יישום של אולטראסאונד ו גל גזה אלסטוגרפיה הדמיה במודל חולדה של NAFLD / NASH

השימוש באלסטוגרפיה של גל אולטרסאונד וגיזה מאפשר לחוקרים למדוד את השינויים בשומן הכבד ובפיברוזיס משתמעים במודלים של steatohepatitis nonalcoholic. מודל הדמיה זה הוא טכניקה לא פולשנית, בעלת תפוקה גבוהה וניתנת לתרגום קליני, וניתן להשתמש בה כדי להעריך את שלב המחלה ואת היעילות במודלים של סטטוהפטיטיס שאינם אלכוהוליים במהלך גילוי תרופות. בתור התחלה, מניחים חולדות ויסטאר האן זכרות בנות שישה עד שבעה שבועות במשקל של 150 עד 175 גרם בזוגות בכלובים מאווררים בנפרד עם מצעים מתאימים בכ-22 מעלות צלזיוס ו-40 עד 70% לחות יחסית עם מחזור אור/חושך של 12 עד 12 שעות.

לספק 20 חולדות עם כולין לקוי, דיאטה עתירת שומן עם 1%כולסטרול, ועוד 20 חולדות עם אוכל מכרסמים מעבדה סטנדרטי. כדי להתקין את מכשיר ההדמיה, הניחו משטח מחומם באזור ההדמיה כדי לשמור על חמימות החיה במהלך ההדמיה, ולתקן את חרוט האף ההרדמה להעברת ההרדמה השאיפה. השתמש מחזיק בדיקה אולטרסאונד כדי להעביר את הבדיקה אולטרסאונד למיקום הרצוי כדי למנוע את הבדיקה ממנוחה על החיה.

לאחר החולדה הוא מרדים לחלוטין, להעביר אותו מתא האינדוקציה לשמיכה מים חמים חמים במחזור. השתמש קרם depilation כימי כדי להסיר את השיער מכלוב הצלעות לאגן בצד ימין של החולדה. הנח את החולדה בעמדת ההחלמה לרוחב השמאלי והדביק את כפות הרגליים העליונות מעל הראש על פלטפורמת הדמיה חמה.

הקש על מקש המטופל בלוח הבקרה של המכשיר וזיהה את הנושא בהתאם לעיצוב המחקר. החל כמות קטנה של ג'ל אולטרסאונד מחומם על אזור העור depilated של החולדה. הזז את בדיקת האולטרסאונד כדי לגעת באזור מכוסה ג'ל.

לאחר התמונה במצב B חי של האיברים הפנימיים מופיע על המסך, להעביר את הבדיקה אולטרסאונד לאזור מעט מעל הירך, רק במקביל לחוליות המותני. השתמש בתצוגה במצב B כדי לאתר את הכליה הנכונה על ידי זיהוי עורק הכליות הגדול והפרדת המדולה של קליפת המוח. התבונן בחלק מהכבד במישור אחד של התמונה והבטח כי בועות אוויר או צללים אינם נוכחים בתמונה.

להתאים את המוקד ולוודא כי קליפת המוח הכליתית ופרנצ'ימה הכבד נמצאים באותו מישור כדי לקבל תמונה ברורה. ודא כי החיה היא בין נשימות בעת הקפאת המסך כדי למנוע לכידת תמונות מטושטשות. בחר את יחס מצב B כדי למדוד את הבהירות היחסית של הרקמה מאזור העניין שנבחר.

צור מעגל של שני מילימטר והצב אותו על אזור העניין בתמונה של הכבד, הממוקם מימין לכליה. מניחים עיגול חדש על התמונה של קליפת הכליה, תוך שמירה על עומק העיגולים על הכבד ועל קליפת המוח של הכליות זהה. לחץ על לחצן הבחירה בלוח הבקרה כדי להציג את אינדקס כליות hepato כיחס מצב B ולחזור על המדידה שלוש פעמים בעומקים ומישורים שונים של הרקמה, ולאחר מכן לחשב את הממוצע.

