RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/62845-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study employs direct stochastic optical reconstruction microscopy (dSTORM) to visualize extracellular vesicles (EVs) and exosomes at a nanometer scale, surpassing the diffraction limits of traditional light microscopy. The protocol allows for precise imaging of EVs in three-dimensional space, facilitating the study of their biochemical nature and roles in disease, including viral infections such as SARS-CoV-2.
מיקרוסקופיה של שחזור אופטי סטוכסטי ישיר (dSTORM) משמשת לעקיפת מגבלת עקיפה אופיינית של מיקרוסקופיית אור ולהציג אקסוזומים בסולם הננומטר. זה יכול להיות מועסק בשניים ושלושה ממדים כדי לאפיין אקסוזומים.
פרוטוקול זה משתמש במיקרוסקופיה ברזולוציה סופר, במיוחד מיקרוסקופיית שחזור אופטי סטוכסטי ישיר, הידועה גם בשם dSTORM, כדי לעקוף את מגבלת עקיפה ולהמחיש את השטחים EVs בדיוק ננומטר בשלושה ממדים. אחד היתרונות הבולטים של dSTORM הוא יכולתה לדמיין חלקיקים ישירות מתחת לרמת עקיפה של אור מבלי לפגוע בצעדים המשנים את האופי הביוכימי של ה- EV. וירוסים רבים מבחינה אבולוציונית מועסקים איתות EV, ולכן, dSTORM יכול לשמש כדי לאפיין את EVs עבור סמנים ביולוגיים של מחלות והתקדמות, כמו גם לדמיין חלקיקי וירוס בודדים, כגון SARS-CoV2. התחל על ידי הצבת שלפוחיות מטוהרות, חוץ-תאיות, או כלי עבודה אלקטרוניים, על תחתית זכוכית, מפולת מיקרו, שמונה צלחות באר בנפח כולל של 200 מיקרוליטרים, ולאפשר להם לדבוק על פני השטח בן לילה בארבע מעלות צלזיוס.
מבלי להסיר את הפתרון הקיים מלוח שמונה הבארות, תקן את ה- EVs על הלוחות על ידי הוספת 200 מיקרוליטרים של 4% paraformaldehyde ב- 1X PBS לפתרון המכיל EV בכל באר ואפשר ללוחות לדגור במשך 30 דקות בטמפרטורת החדר. הסר בזהירות paraformaldehyde ופתרון עודף עם micropipette לא להפריע את EVs. לשטוף את EV עם 1X PBS כדי להסיר paraformaldehyde עודף.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
12:10
Related Videos
24K Views
05:25
Related Videos
1.7K Views
10:51
Related Videos
9.4K Views
11:28
Related Videos
10.7K Views
14:23
Related Videos
11.4K Views
06:33
Related Videos
10.7K Views
14:09
Related Videos
7.4K Views
08:32
Related Videos
9.1K Views
07:48
Related Videos
4.9K Views
10:41
Related Videos
2.6K Views