Name: דגם עכבר של חוסר יציבות בעמוד השדרה המותני (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-23T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 28 s
Description: למדו כיצד ליצור מודל עכברי לניוון דיסקים בין-חולייתיים בעמוד השדרה המותני באמצעות כריתה כירורגית של זיזי השדרה והרצועות. מודל זה מאפשר מחקר אורתופדי אמין ושחזרי לחקר מנגנוני הניוון והטיפולים הפוטנציאליים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81973607) ומחקר ופיתוח תרופות חיוניות (2019ZX09201004-003-032) ממשרד המדע והטכנולוגיה של סין.

החקירות המתוארות תואמות את ההנחיות לטיפול ושימוש בחיות מעבדה של המכונים הלאומיים לבריאות ואושרו על ידי אוניברסיטת שנגחאי לרפואה סינית מסורתית טיפול בבעלי חיים ושימוש בוועדה. כל המניפולציות הכירורגיות בוצעו בהרדמה עמוקה ובעלי החיים לא חוו כאבים בשום שלב במהלך ההליך.
1. הכנה טרום ניתוחית
<ol><li>עיקור מכשירים: מכשירים כירורגיים מעוקרים בקיטור במובלעת אוטומטית (121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות) לפני הניתוח. לארוז מכשירים במיכל מתכת ולתחזק אותם עד שהם משמשים בניתוח.</li>
	<li>הגדרת פלטפורמת ניתוח: להקצות שטח ספסל של לפחות 60 ס"מ x 60 ס"מ לניתוח. יש לנקות את פני השטח עם 75% אלכוהול ולכסות במגבת רפואית חד פעמית. מניחים חבילת מכשירים כירורגיים סטריליים, ריאגנטים, פריטים כירורגיים על מגבת רפואית חד פעמית בתוך 1/3 העליון של האזור. השאירו את 2/3 הנותרים של האזור נקי לניתוח. הוסף משטח חם מתחת כרית כירורגית לתמיכה תרמית.</li>
	<li>הכנת בעלי חיים<ol>
<li>הנח את החיה (עכברי C57BL/6J, זכר, בן 8 שבועות) לתוך תא האינדוקציה. הפעל את מאדה ברמת אינדוקציה של 4% עבור איזופלורן ו 4 L / min עבור חמצן. לאחר החיה מורדמת לחלוטין, לשמור על ההרדמה עם חרוט האף ואת הלידה הרדמה ברמה של 1.5% עבור איזופלורן ו 0.4 L / min עבור חמצן במהלך הניתוח. לפקח על החיה לנשימה.</li>
		<li>החל משחת עיניים הידרוכלוריד כלורטרציקלין כדי למנוע יובש בקרנית במהלך הניתוח.</li>
		<li>לגלח את האזור הכירורגי על פני השטח הגבי מאזור בית החזה התחתון לחלק העליון של אזור sacral באמצעות גוזם בעלי חיים קטן. מוציאים את הפרווה המגולחת עם מגבוני רקמה.</li>
		<li>החל קרם depilatory על האזור מגולח ולהשאיר אותו שם לא יותר מ 3 דקות. מוציאים את השמנת עם גזה וסומק עם 2 מ"ל של 0.9% מלוחים סטריליים.</li>
		<li>הנח כרית גלילית כירורגית בהתאמה אישית (איור 2A) מתחת לבטן העכבר כדי להרים את עמוד השדרה המותני ולהקל על הניתוח.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. חשיפת המותני השלישי לחמישי המותני (L3–L5) תהליכים מסתובבים
<ol><li>השתמש באצבע המורה כדי לגעת בתהליכים הסיבוביים התת עוריים של החוליות המותניות, שהן חיצוניות יותר, ולהשוות עם חוליות בית החזה וחוליות הסאקרל כדי לזהות את אזור המותני.</li>
	<li>לשטוף את העור באמצעות 75% אלכוהול. בצע חתך עור 3-4 ס"מ קו האמצע מעל אזור העצים מאזור אמצע בית החזה אל הירך באמצעות להב אזמל כדי לחשוף את fascia.</li>
	<li>זהה את עמוד השדרה המותני על ידי המורפולוגיה של fascia האחורי מוכנס על קצות התהליכים ספינוס. בפירוט, המותני השלישי (L3)אל sacral הראשון (S1)fasciae נבדלים fasciae אחרים על ידי צורות "V" שלהם. קצה ה-"V" האחרון מתחבר ל-sacral הראשון (S1)fascia ועצה ה-"V" הראשון מתאים לתהליך הסיבובי L3 (איור 2B).</li>
	<li>הפוך את החתכים בשרירים הצנחניים האחוריים לאורך התהליכים הסיבוביים מ- L3 עד L5 משני הצדדים לרוחב עם להב אזמל(איור 2C). לשלוט בעומק החתך לכיוון ההיבטים כדי להפחית דימום.</li>
	<li>הפרד את שכבות השריר באמצעות שתי מלקחיים עיניים כדי לחשוף L3 כדי L5 תהליכים ספיניים ורצועות על-ראשי.</li>
</ol>3. כריתה של L3–L5 תהליכים מסתובבים יחד עם הרצועות
<ol><li>הפרד תהליכים מסתובבים אינדיבידואליים על-ידי ניתוק הרצועות הבין-ראשיות באמצעות גזירי ונוס(איור 2D).</li>
	<li>נתחו את התהליכים הסיבוביים L3–L5 יחד עם הרצועות הבין-ראשיות עם גזירה של ונוס(איור 2E).</li>
	<li>לתפור את חתך העור עם משי סטרילי קלוע (גודל תפר 5.0) ללא חיבור מחדש של השרירים para החוליות.</li>
	<li>החל משחת עיניים הידרוכלוריד כלורטרציקלין לאתר הכירורגי.</li>
	<li>ניהול Buprenorphine-SR (25 uL לגרם של משקל העכבר) מיד לאחר ניתוח LSI למשככי כאבים.</li>
	<li>מניחים את בעלי החיים בתא חם ומנטרים במהלך ההחלמה מההרדמה. לפקח על צריכת מזון ומים לפני החזרת בעלי החיים לכלוב הבית.</li>
	<li>לפקח על החיה פעם ביום במשך 3 הימים הראשונים לאחר הניתוח. החיה צריכה להיות מסוגלת לקבל תיאבון נורמלי צריך לרפא ללא סימן של מוגלה, דימום, או נפיחות. ייתכן שיש להם ליקוי קל בתנועה.</li>
	<li>בצע פעולות מזויפות רק על ידי ניתוק השרירים הפר החולייתיים האחוריים מחוליות L3–L5.</li>
</ol>

