Name: דגם העכבר של חסימת מעיים חלקית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-05T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 33 s
Description: למדו כיצד ליצור חסימות מעיים חלקיות בעכברים לחקר שינויים מולקולריים ופנוטיפיים ברקמות מערכת העיכול. שיטה זו אמינה, ניתנת לשחזור וחסכונית למחקרים בתחום הגסטרואנטרולוגיה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים רוצה להודות בנימין J Weigler, D.V.M., Ph.d., מנדוויל וולט, D.V.M. (חיה משאבים & הקמפוס השתתפות וטרינר, אוניברסיטת נבאדה, רינו) עבור שירותיהם בעלי חיים מצוינת בתנאי העכברים, כמו גם לעצתם על ניתוחים.

להלן כללי התנהגות אושרה על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ו להשתמש הוועדה (IACUC)-המשאבים בעלי חיים אוניברסיטת נבאדה-רינו (אולטימה), תואם כל המוסדיים הנחיות אתיות לגבי מחקר בבעלי החיים.
1. בעלי חיים.
<ol><li>להשיג עכברים C57BL/6 בוגרת (4-6 שבועות) במשקל בין 20-30 g. House המושבה של עכברי מעבדה במתקן בעלי חיים מרוכזת בשעה אולטימה משאבים בעלי חיים.</li>
</ol>2. ניתוח חסימה חלקית
הערה: הניתוחים מתבצעים בחדר המוקדש ניתוחים. כל מכשירי ניתוח הן בלוק לפני הניתוח. השמלות כירורגי סטרילי וכפפות לענידה על ידי כל אנשי הצוות בחדר ניתוח בכל עת.
<ol><li>הכנה העכבר כירורגי<ol>
<li>בדוק את מערכת משלוח הרדמה כדי להבטיח אספקת החמצן, איזופלוריין היא נאותה בהליך. הפעל את אספקת החמצן. להפעיל את זרימה הגז להתאים אותו ל 500-1000 מ ל לדקה במקום החיה בבית הבליעה אינדוקציה, חותם העליון.</li>
		<li>הפעל את מכשיר אידוי איזופלוריין 5%-ל, ונטר החיה עד שיהפוך שכיבה. לעבור את מערכת משלוח הרדמה קונוס האף.</li>
		<li>ריקון התא אינדוקציה של דלק משקעי עם חמצן, ולאחר מכן לבטל את הקו לשכת הגיוס תוך שמירה על קו חרוט האף פתוח.</li>
		<li>להסיר את החיה מן החדר ומניחים בזהירות משחה אופטלמולוגיות על העיניים של החיה.</li>
		<li>למקם את האף חרוט על משטח חם preheated כאשר הגז ממשיך לזרום.</li>
		<li>לשנות את זרימת חמצן 100-200 מ לדקה, עם 2-3% איזופלוריין. אם בעל החיים מתחיל לזוז, gentlyrestrain החיה עם אצטרובל האף על עד מורדם לחלוטין שוב.</li>
		<li>פקח על הנשימה ועל בתגובה לגירוי במהלך ההליך ולהתאים את אחוז איזופלוריין (2-5%) לפי הצורך. רמת ההרדמה בעלי חיים מנוטרת על ידי חוסר של הבוהן קמצוץ רפלקס לפני הניתוח מתבצע.</li>
		<li>להזריק תרופות הכאב (הבופרנורפין, µg/1g של משקל הגוף) intraperitoneally מן האתר החתך.</li>
		<li>להחיל קרם להסרת שיער על הבטן בעזרת ספוגית כותנה נקי. תן את קרם לשבת למשך 3-5 דקות על העכבר, ואז להסיר את שיער באמצעות מטליות גזה וכותנה. חזור על שלב זה עד כל השיער הוסר מן הבטן של העכבר.</li>
		<li>לנקות את העור עם אתנול 70% באמצעות מטליות גזה וכותנה. החל swabsticks או povidone יוד פתרון כדי לנקות את הבטן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>ניתוח חסימה חלקית<ol>
