Name: מודל בעלי חיים גדול לפגיעה חריפה בכליות על ידי אומת עורק כליות דו-צדדית זמנית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 2 s
Description: חקור מודל חזיר גדול לפגיעה חריפה בכליות באמצעות חסימת עורקים כליתיים דו-צדדית זמנית. שיטה זו מחקה תרחישים קליניים כמו השתלת כליה ומינימליזם תגובה דלקתית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להודות לד"ר ארתור נדר על עזרתו והדרכתו. עבודה זו נתמכה על ידי פרס החדשנות של ריצ'רד א' וסוזן פ. סמית' לנשיא, מייקל ב. קליין ומשפחתו, קרן משפחת סידמן, קרן הצדקה מייקל ב. רוקין, קרן המחקר לצדקה של קנת ס. גריפין ומועצת ההשקעות של בוסטון.

כל המחקרים נערכו בהתאם להנחיות המכון הלאומי לבריאות בנושא טיפול בבעלי חיים ושימוש בבעלי חיים ואושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים לילדים בבוסטון (פרוטוקול 18-06-3715). כל בעלי החיים קיבלו טיפול אנושי בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה. איור 1 מציג את ציר הזמן הכולל הרדמה, הכנה כירורגית ונקודות זמן למדידות התוצאה העיקריות של מחקר זה.
1. אינדוקציה, הרדמה וצנרר
<ol><li>כדי למנוע מתחים ואי נוחות מיותרים, לרדם את החזיר על ידי הזרקה תוך שרירית של תערובת של tiletamine/zolazepam 4-6 מ"ג/ק"ג וקסילאצין 1.1-2.2 מ"ג/ק"ג, כמו גם איזופלוראן 3% באמצעות מסכת פנים.</li>
	<li>ניתן לתמצת את וריד האוזן כדי לקבל גישה ורידית עם צינורית 20 G IV לאחר חיטוי האזור עם 95% אתנול. התחל עירוי תחזוקה (0.9% NaCl ב 5 מ"ל / קילוגרם / שעה).</li>
	<li>צנרר את החזיר עם צינור אנדוטראצ'אל (גודל 7 עבור חזירים במשקל 40-50 ק"ג) לאחר התאוות הרדמה מאושרת. לבצע אוורור בלון בתדירות של 12 נשימות / דקות ולהעביר את החזיר לחדר הניתוח.</li>
	<li>הנח את החיה על שולחן הניתוחים בתנוחה העגולה. מיד להתחיל אוורור לחץ חיובי מכני עם FiO2 0.50, 10 מ"ל / קילוגרם נפח גאות ושפל, ותדירות של 12 נשימות / דקה תחת קנוגרפיה רציפה.</li>
	<li>מניחים אוקסימטר דופק על האוזן או על השפה התחתונה לניטור רציף.</li>
	<li>שמור על נורמוטריה (37 °C (37 °F) באמצעות כרית מחוממת אוויר.</li>
	<li>כדי לשמור על הרדמה כללית, לשמור על ניהול איזופלוריין ב 0.5-4% דרך הצינור אנדוטראצ'אל. לאורך כל ההליך, לפקח ברציפות אק"ג, לחץ דם עורקי, טמפרטורה, קנוגרפיה כדי למדוד את עומק ההרדמה.</li>
	<li>הכנס קטטר פולי כדי לבדוק את מצב הנוזל של החיה ולעקוב אחר תפוקת השתן על ידי איסוף שתן בשקית ניקוז. הערה:חזירים נקבות עדיפים על פני זכרים בשל התכונות האנטומיות של השופכה שלהם המאפשר צנתור קל יותר.</li>
</ol>2. הכנה כירורגית וגישה לכלי הדם
<ol><li>לעטוף את החיה בצורה סטרילית.</li>
	<li>לחטא את האזור לרוחב הימני של הצוואר על ידי החלת betadine ולאחר מכן 95% אתנול עבור 3 פעמים.</li>
	<li>בצע חתך עבור הצנתור של העורק הראשי הנכון ואת הווריד הצוואר הימני. לסגת השריר sternocleidomastoid לרוחב ולנתק אותו עד העורק הראשי הימני ואת הווריד הצוואר הימני.</li>
	<li>הכנס נדן אנגיוגרפיה 5F הן בעורק והן בווריד. אבטחו אותו עם תבר משי 2-0.</li>
	<li>הכנס נדן אנגיוגרפיה 5F באמצעות טכניקת סלדינגר לתוך עורק הירך השמאלי.<ol>
<li>כדי לבצע את טכניקת סלדינגר לנקב את עורק הירך באמצעות מחט חלולה. הכנס מדריך קצה רך דרך הלומן ולקדם אותו לתוך עורק הירך.</li>
		<li>החזק את חוט המדריך מאובטח עם היד תוך הסרת המחט. מעבירים את נדן האנגיוגרפיה מעל המדריך לעורק הירך ונסוגים את חוט המדריך. השתמש הדרכת אולטרסאונד, במידת הצורך.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. אינדוקציה של פציעת איסכמיה-רפרפוזיה כליות
<ol><li>יש לנהל 200 IU/kg נתרן הפרין תוך ורידי כדי להשיג קרישה מערכתית (זמן קרישה מופעל היעד (ACT) > 300 s).</li>
	<li>בצע אנגיוגרפיה על ידי הזרקת סוכן ניגוד יוד תחת פלואורוסקופיה כדי לזהות את עורקי הכליות. הערה: כדי להפחית את הסיכון לנפרוטוקסיות הנגרמת על ידי ניגודיות, לדלל את חומר הניגודיות יוד בתמיסה 1:1 עם תמיסת מלח רגילה. Tabulate המינון עבור כל בעלי החיים כדי להבטיח מינון שווה ערך.</li>
	<li>זהה את עורקי הכליה, לקדם באופן ידני את מדריך בצנתר המנחה.</li>
	<li>מקם את הצנתר המנחה 5F JL4 בעורק הכליה השמאלי דרך העורק הראשי הימני(איור 1A).</li>
	<li>מקם את הצנתר המנחה השני של 5F JL4 בעורק הכליות הימני דרך עורק הירך השמאלי(איור 1A).</li>
