Name: ניטור מחזור אסטרוס מכרסמים תוך שימוש בשטיפה נרתיקית: אין דבר כזה מחזור רגיל (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-30T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 5 s
Description: למדו שיטת שטיפה נרתיקית לניטור מחזור אסטרוס בנקבות חולדות. טכניקה זו מאפשרת אפיון תאים מיקרוסקופי ומספקת כלים לתכנון ניסויים בביולוגיה ובתרופות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נערך באמצעות שיתוף פעולה במימון NIH בין המרכז לחקר פגיעות מוחיות באוניברסיטת קליפורניה בלוס אנג'לס (BIRC).

למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.

צעדים מרכזיים ושיקולים חשובים שלבים קריטיים מסוימים בפרוטוקול המסופק דורשים דגש, במיוחד באוסף תאי הנרתיק. במהלך מיצוי נוזל הנרתיק, הבטחת הזווית והעומק הנכונים של החדרת המזרק היא המפתח להפקת תוצאות משביעות רצון ובסופו של דבר למניעת גירוי, פציעה או גירוי צוואר הרחם לבעל החיים. הגירוי של צוואר הרחם יכול להיות מקור אחד של אינדוקציה pseudopregnancy, המצוין על ידי 12-14 ימים של כתם נרתיקי של לויקוציטים בלבד11. במהלך שלב הערכת המיקרוסקופ, חיוני להתמקד במישור החזותי המציג את תאי הנרתיק...