<ol><li>Makino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+disc+degeneration+progression+in+young+women+in+their+20%27s%3A+a+prospective+ten-year+follow+up%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Science%3A+Official+Journal+of+the+Japanese+Orthopaedic+Association%22%5BJournal%5D)">Lumbar disc degeneration progression in young women in their 20's: a prospective ten-year follow up.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 22 (4), 635-640 (2017).</li>
<li>Lee, Y. C., Zotti, M. G. T., Osti, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operative+management+of+lumbar+degenerative+disc+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">Operative management of lumbar degenerative disc disease.</a> Asian Spine Journal. 10 (4), 801-819 (2016).</li>
<li>Wei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+experimental+intervertebral+disc+degeneration+induced+by+bleomycin+in+the+rhesus+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Musculoskeletal+Disorders%22%5BJournal%5D)">In vivo experimental intervertebral disc degeneration induced by bleomycin in the rhesus monkey.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 15, 340(2014).</li>
<li>Lim, K. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovine+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+model+utilizing+a+lateral+retroperitoneal+drill+bit+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Ovine lumbar intervertebral disc degeneration model utilizing a lateral retroperitoneal drill bit injury.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (123), e55753(2017).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+features+of+the+degenerating+intervertebral+disc+in+a+goat+disc-injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Histological features of the degenerating intervertebral disc in a goat disc-injury model.</a> Spine. 36 (19), 1519-1527 (2011).</li>
<li>Bergknut, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dog+as+an+animal+model+for+intervertebral+disc+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">The dog as an animal model for intervertebral disc degeneration.</a> Spine. 37 (5), 351-358 (2012).</li>
<li>Kong, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rabbit+Model+for+in+vivo+Study+of+Intervertebral+Disc+Degeneration+and+Regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Neurosurgical+Society%22%5BJournal%5D)">Rabbit Model for in vivo Study of Intervertebral Disc Degeneration and Regeneration.</a> Journal of Korean Neurosurgical Society. 44 (5), 327-333 (2008).</li>
<li>Gullbrand, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+large+animal+model+that+recapitulates+the+spectrum+of+human+intervertebral+disc+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">A large animal model that recapitulates the spectrum of human intervertebral disc degeneration.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 25 (1), 146-156 (2017).</li>
<li>Jin, L., Balian, G., Li, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+disc+degeneration-an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Histology+and+Histopathology%22%5BJournal%5D)">Animal models for disc degeneration-an update.</a> Histology and Histopathology. 33 (6), 543-554 (2018).</li>
<li>O'Connell, G. D., Vresilovic, E. J., Elliott, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+intervertebral+disc+anatomy+across+several+animal+species%5BTitle%5D)+AND+%2252nd+Annual+Meeting+of+the+Orthopaedic+Research+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative intervertebral disc anatomy across several animal species.</a> 52nd Annual Meeting of the Orthopaedic Research Society. , (2006).</li>
<li>Elliott, D. M., Sarver, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Young+investigator+award+winner%3A+validation+of+the+mouse+and+rat+disc+as+mechanical+models+of+the+human+lumbar+disc%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Young investigator award winner: validation of the mouse and rat disc as mechanical models of the human lumbar disc.</a> Spine. 29 (7), 713-722 (2004).</li>
<li>Ohnishi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+mouse+intervertebral+disc+degeneration+model+based+on+a+new+histological+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">In vivo mouse intervertebral disc degeneration model based on a new histological classification.</a> Plos One. 11 (8), 0160486(2016).</li>
