אפיון מחלות במהלך החמצון האוטומטי הנשלט באמצעות מעבר מדרגתי

חמצן הדרגתי ektacytometry היא הערכה תפקודית להעריך נטייה מחלה בודדים. נכון להיום, אין בדיקות פונקציונליות אחרות זמינות או בשימוש. חמצן הדרגתי ektacytometry הוא מסוגל לקבוע את מתח החמצן שבו תאי הדם של חולה עם מחלה חרגל להתחיל חרגל.

מתח חמצן זה הוא ספציפי למטופל והוא יכול לשמש סמן ביולוגי לחומרת המחלה. במחלת חרמשית, טכניקה זו יכולה לשמש כדי לפקח על יעילות הטיפול וזה יכול לשמש לפיתוח של טיפולים חדשים. הדגמה חזותית של טכניקה זו חשובה משום שהיא רגישה מאוד.

ישנם גורמים רבים שישפיעו על המדידה אשר אתה לא יודע מתי אתה מתחיל לעבוד עם טכניקה זו. מי שמנסה את זה בפעם הראשונה עלול לחוות כי הטכניקה רגישה מאוד להכנת מדגם וטיפול לדוגמה. העצה שלי היא לעבוד סטנדרטי ככל האפשר ולפתח שגרה.

כדי להתחיל בהליך זה, הפעל את המחשב ואת ektacytometer ולפתוח את התוכנה במחשב. פתח את גליל החנקן כדי לוודא שהחנקן זמין כדי לרוקן את הדגימה. מנמיך את בוב ב ולוודא את ה יכול להסתובב בחופשיות.

כאשר התוכנה פועלת, בדוק אם ההודעה לוודא שסתום הגז פתוח ולחץ על אישור. ודא כי ektacytometer מתחיל את תהליך הבדיקה העצמית ובחר להתחיל. אם בדיקה עצמית נכשלת, הפעל אותה מחדש על-ידי לחיצה על בדיקת חומרה, pO2, בדיקה עצמית. בחר סריקת pO2 מהבדיקות השונות המפורטות בצד ימין.

בחר הגדרות בצד ימין של המסך וודא שהן מוגדרות לפי הפרמטרים המפורטים בטבלה אחד מפרוטוקול הטקסט המוודא לשמור על אותן הגדרות עבור כל מדידה. שמור הגדרות אלה על-ידי לחיצה על אישור ולאחר מכן לחיצה שוב על אישור. ראשית, לאסוף דגימות דם על ידי פורנקונצורה בצינור המכיל EDTA ולאחסן את הדם בארבע מעלות צלזיוס למינימום של 30 דקות אבל לא יותר מ 24 שעות.

לאחר מכן, מערבבים את הדגימות בעדינות על ידי היפוך הומוגניזציה. תן לדגימות להתחמם לטמפרטורת החדר על ספסל רולר לפני המדידה. השתמש מנתח המטולוגיה כדי למדוד את ספירת הדם המלאה על ידי הצבת השאיפה מחט לתוך הצינור ולחיצה על הכפתור מאחורי המחט של מנתח המטולוגיה כדי להתחיל את המדידה המנתח ישתמש בין 20 ל 200 microliters של דם שלם.

לאחר מכן לתקנן את דגימת הדם כולה לספירת RBC של 200 מיליון תאי דם אדומים בחמישה מיליליטר של PVP על ידי חישוב נפח המדגם שיתווסף. כדי להתחיל, לחתוך קצה פיפטה מראש להרטיב אותו על ידי שימוש חוזר בדם שלוש פעמים. לאחר מכן פיפטה נפח המדגם המחושב לתוך בקבוקון PVP.

מערבבים בעדינות את המדגם באופן ידני על ידי היפוך עד שהוא הומוגני. לאט לאט לצייר שני מיליליטר של תערובת הדם PVP לתוך מזרק שלושה מיליליטר ללא המחט. לדחוף את הבוכנה כדי להסיר את כל בועות אוויר גלוי פתרון מדגם עודף עד בין 1.5 ו 1.8 מיליליטר נשארים במזרק.

הזרק את נפח הדגימה הכולל לאט ובדרך שווה לבוב דרך המחבר. ודא כי רמת המדגם היא מעל חיישן החמצן ואת חור היניקה הקטן. בתוכנה, לחץ על חדש ומלא את המזהה לדוגמה, ההערות, תאריך התרומה וצמיגות PVP.

