק 4% איזופלואורן ב-2.5 ליטר לדקה.
לאחר מכן ודא רמת הרדמה נכונה על ידי בדיקת אובדן של הקאה ורפלקסים קטנוניים. טונוס שרירים רגוע אוניברסלי הוא גם אינדיקטור להרדמה עמוקה. לאחר מכן, יש למרוח משחה אבטונית על שתי העיניים.
לאחר מכן, הסר את השיער מאזור הגחון ממש מתחת למפרקי הברכיים באמצעות קוצץ שיער של בעלי חיים. לאחר מכן, הסירו את השיער הרופף ונקו את העור החשוף עם שלושה קרצוף לסירוגין של 70% אתנול ובטדין ועטפו את החיה והשאירו רק את הגפה התחתונה חשופה. כדי להתחיל בניתוח יש לאתר את עורק הספנוס ולבצע חתך של 1.5 סנטימטר.
לאחר מכן באמצעות מלקחיים קטנים ומעוקלים חושפים בזהירות חלק קטן מעורק הספנוס. היזהר להימנע מפגיעה בווריד הירך או בעצב הירך. ניקוי יסודי של העורק חשוב מאוד במהלך חשיפה זו.
לאחר מכן, הנח שתי לולאות קשירה רופפות מתחת לעורק הספנוס וקשר לולאת קשירה אחת ליד הקצה הדיסטלי של העורק. לאחר מכן הנח מהדק מיקרו-וסקולרי לאורך העורק מעל הקשירה וסגור את המהדק כדי לעצור את זרימת הדם. מרחו מיד טיפת פפברין כדי להרחיב את העורק ולמנוע התכווצויות פאזה.
לאחר מכן, בעזרת הקשירה, הרם את עורק הספנוס ובצע חתך קטן לכריתת עורקים באמצעות מחט בגודל 24. לאחר מכן הרם את דשי החתך והכנס לאט קיסם ורידים או מחט מנחה ללומן העורק. כעת, הכנס בזהירות קטטר לכריתת תסחיף עורקי לעורק הספנוס.
היו עדינים כדי להימנע מיצירת קרעים. לאחר מכן הסר את קוטף הוורידים ושחרר את מהדק המיקרו וסקולרי על העורק. כדי ליצור את הפציעה, יש לקדם תחילה את צנתר הבלון לסימון השלישי.
זה אמור לשים בערך שניים עד חמישה סנטימטרים מעל התפצלות הכסל. לאחר מכן, נפחו את הבלון ב 0.1 מיליליטר מי מלח רגילים. כעת, הצמד את הקטטר ומשוך אותו לאחור שישה סנטימטרים תוך כדי סיבובו כדי לפגוע ברקמה.
לאחר הנסיגה, רוקנו את הבלון. וכדי להבטיח הרחבה מלאה של האנדותל, חזור על התהליך פעמיים נוספות. לאחר מכן הסר את הקטטר וקשר מיד את לולאת הקשירה ממש מעל אתר כריתת העורקים כדי לעצור את הדימום.
לאחר מכן, יש למרוח חומר חיטוי מתאים סביב ניקוב הפצע ולנגב את קרישי הדם. לבסוף, סגור את חתך העור וחטא את מקום הניתוח בתמיסת פובידון-יוד. לאחר מכן חזור על כל ההליך הכירורגי על עורק הכסל הנגדי באמצעות הצנתר השני.
לאחר הניתוח יש לנקות תחילה את המשחה האבטונית מצידי הארנב. לאחר מכן יש לתת סולפדוקסין וטרימתופרים. לאחר מכן העבירו את הארנב עם כרית הכותרת לכלוב התאוששות נקי ומדבקת ניטור וקליפסים.
ברגע שהחיה חוזרת לשכיבה חיצונית ומסתובבת, החזירו אותה לכלוב הביתי שלה. לטיפול בכאב, יש לספק בופרנורפין. כעת, התחל להאכיל את החיה בתזונה אטרוגנית כל עוד יש צורך.
כדי לקצור פשתן דק מוקדם, שבועיים או ארבעה שבועות לאחר הניתוח, תחילה יש להרדים את הארנב ולאחר מכן להמית את הארנב עם חתך בין-קרדינלי. לאחר מכן, פתח את הבטן וחשוף את הרטרופריטונאום. לאחר מכן עקבו אחר אבי העורקים לכיוון התפצלות הכסל וקשרו אותו מעל ההתפצלות.
לאחר מכן הסירו בזהירות את הרקמות שמסביב ובודדו את שני עורקי הכסל. כעת נתחו את שני העורקים וטבלו אותם ב-PBS קר כקרח. שם מסירים את הקרישים באמצעות מלקחיים ומחלקים כל עורק ל-46 מקטעים.