<li>Vo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+aging+of+intervertebral+discs+in+a+mouse+model+of+progeria%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Accelerated aging of intervertebral discs in a mouse model of progeria.</a> Journal of Orthopaedic Research. 28 (12), 1600-1607 (2010).</li>
<li>Oichi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+intervertebral+disc+degeneration+model+by+surgically+induced+instability%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">A mouse intervertebral disc degeneration model by surgically induced instability.</a> Spine. 43 (10), 557-564 (2018).</li>
<li>Ohnishi, T., Sudo, H., Tsujimoto, T., Iwasaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+spontaneous+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Age-related spontaneous lumbar intervertebral disc degeneration in a mouse model.</a> Journal of Orthopaedic Research. 36 (1), 224-232 (2018).</li>
<li>Stern, W. E., Coulson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+collagenase+upon+the+intervertebral+disc+in+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Effects of collagenase upon the intervertebral disc in monkeys.</a> Journal of Neurosurgery. 44 (1), 32-44 (1976).</li>
<li>Silva, M. J., Holguin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LRP5-deficiency+in+OsxCreERT2+mice+models+intervertebral+disc+degeneration+by+aging+and+compression%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">LRP5-deficiency in OsxCreERT2 mice models intervertebral disc degeneration by aging and compression.</a> bioRxiv. , (2019).</li>
<li>Nemoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+changes+in+intervertebral+discs+after+smoking+and+cessation%3A+experimental+study+using+a+rat+passive+smoking+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Science%3A+Official+Journal+of+the+Japanese+Orthopaedic+Association%22%5BJournal%5D)">Histological changes in intervertebral discs after smoking and cessation: experimental study using a rat passive smoking model.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 11 (2), 191-197 (2006).</li>
<li>Mulholland, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+myth+of+lumbar+instability%3A+the+importance+of+abnormal+loading+as+a+cause+of+low+back+pain%5BTitle%5D)+AND+%22European+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">The myth of lumbar instability: the importance of abnormal loading as a cause of low back pain.</a> European Spine Journal. 17 (5), 619-625 (2008).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanosignaling+activation+of+TGF%CE%B2+maintains+intervertebral+disc+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Research%22%5BJournal%5D)">Mechanosignaling activation of TGFβ maintains intervertebral disc homeostasis.</a> Bone Research. 5, 17008(2017).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excessive+activation+of+tgf%CE%B2+by+spinal+instability+causes+vertebral+endplate+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Excessive activation of tgfβ by spinal instability causes vertebral endplate sclerosis.</a> Scientific Reports. 6, 27093(2016).</li>
<li>Ni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+innervation+in+porous+endplates+by+Netrin-1+from+osteoclasts+mediates+PGE2-induced+spinal+hypersensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Sensory innervation in porous endplates by Netrin-1 from osteoclasts mediates PGE2-induced spinal hypersensitivity in mice.</a> Nature Communications. 10 (1), 5643(2019).</li>
<li>Liu, S., Cheng, Y., Tan, Y., Dong, J., Bian, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligustrazine+prevents+intervertebral+disc+degeneration+via+suppression+of+aberrant+tgf%CE%B2+activation+in+nucleus+pulposus+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Ligustrazine prevents intervertebral disc degeneration via suppression of aberrant tgfβ activation in nucleus pulposus cells.</a> BioMed Research International. 2019, 5601734(2019).</li>
<li>Boos, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+age-related+changes+in+lumbar+intervertebral+discs%3A+2002+Volvo+Award+in+basic+science%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Classification of age-related changes in lumbar intervertebral discs: 2002 Volvo Award in basic science.</a> Spine. 27 (23), 2631-2644 (2002).</li>
<li>Miyamoto, S., Yonenobu, K., Ono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+cervical+spondylosis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Experimental cervical spondylosis in the mouse.</a> Spine. 16, 10 Suppl 495-500 (1991).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