	<li>השתמש במדריך כדי לכוון צנתר ההרחבה של אנגיופלסטיקה טרנסלומינלית (PTA) 5F לכל עורק כליות. הערה: עדיף למקם את הבלון בעורק הכליות הפרוקסימלי כך שלא נותרו ענפים או בטחונות של עורק הכליה לאחר אינפלציית הבלונים.</li>
	<li>מקם כל קטטר בלון במקום וחבר קו לחץ לכל קטטר.</li>
	<li>בדוק את נוכחותם של צורות גל דופק עורקי בצג הלחץ כדי להבטיח את המיקום הנכון של הצנתר.</li>
	<li>לנפח כל בלון ולכוון ללחץ של כ 2.5 קמ"ש בתוך הבלון(איור 1B).</li>
	<li>כדי לאשר את הפסקת זרימת הדם לכליות להתבונן שיטוח של צורת גל הדופק בקצה צנתר הבלון.</li>
	<li>הזריקו מדיום ניגודיות יוד (דילול 1:1) ובדקו אם יש אטימות של כלי הכליה. הערה: ניתן גם למלא את הבלון עם סוכן ניגודיות יוד להדמיה של הבלון המנופח. עם זאת, שיטה זו אינה רגישה כמו שיטוח צורת גל הדופק כדי לאשר את החסימה של עורקי הכליות.</li>
	<li>לאחר 60 דקות של חסם, בזהירות לנפח ולהסיר את צנתרים הבלון מן העורקים הכליות.</li>
	<li>בצע אנגיוגרפיה (באמצעות בינוני ניגודיות מדוללת 1:1) כדי לאשר טפיחה בעורק הכליות והקמת רפרפוזיה כליות(איור 1C).</li>
	<li>הסר את נדן אנגיוגרפיה 5F מעורק הירך השמאלי.</li>
	<li>החל לחץ מוצק באתר של צנתור במשך 30 דקות.</li>
	<li>הפוך את ההשפעה של הפרין על ידי הממשל של פרוטמין (3 מ"ג/ קילוגרם) עד ACT מנרמל.</li>
	<li>כדי לדגום שתן במהלך התקופה שלאחר הניתוח, לאבטח צינור צנתר פולי עם תפר משי 2-0 באמצעות תפר מופרע על העור.</li>
	<li>השאירו את נדן האנגיוגרפיה בעורק הראשי הימני וריד הצוואר הימני במקום ואבטחו אותם עם תפר משי 2-0 באמצעות תפר מופרע כדי לאפשר דגימת דם לאורך המחקר.</li>
	<li>סוגרים את חתכת הצוואר בתפר משי 2-0 באמצעות תפר רציף ב-2 שכבות.</li>
	<li>יש לנהל bupivacaine (3 מ"ג/ק"ג) באתר ההסתה כדי למזער את הכאב.</li>
	<li>המשך לחות החיה עם 0.9% NaCl ב 5 מ"ל / קילוגרם / שעה בסך הכל 2 שעות לאחר סוף איסכמיה.</li>
	<li>מניחים מדבקת פנטניל (25-50 מיקרוגרם/שעה) על גב החיה כדי למזער כאב לאחר הניתוח.</li>
	<li>לנהל זריקה תוך שרירית של buprenorphine (0.005-0.1 מ"ג/ק"ג) כדי למזער את הכאב לאחר הניתוח.</li>
	<li>לפקח על החיה ולשמור אותו על אוורור מכני עד לעורר.</li>
</ol>4. התאוששות בעלי חיים
<ol><li>לאחר ההתעוררות, יש לארח את החיה בחדר מבוקר טמפרטורה.</li>
	<li>המשיכו להפוך את החיה מצד רוחבי אחד לשני עד שהיא חוזרת להכרה מלאה וליכולת לטבול.</li>
	<li>לספק מים ומזון ad libitum.</li>
</ol>5. הערכה פונקציונלית
<ol><li>לאסוף את הדם ואת דגימות השתן על פי הפרוטוקול הרצוי. הערה: במחקר זה, נקודות הזמן הבאות הוגדרו: בסיסי (1 שעות לאחר תחילת פרוטוקול הידרציה ולפני החסימה של עורקי הכליה), סוף איסכמיה, ורפרפוזיה (2 שעות, 6 שעות, 24 שעות).</li>
	<li>לאסוף את דגימות הדם ורידים. לאחסן אותם ליתיום הפרין או EDTA מצופה vacutainers לניתוח הבא. הערה: שאב דם ישירות מהקטטרים בעורק הראשי וריד הצוואר.</li>
	<li>לאסוף את דגימות השתן מן קטטר פולי ולאחסן אותם בצינורות 15 mL לניתוח. הערה:לאסוף את השתן משקית הניקוז מחובר קטטר פולי.</li>
	<li>כדי לקבוע את תפוקת השתן, לרוקן את שקית הניקוז ולאסוף שתן במשך 1 שעה. הערה: עבור נקודת הזמן 6 h שבה שקית ניקוז אינה מחוברת קטטר פולי, לסגור את הצינור מחובר קטטר פולי במשך 30 דקות ולאחר מכן לאסוף את השתן עם מזרק 60 מ"ל כדי לקבוע את תפוקת השתן.</li>
</ol>6. המתת חסד
<ol><li>לאחר תום תקופת ההפרטה, בצע הרדמה ונטר כמתואר לעיל.</li>
	<li>המשך הידרציה עם 0.9% NaCl ב 5 מ"ל / קילוגרם / שעה.</li>
	<li>השתמש בקטטרים העורקיים והווריריים לדגימה בדם ובקטטר פולי כדי לקבוע את תפוקת השתן. לאסוף את דגימות הדם והשתן הסופי ולחשב את תפוקת השתן.</li>
	<li>בצע 15 ס"מ 15 ס"מ תיקון לפרוסטומיה בקו האמצע באמצעות להב בגודל 10 מן xiphoid עד לאגן האמצעי.</li>
	<li>השתמש מפסק לרוחב ישר כדי לבטל את עור הבטן.</li>
	<li>לנתח את ההחזקות לרוחב צפק של דופן הבטן כדי לחשוף את retroperitoneum ימין ושמאל.</li>
	<li>זהה ותתחו בבוטות גם עורקי כליות וגם ורידים.</li>
	<li>ליגת הן עורקי כליות והן ורידים עם תפירת משי 2-0 ולבצע כריתת נפרקטומיות דו-צדדיות כדי לאסוף דגימות רקמות שלמות לניתוח היסתולוגי ומטבולי.</li>
	<li>המתת חסד את החיה בשיטה המועדפת של המתת חסד (למשל, דממה, פנטוברביטל)</li>
</ol>

