Name: חקר מודלים ניסיוניים לתרומת איברים להשתלת ריאות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-15T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 56 s
Description: חקור מודלים ניסיוניים לתרומת איברים להשתלת ריאות בעכברושים. השיטה משווה תהליכי דלקת ומחלות פתולוגיות בין מודלי מוות מוחי, מוות מחזורי והלם המורגי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים ל- FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo) על מתן התמיכה הכספית.

ניסויים בבעלי חיים עמדו בדרישות ועדת האתיקה לשימוש וטיפול בבעלי חיים ניסיוניים של הפקולטה לרפואה של אוניברסיטת סאו פאולו (פרוטוקול מספר 112/16).
1. קיבוץ בעלי חיים
<ol><li>הקצו באופן אקראי שנים-עשר זכרים של חולדות Sprague Dawley (250-300 גרם) לאחת משלוש קבוצות ניסוי (n=4) כדי לנתח ולהשוות את ההשפעות הקשורות למודלים של בעלי חיים.</li>
	<li>הקצאת בעלי חיים לקבוצת הלם דימומי (HS, n = 4): בעלי חיים הנתונים לצנתור כלי דם עם השראת הלם דימום + תחזוקה למשך 360 דקות + מיצוי בלוק לב-ריאתי + הכנת דגימה לניתוח.</li>
	<li>הקצאת בעלי חיים לקבוצת מוות מוחי (BD, n = 4): בעלי חיים הנתונים למוות מוחי + תחזוקה למשך 360 דקות + מיצוי בלוק לב-ריאתי + הכנת דגימה לניתוח.</li>
	<li>הקצאת בעלי חיים לקבוצת מוות במחזור הדם (CD, n = 4): בעלי חיים הנתונים לצנתור כלי דם + השראת מוות במחזור הדם + השעיית הנשמה + איסכמיה בטמפרטורת החדר למשך 180 דקות + הכנת דגימה לניתוח.</li>
</ol>2. הרדמה והכנה טרום ניתוחית
<ol><li>מניחים את החולדה בתא סגור עם 5% איזופלורן למשך 1 - 4 דקות. ודא הרדמה נכונה על ידי בדיקת רפלקס צביטת הבוהן. בהיעדר תגובות רפלקס (ללא נסיגת כפות), בצע אינטובציה אורוטרכאלית (אנגיוקאת 14-G) בעזרת לרינגוסקופ ילדים.</li>
	<li>באמצעות מכונת הנשמה מכנית שהותאמה בעבר (FiO2 100%, נפח גאות ושפל 10 מ"ל/ק"ג, 90 מחזורים לדקה ו-PEEP 3.0 cmH2O), חברו את קטטר קנה הנשימה למכונת ההנשמה והתאימו את ריכוז חומר ההרדמה ל-2%. הערה: כל ההליכים הקשורים למודלים של בעלי חיים פעלו לפי אותו פרוטוקול הרדמה המתואר בסעיף זה.</li>
	<li>הסר פרווה מאזורי העניין (ראש, צוואר, חזה ובטן). לאחר מכן, באמצעות גזה, לחטא את שדה הניתוח ואת זנב החיה. החיטוי מתבצע עם שלושה סיבובים לסירוגין של פתרון אלכוהולי של פילינג chlorhexidine digluconate.</li>
	<li>חתכו את קצה זנבו של בעל החיים, הניחו את האגודל ואת האצבע המורה על בסיס הזנב, ולאחר מכן לחצו והחליקו אותם הרחק מהבסיס. לאסוף דגימת דם היקפית (20 μL) דרך הזנב עבור ספירת לויקוציטים הכוללת8. הערה: הליך זה חייב להתבצע לפני תחילת קנה הנשימה ומיד בסוף כל פרוטוקול (BD ו- HS - לאחר 360 דקות).</li>
	<li>השתמש פיפטה מדויקת כדי לדלל את הדם שנאסף ב 380 μL (1:20) של תמיסה של טורק (חומצה אצטית קרחונית 99%). לאחר הדילול, הכניסו את דגימת הדם לתא נויבאואר והניחו אותה תחת מיקרוסקופ (40x). בצע את ספירת לויקוציטים הכוללת בארבעת הרבעים הרוחביים של החדר.</li>
</ol>3. טרכאוסטומיה
<ol><li>בעזרת מספריים ומלקחיים מתאימים, לבצע דיסקציה אורכית של קנה הנשימה הצווארי, החל מהשליש האמצעי של הצוואר לחריץ suprasternal (<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62975/62975eq01.jpg" style="margin: auto;">חתך 1.5 ס"מ). לאחר החתך של העור והרקמה התת עורית, לנתח את שרירי צוואר הרחם עד קנה הנשימה נחשף.</li>
	<li>מניחים רצועת משי אחת 2-0 מתחת לקנה הנשימה.</li>
	<li>באמצעות microscissors, tracheostomize את השליש העליון של קנה הנשימה כדי להשיג אוורור אחיד. חותכים אופקית את קנה הנשימה בין שתי טבעות סחוס כדי להתאים לקוטר של צינורית מתכת (3.5 ס"מ).</li>
	<li>הכנס את צינור האוורור ותקן אותו עם ליגטורות מוכנות.</li>
	<li>חבר את צינור האוורור למערכת האוורור של בעלי חיים קטנים.</li>
	<li>אווררו את החולדה עם נפח גאות של 10 מ"ל/ק"ג, קצב של 70 מחזורים לדקה, ו-PEEP של 3 ס"מ ג'2O.</li>
</ol>4. עורק הירך וצנתור ורידים
<ol><li>חשוף את משולש הירך דרך חתך קטן (<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62975/62975eq01.jpg" style="margin: auto;">1.5 ס"מ) באזור המפשעה. לזהות ולבודד את כלי הירך. עבור הליך זה, השתמש בסטריאומיקרוסקופ (הגדלה פי 3.2).</li>
	<li>הניחו שתי ליגטורות משי 4-0 מתחת לכלי הדם (וריד או עורק), האחת רחוקה והשנייה קרובה. סגור את הליגטורה הדיסטלית ביותר, ולאחר מכן הנח קשר מותאם מראש בליגטורה הפרוקסימלית ומשוך.</li>
	<li>הכנס את הצנתר דרך חתך קטן שנוצר מראש בכלי הדם. קבע את הצינורית כדי למנוע נקע. הערה: יש להפוך את הצנתרים ממאריך יילודים בקוטר 20 ס"מ המרותך בחימום לצנתר היקפי תוך ורידי המתאים לקליבר הרשת הוורידית של בעל החיים, ובכך למנוע השבה של תכולת הדם. לשמן את הצינורית עם הפרין, הימנעות היווצרות של טרומבי וסיבוכים במהלך מדידת לחץ עורקים ממוצע (MAP).</li>
	<li>חבר את צנתר העורק למתמר לחץ ולמערכת ניטור סימנים חיונית כדי לרשום את הלחץ העורקי הממוצע (MAP). המתמר צריך להיות ממוקם בגובה הלב של החיה. הקלט את המפה כל פרק זמן של 10 דקות.</li>
	<li>הכניסו את צנתר המזרק (3 מ"ל) לווריד, במטרה להידרציה ולסגנציה בעת הצורך.</li>
</ol>5. אינדוקציה הלם Hemorrhagic
<ol><li>באמצעות גישה ורידית ועם מזרק heparinized, להסיר כמויות קטנות של דם עד ערכי MAP של <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62975/62975eq01.jpg" style="margin: auto;">50 מ"מ כספית הם הגיעו, ובכך ליצור הלם דימומי. הערה: לאסוף aliquot 2 מ"ל של דם כל 10 דקות בשעה הראשונה של הניסוי וכל 30 דקות בשעות שלאחר מכן.</li>
	<li>שמור על לחץ יציב על כ 50 מ"מ כספית לתקופה של 360 דקות. לשם כך, להסיר או להוסיף aliquots של דם אם הלחץ עולה או יורד, בהתאמה.</li>
	<li>שים מקור חום בקרבת מקום כדי למנוע היפותרמיה. הערה: כאן, נעשה שימוש במנורת חום.</li>
	<li>בסוף הפרוטוקול, קצרו את הבלוק הריאתי בקיבולת הריאה הכוללת (TLC) והקפיאו בחנקן נוזלי או הניחו אותו בתמיסת קיבוע למחקרים נוספים. הערה: בעזרת מכונת הנשמה של בעלי חיים קטנים, ניתן לגשת לפרמטרי האוורור במהלך הפרוטוקול. במחקר הנוכחי, פרמטרים אלה הוערכו מיד לפני אינדוקציה HS (בסיסי) ו 360 דקות מאוחר יותר (סופי).</li>
</ol>6. זירוז מוות במחזור הדם
<ol><li>כדי לגרום למוות במחזור הדם, יש לתת 150 מ"ג/ק"ג נתרן תיאופנטל דרך קו הוורידים. לאחר מכן כבה את מערכת האוורור.</li>
	<li>שים לב לירידה ההדרגתית ב- MAP עד שהיא מגיעה ל- 0 מ"מ כספית. מנקודה זו, שקול את תחילת תקופת איסכמיה חמה ולהתחיל את ספירת הזמן. בעל החיים צריך להישאר בטמפרטורת החדר (כ 22 ° C) במשך 180 דקות.</li>
	<li>בסוף הפרוטוקול, חבר מחדש את הריאות למכונת ההנשמה המכנית וקצור את בלוק הריאות ב- TLC לאיסוף. או להקפיא הבזק באמצעות חנקן נוזלי או למקם אותו בתמיסת הקיבוע למחקרים נוספים.</li>
</ol>7. השראת מוות מוחי
<ol><li>הניחו את החולדה במצב נוטה.</li>
	<li>הסר את העור מהגולגולת באמצעות מספריים כירורגיים. קדח קידוח בקוטר 1 מ"מ קדמי בקוטר 2.80 מ"מ וגחוני 10.0 מ"מ לברגמה ו-1.5 מ"מ רוחבי לתפר הסגיטלי.</li>
	<li>הכניסו את כל צנתר הבלון לחלל הגולגולת וודאו שהבלון ממולא מראש במי מלח (500 μL).</li>
	<li>בעזרת מזרק, במהירות לנפח את הצנתר.</li>
	<li>אשרו מוות מוחי על ידי התבוננות בגובה פתאומי של MAP (רפלקס קושינג), היעדר רפלקסים, מידריאזיס דו-צדדי ודום נשימה. לאחר האישור, יש להפסיק את ההרדמה ולהשאיר את בעל החיים על הנשמה מכנית למשך 360 דקות.</li>
	<li>הניחו מקור חום בקרבת מקום כדי למנוע היפותרמיה.</li>
	<li>בסוף הפרוטוקול, קצרו את בלוק הריאתי ב-TLC לאיסוף והקפיאו בחנקן נוזלי או הניחו אותו בתמיסת קיבוע למחקרים נוספים. הערה: בעזרת מכונת הנשמה של בעלי חיים קטנים, ניתן לגשת לפרמטרי האוורור במהלך הפרוטוקול. במחקר הנוכחי, הערכנו פרמטרים אלה מיד לפני אינדוקציה BD (בסיסי) ולאחר 360 דקות (סופי).</li>
</ol>

