Name: חולדה מודל מרכזי עייפות בעזרת ששונה שיטת פלטפורמה מרובים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-14T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: למדו לבנות מודל חולדה לעייפות מרכזית בשיטת הפלטפורמות המרובות המשופרת. הפרוטוקול משלב גורמים נפשיים ופיזיים לחקירת מנגנוני העייפות והשפעותיו של חסר שינה על המודל.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי קרן בייג'ינג של מדעי הטבע (No.7162124), שין-אאו הרישמי של רפואה סינית אוניברסיטת בייג'ינג.

כל החיות היו מתוחזק בהתאם להנחיות על ידי החקיקה הסינית על השימוש אתית, טיפול של חיות מעבדה.
1. מידול טרום הכנה
<ol><li>
הכנת המעבדה
	<ol>
<li>הפעל את מנורת UV במשך לפחות 30 דקות לפני הניסוי.</li>
		<li>בקרת הטמפרטורה במעבדה ב 25 ± 3 מעלות צלזיוס, והלחות היחסית סביב 30%.</li>
		<li>להפעיל את המעבדה אור בשעה 6, תכבה את האור בשעה 18:00 להקים מעגל/כהה 12 h/12 שעות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
פלטפורמה מרובים תיבת בנייה
	<ol>
<li>לבנות מיכל פלסטיק אטום ללא כיסוי של 110 × 60 × 40 ס מ3.</li>
		<li>תקן 15 פלטפורמות מעגלית (h = 8 ס"מ, d = 6.5 ס מ) על החלק התחתון של הטנק, סניטר להפיץ שלוש שורות ועמודות חמש. להשאיר מספיק מקום בין כל פלטפורמה, בערך 10 ס מ בין טורים או 13 ס מ בין שורות.</li>
		<li>הגדר פורקן מים על הצד הלטראלי של הטנק, להתקין ברז.</li>
		<li>הופכים שער ברזל-חוט אחר תנועותיהם לטנק עם קופסת האוכל תלוי על זה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
קיבוץ וחולדות דיור הערה: חולדות זכרים Wistar של בן, 8 שבועות, במשקל של 200-210 g, משמשים את הניסוי. העכברושים חיים בקבוצות במהלך תהליך דוגמנות.<ol>
<li>מספר הזנב שורשים של החולדות עם עט מרקר.</li>
		<li>שוקל את החולדות לא לכלול את קלות או כבדות במיוחד, חלק את השאר באופן אקראי לקבוצות מודל ושליטה.</li>
		<li>לשים את החולדות בעדינות לתוך הכלובים נקי ולאפשר להם להסתגלות למעבדה לפחות 3 ימים. מספקים מספיק מים, אספקת המזון.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. מידול עם MMPM
הערה: התהליך מתחיל בשעה 18:00 ומסתיים ב-8 בבוקר למחרת, עבור סכום כולל של 14 שעות ביום, במשך 21 ימים. כדי למנוע הפרעה גורמים, האדם נדרש לבצע את הניסוי כולו, כשאתה לובש אותו המעבדה. 10 חולדות Wistar משמשים את הניסוי.
<ol><li>מניחים את הטנק על משטח שטוח, למשל, על הרצפה. ואז למלא את המיכל בערך 7 ס מ של מים חמים (25 ± 3 ° C), כ- 1 ס מ מתחת פלטפורמת שטוח.</li>
	<li>להכין מספיק אוכל ושתייה וכל העכברים למיכל עבור יום אחד. להכניס תיבת מזון למספוא ומים ולתלות אותו על השער. הערה: כמה עכברים חכם ללמוד על תיבת האוכל. אם כך, להסיע אותם בחזרה לתוך הטנק.</li>
	<li>לקחת את החולדות קבוצה דגם הכלוב, לתפוס אותם על ידי הזנב, לשים אותם בעדינות לתוך הטנק. ההשקה כל העכברושים במים במקום פלטפורמות להמריץ את הפחד של מים. ודא כי כל עכבר מקבל פלטפורמה לעמוד עליה, בעוד חולדות של קבוצת הביקורת נשאר בכלובים המקורי שלהם עם מספיק אוכל ומים.</li>
	<li>מכסה למיכל. נטר את החולדות כדי למנוע מהפציעה. אם עכבר נשאר במים למשך יותר משעה בלי לטפס על הפלטפורמה, תוציא את זה למיכל ולהסיר אותו מן הבחינה.</li>
	<li>לאחר 14 h, לקחת את החולדות דגם מהמיכל, תייבשי את השיער שלהם עם מייבש. לסמן מחדש זנבות של החולדות אם זה נמוג. להחזיר את החולדות לכלובים המקורי שלהם ולספק להם מספיק אוכל ומים.</li>
	<li>פלאש בכל פינה של הטנק. לרומם בצד אחד של הטנק, לפתוח את הברז כדי outflow את השפכים.</li>
	<li>לחטא את המיכל עם 75% אתנול תרסיס, לחשוף אותם בפני האור האולטרה סגול.</li>
</ol>3. דגם: התנהגותית מבדק
הערה: כל הבדיקות מבוצעות במעבדה התנהגותית. רעש, אור נוסף אסורה במהלך הבדיקה כדי למנוע הפרעה. במידת האפשר, השתמש את המשתמשים מקבלי אותו לערוך כל בדיקה. מעיל כהה וכפפות נדרשים עבור זיהוי סולם אפור בעיבוד תמונה. לבצע את OFT תחילה שכן יש לפחות. ההשפעה על ההתנהגות חולדה.
