Name: עירוי צינור הלבלב: שיטה יעילה וסלקטיבית של סמים ומשלוח ויראלי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 3 s
Description: למד שיטת עירוי צינור הלבלב לחקירת מחלות הלבלב כמו דלקת כרונית, סוכרת וסרטן הלבלב. השיטה מאפשרת מעקב שושלתי, הכנסת גנים ומיקוד סלקטיבי בתאי לבלב בעכברים מוחדרים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

למחברים אין הכרות. המימון התקבל מהוועדה לבריאות ולתכנון המשפחה של מחוז ג'ה-ג'יאנג (מענק 20146242) ומקרן הלשכה למדע וטכנולוגיה של וונג'ואו (מענק Y20140248).

כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לחקר וטיפול בבעלי חיים בבית החולים לילדים של פיטסבורג ובאוניברסיטת פיטסבורג מוסדית לטיפול בבעלי חיים והוועדה לטיפול ושימוש.
1. הכנה טרום הניתוחית
<ol><li>יש לנהל איזופלוראן בשאיפה (1 - 3% לתחזוקה ועד 5% לאינדוקציה) באמצעות חרוט אף לרמת הרדמה מתאימה. לפקח על ההוות של הרדמה על ידי צביטת בוהן עם מלקחיים. היעדר תגובה נחשב הולם, והקפידו לא לקחת יתר על המידה, שכן עלול להתרחש דיכאון נשימתי.</li>
	<li>מניחים את החיה על גבו על במת המיקרוסקופ הניתוח, כאשר הבטן מרוכזת לאור המטרה. לשתק את החיה עם סרט ניתוחי. יש למרוח משחה עיניים על עיני החיה כדי למנוע יובש בזמן הרדמה.</li>
	<li>יש למרוח שכבה חלקה ועבה של קרם להסרת שיער ולהשאיר אותו במקומו למשך 3 דקות. בדוק אזור קטן להסרת שיער. יש לנגב בעדינות את השמנת והשיער עם גזה ספוגה באתנול ב-70%.</li>
	<li>יש לנקות ולחטא את בטנו של החיה על ידי ניגובה עם גזה ספוגה באתנול 70% ואחריה גזה ספוגה בטדין. לשמור על תנאים סטריליים לאורך כל ההליך הכירורגי.</li>
</ol>2. חשיפה נכונה
<ol><li>לעשות חתוך קו האמצע בעור מתהליך xyphoid אל הטבור באמצעות אזמל. הרם את צפק עם מלקחיים אדסון ולעשות חור קטן בקו האמצע באמצעות מספריים.</li>
	<li>להרחיב את החתיכה צפק לאורך חתכת העור, דואג להישאר על קו האמצע (לינאה אלבה). הערה: זה ייצור לפרוסטומיה בטן קו האמצע העליון.</li>
	<li>להעלות את הכבד עם מפסקים קהים כדי לחשוף את צינור המרה המשותף. מהדק את צינור המרה המשותף עם מלחצי כלי דם בולדוג מעוקלים. הערה: תמרון זה מונע עירוי לא רצוי לתוך הכבד.</li>
</ol>3. זיהוי של פפילה הלבלב ותריסאודנוטומיה
<ol><li>זהה את התריסריון, ועם מלקחיים Arruga, לחזור בו בקול רם כדי להציג את הפפילה. הערה: הפפילה היא נקודה לבנה על המשטח החלק החלקי של החלק השני של התריסריון.</li>
	<li>לסגת התריסריון cauddenum caudally, המאפשר זיהוי של מהלך צינור הלבלב. עם מחט 301/2-מד, לנקב את הקיר של התריסריון משיק, ישירות מול הפפילה. הערה: המחט צריכה לעקוב אחר אותה זווית כמו הצינור כפי שהוא נכנס התריסריון.</li>
</ol>4. עירוי.
<ol><li>מעבירים את הצנתר דרך התריסריון שנוצר בשלב 3.2 עד שהקטטר נראה בתוך הצינור. לקדם את הקטטר לתוך הצינור לא יותר מ 1 ס"מ כדי למנוע את המעקף של יובלים דביקים קטנים.</li>
	<li>מהדקים את הצנתר במקום עם מהדק כלי דם בולדוג מעוקל שני. הפעל את המשאבה והחדיר את עוצמת הקול שנבחרה. נפח חדורים עשוי לנוע בין 25 - 250 μL, עם נפח אידיאלי של כ 150 μL.</li>
	<li>לנהל הזרקה תוך-איפריטונית של כ 1.5 מ"ל של מלוחים כדי לקזז הפסדים. לכסות את המעי החשוף עם גזה לחה כדי למנוע ייבוש.</li>
	<li>בסיום העירוי, להסיר את מלחצי הבולדוג שהחזיק את הקטטר במקום. השתמש מהדק הבולדוג כדי להסיר בעדינות את הצנתר מצינור הלבלב. שחררו את המלחציים מצינור המרה המשותף.</li>
	<li>סוגרים את צפק ואת העור בשכבות אחת או שתיים באמצעות תפוי פועל. הערה: אין צורך לסגור את התריסריון, שכן הוא ייאטם בכוחות עצמו.</li>
	<li>כמו מכאלגזיה לאחר הניתוח, לנהל מנה של קטופן ב 5 מ"ג/ קילוגרם במהלך ההליך ואחד למחרת.</li>
	<li>החזר את העכבר לכלוב שלו תחת מנורת חום עד שהוא מתאושש. ספק לעכבר מזון ומים ad libitum.</li>
	<li>אין להשאיר את החיה ללא השגחה עד שהיא תחזור להכרה מספקת כדי לשמור על נסיגה ב לעצם החזה. אין להחזיר בעל חיים שעבר ניתוח לחברה של בעלי חיים אחרים עד להחלמתו המלאה.</li>
</ol>5. הכנת מדגם
<ol><li>מניחים את החיה בתא דו תחמוצת הפחמן או לבצע נקע צוואר הרחם.</li>
	<li>קצירת הלבלב, עם הטחול, הכבד והתריסריון כבקרות. לתקן את הרקמות paraformaldehyde לילה ב 4 °C (50 °F). Cryoprotect המדגם ב 30% סוכרוז לילה, כפי שתואר בעבר6.</li>
	<li>הצמד-להקפיא את הדגימות. חלק את הרקמה בעובי של 6 מיקרומטר באמצעות microtome. בצע הדמיה על מיקרוסקופ עם הדמיית פלואורסצנטיות, כפי שתואר בעבר7.</li>
</ol>