<ol><li>Paterno, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+implications+of+donor+warm+and+cold+ischemia+time+in+donor+after+circulatory+death+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Clinical implications of donor warm and cold ischemia time in donor after circulatory death liver transplantation.</a> Liver Transplantation. 25 (9), 1342-1352 (2019).</li>
<li>Yusen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+registry+of+the+International+Society+for+heart+and+lung+transplantation%3A+thirty-third+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report-2016%3B+focus+theme%3A+primary+diagnostic+indications+for+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The registry of the International Society for heart and lung transplantation: thirty-third adult lung and heart-lung transplant report-2016; focus theme: primary diagnostic indications for transplant.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 35 (10), 1170-1184 (2016).</li>
<li>Jung, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+transplant+outcomes+for+low-level+and+standard-level+tacrolimus+at+different+time+points+after+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Comparison of transplant outcomes for low-level and standard-level tacrolimus at different time points after kidney transplantation.</a> Journal of Korean Medical Science. 34 (12), e103(2019).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+International+Society+for+heart+and+lung+transplantation+donation+after+circulatory+death+registry+report%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The International Society for heart and lung transplantation donation after circulatory death registry report.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 34 (10), 1278-1282 (2015).</li>
<li>Drake, M., Bernard, A., Hessel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+death%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Brain death.</a> Surgical Clinics of North America. 97 (6), 1255-1273 (2017).</li>
<li>Nepomuceno, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hypertonic+saline+in+the+pretreatment+of+lung+donors+with+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of hypertonic saline in the pretreatment of lung donors with hemorrhagic shock.</a> Journal of Surgical Research. 225, 181-188 (2018).</li>
<li>Menegat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+bone+marrow+downregulation+in+brain-dead+rats%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Experimental+Pathology%22%5BJournal%5D)">Evidence of bone marrow downregulation in brain-dead rats.</a> International Journal of Experimental Pathology. (3), 158-165 (2017).</li>
<li>Iskender, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+versus+cold+ischemic+donor+lung+preservation+on+the+underlying+mechanisms+of+injuries+during+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Effects of warm versus cold ischemic donor lung preservation on the underlying mechanisms of injuries during ischemia and reperfusion.</a> Transplantation. (5), 760-768 (2018).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+ex+vivo+perfusion+prevents+lung+injury+compared+to+extended+cold+preservation+for+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Normothermic ex vivo perfusion prevents lung injury compared to extended cold preservation for transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 9 (10), 2262-2269 (2009).</li>
<li>Wauters, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+lung+injury+at+increasing+time+intervals+in+a+murine+brain+death+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Evaluating lung injury at increasing time intervals in a murine brain death model.</a> Journal of Surgical Research. 183 (1), 419-426 (2013).</li>
<li>Smith, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiologic+changes+during+brain+stem+death--lessons+for+management+of+the+organ+donor%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Physiologic changes during brain stem death--lessons for management of the organ donor.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 23 (9), S217-S222 (2004).</li>
<li>Belhaj, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+versus+humoral+determinants+of+brain+death-induced+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mechanical versus humoral determinants of brain death-induced lung injury.</a> PLoS One. 12 (7), e0181899(2017).</li>
<li>Kolkert, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gradual+onset+brain+death+model%3A+a+relevant+model+to+study+organ+donation+and+its+consequences+on+the+outcome+after+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">The gradual onset brain death model: a relevant model to study organ donation and its consequences on the outcome after transplantation.</a> Laboratory Animals. 41 (3), 363-371 (2007).</li>
<li>Rocha-E-Silva, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+effects+of+shock+and+trauma+in+experimental+models%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Brasileira+de+Cirurgia+Cardiovascular%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular effects of shock and trauma in experimental models: A review.</a> Revista Brasileira de Cirurgia Cardiovascular. 31 (1), 45-51 (2016).</li>
<li>Manara, A. R., Murphy, P. G., O'Callaghan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+circulatory+death%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Donation after circulatory death.</a> British Journal of Anaesthesia. 108, i108-i121 (2012).</li>
<li>Dhital, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+heart+transplantation+with+distant+procurement+and+ex-vivo+preservation+of+donor+hearts+after+circulatory+death%3A+a+case+series%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Adult heart transplantation with distant procurement and ex-vivo preservation of donor hearts after circulatory death: a case series.</a> The Lancet. 385 (9987), 2585-2591 (2015).</li>
<li>Boucek, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pediatric+heart+transplantation+after+declaration+of+cardiocirculatory+death%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pediatric heart transplantation after declaration of cardiocirculatory death.</a> The New England Journal of Medicine. 359 (7), 709-714 (2008).</li>
<li>Kramer, A. H., Baht, R., Doig, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+trends+in+organ+donation+after+neurologic+determination+of+death%3A+a+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22CMAJ+Open%22%5BJournal%5D)">Time trends in organ donation after neurologic determination of death: a cohort study.</a> CMAJ Open. 5 (1), E19-E27 (2017).</li>
<li>Reino, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trauma+hemorrhagic+shock-induced+lung+injury+involves+a+gut-lymph-induced+TLR4+pathway+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Trauma hemorrhagic shock-induced lung injury involves a gut-lymph-induced TLR4 pathway in mice.</a> PLoS One. 6 (8), e14829(2011).</li>
<li>Pascual, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertonic+saline+resuscitation+of+hemorrhagic+shock+diminishes+neutrophil+rolling+and+adherence+to+endothelium+and+reduces+in+vivo+vascular+leakage%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Hypertonic saline resuscitation of hemorrhagic shock diminishes neutrophil rolling and adherence to endothelium and reduces in vivo vascular leakage.</a> Annals of Surgery. 236 (5), 634-642 (2002).</li>
<li>Van Zanden, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+donor+lung+quality+deteriorates+more+after+fast+than+slow+brain+death+induction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Rat donor lung quality deteriorates more after fast than slow brain death induction.</a> PLoS One. 15 (11), e0242827(2020).</li>
<li>Shivalkar, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+effects+of+explosive+or+gradual+increase+of+intracranial+pressure+on+myocardial+structure+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Variable effects of explosive or gradual increase of intracranial pressure on myocardial structure and function.</a> Circulation. 87 (1), 230-239 (1993).</li>
