Name: הערכה של ההשפעות המטבולית של Isocaloric 2:1 לסירוגין צום בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-11-27T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 6 s
Description: חקור את ההשפעות המטבוליות של צום לסירוגין ביחס 2:1 בעכברים מסוג C57BL/6J ו-ob/ob. השיטה מאפשרת לבחון התערבויות תזונתיות ללא תלות בצריכת קלוריות, ומדגימה שיפור בטיפול בגלוקוז ובהרכב הגוף.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

K.-H. K היה נתמך על ידי הקרן לב ושבץ של קנדה גרנט בסיוע (G-18-0022213), J. P. קרן ביקל ו אוניברסיטת אוטווה מכון הלב הקרן למעלה; ח.-K.S. היה נתמך על ידי מענקים מן המכונים הקנדיים לחקר הבריאות (PJT-162083), ראובן והלן דניס המלומד ופרס החוקר החדש הפיננסי של יום ראשון לחקר הסוכרת של בנטינג & מרכז הסוכרת הטוב ביותר (BBDC) ומדעי הטבע והמועצה למחקר הנדסי (NSERC) של קנדה (RGPIN-2016-06610). R.Y.K. היתה נתמכת על ידי מחבר מאוניברסיטת אוטווה הקרן למחקר קרדיולוגיה. J.H.L. היה נתמך על ידי מלגת הדוקטורט NSERC ומלגת בוגרת אונטריו. בן היה נתמך על ידי UOHI בוגר פרס והמלכה אליזבת השנייה בוגרת מלגה במדע וטכנולוגיה.