<ol><li>Ali Pour, P., Kenney, M. C., Kheradvar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioenergetics+consequences+of+mitochondrial+transplantation+in+cardiomyocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Bioenergetics consequences of mitochondrial transplantation in cardiomyocytes.</a> Journal of the American Heart Association. 9 (7), 014501(2020).</li>
<li>Giraud, S., Favreau, F., Chatauret, N., Thuillier, R., Maiga, S., Hauet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+large+pig+for+renal+ischemia-reperfusion+and+transplantation+studies%3A+The+Preclinical+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Contribution of large pig for renal ischemia-reperfusion and transplantation studies: The Preclinical Model.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 14(2011).</li>
<li>Amdisen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testing+Danegaptide+effects+on+kidney+function+after+ischemia%2Freperfusion+injury+in+a+new+porcine+two+week+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Testing Danegaptide effects on kidney function after ischemia/reperfusion injury in a new porcine two week model.</a> PLoS ONE. 11 (10), 1-13 (2016).</li>
<li>Bhargava, P., Schnellmann, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+energetics+in+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial energetics in the kidney.</a> Nature Reviews Nephrology. 13 (10), 629-646 (2017).</li>
<li>Bonventre, J. V., Weinberg, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+pathophysiology+of+ischemic+acute+renal+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the pathophysiology of ischemic acute renal failure.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 14 (8), 2199-2210 (2003).</li>
<li>Case, J., Khan, S., Khalid, R., Khan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+Acute+Kidney+Injury+in+the+Intensive+Care+Unit%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Research+and+Practice%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of Acute Kidney Injury in the Intensive Care Unit.</a> Critical Care Research and Practice. 2013, 9(2013).</li>
<li>Jabbari, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transplantation+ameliorates+ischemia%2Freperfusion-induced+kidney+injury+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta+%28BBA%29+-+Molecular+Basis+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transplantation ameliorates ischemia/reperfusion-induced kidney injury in rat.</a> Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease. 1866 (8), 165809(2020).</li>
<li>Malagrino, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheter-based+induction+of+renal+ischemia%2Freperfusion+in+swine%3A+Description+of+an+experimental+model%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reports%22%5BJournal%5D)">Catheter-based induction of renal ischemia/reperfusion in swine: Description of an experimental model.</a> Physiological Reports. 2 (9), 1-13 (2014).</li>
<li>Freeman, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nephropathy+requiring+dialysis+after+percutaneous+coronary+intervention+and+the+critical+role+of+an+adjusted+contrast+dose%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Nephropathy requiring dialysis after percutaneous coronary intervention and the critical role of an adjusted contrast dose.</a> American Journal of Cardiology. 90 (10), 1068-1073 (2002).</li>
<li>Gasthuys, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+maturation+of+the+glomerular+filtration+rate+in+conventional+growing+piglets+as+potential+juvenile+animal+model+for+preclinical+pharmaceutical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Postnatal maturation of the glomerular filtration rate in conventional growing piglets as potential juvenile animal model for preclinical pharmaceutical research.</a> Frontiers in Pharmacology. 8 (431), 1-7 (2017).</li>
<li>Doulamis, I. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transplantation+by+intra-arterial+injection+for+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transplantation by intra-arterial injection for acute kidney injury.</a> American Journal of Physiology - Renal Physiology. 319 (3), 403-413 (2020).</li>
<li>Rewa, O., Bagshaw, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+kidney+injury-epidemiology%2C+outcomes+and+economics%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Acute kidney injury-epidemiology, outcomes and economics.</a> Nature Reviews Nephrology. 10 (4), 193-207 (2014).</li>
<li>Grossini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Levosimendan+Protection+against+Kidney+Ischemia%2FReperfusion+Injuries+in+Anesthetized+Pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Levosimendan Protection against Kidney Ischemia/Reperfusion Injuries in Anesthetized Pigs.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 342 (2), 376-388 (2012).</li>
<li>Laskey, W. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volume-to-creatinine+clearance+ratio.+A+pharmacokinetically+based+risk+factor+for+prediction+of+early+creatinine+increase+after+percutaneous+coronary+intervention%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Volume-to-creatinine clearance ratio. A pharmacokinetically based risk factor for prediction of early creatinine increase after percutaneous coronary intervention.</a> Journal of the American College of Cardiology. 50 (7), 584-590 (2007).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין אינטרסים כלכליים מתחרים.

