5 במרץ 2018
חסימות מעיים הם סתימה חלקית או מלאה של המעי העלולה לגרום כאבי בטן, בחילות, הקאות, מניעת המעבר של צואה. ההליך ליצירת obsructions חלקי המעי בעכברים זה אמין בלימוד המנגנונים צמיחת תאים פתולוגיים ומוות במעי.
המטרה הכוללת של הליך כירורגי זה היא לייצר באופן אמין ועקבי חסימות מעיים בעכברים המקלים על חקר השינויים המולקולריים והפנוטיפיים ברקמת מערכת העיכול המתרחשים בתגובה לחסימות. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מערכת העיכול סביב המנגנונים התאיים העומדים בבסיס השינויים הפנוטיפיים הנובעים מחסימת מעיים. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא אמינה, ניתנת לשכפול וחסכונית.
ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על הטיפול בחסימת מעיים מכיוון שהם מחקים מצבים פנוטיפיים הנצפים בפתולוגיות אנושיות הנגרמות על ידי חסימת מעיים. ידגימו את ההליך הזה סה און הא, פוסט-דוקטורנט, ולאי ווי, סטודנט לתואר שני, שניהם מהמעבדה שלנו. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטה בבוהן, מרחו משחה על עיני החיה והניחו את העכבר על כרית חימום.
הסר את השיער מהבטן בעזרת קרם אפילציה ונקה את העור החשוף עם אתנול 70%. יש לחטא את אתר הניתוח בתמיסת פובידון-יוד ולעטוף את החיה בנייר סטרילי בגודל 25 על 50 ס"מ עם פתח של 2.5 על 2.5 ס"מ לאזור הניתוח. אבטח את הווילון ברצועות סטריליות בגבולות הפתח והעור והשתמש בלהב אזמל מספר 15 כדי לבצע חתך עור אורכי של שלושה סנטימטרים.
בעזרת מלקחיים ומספריים כירורגיים יש להפריד בזהירות את העור משכבת השרירים מבלי לחתוך את הרקמה ולאתר את הלינאה אלבה. לאחר מכן השתמש במלקחיים מיקרו ובמספריים כדי לחתוך שני סנטימטרים לאורך הלינאה אלבה כדי לחשוף את החלל התוך-צפקי ולאתר בזהירות את הצקום. השתמש במלקחיים המיקרו כדי להזיז לאט ובעדינות את הצקום, המעי הגס הפרוקסימלי והאילאום מתוך החלל התוך-צפקי אל הווילון הסטרילי ולהרטיב מיד את רקמת המעי עם גזה ספוגה במי מלח סטריליים 0.9%.
אתר את המזנטריה בין האילאום למעי הגס הפרוקסימלי ובצע חתך של סנטימטר אחד במזנטריה במקביל וממש מתחת לאילאום תוך הקפדה להימנע מחיתוך כלי דם כלשהו. חותכים לאורך כדי לפתוח את הכלי המזנטרי ומשתמשים במיקרו מלקחיים כדי לפתוח טבעת סיליקון מעוקרת בגודל מתאים. הכנס קצה אחד של הטבעת דרך החתך והביא את קצה הטבעת למגע עם הקצה הראשון כדי להחזיר את המכשיר לצורתו המקורית.
ודא שהטבעת מקיפה לחלוטין את האילאום וסגור את הטבעת בתפר. החתכים במזנטריה צריכים להיות גדולים מספיק כדי שהטבעת תתאים, אך קטנים מספיק כדי שלא ייחתכו כלי דם. כמו כן, ודא שהטבעת מונחת על האילאום, לא על המעי הגס.
החזירו בזהירות את המעיים למיקומם האנטומי המקורי והשתמשו בתפר נספג בתפר רציף פשוט כדי לסגור את שכבת השרירים לאורך הלינאה אלבה. נקה כל דימום עם גזה סטרילית ספוגה במי מלח 0.9% והשתמש בתפר ניילון חדש ותפר רציף פשוט כדי לסגור את העור. לאחר מכן יש לחטא את מקום הפצע עם פובידון-יוד ולהזריק אנטיביוטיקה לפני הנחת החיה בשער התחממות עם ניטור עד לשכיבה מלאה.