<ol><li>Gittes, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+biology+of+the+pancreas%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Developmental biology of the pancreas: a comprehensive review.</a> Dev Biol. 326 (1), 4-35 (2009).</li>
<li>Gu, G., Dubauskaite, J., Melton, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+evidence+for+the+pancreatic+lineage%3A+NGN3%2B+cells+are+islet+progenitors+and+are+distinct+from+duct+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Direct evidence for the pancreatic lineage: NGN3+ cells are islet progenitors and are distinct from duct progenitors.</a> Development. 129 (10), 2447-2457 (2002).</li>
<li>Weinberg, N., Ouziel-Yahalom, L., Knoller, S., Efrat, S., Dor, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lineage+tracing+evidence+for+in+vitro+dedifferentiation+but+rare+proliferation+of+mouse+pancreatic+beta-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Lineage tracing evidence for in vitro dedifferentiation but rare proliferation of mouse pancreatic beta-cells.</a> Diabetes. 56 (5), 1299-1304 (2007).</li>
<li>Raper, S. E., DeMatteo, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenovirus-mediated+in+vivo+gene+transfer+and+expression+in+normal+rat+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">Adenovirus-mediated in vivo gene transfer and expression in normal rat pancreas.</a> Pancreas. 12 (4), 401-410 (1996).</li>
<li>Xiao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+cell+tracing%2C+lineage+tagging+and+targeted+genetic+manipulations+in+multiple+cell+types+using+pancreatic+ductal+infusion+of+adeno-associated+viral+vectors+and%2For+cell-tagging+dyes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Pancreatic cell tracing, lineage tagging and targeted genetic manipulations in multiple cell types using pancreatic ductal infusion of adeno-associated viral vectors and/or cell-tagging dyes.</a> Nat Protoc. 9 (12), 2719-2724 (2014).</li>
<li>Song, Z., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27587395">EGFR signaling regulates beta cell proliferation in adult mice.</a> J Biol Chem. 291 (43), (2016).</li>
<li>Xiao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((M2+macrophages+promote+beta-cell+proliferation+by+up-regulation+of+SMAD7%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">M2 macrophages promote beta-cell proliferation by up-regulation of SMAD7.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (13), E1211-E1220 (2014).</li>
<li>Laukkarinen, J. M., Van Acker, G. J., Weiss, E. R., Steer, M. L., Perides, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+acute+biliary+pancreatitis+induced+by+retrograde+pancreatic+duct+infusion+of+Na-taurocholate%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">A mouse model of acute biliary pancreatitis induced by retrograde pancreatic duct infusion of Na-taurocholate.</a> Gut. 56 (11), 1590-1598 (2007).</li>
<li>Lichtenstein, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10834702">Acute lung injury in two experimental models of acute pancreatitis: infusion of saline or sodium taurocholate into the pancreatic duct.</a> Crit Care Med. 28 (5), 1497-1502 (2000).</li>
<li>Perides, G., van Acker, G. J., Laukkarinen, J. M., Steer, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+acute+biliary+pancreatitis+induced+by+retrograde+infusion+of+bile+acids+into+the+mouse+pancreatic+duct%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Experimental acute biliary pancreatitis induced by retrograde infusion of bile acids into the mouse pancreatic duct.</a> Nat Protoc. 5 (2), 335-341 (2010).</li>
<li>Guo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+transduction+and+labeling+of+pancreatic+ducts+by+targeted+recombinant+viral+infusion+into+mouse+pancreatic+ducts%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Specific transduction and labeling of pancreatic ducts by targeted recombinant viral infusion into mouse pancreatic ducts.</a> Lab Invest. 93 (11), 1241-1253 (2013).</li>
<li>Xiao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurogenin3+activation+is+not+sufficient+to+direct+duct-to-beta+cell+transdifferentiation+in+the+adult+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Neurogenin3 activation is not sufficient to direct duct-to-beta cell transdifferentiation in the adult pancreas.</a> J Biol Chem. 288 (35), 25297-25308 (2013).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

