מודל אוטם שריר הלב באמצעות הארכה קבועה של עורק שמאלי קדמי כלילי יורד

מודל מורין זה של עבירה שריר הלב מאפשר ניטור של תהליכים פתולוגיים המתרחשים מ occlusion כלילי לאי ספיקת לב בשלב מאוחר ברקמת הלב המקומית ורמות מערכתיות. שיטה זו תואמת לכל קריאה המשמשת כיום בביולוגיה של הלב ובפיזיולוגיה. בנוסף, הוא נהנה מהמגוון העצום של מודלים גנטיים מורין.

רכישת מיומנויות כירורגיות נאותה יכול לקחת זמן לשלוט. הליך זה נלמד בצורה הטובה ביותר צעד אחר צעד עם חוקר מנוסה. הדגמה חזותית של מודל מורין זה מאפשרת שיתוף של רמזים שיכולים לעזור עם ההליך הכירורגי ולהאיץ את תהליך הלמידה.

השתמש בתער חשמלי כדי לגלח במהירות הרדמה, 25 עד 30 גרם, זכר, עכבר C57-Black/6 על הגרון ואת הצד השמאלי של כלוב הצלעות. אשר חוסר תגובה לצביטת בוהן. יש למרוח משחה על עיני החיה.

מניחים את העכבר במצב supine על כרית חימום, וממקמים גזה קטנה לדחוס מתחת לראש, כדי למנוע התחממות יתר של העיניים. אבטחו את הגפיים עם סרט הדבקה. מעבירים לולאה של תפר משי 5-0 מתחת לחתכים העליונים, ומאבטחים את גפיים של הלולאה על משטח החימום כדי להשאיר את הפה פתוח במהלך הקנון.

יש למרוח קרם גנאי על האזורים המגולחים מראש, ולעיסוי עדין עם ספוגית כותנה למשך דקה אחת. מוציאים את הפרווה העודפת ו השמנת עם גזה, ומנקים את העור החשוף בטיפות של 0.9% תמיסת מלח וגזה. החל חתיכות של גזה סטרילית על הגרון מגולח ובית החזה, ולהשרות את גזה עם iodopovidone.

הגדר את מכונת ההנשמה בנפח גאות ושפל של שבעה מיליליטר לקילוגרם וקצב אוורור של 140 משיכות לדקה. הזז את העכבר תחת מיקרוסקופ סטריאו מיקרוכירורגי. מחזיק את העור על מרכז הגרון, לעשות חתך 0.5 ס"מ לאורך הקו caudal / cephalic, ולהפריד את האונות של בלוטת הרוק.

השתמש מדחיסות מעוגלים כדי להפריד בעדינות את fascia של שריר sternohyoid עד הגרון ואת קנה הנשימה גלויים. לאחר מכן אבטחו את קצות הפתח עם מפשקים המחוברים לרצועות אלסטיות. לאחר מכן, למשוך בעדינות את הלשון הצידה, ולהשתמש מדחוסים כדי להכניס את המחט הפנימית קהה של 16 מד cannula לתוך קנה הנשימה.

דמיינו הכנסה נכונה לקנה הנשימה דרך חתך הגרון, וחברו את הקנולה למכונת ההנשמה. מניחים 0.9% מלוחים סטריליים בתוספת גזה ספוגה iodopovidone על החתך כדי לשמור על הרקמות רטובות במהלך הניתוח. ואז למקם את צינורות הפליטה לתוך המים.

נוכחות הבועות מצביעה על צנרור מוצלח. עבור קשירה של העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי, או LAD, בזהירות להזיז את העכבר לתוך מיקום דטוביטוס בצד ימין, ולרסן מחדש את האיבר הקדמי השמאלי בתנוחה החדשה. זהה את הקו בין החזה השמאלי שרירים קטנים העיקריים, ולעשות חתך עור סנטימטר אחד לאורך הקו.

באמצעות מיקרו מספריים ניתוח קהה, להפריד את fascia של שרירי החזה מבלי להסית את הרקמות, ולהשתמש מפשקים המחוברים להקות אלסטיות כדי לשמור על ההפרדה. הגדר את מכונת ההנשמה עם לחץ חיובי תפוגת סוף של שלושה סנטימטרים של מים. השתמש במטליות קהות כדי לפתוח את חלל החזה בחלל הבין-קומתי השלישי בין הצלעות השלישית והרביעית.