כל השיטות והפרוטוקולים כאן אושרו על ידי ועדות טיפול בעלי חיים ב טיפול בעלי חיים וטרינרי שירות (ACVS) של אוניברסיטת אוטווה והמרכז לפנוגנומיקה (TCP) ולהתאים את הסטנדרטים של המועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים. יש לציין כי כל ההליכים המתוארים כאן צריכים להתבצע תחת אישור מוסדי וממשלתי, כמו גם על ידי צוות הבקי באופן טכני. כל העכברים שוכנו בכלובים הסטנדרטיים של פרקו בחדרים עם שליטת טמפרטורה ולחות עם 12 h/12 h מחזורי אור/כהים (21-22 ° c, 30% – 60% לחות לדיור רגיל) וגישה חופשית למים. C57BL זכר/6J ו ob/ob עכברים התקבלו מהמעבדה ג'קסון.
1.2:1 משטר אם
<ol><li>עבור רזה ודיאטה המושרה מודלים עכבר השמנת יתר, להכין תזונה נורמלית (17% שומן, ND) או דיאטה שומן גבוה (45% שומן, HFD). הערה: 60% hfd ניתן להשתמש כדי לגרום להשמנה חמורה הנגרמת דיאטה; עם זאת, בשל הרכות של הגלולה המזון, קשה יחסית למדוד את צריכת המזון היומית באופן מדויק. מערכת מדידה רציפה אוטומטית יכולה לשפר את הרב-תכליתיות עבור סוגים מרובים של דיאטות.</li>
	<li>מדידת משקל הגוף הבסיסי ואת הרכב הגוף של כל עכבר ב 7 שבועות של גיל באמצעות סולם ו אכעמרי, בהתאמה. הערה: עיין בסעיף 3 למדידת הרכב הגוף.</li>
	<li>בהתבסס על משקל הגוף ואת תוצאות הרכב הגוף, באופן אקראי ובאותה מידה לחלק 7 שבוע בן זכר C57BL/6J עכברים לשתי קבוצות: ad libitum (אל) ולסירוגין הצום (IF) קבוצות.</li>
	<li>מניחים שניים עד שלושה עכברים לכל כלוב ומבטיחים גישה חופשית למים לשתייה. הערה: מספר העכברים לכל כלוב יכול להשפיע על התנהגות צריכת המזון. מומלץ לשמור על מספר שווה של עכברים לכל כלוב בכל הקבוצות במהלך המחקר.</li>
	<li>ספק שבוע של הסתגלות לסביבת הכלוב החדשה ולדיאטה לפני הפעלת משטר IF.</li>
	<li>תקופת צום: עכברים להעביר לכלוב נקי עם מצעים טריים ב 12:00 PM. אין להוסיף מזון לקבוצת IF, תוך מתן כמות מספקת של מזון לקבוצת AL. הערה: עבור כל מחזור צום חשוב לשנות כלובים לקבוצות של אל ו-IF כדי להבטיח ששתי הקבוצות ייחשפו לאותה כמות של זמן טיפול.</li>
	<li>לאחר 24 שעות, למדוד את המשקולות של עכברים בשתי הקבוצות ושאריות מזון בכלובים אל. הערה: הקפד לכלול את המשקל של פירורי מזון על הופר המזון התחתון של הכלוב, במיוחד בעת שימוש HFD, כמו עכברים לעתים קרובות להסיר כדורי קטנות או שברי מזון מן הופר ולשמור אותם ליד אתרי הקן. צריכת האנרגיה הממוצעת לכל עכבר בסוף כל 2:1 מחזור (3 ימים) היא סביב 35 קק ל, שווה ל ~ 10 g עבור דיאטה נורמלית (3.3 קלוריות/g) ו ~ 7 g עבור HFD (4.73 קק ל/g).</li>
	<li>תקופת האכלה: לספק כמות שקלה של מזון בשעה 12:00 PM עבור קבוצות AL ו-IF.</li>
	<li>לאחר 48 h של מתן המזון, למדוד את המשקל של שאריות מזון ועכברים.</li>
	<li>חזור על שלבים 1.6 – 1.10 למשך המחקר (למשל, 16 שבועות ).</li>
</ol>2. קבוצת הבקרה של האכלה זוגית (PF)
הערה: עבור ניסוי IF שבו התנהגות האכלה שונה נצפתה במודל העכבר (למשל, hyperphagia ב ob/ob עכברים), יש צורך להיות קבוצה האכלה זוג כפקד עבור השוואה נכונה הקלוריות עצמאית IF.
<ol><li>עבור קבוצת הבקרה של PF, סדר את לוח הזמנים של הניסוי כך שאותה כמות מזון הנצרכת על-ידי קבוצת IF מוצעת לקבוצת PF (איור 2).</li>
	<li>מדוד את כמות המזון הנצרכת על-ידי קבוצת IF למשך יומיים של תקופת הזנה מחדש.</li>
	<li>חלק כמות זו של מזון נצרך בקבוצה IF באופן שווה לשלוש פרופורציות ולספק אותה מדי יום לקבוצת PF בשעה 12:00 PM. הערה: הענקת כמות שווה של מזון יומית היא קריטית. במקרה של עכברים עם hyperphagia, אם העכברים הזנת זוג מסופקים עם כמות של מזון פחות מאשר הצריכה ההתנדבות שלהם בבת אחת, הם כנראה לצרוך את כל המזון סיפק ולהפוך באופן יעיל. הדבר עלול למנוע השוואה נכונה לעכברים שטופלו במידה ולבלבל את התוצאה.</li>
	<li>חזור על שלבים 2.1 – 2.3 למשך המחקר.</li>
</ol>3. ניתוח הרכב הגוף
הערה: מאז לטווח ארוך אם משפיע על משקל הגוף בעכברים, הרכב הגוף יכול להיות נמדד במחזורים המתאימים (למשל, כל 3 או 4 מחזורים) באמצעות מנתח הרכב הגוף לכמת שומן המסה רזה בחיים, עכברים לא מורדם.
<ol><li>הפעל את מנתח הרכב הגוף. הערה: לפני תחילת התוכנית, להשאיר את המחשב על לפחות 2-3 h כדי להתחמם.</li>
	<li>הפעל בדיקת מערכת על מנתח הרכב הגוף כדי לבדוק את דיוק המדידה שלו. במקרה הצורך, כיילו את המערכת באמצעות דגימות שמן קנולה ומים.</li>
	<li>למדוד את משקל הגוף של כל עכבר.</li>
	<li>מניחים את העכבר במחזיק בעלי חיים קטנים.</li>
	<li>הוסף מפריד כדי להגביל את התנועה הפיזית של העכבר במהלך המדידה והכנס את המחזיק לתוך מנתח הרכב הגוף.</li>