עבודה זו מתארת בפירוט את המתודולוגיה שמאחורי עירוי צינור הלבלב, מודל עכבר יעיל להעברת גנים ומולקולות אחרות באופן ספציפי ויעיל ללבלב. עמימות בפרטי ההליך בין קבוצות שונות הדגישה את הצורך בפרוטוקול סטנדרטי8,9,10.
ישנם מספר שלבים קריטיים של ההליך, החל בבחירת עכברים צעירים ובריאים. ניקוב התריסריון, קטן ומבוקר ככל שיהיה, הוא אירוע טראומטי בעכבר, שללא ספק מוביל לגיוס ציטוקינים דלקתיים וגורמים אחרים שלא התאפי...

הלבלב הוא איבר בימפונקציוני, עם מרכיבים אנדוקריניים ואקסוקריניים כאחד. מספר פתולוגיות יכולות לייעל את הלבלב, כולל סוכרת, דלקת לבלב וסרטן הלבלב1. כל שלוש המחלות הללו מסמנות תחומי מחקר פעילים, לא רק כדי לפתח טיפול מיידי, אלא גם כדי להבין טוב יותר את הפתופיזיולוגיה שלהם.
שיטת משלוח טיפולי ממוקדת תועיל. פיתחנו טכניקת עירוי צינור הלבלב כי היא שיטה יעילה סלקטיבית עבור משלוח סמים ויראלי לתאי הלבלב. במודל זה, צינור הלבלב הוא cannulated באופן סלקטיבי, ואת צינור המרה הנפוצה הוא נאטם, המאפשר משלוח אך ורק ללבלב.
טכניקה זו יכולה לאפשר מעקב שושלת של סוגי תאים ספציפיים כדי לפרט עוד יותר את המסלולים ההתפתחותיים החשובים להתפתחות הלבלב ופתולוגיה2,3. מקדמים שונים בווקטורים ויראליים מאפשרים פילוח ספציפי של קווי תאים ולהכנסת גנים לקווי תאים אלה4,5. עבודה זו מדגימה את הביטוי של חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) בתוך הלבלב לאחר עירוי צינור הלבלב של וקטור ויראלי המבטא GFP לעומת ניתוח מזויף.