פיתחנו את מודל העכבר חוסר היציבות בעמוד השדרה המותני המבוסס על מודל העכבר הספונדילוזיס הצווארי שבו השרירים הפארא חולייתיים האחוריים מהחלאות היו מנותקים והתהליכים הספניים יחד עם הרצועות העל-ראשיות והבין-ראשיות הושלכו מחדש25. ביצענו ניתוח דומה על עמוד השדרה המותני, שיש בו תהליכים ספיניים בולטים יותר. דגם העכבר LSI פיתח IDD דומה בעמוד השדרה המותני.
היתרונות של מודל LSI כוללים יכולת פעולה חזקה, ללא דרישה של ציוד מיוחד, רבייה, ותקופה קצרה יחסית של פיתוח IDD.
<p class="jo...

ניוון דיסק בין חולייתי (IDD) נתפס בדרך כלל בהזדקנות ואפילו צעירים הנגרמים על ידי גורמים רבים1. ניתוח לחולים הסובלים IDD, גרימת כאבי גב תחתון ותנועה לקויה, מבוצע בדרך כלל בשלב מאוחר יותר או במקרים חמורים ויש לו סיכונים פוטנציאליים כגון אי איחוד או זיהום2. טיפול אידיאלי שאינו אופרטיבי דורש הבנה מקיפה של מנגנון IDD. המודל החייתי IDD משמש ככלי חיוני למחקרים של מנגנון IDD והערכת טיפול IDD.
בעלי חיים גדולים יותר נבחרו עבור מודלים IDD כגון פרימטים, כבשים, עזים, כלבים, וארנבות בשל הדמיון שלהם עם המבנה האנטומי האנושי במידה רבה ואת operability חזק במונחים של גודל דיסקים בין חולייתיים (הפריה חוץ גופית)3,4,5,6,7,8. עם זאת, מודלים אלה של בעלי חיים גוזלים זמן רב ואינטנסיביים9. עכבר IVD הוא ייצוג לקוי של IVD האנושי מבוסס על מדידות גיאומטריות של יחס הגובה-רוחב, פולפוסוס גרעין ליחס אזור דיסק, וגובה מנורמל10. למרות ההבדל בגודל, קטע IVD המותני של העכבר מציג תכונות מכניות דומות להפריה חוץ גופית אנושית כגון דחיסה ונוקשות פיתולים11. בנוסף, מודל IDD עכבר יש את היתרון של עלות נמוכה, פיתוח IDD קצר יחסית, ואפשרויות נוספות עבור בעלי חיים מהונדסים גנטית ונוגדנים מנוצלים במחקרים מכניים נוספים12,13,14,15.
מודלי IDD הנגרמים על-ידי ניסויים משתנים מהמרצים והיישומים. לדוגמה, ניוון מטריצה חוץ-תאית (ECM) הנגרמת על ידי קולגנאז מתאים למחקר התחדשות ECM16. פנוטיפ מהונדס גנטית מתאים לחקר תפקוד הגנים בתהליך IDD ובטיפולים גנטיים17. Annulus פיברוסוס חתך ומודלים עשן לחקות טראומה ולא דלקת המושרה IDD12,18.
חוסר יציבות בעמוד השדרה (SI) מוביל לעמוד שדרה לא יציב שאינו במצב אופטימלי של שיווי משקל. זה יכול להיגרם על ידי תנועה חריגה של קטע תנועה מותנית בשל החולשה של הרקמה התומכת שמסביב כגון רצועות ושרירים. זה גם נראה בדרך כלל לאחר ניתוח היתוך עמוד השדרה19. SI נחשב כגורם העיקרי של IDD. לכן, אנו שואפים לפתח מודל עכברי SI (המתמקד בעמוד השדרה המותני) המחקה את תהליך IDD האנושי20,21.
בפרוטוקול, הצגנו את ההליך של יצירת מודל אי יציבות עמוד השדרה המותני (LSI) על ידי כריתה של המותני השלישי (L3)כדי מותני החמישי (L5)תהליכים מסתובבים יחד עם הרצועות העל-ראשיות והאינטרספין(איור 1A,B). המודל החייתי מפתח IDD כבר שבוע לאחר הניתוח כפי שמוצג על ידי היפרטרופיה ונקבוביות ב endplates (EPs). נפח IVD מתחיל להקטין 2 שבועות לאחר הניתוח דרך 16 שבועות יחד עם ציון IVD מוגבר, אשר מציין את מידת IDD. אנו מאמינים כי ההליך המפורט והדמיינו שימושי לחוקרים כדי להקים את מודל העכבר LSI במעבדה שלהם ולהחיל על מחקר IDD לפי הצורך.