<ol><li>
למוד
	<ol>
<li>בדוק את ההקלטה מעל תיבת שדה פתוח כדי לוודא זה מחובר כהלכה לתחנת העבודה ועוסק בכל פינה של התיבה. להתאים את התאורה לחסל צללים בתיבה.</li>
		<li>להעביר את החולדות למעבדה התנהגותית בכלובים המקורי שלהם. לאפשר להם להסתגלות במשך לפחות שעה לפני המבחן.</li>
		<li>לנקות, לנקות את התיבה עם 75% אתנול כדי להבטיח כי אין צואה או הריח נשאר מהניסוי הקודם.</li>
		<li>להסיר את חולדה מן הכלוב על ידי הגב והניחו אותה בעדינות לתוך האזור המרכזי של התיבה. במהירות נסיגה האצולה מהתיבה כדי לא לחסום את הזריקה.</li>
		<li>קלט המספר של החולדה, להתחיל בהקלטה. לספור ולהקליט את התדירות של פעילויות אנכי של החולדה, כולל גידול וטיפוס.</li>
		<li>לאחר 5 דקות, לעצור את ההקלטה, קח את החולדה מחוץ לקופסה, להחזיר אותו לכלוב.</li>
		<li>חזור על שלבים 3.1.3 - 3.1.6 עד כל העכברושים סיימו את המבחן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
EPM
	<ol>
<li>בצע את השלבים שלפני הסימון, להתאקלמות באשר OFT (שלבים 3.1.1 - 3.1.2).</li>
		<li>להסיר את חולדה מן הכלוב על ידי גבו ושם אותה בעדינות על החלק צומת של שתי זרועות. להנחית את החולדה לכיוון הזרוע השמאלית פתוח ולעזוב במהירות כדי לא לחסום את הזריקה.</li>
		<li>קלט המספר של החולדה, להתחיל בהקלטה. לספור ולהקליט את התדירות של הזרוע שונים כניסות. אם החולדה יוריד את המבוך במבחן, תרים אותו ולשלוח אותו למבוך. להקליט מידע מפורט עבור ניתוח נתונים.</li>
		<li>לאחר 5 דקות, לעצור את ההקלטה, קח את החולדה החוצה, להחזיר אותו לכלוב.</li>
		<li>הסר את הצואה, לנגב את המבוך עם 75% אתנול לחסל את הריח של חולדה לשעבר.</li>
		<li>חזור על שלבים 3.2.2 - 3.2.5 עד כל העכברושים סיימו את המבחן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
מבחן ES
	<ol>
<li>למלא את מיכל שחייה (70 × 30 × 110 ס מ3) עם 80 ס מ של מים חמים (25 ± 3 ° C). הערה: אם יש תרמוסטט במיכל, טמפרטורת המים להגדיר בסביבות 37 ° C, הדומה לטמפרטורת הגוף של החולדה. אם לא, לקבוע את טמפרטורת החדר לשמור את זה קבוע.</li>
		<li>להפוך מטען עבור כל עכברוש עם סיכת אשכולות ולקשור אותו בעדינות על שורש הזנב שלה. העומס שוקל 10% ממשקל של החולדה.</li>
		<li>תפוס חולדה בזנב ולזרוק אותו לתוך הטנק שחייה. אם החולדות מצטופפות או להיצמד לקיר, להבחין ביניהם ונהג אותם בחזרה למים.</li>
		<li>להתחיל תזמון כרגע כאשר העכברוש מכניסים מים ותזמון עצור כאשר הוא נחלש, אשר הוכח כמו הכשל להיאבק מחוץ למים עם הפה והאף מתחת למים במשך יותר מ 10 s. הערה: לפעמים, תשישות וטביעה מתרחש בפתאומיות. ודאו שיש לכם מספיק ניסויים כדי להקליט ולשמור את החיה בו זמנית.</li>
		<li>הסר את החולדות מותש מהמים מבלי להפריע לאחרים. תייבשי את השיער שלהם, לסמן מחדש את המספרים שלהם ולשלוח אותם חזרה לכלוב.</li>
		<li>להחליף את המים במיכל לאחר סיום קבוצה אחת. לאחר כל העכברושים נעשים, לרוקן למיכל שחייה, לנקות, לעקר אותה עם אתנול וביו -אור UV.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. מודל ההערכה: נוירוטרנסמיטר מרכזי זיהוי
<ol><li>עזים ומתנגד העכברוש עם הזרקה הצפק התוך של 10% כלורין (3 מ"ל/ק"ג) עד שזה חסר הכרה.</li>
	<li>לערוף את החולדה.</li>
	<li>עושים חתך אורכי לאורך הקו שלאחר המדיאלי, לפתוח את הגולגולת לשני הצדדים, לחשוף את המוח. . תהפוך את הגולגולת, מסירים את המוח והניח את המוח על שקית קרח.</li>
	<li>להפריד ולהסיר ההיפותלמוס, וזה האיזור בצורת מעוין בחלק המרכזי של הבסיס של המוח יש גבול ברור עם הרקמות הסובבות. למקם אותו צינור סטרילי ומקפיאים עם חנקן נוזלי. אחסן את כל הדגימות מקרר-80 ° C.</li>
	<li>לזהות את התוכן של DA ו- 5-HT בהיפותלמוס באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים (HPLC)8.</li>
</ol>