תרומות חדשות מחזור האסטרוס של מכרסמים זוהה כאינדיקטור חיוני לבריאות. עם זאת, הטיות לא מודעות של חוקרים ופרשנויות לא מדויקות לגבי הגוף הנשי מעכבות את הקהילה המדעית. עצם האטימולוגיה של המילה "estrous" מרמזת על תחושה של נחיתות ושליליות. אוריפידס השתמש במונח כדי לתאר "טירוף" או טירוף, הומרוס כדי לתאר פאניקה, ואפלטון כדי לתאר דחף לא רציונלי. מחקר זה מדגיש כיצד נקודות מבט ראשוניות אלה משפיעות על הקהילה המדעית הנוכחית ומתייחס לחששות אלה באמצעות פרדיגמת פסיפס חדשנית – שילוב מעודכן של שיטות שנחקרו בעבר, שהורחבו בהיקפן לגישה מקיפה יותר.
המחקר והשימוש בטכניקה זו נחוצים, ראשית, מכיוון שאין טכניקת ניטור סטנדרטית ומקיפה, ושיטות פרשנות נתונים יכולות להיות לא ברורות. שנית, למרות שמאפייני מחזור האסטרוס תלויים בכך שחולדות בודדות נחקרות, הם לעתים קרובות אוניברסליים. שלישית, בעוד שמחזורים הורמונליים הם תהליכים שגרתיים ומועילים, הם מוקפים בסטיגמה מסוכנת הנחקרת בפרק 'תרגום לבני אדם'. מחקר זה נועד לטפל בשלוש הסוגיות הללו בשלוש דרכים – (A) על ידי תיאור טכניקת ניטור מחזורית אסטרוס מעמיקה והבהרת האופן שבו ניתן לפרש את התוצאות, (B) על ידי התוויית שיטות השומרות על השלמות והאינדיבידואליות של כל מחזור, ו-(C) על ידי הפניית תשומת הלב לתפיסות מוטעות המנציחות פרקטיקות לא מבוססות.
מחקר זה ייחודי גם בהתמקדותו בחולדות מתבגרות, תקופה המאופיינת בשינויים התפתחותיים מכריעים השופכים אור על ביטויים התנהגותיים, אנטומיים ופיזיולוגיים שונים בבגרות1. בניית תכנון ניסיוני סטנדרטי לניטור מחזורים הורמונליים באוכלוסייה שאינה נחקרת כראוי תוך פירוק הטיות נפוצות תאפשר פיתוח של מתאמים הורמונליים אמינים ותקפים 2,3,4 וקביעת שיבושים במחזור התלויים במצב 5,6,6,7,8,9,10 . בסופו של דבר, חידושים אלה משמשים להרחבת קריטריונים לאבחון, טיפולים והתערבויות של חששות בריאותיים שונים.
הגדרות ושימושים בסיסיים מחזור האסטרוס הוא אוסף של תהליכים פיזיולוגיים דינמיים המתרחשים בתגובה לשלושת הורמוני המין הסטרואידים הנשיים המתנדנדים: אסטרדיול, הורמון לוטיניזציה (LH) ופרוגסטרון (איור 1A,B). אינטראקציות בין מערכת העצבים האנדוקרינית והמרכזית מווסתות את המחזור, שנמשך לרוב 4-5 ימים וחוזר על עצמו מתחילת ההבשלה המינית ועד לסנסנציה ו/או הפסקה של הרבייה. הוא מחולק לקטגוריות נפרדות המבוססות על רמות ההורמונים – לרוב ל-4 השלבים של diestrus (DIE), proestrus (PRO), estrus (EST) ו-metestrus (MET), המתקדמים באופן מעגלי. מספר החטיבות יכול לנוע בין 3 שלבים11 ל -13 שלבים12, בהתאם לאופי המחקר13. המספר הנמוך יותר של החטיבות אינו כולל לעתים קרובות את MET כשלב ומסווג אותו כתקופת מעבר קצרה למשך זמן. המספר הגבוה יותר כולל בדרך כלל תתי-סעיפים המאפשרים בחינה מדוקדקת יותר של תופעות כגון התפתחות הגידול או פסאודו-אופרגנטיה ספונטנית, המצב הפיזיולוגי של ההריון ללא השתלה עוברית 12,14,15.