<table><tbody><tr><td>עכברים (25 - 30 גרם, בני 8-12 שבועות)</td>מעבדת <td></td><td></td><td>ג'קסון</td></tr><tr><td>Ketofen</td><td>Henry Schein Inc.</td><td>5487</td><td></td></tr><tr><td>אתנול (70%)</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>34923</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת מלח סטרילית</td><td>בקסטר Healthcare Corp.</td><td>2B-13-00</td><td></td></tr><tr><td>ציוד</td><td></td><td></td><td></td>מגן</tr><tr><td>מוצר</td><td></td><td></td> להסרת שיער <td>Nair או גוזם</td></tr><tr><td>רפידות גזה 2 אינץ' x 2 אינץ'</td><td>Fisher Healthcare</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>מחטים (30.5 גרם ו- 25 גרם)</td> <td>בקטון דיקסינסון ושות'</td><td>305106 ומזרק 305122</td><td></td></tr><tr><td>לקטופן ומלח</td><td>בקטון דיקסינסון ושות'.</td><td></td><td>מזרק 309657</td></tr><tr><td>למשאבה</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>4010.200V0</td><td></td></tr><tr><td>משאבת עירוי</td><td>מערכות משאבות בע"מ</td><td>NE-1000</td><td></td></tr><tr><td>אינפוזיה קטטר</td><td>World Precision Instruments</td><td>CMF31G</td><td></td></tr><tr><td>מהדקי בולדוג מעוקלים (2)</td><td>Roboz</td><td>RS-7439</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים ארוגה</td><td>Roboz</td><td>RS-5163</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים אדסון</td><td>Roboz</td><td>RS-5234</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>Roboz</td><td>RS-7882</td><td></td></tr><tr><td>מספריים</td><td>Roboz</td><td>RS-5982</td><td></td></tr><tr><td>יישומי קצה כותנה</td><td>מכירות ושירותי רופא</td><td>22-9988</td><td></td></tr> ניתוח תפר <tr><td>מיקרוסקופ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>אוונס ומינור</td><td>SXMD1B402</td><td></td></tr></tbody></table>

עירוי צינור הלבלב: שיטה יעילה וסלקטיבית של סמים ומשלוח ויראלי

Pancreatic Duct Infusion: An Effective and Selective Method of Drug and Viral Delivery

הלבלב הוא איבר ביפון עם מרכיבים אנדוקריניים ואקסוקריניים כאחד. מספר פתולוגיות עלולות להכאיב ללבלב, כולל סוכרת, דלקת לבלב וסרטן הלבלב. כל שלוש המחלות הללו מסמנות תחומי מחקר פעילים, לא רק כדי לפתח טיפול מיידי, אלא גם כדי להבין טוב יותר את הפתופיזיולוגיה שלהם. ישנם מעט כלים לקידום תחומי לימוד אלה. עירוי צינור הלבלב היא טכניקה חשובה שיכולה לאפשר מעקב אחר שושלת, הקדמת גנים, פילוח ספציפי לקו התא. הטכניקה דורשת את הניתוח המורכב של החלק השני של התריסריון והאמפולה, ואחריו החסם של צינור המרה ואת cannulation של צינור הלבלב. למרות הטכניקה היא מבחינה טכנית מאתגר בהתחלה, היישומים הם רבים. העמימות בפרטי ההליך בין הקבוצות הדגישה את הצורך בפרוטוקול סטנדרטי. עבודה זו מתארת את הביטוי של חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) בתוך הלבלב לאחר עירוי צינור הלבלב של וקטור ויראלי המבטא GFP לעומת ניתוח מזויף. עירוי ולכן הביטוי הוא ספציפי ללבלב, ללא ביטוי נוכח בכל סוג רקמה אחר.

