Name: מיצוי וניתוק של מוח החזיר המבוית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: למדו פרוטוקול מקיף למיצוי וניתוח מוח חזיר מבוית לחקר נוירואנטומיה ומדעי המוח. השיטה מספקת הוראות מפורטות להסרת הגולגולת וחיתוך אזורי מוח ספציפיים תוך שמירה על שלמות הרקמה לניתוחים עתידיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים רוצים להכיר ג'ים Knoblauch ומרטין-בות הודג'ס של המכללה לחקלאות, הצרכן ומדעי הסביבה טכנולוגיית מידע ושירותי תקשורת על המומחיות שלהם ירי, הקלטה, ועריכה אודיו ווידאו.

נהלים העוסקים בנושאים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC) באוניברסיטת אילינוי באורבנה-שמפיין
הערה: לפני המתת חסד, החזיר היה מורדם באמצעות הזרקה תוך שרירית עם שילוב של טלזול:קטמין:xylazine (50.0 מ"ג של טילטמין HCl בתוספת 50.0 מ ג של zolazepam HCl מכון מחדש עם 2.50 מ"ל של קטמין HCl (100 גרם / L) ו 2.50 מ"ל של xylazine (100 גרם / L) ומנוהל ב 0.06 מ"ג / קילוגרם BW). לאחר שהורדם, החזיר היה מורדם באמצעות ניהול intracardiac של נתרן pentobarbital (390 מ"ג / מ"ל מנוהל ב 1 מ"ל / 5 ק"ג BW). עבור ניתוח המוח, מומלץ כי שיטת המתת חסד להיבחר בהתבסס על ההליך האנליטי הרצוי של הרקמה. שיטת המתת החסד אמורה לגרום לנזק מועט ככל האפשר למוח.
1. מיצוי מוח החזיר
<ol><li>לאחר המתת חסד הומנית, ערפו את ראשו של החזיר על ידי חיתוך מעל עורף הצוואר, בין החוליה הראשונה והשנייה (אטלס וציר, בהתאמה).</li>
	<li>אבטחו את הראש בספסל משותק שונה כך שיכלול קוצים. ודא כי הראש משותק לחלוטין לפני שתמשיך.<ol>
<li>באמצעות אזמל, לעשות חתך קשת לאורך קו האמצע של הגולגולת שממשיך לחלק האחורי של הראש.</li>
		<li>הפוך חתך שני (רוחבי) על החלק האחורי של הראש.</li>
		<li>הפוך שלישי (רוחבי) לחתוך על הקצה האחורי של האף בשורה עם העיניים. חותכים את העור רחוק ככל האפשר מהגולגולת כדי להבטיח גישה קלה לגולגולת.</li>
	</ol>
</li>
	<li>באמצעות מסור עצם, לעשות שני חתכים מהקצה האחורי לרוחב לקו האמצע, המשתרע מהעיניים לשיא של עקמומיות הגולגולת. לרתק את המסור לכיוון קו האמצע ולחתוך רק עמוק מספיק כדי לחדור את הגולגולת.<ol>
<li>חזור על התהליך הנ"ל בצדדים הניצבים, יצירת "חלון" מלבני בגולגולת.</li>
	</ol>
</li>
	<li>באמצעות וו בשר, חטט את החלק המלבני של הגולגולת. התחל על ידי הצבת הוו לתוך אחת הפינות של החלק ולהפעיל לחץ כלפי מעלה כדי לשחרר את חתיכת הגולגולת. יש להקפיד למקם את וו הבשר רק ברמת הגולגולת כדי למנוע חדירה בשוגג של רקמת המוח.</li>
	<li>אם שכבות קרום המוח נשארות על המוח, השתמש במלקחיים ומספריים קהים (או לחילופין, אזמל) כדי להסיר בעדינות את השכבות מבלי לחתוך למוח.</li>
	<li>השתמש אזמל כדי לחתוך את השריר והשומן בחלק האחורי של הראש, חושף את החלק האחורי של הגולגולת.<ol>
<li>לעשות שני חתכים רוחביים לאורך החלק האחורי של הגולגולת. הקפד לא לחתוך לתוך רקמת המוח.</li>
		<li>לאבטח את הראש על ידי הנחת יד מוצקה על האף ולהפעיל לחץ לאחור כדי למשוך את החלק האחורי של הגולגולת, חושף את המוח הקטן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>מוציאים את הראש מהספסל ומניחים על מחצלת כירורגית.</li>