<li>לעטוף באתר כירורגית באמצעות נייר סטרילי 25 x 50 ס מ 2.5 x 2.5 ס"מ פותח באמצע לאזור הניתוח. אבטח את הכיסוי ותאבטחי לבעל-החיים על-ידי הצבת רצועות סטרילי-גבולות פתיחה של העור.</li>
		<li>עושים ~3.0 ס מ בטן חתך longitudinally באמצעות אזמל להב מס 15, המבטיח כי רק את העור הוא חרות והימנעות לחתוך השכבה musculoperitoneal בשלב זה.</li>
		<li>בעזרת מלקחיים ומספריים כירורגי, הפרד בזהירות את העור מהשכבה musculoperitoneal מבלי לגרום כל חתך על שכבת musculoperitoneal. לאחר השכבות הופרדו במידה מספקת (כ 1 ס"מ על 4 ס"מ), לזהות את לינאה אלבה על שכבת musculoperitoneal ו לחתוך ~ 2 ס מ לאורך linea alba לחשוף את חלל בקרום הבטן בעזרת מיקרו-מלקחיים ומספריים.</li>
		<li>בזהירות לאתר ולזהות את המעי האטום. לאט ובעדינות להסיר את המעי האטום חלל בקרום הבטן עם מיקרו-מלקחיים, מביא את המעי הגס הפרוקסימלית ואת מעי עם המעי בחוץ על גבי הכיסוי ותאבטחי סטרילי. מיד להרטיב את רקמת המעי עם גזה ספוגים מלוחים סטרילית 0.9% ולשמור על רקמות חשופות לחלח בכל עת בזמן שהם מחוץ חלל הבטן.</li>
		<li>לאתר ולזהות את מצע המעי בין מעי הגס הפרוקסימלית. לעשות חתך (~ 1 ס מ) מקבילים, מתחת, מעי, מצע המעי ולהימנע חיתוך להערכת כלשהו.</li>
		<li>לקחת טבעת סיליקון בלוק (6 מ מ אורך, קוטר חיצוני 4 מ מ, קוטר פנימי 3.5 מ מ). חותכים longitudinally כדי לפתוח את הצנרת ולפתוח את הטבעת עם מיקרו-מלקחיים.</li>
		<li>הכנס קצה אחד של הטבעת נפתח דרך החתך הרקמה מצע המעי. להחזיר את הטבעת לצורת טבעת הושלמה על ידי הבאת קצה אחד עם השני, עם מעי מוקף את הטבעת.</li>
		<li>להבטיח טבעת סיליקון לחלוטין המקיפה מעי, לסגור את הטבעת בתפר ומניחים בזהירות את המעיים בחזרה בחלל בקרום הבטן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>ניתוח סגירת מעגל<ol>
<li>ביצוע פשוט בתפר רצוף על השכבה musculoperitoneal לאורך linea alba לסגור את musculoperitoneal פצע בתפר שנספג. עם השלמת התפר, לנקות את מדממת עם גזה ספוגים מלוחים סטרילית 0.9%.</li>
		<li>לחלוטין לסגור את הפצע, בתפר ניילון נפרדים, לבצע בתפר רצוף פשוטה על העור.</li>
		<li>לאחר שני תפרים הושלמו, לנקות את הפצע עם swabstick החדש או povidone יוד.</li>
		<li>Intraperitoneally מזריקים אנטיביוטיקה (גנטמיצין, μL 150 לכל העכבר מבוסס על 20-30 גרם משקל).</li>
		<li>לאחר השלמת הליך, כבה את מכשיר אידוי איזופלוריין ולאפשר את החיה לנשום רק זורם חמצן עד מתחילים צובר התודעה.</li>
		<li>לאחר החיה ער, למקם את החיה אזור שחזור נפרדת עם תמיכה תרמי עד החלים לחלוטין.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. פעולה-מאוחרת התבוננות.
<ol><li>לאחר סיום הניתוח, להעביר את החיות אינקובטור בחדר התאוששות שבו הטמפרטורה והלחות מוסדר. מעקב החיות במשככי כל 15 דקות עבור השעה הראשונה ואז כל 30 דקות במשך השעה השנייה בזמן בעלי החיים בחממה.</li>
	<li>ברגע התצפית שנקבעו תושלם, להעביר את החיות לכלוב נפרדים משלהם, לפקח עליהם מדי יום סימנים קליניים של כאב18, וכדי להבטיח כי הפצע כירורגי הוא מחלים כראוי ללא כל סימנים של סיבוכים ( התבקעות) הנוכחי.</li>
</ol>

