Name: הפעלת התכווצות אבי העורקים רוחבית עם תפר נספג להשגת היפרטרופיה שריר הלב ארעית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-09-09T14:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: למד שיטה משופרת ליצירת היפרטרופיה שריר הלב ארעית בעכברים באמצעות תפרים נספגים. פרוטוקול זה מספק חלופה בטוחה יותר לחקר מנגנוני נסיגת ההיפרטרופיה ותנאי מוקדם של שריר הלב.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81770271; ל- Y, ליאו), הכספים המשותפים של הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (U1908205; ל- Y, ליאו), ופרויקטי התכנון העירוניים של הטכנולוגיה המדעית של גואנגג'ואו (201804020083; לד"ר ליאו).

כל ההליכים בוצעו בהתאם להנחיות הטיפול והשימוש בחיות מעבדה שפורסמו על ידי המכונים הלאומיים לבריאות בארה"ב (פרסום NIH מס' 85-23, עודכן בשנת 1996). עכברים זכרים C57BL/6J (8-10 שבועות, 20-25 גרם) סופקו על ידי מרכז החיות של האוניברסיטה הרפואית הדרומית.
1. הכנה טרום ניתוחית
<ol><li>צבוט את קצה מחט 25 G עם מחזיק מחט קהה אותו עם חפץ קשה כמו המחזיק.</li>
	<li>מעבירים תפר 5-0 נספג דרך המחט ולאחר מכן מסובבים אותו ל-90° עם מחזיק13. הערה: על פי מטרות מחקר שונות, החוקרים יכולים לבחור קווים נספגים עם זמן ספיגה שונה. בפרוטוקול הזה, השתמשנו בתפר נספג של שבועיים כדי לכווץ את קשת העורקים.</li>
	<li>עקומת עוד 25 G מחט ל 120° ולהחליק את הקצה עם מחזיק לשמש מרווח בשלב הקשירה. הערה: מחט 25 גרם שימשה כמרווח לעכברים בעלי משקל גוף (BW) >25 גרם. השתמש במחט 26 גרם לעכברים עם 19-24 גרם BW.</li>
	<li>לחטא את האתר האופרטיבי עם 75% אלכוהול.</li>
	<li>כוונן את טמפרטורת כרית החימום ל-37°C.</li>
	<li>הכן מכשירים כירורגיים מעוקרים (כולל 1 מספריים עיניים, 1 מספריים מיקרו, 2 פינצטה מרפק מיקרוכירורגית, 1 מחזיק מחט, ו 1 מחזיק מחט מיקרו).</li>
</ol>2. אינדוקציה של הרדמה וגילוח
<ol><li>הרדמה של עכבר על ידי הזרקה תוך-אישית של תערובת של קסילאזין (5 מ"ג/ק"ג) וקטמין (100 מ"ג/ק"ג) מדולל בתמיסת מלח (0.9% NaCl). אשר הרדמה מלאה עם רפלקס משיכת הדוושה השלילי.</li>
	<li>שמור על העכבר במצב סופי על ידי תיקון החותכים עם תפר ותיקון הגפיים עם קלטות דבק.</li>
	<li>החל קרם depilatory כדי להסיר שיער על צווארו xiphoid. לחטא את האזור עם יוד ואחריו 75% אלכוהול.</li>
</ol>3. ניתוח
<ol><li>בצע חתך מעל 10 מ"מ בתנוחת קו האמצע בין חריץ סופרה-עצם החזה והחזה עם אזמל. לאחר מכן, להפריד את העור ואת fascia שטחי.</li>
	<li>זהה את החלל הבין-צלעי הראשון על-ידי ספירת הצלעות מזווית החזה. בצע את החתך בחלל הבין-צלעי הראשון וקרוב ככל האפשר לעצם החזה. לחדור אותו בבוטות עם פינצטה מרפק כדי לפתוח את החלל הזה.</li>
	<li>מפרידים בעדינות את הפרנצ'ימה ואת התימוס עד לקשת אבי העורקים הרוחבית. הערה: אין לפגוע בשפע הקודקודי כדי למנוע פנאומותורקס.</li>
	<li>עברו את התפר הניתן לספיגה של 5-0 מתחת לקשת העורקים בין העורק הברכיוסקפלי לעורק הראשי המשותף השמאלי עם מחט תפס14. אנא ודא כי העורק brachiocephalic, העורק הראשי המשותף השמאלי, ואת העורק subclavian השמאלי גלויים בשדה המבצע.</li>
