22 בפברואר 2018
פרוטוקול זה מתאר מודל חדש שבאמצעותו חולדות בריא יכול חוזה דיכאון על נתון periodthrough הדבקה על ידי חשיפה כרונית בלתי צפויות הדגיש חולדות (CUS).
המטרה הכוללת של מודל זה היא לבסס הדבקה בדיכאון בחולדות. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום ההתנהגותי כגון מנגנון פעולה, מניעה, הכלה וטיפול בדיכאון מדבק. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שמדובר במודל חדש לביסוס דיכאון מדבק.
ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על טיפול בדיכאון מכיוון שכרגע אין פורמט קיים לחקר דיכאון מדבק. עבור הליך הניסוי, בחר חולדות Sprague Dawley זכרים ללא פתולוגיה גלויה כל אחד במשקל של בין 300 ל -350 גרם. אכלס שלוש חולדות בכל כלוב עם צ'או ומים זמינים אד ליביטום.
אפשר מינימום שבועיים של הסתגלות במחזור אור וחושך של 12 שעות. לפני תחילת הניסוי, בדוק את כל החולדות לנוכחות התנהגויות דמויות דיכאון באמצעות מבחן העדפת סוכרוז בן שלושה ימים. לשם כך, הניחו את החולדות בכלובים בודדים באותו חדר כמו הדיור במהלך מחזור החושך.
הניחו בקבוק של 100 מיליליטר תמיסת סוכרוז 1% בכל כלוב למשך 24 שעות ואפשרו הסתגלות. לאחר 24 שעות, הסר את הבקבוקים ומנע מהחולדות מזון ומים למשך 12 שעות. לאחר 12 שעות, הניחו שני בקבוקים, האחד מכיל 100 מיליליטר תמיסת סוכרוז 1% והשני 100 מיליליטר מי ברז בכל כלוב למשך ארבע שעות.
לאחר ארבע שעות, רשום את הנפח במיליליטר על תמיסת הסוכרוז והמים הנצרכים וחשב את הזיקה להעדפת סוכרוז כפי שמוצג. חסל חולדות שנמצאו חיוביות לדיכאון, ואז חסל חולדות ששוכנו באותם כלובים כמו החולדות המדוכאות. במידת הצורך, אל תכלול חולדות נוספות באופן אקראי כדי ליצור את הקבוצות הסופיות.
תייגו את החולדות באמצעות מדבקות ממוספרות. כדי לגרום לדיכאון, חשפו את 60 החולדות בקבוצה שנחשפה ללחץ כרוני בלתי צפוי לכל שניים משבעת גורמי הלחץ הבאים. בסדר אקראי במשך חמישה שבועות רצופים, השתמש בגורם לחץ אחד במהלך היום והשני בלילה.
אכלס את החולדות בקבוצות גדולות יותר על ידי הצבת שש חולדות במקום שלוש הרגילות בכלוב למשך 18 שעות. הניחו את החולדות בכלוב מוטה 45 מעלות לאורך הציר האנכי למשך שלוש שעות. מזון מונע מהחולדות למשך 18 שעות.
מנעו מהחולדות מים למשך 18 שעות, וחשפו אותן לבקבוקי מים ריקים לאחר שעה. הניחו את החולדות בכלוב עם מצעים רטובים למשך שמונה שעות במהלך מחזור הלילה. חשפו את החולדות לתאורה רציפה למשך 24 שעות במחזור אור-חושך הפוך פעמיים בשבוע.
הניחו את החולדות בסביבה חמה המוגדרת על 40 מעלות צלזיוס למשך חמש דקות במהלך מחזור הלילה. לאחר חשיפה לשני גורמי הלחץ שנבחרו, אשר את התפתחות הדיכאון על ידי ביצוע מבחן העדפת סוכרוז. ראשית, הניחו שתי חולדות חשופות ל-CUS בכל כלוב ב-30 כלובים שונים.
לאחר מכן הוסיפו חולדה אחת מקבוצת ההדבקה בדיכאון לכל כלוב המכיל שתי חולדות שנחשפו ל-CUS ואפשרו מגורים משותפים במשך חמישה שבועות בתנאים סטנדרטיים. לאחר חמישה שבועות של מגורים משותפים, הכניסו את כל הקבוצות להעדפת סוכרוז, שדה פתוח ומבחני שחייה בכפייה. נקו את המכשיר עם 5% אלכוהול לפני הכנסת כל בעל חיים.