<li>López-Aguilar, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Massive+brain+injury+enhances+lung+damage+in+an+isolated+lung+model+of+ventilator-induced+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Massive brain injury enhances lung damage in an isolated lung model of ventilator-induced lung injury.</a> Critical Care Medicine. 33 (5), 1077-1083 (2005).</li>
<li>Catania, A., Lonati, C., Sordi, A., Gatti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrimental+consequences+of+brain+injury+on+peripheral+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Detrimental consequences of brain injury on peripheral cells.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 23 (7), 877-884 (2009).</li>
<li>McKeating, E. G., Andrews, P. J., Mascia, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocyte+adhesion+molecule+profiles+and+outcome+after+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochirurgica+Supplement%22%5BJournal%5D)">Leukocyte adhesion molecule profiles and outcome after traumatic brain injury.</a> Acta Neurochirurgica Supplement. 71, 200-202 (1998).</li>
<li>Ott, L., McClain, C. J., Gillespie, M., Young, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokines+and+metabolic+dysfunction+after+severe+head+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Cytokines and metabolic dysfunction after severe head injury.</a> Journal of Neurotrauma. 11 (5), 447-472 (1994).</li>
<li>Avlonitis, V. S., Wigfield, C. H., Kirby, J. A., Dark, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hemodynamic+mechanisms+of+lung+injury+and+systemic+inflammatory+response+following+brain+death+in+the+transplant+donor%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The hemodynamic mechanisms of lung injury and systemic inflammatory response following brain death in the transplant donor.</a> American Journal of Transplantation. 5 (4), 684-693 (2005).</li>
<li>De Jesus Correia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertonic+saline+reduces+cell+infiltration+into+the+lungs+after+brain+death+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pulmonary+Pharmacology+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Hypertonic saline reduces cell infiltration into the lungs after brain death in rats.</a> Pulmonary Pharmacology & Therapeutics. 61, 101901(2020).</li>
<li>Kalsotra, A., Zhao, J., Anakk, S., Dash, P. K., Strobel, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+trauma+leads+to+enhanced+lung+inflammation+and+injury%3A+evidence+for+role+of+P4504Fs+in+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Brain trauma leads to enhanced lung inflammation and injury: evidence for role of P4504Fs in resolution.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 27 (5), 963-974 (2007).</li>
<li>Simas, R., Zanoni, F. L., Silva, R., Moreira, L. F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+death+effects+on+lung+microvasculature+in+an+experimental+model+of+lung+donor%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Brasileiro+de+Pneumologia%22%5BJournal%5D)">Brain death effects on lung microvasculature in an experimental model of lung donor.</a> Journal Brasileiro de Pneumologia. 46 (2), e20180299(2020).</li>
<li>Moore, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physiological+response+to+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Emergency+Nursing%22%5BJournal%5D)">The physiological response to hemorrhagic shock.</a> Journal of Emergency Nursing. 40 (6), 629-631 (2014).</li>
<li>Fülöp, A., Turóczi, Z., Garbaisz, D., Harsányi, L., Szijártó, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+hemorrhagic+shock%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Experimental models of hemorrhagic shock: a review.</a> European Surgical Research. 50 (2), 57-70 (2013).</li>
<li>Hillen, G. P., Gaisford, W. D., Jensen, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+changes+in+treated+and+untreated+hemorrhagic+shock.+I.+Early+functional+and+ultrastructural+alterations+after+moderate+shock%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary changes in treated and untreated hemorrhagic shock. I. Early functional and ultrastructural alterations after moderate shock.</a> The American Journal of Surgery. 122 (5), 639-649 (1971).</li>
<li>Sprung, J., Mackenzie, C. F., Green, M. D., O'Dwyer, J., Barnas, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chest+wall+and+lung+mechanics+during+acute+hemorrhage+in+anesthetized+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiothoracic+and+Vascular+Anesthesia%22%5BJournal%5D)">Chest wall and lung mechanics during acute hemorrhage in anesthetized dogs.</a> Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 11 (5), 608-612 (1997).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+BTK+protects+lungs+from+trauma-hemorrhagic+shock-induced+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Medicine+Reports%22%5BJournal%5D)">Inhibition of BTK protects lungs from trauma-hemorrhagic shock-induced injury in rats.</a> Molecular Medicine Reports. 16 (1), 192-200 (2017).</li>
<li>Maeshima, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+hemorrhagic+shock-induced+lung+injury+by+heme+arginate+treatment+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Prevention of hemorrhagic shock-induced lung injury by heme arginate treatment in rats.</a> Biochemical Pharmacology. 69 (11), 1667-1680 (2005).</li>
<li>Gao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+resuscitation+fluids+on+acute+lung+injury+in+a+rat+model+of+uncontrolled+hemorrhagic+shock+and+infection%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Trauma%22%5BJournal%5D)">Effects of different resuscitation fluids on acute lung injury in a rat model of uncontrolled hemorrhagic shock and infection.</a> The Journal of Trauma. 67 (6), 1213-1219 (2009).</li>
<li>Wohlauer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nebulized+hypertonic+saline+attenuates+acute+lung+injury+following+trauma+and+hemorrhagic+shock+via+inhibition+of+matrix+metalloproteinase-13%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Nebulized hypertonic saline attenuates acute lung injury following trauma and hemorrhagic shock via inhibition of matrix metalloproteinase-13.</a> Critical Care Medicine. 40 (9), 2647-2653 (2012).</li>
<li>Morrissey, P. E., Monaco, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+circulatory+death%3A+current+practices%2C+ongoing+challenges%2C+and+potential+improvements%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Donation after circulatory death: current practices, ongoing challenges, and potential improvements.</a> Transplantation. 97 (3), 258-264 (2014).</li>
<li>Snell, G. I., Levvey, B. J., Levin, K., Paraskeva, M., Westall, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+brain+death+versus+donation+after+circulatory+death%3A+lung+donor+management+issues%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Donation after brain death versus donation after circulatory death: lung donor management issues.</a> Seminars in Respiratory and Critical Care Medicine. 39 (2), 138-147 (2018).</li>
<li>Iskender, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+versus+cold+ischemic+donor+lung+preservation+on+the+underlying+mechanisms+of+injuries+during+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Effects of warm versus cold ischemic donor lung preservation on the underlying mechanisms of injuries during ischemia and reperfusion.</a> Transplantation. 102 (5), 760-768 (2018).</li>
<li>Yamamoto, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activations+of+mitogen-activated+protein+kinases+and+regulation+of+their+downstream+molecules+after+rat+lung+transplantation+from+donors+after+cardiac+death%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Activations of mitogen-activated protein kinases and regulation of their downstream molecules after rat lung transplantation from donors after cardiac death.</a> Transplantation Proceedings. 43 (10), 3628-3633 (2011).</li>
<li>Kang, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+signatures+in+donor+lungs+from+donation+after+cardiac+death+vs+after+brain+death%3A+a+functional+pathway+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Transcriptional signatures in donor lungs from donation after cardiac death vs after brain death: a functional pathway analysis.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 30 (3), 289-298 (2011).</li>
</ol>