<ol><li>Millat, B., Guillon, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiopathology+and+principles+of+intensive+care+in+intestinal+obstructions%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Prat%22%5BJournal%5D)">Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions.</a> Rev Prat. 43, 667-672 (1993).</li>
<li>Tonelli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+developments+in+Crohn%27s+disease%3A+solution+of+doctrinal+mysteries+and+reinstatement+as+a+surgically+treatable+disease.+1.+The+process+is+not+a+form+of+enteritis+but+lymphedema+contaminated+by+intestinal+contents%5BTitle%5D)+AND+%22Chir+Ital%22%5BJournal%5D)">New developments in Crohn's disease: solution of doctrinal mysteries and reinstatement as a surgically treatable disease. 1. The process is not a form of enteritis but lymphedema contaminated by intestinal contents.</a> Chir Ital. 52, 109-121 (2000).</li>
<li>Limsrivilai, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meta-analytic+Bayesian+model+for+differentiating+intestinal+tuberculosis+from+Crohn%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Meta-analytic Bayesian model for differentiating intestinal tuberculosis from Crohn's disease.</a> Am J Gastroenterol. 112, 415-427 (2017).</li>
<li>Dvorak, D., Adamova, Z., Bar, T., Slovacek, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Internal+hernia+as+a+cause+of+small+bowel+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Rozhl+Chir%22%5BJournal%5D)">Internal hernia as a cause of small bowel obstruction.</a> Rozhl Chir. 96, 34-36 (2017).</li>
<li>Massani, M., Capovilla, G., Ruffolo, C., Bassi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastrointestinal+stromal+tumour+%28GIST%29+presenting+as+a+strangulated+inguinal+hernia+with+small+bowel+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Case+Rep%22%5BJournal%5D)">Gastrointestinal stromal tumour (GIST) presenting as a strangulated inguinal hernia with small bowel obstruction.</a> BMJ Case Rep. , (2007).</li>
<li>Chen, J., Chen, H., Sanders, M., Perrino, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+SRF%2FCArG-dependent+gene+transcription+during+chronic+partial+obstruction+of+murine+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Regulation of SRF/CArG-dependent gene transcription during chronic partial obstruction of murine small intestine.</a> Neurogastroenterol Motil. 20, 829-842 (2008).</li>
<li>Chang, I. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+interstitial+cells+of+Cajal+and+development+of+electrical+dysfunction+in+murine+small+bowel+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Loss of interstitial cells of Cajal and development of electrical dysfunction in murine small bowel obstruction.</a> J Physiol. 536 (Pt 2), 555-568 (2001).</li>
<li>Liu, D. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voltage+dependent+potassium+channel+remodeling+in+murine+intestinal+smooth+muscle+hypertrophy+induced+by+partial+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Voltage dependent potassium channel remodeling in murine intestinal smooth muscle hypertrophy induced by partial obstruction.</a> PLoS One. 9 (2), e86109(2014).</li>
<li>Guo, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Down-regulation+of+hydrogen+sulfide+biosynthesis+accompanies+murine+interstitial+cells+of+Cajal+dysfunction+in+partial+ileal+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Down-regulation of hydrogen sulfide biosynthesis accompanies murine interstitial cells of Cajal dysfunction in partial ileal obstruction.</a> PLoS One. 7, e48249(2012).</li>
<li>Yang, J., Zhao, J., Chen, P., Nakaguchi, T., Grundy, D., Gregersen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interdependency+between+mechanical+parameters+and+afferent+nerve+discharge+in+hypertrophic+intestine+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol-Gastr+L%22%5BJournal%5D)">Interdependency between mechanical parameters and afferent nerve discharge in hypertrophic intestine of rats.</a> Am J Physiol-Gastr L. 310, G376-G386 (2016).</li>
<li>Zhao, J., Liao, D., Yang, J., Gregersen, H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2857539/">Biomechanical remodeling of obstructed guinea pig jejunum.</a> J Biomech. 43, 1322-1329 (2010).</li>
<li>Bowen, E. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22129371">Duodenal Brunner's glade adenoma causing chronic small intestinal obstruction in a dog.</a> J Small Anim Pract. 53, 136-139 (2012).</li>
<li>Bettini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophy+of+intestinal+smooth+muscle+in+cats%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Hypertrophy of intestinal smooth muscle in cats.</a> Res Vet Sci. 75, 43-53 (2003).</li>
<li>Macdonald, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smooth+muscle+phenotypic+plasticity+in+mechanical+obstruction+of+the+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Smooth muscle phenotypic plasticity in mechanical obstruction of the small intestine.</a> J Neurogastroenterol Motil. 20, 737-740 (2008).</li>
<li>Ha, S. E., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28806761">Transcriptome analysis of PDGFRα+ Cells identifies T-types Ca2+ channel CACNA1G as a new pathological marker for PDGFRα+ cell hyperplasia.</a> PLoS One. 12, e0182265(2017).</li>
<li>Park, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+response+factor+is+essential+for+prenatal+gastrointestinal+smooth+muscle+development+and+maintenance+of+differentiated+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Serum response factor is essential for prenatal gastrointestinal smooth muscle development and maintenance of differentiated phenotype.</a> J Neurogastroenterol Motil. 21, 589-602 (2015).</li>
<li>Spencer, N. J., Sanders, K. M., Smith, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migrating+motor+complexes+do+not+require+electrical+slow+waves+in+the+mouse+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Migrating motor complexes do not require electrical slow waves in the mouse small intestine.</a> J Physiol. 553, 881-893 (2003).</li>
<li>Langford, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nat Methods. 7, 447-449 (2010).</li>
<li>Terez, S. D., Notari, L., Sun, R., Zhao, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+smooth+muscle+responses+to+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of smooth muscle responses to inflammation.</a> Neurogastroenterol Motil. 24, 802-811 (2012).</li>
<li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smooth+muscle+hyperplasia%2Fhypertrophy+is+the+most+prominent+histological+change+in+Crohn%27s+fibrostenosing+bowel+strictures%3A+A+semiquantitative+analysis+by+using+a+novel+histological+grading+scheme%5BTitle%5D)+AND+%22J+Crohns+Colitis%22%5BJournal%5D)">Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme.</a> J Crohns Colitis. 11, 92-104 (2017).</li>
<li>Huizinga, J. D., Chen, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+Cells+of+Cajal%3A+Update+on+Basic+and+Clinical+Science%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Gastroenterol+Rep%22%5BJournal%5D)">Interstitial Cells of Cajal: Update on Basic and Clinical Science.</a> Curr Gastroenterol Rep. 16, 363(2014).</li>
<li>Jirkof, P., Touvieille, A., Cinelli, P., Arras, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Buprenorphine+for+pain+relief+in+mice%3A+repeated+injections+vs+sustained-release+depot+formulation%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Buprenorphine for pain relief in mice: repeated injections vs sustained-release depot formulation.</a> Lab Animal. 49, 177-187 (2015).</li>
<li>Spencer, N. J., Dinning, P. J., Brookes, S. J., Costa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+the+mechanisms+underlying+colonic+motor+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Insights into the mechanisms underlying colonic motor patterns.</a> J Physiol. 594, 4099-4116 (2016).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