	<li>מניחים את המרווח, מוכן בשלב 1.3, על האב העורקים הרוחבי ולבצע קשר כפול על המרווח עם התפר בשלב 3.4. הערה: קצה המרווח חייב להיות בוטה כדי למנוע פגיעה בגור העורקים הרוחבי בעת הסרתו.</li>
	<li>הסר את המרווח במהירות אך בעדינות, ולאחר מכן לחתוך את קצות התפר.</li>
	<li>סגור את החלל הבין-צלעי הראשון ואת העור באמצעות תפרים של 5-0 ניילון. לחטא את העור שוב עם 75% אלכוהול.</li>
	<li>מניחים את העכבר על כרית החימום כדי לקדם את ההתאוששות. להזריק buprenorphine (0.1 מ"ג/ק"ג, q12h) תוך-פרטית במשך 3 הימים הראשונים לאחר הניתוח.</li>
	<li>להחזיר את העכבר לכלוב בחדר מחזור אור / כהה 12 שעות כאשר הוא משחזר את ההכרה.</li>
	<li>בצע ניתוח מזויף זהה לכל השלבים לעיל אך ללא התכווצות (שלב 3.5).</li>
	<li>בצע ניתוח עבור קבוצת תפר משי, זהה לכל השלבים לעיל אבל באמצעות תפר משי 5-0 בשלב 1.2.</li>
</ol>4. הערכה אקו לבביוגרפית של קשירה ומדידות מוצלחות
<ol><li>בצע הערכה אקו-קרדיוגרפית ביום (ד) 7 לאחר הניתוח.</li>
	<li>הרדמה העכבר עם 3% isoflurane באמצעות שאיפה עבור אינדוקציה, ו 1.5% לשמירה על עומק ההרדמה, עם קצב זרימת חמצן 0.5-1 L / min.</li>
	<li>מניחים את העכבר בתנוחה סופית על הפלטפורמה, מתוחזק ב 37 °C (69 °F), ואת הגפיים שלה אל האלקטרודה.</li>
	<li>הסר את שיער החזה עם קרם depilatory ולהחיל סוכן צימוד קולי על החזה של העכבר.</li>
	<li>להעריך התכווצות רוחבית של העורקים עם בדיקה של 30 מגה-הרץ.<ol>
<li>הטה את הרציף שמאלה. שמור את החללית במצב אנכי ולהוריד אותו על החזה לאורך הקו הפארסטרנלי הימני. לאחר מכן, טפל בציר X ובציר Y במצב B עד לקשת אבי העורקים נראה בבירור.</li>
		<li>אתר את ההתכווצות על ידי B-mode כדי להשיג את תצוגת קשת העורקים11. השתמש במצב דופלר צבע גל פעמו כדי למדוד את מהירות זרימת השיא ולבחור עכברים עם מהירות של יותר מ 3,000 מ"מ / s כקבוצה TAC (ערכים מבוססים על ניסויים ראשוניים).</li>
		<li>לחשב את שיפוע הלחץ על פי הגירסה ששונתה של המשוואה של ברנולי11: שיפוע לחץ = 4 x Vמקסימום2. הערה: שיפוע הלחץ האידיאלי לדגם התכווצות אגורה רוחבית נע בין 40-80 מ"מ-ח"ג11.</li>
		<li>שמור את הנתונים והתמונות באמצעות חנות Cine וחנות מסגרות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>להעריך את הממדים ואת ההתכווצות של החדר השמאלי (LV) עם בדיקה 30 מגה הרץ.<ol>
<li>אפס את הפלטפורמה למיקום האופקי. שמור על החללית ב-30° נגד כיוון השעון ביחס לקו הפאראסטרנלי השמאלי.</li>
		<li>השתמש במצב B וטפל ב- X ו- Y כדי לקבל תצוגת ציר ברורה וארוכה של הלב.</li>
		<li>הקש M-mode כדי להציג את שורת המחוון. רכוש תמונות באמצעות Cine Store ו-Frame Store למדידה מאוחרת יותר של ממד תא LV, קיצור שברים ועובי קיר LV.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לאחר סיום, להפסיק שאיפת isoflurane ולאפשר לעכבר להתאושש מהרדמה. לאחר מכן, להחזיר את החיה לכלוב שלה בחדר מחזור אור / כהה 12 שעות.</li>
	<li>על D14 ו D28 לאחר הניתוח, לחזור על השלבים לעיל כדי למדוד את הפרמטרים הלב ולאחר מכן לקצור את הלב למחקרים היסטולוגיים.</li>
</ol>