במחקר זה זוהו השלבים באמצעות מרכיבים של תעלת הנרתיק, שנקראו 3 הדטרמיננטים המסווגים - סוג(ים) של תאים, סידור תאים וכמות תאים (איור 2A-D). אמנם מצבו של נוזל הנרתיק לא היה במעקב במחקר זה, אך מומלץ לכלול אותו כמרכיב סיווג רביעי. מידע נוסף על בדיקת נוזל הנרתיק ניתן למצוא ברשימת ההפניות16. ניתן לבחון את מרכיבי הסיווג על ידי חילוץ תאים באמצעות שטיפה נרתיקית, הטכניקה העיקרית המומלצת בניטור מחזורי אסטרוס מודרני. בעוד שהתהליכים הפיזיולוגיים המעמיקים בתוך כל שלב נמצאים מחוץ לתחום מחקר זה, מידע נוסף ניתן למצוא בספרות17.
השימוש והמשך הפיתוח של טכניקת ניטור מחזור אסטרוס זו מושרש בקשרים בין הורמוני סטרואידים מיניים לבין תפקוד מערכות הגוף כגון מערכת הלב וכלי הדם18, מערכת אנדוקרינית8 ומערכת העצבים המרכזית 19,20,21. יחד עם זאת, ייתכן שלא תמיד יהיה צורך בניטור מחזורי אסטרוס כאשר נקבות מכרסמים מעורבות 22,23,24,25. במקום זאת, חשוב תחילה לשקול אם דווחו הבדלים בין המינים בתחום הספציפי של המחקר, אותם ניתן לבחון עוד יותר בסקירות שפורסמו22,23. אף על פי שניטור מחזורי אסטרוס הוא חיוני במגוון רחב של מחקרים, אין לראות בו מכשול להכללת מכרסמים נקבות בניסויים. בעוד שטכניקה זו עשויה להיראות מורכבת וגוזלת זמן רב, ההליך עצמו יכול להימשך פחות מ -15 דקות, תלוי בחוקר, והוא חסכוני. באופן כללי, הכללתם של מכרסמים נקבות במחקרים מדעיים היא יתרון להבנת מערכות הגוף, מצבים ופתולוגיות שונות ובריאות כללית, שכן התפתחויות אלה התבססו בעיקר על תבנית הגוף הגברי.
פרמטרים אוניברסליים ושונות טבעית במכרסם קביעת טווחים להיבטים הנתפסים כ"טיפוסיים" נחוצה כדי להגדיר דפוסי מחזור סטנדרטיים, לקבוע פרמטרים למטרות השוואתיות ואנליטיות, ולזהות חריגות וחריגות. יחד עם זאת, חשוב גם להכיר בכך שהמחזור של כל חולדה הוא ייחודי, וצפויות סטיות המבוססות על זן בעלי חיים, תהליכים פיזיולוגיים ותנאי סביבה. למעשה, אחד ההיבטים ה"נורמליים" ביותר של מחזור האסטרוס הוא השתנות. זה נראה באורך המחזור הכולל, עם טווח של 3-38 ימים26,27; גיל ההתבגרות המינית שיכול לנוע בין 32-34 ימים למספר שבועות 28,29,30; מה שנחשב אציקלי11, והדפוסים הדטרמיננטיים המסווגים 11,13. באופן כללי, אין תבנית אוניברסלית למחזור האסטרוס, ותרגום זה הן לקהילה המדעית והן לציבור הרחב הוא חלק חשוב בתהליך הניסויי.
נקודות זמן ניסיוניות וגיל התפתחותי הכרה בעקרון זה של השתנות מסייעת בבניית תכנון ניסיוני אמין ותקף. לדוגמה, תחילתו של ניטור מחזורי אסטרוס מסתמכת על ההתפתחות האנטומית והפיזיולוגית של החולדות, המשתנה בהתאם לגורמים סביבתיים ופיזיולוגיים. הניטור לא יכול להתחיל עד להתפתחות פתח הנרתיק (VO), שהוא פתח הנרתיק החיצוני המוקף בפות שמוביל לחלק הפנימי של תעלת הנרתיק (איור 3A-D). בעוד שה-VO מתפתח לעתים קרובות באופן מלא בין הגילאים 32 ל-34 ימים, הוא נשאר אינדיבידואלי לכל נושא, והרבה על התהליך עדיין לא ידוע. פתח זה שימש לזיהוי הופעת ההבשלה המינית, אשר