	<li>השתמש בכלי דק ארוך, כגון הקצה הקהה של אזמל, כדי להסיר את המוח. הפוך את הראש והשתמש בתנועת סקופים עדינה כדי לפתות את המוח לצאת מחלל הגולגולת מבלי לפגוע בפני השטח של המוח. הערה: יהיה צורך לנתק עצבי גולגולת כדי להסיר את המוח. עשו זאת בעדינות ואל תנסו למשוך בכוח את המוח החוצה. המוח ייפול מעצמו כאשר הוא מנותק לחלוטין מהגולגולת ומעמוד השדרה.</li>
</ol>2. ניתוח מוח החזיר
הערה: זה עשוי להיות מועיל להשתמש אטלס במוח או מדריך ניתוח סיבים14 כייצוג חזותי במהלך הליכי ניתוח. ודא שדגימות רקמה מנותח מאוחסנות כראוי בהתאם לצרכים הספציפיים לפרויקט בעת הסרת כל דגימה (המתוארת בפירוט רב יותר להלן). בנוסף, שים לב כי לצורך וידאו זה, כל אזורי המוח המוצגים נותחו מחצי הכדור הימני, אבל זה עשוי להיות שונה לכל מעבדה המבוססת על מטרות ניסיוניות.
<ol><li>כדי להסיר את גזע המוח (בעיקר medulla), להפוך caudal לחתוך קורנל למוח הקטן.</li>
	<li>כדי להסיר את המוח הקטן, להפוך את החלק האחורי לחתוך קורנל לקליפת המוח. לבודד את האזורים הרצויים (למשל, vermis, flocculus, וכו ') של המוח הקטן מדגם זה. הקפד לא לכלול כל חלקים של גזע המוח במדגם זה.</li>
	<li>להפריד את שתי ההמיספרות של המוח על ידי ביצוע חתך באמצע קשת לאורך סדק האורך. הפוך את החתך הזה כתנועה רציפה כדי למנוע נזק לקליפת המוח.</li>
	<li>כדי להסיר את midbrain, לנתח כמות רצויה של רקמה רק גחוני קוליקולי מעולה ונחות.</li>
	<li>כדי להסיר את ההיפוקמפוס, מניחים את הקצה הקהה של אזמל בחלק האחורי של כפיס המוח ומגלגלים בעדינות את ההיפוקמפוס החוצה, באמצעות תנועת "J" החל מהחלק האחורי של כפיס המוח; קרן היפוקמפוס שלמה היא 'בצורת שעועית'.</li>
	<li>הסטריאטום (גרעין caudate מוצג בעיקר) הוא אזור אפור ולבן מפוספס חומר ממש מתחת לכוס המוח ואת אצטרורי ההיפוקמפוס. משופע את האזמל ולהסיר את האזור הזה, חושף רקמה מפוספסת בעת ההסרה.</li>
	<li>כדי להסיר את קליפת המוח הקדם-מצחית המדיאלית, לנתח רקמה מהג'ירואים הקדמיים לכוס המוח הקורפוס, תוך הסרת החלק המדיאלי ביותר של סעיף זה. קליפת המוח הימנית צריכה להישאר לאחר הסרת קליפת המוח הקדם-מצחית המדיאלית.</li>
	<li>כדי להסיר את התלמוס, להסיר את המבנה דמוי הנורה במרכז המשטח midsagittal של המוח rostral כדי midbrain. התלמוס יש צורה כדורית ייראה מעט כהה יותר מאשר הרקמה שמסביב.</li>
</ol>3. לאחר הניתוח
<ol><li>עם השלמת הניתוח, לשמר דגימות רקמה כראוי לניתוחים הבאים. השמטת שלב זה תגרום לאוקוליזה והשפלה משמעותיות בתוך 20 דקות בלבד.</li>
	<li>השאר כל אזור במוח שלם בזמן הניתוח אם יתבצעו ניתוחים מבניים, או טחן את הרקמות כדי ליצור דגימת רקמה הומוגנית לפני השימור. שיטות שימור מדגם נפוצות עבור רקמות המוח כוללות cryopreservation וקיבעון כימי באמצעות סוכני crosslinking15.</li>
	<li>לתרגילי מעבדה סטנדרטיים (למשל, ביטוי גנים או חלבונים), יש לטבול בחנקן נוזלי או בפתרונות המייצבים חומר גנטי לפני אחסון ארוך טווח ב-80°C (80°C) כדי לספק שיטות שימור נוחות וחסכוניות.</li>
	<li>אם שמירה על מבנה הרקמות היא בראש סדר העדיפויות, לשמר את רקמות המוח באמצעות שיטות קיבוע מסורתיות (למשל, באמצעות קיבועים מבוססי אלדהיד כדי crosslink חלבונים), ללא או עם זלוף של החיה או איבר של עניין לפני ניתוח רקמות.</li>
</ol>