<ol><li>Murry, C. E., Jennings, R. B., Reimer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+with+ischemia%3A+a+delay+of+lethal+cell+injury+in+ischemic+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Preconditioning with ischemia: a delay of lethal cell injury in ischemic myocardium.</a> Circulation. 74 (5), 1124-1136 (1986).</li>
<li>Ban, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphatidylinositol+3-kinase+gamma+is+a+critical+mediator+of+myocardial+ischemic+and+adenosine-mediated+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Phosphatidylinositol 3-kinase gamma is a critical mediator of myocardial ischemic and adenosine-mediated preconditioning.</a> Circulation Research. 103 (6), 643-653 (2008).</li>
<li>Wu, Z. K., Iivainen, T., Pehkonen, E., Laurikka, J., Tarkka, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+suppresses+ventricular+tachyarrhythmias+after+myocardial+revascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning suppresses ventricular tachyarrhythmias after myocardial revascularization.</a> Circulation. 106 (24), 3091-3096 (2002).</li>
<li>Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+and+postconditioning%3A+underlying+mechanisms+and+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Preconditioning and postconditioning: underlying mechanisms and clinical application.</a> Atherosclerosis. 204 (2), 334-341 (2009).</li>
<li>Heusch, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+basis+of+cardioprotection%3A+signal+transduction+in+ischemic+pre-%2C+post-%2C+and+remote+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Molecular basis of cardioprotection: signal transduction in ischemic pre-, post-, and remote conditioning.</a> Circulation Research. 116 (4), 674-699 (2015).</li>
<li>Lund, O., Emmertsen, K., Dorup, I., Jensen, F. T., Flo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regression+of+left+ventricular+hypertrophy+during+10+years+after+valve+replacement+for+aortic+stenosis+is+related+to+the+preoperative+risk+profile%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Regression of left ventricular hypertrophy during 10 years after valve replacement for aortic stenosis is related to the preoperative risk profile.</a> European Heart Journal. 24 (15), 1437-1446 (2003).</li>
<li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciiences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciiences of the United States of America. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li>
<li>Wei, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+hypertrophic+preconditioning+attenuates+cardiomyocyte+hypertrophy+and+slows+progression+to+heart+failure+through+upregulation+of+S100A8%2FA9%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Myocardial hypertrophic preconditioning attenuates cardiomyocyte hypertrophy and slows progression to heart failure through upregulation of S100A8/A9.</a> Circulation. 131 (17), 1506-1517 (2015).</li>
<li>Huang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+biomicroscopy+validation+of+a+murine+model+of+cardiac+hypertrophic+preconditioning%3A+comparison+with+a+hemodynamic+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Ultrasound biomicroscopy validation of a murine model of cardiac hypertrophic preconditioning: comparison with a hemodynamic assessment.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 313 (1), 138-148 (2017).</li>
<li>Oka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac-specific+deletion+of+Gata4+reveals+its+requirement+for+hypertrophy%2C+compensation%2C+and+myocyte+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Cardiac-specific deletion of Gata4 reveals its requirement for hypertrophy, compensation, and myocyte viability.</a> Circulation Research. 98 (6), 837-845 (2006).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cardiac+morphological+and+functional+changes+in+mouse+model+of+transverse+aortic+constriction+by+echocardiographic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (112), e54101(2016).</li>
<li>Veldhuizen, R. A., Slutsky, A. S., Joseph, M., McCaig, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+mechanical+ventilation+of+isolated+mouse+lungs+on+surfactant+and+inflammatory+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22The+European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Effects of mechanical ventilation of isolated mouse lungs on surfactant and inflammatory cytokines.</a> The European Respiratory Journal. 17 (3), 488-494 (2001).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+right+ventricular+failure+by+pulmonary+artery+constriction+and+evaluation+of+right+ventricular+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction of right ventricular failure by pulmonary artery constriction and evaluation of right ventricular function in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (147), e59431(2019).</li>
<li>Eichhorn, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+closed-chest+model+to+induce+transverse+aortic+constriction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A closed-chest model to induce transverse aortic constriction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (134), e57397(2018).</li>
<li>Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+of+minimally+invasive+transverse+aortic+constriction+in+mice+for+induction+of+left+ventricular+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Technique of minimally invasive transverse aortic constriction in mice for induction of left ventricular hypertrophy.</a> Journal of Visualized Experiments. (127), e56231(2017).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

