מודל כירורגי מותאם של איסכמיה בגפיים אחוריות ב- ApoE^-/- עכברים באמצעות חתך מיניאטורי

מה שהצגנו היום היא שיטה פשוטה ומשונה ויעילה בניתוח, כדי להקים איסכמיה בגפיים האחוריות בעכברים ApoE. שיטה זו יכולה להיות מיושמת בכל מתקן בעלי חיים. היתרון העיקרי של השיטה הסינובית הוא פולשניות נמוכה, באמצעות חתירה של פחות מחמישה מילימטרים.

בשיטה יש חוף למידה. לכן, אנו ממליצים לתרגל על מודלים מיקרוכירורגיים לפני העבודה על בעלי החיים, אשר הולכים להיכלל בניתוח הסופי. את השיטה ידגים קיחואן יאן, רופא לרפואה והסטודנט מהמעבדה שלי.

התחל בהכנת הציוד והכלים הנדרשים לניתוח. לאחר מתן ההרדמה לעכבר, להחיל משחה על העיניים כדי למנוע יובש. לאחר מכן מניחים את העכבר על כרית חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף הליבה בכ 37 מעלות צלזיוס.

בעזרת צמר גפן וקרם להסרת שיער, יש להסיר בזהירות את השיער מעור הגפיים האחוריות בצד ימין. הנח את העכבר בתנוחת העל-סמך על משטח החימום מתחת למיקרוסקופ ניתח. השתמש באלכוהול כדי לחטא את העור ולנגב עם הכותנה הרחק מהצד הצמחי של החתירה.

באמצעות מלקחיים מחודדים ומספריים כירורגיים לעשות חתך כשלושה עד ארבעה מילימטרים באמצע אזור מפשעה. הסר בזהירות את רקמת השומן התת עורית בעזרת מלקחיים מחודדים עדינים כדי לחשוף את חבילת הנוירווסקולריות של הירך הפרוקסימלית. באמצעות צמר גפן לח עם מלוחים, בזהירות להזיז את עורק הירך מן עצב הירך וריד הירך.

לאחר מכן באמצעות קצה של תפר 7.0, בזהירות לנקב את הממברנה של נדן הירך. לאחר מכן לעבור 7-0 תפרים נספגים דרך עורק הירך הפרוקסימלי ולעשות קשרים כפולים באמצעות מספריים מעיינות. לאחר מכן חוצים את עורק הירך בין שני הקשרים.

מעבירים את התפר 6-0 נספג דרך הקצה התחתון של החתירה וגוררים בעדינות את החתירה לאזור הצד הימני של הברך של הגפה האחורית כדי לחשוף את עורק הירך הדיסטלי. בזהירות להזיז את הרקמה התת עורית הצידה כדי לחשוף את החבילה הנוירווסקולרית. לנתח את עורק הירך מן הווריד הירך ועצב הירך, ולהשתמש כותנה כדי להגן על העצב.

לאחר מכן באמצעות קצה של תפר 7.0, לנקב את הממברנה של נדן הירך. מעבירים שני תפרים נספגים 7-0 דרך עורק הירך הדיסטלי ומשתמשים בקשרים כפולים באמצעות מספריים קפיציים כדי לעבור את עורק הירך בין שני קשרים. לאחר מכן, לתפור את ההסתה באמצעות התפרים 6-0 נספג.

הנח את העכבר על כרית חימום בכלוב נקי והמשיך לעקוב אחר הפרמטרים החיוניים שלו עד להתאוששות. לקבוע את ההצלחה של קשירה כפולה של עורק הירך או DLFA למחרת באמצעות MRI. לפני הליך DLFA, משקולות של עכברים נעו בין 29.6 ל 38.0 גרם.

שבעה ימים לאחר ניתוח DLFA, המשקולות נעו בין 26.5 ל 34.1 גרם, נמוך משמעותית מאשר משקולות לפני DLFA. האזורים הפרוקסימליים והדיסטליים של ה-FA הנכון לא הראו זלוף. תוצאות סולם טרלוב ירדו באופן משמעותי יום אחד לאחר הניתוח.

למרות שהם גדלו בהדרגה בימים שלאחר מכן, הם עדיין היו נמוכים מקו הבסיס עד היום השביעי. כפות הרגליים של הגפיים האחוריות האיסכמיות בשבעה עכברים לא הצליחו להימתח באופן טבעי בהשוואה לצד הנגדי. בנוסף, ארבעה מהעכברים הציגו שינוי צבע קל של כפות הרגליים בהשוואה לצד הנגדי.

כתמי H&E של שריר GM הימני חשפו myofibers שהפגינו נמק איסכמי לא סדיר, שבו תאי לווין מתרבים החליפו את myofibers נמק הופצו במסה או עם פיזור קבוע. Myofibers הפגינו חדירה דלקתית על ידי מקרופאגים רב-גרעיניים איבדו את המאפיינים המורפולוגיים הרגילים שלהם, עם מעט מאוד myofibers מחודש להיות נוכח. חלקים רוחביים של המאופיברים המחודשים האלה היו עגולים.

הציטופלסמה הייתה מוכתמת באדום וגרעין קטן אחד או גרעינים מרובים היו ממוקמים במרכז. עם זאת, סוג זה של דפוס דלקתי לא נצפה GM השמאלי. כתמי נוגדנים CD31 שבוצעו כדי לבחון את צפיפות המיקרו וסקולרי, הצביעו על כך שגפיים אחוריות איסכמיות הציגו צפיפות מיקרו-וסקולרית גבוהה משמעותית מאשר הצד הלא איסכמי. הדבר החשוב ביותר הוא ניתוח של עורק הירך.

המפעיל צריך להיות מנוסה בטכניקות מיקרוכירורגיות, כמו גם להכיר אנטומיה אחורית של העכבר. באופן עקרוני, שיטה זו יכולה לשמש גם כדי ללמוד פציעה איסכמיה-reperfusion ברגל. בזאת, ניתן לאסם את העורק עם מהדק כלי רך לפני מתן אפשרות לשיפוץ.