<ol><li>Hughes, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Swine+in+cardiovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Swine in cardiovascular research.</a> Laboratory Animal Science. 36 (4), 348-350 (1986).</li>
<li>Yen, J. Anatomy of the Digestive System and Nutritional Physiology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYen%2C+J+%22Biology+of+the+Domestic+Pig%22">Biology of the Domestic Pig</a>. , 31-63 (2001).</li>
<li>Pond, W. G. Of Pigs and People. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPond%2C+WG+%22Swine+Nutrition%22">Swine Nutrition</a>. , 3-24 (2001).</li>
<li>Odle, J., Lin, X., Jacobi, S. K., Kim, S. W., Stahl, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Suckling+Piglet+as+an+Agrimedical+Model+for+the+Study+of+Pediatric+Nutrition+and+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Animal+Biosciences%22%5BJournal%5D)">The Suckling Piglet as an Agrimedical Model for the Study of Pediatric Nutrition and Metabolism.</a> Annual Review of Animal Biosciences. 2 (1), 419-444 (2014).</li>
<li>Larsen, M. O., Rolin, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+G%C3%B6ttingen+minipig+as+a+model+of+diabetes%2C+with+special+focus+on+type+1+diabetes+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Use of the Göttingen minipig as a model of diabetes, with special focus on type 1 diabetes research.</a> ILAR Journal. 45 (3), 303-313 (2004).</li>
<li>Lehmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+minipig+in+general+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">The minipig in general toxicology.</a> Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 25, 59-62 (1998).</li>
<li>Richer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sacrococcygeal+and+transsacral+epidural+anesthesia+in+the+laboratory+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Radiologic+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Sacrococcygeal and transsacral epidural anesthesia in the laboratory pig.</a> Surgical Radiologic Anatomy. 20, 431-435 (1998).</li>
<li>Lind, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+pigs+in+neuroscience%3A+Modeling+brain+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+and+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 31 (5), 728-751 (2007).</li>
<li>Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pig+model+in+brain+imaging+and+neurosurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">The pig model in brain imaging and neurosurgery.</a> Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).</li>
<li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt%5BTitle%5D)+AND+%22Early+Human+Development%22%5BJournal%5D)">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early Human Development. 311, 79-83 (1979).</li>
<li>Aurich, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+training+model+with+nonliving+swine+head.+Alternative+for+neurosurgical+education%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cirurgica+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Microsurgical training model with nonliving swine head. Alternative for neurosurgical education.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 29 (6), 405-409 (2014).</li>
<li>Bassi, T., Rohrs, E., Fernandez, K., Ornowska, M., Reynolds, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+brain+excision%3A+An+easier+method+to+harvest+the+pig%27s+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Interdisciplinary+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Direct brain excision: An easier method to harvest the pig's brain.</a> Interdisciplinary Neurosurgery. 14, 37-38 (2018).</li>
<li>Bjarkam, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+pig+CNS+for+histological+analysis%3A+A+manual+for+decapitation%2C+skull+opening%2C+and+brain+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Exposure of the pig CNS for histological analysis: A manual for decapitation, skull opening, and brain removal.</a> Journal of Visualized Experiments. 122, e55511(2017).</li>
<li>Pascalau, R., Szabo, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibre+dissection+and+sectional+study+of+the+major+porcine+cerebral+white+matter+tracts%5BTitle%5D)+AND+%22Anatomia%2C+Histologia%2C+Embryologia%22%5BJournal%5D)">Fibre dissection and sectional study of the major porcine cerebral white matter tracts.</a> Anatomia, Histologia, Embryologia. 46, 378-390 (2017).</li>
<li>McFadden, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfusion+fixation+in+brain+banking%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica+Communications%22%5BJournal%5D)">Perfusion fixation in brain banking: a systematic review.</a> Acta Neuropathologica Communications. 7, 146(2019).</li>
<li>Félix, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+atlas+of+the+pig+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic atlas of the pig brain.</a> Brain Research Bulletin. 49, 1(1999).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