<ol><li>Ishii, A., Tanaka, M., Yamano, E., Watanabe, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neural+substrates+of+physical+fatigue+sensation+to+evaluate+ourselves%3A+a+magnetoencephalography+study%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The neural substrates of physical fatigue sensation to evaluate ourselves: a magnetoencephalography study.</a> Neuroscience. 261, 60-67 (2014).</li>
<li>Dalsgaard, M. K., Secher, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Brain+at+Work%3A+A+Cerebral+Metabolic+Manifestation+of+Central+Fatigue%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">The Brain at Work: A Cerebral Metabolic Manifestation of Central Fatigue?</a> Journal of Neuroscience Research. 85 (15), 3334-3339 (2007).</li>
<li>Chaudhuri, A., Behan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatigue+in+neurological+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Fatigue in neurological disorders.</a> The Lancet. 363, 978-988 (2004).</li>
<li>Baston, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise-induced+central+fatigue%3A+a+review+of+the+literature+with+implications+for+dance+science+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dance+Medicine+%26+Science%22%5BJournal%5D)">Exercise-induced central fatigue: a review of the literature with implications for dance science research.</a> Journal of Dance Medicine & Science. 17 (2), 53-62 (2013).</li>
<li>Yamashita, M., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tryptophan+and+Kynurenic+Acid+May+Produce+an+Amplified+Effect+in+Central+Fatigue+Induced+by+Chronic+Sleep+Disorder%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Tryptophan+Research%22%5BJournal%5D)">Tryptophan and Kynurenic Acid May Produce an Amplified Effect in Central Fatigue Induced by Chronic Sleep Disorder.</a> International Journal of Tryptophan Research. 7, 9-14 (2014).</li>
<li>Lee, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+duration+of+one+bout+treadmill+exercise+on+cell+proliferation+and+central+fatigue+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Exercise+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">The impact of duration of one bout treadmill exercise on cell proliferation and central fatigue in rats.</a> Journal of Exercise Rehabilitation. 9 (5), 463-469 (2013).</li>
<li>Su, kY., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rutin%2C+a+flavonoid+and+principal+component+of+saussurea+involucrata%2C+attenuates+physical+fatigue+in+a+forced+swimming+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Rutin, a flavonoid and principal component of saussurea involucrata, attenuates physical fatigue in a forced swimming mouse model.</a> International Journal of Medical Sciences. 11 (5), 528-537 (2014).</li>
<li>Hashemi, F., Laufer, R., Szegi, P., Csomor, V., Kal ász, H., Tekes, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HPLC+determination+of+brain+biogenic+amines+following+treatment+with+bispyridinium+aldoxime+K203%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiologica+Hungarica%22%5BJournal%5D)">HPLC determination of brain biogenic amines following treatment with bispyridinium aldoxime K203.</a> Acta Physiologica Hungarica. 101 (1), 40-46 (2014).</li>
<li>Machado, R. B., Hipo'lide, D. C., Benedito-Silva, A. A., Tufik, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+deprivation+induced+by+the+modified+multiple+platform+technique%3A+quantification+of+sleep+loss+and+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Sleep deprivation induced by the modified multiple platform technique: quantification of sleep loss and recovery.</a> Brain Research. 1004 (1-2), 45-51 (2004).</li>
<li>Alzoubi, K. H., Khabour, O. F., Tashtoush, N. H., AI-Azzam, S. I., Mhaidat, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+Effect+of+Pentoxifylline+on+Sleep-Deprivation+Induced+Memory+Impairment%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the Effect of Pentoxifylline on Sleep-Deprivation Induced Memory Impairment.</a> Hippocampus. 23 (9), 812-819 (2013).</li>
<li>Pires, G. N., Tufik, S., Andersen, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grooming+analysis+algorithm%3A+Use+in+the+relationship+between+sleep+deprivation+and+anxiety-like+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+and+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Grooming analysis algorithm: Use in the relationship between sleep deprivation and anxiety-like behavior.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 41, 6-10 (2013).</li>
<li>Yamashita, M., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="https://www.jstage.jst.go.jp/article/ninchishinkeikagaku/15/1/15_67/_article">Establishment of a rat model of central fatigue induced by chronic sleep disorder and excessive brain tryptophan.</a> Japanese Journal of Cognitive Neuroscience. 15, 67-74 (2013).</li>
<li>Arai, M., Yamazaki, M., Inoue, K., Fushiki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intracranial+injection+of+transforming+growth+factor-beta+relevant+to+central+fatigue+on+the+waking+electroencephalogram+of+rats+Comparison+with+effects+of+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+and+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Effects of intracranial injection of transforming growth factor-beta relevant to central fatigue on the waking electroencephalogram of rats Comparison with effects of exercise.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 26 (2), 307-312 (2002).</li>
<li>Han, C. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+behavioral+and+brain+changes+after+different+durations+of+the+modified+multiple+platform+method+on+rats%3A+An+animal+model+of+central+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Distinct behavioral and brain changes after different durations of the modified multiple platform method on rats: An animal model of central fatigue.</a> PloS One. 12 (5), e0176850(2017).</li>
<li>Tang, X., Yang, L., Sanford, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+variation+in+sleep+and+motor+activity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Individual variation in sleep and motor activity in rats.</a> Behavioural Brain Research. 180 (1), 62-68 (2007).</li>
<li>Stanford, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Open+Field+Test%3A+reinventing+the+wheel%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The Open Field Test: reinventing the wheel.</a> Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134-135 (2007).</li>
<li>Ahn, S. H., et al. <a target="_blank" href="https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/19768354.2013.790840">Basal anxiety during an open field test is correlated with individual differences in contextually conditioned fear in mice.</a> Animal Cells and Systems. 17 (3), 154(2013).</li>
<li>Costa, A. A., Morato, S., Roque, A. C., Tin ós, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+computational+model+for+exploratory+activity+of+rats+with+different+anxiety+levels+in+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A computational model for exploratory activity of rats with different anxiety levels in elevated plus-maze.</a> Journal of Neuroscience Methods. 236, 44-50 (2014).</li>
<li>Liu, Z., Wu, Y., Liu, T., Li, R., Xie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+regulation+in+a+rat+model+of+exercise-induced+chronic+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Serotonin regulation in a rat model of exercise-induced chronic fatigue.</a> Neuroscience. 349, 27-34 (2017).</li>
<li>Foley, T. E., Fleshner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroplasticity+of+dopamine+circuits+after+exercise%3A+implications+for+central+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroMolecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neuroplasticity of dopamine circuits after exercise: implications for central fatigue.</a> NeuroMolecular Medicine. 10 (2), 67-80 (2008).</li>
<li>Leite, L. H., Rodrigues, A. G., Soares, D. D., Marubayashi, U., Coimbra, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+fatigue+induced+by+losartan+involves+brain+serotonin+and+dopamine+content%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+%26+Science+in+Sports+%26+Exercise%22%5BJournal%5D)">Central fatigue induced by losartan involves brain serotonin and dopamine content.</a> Medicine & Science in Sports & Exercise. 42 (8), 1469-1476 (2010).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