יש עדיין אזור שלא נחקר כראוי בתנאים קדם-איסכמיים לבביים. בהתבסס על המחקרים הקודמים שלנו, עברנו לשימוש תפרים נספגים כדי לשפר את המודל hypertrophic היפרטרופי שריר הלב תנאים.
בדיווחים קודמים, חוקרים רבים השתמשו תפר משי כדי לכווץ את קשת העורקים8,14,15. תפר משי היה זמין בקלות שימש לעתים קרובות עבור תפר פצע כירורגי, קשירת רקמות, קיבוע רקמות. בפרוטוקול זה, החלפנו תפר משי בתפר נספג עבור TAC הראשון. מצאנו כי מ...

תנאים קדם איסכמיים היא תופעה שגורמת לפרקים קצרים ולא קטלניים של איסכמיה ורפרופוזיה ללב ויש לה את היכולת להפחית באופן דרמטי את הפגיעה בשריר הלב1. בהתחשב בהשלכות הקליניות הברורות של תנאים קדם איסכמיים, כגון הגבלת גודל אוטם שריר הלב2 ודיכוי tachyarrhythmias חדרית לאחר revascularization שריר הלב3, היו הרבה מחקר לנתח את המנגנונים הבסיסיים השפעות מגן אירובי הנגרמת על ידי מראש4,5. לעומת זאת, סוגים אחרים של תנאים קדם-איסכמיים קיבלו תשומת לב מועטה יחסית. היפרטרופיה לב עשוי להיות קהה בחולים עם היצרות אבי העורקים עובר החלפת שסתום אבי העורקים6. בכל מקום שבו קיים מצב של היפרטרופיה שריר הלב פתולוגית, העיקרון של תנאים קדם מדווח לעתים רחוקות.
בשנת 1991, רוקמן ואח 'הקימו לראשונה מודל עכבר של היפרטרופיה חדרית שמאלית על ידי התכווצות רוחבית של העורקים (TAC)7. על ידי הפעלת TAC פעמיים בעכברים, הוכחנו בעבר כי תנאים קדם היפרטרופיים שריר הלב (MHP) מוביל גירוי היפרטרופי חולף בלב ובכך להפוך את הלב עמיד יותר ללחץ היפרטרופי מתמשך בעתיד8. המאפיינים של מודל MHP אומתו על ידי ביומיקרוסקופ אולטרסאונד והערכה המודינמית9. נקודות מפתח בבניית המודל היו לבצע כריתת חזה שלוש פעמים, TAC במשך שבוע, debanding במשך שבוע, ו TAC משני במשך 6 שבועות. עם זאת, debanding יכול לגרום לדימום, מה שהקשה להיות שולט על ידי טירונים וקשה להיות פופולרי. בנוסף, זהו גם אתגר טכני לצנרר עכברים. צנרור לא תקין עלול לגרום לפגיעה בקנה הנשימה, pneumothorax, ואפילו מוות בעכברים. לכן, יש צורך ובעל ערך כדי לשפר כמה הליכים תוך בניית מודל MHP.
כדי להפחית את הקושי של המודל ולהגדיל את הצלחתו, עברנו לתפרים נספגים עבור TAC הראשון וניטרנו את הצלחת הדגם על ידי מדידת שיפוע לחץ על פני התכווצות אבי העורקים תחת אקולב 10. בהתבסס על הניסוי הראשוני שלנו, זה יהיה קשה לגרום היפרטרופיה שריר הלב מספיק בעכברים עם שיפוע בלחץ נמוך מדי, בעוד עכברים עם שיפוע בלחץ גבוה מדי יפתחו אי ספיקת לב חריפה או אפילו למות. שיפוע הלחץ האידיאלי עבור הדגם נע בין 40-80 מ"מ/ג11. בנוסף, ניסוי זה לא הסתמך על מאוורר, אשר יכול למעשה למנוע מניפולציה טכנית הקשורים לאוורור ופציעה12.

