אלקטרופיזיולוגיות להערכת אטריה מאתר עם מיפוי אופטי ברזולוציה גבוהה

פרוטוקול זה מתאר הערכת אלקטרופיזיולוגיות אטריה מאתר ניצול מערכת מיפוי אופטי עם הגיאופוליטיות והמרחביות טמפורלית רזולוציה גבוהה, כולל הקלטות כפולה של מתח הממברנה, Ca^{2 +} חולף תחת מתוכנת גירוי דרך קטטר אלקטרודה מיוחדת.

המטרה הכוללת של ניסוי זה היא להשיג הערכה מפורטת של אטריום העכברים עם רזולוציה זמנית ומרחבית גבוהה במהלך קצב סינוס תקין והפרעות קצב פרוזדוריות הנגרמות על ידי גירוי חשמלי. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום האלקטרופיזיולוגי של הלב, כגון כיצד מוטציות גנטיות תורמות להפרעות קצב פרוזדורים. היתרון העיקרי בטכניקה זו הוא שאנו יכולים להשיג את המיפוי האופטי המדויק בפרוזדורים, תוך התמקדות במנגנון ההתחלה והתחזוקה של הפרעות קצב פרוזדורים.

פרטים על מנגנון לנגנדורף שהוקם, כולל הרכבת מעגל הזילוף, מסופקים בפרוטוקול הטקסט. פרמטרי הדמיה מסופקים גם בטקסט. כדי להכין את העכבר לקנולציה יש לטפל בו בהפרין ולהרדים אותו כמפורט בטקסט.

הקפד לאשר את ההרדמה באמצעות בדיקת רפלקס לפני שתמשיך. כדי להמשיך, אבטח את העכבר במצב שכיבה על לוח ההפעלה. לאחר מכן, פתח את דופן הבטן מתחת לרמת תהליך ה- xiphoid באמצעות מספריים.

לאחר מכן, בצע חתך רוחבי בסרעפת וחתך את שני צידי הצלעות בקו בית השחי המדיאלי מבלי לפגוע בלב. לאחר מכן, כרתו במהירות את הלב יחד עם כלי הדם והרקמות הסמוכים. לאחר מכן, שטפו את הלב עם 10 מיליליטר PBS קר כקרח והסירו את הרקמות שמסביב.

לאחר מכן, לתוך אבי העורקים העולה, הכניסו את קצה המחט הקהה בגודל 21 המחוברת למעגל הזילוף. תחת סטריאוסקופ, תקן אותו במקומו בעזרת תפרים. כעת, שטפו את הלב בתמיסה של טירוד מאווררת בחמצן טהור למשך 10 דקות.

במהלך הזילוף, עקוב באופן רציף אחר לחץ הזילוף. שמור אותו בין 80 ל -100 מילימטרים של כספית. במהלך הזלוף, הכנס צינור פוליאתילן דק לתוך הווריד הנבוב העליון והשתמש בתפרים כדי להחזיק אותו במקומו.

לאחר מכן, הנח את הלב בתא הזכוכית המחומם. ברגע שנכנסים לחדר, יש לנקב את חלל החדר השמאלי עם מחט שוכנת בקוטר 24 על ידי מעבר דרך קודקוד החדר כדי למנוע נזק לאטריום. לאחר מכן, הסר את המחט הפנימית והשאיר צינורית חיצונית בחדר השמאלי.

לאחר מכן, הכניסו קטטר אלקטרודה מרובע קוטבי 1 צרפתי, בהתאמה אישית, דרך הצינור בווריד הנבוב העליון כדי לעורר את הפרוזדור הימני. כעת, הכנס אלקטרודת סיכה לקודקוד החדר כדי להקליט ברציפות את האלקטרוקרדיוגרמה הדו-קוטבית בין אלקטרודת הסיכה למחט הקנולציה. עקוב באופן רציף אחר האלקטרוקרדיוגרמה ולחץ הזלוף לאורך כל המחקר.

כדי להכתים להקלטות בודדות של מתח הממברנה, תחילה צמצם את תאורת הסביבה. יש לשמור על טמפרטורת תמיסת הזלוף על 37 מעלות צלזיוס. העבירו 10 מיליליטר של כתם במשך שתיים עד חמש דקות דרך מסלול הזילוף.