MMPM מיועד במקור חסך שינה9. חולדות הן פצח מיכל מים עם פלטפורמות קבוע בתחתית. מונע על ידי הפחד האינסטינקטיבי של מים, חולדות יישאר לעמוד על הפלטפורמות, מתרחשת ללא שינה. המחקר מראה כי שעות שונות של חוסר שינה להוביל שינויים שונים עכברוש התנהגות ומצב רוח, כולל זיהוי לקות10, רגשות שליליים11, ועייפות במרכז. יש חוקרים להוכיח כי מניעת שינה כרונית עם השיטה פלטפורמה אחת (SPM) יכול לגרום לעייפות המרכזי, עם זיהוי לקות והחברה הפרעות12. מחקר...

עייפות היא אחד הגורמים העיקריים המאיימים על בריאות האדם1. בעשרות השנים האחרונות, מחקרים שונים הוכיחו כי עייפות הוא המופעלות באופן עקיף אבל מונחה מרכזי, תמיד מלווה עם הפרעות רגשיות, קוגניטיביות. פיזיולוג איטלקי א Mosso הציע לראשונה את המילה עייפות מרכזית2. זה מוגדר בדרך כלל מוגבל פעילות התנדבותית, קוגניציה ירידת ערך עקב תפקוד לקוי של הדחף התמסורת של מערכת העצבים המרכזית (CNS)3. לעומת עייפות שרירים היקפית, עייפות המרכזי מדגיש שינויי מערכת העצבים, כמו גם בהפרעות רגשיות/התנהגותיות הסוגר כולל דיכאון, חרדה, קוגניציה ליקוי של אובדן זיכרון. מחקר אחד מראה כי גורמים רבים יכול לגרום עייפות המרכזית, בין אילו פעילות פיזית מוגזמת, מתח נפשי הם די הכרחית4. באשר בפתוגנזה, תיאוריות כמו טריפטופן-kynurenine מסלול השערה5 מסבירות שינויי מסלולים מסוימים; עם זאת, מחקרים מעמיקים יותר נדרשים עדיין לחשוף את מתאמים המרכזי-ההיקפית של עייפות המרכזית.
כמו המנגנון הבסיסי של עייפות המרכזי הוא עדיין לא ברור, במודל חיה יעיל הוא די חשוב למחקר נוסף. הדגמים עייפות הקיימים הם בעיקר המושרה על ידי פעילות גופנית מוגזמת, כמו הליכונים6 ו שחייה שנטענו משקל7, עם חשש קטן על גורמים נפשיים. כדאי לדמות הפיתוח של מרכזי עייפות, הקבוצה שלנו פיתח מודל עכברוש עם MMPM. במהלך התהליך מידול, חולדות יישאר לעמוד על פלטפורמות צר בתיבת פלטפורמה מרובות במשך שעות ארוכות כולל חלק הזמן לישון. שונים של פעילות גופנית מוגזמת מודלים, המודל MMPM משתמש מניעת שינה חלקי כגורם נפשי תמורת זה מורכב בפתוגנזה של עייפות המרכזית.
מודל הערכה, אנו משתמשים הבדיקות OFT ו- EPM לקבוע חרדה רוח ואת פעילות התנדבותית. הבדיקה ES מבוצע כדי למדוד את ביצועי השרירים ההיקפיים. בנוסף, אנו לקחת את המוח של החולדה, לזהות דופמין (DA) / סרוטונין (5-HT) בתוכן שני hypothalamuses לבחון את ההבדלים נוירוטרנסמיטר מרכזי.
פרוטוקול שיובאו להלן נועד המודל המרכזי עייפות המושרה על ידי פעילות גופנית חוזרת ונשנית, חוסר שינה, מחקה מצב שכיח בחיי האדם. עם זאת, על-ידי התאמת משך מודל, זה יכול לשמש בתחומים רבים אחרים, כמו מחקרי תצפית ומתח שינה. בעתיד מחקר, אנו מקווים כי מודל זה יעזור לגלות עוד שינויים CNS וקשריהם עם מערכת היקפיים, כדי לחשוף את המנגנון הפתוגנזה של עייפות המרכזית.