להדגים כי עכברים שקיבלו את הניתוח פו מעיים בעקביות ובאופן reproducibly לפתח שריר חלק המעי יתר, אשר מחקה חסימת מעיים אנושיים. חסימת מעיים ניתוחים פותחו עבור בעלי חיים שונים, כולל עכברים7, חולדות10, שרקנים11,12 ו חתולים כלבים13. הדגם העכבר של חסימת מעיים יש זמן, עלות, בגודל פנוטיפי יתרונות על פני דגמים אחרים בעלי חיים גדולים יותר. הפיתוח של היפרטרופיה עכברים או חולדות לוקח רק 10-14 ימים1...

חסימות מעיים הם סתימה חלקית או מלאה במעי קטן או גדול אשר מונע מזון מעוכל, נוזלים וגז עוברים דרך המעיים של1. בשל החסימה, החסימה גורם לדפנות כדי להפוך לעבות, שצמצם את לומן2. חסימת מעיים יכולה להתרחש כתוצאה ניתוחי בטן או אגן לגרום היווצרות רקמת אדהזיה בטן או מהפרעות במערכת העיכול כגון מחלות מעי דלקתיות (מחלת קרוהן), דיברטיקוליטיס, בקע, התפתלות המעים, stricture, התפשלות מעיים, עצירות, פקק צואה, חסם מעיים מדומה, סרטן וגידולים3,4,5. חסימות מעיים במקרים אלה לעיתים קרובות להוביל היפרטרופיה של tunica muscularis של המעי6.
פו של לומן המניע distention מעיים, ומגביר את עובי שכבת השריר החלק סביב החסם בתגובה צורך להמשיך הפריסטלטיקה פונקציונלי7,8,9,10, 11,12,13. מודלים חייתיים של פו מעיים פותחו כדי ללמוד היפרטרופיה של השריר החלק עכברים7, חולדות10, שרקנים11, כלבים12ו חתולים13 המתפתחים באופן עקבי היפרטרופיה דומה בתוך שכבות שריר המעי.
דגם העכבר של פו מעיים היא הדרך הכי חסכוניות כדי ליצור וללמוד חסימות מעיים ויוו. חסימות מעי דק מתבצעות בעכברים באמצעות טבעת סיליקון בניתוח ממוקמים סביב מעי. העכברים פו הראו עלייה מוקדם מספר התאים (היפרפלזיה), וכן הגדלה עובי שכבת השריר (היפרטרופיה) אחרי פו ניתוח8,15. SMC הם תאים פלסטיק ראשי צומחים בתוך שכבות שריר חלק כתגובה היפרטרופית התנאים14, אך תאים אחרים כגון ICC תאים PDGFRα+ קשורים קשר הדוק עם SMC, גם אוכלס. בעבר דיווחנו כי העכברים פו לפתח היפרטרופיה במעי הדק, ב- SMC אילו הם dedifferentiated לתוך תאים PDGFRα+ , כי הם מאוד proliferative7,15,16. לעומת זאת, ICC מנוון, איבד בתוך הרבדים מתעצם שריר חלק במהלך הפיתוח של המעי obsruction7. יתרון מרכזי נוסף של דגם פו הוא את יכולתו לגרום שינויים במערכת העצבים המעית הפצת neurogenic תבניות מוטוריות. מרכזי הפצת neurogenic דפוס מנוע במעי הדק העכבר הוא העברת המנוע מורכב (MMC), אשר neurogenic אינה דורשת ICC או חשמל גלים איטיים17. דגם פו יכולה לספק תובנות ברורות איך MMCs ואת העצבים המעית הם שופצה על ידי חסימה חלקית.
כאן, אנו מציעים פרוטוקול מאתר לניתוח פו מעיים באמצעות טבעת סיליקון. עכברים קבלת ניתוח פו בצורה אמינה לייצר היפרטרופיה ב muscularis tunica של המעי הדק. בתוך היפרטרופית שריר, SMC, ICC, PDGFRα+, תאים עצביים הם באופן דרמטי ועיצבנו מחדש.