ברצוננו לאשר כי לא ידוע על ניגודי עניינים הקשורים לפרסום זה וכי לא הייתה תמיכה כספית משמעותית לעבודה זו שהייתה יכולה להשפיע על תוצאותיה.

בשנים האחרונות, המספר ההולך וגדל של אבחונים של מוות מוחי הוביל אותה להיות הספקית הגדולה ביותר של איברים ורקמות המיועדים להשתלה. צמיחה זו, עם זאת, לוותה בגידול מדהים בתרומות לאחר מוות במחזור. למרות אופיו הרב-גורמי, רוב המנגנונים המפעילים של סיבות המוות מתחילים לאחר טראומה או מלווים אותה עם אובדן נרחב של תכולת דם 4,18.
בהקשר זה, מודלים ניסיוניים של מוות מוחי, דום מחזור הדם והלם דימומי הם כלים חשובים למחקר פרוספקטיבי של סיבוכים הקשורים לסיבת המוות של תורם והשפעתם על הכדאיות של איברים פוטנציאליים המיועדים להשתלה 6,8,10. מספר שושלות של בעלי חיים הוצעו להקמת מודלים, כגון חזירים, ארנבים, חולדות ועכברים. מודלים של חולדות ועכבר נפוצים יותר בספרות מכיוון שהם אינם יקרים במיוחד וכרוכים בקושי לוגיסטי נמוך תוך שחזור משביע רצון של האירועים הפתופיזיולוגיים הנחקרים 8,13,14,15.
ברצוננו להדגיש כי הנחיות ומחקרים עדכניים אישרו את השימוש במשככי כאבים טרום הרדמה כחלק בלתי נפרד מהפרוטוקולים הכירורגיים, גם במצבים אקוטיים, במטרה לנהל באופן מקיף יותר את הכאב ההיקפי ואת רווחת בעלי החיים. אנו ממליצים לחוקרים להעריך גישה כזו במחקרים עתידיים.
מוות מוחי (BD) מודל BD נמצא ניתן לשחזור באמצעות עלייה פתאומית ב- ICP. השימוש במכשירים מתאימים וכוח אדם מיומן מאפשר הצלחה כירורגית ושכפול של הטכניקה עם כמה שבועות של אימון. במהלך הפיתוח של טכניקת BD, טרפנציה צריכה להתבצע עם מקדח ממונע מתאים, כך שאין רפיון בקטטר, ובכך למנוע הקרנה של רקמת המוח מתוך החור. בנוסף, במהלך הקידוח, יש לעצור את התנועה קדימה של המקדח ברגע שמתגברים על ההתנגדות הראשונית המוצעת על ידי הגולגולת.
על החוקרים להישאר ערניים ולהבטיח ניפוח מהיר של הצנתר, שכן אינפלציה הדרגתית מקדמת תגובות דלקתיות והמודינמיות מובהקות21. שינויים בלחץ הדם, בתורם, צריכים להיות מנוטרים כל הזמן לאורך כל הפרוטוקול, במיוחד במהלך החדרת קטטר, אשר צריך להיות מלווה בעלייה פתאומית ב- MAP ובמהלך השעה הראשונה לאחר הקמת BD (תקופה שלאחר אינפלציה). תוצאות אלה תואמות את הספרות, אשר מראה קביעת שיא יתר לחץ דם מיד לאחר החדרת קטטר, ואחריו ירידה ברמות הלחץ, בתגובה סבירה לעלייה חולפת ברמות קטכולאמיןבמחזור 22.
שמירה על בעל החיים ב-BD לפרקי זמן ממושכים עלולה להוביל ללחץ דם נמוך ואחריו למוות במחזור הדם, מה שהופך את הניסוי לבלתי אפשרי. בהתאם לכך, רוב הפרוטוקולים המשמשים בספרות קובעים תקופת מעקב הנעה בין 4 ל -6 שעות, שלאחריה יש לתת תרופות vasoactive 12,13,21,22,23.
בנוסף לשינויים המודינמיים, אוטם מוחי ואיסכמיה מקדמים עלייה במחזור הדם המערכתי של גורמים פרו-דלקתיים, אשר, כאשר הם מגיעים לריאות, תורמים לפגיעה פרנכימה ריאתית 24,25,26.
במחקר שלנו, BD לווה בעלייה משמעותית בביטוי IL-1β ברקמה (מעל CD) וביחס משקל רטוב/יבש, מדד לבצקת ריאות. מחקרים קודמים הצביעו על עלייה ברמות במחזור הדם של ציטוקינים מעודדי דלקת לאחר אירוע BD, אשר בסופו של דבר עשוי להעדיף את אפנון הביטוי של מולקולות הידבקות, חדירות כלי דם מוגברת, וכתוצאה מכך נדידת לויקוציטים 27,28,29,30.
הלם דימומי (HS) הוקם באמצעות נסיגה או עירוי של aliquots הדם במטרה תחזוקה לחץ דם ממושך (≤ 50 מ"מ כספית), מודל הלחץ הקבוע של HS שואף לחקות את הירידה בנפח הדם הנגרמת על ידי תהליך hemorrhagic, וכתוצאה מכך, את הנחתת לחץ מילוי מערכתית. אירועים אלה מובילים לירידה ב- MAP, המלווה בירידה בלחץ זילוח ריאתי31,32.
בין היתרונות של מודל HS זה היא האפשרות לשלוט על מידת ומשך לחץ דם, בנוסף ליכולת השחזור הגדולה יותר של הטכניקה בהשוואה למודלים המבוססים על נפח דם קבוע מראש. בהתאם לכך, רוב הפרוטוקולים המשמשים בספרות קובעים תקופת פרוטוקול הנעה בין 15 דקות ליותר מ -180 דקות, עם רמות לחץ דם ממוצעות הנעות בין 20-55 מ"מ כספית, בהתאם לניתוח שנבחר במחקר 6,32. במחקר הנוכחי, לחץ דם נשמר במשך 3 שעות, מה שהוביל להתנגדות מוגברת לרקמות, ואחריה ירידה בציות הריאות בבעלי חיים שנחשפו ל- HS. כדי לאשש זאת, מחקרים שונים בספרות הצביעו על קשר פרופורציונלי בין הזמן המושקע ב- HS לבין ההשפעות של היפובולמיה על התנגדות דרכי הנשימה והיענות לריאות 6,33,34.
בנוסף, במחקר הנוכחי, HS לווה בלויקוציטוזה משמעותית ובביטוי רקמות מוגבר של IL-1β (ביחס ל-CD) ו-TNF-α. פגיעה באנדותל המיקרו-וסקולטורה הריאתי, הנגרמת על ידי שחרור מיני חמצן תגובתי מהתהליך הראשוני של היפוקסיה ואיסכמיה מבוססת, תגביר את חדירות כלי הדם, אשר, יחד עם העלייה בלחץ עורק הריאה, תפעל כגורם כימוטקטי עבור לויקוציטים ושחרור לאחר מכן של מתווכי דלקת 6,20,31,35,36, 37,38.
מוות במחזור הדם (CD) ההבדל העיקרי בין השתלים השוליים שמקורם בתהליכי BD ו- CD הוא זמן האיסכמיה החם (WIT) אליו יהיה נתון השתל, המוגדר על ידי חוקרים מסוימים כזמן שבין היעדר פולסים היקפיים לבין הפרעה בזרימת הדם עקב הסרת ציוד תומך חיים עד זילוח קר או אזורי של האיבר17, 39,40.
במחקר הנוכחי, האיברים והרקמות של בעלי חיים שנגזרו ממודל CD היו נתונים לתקופת WIT של 180 דקות. מספר מחקרים בספרות חשפו קשר פרופורציונלי בין WIT לבין תפקוד לקוי לאחר השתלה, דבר המצביע על כך שזמן האיסכמיה צריך להשתנות בהתאם למאפיינים ולשלמות של כל איבר. בהקשר זה, השתלות ריאה מחולדות הוכחו כעמידות לתקופות של עד 3 שעות של איסכמיה חמה41,42.
עם עדויות לפגיעה ברקמה הנגרמת על ידי השלב הסימפתטי השולט, חוסר יציבות המודינמית ודלקת מערכתית כתוצאה מתהליך BD, תרומות לאחר מעצר מחזור הדם נשקלו מחדש כאסטרטגיה פוטנציאלית להפחתת סיבוכים הקשורים להשתלה 41,42,43. במובן זה, הנתונים שלנו מצביעים על ירידה דרמטית ברמות IL-1β ו- TNF-α במודל CD ביחס לשני המודלים האחרים שנחקרו. אישוש לכך, Iskender et al.4 ציינו את הרמות הנמוכות של ציטוקינים ברקמה במודל של זילוח ריאות בחולדות עם רקמות שנתרמו לאחר WIT באמצעות מנגנונים שעדיין אינם מובנים היטב.
בהתבסס על האמור לעיל, בחירת המתודולוגיה והתאמותיה צריכה להיות תלויה במטרות שפותחו על ידי החוקר. לאחר שנקבעו, יעדים אלה צריכים להנחות את סוג מודל התרומה, את זמן הפרוטוקול ואת הניתוחים שיש לבצע. ניתן גם לקשר את סוג התרומה עם מודלים בעלי חיים של שיקום ריאות ורפרפוזיה.
מסקנות לסיכום, המודלים של תורמי איברים המתוארים כאן הם כלים פוטנציאליים בחקר השינויים הקשורים למתודולוגיות שונות של קצירת שתלים ויכולים לספק אמצעים שבאמצעותם ניתן לקבל הבנה מלאה של ההשפעה של איכות איברים אלה על התוצאות לאחר ההשתלה, בהתחשב ביכולת השחזור והאמינות של המתודולוגיות המוצגות כאן.