<table><tbody><tr><td>התאמה אישית של מיכל מים למניעת שינה מרובת פלטפורמות</td><td>, הוא מסופק על ידי המעבדה הנוירו-אימונולוגית של אוניברסיטת בייג'ינג לרפואה</td><td></td> סינית <td>110 ס"מ x 60 ס"מ x 40 ס"מ. יש 15 פלטפורמות קטנות מפלסטיק בתחתית. הפלטפורמה הקטנה בקוטר 6.5 ס"מ ובגובה 8 ס"מ</td></tr><tr><td>חולדות Wistar</td><td>בייג'ינג וויטונג ליהואה מספר רישיון של חברת טכנולוגיית בעלי חיים ניסיוניים</td><td>SYXK (בייג'ינג) 2016-0011</td><td>השתמש ב-32 חולדות זכרים בריאים של Wistar, בני 8 שבועות (200-210 גרם)</td></tr> <tr><td>Agilent 1100LC כרומטוגרף נוזלי בעל ביצועים גבוהים&nbsp;</td><td>אג'ילנט</td><td>&nbsp; G1379A, G1311A, G1313A, G1316A&nbsp;</td><td>&nbsp; G1379A, משאבה כרומטוגרפית מסוג G1311A, דגימה אוטומטית G1313A, תיבת טמפרטורת עמודה G1316A</td></tr><tr><td>גלאי אלקטרוכימי עשור II SDC אלקטרודה אלקטרוכימית</td><td>של חברת</td><td></td> ANTEC ההולנדית<td>, אלקטרודת ייחוס Ag / AgCl, תחנות עבודה (Clarity CHS)</td></tr> <tr><td>צנטריפוגת קירור במהירות גבוהה Biofuge Stratos</td><td>HERAEUS</td><td></td><td></td></tr><tr><td>VCX130 מכשיר שבירה קולי</td><td>SONICS</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ACS-ZEAS בקנה מידה אלקטרוני</td><td>פיתוח טכנולוגיית Phos, בייג'ינג.</td><td></td><td>משקל חולדות השקילה יכול להיות מדויק עד 0.1 גרם.</td></tr><tr>התאמה אישית של <td>תיבת שדה פתוח</td><td>, היא מסופקת על ידי המעבדה הנוירו-אימונולוגית של אוניברסיטת בייג'ינג לרפואה</td><td></td> סינית <td>קופסת עץ של שדה פתוח&nbsp; 100 ס"מ על 100 ס"מ על 40 ס"מ, בתוך הקיר והתחתון כמו האפור. החלק התחתון מחולק ל-25 ריבועים שווים בשטח, שכל אחד מהם הוא 20 ס"מ על 20 ס"מ, ו-16 הרשתות לאורך הקיר החיצוני הן החיצוניות, ו-9 הרשתות האחרות הן מרכזיות. המצלמה מותקנת מעל החציון.</td></tr><tr><td>מבוך פלוס מוגבה</td><td>בייג'ינג zhongshi dechuang טכנולוגיה פיתוח ושות' בע"מ.</td><td></td><td>הזרועות הפתוחות והזרועות הסגורות של הצלב מורכבות מ-30 ס"מ על 5 ס"מ על 15 ס"מ, והאזור המרכזי הוא 5 ס"מ על 5 ס"מ, עם מצלמה המותקנת מעל המרכז וגובה 45 ס"מ.</td></tr><tr><td>דלי שחייה של חולדות.</td><td>Zhenhua ציוד מכשור ביולוגי ושות', בע"מ. אנהוי, סין.</td><td></td><td>נפח תוף הפלסטיק הוא 70 ס"מ על 30 ס"מ על 110 ס"מ, המשמש לשחייה בחולדות.</td></tr><tr><td>מדחום</td><td>Shiya מכשיר ושות', בע"מ, צ'אנגג'ואו, סין.</td><td></td><td>שליטה בטמפרטורת</td></tr><tr><td>המים משאבת מים קטנה</td><td>Xincheng טכנולוגיה ושות', בע"מ, צ'נגדו, סין.</td><td></td><td>משמש להתנהגות מיכל מים ושחייה.</td></tr><tr><td>תוכנה התנהגותית Ethovition3.0.</td><td>Nuldus, הולנד</td><td></td><td>ניתוח מדידה של סרטוני התנהגות חולדות.</td></tr></tbody></table>