	<li>. הפעל את תוכנית הסריקה הערה: זה לוקח בערך 90-120 s לנתח.</li>
	<li>לאחר המדידה, להסיר את המחזיק מהציוד ולהביא את העכבר בחזרה לכלוב. הערה: פרוטוקול מפורט יותר ניתן למצוא בפרסום הקודם9.</li>
</ol>4. גלוקוז ובדיקות עמידות לאינסולין
<ol><li>עבור בדיקת עמידות גלוקוז (GTT), למדוד את משקל הגוף ואת הרכב הגוף של כל עכבר לפני העומס לצום ולסמן את הזנב עם סמן קבוע ליצירת אינדקס קל ומהיר.</li>
	<li>מניחים עכברים בכלובים חדשים ללא אוכל בשעה 7:00 בלילה לצום. הערה: צום לילה הוא הפרוטוקול הסטנדרטי, אך בשל הפיזיולוגיה של העכבר (g., הגביראת ניצול הגלוקוז לאחר צוםממושך 10,11), צום קצר (~ 6 h) ניתן להשתמש כמתואר עבור הויט.</li>
	<li>לאחר הצום 14 – 16 h (9:00 בבוקר למחרת), למדוד את משקל הגוף ואת הרכב הגוף של כל עכבר ולחשב את כמות המינון הגלוקוז על בסיס משקל הגוף. הערה: כדי למנוע הערכה יתר של חוסר סובלנות של גלוקוז בעכברים שמנים, המסה רזה שהושג ניתוח הרכב הגוף ניתן להשתמש כדי לחשב את המינון גלוקוז12,13.</li>
	<li>עבור כל עכבר, לחתוך את קצה הזנב (0.5 – 1.0 מ"מ) באמצעות מספריים כירורגי נקי. לאחר לנגב את טיפת הדם הראשונה, לצייר טיפה טרייה של דם מן הזנב ולמדוד בסיסית הצום של רמת הגלוקוז בדם עם הגלוקומיטר. הערה: חיתוך זנב נוסף אינו נדרש עבור כל מדידת הגלוקוז בדם במהלך GTT או אוויט. הפצע יכול להיות מרענן על ידי שהוא משלחים אותו עם גזה כדי למשוך טיפת דם.</li>
	<li>עכברים נושא להזרקה הצפק (כגון) של גלוקוז (1 מ"ג/g של משקל הגוף). הערה: מבוסס על מטרת הניסוי (למשל, בחינת אפקטים בבדיל), מינהל אוראלי של גלוקוז ניתן לבצע על ידי gavage אוראלי. הפרוטוקול עבור GTT אוראלי (OGTT) ניתן למצוא במחקר אחר14.</li>
	<li>מדידת הגלוקוז בדם מהזנב ב 0, 5, 15, 30, 60, ו 120 דקות לאחר הזרקת גלוקוז.</li>
	<li>לאחר סיום GTT, לספק כמות מספקת של מזון.</li>
	<li>עבור בדיקת עמידות לאינסולין (אוויט), הסר מזון ב 9:00 בבוקר. הערה: מכיוון ששניהם GTT ו-אוויט הם חוויות לגרימת מתח עבור עכברים שיכולים להעלות את רמות הגלוקוז בדם ולשנות את הפיזיולוגיה, מומלץ לבצע את האוויט לאחר שהוא מספק לפחות 2-3 ימים של שחזור לאחר ניסוי GTT.</li>
	<li>לאחר צום עבור 6 h (3:00 PM), למדוד את הגלוקוז דם הבסיסי מן הזנב כמתואר בשלב 4.4.</li>
	<li>עכברים הנושא להזרקת אינסולין (0.65 mU/g של משקל הגוף).</li>
	<li>מדידת הגלוקוז בדם מהזנב ב 0, 15, 30, 60, 90, ו 120 מינימום לאחר הזרקת אינסולין.</li>
	<li>לאחר לסיים את הרייט, לספק כמות מספקת של מזון.</li>
</ol>5. קלורימטריה עקיפה
הערה: מטבוליזם אנרגיה של עכברים IF שטופלו ניתן להעריך עוד יותר באמצעות calorimetry עקיפה על מחזור אחד של IF. זה יהיה למדוד את צריכת החמצן (VO2), הייצור פחמן דו חמצני (vco2), יחס החילוף הנשימתי (RER), וחום (קק ל/h).
<ol><li>הפעל את העוצמה של מערכת קלורימטר עקיפה לפחות 2 h לפני הפעלת הניסוי. הערה: חימום מערכת זה חשוב למדידה מדויקת.</li>
	<li>הכינו כלובים עם מצעים נקיים, מילוי בקבוקי מים, והוסיפו את כמות האוכל המוקדמת ביותר למזון.</li>
	<li>בדקו את מצב הדריריט. וסודה ליים אם מחוון צבע של הדריריט מופיע ורוד, מה שמעיד על כך שהדריריט ספג כמות גבוהה של לחות, יש צורך להחליף או לעלות בדריריט טרי.</li>
	<li>כיול המערכת באמצעות גז עם הרכב מסוים (0.5% CO2, 20.5% O2).</li>
	<li>מדידת משקל הגוף ואת הרכב הגוף של כל עכבר, אשר ישמש כדי לנרמל את VO2 ו vco2 נתונים.</li>
	<li>מניחים בעדינות עכבר אחד לכל כלוב.</li>
	<li>להרכיב כלובים מטבולית, למקם אותם בחדר הסביבה מבוקרת טמפרטורה, ולהתחבר קווי גז וכבל חיישן הפעילות.</li>
	<li>לאחר הגדרת פרופיל הניסוי על-ידי הוספת פרמטרים ניסיוניים מתאימים באמצעות התוכנה, הפעל את התוכנית למדידה. מטרת המדידה של היום הראשון היא לספק תקופת ההסתגלות ולמדוד את חילוף החומרים של האנרגיה הבסיסית.</li>
	<li>בשעה 12:00 ביום למחרת, הנושא עכברים ל -24 שעות של צום על ידי הסרת מזון ופירורים מהחגב והתחתון של הכלוב. במקרה הצורך, החליפו במצעים נקיים.</li>
	<li>לאחר 24 שעות, להוסיף את כמות מראש שקלה של אוכל הופר מזון לתקופת האכלה מחדש.</li>
	<li>המשך למדוד ל-48 h הבא. בדוק באופן קבוע אם המערכת פועלת ללא הפרעה בחומרה או בתוכנה.</li>
	<li>לאחר השלמת המדידה, לסיים את התוכנית ולהביא עכברים בחזרה לכלובים המקורי שלהם. מדדו את כמות שאריות המזון כדי לבחון צריכת מזון.</li>
	<li>הפרוטוקול המפורט לקלאורימטר עקיף ניתן למצוא במחקר הקודם9.</li>
</ol>