מניחים שני מפשקים לתוך כלוב הצלעות, אחד על כל צלע, ולהשתמש מדפים דק מעוקל להסיר בזהירות את pericardium מבלי לפגוע בלב ובריאות. אתר את LAD כקו אדום בהיר ושטחי הפועל מקצה האוריאל השמאלי לכיוון השיא. השתמש במחזיק מחט כדי להעביר תפר משי 7-0 מתחת LAD שניים עד שלושה מילימטרים מתחת לאטריה השמאלית.

משיכת המשי לאט כדי למנוע קריעת רקמת לב, לקשור את הקשירה עם שלושה קשרים. החלק השמאלי התחתון של החדר השמאלי יהפוך מיד חיוור על קשירה. עכשיו לשחרר את מפשקי הצלעות, והחזקת הצלע השלישית עם מלקעות, לעשות שני מעברים עם תפר משי 6-0 מתחת לצלעות השלישית והרביעית.

מניחים שלוש טיפות של 37 מעלות צלזיוס 0.9% תמיסת מלח על הפתח, ולסגור את צינור פליטת תפוגה במשך שניים או שלושה מחזורי נשימה כדי לנפח כראוי את הריאות. הדקו ואבטחו את התפר בשתי זריקות, ושחררו את המפשקים המחזיקים את השרירים, ועזרו לשרירים לחזור למיקום האנטומי הנכון שלהם. לאחר מכן סגור את עור בית החזה עם שני תפרים ושתי זריקות של משי תפר 5-0.

סגור את עור הגרון עם תפר אחד של משי תפר 5-0 ושתי זריקות. בסוף ההליך, להסיר את רצועות הסרט מן הגפיים, בזהירות להפוך את החיה כדי דטוביטוס הגחוני על כרית הדחיסה, ולהציב דחיסה על כרית החימום בצד ימין של החיה. להזריק תוך-אפית 0.3 מיליליטר של 37 מעלות צלזיוס מחומם 5% פתרון גלוקוז.

עצור את מכונת ההנשמה. אם העכבר נושם באופן ספונטני, הסר בזהירות את ה Cannula. להזריק תת עורית 0.1 מיליגרם לקילוגרם של buprenorphine.

מניחים את העכבר בכלוב 30 מעלות צלזיוס מאוורר עם 100% חמצן לפחות שעה אחת עם ניטור. במהלך שני הימים הראשונים לאחר הניתוח, לספק לעכבר עם דיאטה רכה ומים עד ליביום, חימום החיה לפי הצורך. שבעה ימים לאחר הניתוח, האזורים האיסכמיים נשארים נגועים על ידי טריפנילטרזוליום כלוריד, ואילו הרקמה החיה מכתימה אדום בשל נוכחותם של דהידרוגנאזים.

לאחר מכן ניתן לחשב את האזורים האיסכמיים כאחוז השטח הלבן של החדר השמאלי בתוכנת דימות. ניתוח כתם מערבי עבור actin שריר אלפא חלקה וזרחון SMAD2, אשר בהתאמה הקריאות העיקריות של myofibroblasts והפיכת הפעלה איתות גורם גדילה בטא, ניתן להשתמש כדי לקבוע את היקף הפיברוזיס בתוך הרקמה שריר הלב של הלבבות אוטם. ניתוח תגובת שרשרת פולימראז בזמן אמת של שינוי בטא גורם גדילה וביטוי mRNA היעד במורד הזרם שלה יכול להתבצע גם כדי להעריך את נוכחותו של פיברוזיס שריר הלב.

מסלולי איתות פרו דלקתיים והביטוי של גנים פרו דלקתיים נמצא בדרך כלל להיות מופעל בתוך השבוע הראשון לאחר אוטם שריר הלב. ביטוי mRNA של גנים פרו דלקתיים סמני מונוציטים / מקרופאג נצפתה גם. גובה הרצועה ישפיע באופן קריטי על ההישרדות ויש להתאים אותו לכל זן או גנוטיפ, גם אם הסתעפות LAD עשויה להשתנות.

קבועים קשירה הוא המפתח כדי להשיג תוצאות לשחזור. הליך זה עשוי להיות יחד עם כל שיטה אנליטית והוא יכול להיות ואחריו ניתוח פונקציונלי, קיבוע רקמות, תרבות התא, או כל טכניקה מעניינת.