מקם את החולדה בפינת השדה הפתוח הפונה לקיר. הקליטו את התנהגות החולדה במצלמת וידאו למשך חמש דקות. נתח הקלטות פוסט של מרחק הנסיעה הכולל, המהירות בחלק המרכזי של השדה וזמן השהות בחלק המרכזי של השדה.
להתרגלות, הניחו את החולדה בגליל זכוכית המכיל מים בטמפרטורת החדר למשך 15 דקות שחייה. מוציאים את החולדה מהגליל, מייבשים במגבות נייר ומניחים בכלוב חם למשך 15 דקות לפני החזרת החולדה לכלוב הביתי. למחרת, צלם בווידאו סשן שחייה של חמש דקות ונתח את ההקלטות לחוסר תנועה, טיפוס ועשיית צרכים.
לאחר חשיפת חולדות לחמישה שבועות של CUS לצורך השראת דיכאון ולאחר מכן חשיפת חולדות בריאות לחולדות שנחשפו ל-CUS במשך חמישה שבועות נוספים, שתי קבוצות החולדות הראו התנהגויות דמויות דיכאון בסוף, כפי שהוכח על ידי העדפה מופחתת לסוכרוז. בשדה הפתוח, חולדות הן בקבוצת החשיפה והן בקבוצת ההדבקה בדיכאון הפחיתו את מרחקי הנסיעה הכוללים והפחיתו את המהירויות הממוצעות בהשוואה לקבוצת הביקורת. הזמן שבילו החולדות מקבוצת הביקורת בשתי קבוצות הניסוי במרכז השדה הפתוח לא היה שונה באופן משמעותי.
גם חולדות שנחשפו ל-CUS וגם חולדות עם דיכאון הראו חוסר תנועה ממושך לאחר מבחן השחייה הכפויה. עם זאת, זמן ממושך משמעותית של חוסר פעילות נרשם רק בקבוצה שנחשפה ל-CUS בהשוואה לקבוצת הביקורת. בפרמטר אחר שנבדק במבחן שחייה בכפייה, זמן טיפוס, שתי הקבוצות של חולדות CUS שנחשפו ל-CUS וחולדות דיכאון הדבקה הראו תכונות טיפוס מוגבלות ביותר בהשוואה לקבוצת הביקורת.
הערכת קצב עשיית הצרכים הביאה לרישום כמויות גבוהות של צואה בשתי קבוצות הניסוי בהשוואה לביקורת. בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לתכנן מראש את הסיבוב האקראי של גורמי לחץ במהלך מודל הלחץ הכרוני הבלתי צפוי בגלל הביקוש הגבוה שלו לעבודת כפיים. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע בדיקות אחרות כמו מבוך מוגבה פלוס או מבחן מראה על מנת לחקור עוד יותר את השינויים ההתנהגותיים בעקבות הדיכאון.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מחקר זה מבסס את מודל בעלי החיים הראשון לדיכאון מדבק, ומראה שחולדות בריאות יכולות לפתח התנהגויות דמויות-דיכאון לאחר מגורים משותפים עם חולדות שנחשפו ללחץ כרוני בלתי צפוי (CUS). הפרוטוקול מספק מסגרת הניתנת לשחזור לבדיקת המנגנונים, המניעה והטיפול בהדבקה של דיכאון בסביבת מעבדה מבוקרת.
מודל זה נותן מענה לפער קריטי במדעי המוח ההתנהגותיים על ידי מתן אפשרות לחקר הדבקה בדיכאון, תופעה בעלת השלכות על הבנת ההעברה החברתית של הפרעות מצב רוח. הוא מספק מערכת פרה-קלינית לבחינת המנגנונים העומדים בבסיס התפשטות הדיכאון באוכלוסיות, ותומך בתיקוף מטרות להתערבויות שמטרתן למנוע או למתן את השפעות ההדבקה. גישה זו בעלת ערך ניבוי להפחתת סיכונים של אסטרטגיות טיפוליות, וזאת באמצעות מידול של ממד חברתי-מתווך של דיכאון שאינו נלכד במודלים מסורתיים המושרים על ידי סטרס.
השיטה משתלבת ברצף הגילוי, החל מבדיקת היפותזת המטרה ועד לאישור פרה-קליני, ובמיוחד עבור פנוטיפים התנהגותיים המושפעים מהסביבה החברתית. היא מאפשרת הערכה מוקדמת של מעורבות המטרה (target engagement) במודלים שבהם דיכאון נובע מהעברה סביבתית ולא רק מחשיפה ישירה לסטרס.