נקשרה לעלייה של אסטרדיול31, ההבשלה של ציר ההיפותלמוס-יותרת המוח-השחלות32, והביוץ הראשון בחולדות 17,33,34,35. עם זאת, פרסומים אחרונים מצאו כי הוא רק סמן עקיף של התפתחות הרבייה, שכן הוא יכול להיות מנותק מהתרחשויות הורמונליות והתפתחותיות בסביבות שליליות31 ועשוי לייצג שינויים ברמות האסטרדיול ולא התבגרות מינית33. לכן, מומלץ לא להסתמך אך ורק על VO כדי לקבוע את הגיל ההתפתחותי וכמזהה לניטור מחזור אסטרוס36 אלא גם לנצל את המראה של שלב ה- EST הראשון וקורניפיקציה של תאי האפיתל30 כדי לסמן את תחילת ההבשלה המינית.
משקל הגוף מתואם באופן בולט עם הגיל ההתפתחותי בתקופת ההתבגרות במכרסמים30,37 ולכן יכול גם לסייע בקביעת הגיל ההתפתחותי בתקופה זו. המנגנונים המוצעים הקשורים לתופעה זו כוללים גירוי של הורמונים הדרושים להתפתחות הרבייה, כגון הורמון גדילה, ועיכוב ציר יותרת הכליה ההיפותלמית-יותרת המוח (HPA) על ידי וסת התיאבון, לפטין30. עם זאת, לא מומלץ להשתמש במדד זה כאינדיקטור היחיד לגיל ההתפתחותי בשל השונות הגדולה שנראתה בין חולדות על פני מינים שונים לבין ספקי הספקים38. השונות הנראית בהתפתחות ה-VO ומשקל הגוף מדגימה את חשיבותו של המושג בתהליך הניסוי הכולל.
תרגום לבני אדם: הקשרים תרבותיים ומדעיים מערכת היחסים התרגומית של מחקרי רבייה בין בעלי חיים לבני אדם היא דו-כיוונית. התוצאות ממחקרים המבוססים על בעלי חיים משפיעות על האופן שבו מעריכים, ניגשים ומנתחים את התהליכים האנושיים39. התפיסה של מערכת הרבייה האנושית והתהליכים הקשורים אליה משפיעים על האופן שבו נחקרים בעלי חיים. למעשה, אחת האינדיקציות הקולניות ביותר למחקר נוסף בתחום זה נובעת מאמונות חברתיות-תרבותיות מוטות הקשורות למחזורים הורמונליים המשפיעים על התהליך המדעי. רבות מהמוסכמות הללו נגזרות מסלידה תרבותית כללית מדיון במחזור החודשי, מה שהוביל לפער נתונים בידע מבוסס היטב40,41. יש לכך ספקטרום של השלכות המשתרעות בין מינוריות לקטלניות – מגובה מדפים וגודל הסמארטפון ועד התאמת שריון גוף משטרתי והחמצת אבחנות סרטן42.
התיאור של הווסת כבלתי סניטרית, הרסנית ורעילה – הנראה בטקסטים, בתקשורת, במילונים ובתורות רפואיות נערצות – נשמר על ידי פרסומים מדעיים. זה קורה באמצעות תיאורים לא מדויקים ומוטים של מחזורים הורמונליים, בידוד מערכת הרבייה ממקביליה הנוירואנדוקריניים והשפעותיה הסביבתיות, והפרספקטיבה הרדוקציוניסטית של השלמת מחזור כ'כישלון להרות'43,44. זה מוביל ליצירת פרקטיקות ניסיוניות לא מבוססות, כגון השמטת משתנים חיצוניים המשפיעים על מחזורים הורמונליים, קביעת נקודות התחלה וסיום המבוססות אך ורק על התפתחויות אנטומיות, ומדידת התקדמות המחזור באופן ליניארי ולא מעגלי. למרות הקשר הישיר בין גורמים סוציו-תרבותיים לבין השלכות ביולוגיות, הוא אינו נחשב לעתים קרובות בספרות המדעית. באמצעות בדיקה של פרסומים הוליסטיים יותר 43,44,45, חוקרים יכולים לפרק את הסטיגמות הללו וליצור עיצובים ניסיוניים אמינים ותקפים יותר.