הטכניקות המתוארות בזאת עוצבו עבור חזירים כ 4 שבועות של גיל. זה קריטי לבצע שלבים אלה מיד לאחר החזיר כבר מורדם באופן אנושי כדי להבטיח את השלמות של מבנה רקמת המוח נשמר, במיוחד כאשר בוחנים מבחנים ביוכימיים הבאים. זה מועיל להשתמש אטלס או סיבים16 מדריכי ניתוח כאשר הראשון ללמוד את הטכניקות. מומלץ כי הנסיין לתרגל כמה עקירות מוח ו dissections לפני קבלת דגימות לאיסוף נתונים. הצעד הקשה ביותר הוא הסרת הגולגולת. שלב זה יהיה קל יותר עם ניסיון כפי שהוא דורש בעיקר תרגול ממקור ראשון כדי לדעת איפה על הגולגולת כדי ל...

החזיר תועד היטב והתקבל כמודל חיה לתרגום למחקר במערכות לב וכלידם 1, מערכות במערכת העיכול2, תזונה3,4,סוכרת5, טוקסיקולוגיה6, וטכניקותכירורגיות 7. השימוש של החזיר במדעי המוח מתחיל לגדול, כמו PubMed מחפש את מילות המפתח "מודל בעלי חיים במוח החזירים" לגרום ארבע פעמים יותר תוצאות מ 1996-2005 מאשר בתקופה הקודמת 10 שנה8, ועוד יותר תוצאות כיום. הסיבה העיקרית לכך שהפופולריות של מודל החזיר מתרחבת נובעת מהדמיון שלו בצמיחה, במבנה ובתפקוד של המוח בהשוואה לבני אדם. בהשוואה למוח האנושי, מוח החזיר מציג דפוסים ג'יראליים דומים, כלי דם והפצה של חומר אפור ולבן9. יתר על כן, מוח החזיר שימש בהליכי דימות מוחי, עורר הקלטה פוטנציאלית, ובקביעת טכניקות נוירוכירורגיה8,9. שלא כמו מודלים אחרים של בעלי חיים, לעומת זאת, החזיר והאנושי חווים פרצי צמיחת מוח פרינטליים, בניגוד להתפרצויות גדילה לפני או אחרי הלידה. בלידה, המוח האנושי והחזירי שוקלים כ -27 ו -25 אחוז ממשקל המוח הבוגר שלהם, בהתאמה, בהשוואה למוח החולדה ששוקל 12 אחוז ממשקל המוח הבוגר שלו ולמוח קוף הרזוס ב -76 אחוז ממשקל הבוגר10.
אחת הסיבות לכך שהחזיר אומץ באיטיות כמודל חייתי למדעי המוח היא שחוקרים רבים אינם מכירים את החיה בהקשר זה. החוקרים עשויים שלא להיות מודעים לשימושים הפוטנציאליים שלה בתחום או לא יכול לדעת את הטכניקות הנכונות הנדרשות כדי להשתמש במודל כזה. כמו השימוש בחזיר כמודל ביו-רפואי פרה-קליפיני זוכה לתשומת לב ושימוש במדעי המוח, יש צורך לקבוע נהלים סטנדרטיים של הסרת רקמות כדי להבטיח השוואה מדויקת של נתונים על פני מחקרים. למרות ניתוח וטכניקות כירורגיות מעורבים המוח חזיר פורסמו במקומות אחרים11,12,13, יש צורך פרוטוקולים פשוטים סטנדרטיים כדי לאסוף רקמת מוח חזיר, במיוחד לשימוש מבחנים ביוכימיים. ככזה, המטרה של וידאו זה היא לספק את הידע הדרוש כדי לאפשר לחוקרים לבצע מיצוי מוח סטנדרטי וניתוח. וידאו זה ממחיש טכניקה נכונה אחת כדי להסיר את מוח החזיר תוך שמירה על קליפת המוח ואת גזע המוח שלם, ולאחר מכן לסקור שיטות לנתח כמה אזורי מוח מרכזיים.

