הקלטה Intracavernosal לחץ כדי להעריך את תפקוד זיקפה אצל מכרסמים
6 ביוני 2018
Intracavernosal לחץ הקלטה (ICP) היא שיטה חשוב להעריך את הפונקציה זיקפה של חיות ניסוי. כאן, פרוטוקול מפורט מומחש על ההליך הקלטה של ICP catheterizing הפין crura, ואז חשמלית גירוי העצבים חלול בחולדות.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לבדוק את תפקוד הזקפה של חולדות על ידי צנתור ה-crus corpus cavernosum ורישום לחץ תוך מערה לאחר גירוי של עצבי המערה. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום תפקוד לקוי של זיקפה גברית, כגון להערכת הטיפולים והתרופות לתפקוד לקוי של זיקפה. אז יתרון אחד של טכניקה זו הוא שהיא מספקת הערכה מדויקת יותר של תפקוד הזקפה והרפלקסים, השינוי הדינמי בזרימת הדם הקשור לתגובת זיקפה.
הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית מכיוון שקשה ללמוד צנתור מכיוון שהשטח הקטן של הטוניקה הלבנה של crus corpus cavernosum מקשה על החדרת המחט לפין קרורה. כדי להתכונן לניתוח, הכינו זוג אלקטרודות דו קוטביות להקלטות לחץ תוך מערות. כופפו מעט את קצות האלקטרודות והתאימו את המרחק ביניהן למילימטר עד שניים.
לאחר מכן חבר את האלקטרודות לממריץ באמצעות שני מהדקי תנין. לאחר מכן, הרכיבו את מערכת הצנתר. ראשית, השתמש בצינורות כדי לחבר מחט היפודרמית בגודל 23 לתא עצירה תלת-כיווני.
לאחר מכן חבר את תא העצירה למתמר לחץ. לאחר מכן, חבר מזרק של 10 מיליליטר עמוס במי מלח הפרין למצב השלישי של תא העצירה. לאחר מכן מלאו את כל המערכת במי מלח הפרין ובדקו אם יש נזילות.
לאחר מכן, הרם את המחט 20 סנטימטרים וכייל את מערכת ההקלטה ל -20 סנטימטרים של מים. לאחר הכיול, התאם את גובה המחט ובדוק את הדיוק של מערכת ההקלטה. לפי הצורך, חזור על הכיול עד לאישור הדיוק.
לאחר מכן, העבירו את החולדות ממתקן החיות לחדר הניתוח ואפשרו להן להתאקלם בחדר למשך 30 דקות לפחות. בינתיים, יש לעקר את כלי הניתוח באתנול 70% ולהכין את חומרי הניתוח הדרושים. לאחר 30 דקות הכינו את החולדה הראשונה לניתוח.
הרדימו אותו עם נתרן פנטוברביטל והמתינו חמש עד 10 דקות. לאחר מכן צבטו את אצבעות החולדות ובדקו אם אין רפלקס כדי לאשר הרדמה תקינה. לאחר מכן, גלחו את הפרווה מהבטן והצוואר והניחו את החולדה על קרש כירורגי.
כעת נגב את העור החשוף בשלושה פילינגים לסירוגין עם 10% פובידון יוד ואחריו 70% אתנול. כמו כן, יש למרוח משחה עיניים כדי למנוע התייבשות של העיניים. לאחר מכן המשך בניתוח.
לפני בידוד עצב המערה, צנתר את עורק הצוואר השמאלי על פי פרוטוקול הטקסט. התחל את בידוד העצבים על ידי הרמת העור והשריר של הבטן בעזרת זוג מלקחיים. לאחר מכן, בעזרת מספריים, בצע חתך בקו האמצע מהבטן התחתונה לפין.
לאחר מכן, העבירו בעדינות את המעיים לחלק העליון של חלל הבטן. ואז תפסו את שלפוחית השתן בזוג מלקחיים ושלפו אותה מחלל הבטן. כעת מצא את אונות הגחון של הערמונית הממוקמות בחלק הגחוני של השופכה.
