Name: התמיינות מכוונת של תאי אנדותל המוגניים מתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-03-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 23 s
Description: למדו פרוטוקול לגידול תאי אנדותל המוגניים מתאי גזע עובריים אנושיים. השיטה מאפשרת חקר המעבר האנדותלי-המטופואטי ומספקת מערכת נקייה מסרום ומתומכי גידול ליישומים בחקר ובהנדסת רקמות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה חלקית על ידי מענקי NIH HL128064 ו- U2EB017103. תמיכה נוספת ניתנה על ידי מענק CT Innovations 15-RMB-YALE-04.

<ol><li>Giacomelli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+cardiac+microtissues+composed+of+cardiomyocytes+and+endothelial+cells+co-differentiated+from+human+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional cardiac microtissues composed of cardiomyocytes and endothelial cells co-differentiated from human pluripotent stem cells.</a> Development. 144 (6), 1008-1017 (2017).</li>
<li>Wu, J., Wu, Z., Xue, Z., Li, H., Liu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PHBV%2Fbioglass+composite+scaffolds+with+co-cultures+of+endothelial+cells+and+bone+marrow+stromal+cells+improve+vascularization+and+osteogenesis+for+bone+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22RSC+Advances%22%5BJournal%5D)">PHBV/bioglass composite scaffolds with co-cultures of endothelial cells and bone marrow stromal cells improve vascularization and osteogenesis for bone tissue engineering.</a> RSC Advances. 7 (36), 22197-22207 (2017).</li>
<li>Lee, H., Chung, M., Jeon, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvasculature%3A+An+essential+component+for+organ-on-chip+systems%5BTitle%5D)+AND+%22MRS+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Microvasculature: An essential component for organ-on-chip systems.</a> MRS Bulletin. 39 (1), 51-59 (2014).</li>
<li>Gritz, E., Hirschi, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specification+and+function+of+hemogenic+endothelium+during+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">Specification and function of hemogenic endothelium during embryogenesis.</a> Cellular and Molecular Life Sciences. 73 (8), 1547-1567 (2016).</li>
<li>Williams, I. M., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+endothelial+cells+from+human+pluripotent+stem+cells%3A+Methods%2C+considerations%2C+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Generation of endothelial cells from human pluripotent stem cells: Methods, considerations, and applications.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 39 (7), 1317-1329 (2019).</li>
<li>Olmer, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+human+pluripotent+stem+cells+into+functional+endothelial+cells+in+scalable+suspension+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Differentiation of human pluripotent stem cells into functional endothelial cells in scalable suspension culture.</a> Stem Cell Reports. 10 (5), 1657-1672 (2018).</li>
<li>Cossu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lancet+Commission%3A+Stem+cells+and+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Lancet Commission: Stem cells and regenerative medicine.</a> The Lancet. 391 (10123), 883-910 (2018).</li>
<li>Fox, I. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+differentiated+pluripotent+stem+cells+in+replacement+therapy+for+treating+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Use of differentiated pluripotent stem cells in replacement therapy for treating disease.</a> Science. 345 (6199), 1247391(2014).</li>
<li>Mahla, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cells+applications+in+regenerative+medicine+and+disease+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Stem cells applications in regenerative medicine and disease therapeutics.</a> International Journal of Cell Biology. 2016, 1-24 (2016).</li>
<li>Ebert, A. D., Liang, P., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induced+pluripotent+stem+cells+as+a+disease+modeling+and+drug+screening+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Induced pluripotent stem cells as a disease modeling and drug screening platform.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 60 (4), 408-416 (2012).</li>
<li>Rowe, R. G., Daley, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induced+pluripotent+stem+cells+in+disease+modelling+and+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Genetics%22%5BJournal%5D)">Induced pluripotent stem cells in disease modelling and drug discovery.</a> Nature Reviews Genetics. 20 (7), 377-388 (2019).</li>
<li>Liu, C., Oikonomopoulos, A., Sayed, N., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+human+diseases+with+induced+pluripotent+stem+cells%3A+from+2D+to+3D+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Modeling human diseases with induced pluripotent stem cells: from 2D to 3D and beyond.</a> Development. 145 (5), (2018).</li>
<li>Wnorowski, A., Yang, H., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress%2C+obstacles%2C+and+limitations+in+the+use+of+stem+cells+in+organ-on-a-chip+models%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Progress, obstacles, and limitations in the use of stem cells in organ-on-a-chip models.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 140, 3-11 (2019).</li>
<li>Ramme, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+induced+pluripotent+stem+cell-derived+four-organ-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Science+OA%22%5BJournal%5D)">Autologous induced pluripotent stem cell-derived four-organ-chip.</a> Future Science OA. 5 (8), 1-12 (2019).</li>