<table><tbody><tr><td>#22 להבי אזמל עבור #4 ידיות</td><td>טד פלה, בע"מ.</td><td>549-4S-22</td><td></td></tr><tr><td>11 1/2 אינץ' מסור עצם Satterlee</td><td>Leica Biosystems</td><td>38DI13425</td><td></td></tr><tr><td>5 1/2 אינץ' מפסק גולגולת עם קצה אזמל (וו בשר)</td> <td>Leica Biosystems</td><td>38DI37636</td><td></td></tr><tr><td>ספסל סדנה כבד 5 אינץ' Vise Pony</td><td></td><td>29050</td><td></td></tr><tr><td>סכין קצבים 25 ס"מ</td><td>Victorinox</td><td>5.7403.25</td><td>לחדד לפני השימוש</td></tr><tr><td>CM40 טיפה קלה מהדקי C מזויפים</td><td>Bessey</td><td>00655BC3120</td><td></td></tr><tr><td>סכין חידוד יהלום מעצב</td><td>שף ' s Choice</td><td>436-3</td><td></td></tr><tr><td>ידית להב אזמל נירוסטה של שנדון #4</td><td>ThermoScientific</td><td>5334</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים לרקמות</td><td>הנרי שיין</td><td>101-5132</td><td></td></tr><tr><td>כרית חיתוך ויניל</td><td>קרולינה</td><td>629006</td><td></td></tr></tbody></table>

מיצוי וניתוק של מוח החזיר המבוית

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

השימוש בחזיר כמודל חיה פרה-קליני ותרגום תועד היטב והתקבל על ידי תחומי מחקר החוקרים מערכות לב וכלי דם, מערכות במערכת העיכול ותזונה, והחזיר משמש יותר ויותר כמודל חיה גדול במדעי המוח. יתר על כן, החזיר הוא מודל מקובל ללמוד נוירו-פיתוח כפי שהוא מציג את צמיחת המוח ודפוסי התפתחות דומים למה שקורה בבני אדם. כמודל חיה פחות נפוץ במדעי המוח, ניתוח וניתוח הליכים על חזירים לא יכול להיות מוכר או מתורגל היטב בקרב החוקרים. לכן, פרוטוקול חזותי סטנדרטי המפרט שיטות מיצוי וניתוק עקביות עשוי להוכיח ערך לחוקרים העובדים עם החזיר. הסרטון הבא מציג טכניקה להסרת מוח החזיר תוך שמירה על קליפת המוח וגזע המוח ללא פגע וסוקר שיטות לנתח מספר אזורי מוח שנחקרו בדרך כלל, כולל גזע המוח, המוח הקטן, המוח התיכון, ההיפוקמפוס, הסטריאטום, התלמוס וקליפת המוח הקדם-מצחית המדיאלית. מטרת וידאו זה היא לספק לחוקרים את הכלים והידע הדרושים כדי לבצע באופן עקבי מיצוי המוח וניתוח על החזיר בן ארבעה שבועות.

סעיף זה מתאר דוגמאות של תוצאות שהושגו לאחר מיצוי נכון וניתוח של מוח חזיר בן 4 שבועות. איור 1 מתאר את הצורה של כל אזור במוח לשימוש כקו עזר במהלך הניתוח. חלק מגזע המוח עשוי להישאר בגולגולת לאחר הסרת המוח הקטן(איור 1B). זה יכול להיות מוסר תוך בידוד האזור הרצוי של המוח הקטן. טבלה 1 מציגה את המשקל הממוצע (כלומר ± שגיאת תקן של הממוצע) עבור כל אחד מאזורי המוח המנותחים (n= 5).
<img alt="דיאגרמ...

פרוטוקול זה מפרט את הטכניקה להסרת מוח החזיר בשלמותו וניתוח של מספר אזורי מוח הנחקרים בדרך כלל במדעי המוח.