לחץ על אישור ושוגם. לאחר 60 שניות של שאספירה, ההגבה מסתובבת ושואפת שוב במשך 15 שניות. כאשר הסיבוב נעצר, לחץ על אישור. סגור את מכסה המכונה.

לחץ להמשיך ולהתחיל עכשיו כמו חמצן הדרגתי ektacytometry נעשה עם רווח קבוע. לאחר המדידה, הדפס את הדוח המציג את העקומה ואת הפרמטרים המחושבים באופן אוטומטי על-ידי התוכנה. ודא שהנתונים הגולמיים מאוחסנים באופן אוטומטי בתיקיה המיועדת בהגדרות.

ראשית, להסיר את המזרק מדגם ולהחליף אותו עם מזרק מלא מים מזוקקים או מים deionized. לחץ על נקה ורוקן באיטיות את המחבר במהלך שטיפה כדי לוודא שהוא מתרוקן לשני הכיוונים. לאחר מכן, להסיר את המזרק ולהרים את בוב.

השתמש במטלית רכה כדי לייבש ביסודיות את בוב ומחבר. לאחר מכן השתמש במזרק גדול כדי לשטוף את המחבר כדי להסיר את כל המים שנותרו בצינור ובוב. שמור את המזרק בלחצון ולחסום את השקע של בוב כדי לקבל בחזרה את הלחץ בצינורות ובכך להסיר את המים הנותרים.

ואז לייבש את ה תוך הימנעות לגעת נקודת החמצן. מנמיך את בוב ואת ה ההכן את המכונה למדידה הבאה. לאחר הבטחת כי המכונה הוא שטף כראוי, לבדוק כדי לוודא כי הצינורות הנכונים מתייחסים פתרון הניקוי.

סגור את התוכנה, לחץ על סגור ולחץ על התחל כדי להתחיל בתוכנית ניקוי סוף היום. ואז לרוקן את בקבוק הפסולת ולהשתמש במטלית רכה לייבש את בוב ו. סגור את מכסה המכונה.

סגור את גליל החנקן כבה את המחשב והמכונה. חמצן הדרגתי ektacytometry יכול לשמש כדי לחקור את ההתנהגות המחליא של תאי דם אדומים תחת מגוון של ריכוזי חמצן. ב ektacytometry שיפוע חמצן, ניוון מתמשך של המדגם על ידי גז חנקן ואחריו reoxygenation מהיר על ידי אוויר הסביבה.

בתנאים אלה, חרפת תאי דם אדומים ניתן לראות תחת ניוון. זה יגרום עיוות של דפוס diffraction כי תאים אדומים חולים לא ליישר כראוי תחת הלחץ ההטיה להחיל. תאי דם אדומים מגל להראות שינוי צורה במהלך deoxygenation המחקה את התנאים במהלך חמצן הדרגתי ektacytometry אבל להראות שום שינוי צורה כאשר מחומצן.

תהליך זה גורם לעיוות של דפוס ההתהוות במהלך ektacytometry שיפוע חמצן ובכך בירידה במדד התארכות. עקומה ייצוגית המתקבלת על ידי ektacytometer מציגה את ששת הפרמטרים המשקפים מאפיינים שונים של ההתנהגות המחליא:מדד התארכות מקסימלי, מדד התארכות מינימלי, דלתא EI, נקודת מחליא, האזור מתחת לעקומה, ואת ההתאוששות. עקומות מייצגות של תאי דם אדומים משליטה בריאה, חולים עם תכונות HbS, וחולה מחלה הומוזיגני מוצגים כאן.

ההבדלים הברורים בעקומות הייצוגיות של חולי מגל הומוזיגים שטופלו בהידרוקסיל אוריאה ועיקור מדגישים את התועלת של ההתקפדה הזו. ישנם גורמים רבים המשפיעים על חמצן הדרגתי ektacytometry כגון טמפרטורה, pH, osmolarity של PVP, אלא גם שרידים של מים ואת מידת הערבוב של פתרון דגימת הדם יכול להשפיע על המדידות. לכן, טיפול לדוגמה מתוקן הוא חיוני.

התוצאה של חמצן הדרגתי ektacytometry עשוי להיות מיושם ישירות בפועל קליני, ובכך לתרום לרפואה מותאמת אישית. טכניקה זו מאפשרת לחקור התנהגות חרמשית כדי לחקור את הפוטנציאל של טיפולים חדשים למחלות חרמשיות והוא יכול לשמש סמן ביולוגי רלוונטי קלינית לחומרת המחלה.