<li>Ronaldson-Bouchard, K., Vunjak-Novakovic, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organs-on-a-Chip%3A+A+fast+track+for+engineered+human+tissues+in+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Organs-on-a-Chip: A fast track for engineered human tissues in drug development.</a> Cell Stem Cell. 22 (3), 310-324 (2018).</li>
<li>Kane, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Derivation+of+endothelial+cells+from+human+embryonic+stem+cells+by+directed+differentiation%3A+analysis+of+microrna+and+angiogenesis+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Derivation of endothelial cells from human embryonic stem cells by directed differentiation: analysis of microrna and angiogenesis in vitro and in vivo.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 30 (7), 1389-1397 (2010).</li>
<li>Costa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Derivation+of+endothelial+cells+from+human+embryonic+stem+cells+in+fully+defined+medium+enables+identification+of+lysophosphatidic+acid+and+platelet+activating+factor+as+regulators+of+eNOS+localization%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research%22%5BJournal%5D)">Derivation of endothelial cells from human embryonic stem cells in fully defined medium enables identification of lysophosphatidic acid and platelet activating factor as regulators of eNOS localization.</a> Stem Cell Research. 10 (1), 103-117 (2013).</li>
<li>Nguyen, M. T. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+human+embryonic+stem+cells+to+endothelial+progenitor+cells+on+laminins+in+defined+and+xeno-free+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Differentiation of human embryonic stem cells to endothelial progenitor cells on laminins in defined and xeno-free systems.</a> Stem Cell Reports. 7 (4), 802-816 (2016).</li>
<li>Ikuno, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+and+robust+differentiation+of+endothelial+cells+from+human+induced+pluripotent+stem+cells+via+lineage+control+with+VEGF+and+cyclic+AMP%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+One%22%5BJournal%5D)">Efficient and robust differentiation of endothelial cells from human induced pluripotent stem cells via lineage control with VEGF and cyclic AMP.</a> PLOS One. 12 (3), 0173271(2017).</li>
<li>Aoki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+differentiation+and+purification+of+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+endothelial+progenitor+cells+and+expansion+with+the+use+of+inhibitors+of+ROCK%2C+TGF-B%2C+and+GSK3B%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Efficient differentiation and purification of human induced pluripotent stem cell-derived endothelial progenitor cells and expansion with the use of inhibitors of ROCK, TGF-B, and GSK3B.</a> Heliyon. 6 (3), 03493(2020).</li>
<li>Lian, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+differentiation+of+human+pluripotent+stem+cells+to+endothelial+progenitors+via+small-molecule+activation+of+Wnt+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Efficient differentiation of human pluripotent stem cells to endothelial progenitors via small-molecule activation of Wnt signaling.</a> Stem Cell Reports. 3 (5), 804-816 (2014).</li>
<li>Orlova, V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation%2C+expansion+and+functional+analysis+of+endothelial+cells+and+pericytes+derived+from+human+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Generation, expansion and functional analysis of endothelial cells and pericytes derived from human pluripotent stem cells.</a> Nature Protocols. 9 (6), 1514-1531 (2014).</li>
<li>Kusuma, S., Gerecht, S. Derivation of endothelial cells and pericytes from human pluripotent stem cells. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKusuma%2C+S+%22Human+Embryonic+Stem+Cell+Protocols%22">Human Embryonic Stem Cell Protocols</a>. Turksen, K. , Humana Press. New York, NY. 213-222 (2014).</li>
<li>Bao, X., Lian, X., Palecek, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+endothelial+progenitor+differentiation+from+human+pluripotent+stem+cells+via+wnt+activation+under+defined+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Directed endothelial progenitor differentiation from human pluripotent stem cells via wnt activation under defined conditions.</a> Methods in Molecular Biology. 1481, 183-196 (2016).</li>
<li>Xu, M., He, J., Zhang, C., Xu, J., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+for+derivation+of+endothelial+lineages+from+human+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Strategies for derivation of endothelial lineages from human stem cells.</a> Stem Cell Research & Therapy. 10 (1), 200(2019).</li>
<li>Arora, S., Yim, E. K. F., Toh, Y. -C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+specification+of+pluripotent+stem+cell+derived+endothelial+cells+toward+arterial+and+venous+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Bioengineering+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Environmental specification of pluripotent stem cell derived endothelial cells toward arterial and venous subtypes.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 7, 143(2019).</li>