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

הסרטון הבא הוא הדגמה של הסרה וניתוק של מוח החזיר. זה עשוי להיות מועיל להתייחס אטלס, או מדריך ניתוח סיבים לפני או במהלך ההליך. סכין קצבים גדולה היא הטובה ביותר לעריפת ראש מכיוון שהיא תאפשר חתך נקי אחד בין האטלס לציר.ודא שהסכין חדה לפני שמתחילים עם נושא חדש. וו בשר משמש להסרת הגולגולת. כלי דק ארוך כגון ידית אזמל משמש להסרת המוח מהגולגולת.סגן עם ברגים או בליטות יש צורך לאבטח את הראש בעת חיתוך הגולגולת. לאחר החיה כבר המתת חסד אנושית על פי פרוטוקולים הוקמה להמשיך כדלקמן. חותכים ממש מעל עורף הצוואר, בין הכתפיים לחלק העליון של הראש.לאבטח את החזיר ולהעביר את השנים מהדרך במהלך עריפת ראש. השתמש אזמל כדי להפוך חתכים כדי להפריד את העור מן הגולגולת. בצע חתך ראשוני באמצע הגולגולת שממשיך לחלק האחורי של הראש.החתך הרוחבי השני צריך להיות בחלק האחורי של הראש. החתך השלישי גם רוחבי יתחיל בחלק האחורי של חוטם זה, מוטבע עם העיניים כדי להבטיח גישה קלה לגולגולת. השתמש מסור עצם כדי להפוך את החלקני כדי חתכים אחוריים לרוחב לקו האמצע.התחל על ידי סימון קל של האזור עבור החתך עם המסור, ולאחר מכן להתחיל ניסור עד שאתה נתקל פחות התנגדות מהגולגולת. מעט לשקוע את המסור לכיוון קו האמצע תוך חיתוך כמו זה יבטיח כי אתה חותך את החלק הדק ביותר של הגולגולת. אם החתך קרוב מדי לאוזן יהיה קשה להסיר את הגולגולת.אבל אם החתך קרוב מדי לקו האמצע הפתח יהיה קטן מכדי להסיר את המוח. חזור על תהליך זה בצדדים הניצבים כדי ליצור חלון מלבני. ודא שכל פינה בחלון נחתכת לחלוטין, כך שניתן יהיה להסיר חלק מהגולגולת כדי לחשוף את המוח שמתחת.לאחר מכן, השתמש בוו בשר או בכלי מעוקל כדי לחטט בחלק הגולגולת המלבנית מחוץ למיקום. התחל על ידי הצבת הוו לאחת הפינות, והפעלת לחץ כדי להקציף את הכיפה. במקרים מסוימים, קרום המוח יישאר על המוח.ואם זה קורה בזהירות להשתמש מלקחיים ומספריים קהה, או לחילופין אזמל כדי להסיר את קרום המוח מבלי לחתוך את המוח. לעיון המוח צריך להיראות כדלקמן לפני ואחרי שכבות קרום המוח הוסרו. חותכים דרך השריר והשומן בחלק האחורי של הראש כדי להתכונן לחשיפה של המוח הקטן.כדי לחשוף את המוח הקטן לעשות שני חתכים רוחביים לאורך האחורי של הגולגולת. בעת ביצוע חתכים אלה להיזהר לא לחתוך לתוך המוח החשוף. לאחר החתכים נעשו מקום יד אחת על האף, ואחד על הגולגולת, ולהפעיל לחץ לאחור כדי למשוך את החלק האחורי של הגולגולת הרחק משאר הראש.כפי שמודגש כאן, המוח הקטן תחוב מאחורי שכבות קרום המוח הנותרות. השתמש בקצה של מכשיר קהה כמו ידית אזמל כדי להפריד בזהירות את המוח מן הגולגולת, מקפיד למנוע פגיעה במוח בתהליך. הפוך מעט את הראש כדי לעזור לפתות את המוח לצאת מהגולגולת, ולהשתמש בתנועת סקופים עדינה כדי לנתק את עצבי הגולגולת ולהסיר את המוח.תהליך זה דורש סבלנות ותרגול כדי לחסל את כל הקשרים הנותרים בין המוח לחלל הגולגולת. היפוך ראשו של החזיר יכול להיות מועיל במהלך תהליך זה. המשך להשתמש בתנועות גורפות עם המכשיר הקהה כדי לשחרר את המוח.כפי שמודגש כאן, המוח הקטן וגזע המוח עשוי להיות קשה להסיר כפי שהם תחובים לתוך חלל הגולגולת. יש להקפיד בעת הסרת המוח הקטן והמדולה, או גזע המוח. המוח צריך לנשור מעצמו כאשר הוא מנותק לחלוטין מהגולגולת.חלל הגולגולת צריך להיראות כפי שמוצג לאחר הסרת המוח. כהכנה לניתוח אזור המוח יש לוודא שהמכולות המסומנים מראש מאורגנות, ובקרבה. שיטות שימור לדוגמה כוללות דגימות הקפאה הצמדה בחנקן נוזלי, או שקוע אותם בתמיסה משמרת.לאחר שחולצו מחלל הגולגולת המוח כולו צריך להיראות כדלקמן. כדי להסיר את המדולה או גזע המוח, לעשות caudal לחתוך קורנל למוח הקטן. כדי להסיר את המוח הקטן, להפוך את החלק האחורי לחתוך קורנל לקליפת המוח.כדי להפריד את ההמיספרות לעשות חתך midsagittal לאורך סדק האורך באמצעות תנועה רציפה כדי למנוע נזק. לצורך הסרטון הזה נראה רק ניתוחים מחצי הכדור הימני. כדי להסיר את המראה midbrain עבור מעולה, וקוליקולי נחות שהם שתי בליטות בחלק האחורי של המוח.הסר את הכמות הרצויה של רקמת המוח רק גחוני לאזורים אלה. כדי להסיר את ההיפוקמפוס למקם את ידית האזמל על האחורי של כפיס המוח, בעדינות לגלגל את ההיפוקמפוס החוצה. כל קרן ההיפוקמפוס תהיה בצורת שעועית.ההיפוקמפוס צריך להתגלגל בקלות כאשר גורפים את האצבע בתנועה j, החל מן כפיס המוח האחורי קורפוס. כדי להסיר את גרעין הסטריאטום או הקאודט, נקה את החלק החלקני של כפיס המוח הקורפוס. גרעין הקאודט הוא האזור מפוספס או מפוספס בצבעי אפור ולבן וממוקם ממש מתחת לכוסה הקורפוס.עם ידית אזמל בזווית להסיר את האזור הזה אשר כולל בעיקר את הגרעין caudate. לאחר הסרת רקמה זו אתה אמור להיות מסוגל לראות דפוס מפוסס שבו אזור המוח היה ממוקם. כדי להסיר את הרקמה הקדם-מצחית המדיאלית המנותחת מהgyrus הקדמי לכוס המוח הקורפוס לוקח את החלק המדיאלי ביותר של סעיף זה.קליפת המוח הימנית צריכה להישאר לאחר הסרת קליפת המוח הקדם-מצחית המדיאלית. כדי להסיר את התלמוס, להסיר את הנורה כמו מבנה במרכז המשטח midsagittal. התלמוס בעל צורה כדורית ברורה, והוא ייראה מעט כהה יותר מהרקמה שמסביב.עם השלמת דגימות רקמת הניתוח יש לשמר כראוי בהתבסס על תוצאות ניסיוניות ספציפיות. להלן אזורי המוח המנותחים, כולל הגודל והצורה היחסיים הצפויים בעת עבודה עם חזירים צעירים. עם שליטה בטכניקות אלה, מיצוי המוח כולו, הליך ניתוח ייקח פחות מ 15 דקות לכל נושא, ולהפיק תוצאות עקביות.