רלוונטיות קלינית השתלת איברים היא אפשרות טיפולית מבוססת היטב למספר פתולוגיות חמורות. בשנים האחרונות הושגו התקדמויות רבות בתחומים הקליניים והניסיוניים של השתלות איברים, כגון ידע רב יותר על הפתופיזיולוגיה של תפקוד לקוי של השתל הראשוני (PGD) והתקדמות בתחומי טיפול נמרץ, אימונולוגיה ופרמקולוגיה 1,2,3. למרות ההישגים והשיפורים באיכות ההליכים הכירורגיים והפרמקולוגיים הקשורים, הקשר בין מספר האיברים הזמינים למספר המושתלים ברשימת ההמתנה נותר אחד האתגרים העיקריים 2,4. בהקשר זה, הספרות המדעית הציעה מודלים של בעלי חיים לחקר טיפולים שניתן ליישם על תורמי איברים לטיפול ו/או שימור האיברים עד למועד ההשתלה 5,6,7,8.
על ידי חיקוי האירועים השונים שנצפו בפרקטיקה הקלינית, מודלים של בעלי חיים מאפשרים לחקור את המנגנונים הפתולוגיים הקשורים ואת הגישות הטיפוליות שלהם. האינדוקציה הניסיונית של אירועים אלה, ברוב המקרים הבודדים, יצרה מודלים ניסיוניים של תרומת איברים ורקמות הנחקרים באופן נרחב בספרות המדעית על השתלות איברים 6,7,8,9. מחקרים אלה משתמשים באסטרטגיות מתודולוגיות שונות, כגון אלה הגורמות למוות מוחי (BD), הלם דימומי (HS) ומוות במחזור הדם (CD), שכן אירועים אלה קשורים לתהליכים מזיקים שונים המסכנים את הפונקציונליות של האיברים והרקמות שנתרמו.
מוות מוחי (BD) BD קשורה לסדרה של אירועים המובילים להידרדרות פרוגרסיבית של מערכות שונות. זה קורה בדרך כלל כאשר עלייה חריפה או הדרגתית בלחץ תוך גולגולתי (ICP) קורה עקב טראומה מוחית או דימום. עלייה זו ב- ICP מקדמת עלייה בלחץ הדם בניסיון לשמור על זרימת דם מוחית יציבה בתהליך המכונה רפלקסקושינג 10,11. שינויים חריפים אלה עלולים לגרום להפרעות בתפקוד הלב וכלי הדם, האנדוקריניות והנוירולוגיות הפוגעות בכמות ואיכות האיברים הנתרמים, בנוסף להשפעה על התחלואה והתמותה לאחר ההשתלה 10,11,12,13.
הלם דימומי (HS) HS, בתורו, קשור לעתים קרובות עם תורמי איברים, שכן רובם קורבנות של טראומה עם אובדן משמעותי של נפח הדם. איברים מסוימים, כגון הריאות והלב, פגיעים במיוחד ל- HS עקב היפובולמיה וכתוצאה מכך היפופרפוזיה של רקמות14. HS גורם לפגיעה ריאתית באמצעות חדירות נימים מוגברת, בצקת וחדירה של תאים דלקתיים, מנגנונים שיחד פוגעים בחילוף הגזים ומובילים להידרדרות מתקדמת של איברים, וכתוצאה מכך משבשים את תהליך התרומה 6,14.
מוות במחזור הדם (CD) השימוש בתרומת תקליטורים לאחר תרומת תקליטורים גדל באופן אקספוננציאלי במרכזים מרכזיים בעולם, ובכך תורם לגידול במספר האיברים שנאספו. איברים שנמצאו מתורמים לאחר CD פגיעים להשפעות של איסכמיה חמה, המתרחשת לאחר מרווח של אספקת דם נמוכה (שלב אגוני) או ללא אספקת דם (שלב אסיסטולי)8,15. Hypoperfusion או היעדר זרימת הדם יוביל היפוקסיה רקמות הקשורים אובדן פתאומי של ATP הצטברות של רעלים מטבוליים ברקמות15. למרות השימוש הנוכחי בו להשתלה בפרקטיקה הקלינית, נותרו ספקות רבים לגבי השפעת השימוש באיברים אלה על איכות השתל שלאחר ההשתלה ועל הישרדות המטופל15. לפיכך, השימוש במודלים ניסיוניים להבנה טובה יותר של הגורמים האטיולוגיים הקשורים לתקליטור גדל גם הוא 8,15,16,17.
מודלים ניסיוניים ישנם מודלים ניסיוניים שונים לתרומת איברים (BD, HS ו-CD). עם זאת, מחקרים מתמקדים לעתים קרובות רק באסטרטגיה אחת בכל פעם. קיים פער ניכר במחקרים המשלבים או משווים בין שתי אסטרטגיות או יותר. מודלים אלה שימושיים מאוד בפיתוח טיפולים המבקשים להגדיל את מספר התרומות וכתוצאה מכך להקטין את רשימת ההמתנה של מושתלים פוטנציאליים. מיני בעלי החיים המשמשים למטרה זו משתנים ממחקר למחקר, כאשר מודלים חזיריים נבחרים בדרך כלל כאשר המטרה היא תרגום ישיר יותר עם הפיזיולוגיה של מורפו האנושי ופחות קושי טכני בהליך הכירורגי בשל גודל החיה. למרות היתרונות, קשיים לוגיסטיים ועלויות גבוהות קשורים למודל החזירי. מאידך גיסא, העלות הנמוכה והאפשרות למניפולציה ביולוגית מעדיפים את השימוש במודלים של מכרסמים, המאפשרים לחוקר להתחיל ממודל אמין להתרבות ולטפל בנגעים, כמו גם לשלב את הידע שנרכש בתחום השתלות האיברים.
כאן, אנו מציגים מודל מכרסמים של מוות מוחי, מוות במחזור הדם, ותרומת הלם דימומי. אנו מתארים תהליכים דלקתיים ומצבים פתולוגיים הקשורים לכל אחד מהמודלים הללו.