AKI היא הפרעה קלינית נפוצה המשפיעה על עד 50% מהחולים הבוגרים המאושפזים ברחבי העולם6,12. מודל בעלי חיים רלוונטי קלינית נדרש כדי לחקור עוד יותר את הפתופיזיולוגיה של המחלה ויעדים טיפוליים פוטנציאליים. למרות שישנם מספר מודלים מורים המשכפלים AKI, אלה אינם מחקים לחלוטין את התרחישים הקליניים שלהם ואת האנטומיה של הכליה האנושית. מחקר זה מציע מודל חזירים רלוונטי קלינית כדי לאפשר תרגום לבני אדם13.
כאן, הפרוטוקול מתאר גישה ...

פגיעה חריפה בכליות (AKI) היא מצב מאובחן בקרב חולים כירורגיים הקשורים לתחלואה ותמותה משמעותית1,2. הנתונים הזמינים מראים כי AKI יכול להשפיע אפילו על מחצית מכלל החולים המאושפזים ברחבי העולם ומוביל לשיעור תמותה של 50% בחולים ביחידה לטיפול נמרץ1,3. למרות שכיחותו הגבוהה, הטיפול הנוכחי ב- AKI נותר מוגבל לאסטרטגיות מניעה, כגון ניהול נוזלים ודיאליזה. לכן, יש עניין מתמשך לחקור טיפולים אלטרנטיביים עבור AKI4,5,6.
AKI מסווג בדרך כלל טרום כליות, מהותי, ולאחר כליות מבוסס על האטיולוגיה שלה4,5,6. רוב החולים הכירורגיים עם AKI קשורים לגורמים טרום כליות עקב היפובולמיה, וכתוצאה מכך פגיעה איסכמיה-reperfusion (IRI) של הכליות2. מבחינה קלינית, תפוקת השתן פוחתת, ורמות קריאטינין להגדיל עקב ירידה בתפקוד הכלייתי. הכליה היא איבר בעל קצב חילוף חומרים גבוה ורגיש לאיסכמיה. מודל בעלי חיים גדול מאוד לשחזור של IRI כליות יש צורך להשיג תובנה טובה יותר לתוך הפתופיזיולוגיה של AKI ואת הגישות הטיפוליות הפוטנציאליות שלה5.
כדי לחקות את התרחיש הקליני של hypoperfusion כליות peri-operatively, מודל של נעילת עורק כליות דו צדדי נחשב מתאים. מודלים שתוארו בעבר הכרוכים בחסימה חד-צדדית של עורק הכליה עם או בלי כריתה של הכליה הנגדית אינם מספקים ישימות קלינית מספקת7,8. למרות מודלים אלה מספיקים לגרימת AKI, הם אינם דומים תרחישים קליניים בחיים האמיתיים לא במונחים של סוג ולא משך של פגיעה.
מטרתו של נייר זה היא להציג מודל חזירי של חסימה זמנית דו-צדדית עורית של עורקי הכליה על ידי חסימת צנתר בלון תחת אנגיוגרפיה. אותיקה עורק כליות דו צדדי מחקה את התרחיש הקליני של hypoperfusion כליות, ואחריו הסרה מאוחרת יותר של הבלון עבור reperfusion9,10. השלבים הטכניים מתוארים, כולל צנתור, הדרכת צנתר, אנגיוגרפיה וניטור המודינמי. שיטה זו לא רק מאפשרת חסם מבוקר מאוד לשכפול של עורקי הכליות, אלא הגישה העורית ממזערת את ההשפעה של התגובה הדלקתית על ידי הגבלת כמות העלבון לגוף בהשוואה לגישה פתוחה.