<table><tbody><tr><td>AmScope 40X-1000X LED מיקרוסקופ סטודנטים + מצלמת USB 5MP</td><td>AmScope</td><td>מספר חלק: M150C-E5 EAN: 0608729747796 מספר דגם: M150C-E5</td><td>https://www.amazon.com/AmScope-40X-1000X-Student-Microscope-Camera/dp/B00O9GNOTA/ref=sr_1_15?crid=2W9CHTG8YSOTV&amp; מילות מפתח=usb + מצלמה + עבור + מיקרוסקופ & המגבר; qid=1572477663& המגבר; s=industrial & המגבר; קידומת = USB + מצלמה + עבור + micr% 2Cindustrial% 2C177& המגבר; sr=1-15</td></tr><tr><td>BD PrecisionGlide חבילת מחטים, 20G x 1, שיפוע קצר</td><td>Fischer Scientific</td><td>14-815-526</td><td></td></tr><tr><td>https://www.fishersci.com/shop/products/bd-precisionglide-single-use-needles-short-bevel-regular-wall-4/14815526#?keyword=BD%20PrecisionGlide%20Needle%20Pack,%2020G%20x%201 Bed O Cob 1/8</td><td>NEWCO</td><td>93009</td><td>https://andersonslabbedding.com/cob-products/bed-ocobs-8b/</td></tr><tr><td>קורנינג וסחר; שקופיות מיקרוסקופ רגילות זכוכית לבנה רגילה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>12-553-7A</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/corning-plain-microscope-slides-microscope-slides-75-x-25mm/125537a</td></tr><tr><td>Corning&trade; משקפי כיסוי מלבניים</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>12-553-464</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/corning-square-rectangular-cover-glasses-rectangle-no-1-thickness-0-13-0-17mm-size-24-x-50mm/12553464#?keyword=true</td></tr><tr><td>קימברלי-קלארק מקצועי ומסחרי; קימטק מדע וסחר; קימוויפס וסחר; מגבים עדינים למשימה, 1 רובד</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>06-666</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/kimberly-clark-kimtech-science-kimwipes-delicate-task-wipers-7/p-211240?crossRef=kimwipes</td></tr><tr><td>מעבדת מכרסמים Labdiet צ'או 50 פאונד, 15001&nbsp;</td><td>NEWCO Specialty and LabDiet</td><td>5012</td><td>נורת</td></tr><tr><td>לד ליניארית https://www.labdiet.com/products/standarddiets/rodents/index.html, UL Type A, T8, דו-פינים בינוניים (G13), טמפרטורת צבע 4,000 K, לומן 2550 lm</td><td>Grainger</td><td>36UX10</td><td>https://www.grainger.com/product/36UX10?gclid=CjwKCAjw_ LL2BRAkEiwAv2Y3SW1WdNdkf7 zdIxoT9R6n2DGnrToJHjv-pwCTca4ahQyExrrtWvbgwRoCi4 cQAvD_BwE& s_kwcid=AL!2966!3!335676016696 !p!! g!! led18et8%2F4%2F840& ef_id= CjwKCAjw_LL2BRAkEiwAv2Y3SW 1WdNdkf7zdIxoT9R6n2DGnrToJ Hjv-pwCTca4ahQyExrrtWvbgwRo Ci4cQAvD_BwE:G:s& s_kwcid=AL!2966!3!335676016696!p!! g!! led18et8%2F4%2F840& cm_mmc= PPC:+Google+PPC</td></tr><tr><td>שקיות הזרקת נתרן כלורי, 0.9%</td> <td>בטיחות פעולה חיה</td><td>ABB079830939</td><td>https://www.liveactionsafety.com/injection-iv-solution-9-sodium-chloride-1000ml-bags/</td></tr> <tr><td>מזרק סטרילי 1 מ"ל&nbsp; עם קצה החלקה לואר - 100 מזרקים על ידי BH</td><td>Supplies BH Supplies</td><td>ASIN: B07BQDRDC2 UPC: 638632928821</td><td>https://www.amazon.com/1ml-Syringe-Sterile-Luer-Slip/dp/B07BQDRDC2/ref=sr_1_1_sspa?crid=13S8EGEUK90G7&amp;< > מילות מפתח=1 מ"ל + סטרילי + מזרק & המגבר; qid= 1572478649& המגבר; s=industrial & המגבר; קידומת = 1 + מ"ל + סטרי % 2C תעשייתי % 2C187 & המגבר; sr=1-1-spons& המגבר; psc=1& המגבר; spLa= ZW5jcnlwdGVkUXVhbGlmaWVy PUEyRlo4NFdZWkJLWkxGJm VuY3J5cHRlZElkPUEwMDEzODQ yMjNWNzdWM0hTNzVBRCZlbmNy eXB0ZWRBZElkPUEwNDI3NzAzMM 0E5SzVKMkxaQVc2JndpZGdldE5h bWU9c3BfYXRmJmFjdGlvbj1jbGlja 1JlZGlyZWN0JmRvTm90TG9nQ2 xpY2s9dHJ1ZQ==</td></tr><tr><td>מכסי תיל ורצפות עכבר מכסה מוט תיל להריוןבשימוש עם כלוב עכברושים (10 אינץ' x 19 אינץ' x 8 אינץ' H) קוטר</td> <td>כוללAllentown</td><td>LV40326013</td><td>https://www.labx.com/item/wire-lids-and-floors-mouse-maternity-wire-bar-lidused/LV40326013#description</td></tr><tr><td>רקמות קלות משקל במיוחד ופלסטיק 17 'x 24' חד פעמי</td><td>Medline Medline</td><td>EAN: 0480196288558 &nbsp; מספר זיהוי סחר עולמי: 40080196288558</td><td>https://www.amazon.com/Medline-Industries-MSC281224C-Lightweight-Disposable/dp/B00A2G67YU/ref=sr_1_4?keywords=medline+industries+surgical+pads&amp;qid=1572475853&amp; sr=8-4</td></tr></tbody></table>