חולדה מודל מרכזי עייפות בעזרת ששונה שיטת פלטפורמה מרובים

A Rat Model of Central Fatigue Using a Modified Multiple Platform Method

במאמר זה הצגנו מודל עכברוש של מרכזי עייפות בעזרת שונה פלטפורמה מרובים שיטה (MMPM). תיבת מרובים פלטפורמה תוכנן כמו מיכל מים עם פלטפורמות צר על החלק התחתון. העכברושים דגם היו לשים לתוך הטנק, עמד על הבמות במשך 14 h (18:00-8:00) ליום 21 ימים רצופים, עם קבוצת בקרה הריק להגדיר עבור חדות. בסוף מידול, חולדות בקבוצה מודל הראתה ברור מראה עייף. כדי להעריך את הדגם, ביצענו מספר בדיקות התנהגותית, כולל במגרש הפתוח (למוד), לבחון את גבוהות פלוס מבוך (EPM) בדיקה של הבדיקה ממצה שחייה (ES). התוצאות הראו כי חרדה, ליקוי קוגניציה מרחבית, עניים שריר ביצועים ולאחר שנדחתה פעילות התנדבותית הציג בחולדות דגם לאשר את האבחנה של עייפות המרכזית. שינויים של המוליכות העצבית המרכזית גם לאמת את התוצאה. לסיכום, המודל בהצלחה מדומה עייפות המרכזית ולאחר מחקר עתידי עם המודל עשוי לעזור לחשוף את מנגנון פתולוגי של המחלה.

נתאר מודל עכברוש של מרכזי עייפות בעזרת MMPM. 24 Wistar חולדות מחולקים באופן אקראי את קבוצת הביקורת וקבוצת מודל, עם 12 חולדות בכל קבוצה. המנגנון דגם מיועד מיכל מים עם פלטפורמות צר על החלק התחתון (איור 1). מודל חולדות לעמוד על הבמות במשך 14 שעות ליום, כולל זמן שינה חלקית, למשך 21 יום (איור 2).
מבחנים התנהגותיים מבוצעות לאחר דוגמנות כדי להעריך את השינויים הרגשיים והגופניים...

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול להציג מודל עכברוש של מרכזי עייפות בעזרת שונה פלטפורמה מרובים שיטה (MMPM).