<table><tbody><tr><td>אינטובציה של 14 מד אנגיוקט</td><td>DB</td><td>38186714</td><td>אינטובציה של Orotracheal</td></tr><tr><td>2.0 משי</td><td>Brasuture</td><td>AA553</td><td>קיבוע צינור קנה הנשימה</td></tr><tr><td>24 מד</td><td>DB</td><td></td><td>גישה עורקית וורידית 38181214 גישה עורקית וורידית</td></tr><tr><td>4.0 משי</td><td>Brasuture</td><td>AA551</td><td>קיבוע של צינוריות עורקים וורידים</td></tr><tr><td>תמיסת כלורהקסידין דיגלוקונאט אלכוהולית (2%).</td><td>ויק פארמה</td><td>Y/N</td><td>Asepsis</td></tr><tr><td>מכשיר טריכוטומיה</td><td>אוסטר</td><td><חזק>Y/N</חזק></td><td><חזק>מכשיר גזירה</חזק></td></tr><tr><td>איזון דיוק</td><td><חזק>שימדזו</חזק>D314800051</td><td></td> <td>ניתוח יחס המשקל הרטוב/יבש</td></tr><tr><td>ברביטוראט (תיופנטל)</td><td>Crist&aacute; lia</td><td>18080003</td><td>צנתר בלון אינדוקציה DC</td></tr><tr><td>(Fogarty-4F)</td><td>Edwards Life מאז</td><td>120804</td><td>BD אינדוקציה</td></tr><tr><td>מאריך יילודים</td><td>Embramed</td><td>497267</td><td>משמש כקטטרים בעזרת האנגיוקט 24 G</td></tr><tr><td>FlexiVent</td><td>Scireq</td><td></td><td>1142254 ניתוח פרמטרים אוורורים</td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Blau Farmaceutica SA</td><td><חזק>7000982-06</חזק></td><td><חזק>נוגד קרישה</חזק></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Crist&aacute; ליה</td><td>10,29,80,130</td><td>הרדמה אינהלציה</td></tr><tr><td>מיקרופיפטה (1000 ומיקרו; L)</td><td><חזק>אפנדורף</חזק></td><td><חזק>347765Z</חזק></td><td><חזק>טיפול בנוזלים בנפח קטן</חזק></td></tr><tr><td>מיקרופיפטה (20 ומיקרו; L)</td><td><חזק>אפנדורף</חזק></td><td><חזק>H19385F</חזק></td><td><חזק>טיפול בנוזלים בנפח קטן</חזק</td></tr><tr><td>>מיקרוסקופ</td><td>Zeiss</td><td>1601004545</td><td>סיוע בהדמיה של מבנים להליך הכירורגי</td></tr><tr><td>מוניטור מולטי-פרמטרי</td><td>רישום Dixtal</td><td>101503775</td><td>MAP</td></tr><tr><td>מקדחה ממונעת</td><td>Midetronic</td><td>MCA0439</td><td>משמש לקידוח קידוח בקליבר 1 מ"מ</td></tr><tr><td>תא נויבאואר</td><td>Kasvi</td><td>D15-BL</td><td>ספירת תאים</td></tr><tr><td>לרינגוסקופ ילדים</td><td>אוקסיגל</td><td>Y/N</td><td>סיוע במהלך אינטובציה של קנה הנשימה</td></tr><tr><td>מזרק (3 מ"ל)</td> <td>SR</td><td>3330N4</td><td>הידרציה והוצאה במהלך פרוטוקול HS</td></tr><tr><td>מתמר לחץ</td><td>Edwards Life מאז</td> רישום <td>P23XL</td><td>MAP</td></tr><tr><td>צינור קנה הנשימה המתכתי</td><td>ביו-רפואי</td><td>006316/12</td><td>צינורית קשיחה לניתוח עם מאוורר FlexiVent</td></tr><tr><td>וופורייזר איזופלורן</td><td>הרווארד ביוסיינס</td><td>1,02,698</td><td>מערכת הרדמה</td></tr><tr><td>מאוורר מכני לבעלי חיים קטנים (683)</td><td>מכשיר הרווארד</td><td>MA1 55-0000</td><td>מתודולוגיית xMap אוורור מכני</td></tr><tr><td></td><td>Millipore</td><td>RECYTMAG-65K-04</td><td>ניתוח סמנים דלקתיים</td></tr></tbody></table>

חקר מודלים ניסיוניים לתרומת איברים להשתלת ריאות

Study of Experimental Organ Donation Models for Lung Transplantation

מודלים ניסיוניים הם כלים חשובים להבנת התופעות האטיולוגיות המעורבות באירועים פתופיזיולוגיים שונים. בהקשר זה, מודלים שונים של בעלי חיים משמשים לחקר האלמנטים המפעילים את הפתופיזיולוגיה של תפקוד לקוי של השתל הראשוני לאחר ההשתלה כדי להעריך טיפולים פוטנציאליים. כיום, אנו יכולים לחלק מודלים ניסיוניים של תרומות לשתי קבוצות גדולות: תרומה לאחר מוות מוחי ותרומה לאחר דום דם. בנוסף, יש לשקול את ההשפעות המזיקות הקשורות להלם דימומי כאשר בוחנים מודלים של בעלי חיים של תרומת איברים. במאמר זה נתאר את הקמתם של שלושה מודלים שונים של תרומת ריאות (תרומת לאחר מוות מוחי, תרומת מוות לאחר מחזור הדם ותרומת הלם לאחר דימומים) ונשווה את התהליכים הדלקתיים וההפרעות הפתולוגיות הקשורות לאירועים אלה. המטרה היא לספק לקהילה המדעית מודלים אמינים של בעלי חיים של תרומת ריאות לחקר המנגנונים הפתולוגיים הקשורים וחיפוש מטרות טיפוליות חדשות כדי לייעל את מספר השתלים ברי קיימא להשתלה.

לחץ עורקים ממוצע (MAP) כדי לקבוע את ההשלכות ההמודינמיות של BD ו- HS, MAP הוערך לאורך 360 הדקות של הפרוטוקול. המדידה הבסיסית נאספה לאחר הסרת עור וקידוח גולגולת ולפני איסוף אליציטוט דם לבעלי חיים הנתונים BD או HS, בהתאמה. לפני השראת BD ו-HS, מפת הבסיס של שתי הקבוצות הייתה דומה (BD: 110.5 ± 6.1 לעומת HS: 105.8 ± 2.3 מ"מ כספית; p=0.5; ANOVA דו-כיוונית). לאחר החדרת קטטר, קבוצת BD חוותה עלייה פתאומית ברמות לחץ הדם (138. 7 ± 10.1 מ"מ כספית). שיא יתר לחץ דם הוא אירוע מוזר הקשור ללחץ תוך גולגולתי מוגבר והוא יכול להיחשב עדות ראשונה להקמת BD. בנוסף, ראינו היעדר רפלקסים, מידריאזיס דו-צדדי ודום נשימה פוסט-ניפוח בכל בעלי החיים. לחץ שיא זה לווה בירידה מהירה ב- MAP (10 דקות - 81.2 ± 10 מ"מ כספית). תת-לחץ דם נמשך כ-50 דקות, ולאחר מכן רמות MAP חזרו לערכים קרובים לאלה שבתחילת המחקר (120 דקות - 120.7 ± 7.5 מ"מ כספית) (איור 1).