<table><tbody><tr><td>כלורטטרציקלין הידרוכלוריד משחת עיניים</td><td>שנחאי כללי פרמצבטיקה ושות', בע"מ</td><td>H31021931</td><td>למנוע יובש בעיניים, למנוע זיהום בפצעים</td></tr><tr><td>C57BL/6J עכברים זכרים</td><td>חברת התרופות טיאן-ג'יאנג (ג'יאנגסו, CN)</td><td>SCXK2018-0004</td><td>דגם בעלי חיים</td></tr><tr><td>מגבת רפואית חד פעמית</td><td>Henan Huayu Medical Devices Co., Ltd.</td><td></td><td>פלטפורמת 20160090 לניתוח כירורגי</td></tr><tr><td>ציוד הרדמה משאף</td><td>MIDMARK</td><td>Matrx 3000</td><td>הרדמה</td></tr><tr><td>איזופלוראן</td><td>שנזן RWD Life Technology Co., Ltd.</td><td>1903715</td><td>הרדמה</td></tr><tr><td>לידוקאין הידרוכלוריד</td><td>שאנדונג Hualu פרמצבטיקה ושות', בע"מ</td><td>H37022839</td><td>שיכוך כאבים</td></tr><tr><td>מחט תפר רפואי</td><td>שנחאי Pudong Jinhuan מוצרים רפואיים ושות', בע"מ</td><td>20S0401J</td><td>תפר עור</td></tr><tr><td>מלקחיים</td> עיניים <td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) ושות', בע"מ מפעל מכשירים כירורגיים</td><td>JD1050</td><td>קליפ את העור</td></tr><tr><td>מספריים עיניים (10 ס"מ)</td> <td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) ושות', בע"מ מפעל מכשירים כירורגיים</td><td>Y00030</td><td>משי חתך עור</td></tr><tr><td>קלוע</td><td>שנחאי Pudong Jinhuan מוצרים רפואיים ושות', בע"מ</td><td>11V0820</td><td>עור תפר</td></tr><tr><td>גוזם בעלי חיים קטנים</td><td>שנחאי Feike Electric Co., Ltd.</td><td>FC5910</td><td>הסרת שיער</td></tr><tr><td>להבים כירורגיים סטריליים (12 #)</td> <td>שנחאי Pudong Jinhuan מוצרים רפואיים ושות', בע"מ</td><td>35T0707</td><td>חתך שרירים</td></tr><tr><td>קרם להסרת שיער Veet</td><td>RECKITT BENCKISER (הודו) בע"מ</td><td>NA</td><td>הסרת שיער</td></tr><tr><td>ונוס מספריים</td><td>ציוד רפואי Mingren אורך</td><td>: 12.5 ס"מ</td><td>קליפ את השריר ואת התהליך הקוצני</td></tr></tbody></table>