<li>Fang, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shear-induced+Notch-Cx37-p27+axis+arrests+endothelial+cell+cycle+to+enable+arterial+specification%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Shear-induced Notch-Cx37-p27 axis arrests endothelial cell cycle to enable arterial specification.</a> Nature Communications. 8 (1), 2149(2017).</li>
<li>Dalton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linking+the+cell+cycle+to+cell+fate+decisions%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Linking the cell cycle to cell fate decisions.</a> Trends in Cell Biology. 25 (10), 592-600 (2015).</li>
<li>Wolf, K., Hu, H., Isaji, T., Dardik, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+identity+of+arteries%2C+veins%2C+and+lymphatics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Molecular identity of arteries, veins, and lymphatics.</a> Journal of Vascular Surgery. 69 (1), 253-262 (2019).</li>
<li>Rocha, S. F., Adams, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+differentiation+and+specialization+of+vascular+beds%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Molecular differentiation and specialization of vascular beds.</a> Angiogenesis. 12 (2), 139-147 (2009).</li>
<li>Goldie, L. C., Lucitti, J. L., Dickinson, M. E., Hirschi, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+signaling+directing+the+formation+and+function+of+hemogenic+endothelium+during+murine+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Cell signaling directing the formation and function of hemogenic endothelium during murine embryogenesis.</a> Blood. 112 (8), 3194-3204 (2008).</li>
<li>Chanda, B., Ditadi, A., Iscove, N. N., Keller, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinoic+acid+signaling+is+essential+for+embryonic+hematopoietic+stem+cell+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Retinoic acid signaling is essential for embryonic hematopoietic stem cell development.</a> Cell. 155 (1), 215-227 (2013).</li>
<li>Marcelo, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemogenic+endothelial+cell+specification+requires+c-kit%2C+notch+signaling%2C+and+p27-mediated+cell-cycle+control%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Cell%22%5BJournal%5D)">Hemogenic endothelial cell specification requires c-kit, notch signaling, and p27-mediated cell-cycle control.</a> Developmental Cell. 27 (5), 504-515 (2013).</li>
<li>Dejana, E., Hirschi, K. K., Simons, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+endothelial+cell+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of endothelial cell plasticity.</a> Nature Communications. 8 (1), 14361(2017).</li>
<li>Ottersbach, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial-to-haematopoietic+transition%3A+an+update+on+the+process+of+making+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Society+Transactions%22%5BJournal%5D)">Endothelial-to-haematopoietic transition: an update on the process of making blood.</a> Biochemical Society Transactions. 47 (2), 591-601 (2019).</li>
<li>Pauklin, S., Vallier, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cell-cycle+state+of+stem+cells+determines+cell+fate+propensity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The cell-cycle state of stem cells determines cell fate propensity.</a> Cell. 155 (1), 135-147 (2013).</li>
<li>Qiu, J., Nordling, S., Vasavada, H. H., Butcher, E. C., Hirschi, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinoic+acid+promotes+endothelial+cell+cycle+early+g1+state+to+enable+human+hemogenic+endothelial+cell+specification%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Retinoic acid promotes endothelial cell cycle early g1 state to enable human hemogenic endothelial cell specification.</a> Cell Reports. 33 (9), 108465(2020).</li>
<li>Sriram, G., Tan, J. Y., Islam, I., Rufaihah, A. J., Cao, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+differentiation+of+human+embryonic+stem+cells+to+arterial+and+venous+endothelial+cells+under+feeder-+and+serum-free+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Efficient differentiation of human embryonic stem cells to arterial and venous endothelial cells under feeder- and serum-free conditions.</a> Stem Cell Research & Therapy. 6 (1), 261(2015).</li>
<li>Ohta, R., Sugimura, R., Niwa, A., Saito, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemogenic+endothelium+differentiation+from+human+pluripotent+stem+cells+in+a+feeder-+and+xeno-free+defined+condition%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Hemogenic endothelium differentiation from human pluripotent stem cells in a feeder- and xeno-free defined condition.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (148), e59823(2019).</li>
<li>Galat, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine-free+directed+differentiation+of+human+pluripotent+stem+cells+efficiently+produces+hemogenic+endothelium+with+lymphoid+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Cytokine-free directed differentiation of human pluripotent stem cells efficiently produces hemogenic endothelium with lymphoid potential.</a> Stem Cell Research & Therapy. 8 (1), 67(2017).</li>
<li>Sidney, L. E., Branch, M. J., Dunphy, S. E., Dua, H. S., Hopkinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concise+review%3A+Evidence+for+CD34+as+a+common+marker+for+diverse+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Concise review: Evidence for CD34 as a common marker for diverse progenitors.</a> Stem Cells. 32 (6), Dayton, Ohio. 1380-1389 (2014).</li>
</ol>

