-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
מיקרוסקופיה ישירה לשחזור אופטי סטוכאסטי של שלשלות חוץ-תאיות בשלושה ממדים
מיקרוסקופיה ישירה לשחזור אופטי סטוכאסטי של שלשלות חוץ-תאיות בשלושה ממדים
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Direct Stochastic Optical Reconstruction Microscopy of Extracellular Vesicles in Three Dimensions

מיקרוסקופיה ישירה לשחזור אופטי סטוכאסטי של שלשלות חוץ-תאיות בשלושה ממדים

Full Text
4,474 Views
09:36 min
August 26, 2021

DOI: 10.3791/62845-v

Meredith G. Chambers1, Ryan P. McNamara1, Dirk P. Dittmer1

1Department of Microbiology and Immunology, Lineberger Comprehensive Cancer Center,The University of North Carolina at Chapel Hill School of Medicine

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study employs direct stochastic optical reconstruction microscopy (dSTORM) to visualize extracellular vesicles (EVs) and exosomes at a nanometer scale, surpassing the diffraction limits of traditional light microscopy. The protocol allows for precise imaging of EVs in three-dimensional space, facilitating the study of their biochemical nature and roles in disease, including viral infections such as SARS-CoV-2.

Key Study Components

Research Area

  • Microscopy and imaging techniques
  • Extracellular vesicles (EVs) and exosomes
  • Viral biology and disease progression

Background

  • Importance of EVs in cellular communication and disease biomarker identification
  • Challenges in visualizing small particles due to diffraction limits
  • Application of super-resolution techniques in biological imaging

Methods Used

  • Direct stochastic optical reconstruction microscopy (dSTORM)
  • Extracellular vesicles (EVs) sourced from affinity purification methods
  • Simulation of imaging conditions for enhanced resolution

Main Results

  • Successful visualization of individual EVs at nanometer resolution
  • Insights into the structural characteristics of EVs and their potential roles in viral infections
  • Demonstration of methodology as a reliable tool for characterizing biological samples

Conclusions

  • dSTORM proves to be an effective technique for studying EVs, enhancing our understanding of their role in health and disease
  • This methodology holds the potential for advancing biomarker discovery and understanding disease mechanisms

Frequently Asked Questions

What is dSTORM?
Direct stochastic optical reconstruction microscopy (dSTORM) is a super-resolution microscopy technique that allows visualization of biological samples at nanometer resolution.
How does dSTORM improve visualization compared to traditional microscopy?
dSTORM bypasses the diffraction limit of light, enabling the imaging of smaller structures with higher precision.
What biological entities can be studied using dSTORM?
dSTORM can be used to visualize extracellular vesicles, viruses, and other small cellular structures.
Why is understanding EVs important?
Understanding EVs is crucial for exploring their roles in intercellular communication and as potential biomarkers in diseases.
What are the key steps in preparing samples for dSTORM?
Key steps include adhering EVs to a surface, fixing them with paraformaldehyde, and preparing an appropriate imaging buffer.
Can dSTORM be used to study viral particles?
Yes, dSTORM can directly visualize viral particles such as SARS-CoV-2, providing insights into their structure and function.
What future applications does this methodology have?
This methodology has potential applications in fundamental biology research, diagnostics, and therapeutic developments targeting EVs.

מיקרוסקופיה של שחזור אופטי סטוכסטי ישיר (dSTORM) משמשת לעקיפת מגבלת עקיפה אופיינית של מיקרוסקופיית אור ולהציג אקסוזומים בסולם הננומטר. זה יכול להיות מועסק בשניים ושלושה ממדים כדי לאפיין אקסוזומים.

פרוטוקול זה משתמש במיקרוסקופיה ברזולוציה סופר, במיוחד מיקרוסקופיית שחזור אופטי סטוכסטי ישיר, הידועה גם בשם dSTORM, כדי לעקוף את מגבלת עקיפה ולהמחיש את השטחים EVs בדיוק ננומטר בשלושה ממדים. אחד היתרונות הבולטים של dSTORM הוא יכולתה לדמיין חלקיקים ישירות מתחת לרמת עקיפה של אור מבלי לפגוע בצעדים המשנים את האופי הביוכימי של ה- EV. וירוסים רבים מבחינה אבולוציונית מועסקים איתות EV, ולכן, dSTORM יכול לשמש כדי לאפיין את EVs עבור סמנים ביולוגיים של מחלות והתקדמות, כמו גם לדמיין חלקיקי וירוס בודדים, כגון SARS-CoV2. התחל על ידי הצבת שלפוחיות מטוהרות, חוץ-תאיות, או כלי עבודה אלקטרוניים, על תחתית זכוכית, מפולת מיקרו, שמונה צלחות באר בנפח כולל של 200 מיקרוליטרים, ולאפשר להם לדבוק על פני השטח בן לילה בארבע מעלות צלזיוס.