<ol><li>Gill, S., Panda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Smartphone+App+Reveals+Erratic+Diurnal+Eating+Patterns+in+Humans+that+Can+Be+Modulated+for+Health+Benefits%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">A Smartphone App Reveals Erratic Diurnal Eating Patterns in Humans that Can Be Modulated for Health Benefits.</a> Cell Metabolism. 22 (5), 789-798 (2015).</li>
<li>Longo, V. D., Panda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fasting%2C+Circadian+Rhythms%2C+and+Time-Restricted+Feeding+in+Healthy+Lifespan%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Fasting, Circadian Rhythms, and Time-Restricted Feeding in Healthy Lifespan.</a> Cell Metabolism. 23 (6), 1048-1059 (2016).</li>
<li>Longo, V. D., Mattson, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fasting%3A+molecular+mechanisms+and+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Fasting: molecular mechanisms and clinical applications.</a> Cell Metabolism. 19 (2), 181-192 (2014).</li>
<li>Patterson, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+Fasting+and+Human+Metabolic+Health%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Academy+of+Nutrition+and+Dietetics%22%5BJournal%5D)">Intermittent Fasting and Human Metabolic Health.</a> Journal of the Academy of Nutrition and Dietetics. 115 (8), 1203-1212 (2015).</li>
<li>Fontana, L., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promoting+health+and+longevity+through+diet%3A+from+model+organisms+to+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Promoting health and longevity through diet: from model organisms to humans.</a> Cell. 161 (1), 106-118 (2015).</li>
<li>Boutant, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SIRT1+Gain+of+Function+Does+Not+Mimic+or+Enhance+the+Adaptations+to+Intermittent+Fasting%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">SIRT1 Gain of Function Does Not Mimic or Enhance the Adaptations to Intermittent Fasting.</a> Cell Reports. 14 (9), 2068-2075 (2016).</li>
<li>Gotthardt, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+Fasting+Promotes+Fat+Loss+With+Lean+Mass+Retention%2C+Increased+Hypothalamic+Norepinephrine+Content%2C+and+Increased+Neuropeptide+Y+Gene+Expression+in+Diet-Induced+Obese+Male+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Intermittent Fasting Promotes Fat Loss With Lean Mass Retention, Increased Hypothalamic Norepinephrine Content, and Increased Neuropeptide Y Gene Expression in Diet-Induced Obese Male Mice.</a> Endocrinology. 157 (2), 679-691 (2016).</li>
<li>Kim, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+fasting+promotes+adipose+thermogenesis+and+metabolic+homeostasis+via+VEGF-mediated+alternative+activation+of+macrophage%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Research%22%5BJournal%5D)">Intermittent fasting promotes adipose thermogenesis and metabolic homeostasis via VEGF-mediated alternative activation of macrophage.</a> Cell Research. 27 (11), 1309-1326 (2017).</li>
<li>Lancaster, G. I., Henstridge, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+Composition+and+Metabolic+Caging+Analysis+in+High+Fat+Fed+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Body Composition and Metabolic Caging Analysis in High Fat Fed Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (135), (2018).</li>
<li>Ayala, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+operating+procedures+for+describing+and+performing+metabolic+tests+of+glucose+homeostasis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Standard operating procedures for describing and performing metabolic tests of glucose homeostasis in mice.</a> Disease Models & Mechanisms. 3 (9-10), 525-534 (2010).</li>
<li>Heijboer, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sixteen+h+of+fasting+differentially+affects+hepatic+and+muscle+insulin+sensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Lipid+Research%22%5BJournal%5D)">Sixteen h of fasting differentially affects hepatic and muscle insulin sensitivity in mice.</a> Journal of Lipid Research. 46 (3), 582-588 (2005).</li>
<li>McGuinness, O. P., Ayala, J. E., Laughlin, M. R., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+experiment+in+centralized+mouse+phenotyping%3A+the+Vanderbilt+experience+and+recommendations+for+evaluating+glucose+homeostasis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">NIH experiment in centralized mouse phenotyping: the Vanderbilt experience and recommendations for evaluating glucose homeostasis in the mouse.</a> American Journal of Physiology: Endocrinology and Metabolism. 297 (4), 849-855 (2009).</li>
<li>Jorgensen, M. S., Tornqvist, K. S., Hvid, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calculation+of+Glucose+Dose+for+Intraperitoneal+Glucose+Tolerance+Tests+in+Lean+and+Obese+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Calculation of Glucose Dose for Intraperitoneal Glucose Tolerance Tests in Lean and Obese Mice.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 56 (1), 95-97 (2017).</li>
<li>Nagy, C., Einwallner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+In+Vivo+Glucose+Metabolism+in+High-fat+Diet-fed+Mice+Using+Oral+Glucose+Tolerance+Test+%28OGTT%29+and+Insulin+Tolerance+Test+%28ITT%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Study of In Vivo Glucose Metabolism in High-fat Diet-fed Mice Using Oral Glucose Tolerance Test (OGTT) and Insulin Tolerance Test (ITT).</a> Journal of Visualized Experiments. (131), 56672(2018).</li>
<li>Kim, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermogenesis-independent+metabolic+benefits+conferred+by+isocaloric+intermittent+fasting+in+ob%2Fob+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Thermogenesis-independent metabolic benefits conferred by isocaloric intermittent fasting in ob/ob mice.</a> Scientific Reports. 9 (1), 2479(2019).</li>
<li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+Fasting+Promotes+White+Adipose+Browning+and+Decreases+Obesity+by+Shaping+the+Gut+Microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Intermittent Fasting Promotes White Adipose Browning and Decreases Obesity by Shaping the Gut Microbiota.</a> Cell Metabolism. 26 (4), 672-685 (2017).</li>
<li>Mitchell, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Daily+Fasting+Improves+Health+and+Survival+in+Male+Mice+Independent+of+Diet+Composition+and+Calories%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Daily Fasting Improves Health and Survival in Male Mice Independent of Diet Composition and Calories.</a> Cell Metabolism. 29 (1), 221-228 (2019).</li>
<li>Cignarella, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+Fasting+Confers+Protection+in+CNS+Autoimmunity+by+Altering+the+Gut+Microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Intermittent Fasting Confers Protection in CNS Autoimmunity by Altering the Gut Microbiota.</a> Cell Metabolism. 27 (6), 1222-1235 (2018).</li>
<li>Martinez-Lopez, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((System-wide+Benefits+of+Intermeal+Fasting+by+Autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">System-wide Benefits of Intermeal Fasting by Autophagy.</a> Cell Metabolism. 26 (6), 856-871 (2017).</li>
<li>Lo Martire, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+blood+glucose+as+a+function+of+body+temperature+in+laboratory+mice%3A+implications+for+daily+torpor%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Changes in blood glucose as a function of body temperature in laboratory mice: implications for daily torpor.</a> American Journal of Physiology: Endocrinology and Metabolism. 315 (4), 662-670 (2018).</li>
<li>Chaix, A., Zarrinpar, A., Miu, P., Panda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-restricted+feeding+is+a+preventative+and+therapeutic+intervention+against+diverse+nutritional+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Time-restricted feeding is a preventative and therapeutic intervention against diverse nutritional challenges.</a> Cell Metabolism. 20 (6), 991-1005 (2014).</li>
<li>Chaix, A., Lin, T., Le, H. D., Chang, M. W., Panda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-Restricted+Feeding+Prevents+Obesity+and+Metabolic+Syndrome+in+Mice+Lacking+a+Circadian+Clock%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Time-Restricted Feeding Prevents Obesity and Metabolic Syndrome in Mice Lacking a Circadian Clock.</a> Cell Metabolism. 29 (2), 303-319 (2019).</li>
<li>Wang, B., Chandrasekera, P. C., Pippin, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptin-+and+leptin+receptor-deficient+rodent+models%3A+relevance+for+human+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Diabetes+Reviews%22%5BJournal%5D)">Leptin- and leptin receptor-deficient rodent models: relevance for human type 2 diabetes.</a> Current Diabetes Reviews. 10 (2), 131-145 (2014).</li>
<li>Pan, W. W., Myers, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptin+and+the+maintenance+of+elevated+body+weight%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%3A+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Leptin and the maintenance of elevated body weight.</a> Nature Reviews: Neuroscience. 19 (2), 95-105 (2018).</li>
<li>Jackson, D. S., Ramachandrappa, S., Clark, A. J., Chan, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanocortin+receptor+accessory+proteins+in+adrenal+disease+and+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Melanocortin receptor accessory proteins in adrenal disease and obesity.</a> Frontiers in Neuroscience. 9, 213(2015).</li>
<li>Tolson, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+Sim1+deficiency+causes+hyperphagic+obesity+and+reduced+Mc4r+and+oxytocin+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Postnatal Sim1 deficiency causes hyperphagic obesity and reduced Mc4r and oxytocin expression.</a> Journal of Neuroscience. 30 (10), 3803-3812 (2010).</li>
<li>Shimada, M., Tritos, N. A., Lowell, B. B., Flier, J. S., Maratos-Flier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+lacking+melanin-concentrating+hormone+are+hypophagic+and+lean%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mice lacking melanin-concentrating hormone are hypophagic and lean.</a> Nature. 396 (6712), 670-674 (1998).</li>
<li>Reitman, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice+and+men+-+environmental+temperature%2C+body+temperature%2C+and+treatment+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Letters%22%5BJournal%5D)">Of mice and men - environmental temperature, body temperature, and treatment of obesity.</a> FEBS Letters. 592 (12), 2098-2107 (2018).</li>
<li>Chvedoff, M., Clarke, M. R., Irisarri, E., Faccini, J. M., Monro, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+housing+conditions+on+food+intake%2C+body+weight+and+spontaneous+lesions+in+mice.+A+review+of+the+literature+and+results+of+an+18-month+study%5BTitle%5D)+AND+%22Food+and+Cosmetics+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Effects of housing conditions on food intake, body weight and spontaneous lesions in mice. A review of the literature and results of an 18-month study.</a> Food and Cosmetics Toxicology. 18 (5), 517-522 (1980).</li>
<li>Toth, L. A., Trammell, R. A., Ilsley-Woods, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+Between+Housing+Density+and+Ambient+Temperature+in+the+Cage+Environment%3A+Effects+on+Mouse+Physiology+and+Behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Interactions Between Housing Density and Ambient Temperature in the Cage Environment: Effects on Mouse Physiology and Behavior.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 54 (6), 708-717 (2015).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