למחבר אין מה לחשוף.

להלן מפורטים השלבים להפקת תאי אנדותל המוגניים מתאי גזע עובריים אנושיים תוך כשבוע באמצעות מערכת תרבית דו-ממדית נטולת מורין וסרום (איור 1). פרוטוקול זה מרחיב על שיטה המתוארת על ידי Sriram et al. (2015) כדי להשיג ECsראשוני 38. האופי הראשוני ופוטנציאל המפרט של CD31+ CD45- ECs מודגם על-ידי התרבות התאים האלה על לוחות מצופים DLL4 והתבוננות בשינויים בביטוי גנים התואמים את מפרט העורקים (איור 3). בנוסף, העלייה בזהות העורקית קש...

תאי אנדותל (ECs) הם אוכלוסייה הטרוגנית של תאים המבצעים פונקציות מרובות בכל גוף האדם וברקמות מהונדסות. בנוסף לתמיכה וויסות סוגי תאים אחרים (כלומר, קרדיומיוציטים1, תאים אוסטאובלסטיים2), תפקודים אלה כוללים יצירת מחסום סלקטיבי בין הדם לרקמות וסיוע ביצירת רקמות3. הבחנה של ECs בוגרים במהלך התפתחות תקינה דורשת מסלולי איתות מגוונים. ECs קדמוניים נגזרים מאבות מזודרם, ולאחר מכן מוגדרים לעבר פנוטיפים עורקיים, ורידיים, נימיים ולימפתיים בוגרים4. בנוסף, תת-קבוצה קטנה של ECs בשק החלמון החוץ-עוברי ובאזור אבי העורקים-גונאד-מזונפרוס העוברי (AGM) מוגדרים גם הם כ-ECs המוגניים, אשר מעוררים תאי גזע ותאי אב המטופויאטיים (HSPCs) הנודדים לכבד העוברי ולמח העצם העוברי, שם הם נשארים לאחר הלידה ומייצרים את כל סוגי תאי הדם לאורך החיים4. המגוון המגוון של פנוטיפים של EC חיוני לכל פיתוח ותחזוקה של רקמות.
לפיכך, ECs ונגזרותיהם הם מרכיבים קריטיים במחקרים שמטרתם מידול, והבהרת מנגנונים של, התפתחות אנושית ו / או מחלה, כמו גם רפואה רגנרטיבית ויישומי הנדסת רקמות 5,6,7,8. עם זאת, המגבלה העיקרית עבור סוגים אלה של מחקרים היא חוסר הזמינות של ECs אנושיים ראשוניים בכמות הנדרשת. ההערכה היא כי מינימום של 3 x 108 ECs יידרש עבור רוב היישומים הטיפוליים6. כדי לפתור בעיה זו, הוצע השימוש בתאי גזע עובריים אנושיים (hESCs) ובתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם (hiPSCs) בשל פוטנציאל השושלת המגוון שלהם ויכולתם לייצר מספר גדול של צאצאים 6,9.
ואכן, התועלת של תאים שמקורם בתאי גזע עובריים או hiPSCs הוכחה במחקרים רבים שהתמקדו במידול מחלות ובבדיקת תרופות10,11,12. טכנולוגיית איבר על שבב (OOC) שימשה כדי לשחזר בצורה נאמנה יותר את הפיזיולוגיה של גוף האדם על ידי שילוב תאים ורקמות בפיגומים תלת-ממדיים. יתר על כן, חיבור של מספר OOCs בודדים (מה שמכונה גוף או אדם על שבב, BOC/HOC) יכול להתבצע באמצעות מיקרופלואידיקה כדי לאפשר הצלבה בין האיברים המעניינים13,14,15. רקמות תומכות, כגון כלי הדם, הן מרכיבים קריטיים של OOCs ו- BOC / HOCs; שילוב כלי הדם מאפשר הובלה של חומרים מזינים, חמצן וגורמים פרקריניים ברחבי הרקמות, ובכך מקדם את המיקרו-סביבה הספציפית לרקמותהנדרשת 3,12. לפיכך, שיטות לגזירת ECs אנושיים בוגרים, כגון ECs עורקיים, ורידיים, לימפתיים והמוגניים, הן חיוניות לקידום גישות הנדסת רקמות אלה.
פורסמו פרוטוקולים מרובים המפרטים שלבים לנגזרת של ECs קדמוניים או אבות אנושיים מ- hESCs או hiPSCs 5,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 . רבים מהפרוטוקולים הללו מסתמכים על היווצרות גוף עוברי (EB) או על תרבית משותפת של תאי גזע עובריים/iPSCs עם שכבת הזנה מורין של תאים סטרומליים. אסטרטגיות אלה נוטות להיות קשות וגוזלות זמן, עם תפוקות EC נמוכות ו / או זיהום של ECs אנושיים עם תאי מורין. פרוטוקולים המסתמכים אך ורק על תרבית דו-ממדית ללא שימוש בתאים סטרומליים דורשים לעתים קרובות אינדוקציות ארוכות, משתמשים בשילובים מורכבים של גורמי גדילה ו/או מעכבים לצורך אינדוקציה, יש תקופות התרחבות ממושכות לאחר הפרדת תאים, או שילוב של גורמים אלה. קידום הידע על מסלולי איתות וגורמים המעורבים בגזירת סוגי EC בוגרים in vivo מספק את הקרקע לפרוטוקול בידול חוץ גופי פשוט וחזק.
בעבר זוהו תפקידי מפתח עבור מסלולי איתות של Notch וחומצה רטינואית (RA) במפרט של ECs עורקיים והמוגני של מורין, בהתאמה, במהלך הפיתוח. מסלול האיתות Notch ממלא תפקידים מרובים במפרט ובתחזוקה של פנוטיפ EC עורקי. עבודה באמצעות מודל כלי הדם ברשתית מורין זיהתה מסלול שבו לחץ גזירה נוזלי משרה ציר איתות Notch-Cx37-p27, המקדם מעצר מחזור תאי G1, המאפשר מפרט EC עורקי27. ההשערה היא שמצבי מחזור התא ממלאים תפקיד בהחלטות על גורל התא על ידי מתן חלונות הזדמנויות ברורים שבהם התאים פתוחים לאותות מסוימים שיכולים לגרום לביטוי גנים ולשינויים פנוטיפיים28. מעצר G1 זה בתיווך Notch איפשר ביטוי של גנים המועשרים ב-ECs עורקיים, כולל אפריןB2, Cx40, DLL4, Notch1 ו-Notch 4 (שנסקרב-29,30). כמו כן, הוכח כי מפרט EC המוגני מקודם in vivo באמצעות איתות RA31,32. מחקרים נוספים זיהו כי, במורד הזרם של איתות RA, ביטוי של c-Kit ו- Notch מעלה את p27, המאפשר מפרט המוגני בשק החלמון מורין וב- AGM33. ניתן לזהות באופן מינימלי ECs המוגני של מורין על ידי ביטוי של סמני אנדותל (כלומר, CD31, KDR) והמטופויאטיים (כלומר, c-Kit, CD34)4. לבסוף, ECs המוגני עוברים מעבר אנדותל-להמטופוייטי (EHT) ליצירת HSPCs, אשר יכול להוליד את כל סוגי תאי הדם 4,34,35.
עבודות אחרונות בדקו אם אותה היררכיית איתות יכולה לקדם מפרט EC המוגני אנושי. לשם כך, פותח פרוטוקול תרבית דו-ממדית ללא סרום ומזין להפקת ECs המוגניים מ-hESCs, ו-ECs המוגניים אלה אופיינו ברמת תא יחיד כ-CD31+ KDR+ c-Kit+ CD34+ VE-Cadherin- CD45-. מחקר זה ניצל גם את הכתב מחוון מחזור תא יוביקוויטינציה פלואורסצנטי (FUCCI), המזהה מצבי מחזור תאים שונים, תוך שימוש ב- H9-hESCs המבטאים את מבנה כתב FUCCI (H9-FUCCI-hESC)36. במחקרים עם תאים אלה, הוכח כי RA מקדם מעצר מוקדם של מחזור תאי G1 ב-ECs, ומצב G1 מוקדם מאפשר אפיון המוגני במבחנה37. כאן, פרוטוקול מפורט להתמיינות של תאי אנדותל המוגני אנושיים אלה ובדיקות המאשרות את זהותם מסופקים. שיטה פשוטה זו מספקת אמצעי שימושי ליצירת תת-קבוצה מיוחדת זו של ECs למחקרים עתידיים של מנגנונים של התפתחות תאי דם אנושיים.