ניטור מחזור אסטרוס מכרסמים תוך שימוש בשטיפה נרתיקית: אין דבר כזה מחזור רגיל

Rodent Estrous Cycle Monitoring Utilizing Vaginal Lavage: No Such Thing As a Normal Cycle

המתודולוגיה הנוכחית קובעת גישה ניתנת לשחזור, סטנדרטית וחסכונית לניטור המחזור האסטרוס של חולדות מתבגרות מסוג ספראג דאולי (SD) נקבות. מחקר זה מדגים את המורכבות של מחזורים הורמונליים ואת הספקטרום הרחב של ההבנה הנדרשת לבניית טכניקת ניטור אמינה ותקפה. באמצעות בחינה מעמיקה של תכנון ניסויי עיקרי ואלמנטים פרוצדורליים, תיאור זה של המחזור ועקרונות היסוד שלו מספק מסגרת להבנה נוספת ולפירוק תפיסות מוטעות לשכפול עתידי.
יחד עם מתווה של תהליך איסוף הדגימות תוך שימוש בשטיפה נרתיקית, ההליך מתאר את המנגנון של סיווג הנתונים למודל בן ארבעת השלבים של בלטו, אסטרוס, מטסטרו ו-diestrus. שלבים אלה מאופיינים בגישה מוצעת חדשה, תוך שימוש ב-4 הדטרמיננטים המסווגים של מצב נוזל הנרתיק, סוג התאים הנוכחי, סידור התאים וכמות התאים בזמן האיסוף. וריאציות של כל שלב, דוגמאות חיוביות ושליליות, ההבחנה בין מחזוריות לאציקליות ותיאורים גרפיים של מרכיבי הסיווג שנאספו מוצגים לצד פרקטיקות פרשניות וארגוניות יעילות של הנתונים. באופן כללי, כלים אלה מאפשרים פרסום של טווחי נתונים הניתנים לכימות בפעם הראשונה, מה שמוביל לסטנדרטיזציה של גורמי סיווג עם שכפול.

הנתונים הנוכחיים משקפים את זה של תוכנית התקינה הגנטית הבינלאומית של SD מתבגרת (IGS) בנוכחות חולדות SD זכריות. בעלי חיים אלה היו ממוקמים הן באוניברסיטת פפרדין והן במעבדות UCLA כחלק ממחקר משותף. איור 5 מציג וריאציות מרובות של 4 שלבי המחזור. איור 5A1 זוהה כדגימת דיסטרוס עם מספר סוגי תאים נוכחים. דוגמה זו מדגימה כי דגימות עם מספר גדול יותר של תאי אפיתל נחשבות ל-diestrus כאשר הן עומדות בכישורים האחרים של הרכיבים המסווגים, כגון דומיננטיות של LEUs. דגי...

מחקר זה מפרט את הגורמים המכריעים שיש לקחת בחשבון בתכנון ניסיוני המערב חולדות נקבות. במובן רחב יותר, נתונים אלה משמשים להפחתת הסטיגמה ומסייעים בפיתוח כלי אבחון והתערבות כוללניים יותר.

The current methodology establishes a reproducible, standardized, and cost-effective approach to monitoring the estrous cycle of female Sprague Dawley ...