זה היה מתועד היטב כי אם מספק השפעות בריאותיות מועילות על מחלות שונות בבני אדם ובעלי חיים8,15,16,17,18,19. המנגנונים הבסיסיים שלה, כגון המעי האוטומטי ומיקרובידום המעיים, הובהר לאחרונה. הפרוטוקול המוצג מתאר isocaloric 2:1 IF משטר אם בעכברים לחקירת הטבות מטבולית בלתי תלוי קלוריות של IF נגד השמנה הנגרמת מפני דיאטה ותפקוד מטבולי מ...

אורח החיים המודרני קשור לזמן צריכת מזון יומיומי ארוך יותר ותקופות צום קצר יותר1. זה תורם מגיפת ההשמנה הגלובלית הנוכחית, עם חסרונות מטבולית לראות בני אדם. צום התאמן במהלך ההיסטוריה האנושית, ואת היתרונות הבריאותיים המגוונים שלה כוללים תוחלת חיים ממושכת, נזק חמצוני מופחת, ו אופטימיזציה הומאוסטזיס אנרגיה2,3. בין מספר דרכים לתרגל צום, מניעת אנרגיה תקופתית, כינה צום לסירוגין (IF), היא שיטה תזונתיים פופולרית הנהוגה באופן נרחב על ידי האוכלוסייה הכללית בשל משטר קל ופשוט שלה. מחקרים שנעשו לאחרונה במודלים פרה-קליניים וקליניים הוכיחו כי אם ניתן לספק יתרונות בריאותיים הדומים להגבלה ממושכת של צום וקלוריק, מציע שאם יכולה להיות אסטרטגיה טיפולית פוטנציאלית להשמנת יתר ומחלות מטבוליות2,3,4,5.
אם משטרי משתנה במונחים של משך צום ותדירות. יום חלופי צום (כלומר, 1 יום האכלה/1 יום צום; 1:1 IF) כבר בשימוש הנפוץ ביותר אם משטר מכרסמים לחקור את ההשפעות הבריאותיות המועילה שלה על השמנת יתר, מחלות לב וכלי דם, מחלות ניווניות, וכו '2,3. עם זאת, כפי שמוצג במחקרים קודמים6,7, ועוד מכונאי אישר בניתוח צריכת האנרגיה שלנו8, 1:1 אם תוצאות האכלה (~ 80%) בשל חוסר זמן האכלה מספיק כדי לפצות על אובדן אנרגיה. זה הופך את זה לא ברור אם היתרונות הבריאותיים שהוענקו על ידי 1:1 אם הם מתווכת על ידי הגבלת קלוריות או שינוי של דפוסי אכילה. לכן, משטר IF חדש פותחה ומוצגת כאן, הכוללת של 2 יום האכלה/1 יום צום (2:1 IF) דפוס, אשר מספק עכברים עם זמן מספיק כדי לפצות על צריכת המזון (~ 99%) ומשקל הגוף. עכברים אלה מושווים לקבוצת ad libitum (אל). משטר זה מאפשר בדיקת ההשפעות של isocaloric אם בהעדר הפחתת קלוריות בעכברים מסוג פראי.
לעומת זאת, במודל העכבר שמוצגים התנהגות האכלה, האכלה אל לא יכול להיות מצב שליטה מתאים כדי להשוות ולבחון את ההשפעות של 2:1 IF. לדוגמה, מאז ob/ob עכברים (מודל גנטי נפוץ עבור השמנת יתר) התערוכה hyperphagia בשל חוסר לפטין הוויסות התיאבון והשובע, אלה עם 2:1 IF מוצג ~ 20% צריכת הקלוריות מופחתת בהשוואה ob/ob עכברים עם האכלה אל. כך, כדי לבחון ולהשוות את ההשפעות של IF ב ob/ob עכברים, קבוצה האכלה זוג כפקד מתאים צריך להיות מועסק.
בסך הכל, פרוטוקול מקיף מסופק לבצע isocaloric 2:1 IF, כולל שימוש בבקרת האכלה זוג. זה הוכיח עוד כי isocaloric 2:1 אם מגן על עכברים מפני השמנה גבוהה תזונה שומן המושרה ו/או תפקוד מטבולית בשני פראי סוג ו ob/ob עכברים. פרוטוקול זה יכול לשמש כדי לבחון את ההשפעות הבריאותיות המומלצות של 2:1 אם בתנאים פתולוגיים שונים, כולל הפרעות נוירולוגיות, מחלות לב וכלי דם וסרטן.