<table><tbody><tr><td>כלים 15 ס"מ</td><td>תרבית רקמות</td><td>קורנינג</td><td>430599</td> מטופלת</tr><tr><td>35 מ"מ תרבית</td> רקמות <td>קורנינג</td><td>430165</td><td>מטופלת</td></tr><tr><td>צלחות 6 בארות</td> תרבית <td>רקמות קורנינג</td><td>3516</td><td>מטופלת</td></tr><tr><td>מגיב אנטי מיקרוביאלי שם מותג: Normocin</td><td>Invitrogen</td><td>ant-nr-1</td><td></td></tr><tr><td>bFGF</td><td>R& מערכות D</td><td>233-FB-025</td><td>שימוש ב-50 ננוגרם/מ"ל</td></tr><tr><td>BMP4</td><td>BioLegend</td><td>595202</td><td>שימוש ב-25 ננוגרם/מ"ל</td></tr><tr><td>סרום בקר אלבומין (BSA)</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1600-1</td><td></td></tr><tr><td>Cell Dettachment Solution שם מותג: Accutase</td><td>Stemcell Technologies</td><td>7920</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl Sulfoxide (DMSO)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D2650-100mL</td><td></td></tr><tr><td>Dispase</td><td>Stemcell Technologies</td><td>7913</td><td></td></tr><tr><td>DLL4</td><td>R& מערכות D</td><td>1506-D4/CF</td><td>רקומביננטי אנושי; שימוש ב-10 &mu; גרם/מ"ל</td></tr><tr><td>DMEM:F12</td><td>Gibco</td><td>11320-033</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Phosphate Buffered Saline (PBS)</td><td>Gibco</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>מדיום גידול תאי אנדותל שם מותג: EGM-2 Endothelial Cell Growth Medium-2 BulletKit (EGM-2)</td><td>צינורות Lonza</td><td>CC-3162</td><td></td></tr><tr><td>FACS</td><td>קורנינג</td><td>352235</td><td>פוליסטירן תחתית עגולה עם מכסה</td></tr> <tr><td>מסנןסרום בקר עוברי (FBS)</td><td>Gemini Bio</td><td>100-106</td><td></td></tr><tr><td>פיברונקטין</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>33016015</td><td>לשימוש בגיל 4 &mu; g/cm2</td></tr><tr><td>GSK3i/CHIR99021</td><td>Stemgent</td><td>04-0004-02</td><td>מלאי 10 מ"מ; לשימוש ב-5 &mu; M</td></tr><tr><td>Hanks תמיסת מלח מאוזנת (HBSS)</td><td>Gibco</td><td>14175-095</td><td></td></tr><tr><td>חומצה הידרוכלורית (HCl)</td><td>Fisher Scientific</td><td>A144S-500</td><td></td></tr><tr><td>חלבון מטריקס&nbsp; שם מותג: Matrigel</td><td>Corning</td><td>356230</td><td>גורם גדילה מופחת. עיין בתעודת הניתוח עבור האצווה כדי לקבוע את ריכוז החלבון (מטריג'ל). ריכוז זה נדרש לחישוב נפח המטריג'ל המכיל 1 מ"ג חלבון.</td></tr><tr><td>מדיום מבוסס מתיל צלולוז שם מותג: MethoCult H4435 Enriched</td><td>Stemcell Technologies</td><td>4435</td><td></td></tr><tr><td>Pluripotent Stem Cell Differentiation Medium שם מותג: STEMdiff APEL 2</td><td>Stemcell Technologies</td><td>5270</td><td></td></tr><tr><td>תאי גזע פלוריפוטנטיים: H1, H9, H9-FUCCI</td><td>WiCell</td><td>WA09 (H9), WA01 (H1)</td><td>אנושי; H9-FUCCI התקבלו ממעבדתו של ד"ר לודוביק ואלייר במכון תאי הגזע של קיימברידג'</td></tr><tr><td>Protein-Free Hybridoma Medium (PFMH)</td> <td>Gibco</td><td>12040077</td><td></td></tr><tr><td>Retinoic Acid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2625-50mg</td><td>בשימוש ב-0.5 &mu; M</td></tr><tr><td>Reverse Transcription master mix שם מותג: iScript Reverse Transcription</td><td>Supermix BioRad</td><td>1708840</td><td></td></tr><tr><td>ערכת מיצוי RNA שם מותג: RNeasy Mini Kit</td><td>Qiagen</td><td>74104</td><td></td></tr><tr><td>נתרן הידרוקסיד (NaOH)</td><td>Fisher Scientific</td><td>SS255-1</td><td></td></tr><tr><td>מדיום גידול תאי גזע שם מותג: mTeSR1</td><td>Stemcell Technologies</td><td>85850</td><td></td></tr><tr><td>SYBR Green master mix שם מותג: iTaq אוניברסלי SYBR Green Master Mix</td><td>BioRad</td><td>1725121</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>Gibco</td><td>25299956</td><td>0.25%</td></tr> <tr><td>VEGF165 (VEGF-A)</td> <td>PeproTech</td><td>100-20</td><td>שימוש ב-50 ננוגרם/מ"ל</td></tr><tr><td>&אלפא;-CD31-FITC</td><td>BioLegend</td><td>303104</td><td>2 &mu; g/mL*</td></tr><tr><td>&alpha;-CD34-Pacific Blue</td><td>BioLegend</td><td>343512</td><td>2 &mu; g/mL*</td></tr><tr><td>&alpha;-CD45-APC/Cy7</td><td>BioLegend</td><td>304014</td><td>2 &mu; g/mL*</td></tr><tr><td>&alpha;-c-Kit-APC</td><td>BioLegend</td><td>313206</td><td>2 &mu; g/mL*</td></tr><tr><td>&alpha;-Flk-1-PE/Cy7</td><td>BioLegend</td><td>359911</td><td>2 &mu; g/mL*</td></tr><tr><td>&alpha;-VE-Cadherin-PE</td><td>BioLegend</td><td>348506</td><td>2 &mu; גרם/מ"ל*</td></tr><tr><td>* יש לבצע אופטימיזציה של צימודים פלואורסצנטיים של נוגדנים על סמך סדרן התאים בו נעשה שימוש. מוצגים כאן הריכוזים הסופיים ששימשו במחקר זה.</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