<table><tbody><tr><td>0.9% נתרן כלורי הזרקה, USP, 100 מ"ל מיכל פלסטיק viaflex</td><td>בקסטר</td><td>2B1302</td><td>עבור הידרציה של בעלי חיים</td></tr><tr><td>סוכן ניגודיות 100.0 מ"ל הזרקת מדיה btl ioversal 74%</td> <td>CARDINAL HEALTH</td><td>133311</td><td>להמחשת כלי הדם</td></tr><tr><td>בארד ברדיה מערכת סגורה שקית ניקוז שתן</td><td>BARD Inc</td><td>802001</td><td>לאיסוף שתן</td></tr><tr><td>BD Vacutainer K2 EDTA</td><td>BD</td><td>367841</td><td>לאחסון דגימות דם</td></tr><tr><td>BD Vacutainer ליתיום הפרין</td><td>BD</td><td>366667</td><td>לאחסון דגימות דם</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Henry Schein</td><td>6906950</td><td>לחיטוי העור</td></tr><tr><td>מפסק Bookwalker</td><td>Codman</td><td></td><td>לנסיגת עור</td></tr><tr><td>Bupivacaine 0.25%</td> <td>Hospira</td><td></td><td>מתן במקום החתך לשיכוך כאבים</td></tr><tr><td>בקבוק בופרנורפין SR</td><td>Zoo Pharm</td><td></td><td>10 מ"ג/מ"ל, מינון: 0.2 מ"ג/ק"ג SC</td></tr><tr><td>Cath angio 5.0 Fr x100.0 ס"מ 0.038 ב-JR4</td><td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td><td>7523-21</td><td>לזיהוי עורקי הכליה</td></tr><tr><td>צינור אנדוטרכיאלי אזוק</td><td>Emdamed</td><td></td><td>להקמת נתיב אוויר מאובטח למשך הניתוח</td></tr><tr><td>EKG Medtronics- Physiocontrol LifePak 20 מוניטור רוויית חמצן</td><td>GE Healthcare Madison WI</td><td></td><td>לניטור ריווי חמצן</td></tr><tr><td>Encore 26 inflator</td><td>BOSTON SCIENTIFIC</td><td>710113</td><td>לניפוח צנתרי הבלון</td></tr><tr><td>אתנול 95% (אלכוהול אתילי)</td> <td>הנרי שיין</td><td></td><td>לחיטוי העור</td></tr><tr><td>מדבקת פנטניל</td><td>מיילן</td><td></td><td>מינון: 25-50 מק"ג לשעה, ציפוי</td></tr><tr><td>סיליקון זהב TD פולי</td><td>TELEFLEX MEDICAL INC</td><td></td> 180730160 <td>לשתן אוסף</td></tr><tr><td>Heparin נתרן</td><td>LEO Pharma A/S</td><td></td><td>מינון: 200 IU/kg</td></tr><tr><td>IV i33 מכונת אולטרסאונד</td><td>פיליפס</td><td></td><td>השתמש בהנחיה אולטרסאונד לצנתר עצם הירך במידת הצורך</td></tr><tr><td>חוט מוביל אבחון Inqwire - 0.035 אינץ' (0.89 מ"מ) - 260 ס"מ (102 אינץ') - 1.5 מ"מ j-tip</td><td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td><td>6609-33</td><td>להנחיית צנתרי הבלון לעורקי</td></tr> <tr><td>הכליהקטטר תוך ורידי, גודל 20 מד</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>Inc SC-360097</td><td>למתן נוזלים</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Patterson Veterinary Supply, Inc.