<table><tbody><tr><td>מערכת מקיפה לניטור בעלי חיים במעבדה (CLAMS)</td>מכשירי <td></td><td>קולומבוס</td><td>קלורימטר עקיף</td></tr><tr><td>D-(+)-תמיסת גלוקוז</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>G8769</td><td>עבור GTT</td></tr><tr><td>EchoMRI 3-in-1</td><td>EchoMRI</td><td>EchoMRI 3-in-1</td><td>ניתוח הרכב גוף</td></tr><tr><td>גלוקומטר ורצועות</td><td>Bayer</td><td>Contour הבא</td><td>אלה מיועדים לניסויי</td></tr> <tr><td>GTT ו-ITTדיאטה עתירת שומן (45% קק"ל% שומן)</td><td>מחקר דיאטות בע"מ</td><td>#D12451</td><td>3.3 קק"ל/גרם</td></tr><tr><td>דיאטה עתירת שומן (60% קק"ל אחוז שומן)</td><td>Research Diets Inc.</td><td>#D12452</td><td>4.73 קק"ל/גרם</td></tr><tr><td>אינסולין</td><td>El Lilly</td><td>Humulin R</td><td>לזן עכבר ITT</td></tr><tr><td>: B6. Cg-Lepob/J</td><td>מעבדת ג'קסון</td><td>#000632</td> זן <td>עכבר Ob/Ob</td></tr>: <tr><td>C57BL/6J</td><td>מעבדת ג'קסון</td><td>#000664</td><td></td></tr><tr><td>צ'או רגיל (17% קק"ל% שומן)</td><td>Harlan</td><td>#2918</td><td></td></tr><tr><td>סולם</td><td>מטלר טולדו</td><td></td><td>מדידת משקל גוף וצריכת מזון</td></tr></tbody></table>

הערכה של ההשפעות המטבולית של isocaloric 2:1 לסירוגין צום בעכברים

Assessment of the Metabolic Effects of Isocaloric 2:1 Intermittent Fasting in Mice

צום לסירוגין (IF), התערבות תזונתיים מעורבים הגבלת אנרגיה תקופתית, נחשב לספק יתרונות רבים ולנטרל חריגות מטבולית. עד כה, סוגים שונים של מודלים IF עם משכים שונים של תקופות צום והאכלה תועדו. עם זאת, פענוח התוצאות הוא מאתגר, כפי שרבים מדגמים אלה כוללים תרומות רב עצרת מתוך אסטרטגיות הגבלת זמן וקלוריות. לדוגמה, מודל הצום החלופי של היום, המשמש לעתים קרובות כמשטר IF מכרסם, יכול לגרום האכלה, מציע כי היתרונות הבריאותיים מהתערבות זו צפויים לתווך דרך שתי הגבלת הקלוריות ומחזורי האכלה מחדש הצום. לאחרונה, זה כבר הראה בהצלחה כי 2:1 IF, המורכב 1 יום של צום ואחריו 2 ימים של האכלה, יכול לספק הגנה מפני השמנת יתר דיאטה ושיפורים מטבוליים ללא הפחתה של צריכת הקלוריות הכוללת. מוצג כאן הוא פרוטוקול של isocaloric 2:1 אם התערבות בעכברים. המתואר גם הוא פרוטוקול של האכלה זוגית (PF) הנדרש כדי לבדוק מודל העכבר עם התנהגויות אכילה שונה, כגון hyperphagia. באמצעות 2:1 IF משטר, זה הוכיח כי isocaloric אם מובילה לעלייה במשקל הגוף מופחת, שיפור הומאוסטזיס גלוקוז, והוצאות אנרגיה מוגבר. לפיכך, משטר זה עשוי להיות שימושי כדי לחקור את ההשפעות הבריאותיות של IF בתנאי מחלה שונים.

איור 1 מציג את ניתוחי האכלה לאחר הצום 24 h ואת ההשוואה בין 1:1 ו 2:1 לסירוגין צום. תקופת צום של 24 שעות הביא לירידה של ~ 10% במשקל הגוף, אשר התאושש לגמרי לאחר 2 ימים של האכלה מחדש (איור 1א). תקופת צום של 24 שעות הנגרמת hyperphagia במהלך 2 הימים הבאים של האכלה מחדש (איור 1B). אף על פי כן, השוואת צריכת האנרגיה בין 1:1 יום אלטרנטיבי צום ו 2:1 הצום לסירוגין חשף כי 1 יום של תקופת האכלה מחדש ב 1:1 אם לא ה...

המאמר הנוכחי מתאר פרוטוקול מפורט עבור isocaloric 2:1 הצום לסירוגין להגן ולטפל נגד השמנת יתר ומטבוליזם הגלוקוז לקוי בסוג פראי ו ob/ob עכברים.

הערכה של ההשפעות המטבולית של Isocaloric 2:1 לסירוגין צום בעכברים

Intermittent fasting (IF), a dietary intervention involving periodic energy restriction, has been considered to provide numerous benefits and counteract ...