<table><tbody><tr><td>וילונות כירורגיים</td><td>ציוד רפואי ווטרינרי</td><td>SMS40</td><td>40 אינץ' X100 יארד</td></tr><tr><td>Underpad, econ, pro plus</td><td>ציוד רפואי ווטרינרי</td><td>MSC281224</td><td>17x24 אינץ'</td></tr><tr><td>מספריים איריס</td><td>Braintree scientific, Inc</td><td>SC-i-130</td><td></td></tr><tr><td>מספריים איריס</td><td>Vantage</td><td>V95-304</td><td></td></tr><tr><td>Dumont פינצטה אלקטרונית ותכשיטנים</td><td>Dumont</td><td>98-180-3</td><td></td></tr><tr><td>תפר נספג קלוע</td><td>Covidien polysorb</td><td>SL-5687G</td><td>5-0, פוליגלקטין</td></tr><tr><td>ניילון נימה מונו שאינו נספג</td><td>AD כירורגי</td><td>S-N618R13</td><td>6-0, ניילון</td></tr><tr><td>להב כירורגי</td><td>Dynarex</td><td></td><td>מס' 15</td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>Jacobson microvascular</td><td>36-1342TC</td><td>8.5 אינץ'</td></tr><tr><td>ידית אזמל</td><td>Flinn scientific</td><td>AB1049</td><td></td></tr><tr><td>מספריים מיקרוכירורגיים</td><td>WPI</td><td>503305</td><td></td></tr><tr><td>משחת עיניים וזלין</td><td>Puralube VET</td><td></td><td>3.5 גרם</td></tr><tr><td>פלוריסו (איזופלורן)</td><td>Vetone</td><td>V1 502017</td><td>250 מ"ל</td></tr><tr><td>סגירת עור מחוזקת רצועת Steri</td><td>3M</td><td>R1547</td><td></td></tr><tr><td>כפפות כירורגיות</td><td>Medline</td><td>MSG2270</td><td></td></tr><tr><td>מסכת פנים לולאת אוזניים</td><td>אזור הבטיחות</td><td>RS700</td><td></td></tr><tr><td>Avant גזה ספוגים לא ארוגים</td><td>טיפול</td><td>PRM25444</td><td></td></tr><tr><td>כירורגית</td><td>אדמירל&nbsp; מלאכה OYC-2</td><td>725-A42</td><td>2.5 אונקיות</td></tr><tr><td>ספוגית</td><td>ChloraPrep</td><td>260103</td><td>2% w/v כלורהקסידין&nbsp; גלוקונאט (CHG) ו-70% v/v איזופרופיל אלכוהול (IPA)</td></tr><tr><td>אפליקטור כותנה עם קצה</td><td>פוריטן</td><td>806-WC</td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין</td><td>גן חיות פארם</td><td>BZ8069317</td><td>1 מ"ג/מ"ל</td></tr><tr><td>ג'נטמיצין סולפט</td><td>Vetone</td><td>G-6336-04</td><td>100 מ"ג/מ"ל</td></tr><tr><td>מסיר קרם ג'ל מהיר</td> פעולה <td></td> מזרק <td>Veet</td> 8111002 <td></td></tr><tr><td></td><td>AHS</td><td>AH01T2516</td><td>1 מ"ל עם מחט</td></tr><tr><td>טבעת סיליקון</td><td>VWR</td><td>60985-720</td><td>אורך 6 מ"מ, קוטר חיצוני 4 מ"מ, קוטר פנימי 3.5 מ"מ</td></tr><tr><td>עכברים C57BL/6 מעבדת</td><td></td><td>ג'קסון</td><td>בת 4-6 שבועות</td></tr></tbody></table>