שלא כמו בקבוצת BD, הירידה ב- MAP בקבוצת HS קשורה לנסיגה של aliquots בדם ב -10 הדקות הראשונות של הניסוי. הלם היפו-וולמי נשמר במשך 360 דקות (שונות ממוצעת לאורך הפרוטוקול 52.3 ± 1.2 מ"מ כספית). לאחר סיום הפרוטוקול, קבוצת BD הראתה דפוס MAP שונה באופן משמעותי במהלך 6 שעות מעקב מקבוצת HS (BD: 93.7 ± 4.5 לעומת HS: 52.3 ± 0.5 מ"מ כספית; p&lt;0.0001; מבחן התלמיד).
מכניקת ריאות כדי להעריך את הפרמטרים האלסטיים וההתנגדותיים של מערכת הנשימה, בוצע ניתוח של מכניקת הריאות של בעלי החיים הנתונים ל- BD ו- HS. 360 דקות לאחר ההתחלה ולאחר תחזוקת לחץ דם, קבוצת HS הציגה עמידות מוגברת לרקמת הריאה (G) (HS: קו בסיס - 0.26 ± 0.02 לעומת סופי - 0.51 ± 0.05 ס"מ גובה2O.מ"ל-1; p=0.03; דו-כיווני ANOVA), ואחריו ציות מופחת למערכת הנשימה (Crs) (HS: בסיס - 0.64 ± 0.05 לעומת סופי - 0.23 ± 0.004 ס"מ H2O/mL; p = 0.001; דו-כיווני ANOVA) (איור 2A,B).
בצקת ריאות בסוף הפרוטוקול נאספה האונה האמצעית של הריאה הימנית לכל הקבוצות, ומשקלה נמדד כדי לנתח את יחס המשקל הרטוב/יבש, ששימש כמדד בצקת ריאות. המשקל הרטוב הוערך מיד לאחר מיצוי האיבר, והמשקל היבש נמדד לאחר 24 שעות בתנור של 80 מעלות צלזיוס. לפי יחס זה, קבוצת BD (2.32 ±-0.1) הראתה בצקת גדולה יותר מאשר קבוצות HS (1.97 ±-0.03) ו-CD (2.04 ±-0.02) (איור 3).
פרמטרים סיסטמיים ודלקתיים רקמתיים בסוף הפרוטוקול חלה עלייה משמעותית במספר הכולל של לויקוציטים מערכתיים בקבוצה שעברה HS (קו בסיס - 13888 ± 887.3 לעומת סופי - 35263 ± 4076 מ"מ3; p=0.0189); דו-כיווני ANOVA) (איור 4). קבוצת HS הראתה גם עלייה במספר הלויקוציטים הן בהשוואה לערכי הבסיס והן ביחס לקבוצת BD (p = 0.0132).
דלקת רקמות הוערכה על ידי כימות סמנים דלקתיים ברקמת הריאה. לשם כך, דגימות ביופסיה של רקמת הריאה עברו הומוגניות בחיץ פוספט ולאחר מכן נשלחו לניתוח עבור ביטוי גורם נמק הגידול אלפא (TNF-α) ואינטרלוקין 1 בטא (IL1-β). רמות הביטוי IL1-β היו גבוהות יותר בקבוצת BD (304.4 ± 91 pg/mg) ובקבוצת HS (327.5 ± 25.2 pg/mg) מאשר בקבוצת CD (8 ± 2.3 pg/mg; p=0.004; חד-כיווניים ANOVA) (איור 5B). קבוצת HS הראתה גם רמות גבוהות יותר של TNF-α (4.7 ± 0.3 pg/mg; p&lt;0.0001; חד-כיווניים ANOVA) מאשר קבוצת BD (1.3 ± 0.3 pg/mg) וקבוצת CD (0.4 ± 0.2 pg/mg) (איור 5B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig01.jpg"> איור 1: מהלך הזמן של לחץ עורקי ממוצע (MAP) בקבוצות של מוות מוחי (BD) והלם דימומי (HS). הערכים עבור כל המדידות מבוטאים כאמצעי ± שגיאות תקן של האמצעים (SEMs). MAP, לחץ עורקי ממוצע; BD, מוות מוחי; HS, הלם דימומי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig02.jpg"> איור 2: מכניקת ריאות. מכניקת ריאות כפי שנקבעה על ידי (A) תאימות מערכת הנשימה ו (B) עמידות רקמות בקבוצת מוות מוחי (BD) וקבוצת הלם דימומי (HS). * מציין הבדלים משמעותיים בין ערכי הבסיס לערך הסופי בקבוצת HS (p&lt;0.05). הערכים עבור כל המדידות מבוטאים כאמצעי ± שגיאות תקן של האמצעים (SEMs), ו- ANOVA דו-כיווני שימש להשוואות. Crs, ציות של מערכת הנשימה; G, התנגדות רקמות; BD, מוות מוחי; HS, הלם דימומי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig03.jpg"> איור 3: בצקת ריאות שנקבעה על-ידי יחס משקל רטוב ליבש של ריאות בקבוצת המוות המוחי (BD) ובקבוצת ההלם הדימומי (HS). הערכים עבור כל המדידות מבוטאים כאמצעי ± שגיאות תקן של האמצעים (SEMs), והשוואות נעשו עם ANOVA חד כיוונית . BD, מוות מוחי; HS, הלם דימומי; CD, מוות במחזור הדם. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig04.jpg"> איור 4: לוקוגרמה של קבוצת הלם דימומי (HS) ומוות מוחי (BD). * מציין הבדלים משמעותיים בין ערכי הבסיס לערכים הסופיים בקבוצת HS (p&lt;0.05). הערכים עבור כל המדידות מבוטאים כאמצעי ± שגיאות תקן של הממוצע (SEMs), והשוואות נעשו עם ANOVA דו-כיוונית . BD, מוות מוחי; HS, הלם דימומי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig05.jpg"> איור 5: תגובות דלקתיות מקומיות היו פחות בולטות בקבוצת המוות במחזור הדם (CD). (A) ביטוי רקמת ריאה של IL-1β; (B) ביטוי רקמת ריאה של TNF-α. הערכים עבור כל המדידות מבוטאים כאמצעי ± שגיאות תקן של הממוצע (SEMs), והשוואות נעשו עם ANOVA חד-כיוונית . BD, מוות מוחי; HS, הלם דימומי; CD, מוות במחזור הדם. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