משטר צום של שניים לאחד לסירוגין מורכב מיום אחד של צום ואחריו יומיים של האכלה מאפשר ללמוד את ההשפעות של התערבויות תזונתיות הכרוכות בהגבלת אנרגיה תקופתית ולא את ההשפעות של צריכת הקלוריות. שלא כמו צום יום חלופי, אשר תוצאות תחת האכלה 2-1 צום לסירוגין מספק עכברים עם מספיק זמן כדי לפצות באופן מלא על אובדן אנרגיה וירידה במשקל הגוף, אשר קורה במהלך צום. זה מאפשר למדענים לבחון את ההשפעות של צום תקופתי ללא תלות בצריכת הקלוריות.שניים לאחד צום לסירוגין מקדם מספר יתרונות נגד דיאטה בשימוש השמנת יתר, תפקוד מטבולי הקשורים כולל הונוסטזיס גלוקוז לקוי ומחלות כבד שומני. פרוטוקול זה יכול להיות מותאם בקלות משטר דיאטה חמש עד שתיים המורכב מחמישה ימים של האכלה ויומיים של צום או זמן מוגבל האכלה שבו הגישה למזון מוגבל לשמונה שעות ביום. אם אדם משתמש במודל עכבר, המציג התנהגות הזנה חלופית, כגון היפרפגיה, האכלה אד ליביטום לא יכול להיות מצב שליטה נאותה.במקרה זה, כלל הזנה זוג יידרש לבחון ולהשוות את ההשפעות של צום לסירוגין. התחל על ידי הכנת דיאטה נורמלית או דיאטה עתירת שומן עבור מודלים עכבר רזה ותואטה המושרה השמנת יתר. למדוד את משקל הגוף הבסיסי ואת הרכב של כל עכבר זכר בן שבעה שבועות C57BL / 6J באמצעות סולם EchomRI, בהתאמה.בהתבסס על תוצאות המשקל והרכב הגוף באופן אקראי ושווה לחלק את העכברים לשתי קבוצות:עד ליביטום או AL, צום לסירוגין או קבוצות IF. לאחר מכן, מקום שניים או שלושה עכברים לכל כלוב להבטיח כי העכברים יש גישה חופשית למי שתייה. אפשר לעכברים שבוע להתאקלם לסביבת הכלוב החדשה לפני תחילת משטר IF.כאשר מוכנים להתחיל את תקופת הצום, להעביר את העכברים לכלוב נקי עם מצעים טריים בשעה 12:00 .m. ספק כמות משוקללת של מזון לקבוצת AL. אין אוכל לקבוצת IF.לאחר 24 שעות, שוקלים את העכברים בשתי הקבוצות, כמו גם את שאריות המזון בכלובי AL. בשעה 12:00 .m, לספק כמות משוקלל של מזון הן AL ו- IF קבוצות.לאחר תקופת האכלה היא מעל למדוד את המשקל של העכברים ושאריות מזון. חזור על המחזור למשך המחקר. הגדר זוג האכלה או קבוצה מבוקרת PF למשך הניסוי על מנת להבטיח השוואה עצמאית קלוריות ל- IF. למדוד את כמות המזון הנצרכת על ידי הקבוצה IF.מחלקים אותו באופן שווה לשלוש מנות ומספקים מנה אחת ביום לבקרת PF. כאשר עובדים עם בעלי חיים עם התנהגויות אכילה משתנות, כגון היפרפגיה, חשוב מאוד לספק כמות שווה של מזון מדי יום לקבוצת הביקורת הזוגית כדי למנוע מעכברים לאכול את המזון בבת אחת. כדי לנתח את הרכב הגוף של העכברים להפעיל את מנתח הרכב הגוף, ולהשאיר את המכונה על במשך שעתיים עד שלוש שעות כדי להתחמם.לפני השימוש בו, הפעל בדיקת מערכת כדי להבטיח דיוק מדידה. ואם יש צורך, לכייל את המערכת עם שמן קנולה. למדוד את משקל הגוף של כל עכבר.לאחר מכן, מניחים אותו במחזיק גלילי בעלי חיים קטן. הוסף מפריד כדי להגביל את התנועה הפיזית של העכבר במהלך המדידה. מניחים את המחזיק לתוך מנתח הרכב הגוף.הפעל את תוכנית הסריקה, שאמורה להימשך 90 עד 120 שניות. לאחר מכן, הסר את המחזיק מהציוד. שים את העכבר בחזרה בכלוב.ביצוע בדיקת סובלנות לגלוקוז ואינסולין כדי לבחון את ההשפעות של צום לסירוגין על הונוסטזיס גלוקוז. לאחר צום של לילה או שש שעות, יש לבצע הזרקה תוך-לידתית של גלוקוז או אינסולין על כל עכבר. לאחר מכן, למדוד את רמת הגלוקוז בדם ב 0, 5, 15, 30, 60, ו 120 דקות לאחר הזרקת באמצעות גלוקומטר.כדי לחקור את ההשפעות של צום לסירוגין על חילוף החומרים של האנרגיה, לבצע קלורימטריה עקיפה על מחזור אחד של IF. לאחר שהעכברים התאקלם במערכת, צם אותם על ידי הסרת מזון ופירורי הופר ותחתית הכלוב. הצג מחדש מזון לאחר 24 שעות לתקופת ההזנה מחדש בת יומיים. בסוף מחזור IF, להחזיר את העכברים בחזרה לכלוב המקורי שלהם ולאסוף נתונים מהתוכנית.העכברים צמים במשך 24 שעות חוו ירידה של עד 10% במשקל הגוף, אשר התאושש לחלוטין לאחר יומיים של הזנה מחדש. כאשר משווים את צריכת האנרגיה בין אחד לאחד לשניים לצום אחד לסירוגין, נמצא כי יום אחד של תקופת הזנה מחדש לא היה מספיק כדי לפצות על הקלוריות שאבדו שהתרחשו בזמן הצום. בהשוואה ל- AL, טיפול IF הוביל לעלייה במשקל הגוף התחתון בעכברים מסוג בר המוזנים עם אוכל רגיל או דיאטה עתירת שומן ללא הבדלים משמעותיים בצריכת המזון.ניתוח הרכב הגוף גילה כי IF מופחת מסת שומן מבלי לשנות מסה רזה בעכברים מסוג בר. ניסויים עם בקרת האכלה זוג אישר כי עלייה במשקל הגוף ירד על ידי IF לא היה בשל צריכת אנרגיה שונה בעכברים מסוג בר. עם זאת, בהשמנת יתר גנטית, ob /ob, עכברים זוג האכילו קבוצת ביקורת היה בלתי ניתן להבחנה מן הקבוצה IF במשקל הגוף והרכב הגוף.בדיקות גלוקוז וסובלנות לאינסולין הראו כי דיאטה עתירת שומן אם עכברים הראו שיפור משמעותי בהומאסטאזיס גלוקוז בהשוואה לתזונת שומן גבוהה AL ועכברים עתירי תזונה עתירי שומן. בעכברים ob/ob, קבוצת IF הציגה שיפור משמעותי בטיפול בגלוקוז עם טיולי גלוקוז קטנים יותר בהשוואה לקבוצת הביקורת שניזונה מזוג עם רגישות לאינסולין שלא הושפעה. השפעה מטבולית נוספת של IF שצוינה בעכברים מסוג פראי הייתה צריכת חמצן גבוהה יותר המעידה על הוצאות האנרגיה במיוחד בתקופת ההאכלה.התנהגות האכלה של עכברים יכולה להיות מושפעת מגורמים סביבתיים כולל צפיפות הדיור. לכן, חשוב לשמור על אותו מספר של עכברים שוכנים לכל כלוב בין קבוצות במהלך המחקר. בעת שימוש במודל עכבר חדש, מומלץ לבחון את התנהגות ההזנה לפני ביצוע ניסוי צום לסירוגין.ניתן ליישם בקלות צום איסוקלורי שניים עד אחד לסירוגין על מודלים אחרים של מחלות, כולל סוכרת, מחלות לב, טרשת עורקים ומחלות נוירולוגיות.