דגם העכבר של חסימת מעיים חלקית

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

חסימות מעיים, לעכב או לחסום תנועה ממברנות, יכולה להיגרם על ידי הדבקויות בבטן ומחלות ביותר במערכת העיכול (GI) כולל גידולים tumorous. עם זאת, הטלפון הסלולרי שיפוץ מנגנונים מעורבים, נגרמת על ידי, חסימות מעיים הם הבינו. פותחו מספר מודלים חייתיים של חסימות מעיים, אך המודל העכבר ביותר העלות/זמן יעיל. המודל העכבר משתמש השתלה כירורגית של חסימת חלקי מעיים (PO) כי יש תמותה גבוה אם זה לא מבוצע כהלכה. בנוסף, עכברים שקיבלו פו ניתוח לא מצליחים לפתח היפרטרופיה אם המצור המתאים לא רגיל או להציב כראוי. כאן, אנו מתארים את פרוטוקול מפורט לניתוח פו המייצרת חסימות מעיים לשחזור ואמין עם שיעור תמותה נמוך מאוד. פרוטוקול זה מנצל טבעת סיליקון בניתוח שמוקם שמקיפה מעי אשר יחסום חלקית תנועה העיכול במעי הדק. חסימה חלקית הופך את המעי להיות מורחבים עקב הפסקת תנועת עיכול. התרחבות של המעי גורם היפרטרופיה של השריר החלק בצד הפה של הטבעת שמתפתח בהדרגתיות מעל שבועיים עד שהיא גורמת למוות. המודל העכבר פו כירורגית מציע מודל ויוו רקמת המעי היפרטרופית שימושי עבור הלומדים שינויים פתולוגיים של תאים במעי כולל תאי שריר חלק (SMC), תאים ביניים של קחאל (ICC), PDGFRα+, ו עצביים תאים במהלך הפיתוח של חסימת מעיים.

חסימה חלקית (PO) היה בניתוח המושרה בעכברים בת חודש על ידי הנחת טבעת סיליקון מסביב מעי קרוב הטבעת ileocecal. טבעת זו יצרה חסימה חלקית מעי. מבצעי בשאם (אז) בוצעו גם בלי טבעת על גיל/מין מתאימים עכברים, עכברים אלה לא הראה תסמינים דומים לאלה שנמצאו בעכברים פו. עכברים התאושש במהירות מהניתוח PO תוך מספר שעות. הם הראו לא ברור שינויים התנהגותיים או חולשה בתוך השבוע הראשון, אך לאחר השבוע הראשון, הם בהדרגה החלו להראות סימנים של פו: בטן נפוחה ואת הייצור של כדורי פחות, צואה קטן יותר. פו עכברים הוקרבו ...

חסימות מעיים הם סתימה חלקית או מלאה של המעי העלולה לגרום כאבי בטן, בחילות, הקאות, מניעת המעבר של צואה. ההליך ליצירת obsructions חלקי המעי בעכברים זה אמין בלימוד המנגנונים צמיחת תאים פתולוגיים ומוות במעי.

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...

