מינוף טורבידיות וטרומבולסטוגרפיה לאפיון קרישי דם משלימים

תרומבולסטוגרפיה ומבחן ת'רוביות הן שתי שיטות פשוטות ומיוחדות לאפיון קרישי דם. טכניקות אלה יחד מציעות הבנה מקיפה יותר של האופן שבו משתני קרישה משפיעים על תכונות קריש. שתי התשקיף הזה, לא רק להציע ניתוח קריש נקודת קצה, אלא גם למשוך היווצרות קריש פיברין לאורך זמן, בניגוד לכלים רבים אחרים אפיון קריש דם טכניקות אלה יכולות לעזור לפתח פלטפורמת קריש סינתטי רלוונטי מבחינה פיזיולוגית שיכולה לספק אבחנה אמינה של המצב הפיברינוליטי של חולי פקקת כדי לפקח על טורבידיות קריש לאורך זמן, להשתמש בכל ספקטרומטר זמין מסחרית שיש לו טווח ספיגה של 350 עד 700 ננומטר.

הפעל את הספקטרומטר ולפתוח את תוכנת הניתוח המתאימה. לאחר מכן בחרו לוח אחד ופתחו את לשונית הגדרות הלוח. לחץ על ABS וקינטי כדי לפקח על ספיגה דינמית לאורך זמן.

בחר 550 ננומטרים בכרטיסיה אורך הגל ולאחר מכן עבור ללשונית התזמון והתאם את זמן הריצה הכולל ל- 60 דקות עם מרווח זמן של 30 שניות, בחר את הבארות המעניין על-ידי הדגשתן. פיפטה 140 microliters של PBS לתוך באר אחת של צלחת UV שקוף 96 היטב. לאחר מכן מוסיפים 10 מיקרוליטרים של תרומבין ומערבבים, מיד ליזום קרישה על ידי הוספת 50 microliters של פיברינוגן לבא ו פיפטה למעלה ולמטה חמש פעמים באמצעות התחנה הראשונה בלבד של פיפטה דואג להימנע מיצירת בועות.

מניחים את הצלחת במחזיק הצלחת ולחץ לקרוא בתוכנה כדי להתחיל את קריאת turbidity. כאשר הקריאה סיימה לאחזר את נתוני העכור ולקבל עקומת מעקב עגמומיות על ידי התוויית השינוי סופג לאורך זמן, להפיק עגמומיות מקסימלית על ידי לקיחת ערך הספיגה המרבי של העקומה לאורך זמן, ולאחר מכן לחשב 90% עגמומיות מקסימלית על ידי הכפלת עשב מקסימלי על ידי 0.9. לגזור את הזמן כדי עגימות מקסימלית על ידי חישוב הזמן של אתחול קריש ל 90% עגימות מקסימלית.

הפעל את thromboelastography או מנתח TEG, ולחכות לטמפרטורה להתייצב ב 37 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן לפתוח את תוכנת TEG וליצור שם ניסוי תחת סעיף מזהה. לחץ על הכרטיסיה TEG ופעל לפי ההנחיות המופיעות על המסך כדי לבצע בדיקת eTest עבור כל הערוצים. לאחר מכן מקם את הידית בחזרה למיקום העומס לאחר השלמת כל הבדיקות.

לחץ על בוצע בדף המידע והקלט מידע לדוגמה עבור ערוצים בהם ייעשה שימוש. מניחים TEG לא צותת ברורה בערוץ המתאים. החלק את המוביל למעלה ולחץ על הקאפ למטה חמש פעמים כדי לתקן את הסיכה למוט פלג הגוף העליון ולאחר מכן להוריד את המוביל ולחץ את ה כלפי מטה לתוך הבסיס עד שהוא לוחץ.

פיפטה 20 microliters של פתרון תרומבין לתוך TEG, ולאחר מכן ליזום קרישה על ידי הוספת 340 microliters של פיברינוגן לתוך ה כדי להשיג פתרון קרישת 360 microliter. מערבבים את תכולת ה על ידי צינור למעלה ולמטה חמש פעמים. החלק את נושאת הגביע שנטענה מעלה הזז את הידית למיקום הקריאה ולחץ על התחל בתוכנה כדי ליזום את קריאת ה- TEG.

לאחר השלמת הקריאה לאחזר את הפרמטרים ולקבל עקומת מעקב TEG על ידי התוויית משרעת לאורך זמן. בחר MA כמו משרעת מקסימלית, אשר מעיד על זן קריש ו TMA כזמן משרעת מקסימלית מהתוכנה. מערבולת ייצוגית ועקומות מעקב TEG של קרישי פיברין אנושיים וחזירים ברמות פיברינוגן שונות מוצגים כאן.

עקומות המעקב מראות כי לאחר תקופת השהיה לאחר התחלת קריש, קלוביות קריש או משרעת קריש עולה לאורך זמן ורמות כבויות בסוף היווצרות קריש. מערבולת מקסימלית וזמן עד מערבולת מקסימלית הם שני הפרמטרים הנגזרים מערבולת, בעוד משרעת מקסימלית וזמן משרעת מקסימלית נגזרים TEG. ברמה גבוהה יותר של פיברינוגן בתספור הקרישה כל ארבעת הערכים גדלים.

מערבולת מקסימלית היא מדד אופטי של מבנה קריש, אשר מעיד על עובי סיבים פיברין וצפיפות רשת פיברין. בעוד משרעת מקסימלית היא מדד מכני המשקף זן קריש מוחלט, נלקח יחד שני הערכים לספק תובנה משלימה על מבני מיקרו קריש. הליך זה מדגים מודל קרישה פשוט יותר כדי לבחון משתנים המשפיעים בעיקר על פילמור פיברין.

מודל זה יכול להיות מותאם אישית על ידי הכללת גורמי קרישה נוספים כדי ללמוד פרמטרים אחרים. מודל הקרישה ניתן לשנות בקלות באמצעות דגימות פלזמה קלינית כדי לפקח על היווצרות קריש והתפכחות בנוכחות תרופות antithrombotic. תוצאות יכולות להנחות ניהול טיפולי בחולים.