בניסוי זה, המעי הדק התמלא חלקית והתנפח שמונה ימים לאחר ניתוח חסימה חלקית והתמלא במלואו והתנפח לאחר 13 ימים לאחר ניתוח חסימה חלקית בהשוואה לבעלי חיים שעברו ניתוח דמה. יתר על כן, היווצרות כדורי צואה במעי הגס של עכברים ביום 8 ו-13 לאחר ניתוח חסימה חלקית הופחתה בהשוואה לזו של חיות הביקורת. שכבת השריר החלק של האילאום ממש במעלה הזרם של הטבעת עברה היפרטרופיה שמונה ימים לאחר ניתוח חסימה חלקית עם היפרטרופיה נוספת שנצפתה ביום ה-13.
תאי השריר החלק גדלו בקצב מהיר בהדרגה בכל שלוש שכבות הרקמה בשמונה ו-13 ימים לאחר ניתוח חסימה חלקית, כפי שהוערך על ידי ניתוח אימונוכימי, בעוד שתאי הביניים של קחאל התנוונו בתוך השכבות התוך-שריריות והבין-שריריות. תת-קבוצות של תאים אלפא חיוביים לקולטן גורם גדילה שמקורו בטסיות דם הידועות גם בשם תאי אלפא PDGFR עוצבו מחדש באופן דינמי בתוך השכבות הבין-שריריות של עכברי חסימה חלקית עם צמיחה שנצפתה שמונה ימים לאחר הניתוח שהתנוונה עד היום ה-13. בנוסף, תאים עצביים אבדו באופן משמעותי גם באזורים הבין-שריריים והתוך-שריריים של עכברים עם חסימה חלקית בשני הימים השמיני וה-13 לאחר הניתוח.
לאחר השליטה, יש להשלים טכניקה זו תוך 30 דקות כדי להבטיח את הישרדות העכבר. בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לטפל ברקמה במהירות ובעדינות. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו בדיקת מגמות במערכת העיכול כדי לענות על שאלות נוספות לגבי האופן שבו חסימות משנות תנועתיות מעיים.
לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום חקר מערכת העיכול לחקור את ההשלכות של חסימת מעיים בעכברים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד למקם במהירות ובצורה נכונה טבעת סביב אילאום העכבר ליצירת חסימה חלקית במעי. אל תשכח שעבודה עם כלים ומחטים כירורגיים עלולה להיות מסוכנת ביותר אז נקוט באמצעי הזהירות המתאימים.
כמו כן, הקפידו ללבוש כפפות סטריליות ולתרגל טכניקות אספטיות בזמן ביצוע הליך זה.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מאמר זה מציג הליך כירורגי שנועד ליצור חסימות מעיים בעכברים, דבר החיוני לחקר השינויים המולקולריים והפנוטיפיים ברקמה של מערכת העיכול. השיטה היא אמינה, ניתנת לשחזור וכלכלית, מה שהופך אותה לכלי בעל ערך עבור חוקרים בתחום.
מודל כירורגי זה מאפשר לחוקרי ביו-פארמה לחקור היפרטרופיה של השריר החלק במעי ושכתוב תאי (cellular remodeling) בסביבה מבוקרת in vivo, ובכך הוא תומך בהסרת סיכונים מכניסטית של מטרות טיפוליות למחלות גסטרו-אינטסטינליות חסימתיות. באמצעות שכפול שינויים פנוטיפיים הנצפים בחסימות מעיים בבני אדם, המודל מספק ערך ניבוי לתיקוף מטרות ופיתוח בדיקות בשלבי גילוי מוקדמים. מידת המהימנות שלו ושיעור התמותות הנמוך משפרים את ההמשכיות התרגומית (translational continuity) משלב הגילוי ועד לתיקוף פרה-קליני.
המודל משתלב ברצף הגילוי, החל מבדיקת היפותזות למטרה, דרך זיהוי מובילים (lead identification) ועד להערכת יעילות פרה-קלינית, ובמיוחד עבור תרפויטיקה המכוונת למערכת העיכול (GI).