</td><td></td><td>מינון 21283620: 3%, INH</td></tr><tr><td>מצנבאום קהה מעוקל 14.5 ס"מ - 5(3/4)"</td><td>"Rudolf Medical</td><td>RU-1311-14M</td><td>לחיתוך וחיתוך רקמות</td></tr><tr><td>ערכת מתמר חד פעמית ליילודים עם מכשיר הדחה של 30 מ"ל לשעה ופקקי עצירה כפולים 4 כיוונים לניטור רציף</td><td>ארגון רפואי</td><td>041588505A</td><td>למדידת לחץ</td></tr><tr><td>צנתר הרחבת Powerflex pro PTA 6 x 20 מ"מ - אורך פיר (135 ס"מ)</td><td>CARDINAL HEALTH</td><td>4400602X</td><td>לחסימת עורקי הכליה</td></tr><tr><td>קווי ניטור לחץ mll/mll - 12 אינץ' שקוף, mll/mll</td><td>Smiths Medical</td><td>B1571/MX571</td><td>למדידת לחץ</td></tr><tr><td>חבילת נוהל</td><td>Molnlycke Health</td><td>Care 97027809</td><td>וילון כירורגי, רפידות גזה, מזרקים, וכו</td></tr>' <tr><td>פרוטאמין</td><td>הנרי שיין</td><td>1044148</td><td>להיפוך</td></tr> <tr><td>הפריןלהב אזמל - גודל #10</td><td>Cardinal Health (נאמנות)</td><td>32295-010</td><td>לחתכי העור</td></tr><tr><td>Stopcock iv 4 way lrg bore rotg male ll adptr strl</td><td>Peoplesoft</td><td>1550</td><td>לחיבור</td></tr><tr><td>צינורות מפסק צד ישר</td><td>קודמן</td><td></td><td>לנסיגת עור</td></tr><tr><td>תפר פרמה hnd 18in 2-0 צמה משי blk</td><td>CARDINAL HEALTH 1</td><td>A185H</td><td>לתפירת אתר חתך ואבטחת קטטרים</td></tr><tr><td>מזרק ניגוד הזרקת 10 מ"ל קבוע זכר לואר אדום</td><td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td><td>MSS111-R</td><td>למתן חומר הניגוד</td></tr><tr><td>מזרק רפואי 60 מ"ל ll plst strl ltx free disp</td><td>CARDINAL HEALTH 1</td><td>BF309653</td><td>לאיסוף שתן ושטיפה של האנגיוקט</td></tr><tr><td>Tilzolan (טילטמין/זולאזפאם)</td> <td>Patterson Veterinary Supply, Inc.</td><td>07-893-1467</td><td>מינון: 4-6 מ"ג/ק"ג, IM</td></tr><tr><td>קסילזין</td><td>פוטני, INC</td><td></td><td>מינון: 1.1-2.2 מ"ג/ק"ג, IM</td></tr></tbody></table>

מודל בעלי חיים גדול לפגיעה חריפה בכליות על ידי אומת עורק כליות דו-צדדית זמנית

A Large Animal Model for Acute Kidney Injury by Temporary Bilateral Renal Artery Occlusion

פגיעה חריפה בכליות (AKI) קשורה לסיכון גבוה יותר לתחלואה ולתמותה לאחר ניתוח. פציעת איסכמיה-רפרפוזיה (IRI) היא הגורם הנפוץ ביותר של AKI. כדי לחקות תרחיש קליני זה, מחקר זה מציג מודל בעלי חיים גדול מאוד לשחזור של IRI כליות חזירים באמצעות בלינתר בלון-צנתר עורית זמנית של עורקי הכליות. עורקי הכליות חסומים למשך 60 דקות על ידי החדרת צנתרי הבלון דרך העורק הירך והתרכול וקידוםם לחלק הפרוקסימלי של העורקים. ניגודיות יוד מוזרק בבוט"ש כדי להעריך כל אטימה של כלי הכליות ולאשר את ההצלחה של החסימה בעורק. זה מאושר עוד יותר על ידי שיטוח צורת גל הדופק בקצה צנתרים הבלון. הבלונים מנוטרלים ומוסרים לאחר 60 דקות של סתירה עורק כליות דו צדדי, ובעלי החיים מורשים להתאושש במשך 24 שעות. בסוף המחקר, קריאטינין פלזמה וחנקן אוריאה בדם להגדיל באופן משמעותי, בעוד eGFR ותפוקת שתן להקטין באופן משמעותי. הצורך בניגודיות יוד הוא מינימלי ואינו משפיע על תפקוד הכלייתי. כריתת עורק הכליה הדו-צדדית מחקה טוב יותר את התרחיש הקליני של תת-פרופלוזיה כליות פריופרטיבית, והגישה העורית ממזערת את ההשפעה של התגובה הדלקתית ואת הסיכון לזיהום שנראה בגישה פתוחה, כגון לפרוסטומיה. היכולת ליצור ולשכפל מודל חזירים רלוונטי קלינית זה מקלה על התרגום הקליני לבני אדם.