התמיינות מכוונת של תאי אנדותל המוגניים מתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים

Directed Differentiation of Hemogenic Endothelial Cells from Human Pluripotent Stem Cells

כלי הדם מופצים בכל מקום בתוך כל רקמות הגוף ומבצעים פונקציות מגוונות. לפיכך, נגזרת של תאי אנדותל וסקולריים בוגרים, המרפדים את לומן כלי הדם, מתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים היא חיונית למגוון יישומים של הנדסת רקמות והתחדשות. in vivo, תאי אנדותל קדמוניים נגזרים מהשושלת המזודרמלית ומוגדרים לתת-סוגים ספציפיים, כולל עורקים, ורידים, נימים, המוגניים ולימפטיים. תאי אנדותל המוגניים מעניינים במיוחד מכיוון שבמהלך ההתפתחות הם מעוררים תאי גזע ותאי אב המטופויאטיים, אשר לאחר מכן מייצרים את כל שושלות הדם לאורך החיים. לפיכך, יצירת מערכת ליצירת תאי אנדותל המוגניים במבחנה תספק הזדמנות לחקור את המעבר מהאנדותל-להמטופויטים, ועשויה להוביל לייצור ex vivo של מוצרי דם אנושיים ולהפחתת ההסתמכות על תורמים אנושיים. בעוד שקיימים מספר פרוטוקולים לגזירת תאי אנדותל אבניים וקדמוניים, לא תואר ייצור של תאי אנדותל המוגני מאופיינים היטב מתאי גזע אנושיים. כאן מוצגת שיטה לגזירת תאי אנדותל המוגני מתאי גזע עובריים אנושיים תוך כשבוע: פרוטוקול התמיינות עם תאי פס פרימיטיביים שנוצרו בתגובה למעכב GSK3β (CHIR99021), לאחר מכן אינדוקציה של שושלת מזודרם בתיווך bFGF, לאחר מכן התפתחות תאי אנדותל ראשוניים המקודמים על ידי BMP4 ו- VEGF-A, ולבסוף מפרט תאי אנדותל המוגני המושרה על ידי חומצה רטינואית. פרוטוקול זה מניב אוכלוסייה מוגדרת היטב של תאי אנדותל המוגני שניתן להשתמש בהם כדי להבין עוד יותר את הוויסות המולקולרי שלהם ואת המעבר האנדותל-להמטופוייטי, שיש לו פוטנציאל להיות מיושם על יישומים טיפוליים במורד הזרם.