In this article, we introduced a rat model of central fatigue using the modified multiple platform method (MMPM). The Multiple Platform box was designed ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בבניית המודל של עייפות מרכזית. למשל, כיצד לייצר עייפות מהיבטים פיזיים ופסיכולוגיים כאחד וכיצד להעריך אותה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שילוב גורמים מנטליים בשיטת פלטפורמות מרובות שונה כדי לדמות טוב יותר את הופעת העייפות המרכזית.הגענו לרעיון לראשונה כששמנו לב לקשר ההדוק בין מחסור בשינה לסירוגין לעייפות מרכזית. ניסינו שעות וימים שונים של חסך כדי לגרום לעייפות מרכזית, ולבסוף גילינו ש-14 שעות על פני 21 ימים היו הדפוס הנכון. המודל מראה תוקף טוב בעייפות מרכזית, וניתן להשתמש בו במחקרים עתידיים כדי לסייע בסקירת המנגנון הבסיסי של המחלה.התחל בבניית מיכל פלסטיק אטום ללא כיסוי. תקן 15 פלטפורמות עגולות בתחתית המיכל, המופצות בצורה מסודרת בשלוש שורות וחמש עמודות. השאירו מספיק מקום בין כל פלטפורמה, בערך 13 סנטימטרים בין שורות ו-10 סנטימטרים בין עמודים.התקן ברז בשקע המים בצד הצדדי של המיכל. לבסוף, הכינו כיסוי רשת חוט ברזל למיכל, ועליו תלויה קופסת מזון. התחל במספור שורשי זנב החולדות עם טוש.שקלו את החולדות, למעט הקלות או הכבדות במיוחד, וחלקו את השאר באופן אקראי לקבוצות המודל והביקורת. הכניסו את החולדות בעדינות לכלובים הנקיים, ואפשרו להן להתאקלם במעבדה למשך שלושה ימים לפחות. לספק אספקת מים ומזון מספקת.התחל בהנחת המיכל על שירות שטוח, ולאחר מכן מלא בשבעה סנטימטרים של מים חמים, כסנטימטר אחד מתחת לפלטפורמה שטוחה. לאחר מכן הכניסו מספוא ומים ליום אחד לקופסת המזון, ותלו אותם על הכיסוי. לאחר מכן, הוציאו את קבוצת החולדות מהכלוב בזנב, והכניסו אותן בעדינות למיכל.שיגרו את כל החולדות למים במקום לפלטפורמות כדי להניע את הפחד שלהם ממים. ודאו שכל חולדה מקבלת פלטפורמה לעמוד עליה, בעוד החולדות מקבוצת הביקורת נשארות בכלובים המקוריים שלהן עם מספיק מזון ומים. לאחר מכן, כסו את המיכל ופקחו על החולדות.לאחר 14 שעות, הוציאו את חולדות הדגם מהמיכל, וייבשו את שיערן במייבש. שימו לב לזנבות העכברושים אם הוא דוהה. לאחר מכן, החזירו את החולדה לכלוב המקורי עם אוכל ומים.לבסוף, שטפו את המיכל ופתחו את הברז כדי להזרים את הביוב. לאחר מכן, יש לעקר את המיכל בתרסיס אתנול של 75%. תוצאות מבחן בשדה פתוח מצביעות על כך שבהשוואה לקבוצת הביקורת, יש ירידה משמעותית הן בתנועת הגידול והן במהירות הממוצעת של פעילות רצונית בחולדות מודל.מבחן המבוך המוגבה פלוס מראה כי 21 ימים של דוגמנות הפחיתו הן את הכניסות והן את משך הזמן בזרוע הפתוחה באופן משמעותי בהשוואה לקבוצת הביקורת, בעוד שהייתה עלייה באלה בזרוע הקרובה. מבחן השחייה הממצה הצביע על כך שמשך השחייה של קבוצת המודל קצר משמעותית מקבוצת הביקורת. לבסוף, תוצאות אלו מצביעות על כך שהדופמין בהיפותלמוס, כמו גם היחס בין דופמין לסרוטונין, יורד משמעותית בקבוצת המודל בהשוואה לקבוצת הביקורת, בעוד שתכולת הסרוטונין עולה משמעותית.לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבנות מיכל מרובה פלטפורמות וליישם אותו במודל העייפות המרכזי שלך. זהו מודל לא פולשני, שקל לשלוט בו. בזמן שמנסים את המודל הזה, זה קריטי לפקוח עין על השאר, מכיוון שהם די אגרסיביים בשבועיים הראשונים, והפציעה עלולה להתרחש.למרות שמודל זה נועד לספק תובנה לגבי עייפות מרכזית, ניתן ליישם אותו גם על מחלות אחרות על ידי שילוב גורמים או התאמת משכי המודל, כגון עייפות ניווט ודיכאון.

a-rat-model-central-fatigue-using-modified-multiple-platform

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

עייפות היא סימפטום נפוץ, לא מטופל ולעתים קרובות לא מובן היטב במחלות והפרעות רבות. בדיקות פרה-קליניות חדשות של עייפות עשויות לסייע בשיפור ההבנה הנוכחית והטיפול העתידי בעייפות. לשם כך, הפרוטוקול הנוכחי מספק אמצעי חדשני למדידת התנהגות דמוית עייפות בעכבר.