הזז את הבדיקה לרוחב באזור תת-צילומי הימני כדי לאתר את הכבד באמצעות מצב B. אתר אזור ברור של הכבד שהוא בעיקר parenchyma וללא כלי דם גדולים, כגון וריד הפורטל עורק הכבד, ולאחר מכן לחץ על כפתור SWE בלוח הבקרה כדי ליצור מפת גמישות גיסת של הרקמה. התאם את הגודל והמיקום של תיבת SWE מתחת לקפסולת הכבד באזור נקי צללים.

כאשר התיבה מלאה ויציבה, לחץ על כפתור ההקפאה בלוח הבקרה בזמן שהעכברוש נמצא בין נשימות. הקישו על ה-Q-Box בתצוגת המגע של המכשיר כדי לחשב את האלסטיות מאזור העניין במפת גמישות הגל הגועה. עיגול ותיבת נתונים יופיעו.

מקם את העיגול באזור נטול הצללים עם צביעה אחידה, תוך הימנעות מאזורים של נוקשות. חזור על ההליך שלוש פעמים על ידי הזזת הגשוש למעלה ולמטה או לצדדים על הבטן כדי לאסוף תמונות ממופות SWE מאזורים שונים של הכבד. בסיום, להסיר את הסרט מן כפות ולנגב את הג'ל עודף.

מניחים את החולדה בחזרה בכלוב חם ויבש ומאפשרים לה להתאושש באופן מלא. בחר את כל הסריקות הנדרשות לניתוח נתונים על-ידי סימון התיבה לצד שם המטופל באמצעות כדור המסלול ולחצן בחר. לאחר ייצוא הקבצים, פתח קובץ JPG בודד של כל סריקה ובחן את הנתונים בצד ימין של התמונה.

העתק את כל הנתונים לגיליון אלקטרוני או לתוכנת ניהול מסד נתונים אחרת ובצע את הניתוחים הסטטיסטיים הרצויים. התמונות המייצגות של מדדי כליות הפטו מקבוצות התזונה עתירות השומן של כולין ומחסור בכולן מראות כי בהירות הכבד בקליפת הכליות הייתה כמעט זהה, ומדד כליות ההפטו היה פחות מאחד בקבוצת הביקורת. בקבוצת הדיאטה עתירת השומן, בהירות הכבד עלתה, ומדד כליות ההפטו עלה ל-1.91 בשישה שבועות ו-1.79 נקודות זמן של 12 שבועות.

ערכי מדד כליות ההפטו של קבוצת הדיאטה עתירת השומן עלו במהירות במהלך שלושת עד ששת השבועות הראשונים, לפני שהגיעו לרמה. חלקי כבד מוכתמים בצבע O אדום שמן הראו אזור מוכתם מוגבר באופן משמעותי בקבוצת הדיאטה עתירת השומן בהשוואה לקבוצת הביקורת. נמצא גם מתאם בין האזור המוכתם באחוזים לבין מדד כליות ההפטו.

נוקשות הרקמות גדלה בהדרגה בקבוצת הדיאטה עתירת השומן במשך 12 שבועות, והגיעה ל -23.1 קילופסקלים עקב פיברוזיס. דגימות הכבד היו מוכתמות באדום picrosirius כדי למקם קולגן כאינדיקטור לפיברוזיס. עלייה משמעותית של אחוזי השטח המוכתם נצפתה בקבוצת הדיאטה עתירת השומן בהשוואה לקבוצת הביקורת.

ומתאם חזק נמצא גם בין האזור המוכתם באחוזים לבין מספרי גל הגיסה E מודולוס. חשוב למקם את המתמר ואת עיגולי מדידה או תיבות כראוי. הימנעות מממצאים בתמונות תאפשר מדידות חוזרות ועקביות.

לאחר ההליך, מדידות ex vivo של טריגליצרידים בכבד וביטוי גנים קולגן יכול להתבצע גם על רקמת נמק כדי לאשר את התוצאות שנראו בהדמיה.