<table><tbody><tr><td>תפר נספג (5-0)</td> <td>שאנדונג קאנג לידה מוצרים רפואיים ושות', בע"מ</td><td>5-0</td><td>קשירה</td></tr><tr><td>מערכת אולטרסאונד בעלי חיים VEVO2100</td><td>חזותי קולי</td><td></td><td>VEVO2100 אקו לב</td></tr><tr><td>אור קר תאורה</td><td>אולימפוס</td><td>ILD-2</td><td>כרית חום אור</td></tr><tr><td>- מערכת כירורגית תרמוסטטית (ALC-HTP-S1)</td> <td>שנחאי ALCOTT BIOTECH CO</td><td>ALC-HTP-S1</td><td>חימום</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD מדעי החיים</td><td>R510-22</td><td>הרדמה ממליצה</td></tr><tr><td>Matrx VIP 3000 איזופורן וופורן</td><td>תאגיד Midmark Corporation</td><td>VIP 3000</td><td>הרדמה</td></tr><tr><td>תפר ניילון רפואי (5-0)</td> <td>Ningbo Medical Needle Co.</td><td>5-0</td><td>סגור את העור</td></tr><tr><td>פנטוברביטל נתרן מלח</td><td>Merck</td><td>25MG</td><td>הרדמה</td></tr><tr><td>דיוק איזון אלקטרוני</td><td>מכשיר דנבר</td><td>TB-114</td><td>חיישן שקילה</td></tr><tr>מרווח <td></td><td></td><td>מתוצרת עצמית</td><td>25 מד</td></tr><tr><td>מחט תפר משי (5-0)</td> <td>Yangzhou Yuankang Medical Devices Co., Ltd.</td><td>5-0</td><td>קשירה</td></tr><tr><td>ציוד מיקרוכירורגיה לבעלי חיים קטנים</td><td>Napox</td><td>MA-65</td><td>מכשירים כירורגיים</td></tr><tr><td>ג'ל שידור</td><td>גואנג גונג פאי</td><td>250 מ"ל</td><td>אקו לב</td></tr><tr><td>קרם הסרת שיער Veet רקיט</td><td>בנצ'יסר</td><td>RQ/B 33 סוג 2</td><td>הסר שיער של עכברים</td></tr><tr><td>מעקר קיטור בלחץ אלקטרותרמי אוטומטי אנכי</td><td>Hefei Huatai ציוד רפואי ושות '</td><td>LX-B50L</td><td>ניקוי אוטומטי של מכשירי הניתוח</td></tr></tbody></table>

הפעלת התכווצות אבי העורקים רוחבית עם תפר נספג להשגת היפרטרופיה שריר הלב ארעית

Operating Transverse Aortic Constriction with Absorbable Suture to Obtain Transient Myocardial Hypertrophy

בהתבסס על פעמיים התכווצות אבי העורקים רוחבית (TACs) בעכברים, הוא הוכיח כי תנאים היפרטרופיים שריר הלב (MHP) יכול להקל על היפרטרופיה cardiomyocyte להאט את ההתקדמות לאי ספיקת לב. למתחילים, עם זאת, מודל MHP הוא בדרך כלל די קשה להקים בגלל המכשולים הטכניים בפעולת ההנשמה, פתיחת החזה שוב ושוב, ודימום שנגרם על ידי debanding. כדי להקל על מודל זה, כדי להגדיל את שיעור ההצלחה הכירורגית ולהפחית את השכיחות של דימום, עברנו תפרים נספגים עבור סירוק TAC הראשון עם טכניקה ללא מאוורר. באמצעות תפר נספג 2 שבועות, הוכחנו כי הליך זה יכול לגרום היפרטרופיה שריר הלב משמעותית ב 2 שבועות; ו 4 שבועות לאחר הניתוח, היפרטרופיה שריר הלב היה נסוג כמעט לחלוטין לקו הבסיס. באמצעות פרוטוקול זה, המפעילים יכולים לשלוט במודל MHP בקלות עם תמותה פעולה נמוכה יותר.

במחקר זה חילקנו באופן אקראי 45 עכברים לשלוש קבוצות, את הזיוף, את קבוצת תפר המשי ואת קבוצת התפרים הניתנת לספיגה (מספר כל קבוצה ב- D0 (בסיסי), D14 ו- D28 לאחר ש- TAC היה 15, 10 ו- 5, בהתאמה). ב- D7, D14, D21 ו- D28 לאחר הניתוח, מהירות השיא המצומצמת נקבעה על ידי אקו לב. גילינו כי מהירות זרימת הדם בהתכווצות עדיין הייתה גדולה מ-3,000 מ"מ לשנייה בשבוע השני לאחר TAC למרות שנעשה שימוש בתפר נספג כדי לכווץ את קשת העורקים(איור 1A). יתר על כן, שיפוע הלחץ בהתכווצות קבוצת התפרים הניתנת לספיגה נשמר מעל 40 ...