מבחן עייפות הליכון: A Assay פשוט, תפוקה גבוהה של התנהגות העייפות דמוית עבור העכבר

מחקר זה מציג ריצה חדשנית מערכת ניידות חית גלגל מבוססת לכמת פעילות גופנית יעילה אצל חולדות. Testbed עכברוש ידידותי בנוי, באמצעות עקומת תאוצה אדפטיבית מוגדר מראש, ואת מתאם גבוה בין שיעור המימוש היעיל ואת נפח האוטם מצביע על הפוטנציאל של הפרוטוקול לניסויים למניעת שבץ.

מנגנון גלגלים מבוססי ריצה חדשני עבור ביצועי הדרכת עכברוש משופרים

אנו מתארים שיטה באמצעות הקרנה היקפית ממוקדת כדי לגרום התנהגות כמו-עייפה בעכברים. מינון ההקרנה לא הקטלני שנבחר מוביל לירידה של שבוע בפעילות ריצת גלגל מרצון.

במודל עכבר של עייפות הנגרם על ידי הקרנה ההיקפית

אנו מספקים פרוטוקול להערכת התנהגות מוטורית באמצעות סוללת בדיקה התנהגותית בחולדות לאחר פציעת ריסוק עצבים סיאטית.

הערכה רב-גורמית של התנהגות מוטורית בחולדות לאחר פציעת ריסוק עצבית סיאטית חד-צדדית

מאמר זה מציג את התגובות המורפומטריות ואת תוצאות ביצועי האימון של פרוטוקול אימון אינטרוולים בעצימות גבוהה (HIIT) במודל של חולדות Sprague-Dawley של השמנת יתר הנגרמת על ידי דיאטה. מטרת פרוטוקול זה הייתה למקסם את עצימות האימון ולקבוע את התגובות הפיזיולוגיות ל-HIIT בחולדות רזות והשמנות.

אימון אינטרוולים כרוני בעצימות גבוהה ומודל השמנת יתר הנגרמת על ידי דיאטה כדי למקסם את מאמץ הפעילות הגופנית ולגרום לשינויים פיזיולוגיים בחולדות

פרוטוקול זה מתאר מודל לחץ קל כרוני בלתי צפוי (CUMS) לדיכאון המבוסס על תיאוריה רפואית מונגולית, יחד עם שיטות לאימות מבחנים התנהגותיים.

לחץ כרוני בלתי צפוי קל בחולדות מבוסס על התרופה המונגולית

מחקר זה העריך את היעילות נוגדת הדיכאון של Qiangzhifang במודל עכברוש של דיכאון כרוני הנגרם על ידי מתח והבהיר את השפעתו הרגולטורית על מסלולי HIF-1 ו-JAK-STAT על ידי פרמקולוגיה של רשת וניתוח עגינה מולקולרית.

פרמקולוגיה ברשת ואימות המנגנונים נוגדי הדיכאון של צ'יאנגז'יפאנג במודל עכברוש דיכאון המושרה על ידי ריסון כרוני

שיפורים אחרונים בתכשירים אורגנוטיפיים של פרוסות מוח אפשרו את ניצולם ליישומים ביוטכנולוגיים. פרוסות אורגנוטיפיות שומרות על מאפיינים מבניים מקומיים של ביולוגיה in vivo, כולל קשרים סינפטיים פונקציונליים. כאן אנו מציגים שיטת אספקה ביוליסטית רגיוסלקטיבית לתיוג ומניפולציה גנטית של פרוסות אלה.

Regioselective Biolistic המיקוד בOrganotypic פרוסות המוח באמצעות אקדח ג&#39;ין השתנה

איתות נרתיקי אפרנטי מעביר מידע חשוב למערכת העצבים המרכזית מקולטנים הממוקמים באיברי הבטן ובית החזה. גרעיני ה-nodose של עצבי הנרתיק מכילים סוגים רבים של קולטנים המווסתים את פעילות הנרתיק. פרוטוקול זה מתאר שיטה של הזרקה מקומית של נוירוכימיקלים לתוך גרעיני הנודוזה.

שיטה של ​​הזרקת Nodose הגרעינים בSprague-Dawley עכברוש

מאמר זה מספק תיאור מפורט על תהליך הייצור של אלקטרודה עצב ממשק שטוח קשר בצפיפות גבוהה (FINE). אלקטרודה זה ממוטב עבור הקלטת מגרת פעילות עצבית באופן סלקטיבי בתוך עצבים היקפיים.

המצאה של צפיפות לתקשר גבוהה, אלקטרודות עצב שטוח ממשק עבור יישומי הקלטת הגירוי

למדו לבנות מודל חולדה לעייפות מרכזית בשיטת הפלטפורמות המרובות המשופרת. הפרוטוקול משלב גורמים נפשיים ופיזיים לחקירת מנגנוני העייפות והשפעותיו של חסר שינה על המודל.

חולדה מודל מרכזי עייפות בעזרת ששונה שיטת פלטפורמה מרובים

גלה סרטונים נוספים