המטרה הכוללת של הליך כירורגי זה היא לייצר באופן אמין ועקבי חסימות מעיים בעכברים המקלים על חקר השינויים המולקולריים והפנוטיפיים ברקמת מערכת העיכול המתרחשים בתגובה לחסימות. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מערכת העיכול סביב המנגנונים התאיים העומדים בבסיס השינויים הפנוטיפיים הנובעים מחסימת מעיים. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא אמינה, ניתנת לשכפול וחסכונית.ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על הטיפול בחסימת מעיים מכיוון שהם מחקים מצבים פנוטיפיים הנצפים בפתולוגיות אנושיות הנגרמות על ידי חסימת מעיים. ידגימו את ההליך הזה סה און הא, פוסט-דוקטורנט, ולאי ווי, סטודנט לתואר שני, שניהם מהמעבדה שלנו. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטה בבוהן, מרחו משחה על עיני החיה והניחו את העכבר על כרית חימום.הסר את השיער מהבטן בעזרת קרם אפילציה ונקה את העור החשוף עם אתנול 70%. יש לחטא את אתר הניתוח בתמיסת פובידון-יוד ולעטוף את החיה בנייר סטרילי בגודל 25 על 50 ס"מ עם פתח של 2.5 על 2.5 ס"מ לאזור הניתוח. אבטח את הווילון ברצועות סטריליות בגבולות הפתח והעור והשתמש בלהב אזמל מספר 15 כדי לבצע חתך עור אורכי של שלושה סנטימטרים.בעזרת מלקחיים ומספריים כירורגיים יש להפריד בזהירות את העור משכבת השרירים מבלי לחתוך את הרקמה ולאתר את הלינאה אלבה. לאחר מכן השתמש במלקחיים מיקרו ובמספריים כדי לחתוך שני סנטימטרים לאורך הלינאה אלבה כדי לחשוף את החלל התוך-צפקי ולאתר בזהירות את הצקום. השתמש במלקחיים המיקרו כדי להזיז לאט ובעדינות את הצקום, המעי הגס הפרוקסימלי והאילאום מתוך החלל התוך-צפקי אל הווילון הסטרילי ולהרטיב מיד את רקמת המעי עם גזה ספוגה במי מלח סטריליים 0.9%.אתר את המזנטריה בין האילאום למעי הגס הפרוקסימלי ובצע חתך של סנטימטר אחד במזנטריה במקביל וממש מתחת לאילאום תוך הקפדה להימנע מחיתוך כלי דם כלשהו. חותכים לאורך כדי לפתוח את הכלי המזנטרי ומשתמשים במיקרו מלקחיים כדי לפתוח טבעת סיליקון מעוקרת בגודל מתאים. הכנס קצה אחד של הטבעת דרך החתך והביא את קצה הטבעת למגע עם הקצה הראשון כדי להחזיר את המכשיר לצורתו המקורית.ודא שהטבעת מקיפה לחלוטין את האילאום וסגור את הטבעת בתפר. החתכים במזנטריה צריכים להיות גדולים מספיק כדי שהטבעת תתאים, אך קטנים מספיק כדי שלא ייחתכו כלי דם. כמו כן, ודא שהטבעת מונחת על האילאום, לא על המעי הגס.החזירו בזהירות את המעיים למיקומם האנטומי המקורי והשתמשו בתפר נספג בתפר רציף פשוט כדי לסגור את שכבת השרירים לאורך הלינאה אלבה. נקה כל דימום עם גזה סטרילית ספוגה במי מלח 0.9% והשתמש בתפר ניילון חדש ותפר רציף פשוט כדי לסגור את העור. לאחר מכן יש לחטא את מקום הפצע עם פובידון-יוד ולהזריק אנטיביוטיקה לפני הנחת החיה בשער התחממות עם ניטור עד לשכיבה מלאה.בניסוי זה, המעי הדק התמלא חלקית והתנפח שמונה ימים לאחר ניתוח חסימה חלקית והתמלא במלואו והתנפח לאחר 13 ימים לאחר ניתוח חסימה חלקית בהשוואה לבעלי חיים שעברו ניתוח דמה. יתר על כן, היווצרות כדורי צואה במעי הגס של עכברים ביום 8 ו-13 לאחר ניתוח חסימה חלקית הופחתה בהשוואה לזו של חיות הביקורת. שכבת השריר החלק של האילאום ממש במעלה הזרם של הטבעת עברה היפרטרופיה שמונה ימים לאחר ניתוח חסימה חלקית עם היפרטרופיה נוספת שנצפתה ביום ה-13.תאי השריר החלק גדלו בקצב מהיר בהדרגה בכל שלוש שכבות הרקמה בשמונה ו-13 ימים לאחר ניתוח חסימה חלקית, כפי שהוערך על ידי ניתוח אימונוכימי, בעוד שתאי הביניים של קחאל התנוונו בתוך השכבות התוך-שריריות והבין-שריריות. תת-קבוצות של תאים אלפא חיוביים לקולטן גורם גדילה שמקורו בטסיות דם הידועות גם בשם תאי אלפא PDGFR עוצבו מחדש באופן דינמי בתוך השכבות הבין-שריריות של עכברי חסימה חלקית עם צמיחה שנצפתה שמונה ימים לאחר הניתוח שהתנוונה עד היום ה-13. בנוסף, תאים עצביים אבדו באופן משמעותי גם באזורים הבין-שריריים והתוך-שריריים של עכברים עם חסימה חלקית בשני הימים השמיני וה-13 לאחר הניתוח.לאחר השליטה, יש להשלים טכניקה זו תוך 30 דקות כדי להבטיח את הישרדות העכבר. בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לטפל ברקמה במהירות ובעדינות. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו בדיקת מגמות במערכת העיכול כדי לענות על שאלות נוספות לגבי האופן שבו חסימות משנות תנועתיות מעיים.לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום חקר מערכת העיכול לחקור את ההשלכות של חסימת מעיים בעכברים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד למקם במהירות ובצורה נכונה טבעת סביב אילאום העכבר ליצירת חסימה חלקית במעי. אל תשכח שעבודה עם כלים ומחטים כירורגיים עלולה להיות מסוכנת ביותר אז נקוט באמצעי הזהירות המתאימים.כמו כן, הקפידו ללבוש כפפות סטריליות ולתרגל טכניקות אספטיות בזמן ביצוע הליך זה.

a-mouse-model-of-intestinal-partial-obstruction

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

ileus לאחר הניתוח (POI) הוא סיבוך של ניתוח בטן מוביל לתחלואה ואשפוז ממושך. בגלל אסטרטגיות מניעות או טיפול חסרות מחקר התעצם הוא הכרחי. לכן הקמנו מודל עכבר סטנדרטי וריאלי כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של POI וללמוד אפשרויות טיפוליות פוטנציאליות.