לאחר מכן, חשוף את האונה הגבית של הערמונית על ידי משיכת אונות הגחון, שלפוחית הזרע וכלי הדם. כעת מצא את נקודת ההדבקה של כלי הדם והערמונית. לאחר מכן הפרד את הרווח בין הערמונית לכלי הדם.
המשך על ידי חשיפת הקפסולה הסיבית הממוקמת מאחור לנקודת הצומת של הערמונית וכלי הדם. לאחר מכן מצא את גנגליון האגן העיקרי ועצבי המערה הממוקמים על פני הערמונית. כעת יבש בזהירות את אזור העצבים המערה בעזרת ספוגית או נייר טישו, ולאחר מכן בודד בזהירות וחבר את עצב המערה הימני עם האלקטרודות הדו-קוטביות.
להמשך הניתוח, חתכו חתך קטן בעור הפין בעזרת מספריים מנתחים ולאחר מכן הסירו בזהירות את עור פיר הפין. לאחר מכן חשוף מספיק רקמה כדי לנתח את שרירי הפין המפוספסים. עכשיו מצא את הענף העליון של עצם הערווה.
לאחר מכן חשוף את שריר הבולבוספונגיוזוס המכסה את נורת הספוגיוס. לאחר מכן, בעזרת מלקחיים מעוקלים, חלקו את שריר הבולבוספונגיוזוס משריר האיסכיוקברנוסוס. המשך על ידי בידוד זהיר של שריר ה- ischiocavernosus.
לאחר מכן חותכים את שריר ה- ischiocavernosus כדי לחשוף את הטוניקה הלבנה של crus corpus cavernosum. כעת בצע את הצנתור. עקוב בזהירות אחר הכיוון האנטומי של crus corpus cavernosum והכנס בעדינות את המחט דרך הטוניקה הלבנה albuginea לתוך הקברנוסום.
מיקום המחט הוא קריטי להצלחת הניתוח, ולכן כבדיקה, יש להזריק כמות קטנה של מי מלח הפריניזציה. זה אמור לגרום לנפילה קלה בפין אם המחט הוחדרה כהלכה. לאחר מכן, מבלי למקם מחדש את המחט, או לשבש את צינור החיבור, שחרר בזהירות את המחט.
לאחר מכן בדוק את האזור לאיתור דליפה. אם לא נמצא, המשך בגירוי העצב וניתוח הנתונים. בדיקת ההקלטה המתוארת של ICP שימשה להבחנה בין חולדות מבוגרות עם הפרעות זיקפה כדי לעזור לכמת את ההשפעה של טיפול או תרופות פוטנציאליות על תפקוד הזקפה.
עקומת תגובת ICP טיפוסית של קבוצת הפרעות הזקפה הייתה נמוכה בהרבה מהעקומה של קבוצת הביקורת. בדרך כלל נבחר ה-ICP הגבוה ביותר לניתוח סטטיסטי. לאחר חישוב היחס בין ICP ללחץ העורקי הממוצע, הנתונים שנאספו מחמש חולדות הראו כי היחס בקבוצת הגיל ירד משמעותית בהשוואה לזה של קבוצות הביקורת.
מלבד שני הפרמטרים המרכזיים הללו, שיא ה-ICP, ה-ICP הרמה, זמן הנפילה והשטח שמתחת לעקומה, כולם ירדו משמעותית בחולדות מבוגרות, ולכן הנתונים מלאים במדידות כמותיות המשקפות את תפקוד הזקפה. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע ביעילות את הקלטת ה-ICP על בעלי חיים. אל תשכח שבזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להשתמש בהפרין על מנת להבטיח שצינור הצינורית יישאר ללא חסימה.
לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך כשעתיים אם היא מבוצעת כראוי.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
סקירה כללית
מאמר זה מציג פרוטוקול מפורט למדידת הלחץ התוך-מערתי (ICP) בחולדות להערכת התפקוד הזקרי. השיטה כוללת החדרת קטטר ל-crus corpus cavernosum וגירוי חשמלי של העצבים המערתיים.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום מדע
- מדעי המוח
- אורולוגיה
- פיזיולוגיה
רקע
- רישום לחץ תוך-גופי (Intracavernosal pressure) הוא קריטי להערכת תפקוד הזקפה במודלים ניסיוניים.