extraction-and-dissection-of-the-domesticated-pig-brain

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

אנו מתארים מודל עכברים של הפרעת פוסט טראומטית (PTSD) החושפת את השינויים המתמשכים בתפקוד נוירואנדוקריניים ותגובה המאוחרת לטווח ארוך, המוגזמת פחד, אופייניים לחולי PTSD. מודל החיה ושיטות שתוארו כאן הם שימושיים עבור correlating סמנים ביולוגיים בגרעיני מוח, שהם מכאניים אך לא ניתן למדוד בחולים, עם סמנים ביולוגיים בתאי דם לבן בפריפריה, שיכול.

סמנים ביולוגיים במודל חיה לחשיפה קושרת עצבית, המטולוגית, והתנהגות של PTSD

סרטון זה מדגים שיטה להכנת תרביות פרוסות היפוקמפוס אורגנוטיפיות ממוחו של גור חולדות. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בנתיחת ההיפוקמפוס, החיתוך ותנאי התרבית הדרושים לקידום קיום התאים וצמיחתם בפרוסות ההיפוקמפוס, ובסופו של דבר ליצירת תרביות פרוסות אורגנוטיפיות.

הכנת תרביות פרוסות אורגנוטיפיות מההיפוקמפוס של גור חולדות

סרטון זה מדגים את תהליך היווצרות הנוירוספרות והתרחבותן מרקמת ההיפוקמפוס. תאי גזע עצביים ותאי אב מרקמת הפיתול המשוננת של העכבר לאחר הלידה מתרבים ויוצרים נוירוספרות ראשוניות, אשר לאחר מכן נזרעות מחדש ליצירת נוירוספרות משניות.