הערכה תפקודית של תנועתיות מעיים ודלקת דופן מעי במכרסמים: ניתוח בדגם סטנדרטי של מניפולצית מעיים

סרטון זה מדגים את יצירתו של מודל לולאה איליאלית לחקר חדירות המעי במודל עכבר. שיטה זו מספקת מודל חי להבנת תפקוד מחסום האפיתל והתגובה החיסונית הנובעת ממנו.

מודל Mouse Ileal Loop: מודל כירורגי לחקר חדירות המעי בעכבר

בסרטון זה, אנו מתארים הליך כירורגי ליצירת לולאת מעי גס פרוקסימלית של עכבר או קטע pcLoop ואחריו הזרקה intraluminal של סמנים פלואורסצנטיים לתוך קטע כדי לחקור את חדירות אפיתל המעי.

יצירת מודל לולאת מעי גס פרוקסימלי של עכבר: הליך כירורגי ליצירת לולאת מעי גס פרוקסימלית ומדידת חדירות המעי על ידי זיהוי סמנים פלואורסצנטיים בסרום לאחר הזרקה תוך לומינלית

כאן, אנו מציגים את צינור המרה חלקית מצדו כמודל כירורגי של פגיעה בכבד והתחדשות בחולדות.

צינור המרה חלקית מצדו העכבר: מודל מבוקרת של מקומי חסימתית לחסימת מרה תוך כבדית

מאתר למעי הגס דיסטלי מספק מודל מאתר הסחה האנושי קוליטיס, קוליטיס בעיקר לימפוציטית קטע המעי הגס נכללו הנחל צואה.

מאתר למעי הגס הדיסטלי, מודל הרומן של הסחה קוליטיס בעכברים C57BL/6

דליפה anastomotic או התמוטטות לאחר הניתוח היא הגורם העיקרי לזיהום לאחר הניתוח. הניתוח ליצירת השקה של המעי הגס הוא שיטה לשחזור ואמין ללמוד את מנגנוני הריפוי של חיבור.

יצירה של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים

תפקוד מחסום אפיתל מעיים Dysregulated ותגובות חיסוניות הם סימני היכר של מחלות מעי דלקתיות שנותרו נחקרות בצורה גרועה בשל מחסור במודלים פיזיולוגיים. כאן, אנו מתארים מודל לולאת מעיים של עכברים המעסיק מקטע מעיים בעל כלי דם וחיצוניים כדי לחקור חלחיליות רירית וגיוס לויקוציטים ב- vivo.

הערכה תפקודית של חלחיליות מעיים ונדידה טרנס-אפיתלית נויטרופילית בעכברים באמצעות מודל לולאת מעיים מתוקננת

אנו מתארים כיצד ליצור מודל כירורגי נפוץ של פגיעה איסכמיה רפרפוזיה במעיים (IRI) במכרסמים. ההליך כרוך חסימה של העורק mesenteric העליון ואחריו שחזור זרימת הדם. מודל זה שימושי למחקרים הבוחנים גורמים חוסמים של IRI במעיים הן ברפואה וטרינרית והן ברפואה אנושית.

מודל מכרסם של פגיעה איסכמיה-רפרפוזיה במעי באמצעות חסימה של העורק המזנטרי העליון

מעקף יחיד anastomosis duodeno-ileal (SADI-S) הוא הליך בריאטרי מתפתח עם השפעות מטבוליות חשובות. במאמר זה, אנו מציגים מודל אמין וניתן לשחזור של SADI-S בעכברים.

מעקף Duodeno-Ileal יחיד Anastomosis עם שרוול Gastrectomy דגם בעכברים

אנו מתארים מודל מורין של אילאוס לאחר הניתוח שנוצר באמצעות מניפולציה במעיים. תפקוד המעבר במערכת העיכול, שינויים פתולוגיים והפעלת תאי מערכת החיסון הוערכו 24 שעות לאחר הניתוח.

מודל Ileus Murine לאחר הניתוח

למדו כיצד ליצור חסימות מעיים חלקיות בעכברים לחקר שינויים מולקולריים ופנוטיפיים ברקמות מערכת העיכול. שיטה זו אמינה, ניתנת לשחזור וחסכונית למחקרים בתחום הגסטרואנטרולוגיה.

דגם העכבר של חסימת מעיים חלקית

גלה סרטונים נוספים