פרוטוקול זה מציג שיטה משופרת להשגת היפרטרופיה שריר הלב חולפת עם תפר נספג, המדמה ירידה היפרטרופיה חדרית שמאל לאחר הסרת עומס לחץ. זה יכול להיות בעל ערך עבור המחקרים על תנאי היפרטרופי שריר הלב.

Based on twice transverse aortic constrictions (TACs) in mice, it is proved that myocardial hypertrophic preconditioning (MHP) could attenuate ...

פרוטוקול זה מציג שיטה משופרת להשגת היפרטרופיה חולפת של שריר הלב, באמצעות תפרים נספגים, הממריצים ירידה בהיפרטרופיה של החדר השמאלי לאחר הסרת עומס יתר בלחץ. באמצעות פרוטוקול זה, חוקרים יכולים לשלוט בקלות במודל עם תמותה נמוכה יותר מפעולה. מי שתדגים את ההליך תהיה שיאושיה הואנג, טכנאית מהמעבדה שלי.התחל בצביטה של קצה מחט בגודל 25 עם מחזיק מחט והקהה אותה. לאחר מכן, העבירו תפר נספג של 5/0 דרך המחט הזו ועקמו את המחט הקהה לזווית של 90 מעלות באמצעות המחזיק. צבט את הקצה של מחט נוספת בגודל 25, ואז עקם אותה לזווית של 120 מעלות והחליק את הקצה עם מחזיק שישמש כמרווח בשלב הקשירה.הכן מכשירים כירורגיים מעוקרים, כולל מספריים עיניים אחת, מספריים מיקרו אחת, שתי פינצטות מרפק מיקרו-כירורגיות, מחזיק מחט אחד ומחזיק מחט מיקרו אחד. כדי להתחיל בניתוח, אשר הרדמה מלאה של העכבר עם רפלקס נסיגת הדוושה. שמור את העכבר במצב שכיבה על ידי קיבוע החותכות בתפר וקיבוע הגפיים בעזרת סרט דבק.הסר את השיער מהצוואר וחטא את האזור ביוד ו-75% אלכוהול. התחל את הניתוח על ידי ביצוע חתך מעל 10 מילימטרים במיקום קו האמצע בין החריץ העל-חזה לחזה. לאחר מכן הפרד את העור מהפאשיה השטחית.בצע חתך בחלל הבין-צלעי הראשון קרוב ככל האפשר לעצם החזה וחדור בצורה בוטה כדי לפתוח את החלל הזה בעזרת פינצטה במרפק. הפרד בעדינות את הפרנכימה ואת התימוס עד שנראה קשת אבי העורקים הרוחבית. העבירו תפר נספג 5/0 מתחת לקשת אבי העורקים בין העורק הברכיוצפלי לעורק הצוואר המשותף השמאלי בעזרת מחט תפס.הנח את המרווח שהוכן בעבר על אבי העורקים הרוחבי וצור קשר כפול על המרווח עם התפר. הסר בעדינות, אך במהירות את המרווח וחתוך את קצות התפר. סגור את החלל הבין-צלעי הראשון ואת העור באמצעות תפרי ניילון 5/0.לחטא את העור שוב עם 75% אלכוהול. שבעה ימים לאחר הניתוח, הניחו את העכבר במצב שכיבה, שמרו אותו על 37 מעלות צלזיוס, והדביקו את גפיו לאלקטרודה. הסר שיער בחזה והחל חומר צימוד קולי על חזה העכבר.לאחר מכן גש ל-TAC עם בדיקה של 30 מגה-הרץ. הטה את הרציף לקצה השמאלי. שמור את הגשושית במצב אנכי והורד אותה על החזה לאורך קו הפרסטרנל הימני.כוונן את ציר ה-X וה-Y במצב B עד שקשת אבי העורקים וההתכווצות נראים בבירור. באמצעות מצב דופלר, מדוד את מהירות השיא, הממדים וההתכווצות של החדר השמאלי. בחר את העכברים במהירות של יותר מ-3000 מילימטרים לשנייה כקבוצת TAC.בעזרת בדיקה של 30 מגה-הרץ, העריכו את מידות החדר השמאלי ואת ההתכווצות. אפס את הפלטפורמה למצב אופקי, תוך שמירה על הגשושית ב-30 מעלות נגד כיוון השעון לקו הפרסטרנלי השמאלי. השג תצוגת ציר קצרה של הלב על ידי מניפולציה של ציר X ו-Y במצב B.לאחר מכן, לחץ על מצב M כדי להציג את קו המחוון ולרכוש תמונות עם Cine Store ו-Frame Store למדידה מאוחרת יותר של ממד תא ה-LV, קיצור חלקי ועובי דופן LV. הדמיית דופלר בגל דופק שבוצעה לאחר 14 יום של TAC הראתה שמהירות זרימת הדם בהיצרות הייתה גדולה מ-3000 מילימטר לשנייה למרות שתפר נספג שימש לכיווץ קשת אבי העורקים. שיפוע הלחץ של זרימת הדם לאחר 14 יום של TAC נשמר מעל 40 מילימטר כספית.מעניין לציין כי בשבוע הרביעי לאחר הניתוח לא הייתה התכווצות, מה שמצביע על כך שהתפר הנספג נספג במלואו. הפרמטרים של החדר השמאלי בקבוצת תפרי המשי וקבוצת התפרים הנספגת בימים 0, 14 ו-28 לאחר TAC, בהדמיה במצב M, מוצגים כאן. ביום ה-14 לאחר TAC, עובי הדופן האחורית של החדר השמאלי בקצה הדיאסטולה גדל, בעוד שהקוטר הפנימי של החדר השמאלי בקצה הדיאסטולה ירד מעט.מקטע הפליטה של החדר השמאלי לא הושפע משימוש בתפרים נספגים. השוואת יחס משקל הלב למשקל הגוף של קבוצת תפרי המשי, קבוצת התפרים הנספגים וקבוצת הדמה מוצגת כאן. פרוסות היסטולוגיות של הלב הראו כי קרדיומיוציטים גדלו באופן משמעותי מיום 14 ליום 28 בקבוצת תפר המשי, אך בעיקר נסוגו ביום 28 בקבוצת התפרים הנספגים.כאשר מנסים פרוטוקול זה, חשוב ביותר לא לפגוע בצדר ההורי כדי למנוע פנאומוטורקס. הקפידו להקהות את קצה המחט ככל האפשר ולבצע את ההליך בעדינות. ישנם יישומים פוטנציאליים רבים לשיטה זו, כגון ביסוס המודל של התניה מוקדמת של היפרטרופיה של שריר הלב, חקר מנגנון הרגרסיה של היפרטרופיה וחקירת הזמן של שיפוץ הפיך של החדר השמאלי.