assessment-metabolic-effects-isocaloric-21-intermittent-fasting

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

המאמר הנוכחי מתאר את הדור ואת מטבולית איפיון של עכברים-fed דיאטה עתירת שומן כמודל של עמידות לאינסולין הנוצרות על-ידי תזונה והשמנה. עוד כולל פרוטוקולים מפורט לביצוע הבדיקה סובלנות גלוקוז דרך הפה ואת הבדיקה עמידות אינסולין, מעקב אחר שינויים לכל הגוף של גלוקוז חילוף החומרים ויוו.

חקר In Vivo מטבוליזם הגלוקוז עכברים הניזונה דיאטה עתירת שומן באמצעות בדיקת הגלוקוז אוראלי סובלנות (OGTT) ובדיקה עמידות לאינסולין (ITT)

השכיחות של השמנת יתר עולה ומגבירה את הסיכון של מחלות ריאה כרונית. להקים את המנגנונים שבבסיס ואת אסטרטגיות מניעה, חיה מוגדרים היטב דרושים מודלים. כאן, אנו מספקים שלוש שיטות (גלוקוז-סובלנות-בדיקה, הגוף plethysmography של הריאה קיבוע) לחקור את ההשפעה של השמנת יתר על תוצאות ריאתי בעכברים.

בדיקת עמידות הגלוקוז בקרום הבטן, מדידה של תפקודי ריאה של קיבעון של הריאה לחקור את ההשפעה של השמנת יתר, חילוף חומרים לקוי על תוצאות ריאתי

פרוטוקול זה מתאר את השימוש מנתח בהרכב הגוף ומערכת חילוף החומרים בעלי חיים ניטור לאפיין הרכב הגוף ופרמטרים מטבולית בעכברים. מודל השמנת יתר הנגרמת על ידי האכלה עתירי שומן משמש כדוגמה עבור היישום של טכניקות אלה.

הרכב הגוף וניתוח מטבולית שכולאת בעכברים פד שומן גבוה

קצר הפעלה (≤10 דקות) גבוה מרווח אימון אינטנסיביות (חבוט) מתגלה כאלטרנטיבה עוד שיטות התרגול, עדיין גרסאות קצרות רק לעתים נדירות הם עוצב במחקרים שנעשו בבעלי חיים. כאן, אנו מתארים ישמשו, 3 ימים בשבוע, הליכון במעלה הגבעה חבוט פרוטוקול זה מגביר את הביצוע הגופני אצל זכר, נקבה בגילאי עכברים.

הפעלה קצר בעוצמה גבוהה מרווח אימון והערכה הליכון בעכברים בגילאי

מאמר זה מספק שלוש גישות קלות ונגישות להערכת חילוף החומרים של השומנים בעכברים.

הערכת יכולת טיפול בליפידים בכל הגוף בעכברים

חמצון β חומצות שומן הוא מסלול מטבולי חיוני האחראי על הפקת אנרגיה בסוגי תאים רבים ושונים, כולל הפטוציטים. כאן אנו מתארים שיטה למדידת חמצון-β חומצות שומן בהפטוציטים ראשוניים שזה עתה בודדו באמצעות 14חומצה פלמיטית המסומנת כ-C.

מדידה של חומצת שומן β-חמצון בהשעיה של הפטוציטים עכברים מבודדים טריים

כתב יד זה מתאר פרוטוקול למדידת קצב חילוף החומרים של הבזל ואת היכולת החמצונית של אדיפוזיטים תרמוגניים בעכברים שמנים.

קביעת ההוצאה על אנרגיה בזלית והקיבולת של אדיפוציטים תרמוגניים להוצאות אנרגיה בעכברים שמנים

הגבלת העיתוי של צריכת המזון התגלתה כהתערבות מבטיחה להחלשת מחלות מטבוליות הנגרמות על ידי דיאטה. כתב יד זה מפרט את הבנייה והשימוש במערכת יעילה שנבנתה בתוך הבית למדידה ומניפולציה של צריכת מזון קצבית בעכברים.

מניפולציה של צריכת מזון קצבית בעכברים באמצעות מערכת הזנה מותאמת אישית

מודל אכילה מופרזת הוקם בעכברים באמצעות גישה לסירוגין ל-M&amp;M's (מזון טעים מאוד העשוי משומן וסוכר). עכברים עם גישה לסירוגין למזון עתיר שומן וסוכר זה הראו התנהגויות דמויות לחץ, צריכת קלוריות מוגברת והעדפה למזון זה על פני צ'או רגיל בהשוואה לעכברים עם גישה רציפה או ללא גישה למזון.

מודל צריכת בולמוס לסירוגין בעכברים

פרופיל איזוטופים יציבים ידי ניתוח כרומטוגרפיה מסת הגז spectrometric של השטף מטבולית מתווך מתואר...

פרופיל איזוטופים יציבים של שטף מטבולית מתווך בשלב פיתוח למבוגרים Caenorhabditis elegans</em

חקור את ההשפעות המטבוליות של צום לסירוגין ביחס 2:1 בעכברים מסוג C57BL/6J ו-ob/ob. השיטה מאפשרת לבחון התערבויות תזונתיות ללא תלות בצריכת קלוריות, ומדגימה שיפור בטיפול בגלוקוז ובהרכב הגוף.

הערכה של ההשפעות המטבולית של Isocaloric 2:1 לסירוגין צום בעכברים

גלה סרטונים נוספים