דגם עכבר של חוסר יציבות בעמוד השדרה המותני

A Mouse Model of Lumbar Spine Instability

ניוון דיסק בין חולייתי (IDD) הוא שינוי פתולוגי נפוץ המוביל לכאבי גב תחתון. מודלים מתאימים לבעלי חיים רצויים להבנת התהליכים הפתולוגיים ולהערכת תרופות חדשות. כאן, הצגנו מודל עכבר אי יציבות עמוד השדרה המותני המושרה בניתוח (LSI) המפתח IDD החל מ 1 שבוע לאחר הניתוח. בפירוט, העכבר תחת הרדמה הופעל על ידי חתך בעור בגב התחתון, L3–L5 חשיפה תהליכים תרד, ניתוק של שרירים paraspinous, כריתה של תהליכים ורצועות, וסגירת העור. L4–L5 IVDs נבחרו לתצפית. מודל LSI מפתחת IDD מותני על ידי נקבוביות והיפרטרופיה ב endplates בשלב מוקדם, ירידה בנפח דיסק בין חולייתי, הצטמקות פולפוסוס גרעין בשלב ביניים, ואיבוד עצם בחוליות המותניות (L5) בשלב מאוחר יותר. מודל העכבר LSI יש את היתרונות של יכולת פעולה חזקה, אין דרישה של ציוד מיוחד, רבייה, זול, ותקופה קצרה יחסית של פיתוח IDD. עם זאת, ניתוח LSI הוא עדיין טראומה שגורמת לדלקת בתוך השבוע הראשון שלאחר הניתוח. לכן, מודל זה של בעלי חיים מתאים לחקר IDD מותני.

מודל העכבר LSI מיושם במחקרים של מנגנון IDD, טיפול IDD, ניוון endplate (EP) כגון טרשת נפוצה, ו innervation חושי ב EP20,21,22,23. עכבר LSI מפתח שינויים ניווניים IDD ו- EP, כפי שזוהה, על ידי ירידה בנפח ובגובה IVD, נפח EP מוגבר, ציונים מוגברים IVD ו- EP.
עמוד השדרה התחתון והתחתון המנותח והמותני נבדקו על ידי טומוגרפיה מיקרו ממוחשבת ברזולוציה גבוהה (μCT) כפי שתואר קודם לכן...

פיתחנו מודל עכבר ניוון דיסק בין חולייתי מותני על ידי כריתה של L3– L5 תהליכים תרד יחד עם רצועות סופרה בין ספינים וניתוק של שרירים paraspinous.

Intervertebral disc degeneration (IDD) is a common pathological change leading to low back pain. Appropriate animal models are desired for understanding ...

