RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/58371-v
Tatsuo Ito1, Keiki Ogino1, Kenjiro Nagaoka1, Kei Takemoto1, Rina Nishiyama1, Yurika Shimizu2
1Department of Public Health,Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry, and Pharmaceutical Sciences, 2Department of Pathophysiology-Periodontal Science,Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a highly sensitive method for detecting 3-nitrotyrosine modifications in atmospheric proteins using air sampler prefilters. The technique utilizes high-performance liquid chromatography with an electrochemical detector (HPLC-ECD) to analyze collected samples.
אנו מציגים שיטה כדי לזהות שינויים כימיים 3-nitrotyrosine של חלבונים אטמוספרי עם 6 מ מ קוטר סבבים של אוויר סמפלר prefilters באמצעות ביצועים גבוהים נוזלי כרומטוגרפיה-אלקטרוכימיות גלאי (HPLC-ECD).
שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלת מפתח במחקר סביבתי על ניטורפירין ו 3-ניטרוטרירוסין. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי היא שיטה ייחודית רגישה מאוד לגילוי 3-nitrotyrosine על מסנני מדגם אוויר. כדי לאסוף חלקיקים מושעים הכולל או חומר חלקיקי של פחות משבעה מיקרון בגודל, תחילה לשקול קלסר 3 מסנן קוורץ ולאבטח אותו על סמפלר אוויר בנפח גבוה. לכסות את המסנן עם בורר גודל חלקיקים כדי לאסוף PM7 או להשאיר את המסנן חשוף כדי לאסוף חלקיקים מושעים הכולל. הפעל את סמפלר האוויר ב 1000 ליטר לדקה ברציפות במשך שבעה ימים. טען את המסננים מראש ליחידת סיווג גודל והתקן את יחידת סיווג הגודל ומסנן גיבוי על סמפלר האוויר בנפח נמוך. הפעל את סמפלר האוויר ב 116 המלטה לדקה ברציפות במשך שבעה ימים כדי לאסוף PM2.5 על מסנן הגיבוי. בסיום הדגימה, רשום את נפח הזרימה הכולל. לשקול את המסנן ולחשב את המשקל של החלקיקים שנאספו. לאטום את המסנן בשקית ניילון ולאחסן אותו ב 30 מעלות צלזיוס.הבא להכין 500 microliters של קוקטייל פרוטאז 6X לא ספציפי חיץ אצטט ולמקם אותו קרום דלסיס עם ניתוק משקל מולקולרי של 5000 דלתונים. לטבול את הממברנה המלאה ב 1 L של חיץ אצטט ומערבבים אותו ב 4 מעלות צלזיוס במשך 24 עד 36 שעות, החלפת החיץ כל 12 שעות כדי להסיר indogenous 3-Nitrotyrosine ו Nitrite.Then למדוד את ריכוז החלבון בתווית פרוטאז דיאליזה עם אסאי חלבון חומצה ביצינצ'ונית. לאחר מכן להסיר מסנן מהמקפיא ולאפשר לו להתחמם לטמפרטורת החדר תוך עדיין אטום בשקית. לאחר מכן אגרוף עד חמישה 6 מילימטרים רחב עיגולים מן החומר החלקיקים מכוסה באזור של המסנן, ולמקום את העיגולים בצינור מיקרו צנטריפוגה 1.5 מיליליטר. הכן 300 מיקרוליטרים של מאגר אצטט המכיל 50
Related Videos
13:21
Related Videos
19.6K Views
07:57
Related Videos
20.5K Views
07:49
Related Videos
11.2K Views
07:14
Related Videos
12.1K Views
08:41
Related Videos
10K Views
07:38
Related Videos
10.8K Views
07:31
Related Videos
6.2K Views
10:38
Related Videos
3.8K Views
08:23
Related Videos
4.9K Views
14:33
Related Videos
15K Views