שרטוט סכמטי המתאר את המפרט של ECs קדמוניים ו- ECs המוגניים מ- hESCs, ותמונה מייצגת של תאים 24 שעות לאחר הציפוי מוצגים באיור 1. לאחר המפרט, ECs ראשוניים ו- ECs המוגניים מטוהרים FACS בימים 5 ו- 8, בהתאמה. ECs פרימורדיאליים מוגדרים כ- CD31+ CD45- ו- ECs המוגניים מוגדרים כ- CD31+ KDR+ c-Kit+ CD34+ VE-Cadherin- CD45-. אסטרטגיית גידור ציטומטרית מייצגת עבור ECs ראשוניים וטיהור EC המוגני מוצגת <strong class="xfig...

מוצג כאן פרוטוקול פשוט להתמיינות מכוונת של תאי אנדותל המוגני מתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים תוך כשבוע.

Blood vessels are ubiquitously distributed within all tissues of the body and perform diverse functions. Thus, derivation of mature vascular endothelial ...

פרוטוקול זה מפרט שיטה ליצירת אוכלוסייה מאופיינת היטב של תאי אנדותל המוגניים אנושיים. ניתן להשתמש בתאים אלה כדי לחקור את הוויסות המולקולרי ואת המעבר האנדותל-להמטופויאטי. התחילו בהתרבות תאי גזע עובריים אנושיים במשך ארבעה ימים כדי להבדיל אותם לתאי אנדותל קדמוניים.ביום החמישי, שאפו את המדיום שמעל התאים. לאחר מכן שטפו בעדינות את התאים עם מיליליטר אחד של DMEM/F-12 לכל באר. הוסיפו מיליליטר אחד של מדיום התמיינות תאי אנדותל המוגני טרי לכל באר ודגרו על התאים למשך 24 שעות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו-חמצני.ביום השישי וביום השביעי, החליפו את המדיום שמעל התאים במיליליטר אחד של מדיום התמיינות של תאי אנדותל הומוגני טרי לכל באר, ודגרו על התאים למשך 24 שעות נוספות. ביום השמיני. לאחר ניתוק ושטיפת התאים, מחלקים אותם באופן שווה לצינורות מיקרוצנטריפוגה על קרח, שכל אחד מהם מכיל מינימום של 600 מיקרוליטר של תאים בצפיפות של 1 כפול 10 עד התאים החמישיים למיליליטר.מוסיפים נוגדנים לצינורות המכילים תאים לפי הצורך ודוגרים על קרח מוגן מפני אור במשך 30 דקות. גלולה את התאים על ידי צנטריפוגה ב 1000 פעמים G ו 4 מעלות צלזיוס במשך חמש דקות. הסר את supernatant ולהשהות את הכדורים ב 600 microliters של חיץ מיון קר כקרח.מסננים את הדגימות דרך מכסה מסנן הרשת של צינורות FACS של חמישה מיליליטר ומאחסנים את התאים על קרח המוגנים מפני אור למיון תאים מיידי. כדי לבודד תאי אנדותל המונוגניים על ידי FACS, יש לשער תחילה את אוכלוסיית התאים השליליים CD45. לאחר מכן, בתוך האוכלוסייה השלילית של CD45, יש לשער את התאים החיוביים ל-CD31.הבא באוכלוסייה החיובית ל-CD31, שער לאוכלוסיית התאים השליליים ל-VE-cadherin. ואז בתוך האוכלוסייה השלילית של VE-cadherin, שער לתאים חיוביים ל-c-Kit. מתוך האוכלוסייה החיובית ל-c-Kit, יש לשער את אוכלוסיית התאים החיוביים ל-CD34.ולבסוף מאוכלוסיית התאים החיוביים ל-CD34, לזהות ולאסוף את התאים החיוביים ל-KDR. לאחר זריעת תאי אנדותל המוגני במדיום מבוסס מתילצלולוז שפותח לצמיחה של תאי אב המטופויאטיים, מושבות יוצרות מושבה-אריתרואיד, ומושבות אריתרואיד יוצרות פיצוץ נספרות ביום השמיני. יחידה יוצרת מושבה-גרנולוציט-מקרופאג' ויחידה יוצרת מושבה-גרנולוציט, אריתרואיד, מקרופאג' ומגה-קריוציטים.מושבות אב המטופויאטיות רב-פוטנטיות נספרות ביום 14. לכל 1000 תאי אנדותל המוגני מצופה, נוצרות כ -20 יחידות יוצרות מושבה. תאים עם מורפולוגיה של תאי אנדותל נראים גם בתרביות.אלה הם תאי האנדותל ההמוגניים המולידים אבות המטופויאטיים מרובי תאים ברמה של תא יחיד. פרוטוקול זה הוא מערכת תרבית דו-ממדית ללא מזין מורין שיכולה לייצר תאי אנדותל המוגוגניים אנושיים תוך כשבוע.

directed-differentiation-hemogenic-endothelial-cells-from-human

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

הדור של לימפוציטים T מ המושרה גזע pluripotent (שב"ס) תאים נותן גישה חלופית של שימוש בתאי גזע עובריים על חיסוני מבוססי תאים T. השיטה מלמדת כי על ידי ניצול...