operating-transverse-aortic-constriction-with-absorbable-suture-to

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מדגים את הטכניקה של פירוק אבי העורקים, אשר יכול להוביל לשיפוץ לאחור כדי להגביל את ההתקדמות לקראת אי ספיקת לב במודל מורין. לאחר הנטישה, הפחתה משמעותית של עומס לאחר החדר מעוררת רגרסיה של היפרטרופיה חדרית ופיברוזיס, מה שגורם להתאוששות בתפקוד הלב.

Surgical Aortic Debanding: הליך לחקר שיפוץ לאחור של חדר שמאל במודל Murine של התכווצות אבי העורקים

אנו מתארים הליך בשלבים ליצירת עומס יתר לחץ והיפרטרופיה של חדר שמאלי בחולדות Wistar ידי התכווצות של אב העורקים עולים באמצעות קליפ מתכתי קטן. דגם זה נעשה שימוש נרחב ללימוד שינויי שיפוץ במהלך היפרטרופיה לבבית ולזיהוי והערכה של אסטרטגיות לנסיגה של שינויים כאלה.

עולה אבי העורקים תעוקה בחולדות ליצירת עומס יתר לחץ לב היפרטרופיה הדגם

מתואר מודל חולדה של התכווצות אבי העורקים הבטני הגורם להיפרטרופיה של הלב ועיצוב מחדש. שיטה יעילה, ניתנת לשחזור וזעיר פולשנית משמשת כדי לספק פלטפורמה פשוטה אך שימושית למחקר בהיפרטרופיה ותפקוד לקוי של שריר הלב.

מודל של שיפוץ לב באמצעות התכווצות של אבי העורקים בבטן בחולדות

התכווצות העורקים רוחבי פולשנית (MTAC) חוסך את עיקרי התכווצות העורקים רוחבי רגיל (TAC) תוך ביטול השימוש מאוורר עם אינטובציה לקנה הנשימה. זה מוכיח להיות שיטה רצויה מאוד ללימודי תפוקה גבוהה על עומס של חדר שמאלי, בעיקר חקר תרגום.