היווצרות והרחבה של נוירוספרות מרקמת היפוקמפוס

מחקר נוירוטוקסיטי (AIDN) התפתחותי של חומר הרדמה (AIDN) מתמקד במכרסמים, שאינם חלים באופן נרחב על בני אדם. מודלים שאינם פרימאטים אנושיים הם רלוונטיים יותר, אבל הם עלות אוסרני וקשה לשימוש לצורך ניסויים. חזירון, לעומת זאת, הוא אידיאלי מבחינה קלינית, מעשית מודל חייתי אידיאלי לחקר neurotoxicity הרדמה.

שימוש במודל חזירון לחקר נוירוטוקסיות התפתחותית בהרדמה (AIDN): גישה נוירו-מדעית טרנסציונית

מטרת נייר זה סרט הדרכה היא לתאר כיצד לחשוף ולהסיר את מוח חזיר לאחר המוות ואת בלוטת יותרת מוח במצב שלם, מתאים לניתוח מקרוסקופית היסטולוגית עוקב.

הסרת &quot;חוברת הדרכת עריפת הראש, פתיחת גולגולת, ו Brain: חשיפה של החזיר CNS לניתוח היסטולוגית

מאמר זה מתאר מתודולוגיה מפורט כדי להשיג מקטעים וצורניים שעברו שיטוח של יונקים cortices והמחש מודולים בקליפת המוח באמצעות פתולוגיה ושיטות immunohistochemical.

ויזואליזציה של מודולי קורטיקליים Cortices יונקים שעברו שיטוח

אנו מציגים פרוטוקול מהיר, שלב אחר שלב, להסרת מוח עכבר ודיסקציה של אזורים בדידים מרקמת מוח טרייה. השגת אזורי מוח לניתוח מולקולרי הפכה לדבר שבשגרה במעבדות רבות למדעי המוח. אזורי מוח אלה מוקפאים באופן מיידי כדי לקבל נתוני תעתיק באיכות גבוהה לניתוח ברמת המערכת.

מיקרו-דיסקציה של מוח העכבר לאזורים שונים מבחינה תפקודית ואנטומית

מאמר זה מציג פרוטוקול שלב אחר שלב להשתלת צינורית ישירה בבור החזירים.<br...

השתלת צינורית ישירה ב"ציסטרנה מגנה של חזירים"

כאן, אנו מציגים שיטה להערכת ביצועים ובטיחות ארוכת טווח של מערכי אלקטרודות תת-דוראליות רכות במודל מיני-חזיר, המתארת שיטות וכלי ניתוח, דימות תהודה מגנטית לאחר הניתוח, אלקטרופיזיולוגיה של קליפת המוח השמיעתית, תכונות אלקטרוכימיות של השתל ואימונוכימיה לאחר המוות.

השתלת מערך אלקטרוקורטיקוגרפיה רכה תת-דוראלית (ECoG) ורישום קליפת המוח לטווח ארוך במיני-חזירים

פרוטוקול זה מתאר ביצוע כריתת גולגולת באמצעות מקדחה פניאומטית במהירות גבוהה על חזיר דני בן 3 חודשים. הגישה נעשית דרך העצם הקדמית וחושפת את הדורה מאטר הגחוני ואת ההמיספרות המוחיות שמתחתיו. הליך זה מאפשר גישה לחלק גדול של מוח החזיר.

גישה למוח החזירי באמצעות כריתת מקדח פניאומטי במהירות גבוהה

שיטה חדשנית לבניית מטריצות מוח ניתנות להרחבה לחיתוך פרוסות קורונליות או סגיטליות מתוארת, ליישום על גורי חזירים יילודים. גישה חסכונית זו משתמשת בלוחות אקריליק מגולפים בתבניות מתבנית ג'ל אגרוז למוח, מתיישמת על מינים שונים, ומאפשרת התרחבות כדי להתאים לצמיחת המוח.

יצירת מטריצת מוח ניתנת להרחבה הניתנת להתאמה אישית בין שלבי ההתפתחות

למדו פרוטוקול מקיף למיצוי וניתוח מוח חזיר מבוית לחקר נוירואנטומיה ומדעי המוח. השיטה מספקת הוראות מפורטות להסרת הגולגולת וחיתוך אזורי מוח ספציפיים תוך שמירה על שלמות הרקמה לניתוחים עתידיים.

מיצוי וניתוק של מוח החזיר המבוית

גלה סרטונים נוספים