מבלי להסיר את הפתרון הקיים מלוח שמונה הבארות, תקן את ה- EVs על הלוחות על ידי הוספת 200 מיקרוליטרים של 4% paraformaldehyde ב- 1X PBS לפתרון המכיל EV בכל באר ואפשר ללוחות לדגור במשך 30 דקות בטמפרטורת החדר. הסר בזהירות paraformaldehyde ופתרון עודף עם micropipette לא להפריע את EVs. לשטוף את EV עם 1X PBS כדי להסיר paraformaldehyde עודף.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

ביולוגיה גיליון 174

Related Videos

חלקיק יחיד מיקרוסקופית אלקטרונים שיקום במתחם Exosome שימוש בשיטה אקראיים הטיה חרוטי

12:10

חלקיק יחיד מיקרוסקופית אלקטרונים שיקום במתחם Exosome שימוש בשיטה אקראיים הטיה חרוטי

Related Videos

24K Views

בדיקת ספיגת שלפוחית חוץ-תאית: שיטה לדמיין ולכמת ספיגה תאית של שלפוחיות חוץ-תאיות באמצעות טכניקת הדמיה פלואורסצנטית תלת-ממדית

05:25

בדיקת ספיגת שלפוחית חוץ-תאית: שיטה לדמיין ולכמת ספיגה תאית של שלפוחיות חוץ-תאיות באמצעות טכניקת הדמיה פלואורסצנטית תלת-ממדית

Related Videos

1.7K Views

ויזואליזציה של Endosome Dynamics בחי מסוף עצב עם דימות פלואורסצנטי ארבעה ממדים

10:51

ויזואליזציה של Endosome Dynamics בחי מסוף עצב עם דימות פלואורסצנטי ארבעה ממדים

Related Videos

9.4K Views

3D Orbital מעקב במיקרוסקופ שני פוטונים השתנה: בקשה למעקב של תאיים שלפוחית

11:28

3D Orbital מעקב במיקרוסקופ שני פוטונים השתנה: בקשה למעקב של תאיים שלפוחית

Related Videos

10.7K Views

הדמיה חוטים ביניים Microtubules עם מיקרוסקופ 2-ממדי ישירה שחזור אופטי סטוכסטי

14:23

הדמיה חוטים ביניים Microtubules עם מיקרוסקופ 2-ממדי ישירה שחזור אופטי סטוכסטי

Related Videos

11.4K Views

הדמיה תלת ממדית של תאים חיידקיים לייצוגים סלולריים מדויקים ולוקליזציה של חלבון מדויק

06:33

הדמיה תלת ממדית של תאים חיידקיים לייצוגים סלולריים מדויקים ולוקליזציה של חלבון מדויק

Related Videos

10.7K Views

כולל תפוקה גבוהה של השתקפות פנימית ומיקרוסקופ שחזור אופטי סטוכסטי אופטיים באמצעות שבב פוטוני

14:09

כולל תפוקה גבוהה של השתקפות פנימית ומיקרוסקופ שחזור אופטי סטוכסטי אופטיים באמצעות שבב פוטוני

Related Videos

7.4K Views

ספיגת ארסיה חוץ-תאית באמצעות ניתוח הדמיית מיקרוסקופ קונפוצלי

08:32

ספיגת ארסיה חוץ-תאית באמצעות ניתוח הדמיית מיקרוסקופ קונפוצלי

Related Videos

9.1K Views

אנקפסולציה מהירה של שלד ציטוסקי משוחזר בתוך בועיות יונילאמלריות ענקיות

07:48

אנקפסולציה מהירה של שלד ציטוסקי משוחזר בתוך בועיות יונילאמלריות ענקיות

Related Videos

4.9K Views

הדמיה קונפוקלית וסופר-רזולוציה של סחר תוך-תאי מקוטב והפרשת חלבוני ממברנת מרתף במהלך Drosophila Oogenesis

10:41

הדמיה קונפוקלית וסופר-רזולוציה של סחר תוך-תאי מקוטב והפרשת חלבוני ממברנת מרתף במהלך Drosophila Oogenesis

Related Videos

2.6K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code