זהו ניתוח כדי לגרום מודל העכבר מציע חלופה עבור ניוון דיסק בין חולייתי המותני מחקרים הקשורים. מצב LSI חזק זה אינו דורש ציוד מיוחד. זה לשחזור וזה יכול לשמש כדי לגרום ניוון דיסק בין חולייתי בתקופה קצרה יחסית של זמן.שליטה במעמקי החתך והדימום וביצוע כריתה של כל תהליך בין-ראשי הם שתי הוצאות מפתח להשתלת ההצלחה שלנו לניסוי. לאחר אישור חוסר תגובה לרפלקס הדוושה, הניחו עכבר שחור בן שמונה שבועות מורדם, זכר, C57 שחור על כרית כירורגית בתנוחת supine והחיל משחה על עיני החיה. השתמש גוזם בעלי חיים קטנים כדי לגלח את האזור הכירורגי מאזור בית החזה התחתון לחלק העליון של אזור sacral ולהסיר את הפרווה מגולח עם מגבונים רקמה.החל קרם depilatory על האזור מגולח באמצעות גזה כדי להסיר את השמנת לאחר לא יותר משלוש דקות לשטוף את העור חשוף עם שני מיליליטר של 0.9 מלוחים סטריליים. לאחר מכן הניחו כרית גלילית כירורגית בהתאמה אישית מתחת לבטן כדי להעלות את עמוד השדרה המותני. כדי לחשוף את חוליות L3 ו- L5 להשתמש באצבע המורה לגעת בתהליכים ספינליים תת עוריים של חוליות המותני ולמיש כדי להשוות את התהליכים עם אלה של חוליות בית החזה וחוליות sacral כדי לזהות את אזור המותני.לשטוף את העור עם 75% אלכוהול, ושימוש במיקרוסקופ מנתח להשתמש אזמל לעשות חתך של שלושה עד ארבעה סנטימטרים באמצע העור מעל אזור המותני מאזור בית החזה באמצע הירך. זהה את עמוד השדרה המותני על ידי צורת ה- V של fascia האחורי מוכנס, לתוך הקצה כך התהליכים ספיני ולהשתמש באזמל כדי להפוך חתכים שרירים paraspinous האחורי רדוד לאורך התהליכים ספיני מ L3 כדי L5 לרוחב משני צידי עמוד השדרה. לאחר מכן השתמש בשני זוגות של מלקחיים עיניים כדי להפריד את שכבות השריר כדי לחשוף את L3 ל L5 תהליכים מסתובבים ורצועות supraspinous.כדי להפריד בין תהליכים ספיניים בודדים להשתמש sheers ורידי כדי לחתוך רצועות בין ראשי כדי לחתוך את L3 כדי L5 תהליכים ספינוס ורצועות בין ראשי. לאחר מכן השתמש תפרים סטריליים מספר חמש משי קלועים כדי לסגור את החתך בעור מבלי לחבר מחדש את השרירים para החוליות ולהחיל משחה הידרוכלוריד כלורטטריקלין לאתר כירורגי. ניתוח היסטומורפומטרי תלת-ממדי מאפשר מדידת דיסק בין חולייתי, בעוד שניתוח מבני תלת-ממדי מאפשר כימות של נפח הרקמה הכולל.נפח הדיסק הבין חולייתי עולה באופן משמעותי שבוע לאחר הניתוח לפני ירידה של שבועיים עד 16 שבועות לאחר ההליך עולה בקנה אחד עם ירידה בגובה הדיסק הבין חולייתי נמדד על פני אותה תקופה. חללים מוגברים בתוך לוחות הגולגולת נצפו גם בעכברי LSI כמומתים על ידי אחוז מוגבר של ערכי הפרדה trabecular גדול או שווה 0.089 ועלייה משמעותית בכמויות endplate לאחר הניתוח. לוחות אנדפלאטס מודל להפגין פנוטיפ דומה, המציין כי LSI מוביל היפרטרופיה endplate ועלייה במספר החלל.נפחי חוליות L5 להגדיל מעט לאחר הניתוח עם הבדלים סטטיסטיים שנצפו ב 16 שבועות. ירידה משמעותית בעצם ליחס נפח הרקמות הכולל קיימת גם 16 שבועות לאחר הניתוח, מה שמצביע על כך LSI גורם לאובדן עצם החוליות בשלב מאוחר יותר. ירידה vacuoles תאיים של תאי פולפוסוס גרעין הואץ גם בבעלי חיים LSI עם מספר גדל של osteoclasts שנצפו ב LSI endplates.ניתן לשנות מודל זה על-ידי הצמדת מספר שונה של חוליות, כגון המותני החמישי בלבד, או מהמותני הראשון למותני החמישי.

a-mouse-model-of-lumbar-spine-instability

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

בדיקת האורך של איבוד מסת העצם של עצמות הירך לבין tibiae של עכברים בוגרים בוצעה בעקבות פגיעה בחוט השדרה באמצעות רציפים במינון נמוך רנטגן סורק. אובדן העצם Tibia זוהה לאורך כל תקופת המחקר, תוך איבוד מסת העצם בעצם הירך לא זוהה עד 40 ימים שלאחר הפציעה.

הערכת אורך של עכבר הינד איבוד מסת העצם לימב לאחר פגיעה בחוט השדרה באמצעות רומן, In vivo מתודולוגיה

בסרטון זה, אנו מתארים את ההליך הכירורגי לגרימת חוסר יציבות בעמוד השדרה המותני במודל עכבר על ידי כריתת התהליך הספינוסי המותני L3 עד L5 יחד עם רצועות על-ספיניות ובין-שדרתיות.