עם תרגול וטכניקה כירורגית זהירה, שיעור ההישרדות של עכברים אלה צריך להיות גדול מ 95%. שבוע לאחר עירוי, ההשפעה הרצויה צריכה להיות ניכרת בלבלב. עכברים בגיל 10 עד 12 שבועות נוצלו עבור חליטות צינור הלבלב. כאן אנו משתמשים בסרוטיפ וירוסים הקשורים לאדנו 8 (AAV8) עם מקדם CMV כדי לבטא חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP), בהשוואה לניתוח מזויף. לבלב עכברים נקצר 7 ימים לאחר חליטות. חלקים מהלבלב, הטחול והתריסריון הוכתמו בנוגדן אינסולין ובהושט. איור 1 מראה כי יש ביטוי נרחב של GFP ...

עירוי צינור הלבלב היא טכניקה חשובה שיכולה לאפשר מעקב אחר שושלת, הקדמת גנים, פילוח ספציפי לקו התא. טכניקת עירוי צינור הלבלב עבור משלוח סמים ויראלי לתאי הלבלב מוצג כאן.

The pancreas is a bifunctional organ with both endocrine and exocrine components. A number of pathologies can afflict the pancreas, including diabetes, ...

המטרה הכוללת של הליך עירוי צינור הלבלב הזה היא לאפשר מעקב אחר שושלת היוחסין, הקדמת גנים, פילוח ספציפי לקו התאים בלבלב. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מרכזיות לגבי מחלות המשפיעות על הלבלב, כולל דלקת לבלב כרונית, סוכרת וסרטן הלבלב. כדי להתחיל, הנח עכבר מרדים מתחת למיקרוסקופ מנתח כך שהבטן שלו ממוקמת במרכז שדה הראייה.לשתק את החיה עם סרט כירורגי ולאחר מכן להחיל משחה עיניים על עיניה כדי למנוע מהם להתייבש. לאחר מכן, לכסות את הבטן של העכבר עם שכבה עבה של קרם להסרת שיער. ואחרי כשלוש דקות, בעדינות לנגב את השמנת עם גזה ספוג 70% אתנול כדי להסיר את כל השיער.לבסוף, לנגב את העור עם 70%אתנול, ואחריו 10% פתרון יודיד פוידון כדי להסיר את כל המזהמים ולחטא את העור. כדי להתחיל את הניתוח, ליצור עם אזמל חנק עור קו האמצע המשתרע מתהליך xiphoid אל הטבור. לאחר מכן באמצעות מלקחיים אדסון, להרים את צפק ולהפוך עם מספריים חור קו האמצע קטן.להרחיב את החתך לאורך קו האמצע של צפק, כך אורך זהה לאורך של חתך העור. לאחר מכן, השתמש במפזרים קהים כדי למשוך את הכבד ולאחר חשיפת צינור המרה המשותף, מהדק אותו עם מהדק כלי דם בולדוג מעוקל. זהה את התריסריון ועם מלקחיים של ארוגה, שלף אותו החוצה בקדמת בטן כדי להציג את הפפילה הנראית כנקודה לבנה על פני השטח החיצוניים של החלק השני של התריסריון.כדי לזהות את צינור הלבלב, למשוך את התריסריון caudly, ולאחר מכן למקם מחט 30-1/5 מד משיק לתריסריון ולעשות נקב על הקיר שלה ישירות מול הפפילה. כדי להחדיר את הפתרון, להציג את הקטטר מחובר משאבת עירוי דרך התריסריון שנוצר ולהחליק אותו לאורך הצינור עד שהוא גלוי בתוך כלי השיט, אבל מגיע לא יותר מסנטימטר אחד כדי למנוע עקיפת יובלים דביקים קלים. לשתק את הקטטר על ידי הידוק אותו עם מהדק כלי דם בולדוג מעוקל שני.