- הטכניקה מסייעת בהבנת דיספונקציה זקרה ובבחינת טיפולים פוטנציאליים.
- החדרת קטטר לשורשי הפין (penis crura) היא מאתגרת בשל מגבלות אנטומיות.
- מדידה מדויקת של ה-ICP משקפת שינויים דינמיים בזרימת הדם במהלך הזקפה.
מטרת המחקר
- לספק שיטה מהימנה לבדיקת תפקוד זקפה בחולדות.
- להקל על המחקר בתחום של דספונקציה ארקטית גברית.
- לשפר את ההבנה של מנגנוני התגובה הזקפתית.
שיטות שנעשה בהן שימוש
- קתטרזציה של גוף הגופים המערים (crus corpus cavernosum).
- גירוי חשמלי של העצבים המערים.
- רישום של הלחץ התוך-מערי.
- הכנת אלקטרודות בי-פולריות למדידות מדויקות.
תוצאות עיקריות
- הפרוטוקול מאפשר הערכה מדויקת של התפקוד הזקרי.
- הדגמה ויזואלית משפרת את הלמידה של טכניקות קטטריזציה.
- שינויים דינמיים ב-ICP מספקים תובנות לגבי פיזיולוגיית הזקפה.
- ניתן להשתמש בשיטה כדי להעריך את יעילותם של טיפולים להפרעות זקפה.
מסקנות
- טכניקה זו להקלטת ICP חיונית למחקר בתחום של דיספונקציה אֶרֶקְטִילִית.
- קתטרים מדויקים הם קריטיים לאיסוף נתונים מהימן.
- המחקר תורם להבנת מנגנוני האֶרֶקְצִיָה בחולדות זכר.
שאלות נשאלות שכיחות
רלוונטיות תעשייתית ניהולית
רישום לחץ תוך-מערה (ICP) במכרסמים מספק הערכה כמותית ורלוונטית פיזיולוגית של התפקוד הזקפתי, ומאפשר הערכה מכניסטית של מועמדים טיפוליים במחקר פרה-קליני של דיספונקציה אֶרֶקטִילִית (ED). שיטה זו תומכת בתיקוף מטרות ובזיהוי מולקולות מובילות באמצעות אספקת נתונים המודינמיים דינמיים המשקפים את מנגנוני התגובה הזקפית, ובכך מפחיתה את ההסתמכות על מדדי קצה חלופיים. שילובה בתהליכי הגילוי מגבירה את הביטחון החזוי בהפחתת סיכונים של טיפולים לדיספונקציה אֶרֶקטִילִית לפני המעבר לשלבי מחקר מאוחרים יותר.
יישומים אסטרטגיים במחקר ופיתוח בביו-פרמה
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- ערך מדעי: מאפשר בחינה של היפותזות טיפוליות על ידי מדידת תגובות ICP לגירוי של העצב הקהבי (cavernous nerve), ובכך מבהיר תרומות ספציפיות של מסלולים לתפקוד הזקפה.
- ערך תפעולי: מספק נתוני המודינמיקה הדירות שסומכים על הפחתת סיכונים ביולוגית של מטרות המעורבות באותות של nitric oxide ובהרפיית שריר חלק.
- ערך ניבוי: מסייע בתעדוף תיק פיתוחים באמצעות כימות השפעות הטיפול על שיא ה-ICP, היחס ICP-to-MAP וזמן ה-detumescence, ובכך מספק אותות מוקדמים ליעילות.
סריקה ופיתוח בדיקה
- מוכנות הבדיקה: מייצר עקומות ICP כמותיות וסטנדרטיות המתאימות לסריקת תרכובות ברמת דיוק גבוהה במודלים מאושרים של מכרסמים.
- שחזוריות: דורש פרוטוקולי קטטריזציה וכיול מדויקים כדי להבטיח פלטים עקביים של מתמר הלחץ בין הניסויים השונים.