פרוטוקול זה הוא משמעותי בכך שהוא מספק טכניקה מקיפה ובעלות נמוכה של זמן יעיל. הוא עונה על מרכיבים מרכזיים של מחקר תרגומי וסיווג נתוני רכיבים הן ברמה האישית והן ברמת הקבוצה. טכניקה זו היא יתרון בשל הכמות הכוללת של מידע שניתן לחלץ לגבי הפרופיל הכולל של החיה.זה כולל את מרכיבי הסיווג ואת המסקנות הבאות. טכניקה זו יכולה לספק תובנות על מגוון רחב של תחומי מחקר, כולל קרדיולוגיה, נוירולוגיה ופרמקולוגיה. טכניקה זו אינה ישימה רק למחקרי רבייה.התחילו בטיפול בחולדה עם אחיזה המתאימה לגיל, כגון אחיזת סגנון הדחיסה לחולדות בגיל ההתבגרות, על ידי הצבת הנבדק על אזור החזה העליון כאשר האף שלו מכוון כלפי מטה אל הקרקע. חשוף את תעלת הנרתיק של הנושא על ידי כיפוף בעדינות של הזנב לפני החדרת המזרק. תוך כדי החזקת המזרק יציב עם האצבע הקדמית והאצבע האמצעית מכניסים את קצה המזרק לתעלת הנרתיק בזווית מקבילה לה, מוציאים באיטיות את הנתרן כלורי לתעלה על ידי דחיפת הבוכנה פנימה עם האגודל.הוציאו את הנתרן כלורי מהתעלה הנרתיקית על ידי משיכת הבוכנה של המזרק הרחק מציפוי האפיתל. השתמש בקריטריונים עבור כל סוג תא כדי לאפיין את התאים הקיימים בדגימה ולרשום את הממצאים. אפיתל קרטיניזציה גרעינית או תאי אפיתל מכמתים ייראו משוננים או בעלי קצוות זוויתיים.למרות המחסור בגרעינים, הוא עשוי להראות אזורים עגולים בהירים בתוך התא המייצגים את המקום

rodent-estrous-cycle-monitoring-utilizing-vaginal-lavage-no-such

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

כאן, אנו מתארים כיצד לזהות את השלב של הרבייה העכברית (proestrus, ייחום, metestrus, או diestrus) על ידי אוסף פשוט, לא פולשנית והערכת ציטולוגיה של דגימות למרוח בנרתיק. בנוסף, אנו מתארים כיצד ציטולוגית נרתיק משקפת רמות הורמונים במחזור שעשו את המעבר דרך מחזור הרבייה העכברי.

ביצוע שטיפת נרתיק, כתמים ויולטו קריסטל, והערכת ציטולוגית נרתיק לאחסון זמני מחזור הייחום חולל זיהוי עכבר

שתי פרדיגמות תרגיל נבדקו על חדש שפותח במודל עכבר בגיל המעבר כימי שגרם לבחון את ההשפעה של גיל המעבר על יכולת גופנית והסתגלות לב לפעילות גופנית.

שיטה לחקר ההשפעה של כשל שחל מושרה כימי ביכולת גופנית ולב הסתגלות בעכברים

הורמונים גונדליים כגון אסטרוגן מווסתים את היווצרות הזיכרון במספר פרדיגמות ניסיוניות, כולל זיכרון הכחדת פחד. פרוטוקול זה מתאר סט של שיטות לחקירת ההשפעה של הורמוני בלוטת המין במיוחד במהלך הכחדה בנקבות רוכבות באופן טבעי, כולל ניטור מחזור אסטרוס ומתן אסטרוגן אקסוגני.

פרוטוקול עבור לימוד ההכחדה של פחד אוויר באופן טבעי רכיבה על אופני חולדות נקבות

כתב יד זה מתאר את התועלת של שבוצעה על חולדות נקבות לעצב ניסיוניות לחקירה הרבייה, הגינקולוגית. הסבר צעד אחר צעד כיצד לבצע הערכה ultrasonographic מוצג.

