זיהוי וניתוח של מחסני עכבר מגוונים
July 11th, 2019
אדיפוציטים קיימות במחסנים נפרדים ויש להם תפקידים מגוונים בתוך המיקרו-סביבות הייחודיות שלהם. כמו הבדלים אזוריים אופי ותפקוד הפונקציה נחשפים, זיהוי סטנדרטית בידוד של מחסני חיוני לקידום השדה. בזאת, אנו מציגים פרוטוקול מפורט לגבי כריתה של מחסני שומן בעכבר.
מתודולוגיה סטנדרטית לזיהוי ניתוח מחסני שומן בכל הגוף היא קריטית לחקירת הבדלים באופיים ותפקודם של אדיפוזיטים בתוך נישות אנטומיות דיסקרטיות. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שזו שיטה אמינה ומדויקת לזיהוי וגירוש מחסנים נפוצים ופחות נחקרים של שומן מכרסמים. לזיהוי ובידוד של BAT בין-שרירי, השתמש במספריים איריס לחתוך אופקית לאורך הקצה התחתון של הרקמה התת עורית לפני של עכבר המתת דם בעקבות הגבול הטבעי של המחסן.
בצע שני חתכים אנכיים לאורך הקצוות הצדדיים של המחסן בעקבות הגבולות הטבעיים של הרקמה. השתמש במקלפים כדי להפוך בזהירות את המחסן כדי לחשוף את רקמת השומן הבין-שרירית בצורת פרפר המוטמעת ברקמת השומן הלבנה. ואז בזהירות לנתח את BAT מן WAT שמסביב.
לאחסן רקמות שומן במיכלים המתאימים לניתוח במורד הזרם. לזיהוי ובידוד של WAT תת עורי אחורי, מניחים את העכבר בתקורת השופים ומאבטחים את גפי החיה. השתמש במדפים כדי להרים את העור בבסיס עצם החזה ולעשות חתך עור מילימטר אחד.
הכנס להב אחד של מספרי הקשתית לתוך החתך ולעשות חתך בעור קו האמצע ארבעה עד חמישה סנטימטרים החל בבסיס עצם החזה ועולה לבסיס הזנב. לאחר מכן, בצע שני חתכים אופקיים של סנטימטר אחד בחלק העליון של החתך האנכי הראשוני המשתרע באופן משני מהקיים. השתמש במקלפים כדי לקלף בזהירות את העור מן החלל צפי, להשתמש ברגל כדי לאתר את WAT תת עורי האחורי אשר צריך להישאר קשור עם העור.
הצמד את העור המושט לחלוטין excise את מחסן WAT מפשעתי משולש מבסיס הישנבת ventrally על פני המפשעה. לזיהוי ובידוד של מחסן WAT הקרביים, השתמש במלקחיים כדי להרים את קיר חלל הציציוני הדק בבסיס עצם החזה ולעשות חתך של מילימטר אחד ברקמת האוהל. הכנס להב אחד של מספרי הקשתית לתוך החתך ולעשות חתך אנכי יורד ארבעה עד חמישה סנטימטרים מהחלק העליון של חלל הצפק לפי הטבעת.
בצע שני חתכים אופקיים של סנטימטר אחד בחלק העליון והתחתון של החתך האנכי המשתרע באופן משני מקו האמצע ולהשתמש במטליות כדי לקלף בחזרה את צפק כדי לחשוף את תכולת חלל הבטן. לאחר מכן הצמד את הצביטה המושטת למחבת הניתוח כדי לקצור את מחסני WAT הכלולים בחלל הצפי. לזיהוי ובידוד של WAT gonadal הקרביים, לאתר את הקניונים ולהשתמש מלקחים כדי להרים את WAT gonadal הקשורים, ולאחר מכן להשתמש מספריים איריס כדי בזהירות excise WAT מן הקניונים.
כדי להפוך את המחסן perirenal, לאתר את הכליה ולהשתמש מלקחיים כדי להרים את רקמת הכליה. משוך את הכליה אל קו האמצע כדי לראות חלוקה ברורה בין המחסנים perirenal ו retroperitoneal ובלות WAT הקשורים ישירות עם הכליות. לאחר מכן להסיר את בלוטות יותרת הכליה הממוקם מעל הכליות מן WAT.
לזיהוי ובידוד של WAT רטרופריטוניאלי, הרימו שוב את הכליה עד קו האמצע ולהשתמש במספריים של הקשתית כדי לנתח בזהירות את ה- WAT הרטרופריטוניאלי מהקיר הקרדיוני האחורי. כדי לבודד את WAT popliteal, מניחים את פתלה נגד מחבת הניתוח דואג כי פוסה popliteal בחלק האחורי של הברך פונה כלפי מעלה. השתמש במספריים הקשתית כדי להסיר בזהירות את העור מבסיס hindlimb לרגל.
השתמש מספריים איריס לעשות חתך בגבול נחות של ראשי המדיאלית והצלבי של שריר gastrocnemius, להשתמש במלקחים כדי להרים את השריר כדי לחשוף את המחסן פופוליטלי משולש. לאחר מכן השתמש מספריים איריס כדי למלמל את המחסן לאורך גבולות הרקמה הטבעית. כאן מוצגים המיקומים האנטומיים הגולמיים של מחסני עכבר תת עוריים, חומים, קרביים ופופליטיים.