פולשנית רוחבי אבי העורקים התכווצות עכברים

המטרה של פרוטוקול זה היא לתאר צעד אחר צעד הטכניקה של פולשנית רוחבי אבי העורקים הכיווץ (טק) בעכברים. על ידי חיסול של צנרור ואוורור אשר הכרחיות עבור הליך רגיל בשימוש נפוץ, טק פולשנית ומפשט את תהליך פעיל ומפחית את הלחץ על החיה.

הטכניקה של פולשנית התרחבות אבי העורקים רוחבי בעכברים עבור אינדוקציה של גדילת

פרוטוקול זה מציג מודל כירורגי בבעלי חיים גדולים של איסכמיה כרונית, יחיד כלי תוצאות חריגות אזוריים, אך אינו יוצר לאוטם, המכונה שבמצב שריר הלב. בעקבות הקמתה של איסכמיה כרונית, חיות מטופלים עם משאבה לימה-בחור עורקים ניתוח מעקפים שתל כדי revascularize את הרקמה איסכמי.

דגם החזירים כירורגי של איסכמיה לב כרוניות שטופלו על ידי משאבה עורקים ניתוח מעקפים שתל

כאן, אנו מציגים פרוטוקול של אבי העורקים רוחבי הכיווץ (טק) באמצעות ניקור לרוחב. טכניקה זו היא הליך ניתוחי החזה פולשנית, סגור במטרה לדמות עומס ואי ספיקת לב בעכברים ניצול ההגדרות הרגילות של מעבדה טק.

דגם סגור-החזה לזירוז רוחבי. התרחבות אבי העורקים בעכברים

כאן אנו מתארים פרוטוקול צעד אחר צעד של פירוק אבי העורקים הכירורגי במודל העכברים המבוסס היטב של התכווצות אבי העורקים. הליך זה לא רק מאפשר ללמוד את המנגנונים שבבסיס שיפוץ הפוך החדר השמאלי ורגרסיה של היפרטרופיה, אלא גם כדי לבדוק אפשרויות טיפוליות חדשניות שעשויות להאיץ את ההתאוששות שריר הלב.

לימוד שיפוץ הפוך חדרי שמאלי על ידי ניתוק האבניים במכרסמים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה שונה ופשוטה עם הליך היצרות אבי העורקים הרוחבי (TAC) זעיר פולשני באמצעות retractor מתוצרת עצמית. הליך זה יכול להתבצע ללא מכונת הנשמה או מיקרוסקופ ומציג עומס לחץ, המוביל בסופו של דבר היפרטרופיה לבבית או אי ספיקת לב.

טכניקה שונה להתכווצות רוחבית של אבי העורקים בעכברים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה חדשה של פסים באבי העורקים בעכברים כדי לגרום לעומס יתר על הלחץ היפרטרופיה לבבית. עבור להקות, טבעת גומי עם קוטר פנימי קבוע משמש. טכניקה חדשה זו מבטיחה פחות שונות ויותר נתונים הניתנים לשחזור עבור ניסויים עתידיים.

פסי אבי העורקים O-Ring לעומת כיווץ אבי העורקים הרוחבי המסורתי למידול היפרטרופיה לבבית הנגרמת על ידי עומס יתר בלחץ

מחקר זה מציג מודל כירורגי חזירי של איסכמיה כרונית של שריר הלב עקב היצרות מתקדמת של העורקים הכליליים, וכתוצאה מכך תפקוד לב לקוי ללא אוטם. לאחר איסכמיה, בעלי חיים עוברים השתלת מעקף עורקים כליליים מחוץ למשאבה עם מיקום אפיקרדיאלי של מדבקת קולגן עמוסת אקסוזומים שמקורם בתאי גזע. טיפול משלים זה משפר את תפקוד שריר הלב ואת ההתאוששות.

מודל חזירי כירורגי של איסכמיה כרונית של שריר הלב מטופל על ידי מדבקת קולגן עמוסת אקסוזום והשתלת מעקף עורקים כליליים מחוץ למשאבה

למד שיטה משופרת ליצירת היפרטרופיה שריר הלב ארעית בעכברים באמצעות תפרים נספגים. פרוטוקול זה מספק חלופה בטוחה יותר לחקר מנגנוני נסיגת ההיפרטרופיה ותנאי מוקדם של שריר הלב.

הפעלת התכווצות אבי העורקים רוחבית עם תפר נספג להשגת היפרטרופיה שריר הלב ארעית

גלה סרטונים נוספים