ואז להפעיל את המשאבה כדי ליזום את עירוי של 150 microliters של הפתרון לתוך הצינור. לאחר מכן, להזריק הצפק של העכבר כ 1.5 מיליליטר של תמיסת מלח כדי למנוע כל אובדן של נפח חדורים ולאחר מכן לכסות את המעי החשוף עם גזה לחה כדי למנוע התפלה. לאחר השלמת העירוי, לשחרר את הצנתר משותק באמצעות מהדק בולדוג, בעדינות להסיר אותו מצינור הלבלב.ואז לשחרר את המהדק מצינור המרה המשותף. סגור את צפק ואת העור על ידי תפירה רציפה אותם בשכבה אחת ולנהל את הראשון מבין שתי מנות של משכך משכך, השני מהם יינתן למחרת. לאחר מכן להחזיר את העכבר לכלוב ממוקם תחת מנורת חום ולספק את החיה עם מזון ומים ad libitum.התבונן בעכבר עד שהוא חזר להכרה מספקת המתבטאת בנסיגה חמורה. שבעה ימים לאחר הניתוח, הבלו מהלבלב החי המתת וכן מטחול, כבד ותריסריון המשמשים כפקדים. לטבול את כל הרקמות המבודדות בתמיסה paraformaldehyde 4% ולתקן אותם בארבע מעלות צלזיוס לילה.לאחר הרקמות קבועות, קריו להגן על הדגימות על ידי השריית אותם בתמיסת 30% סוכרוז בארבע מעלות צלזיוס לילה. לאחר הגנה מפני הקפאה למשך הלילה, הצמד להקפיא את הדגימות בחנקן נוזלי באמצעות microtome, לחתוך קטעי רקמות בשישה מיקרומטרים. לבסוף, צלם את המקטעים תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי.מוצגות כאן תמונות מיקרוסקופיות של מקטעי לבלב שנקטעו מעכברים שבעה ימים לאחר ניתוח מזויף וחליטת צינור הלבלב של AAV8 הנושאת את הגן GFP. כבד, טחול ותריסריון מבודדים מהעכבר עם AAV8 לא הראו שום אות GFP בעוד הלבלב חשף ביטוי GFP בולט, המאשר משלוח ספציפי ללבלב של הנגיף לאחר עירוי צינור הלבלב. לאחר שליטה, טכניקה זו יכולה להיעשות ב 10 דקות כאשר מבוצע כראוי.בעת ביצוע הליך זה, חשוב מאוד לבצע ניתוח זהיר ולעשות את התריסריון הקטן ביותר האפשרי להקדמה של הצנתר. לאחר התפתחותו, הטכניקה סללה את הדרך לחוקרים החוקרים את הלבלב לחקור מספר פתולוגיות המייסרת את האיבר, כולל דלקת לבלב כרונית, סוכרת וסרטן הלבלב הן במודלים של מכרסמים והן במודלים בעלי חיים גדולים יותר. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה צריך הבנה טובה מאוד של איך הן ביעילות והן באופן סלקטיבי להחדיר את צינור הלבלב.

pancreatic-duct-infusion-an-effective-selective-method-drug-viral

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

בקרה וניתוח של מעגלים...

Scalable Fluidic Injector מערכים עבור ויראלי הכוונת של 3-D מעגלים פגוע המוח

סרטון זה מתאר את הפרוטוקול להזרקה תוך-לבבית של רטרו-וירוסים לעכבר המהונדס כדי להבטיח העברת גנים לנגעים קדם-ממאירים β לבלב מתרבים. שיטה זו יכולה גם לסייע בהערכת תפקודם של גנים מועמדים בגרורות סרטניות.