המאפיינים ההיסטולוגיים של מחסני הדם התת עוריים, החומים, הקרביים, הפופליטיים, המכוננים והוסדרים, המחסנים התוך שריריים והבלתי-פתילים יכולים להיות מוערכים על ידי פרוטוקולי הכתמת המטוקסילין ואאוסין סטנדרטיים. רקמות השומן המבודדות באמצעות פרוטוקול זה יכולות לשמש למגוון רחב של נקודות קצה ניסיוניות כולל ניתוח היסטולוגי, מחקרים מולקולריים וניתוח ביטויי גנים וחלבונים. סטנדרטיזציה שדה רחב של זיהוי מחסני שומן מגוונים ללא ספק יעזור לנו לקדם את ההבנה שלנו של המאפיינים המולקולריים והמטבוליים שלהם ואת תרומתם דיפרנציאלית הן מצבים פתולוגיים מקומיים ושיטתיים.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
סקירה כללית
מחקר זה מתייחס לצורך בשיטות סטנדרטיות לזיהוי ובידוד מחסני שומן שונים בעכברים. הבנת ההבדלים האזוריים בתפקוד האדיפוציטים חיונית לקידום המחקר בתחום הבריאות המטבולית. הפרוטוקול המתואר מספק גישה אמינה לכריתה של סוגי רקמות שומן נפוצות ופחות ידועות כאחד.
רכיבי מחקר עיקריים
תחום המחקר
- אפיון רקמת השומן
- מחקר בריאות מטבולית
- טכניקות ביולוגיה מולקולרית
רקע
- מגוון התפקודים של האדיפוציטים בין מחסני שומן שונים
- חשיבות ההקשר האנטומי במחקר האדיפוציטים
- הצורך בפרוטוקולים סטנדרטיים לשיפור הניתנות לשחזור
שיטות ששימשו
- ניתוח של מחסני שומן שונים בעכברים
- מערכת מודל בעכברים
- שימוש במספריים קשתיים ופורצפסים לבידוד כירורגי
תוצאות עיקריות
- זיהוי מוצלח וכריתה של מחסני שומן מרובים
- הפרוטוקול מאפשר ניתוחים עוקבים כגון היסטולוגיה וחקר ביטוי גנים
- סטנדרטיזציה עוזרת להבהיר את ההבדלים במאפייני המחסנים ותפקודיהם
מסקנות
- מחקר זה מדגים מתודולוגיה יעילה לבידוד מחסני שומן בעכברים.
- הממצאים תורמים להבנה טובה יותר של ביולוגיית האדיפוציטים והשלכותיה על הבריאות.
שאלות נפוצות
Executive Industry Relevance
Standardized identification and dissection of mouse adipose depots enables robust comparison of depot-specific molecular and metabolic profiles, directly supporting early-stage metabolic disease research. This reproducibility is critical for target validation and mechanistic de-risking in metabolic and obesity-related drug discovery. Consistent anatomical sampling underpins translational continuity from discovery through preclinical model development.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables precise interrogation of depot-specific adipocyte biology for hypothesis-driven research.
- Supports functional target validation by isolating distinct adipose tissues for molecular analysis.
- Facilitates mechanistic de-risking by allowing direct comparison of depot contributions to metabolic phenotypes.
Screening & Assay Development
- Provides standardized tissue samples for reproducible downstream assays and molecular profiling.
- Improves assay reliability by ensuring anatomical consistency across experimental cohorts.
- Enables quantitative analysis of gene and protein expression in defined adipose depots.
Translational & Preclinical Research
- Aligns preclinical models with human metabolic disease by capturing depot-specific pathophysiology.
- Supports biomarker discovery through comparative analysis of depot molecular signatures.
- Enables risk-adjusted advancement by clarifying depot contributions to systemic metabolic states.
Pipeline & Workflow Integration
This protocol integrates at the interface of early discovery and preclinical research, providing a foundation for molecular, histological, and functional studies of adipose tissue diversity.
- Discovery Biology: Standardized dissection supports hypothesis testing on depot-specific adipocyte function and metabolic regulation.
- Screening: Consistent tissue isolation enables reproducible quantitative assays and comparative studies.
- Analytics: Facilitates robust measurement of gene, protein, and histological endpoints across depots.
- Translational Research: Enhances alignment of mouse models with human metabolic disease by enabling depot-level analysis.
- Enterprise Reuse: Protocol standardization allows broad adoption across metabolic research programs and therapeutic areas.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in depot-specific target validation and mechanistic studies.
- Operational Value: Drives reproducibility and standardization across research teams and studies.
- Strategic Value: Supports informed go/no-go decisions by clarifying depot contributions to disease models.
- Portfolio Impact: Enables risk-adjusted prioritization of metabolic targets and pathways.
Implementation Considerations
- Requires anatomical expertise in mouse adipose tissue identification and dissection.
- Needs access to standard dissection tools and histological analysis infrastructure.
- Demands cross-team adherence to standardized protocols for reproducibility.
- May require adaptation for different mouse strains or experimental conditions.
- Dependent on careful tissue handling to preserve molecular integrity for downstream analyses.
Biopharma FAQs
Chapters in this video
0:04
Title
0:33
Interscapular Brown Adipose Tissue (BAT) and Posterior White Adipose Tissue (WAT) Identification and Isolation
2:38
Gonadal WAT Identification and Isolation
3:47
Perirenal and Retroperitoneal WAT Identification and Isolation
4:33
Other Adipose Depot Identification and Isolation
5:14
Results: Representative Gross Anatomical Identification and Histological Evaluation of Mouse Adipose Depots
6:02
Conclusion