לאחר מכן, רדפו אחרי הכתם על ידי החדרת התמיסה של טירוד למשך חמש דקות. הקפידו לשמור על לחץ הזלוף בין 80 ל -100 מילימטרים של כספית. לאחר מכן, יש לתת מיליליטר אחד של הבלביסטטין המדולל דרך מסלול הזילוף.

יש לאשר את חיסול התכווצות הלב. כמו כן, וודאו שהלב קלט את הכתם בצורה הומוגנית. לפני שתמשיך, הגדר את אלקטרודות הקצב והממריץ ומצא את סף הקצב.

כדי להמשיך, הניחו בזהירות זכוכית כיסוי על הלב המפוזר כדי לשטח את משטח הפרוזדורים ולמנוע חפץ תנועה מרטט של התמיסה. ודא שהאטריום מתחבר לזכוכית הכיסוי כראוי. כעת, ניתן להעריך גדודי קצב שונים.

לקצב קבוע או פרץ, ספק 99 פעימות במרווח קצב המתחיל ב-150 אלפיות השנייה או המרווח הארוך ביותר שנמנע מקצב מהיר יותר מהקצב הפנימי. לאחר מכן, צמצם את מרווח הקצב בהדרגה בחמש אלפיות שנייה עד 40 אלפיות השנייה, או עד שהמרווח לא מצליח לעורר את האטריום. עבור קצב גירוי יחיד נוסף, הגדר את אורכי מחזור הקצב של הכונן הבסיסי או שיש לבדוק את S1.At לפחות שלושה מרווחי S1 עד S1, כגון 120, 100 ו-80 אלפיות השנייה.

לאחר מכן, הגדר את הגירוי הנוסף הראשון, או S2, למינוס 10 אלפיות השנייה עבור אורך המחזור הבסיסי, וספק את ה-S2 לאחר גירוי הקצב האחרון של הדחף הבסיסי. בהדרגה, קצר את מרווח הצימוד של S2 בהדרגה, בחמש אלפיות שנייה צעדים עד שה-S2 לא מצליח לדה-פולריזציה של האטריום. קבע את תקופת העקשן האפקטיבית כמרווח S2 הארוך ביותר שאינו מצליח לדה-פולריזציה של האטריום.

בעת קביעת סף המטופל או תקופת העקשן האפקטיבית, לעיתים קשה לאשר את לכידת הפרוזדורים על ידי התבוננות בקצב על האלקטרוקרדיוגרמה. במקרים כאלה, עליך לבדוק זאת באמצעות מיפוי אופטי. כדי להמשיך, החל את קצב הגירויים הנוספים הכפול והמשולש כדי לגרום לטכיאריתמיה פרוזדורית בהתאם לפרוטוקול הטקסט.

מתח הממברנה בלב לנגנדורף נרשם על ידי ניטור אות הקרינה מ-di-4-ANEPPS ב-10,000 פריימים לשנייה. מפת הפעלה התקבלה על ידי קצב קבוע שנמסר מהפרוזדור הימני וניתן היה לנתח דפוס הולכה מפורט בפרוזדורי העכברים הקטנים. RH237 ו-Rhod2AM שימשו לניטור חולף הסידן בפרוזדור השמאלי במהלך אותו פרוטוקול קצב קבוע.

דגימה ב-1,000 פריימים לשנייה הייתה מהירה מספיק כדי להשוות את פוטנציאל הפעולה בחולף הסידן. לאחר מכן, פרוזדורים טכיאריתמיה נוצרה בלבבות שנלקחו מעכברים 10 ימים לאחר הליך התכווצות אבי העורקים הרוחבי, שהפעיל עומס יתר על הפרוזדור. קצב גירויים נוספים משולש מ-120 עד 80 מילישניות שימש ליצירת הטכיאריתמיה, והתפשטות הטכיאריתמיה נצפתה עוברת דרך מעגל הכניסה מחדש.

לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך שלוש שעות אם היא מבוצעת כראוי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לשמור על הפרוזדורים נקיים מכל נזק או מתח שעלולים לשנות את התכונות האלקטרופיזיולוגיות של הפרוזדורים.