בדיקת אולטרה סאונד בחקירות הרבייה ניסויים על חולדות

התכווצויות הרחם חשובים לרווחתם של הנקבות. עם זאת, באופן פתולוגי הגדילה הפתולוגית עלולה לגרום לדיסנוריאה, במיוחד לנשים צעירות. כאן, אנו מתארים הכנה vivo ex פשוטה המאפשרת הערכה מהירה של היעילות של מרפה שרירים חלקה שניתן להשתמש בהם לטיפול בדינוריאה.

שיטה Vivo Ex להערכת בדרכי הרבייה של העכבר לתנועתיות ספונטנית מעקב הרחם MATLAB מבוסס על התנועה אלגוריתם לניתוח נתונים

פרוטוקול זה מתאר את בנייתה של מערכת מיקרו-הפעלה בעלות נמוכה, את ההשתלה הסטריאוטקסית שלה לתוך מבנים עמוקים במוח ואת ההליך למיקרו-נג'קציה מתוזמנות של טטרודוטוקסין בחולדות ערות וחסרות מעצורים. המטרה היא לחשוף את ההשתתפות של מבנים היפותלמיים ברגולציה של הביוץ על ידי עיכוב הפעילות העצבית שלהם.

חשיפת תפקידם של אזורים נפרדים במוח העכברוש בוויסות הביוץ באמצעות אי-פעילות הפיכה על ידי מיקרו-גניזמים של טטרודוטוקסין

שיטת מניפולציית צוואר הרחם המוצגת יכולה לגרום לפסאודו-הריון בעכברים ללא צורך בגידול נקבות עם זכרים שעברו כריתת כלי דם. השראת פסאודו-הריון נדרשת להצלחת החזרת עוברים לא כירורגית והזרעה מלאכותית לא ניתוחית, שניהם מוצגים גם.

גרימת פסאודו-הריון בעכברות נקבות ללא צורך בזכרים שעברו כריתת כלי דם לפני החזרת עוברים לא ניתוחיים או הזרעה מלאכותית

הורמון מגרה זקיק (FSH) ברקמות ואיברים חוץ-גונדליים שונים קשור לפתוגנזה של מחלות מרובות. ניתן להשתמש במודל העכבר שעבר כריתת שחלות וטיפול ב- FSH (OVF) כדי לחקור את הפעולות החוץ-גונדליות של FSH.

חקר השפעות עצמאיות של הורמון מגרה זקיקים in vivo במודל עכבר

פעימות הורמון luteinizing (LH) הוא סימן היכר של תפקוד הרבייה. אנו מתארים פרוטוקול להפעלה מרחוק של אוכלוסיות נוירונים ספציפיות הקשורות לאיסוף דם אוטומטי סדרתי. טכניקה זו מאפשרת אפנון הורמונלי מתוזמן, ריבוב ומזעור השפעות מניפולציה על רמות LH בבעלי חיים הנעים בחופשיות מודעת, וללא הפרעה.

הפעלה עצבית מרחוק יחד עם דגימת דם אוטומטית כדי לגרום ולמדוד הורמון luteinizing במחזור בעכברים

סריג מבוססי הכתבים משמשים יותר ויותר לעקוב אחר פעילות קינאז ו phosphatase בתאים חיים. כאן אנו מתארים שיטה כיצד להשתמש סריג מבוססי עיתונאים כדי להעריך את מחזור התא תלויות שינויים זירחון היעד.

ניטור פעילות קינאז ו phosphatase דרך מחזור התא על ידי Ratiometric סריג

למדו שיטת שטיפה נרתיקית לניטור מחזור אסטרוס בנקבות חולדות. טכניקה זו מאפשרת אפיון תאים מיקרוסקופי ומספקת כלים לתכנון ניסויים בביולוגיה ובתרופות.

ניטור מחזור אסטרוס מכרסמים תוך שימוש בשטיפה נרתיקית: אין דבר כזה מחזור רגיל

גלה סרטונים נוספים