לאחר מכן הטמיעו מיד את הקטעים בתבנית המכילה תרכובת OCT והצמידו רקמות הקפאה בחנקן נוזלי. אחסן את הרקמות במינוס 80 מעלות צלזיוס ולאחר מכן צבע חלקים בעובי חמישה מיקרון במתודולוגיה סטנדרטית. פגיעה בבלון של עורקי הכסל בוצעה בהצלחה ללא סיבוכים תוך פחות משעה.
הארנב התאושש תוך שעה ו/או נראה בריא ללא ירידה משמעותית במשקל. לא נתקלו בסיבוכים לאחר הניתוח. ואחרי ארבעה שבועות של דיאטה אטרוגנית, כל הארנבים סבלו מהיפרכולסטרולמיה.
השילוב של פגיעה בבלון ודיאטת הכולסטרול הביא לשינויים מבניים בדופן כלי הדם שהובילו להתפתחות פלקס עורקים תוך שבועיים. עורקי הכסל שלא נפגעו ופגועי בלון בודדו מאותה חיה והושוו. פשתן התאפיין בחדירת שומנים כמו גם בנדידת רעש של שרירים חלקים והתפשטות.
הפשתן ממשיך לגדול בכלי הדם הפגועים בעוד שגודל הלומן ממשיך להתכווץ. השינויים שהתקבלו היו בולטים מאוד בארבעה שבועות. לאחר שבועיים וארבעה שבועות, כימות מורפומטרי חשף עובי אינטימה מדיה מוגבר, שטח פלאק מוגבר, שטח לומן מופחת, ולבסוף עלייה בהצטברות שומנים.
צביעה עם אנטי גוף אקטין שריר חלק אלפא מגיב עם אקטין שריר, ובכך מזהה תאי שריר חלק בכלי הדם. בעוד שצביעה עם יותר מ-11 נוגדנים חד-שלווניים חושפת את הציטופלזמה של מקרופאגים. יחד הכתמים חושפים את המידה שבה גם תאי שריר חלק וגם מקרופאגים מתרבים לרובד טרשת עורקים בכלי הדם הפגועים.
לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להיות בעל הבנה טובה של בטיחות רכב ולבצע בקלות פציעה אלימה בעורקי הכסל של הארנב. פגיעה זו בתזונה אטרוגנית גורמת להתפתחות הפלאק של עורקי הכסל בצורה הומוגנית בזמן.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
סקירה
הפרוטוקול מתאר שיטה לגרימת לוחות טרשת עורקים בארנבים על ידי שיבוש כירורגי של האנדותל של עורקי הירך השמאליים שלהם והזנתם בתזונה אטרוגנית. עורק הירך נבחר בשל הדמיון שלו לעורק הכלילי האנושי, מה שהופך אותו למודל רלוונטי לחקר התפתחות לוחות.
רכיבי מחקר מרכזיים
תחום המדע
- טרשת עורקים
- מודלי בעלי חיים
- מחקר קרדיווסקולרי
רקע
- טרשת עורקים היא אחת הסיבות המובילות למוות במדינות מתועשות.
- הבנת היווצרות לוחות היא קריטית לפיתוח אסטרטגיות מניעה.
- עורק הירך של הארנב משמש כמודל מתאים בשל הדמיון האנטומי שלו לעורקים כליליים אנושיים.
- מחקר זה נועד להעריך את ההשפעות של טרשת עורקים מיוחדת על נקודות סיום שונות.
מטרת המחקר
- להשרת לוחות טרשת עורקים בארנבים למטרות מחקר.
- לחקור את המנגנונים של התפתחות ושבירת לוחות.
- להעריך את היעילות של מכשירים והתערבויות טיפוליות חדשות.
שיטות ששימשו
- שיבוש כירורגי של האנדותל בעורק הירך השמאלי.
- הזנת ארנבים בתזונה אטרוגנית לקידום היווצרות לוחות.
- השוואה של הרכב הלוחות בעורק הירך לזה בעורק האבי העורקי.
- הערכת נקודות סיום מורפומטריות ואנגיוגרפיות באמצעות מכשירים מסחריים.
תוצאות עיקריות
- גרימה מוצלחת של לוחות טרשת עורקים במודל הארנב.
- הדגמת הנוהל על ידי Aurelien Frobert.
- השוואה של מאפייני הלוחות בין עורקי הירך והאבי העורק.
- תובנות לגבי הפוטנציאל להתערבויות טיפוליות בטרשת עורקים.
מסקנות
- עורק הירך של הארנב הוא מודל חשוב לחקר טרשת עורקים.
- שיטה זו יכולה לסייע בהערכת טיפולים חדשים לניהול לוחות.
- יש צורך במחקר נוסף כדי לחקור את ההשלכות של ממצאים אלו.