אינדוקציה כירורגית של חוסר יציבות בעמוד השדרה המותני במודל עכבר: הליך כירורגי לכריתה של תהליכי עמוד השדרה המותני ורצועות מחוברות במודל מורין

מקור: Kumar, S., et. al. מודל עכבר של פצעי לחץ לאחר פגיעה בחוט השדרה. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים אינדוקציה מפורטת של פגיעה בחוט השדרה בעכברים. העכבר המורדם מנותח כדי לחשוף את חוליות T9-T10, והתהליכים הקוצניים שלהם מוסרים. לאחר מכן חוט השדרה החשוף עובר טרנסקטציה כדי לגרום לפציעה. לאחר מכן סוגרים את אזור הניתוח, והעכבר מורשה להתאושש.

יצירת מודל עכבר עם פגיעה בחוט השדרה

טכניקה חדשנית ליצירת...

פגיעה קריעת צוואר הרחם מבוקרת בעכברים

מאמר זה מתאר שיטה ליצירת פגיעת דחיסת חוט שדרה (SCI) הניתנת לשחזור בעכבר היילוד. המודל מספק פלטפורמה מועילה לחקר מנגנונים של פלסטיות אדפטיבית העומדים בבסיס התאוששות תפקודית ספונטנית.

חוט השדרה עכבר בילוד דגם פגיעה דחיסה

אנו מציגים מודל תזוזה מבוסס חוט השדרה על חוט השדרה, שיכול לייצר פגיעה עקבית בחוט השדרה בעכברים מבוגרים.

תולעת רקמות מבוססי חוט השדרה פגיעה בעמוד השדרה דגם עכברים

הפרוטוקול מתאר מודל עכבר in vivo חדשני של זיהום שתל בעמוד השדרה שבו שתל חוט K מפלדת אל-חלד נגוע בסטפילוקוקוס אאורוס Xen36 ביולומינסנטי. עומס חיידקי מנוטר לאורך עם הדמיה ביולומינסנטית ומאושר עם ספירת יחידות יוצרות מושבה לאחר המתת חסד.

במודל עכבר Vivo של זיהום שתל בעמוד השדרה

המפרק המורכב של הקרסול (ASCJ) הוא ליבת כף הרגל וממלא תפקיד מפתח בבקרת שיווי המשקל בפעילויות יומיומיות. פציעות ספורט מובילות לעיתים קרובות לחוסר יציבות במפרק זה. כאן, אנו מתארים מודל עכברי של חוסר יציבות הנגרמת על ידי טראנסקציה של הרצועה של ASCJ.

מודל עכברי של אי יציבות מפרקים מורכבים בקרסול-סובטאלרי

טכניקות זעיר פולשניות ומכשיר מעבדה פשוט משפרים את יכולת השכפול של מודל הפגיעה בחוט השדרה על ידי הפחתת הנזק האופרטיבי לחיות הניסוי ומתן אפשרות לתחזוקה של המורפולוגיה האנטומית. השיטה כדאית משום שהתוצאות האמינות וההליך הניתן לשחזור מקלים על חקירת מנגנוני תיקון המחלה.

הקמת מודל פגיעה בעמוד השדרה של חבלה בעכבר המבוסס על טכניקה זעיר פולשנית

בפרוטוקול זה, מתוארות שתי גישות כדי להפוך את בדיקת הדחיסה החד-צירית של חוליות מותניות של עכברים ליותר ברת השגה. ראשית, מתוארת ההמרה של מכונת כיפוף תלת נקודות למכונת בדיקת דחיסה. שנית, שיטת הטבעה להכנת משטח העמסה המשתמשת בצמנט עצם מותאמת לחוליות מותניות של עכבר.

בדיקת דחיסה חד-צירית של חוליות מותניות של עכבר עם הטבעה של משטח הטעינה

מוצג כאן מכשיר חדשני אוטומטי לפגיעה בחוט השדרה עבור עכברים, שיכול לייצר במדויק מודלים של פגיעה בחוט השדרה בדרגות שונות.

משפיען אוטומטי למודל פגיעה מתמשכת בחוט השדרה בעכברים

למדו כיצד ליצור מודל עכברי לניוון דיסקים בין-חולייתיים בעמוד השדרה המותני באמצעות כריתה כירורגית של זיזי השדרה והרצועות. מודל זה מאפשר מחקר אורתופדי אמין ושחזרי לחקר מנגנוני הניוון והטיפולים הפוטנציאליים.

דגם עכבר של חוסר יציבות בעמוד השדרה המותני

גלה סרטונים נוספים