- יכולת הרחבה: תומך בשימוש חוזר בפלטפורמה למחקרים אורכיים ולהשוואות בין טיפולים ברגע שהמיומנות הכירורגית הושגה.
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- רלוונטיות למחלה: מודלים של חולדות מזדקנות מראים הפחתה משמעותית במדדי ICP, דבר המשקף פנוטיפים קליניים של ED ומאפשר התאמה של סממנים ביולוגיים תרגומיים.
- המשכיות פרה-קלינית: תומך בהחלטות קידום מבוססות סיכון על ידי קישור נתוני יעילות נגזרים מ-ICP לוויסות מטרה מבוסס מנגנון.
- הפחתת סיכונים מנגנונית: מבודד תגובות המתווכות על ידי העצב הגאיבנוסי (cavernous nerve), ובכך מבחין בין תרומות נוירוגניות לווסקולריות לתפקוד הזקפה.
שילוב תהליכי עבודה וצנרת (Pipeline & Workflow Integration)
הקלטת ICP נכללת ברצף הגילוי, החל מתיקוף מטרה דרך זיהוי מובילים ועד לבדיקות יעילות פרה-קליניות, ומספקת אפיוני המודינמיקה המנחים החלטות של go/no-go בפיתוח טיפולי ב-ED.
- ביולוגיה של גילוי: תומך בבדיקת השערות על מסלולים נוירוגניים וכליים באמצעות תגובות ICP שגורו חשמלית בעקבות גרייה של העצב הקavernose.
- סריקה: מספק פלטים כמותיים ומוכנים לבדיקה, הכוללים שיא ICP, פלטו ICP ושטח תחת העקומה להערכת תרכובות.
- אנליטיקה: מאפשר השוואה סטטיסטית של יחסי ICP ללחץ עורקי ממוצע ושל משך התגובה בין קבוצות טיפול שונות.
- מחקר תרגומי: מקשר לתקפות פרה-קלינית באמצעות גירעונות ICP תלויי גיל המקבילים לפתופיזיולוגיה של ED בבני אדם.
- שימוש חוזר ארגוני: מבסס יכולת ניתוף המודינמי הניתנת לשימוש חוזר לסריקה איטרטיבית של מועמדים לטיפול ב-ED.
השפעה תפעולית וארגונית
- ערך מדעי: מספק ביטחון חיזוי בתיקוף המטרה על ידי כימות שינויים דינמיים בזרימת הדם הקשורים לרפלקסים של זקפה.
- ערך תפעולי: מבטיח סטנדרטיזציה באמצעות כיול של מי מלח עם הפרין ופרוטוקולים לבדיקת דליפות, ובכך משפר את השחזוריות בין אתרים שונים.
- ערך אסטרטגי: משפר את יעילות ההון על ידי הפחתת נשירה בשלבים מאוחרים, באמצעות הפחתת סיכונים מכניסטית מוקדמת של מנגנוני ED.
- השפעה על הפורטפוליו: מאפשר תיעדוף מותאם סיכונים המבוסס על ספי רגישות כמותיים של יעילות המודינמית.
שיקולי יישום
- נדרשת מומחיות במיקרו-כירורגיה של דיסקציה וסקולרית ועצבית במכרסמים, ובמיוחד לבידוד העצב הקהבי (cavernous nerve) וקתטריזציה של ה-crus corpus cavernosum.
- תלוי במערכות של מתמירים למדידת לחץ, סטימולטורים ביפולריים והכנת סליין עם הפרין למניעת קרישה ושמירה על שלמות המערכת.
- מחייב סטנדרטיזציה בין-צוותית של הטכניקה הכירורגית, נהלי כיול וקריטריונים לניתוח עקומות ICP.
- שיקולי התאמה כוללים אנטומיה ספציפית למודל (למשל, חולדה לעומת עכבר) ופרוטוקולי הרדמה המשפיעים על התגובה העצבית.
- מגבלות מעשיות כוללות את האתגר הטכני של החדרת מחט אל תוך ה-tunica albuginea ואת הצורך במיומנות פרוצדורלית כדי למנוע דליפה וסקולרית.