התמיינות מכוונת של המושרה בתאי גזע pluripotent כלפי לימפוציטים-T

סרטון זה מדגים תהליך רב-שלבי להבחנה של תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים אנושיים לתאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח. התאים המתמיינים המתקבלים מחקים באופן הדוק תאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח, המאופיינים בצמתים הדוקים, מה שהופך אותם לאידיאליים למחקר על מחלות מוח.

התמיינות תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם לתאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח

אנחנו, בהתבסס על ידע מביולוגיה התפתחותית ומחקר שפורסם, פיתחנו פרוטוקול אופטימלי ליצירת נוירונים דופמינרגיים A9 במוח התיכון הן מתאי גזע עובריים אנושיים והן מתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים אנושיים, שיהיו שימושיים למידול מחלות וטיפול בהחלפת תאים למחלת פרקינסון.

בימוי דופאמין Neuron בידול מתאי גזע pluripotent האדם

פרוטוקול זה מתאר אינדוקציה יעילה של אנדותל המוגני ואבות המטופויאטיים רב-פוטנציאליים מתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים באמצעות ביטוי מאולץ של גורמי שעתוק.

אינדוקציה ישירה של Hemogenic האנדותל ודם על ידי יתר של גורמי שעתוק בתאי גזע pluripotent האדם

כאן, אנו מציגים pluripotent האנושי פרוטוקולים התרבות תאי גזע (hPSC), נהגו להבדיל hPSCs לתוך CD34+ אבות hematopoietic. שיטה זו משתמשת ספציפיות שלב מניפולציה של חגיגת הקנוני איתות לציין תאים באופן בלעדי לתוכנית או סופית או פרימיטיבי hematopoietic.

ביים הבידול של אבות Hematopoietic פרימיטיבי, מהווים הסופית מתאי גזע Pluripotent אנושי

מתאי הגזע האנושיים החזקים ביותר. במצב מזינה-ונטול-כאלה שיטה זו יהיו בעלי יישומים נרחבים במידול מחלות והקרנה לתרכובות טיפוליות.

הומוגניים אנדותל בידול מתאי גזע האדם Pluriפוטנטי במזין-ו-Xeno-תנאי מוגדר חינם

פרוטוקול זה ממחיש את האינדוקציה של תוכנית המטוגניים בתוך הגוף האנושי פיברותקיעות על ידי ביטוי נאכף של הגורמים שעתוק GATA2, GFI1B ו-FOS כדי ליצור גזע המטפאות ובתאי קדמון.

הומוגניים מתיכנות מראש של האדם פיברותקיעות על ידי ביטוי שנאכף של גורמים שעתוק

מטרת מאמר זה היא לספק גישה סטנדרטית כדי לגרום בידול אב האדם בכבד מתאי גזע פלוריפוטנטים. הפיתוח של הליך זה עם ניסוחים מדיה מוכנים לשימוש מציעים למשתמש מערכת facile כדי ליצור תאי כבד אנושיים למחקר ותרגום ביו-רפואי.

מפרט פרוגניטור בכבד מתאי גזע פלוריפוטנטים באמצעות מערכת בידול מוגדרת

במאמר זה אנו מתארים פרוטוקול, שיטת תרבית תאי אנדותל מורחבת (EECM), המאפשרת התמיינות של תאי גזע פלוריפוטנטיים לתאים דמויי תאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח (BMEC). תאים אלה מראים ביטוי של מולקולות היצמדות תאי אנדותל ולכן הם מודל מחסום דם-מוח אנושי המתאים לחקר אינטראקציות תאי מערכת החיסון במבחנה.

התמיינות של תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם לתאים דמויי תאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח עם פנוטיפ חיסוני בוגר

פרוטוקול זה מציג את ההתמיינות של אוסטאוקלסטים אנושיים מתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים (iPSCs) ומתאר שיטות לאפיון אוסטאוקלסטים ומבשרי אוסטאוקלסט.

התמיינות ואפיון אוסטאוקלסטים מתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם

למדו פרוטוקול לגידול תאי אנדותל המוגניים מתאי גזע עובריים אנושיים. השיטה מאפשרת חקר המעבר האנדותלי-המטופואטי ומספקת מערכת נקייה מסרום ומתומכי גידול ליישומים בחקר ובהנדסת רקמות.

התמיינות מכוונת של תאי אנדותל המוגניים מתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים

גלה סרטונים נוספים