העברה תוך-לבבית של וקטורים נגיפיים: טכניקה להזרקת וקטורים נגיפיים תוך לבביים לחקר גרורות בלבלב במודל מורין

MicroRNAs ממלאים תפקידים מכריעים במוח ומהווים מטרות פוטנציאליות למידול ניוון עצבי. עם זאת, הפרעה ברמות ה-miRNA היא מאתגרת בשל האורך הקצר של ה-miRNA וחוסר הנגישות של רקמת המוח. סרטון זה מציג שיטה לעיצוב אנטגומיר והעברה ספציפית למוח באמצעות נוירופפטיד בעכברים.

חלופה פשוטה להזרקת stereotactic למציאה ספציפית המוח של מירנה

וירותרפיה אונקוליטית נמצאת בפיתוח כתרופות חדשניות לטיפול בקרצינומה של הכבד (HCC).  כאן אנו מתארים שיטה לטיפול מקומי ב-HCC באמצעות מתן עורקי כבד של נגיף אונקוליטי.

Transarterial מינהל oncolytic וירוסים לטיפול Locoregional של Orthotopic HCC אצל חולדות

לאחר ניקוב אבי העורקים דרך הווריד הנבוב התחתון (IVC) ליצירת פיסטולה של אבי העורקים בעכבר, תמיסה המכילה תרופה מוזרקת לתוך ה-IVC באמצעות אותה מחט, ולאחר מכן דגירה. שיטה זו מאפשרת העברת תרופות חזקה יותר לאנדותל הוורידי בהשוואה לנתיב החיצוני.

החדרת תרופות Intraluminal אל האנדותל מורסה arteriovenous עכבר

מודל מהדק hilar כבד עכברוש ייחודי שפותח עבור הבוחנים את שפעת מולקולות תרופתיות לטיוב פגיע reperfusion-איסכמיה. מודל זה כולל cannulation ישיר של אספקת הפורטל למגזר הכבד איסכמי באמצעות סניף של וריד השער, המאפשר למסירה כבדה ישירה.

שיטה של ​​המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

השתלת הלבלב איון היא דרך להשיג normoglycemia על סוכרת מסוג 1. מאמר זה מתמקד בטכניקה השתלת מהנתיב intraportal כדי לשמור על רמות גלוקוז נורמלי בעכברים סוכרתיים.

השתלת intraportal של לנגרהנס במודל עכבר

פרוטוקול כדי ליצור גנים שונה האדם מדומה מפוזרים תאים איון האדם התפזרו על ידי וירוס לנשיאת RNA קצר (מרין) מוצג. פרוטוקול זה מנצל את כלי האנזים והתרבות הזמינים, ניתן לבצע בקלות, והוא מייצר מדומה מבחינה גנטית מדומה המתאים ללימודים פונקציונליים ומורפולוגיים.

לנטינגינה ג'ין מתווכת השתקה האדם פסאודו איון מוכן לוחות מצורף נמוך

In vivo הדמיה ברזולוציה גבוהה של הלבלב היה קל עם חלון הדמיה תוך וינטלית הלבלב.

הדמיה מיוצבת של אורך ב-Vivo ברמה התאית של הלבלב במודל מורין עם חלון הדמיה תוך-וינטלית של הלבלב

מחקר זה פיתח שיטה פשוטה לחילוץ יעיל של איים ראשוניים תפקודיים ותאי אקינר מהלבלב בעכבר, ומציע כלי חשוב לחקר תקשורת בין-תאית בפתוגנזה של סוכרת מונעת מדלקת לבלב חריפה.

שיטה פשוטה ומהירה לבידוד סימולטני של איים ראשוניים ותאי אצינר ראשוניים בלבלב מעכברים

למד שיטת עירוי צינור הלבלב לחקירת מחלות הלבלב כמו דלקת כרונית, סוכרת וסרטן הלבלב. השיטה מאפשרת מעקב שושלתי, הכנסת גנים ומיקוד סלקטיבי בתאי לבלב בעכברים מוחדרים.

עירוי צינור הלבלב: שיטה יעילה וסלקטיבית של סמים ומשלוח ויראלי

גלה סרטונים נוספים