ניתוח פונקציונלי התוצאות הייצוגיות של מחקר זה נובעות מ -6 בעלי חיים והנתונים המוצגים הם ממוצעים ± הטעות הסטנדרטית של הממוצע. תפקוד הכלייתי מוערך על ידי קביעת תפוקת השתן, קצב סינון גלומרולרי משוער (eGFR), קריאטין פלזמה, וחנקן אוריאה בדם (BUN). סמנים ביולוגיים של תפקוד הכליות מוערכים באמצעות מנתח כימיה נייד. eGFR מחושב על פי הנוסחה הבאה: eGFR = 1.879 × BW1.092/ PCr0.6 (BW: משקל גוף בק"ג; PCr: קריאטינין פלזמה ב mg /dL)10,<sup ...

מחקר זה מציג מודל בעלי חיים גדול מאוד לשחזור של איסכמיה-reperfusion כליות פגיעה חזירים באמצעות בלין-צנתר בלון עורי זמני של עורקי הכליה במשך 60 דקות reperfusion עבור 24 שעות.

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most ...

מחקר זה מתאר מודל בעלי חיים גדול לשחזור של פגיעה איסכמיה כליות, אשר ניתן להשתמש בו כדי ללמוד את הפתופיזיולוגיה של פגיעה בכליות חריפה, ולחקור שיטות טיפוליות פוטנציאליות. שיטה זו ניתנת לשחזור וממזערת את ההשפעה של תגובה דלקתית על ידי הגבלת כמות העלבון לגוף בהשוואה לגישה פתוחה. מודל פרה-קליני זה מחקה תרחישים קליניים, כגון השתלת כליות, hypoperfusion כליות בעקבות הלם קרדיוגני, הליכי טרנסקתטר וכתוצאה מכך איסכמיה כליות, והליכים לב וכלי דם עם זמני מעצר לב וכלי דם ממושכים.כדי להתחיל, לחטא את האזור לרוחב הימני של הצוואר על ידי החלת betadine ולאחר מכן 95% אתנול שלוש פעמים. לעטוף את החיה בצורה סטרילית. בצע חיתוך עבור הצנתור של העורק הראשי הנכון ואת הווריד הצוואר הימני.לסגת השריר sternocleidomastoid לרוחב, ולנתח אותו עד העורק הראשי הימני ואת הווריד הצוואר הימני. הכנס נדן אנגיוגרפיה 5F הן בעורק והן בווריד. אבטחו אותו עם תבר משי 2-0.הכנס נדן אנגיוגרפיה 5F באמצעות טכניקת סלדינגר לתוך עורק הירך השמאלי על ידי ניקוב העורק עם מחט חלולה. הכנס חוט קו יישור רך דרך הלומן ולקדם אותו לתוך עורק הירך. החזק את חוט המדריך מאובטח עם יד בעת הסרת המחט.להעביר את נדן אנגיוגרפיה מעל חוט המדריך לתוך עורק הירך ולהוציא את חוט המדריך באמצעות הדרכת אולטרסאונד במידת הצורך. תוך ורידי לנהל 200 IU לכל קילוגרם נתרן הפרין כדי לה

a-large-animal-model-for-acute-kidney-injury-temporary-bilateral

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מודל Murine מדויק לפגיעה כליות חריפה (AKI) בשל איסכמיה הוא כלי חשוב לחקור פגיעה כליות חריפה ואולי אף למצוא כלים טיפולית לטיפול פגיעה כלייתית. מערכת המשקל תלוי מציעה כלי חסימה מיידית ואמינה reperfusion עורק הכליה מבלי לגרום גודש כליות.

השימוש במערכת תלוי במשקל עבור חסימת עורק הכליה מבודדת

אנו מתארים מודלים של פגיעה בכליות הנגרמות איסכמיה reperfusion בינוניות וקשות שבו העכברים עוברים הידוק חד צדדי ואחרי כריתת כליה הנגדית בו זמנית או עיכוב, בהתאמה pedicle כליות. מודלים אלה נותנים באופן עקבי עלייה לפגיעה בתפקוד הכלייתי וסיסטיק לאחר פציעה, אך חומרת פציעה והישרדות תלויות ברקע, גיל וכירורגי ציוד עכבר.

דגם איסכמיה reperfusion של פגיעה חריפה בכליות ופגיעים ההודעה פיברוזיס בעכברים

מודל העכבר של פגיעה חוזרת באיסכמיה כלייתית המתואר כאן מורכב מכריתת כליה ימנית המספקת רקמת בקרה והידוק של פדיקל הכליה השמאלי כדי לגרום לאיסכמיה הגורמת לפגיעה כלייתית חריפה. מודל זה משתמש בגישת לפרוטומיה בקו האמצע כאשר כל השלבים מבוצעים באמצעות חתך אחד.

כליות איסכמיה reperfusion פגיעה: במודל עכבר של הפגיעה והתחדשות

מודל שונה של 2 כליות 1 קליפ (2K1C) עכבר גולדבלט פותח תוך שימוש בצינורות פוליאוריתן כדי ליזום היצרות של עורק הכליה, מה שגרם לעלייה בביטוי הרנין ובפגיעה בכליות. כאן אנו מתארים הליך מפורט של הכנה והנחת השרוול על עורק הכליה כדי ליצור מודל עכבר 2K1C הניתן לשחזור ועקבי.

מודל שונה של שתי כליות קליפ אחד של ויסות רנין בהיצרות עורק הכליה

פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה כלייתית קשורה לתחלואה ותמותה גבוהה בחולים מאושפזים. כאן אנו מציגים מודל עכבר פשוט ויעיל של פגיעה חד-צדדית באיסכמיה-רפרפוזיה של הכליה ומספקים סקירה רציפה של שינויים פתולוגיים מייצגים שנצפו בכליה.

מודל עכבר יעיל של פגיעה חד-צדדית באיסכמיה-רפרפוזיה של הכליה

מחקר זה ביסס פרוטוקול המתמקד בשכלול טכני של מודל עכברי של איסכמיה כלייתית דו-צדדית - רפרפוזיה לחקר פגיעה חריפה בכליות.

שכלול טכני של מודל עכבר איסכמיה כלייתית דו-צדדית למחקר פגיעה חריפה בכליות

כתב יד זה מציג פרוטוקול סטנדרטי לכריתת כליה 5/6 על ידי כריתה דו-פולרית חדה באמצעות לפרוטומיה בקו האמצע במודל חולדה, במטרה לגרום למצב של אי ספיקת כליות באמצעות הפחתת פרנכימה כלייתית עם מידה רבה של דיוק שיטתי וסיכון נמוך לטעות טכנית.

כריתת כליה 5/6 באמצעות כריתה דו-קוטבית חדה באמצעות לפרוטומיה בקו האמצע בחולדות

כאן, אנו מציגים פרוטוקול המפרט מודל כירורגי לרכישת כליות במודל חזירים פרה-קליני לזלוף מכונה או השתלה לאחר מכן.

רכישת כליות במודל פרה-קליני של בעלי חיים גדולים

מאמר זה מציג מודל CKD איסכמי המשתמש ב-IRI כלייתי חד-צדדי עם נפרקטומיה נגדית שבוצעה יום לפני איסוף הדגימה; פרוטוקול זה מאפשר הערכה פונקציונלית מבוססת סרום, הישרדות גבוהה ופתולוגיה של CKD ניתנת לשחזור ב-28 ו-42 ימים, ומספק פלטפורמה גמישה למחקרים מכניים והתערבותיים.

מודל העכבר של מעבר ממחלת כליות חריפה לכרונית שנגרם מאיסכמיה כליתית/פגיעה ברפרפוזיה

רוב המחקרים הכוללים את מנגנון לנגנדורף משתמשים במודלים של בעלי חיים קטנים בשל המורכבות המוגברת של מערכות עבור יונקים גדולים יותר. אנו מתארים מערכת לנגנדורף למודלים של בעלי חיים גדולים המאפשרת שימוש במגוון מינים, כולל בני אדם, ורכישת נתונים קלה יחסית.

מערכת העבודה לב מבודדת למודלים בבעלי חיים גדולים

חקור מודל חזיר גדול לפגיעה חריפה בכליות באמצעות חסימת עורקים כליתיים דו-צדדית זמנית. שיטה זו מחקה תרחישים קליניים כמו השתלת כליה ומינימליזם תגובה דלקתית.

מודל בעלי חיים גדול לפגיעה חריפה בכליות על ידי אומת עורק כליות דו-צדדית זמנית

גלה סרטונים נוספים