המחקר הנוכחי מראה את הקמתם של שלושה מודלים שונים של תרומת ריאות (תרומה לאחר מוות מוחי, תרומת מוות לאחר מחזור הדם ותרומת הלם לאחר דימומים). הוא משווה את התהליכים הדלקתיים וההפרעות הפתולוגיות הקשורות לאירועים אלה.

Experimental models are important tools for understanding the etiological phenomena involved in various pathophysiological events. In this context, ...

מודלים ניסיוניים של תרומת איברים מחקים בדרך כלל מצבים בודדים של פגיעה ברקמה הקשורה לתהליך המוות ו / או אירועים הקשורים לשימור והשתלת האיבר. מודלים אלה שימושיים מאוד בפיתוח טיפולים המבקשים להגדיל את מספר התרומות, וכתוצאה מכך להקטין את רשימת השקלול של מקבלי התרומות. בהתאם לכך, חשוב לפתח מודלים שונים, כגון אלה הגורמים למוות מוחי ומוות במחזור הדם.מאז אירועים אלה קשורים לתהליכים מזיקים שונים הפוגעים בפונקציונליות של האיברים שנתרמו והרקמות. הרדמה והכנה טרום ניתוחית. הניחו את החולדה בתא סגור עם איזופלורן 5% למשך דקה עד ארבע דקות.ודא הרדמה נכונה על ידי בדיקת רפלקס צביטת הבוהן. בהיעדר תגובות רפלקס, לבצע אינטובציה orotracheal, 14 מד אנגיוקאת בעזרת laryngoscope ילדים. עם מאוורר מכני שהותאם בעבר ונפח גאות ושפל של 10 מיליליטר לקילוגרם, 90 מחזורים לדקה ו-PEEP 3.0 ס"מ H2O, חברו את קטטר קנה הנשימה למכונת ההנשמה והתאימו את ריכוז חומר ההרדמה ל-2% הסר פרווה מאזורי העניין, הראש, הצוואר, החזה והבטן.לאחר מכן, באמצעות גזה, לנקות את השדה הכירורגי ואת הזנב של החיה עם פתרון אלכוהולי של Chlorhexidine digluconate, 2% הליך חיטוי חזר על עצמו שלוש פעמים. חתכו את קצה הזנב של החיה, הניחו את האגודל והאצבע המורה על בסיס הזנב, ואז לחצו והחליקו אותם הרחק מהבסיס. לאסוף דגימת דם היקפית, 20 מיקרוליטר דרך הזנב עבור ספירת לויקוציטים הכוללת. טרכאוסטומיה.בצע דיסקציה אורכית של קנה הנשימה הצווארי, החל מהשליש האמצעי של הצוואר לחריץ העל-החזה. חתך של כ-1.5 ס"מ. לאחר חתך העור והרקמה התת עורית, לנתח את שרירי צוואר הרחם עד קנה הנשימה נחשף.מניחים את ליגטורת המשי 2.0 מתחת לקנה הנשימה. באמצעות מספריים מיקרו, קנה הנשימה הוא השליש העליון של קנה הנשימה כדי להשיג אוורור אחיד. חותכים אופקית את קנה הנשימה בין שתי טבעות סחוס כדי להתאים לקוטר של צינורית מתכת, 3.5 סנטימטרים.הכנס את צינור האוורור ותקן אותו עם ליגטורות מוכנות. חבר את צינור האוורור למערכת האוורור של בעלי חיים קטנים. אווררו את החולדה עם נפח גאות של 10 מיליליטר לקילוגרם, קצב של 70 מחזורים לדקה, ו-PEEP של 3 סנטימטרים H2O.צנתור עורק הירך וורידים. אז, לחשוף את משולש הירך דרך חתך קטן, כ 1.5 ס"מ באזור המפשעה. לזהות ולבודד את כלי הירך.עבור הליך זה, השתמש במיקרוסקופ סטריאו פי 3.2 הגדלה. הניחו שתי ליגטורות משי 4.0 מתחת לכלי הדם, הווריד או העורק, האחת בנפרד והשנייה בסמיכות. סוגרים את הליגטורה הדיסטלית ביותר ומניחים קשר מותאם מראש ברצועה הפרוקסימלית ומושכים.הכנס את הקטטר דרך חתך קטן מוכן בכלי הדם. קבע את הצינורית כדי למנוע נקע. חבר את צנתר העורק למתמר לחץ ולמערכת ניטור סימנים חיונית כדי לרשום את ה- MAP.המתמר צריך להיות ממוקם בגובה הלב של החיה. חבר את צנתר הקשתות למתמר לחץ ולמערכת ניטור סימנים חיונית לרישום ה- MAP. המתמר צריך להיות ממוקם בגובה הלב של החיה.מניחים את קטטר המזרק 3 מיליליטר לתוך הווריד, במטרה הידרציה ו exsanguination בעת הצורך. השראת הלם דימומי. דרך ציר ורידי ועם מזרק heparinized, להסיר כמויות קטנות של דם עד ערכי MAP של כ 50 מ"מ כספית הם הגיעו.לפיכך, הקמת הלם דימומי. הערה, aliquots של דם יש לקחת במרווחים של 10 דקות. שמור על לחץ יציב על כ 50 מ"מ של כספית לתקופה של 360 דקות.לשם כך, להסיר או להוסיף aliquots של דם אם הלחץ עולה או יורד בהתאמה. שים מקור חום בקרבת מקום כדי למנוע היפותרמיה. בסוף הפרוטוקול, יש לקצור את בלוק הריאתי בקיבולת ריאה כוללת לאיסוף, ולהקפיא במהירות הבזק בחנקן נוזלי או להניח בתמיסת קיבוע למחקרים נוספים.זירוז מוות במחזור הדם. כדי לגרום למוות במחזור הדם, לנהל 150 מיליגרם לכל קילוגרם של נתרן thiopental דרך קו ורידי. לאחר מכן, כבה את מערכת האוורור.שים לב לירידה ההדרגתית ב- MAP. החיה צריכה להישאר איסכמיה חמה בטמפרטורת החדר במשך 180 דקות. בסוף הפרוטוקול, חברו מחדש את הריאות למכונת ההנשמה המכנית, וקצרו את הבלוק הריאתי בקיבולת ריאתית כוללת לאיסוף.או להקפיא הבזק בחנקן נוזלי, או להניח בתמיסת קיבוע למחקרים נוספים. השראת מוות מוחי. הניחו את החולדה במצב נוטה.הסר את העור מהגולגולת באמצעות מספריים כירורגיים. קדח קידוח בקוטר 1 מילימטר, 2.8 מ"מ קדמי, 10 מ"מ גחוני ו-1.5 מ"מ רוחבי לתפר הסגיטלי. הכניסו את כל צנתר הבלון לחלל הגולגולת, וודאו שהבלון ממולא מראש במי מלח, 500 מיקרוליטר.בעזרת מזרק, במהירות לנפח את הצנתר. אשר מוות מוחי על ידי התבוננות בגובה פתאומי של MAP. רפלקס קושינג, היעדר רפלקסים, מידריאזיס דו צדדי ודום נשימה.לאחר האישור, יש להפסיק את ההרדמה ולהשאיר את בעל החיים על הנשמה מכנית למשך 360 דקות. הניחו מקור חום בקרבת מקום כדי למנוע היפותרמיה. בסוף הפרוטוקול יש לקצור את הבלוק הריאתי בקיבולת ריאתית כוללת לאיסוף. תוצאות.לאחר החדרת קטטר, קבוצת המוות המוחי חוותה עלייה פתאומית ברמות לחץ הדם. שיא יתר לחץ דם הוא אירוע מוזר הקשור ללחץ תוך גולגולתי מוגבר, והוא יכול להיחשב עדות ראשונה להקמת מוות מוחי. לחץ שיא זה לווה בירידה מהירה ב- MAP.לחץ דם נמוך נמשך כ -50 דקות, ולאחר מכן, רמות MAP חזרו לערכים קרובים לאלה בנקודת ההתחלה. שלא כמו בקבוצת המוות המוחי, הירידה ב-MAP בקבוצת ההלם הדימומי קשורה לנסיגה של אליציטוטים בדם ב-10 הדקות הראשונות של הניסוי. הלם היפו-וולמי נשמר במשך 360 דקות.שש שעות לאחר תחילת ההלם הדימומי, בעלי חיים הפגינו עמידות מוגברת לרקמת הריאה, ואחריה היענות מופחתת למערכת הנשימה. כדי להעריך את השינויים בבצקת ריאות נבדק יחס משקל רטוב ליבש. בהקשר זה, מוות מוחי הראה בצקת גדולה יותר בהשוואה לקבוצת ההלם הדימום והמוות במחזור הדם.לבסוף, קבוצת הלם דימומי הייתה קשורה למספר כולל מוגבר של לויקוציטים מערכתיים בהשוואה לערכי הבסיס, וביחס לקבוצת המוות המוחי. זה לווה ברמות ביטוי גבוהות יותר של IL1 בטא בקבוצת המוות המוחי ובקבוצת ההלם הדימומי מאשר במוות במחזור הדם. קבוצת ההלם הדימומי הראתה גם רמות גבוהות יותר של TNF אלפא בהשוואה לקבוצת מוות מוחי וקבוצת מוות במחזור הדם.המודלים של תורמי איברים המתוארים כאן הם כלים פוטנציאליים בחקר השינויים הקשורים למתודולוגיות שונות של קצירת שתלים, ויכולים לספק אמצעים שבאמצעותם ניתן להשיג הבנה מלאה של ההשפעה של איכות איברים אלה על התוצאות לאחר ההשתלה. בהתחשב ביכולת השחזור והאמינות של המתודולוגיות המוצגות כאן.

study-of-experimental-organ-donation-models-for-lung-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Ex-Vivo ריאות זלוף (EVLP) אפשר השתלת ריאות בבני אדם להפוך לזמינה יותר בכך שיאפשר את היכולת להעריך איברים ולהרחיב את המאגר התורם. כאן אנו מתארים את הפיתוח של תכנית EVLP חולדה וחידודים המאפשרים למודל לשחזור להתרחבות עתידית.

שיטה של ​​מבודד<em&gt; Ex Vivo</em&gt; ריאות זלוף במודל עכברוש: ​​לקחים מפיתוח תכנית EVLP עכברוש

כאן, אנו מציגים אופטימיזציות למודל השתלת ריאות של חולדות המשמשות לשיפור התוצאות. אנו מספקים מדריך מידות לאזיקים המבוסס על משקל הגוף, אסטרטגיית מדידה לבירור החלל הבין-קוסטליהרביעי , ושיטות לסגירת פצעים ואיסוף נוזלים ורקמות BAL (שטיפת סימפונות).

מודל השתלת ריאה של חולדה של איסכמיה חמה / פגיעה ברפרפוזיה: אופטימיזציות לשיפור התוצאות

פרוטוקול זה מתאר מודל חזירי צעיר של השתלת ריאה שמאלית אורתוטופית המיועד לשימוש במחקר ESLP. דגש נעשה על טכניקות הרדמה וכירורגיה, כמו גם צעדים קריטיים ופתרון בעיות.

השתלה אורתוטופית ריאה שמאלית במודל חזיר צעיר עבור ESLP

הפרוטוקול משלב טכניקת התאוששות מהירה של קירור ריאות עם זילוח אזורי נורמתרמי בטני לרכישת שתל בטן בתורמי אסיסטולה מבוקרים, שהיא שיטה בטוחה ושימושית להרחבת מאגר התורמים.

רכש התאוששות ריאה מהירה בשילוב עם זילוח אזורי נורמום בטני בתרומה מבוקרת לאחר מוות במחזור הדם

הפרוטוקול מתאר מודל של תרומה של בעלי חיים גדולים (חזיריים) לאחר מוות במחזור הדם, ואחריו זילוח אזורי נורמתרמי של בית החזה, המדמה באופן הדוק את התרחיש הקליני בהשתלת לב, ויש לו פוטנציאל להקל על מחקרים ואסטרטגיות טיפוליות.

מודל תרומה של בעלי חיים גדולים לאחר מוות במחזור הדם וזילוח אזורי נורממי להערכת לב

כאן, אנו מתארים את השלבים הדרושים להקמת מודל EVLP של חולדות ומראים את הפרופיל הדלקתי הקשור לריאות המועברות. המטרה היא להפיץ ידע וחוויות על מודל EVLP של חולדות, ולאפשר הבנה אינטגרלית של התגובות הביולוגיות הקשורות לטכניקה מהפכנית זו.

הקמת מודל חולדה לזלוף ריאות ex vivo לתובנות תרגומיות בהשתלת ריאות

המטרה היא לפתח מודל חדש של זלוף ריאות ex vivo (EVLP) בחולדות שיכול לשמור על תפקוד ריאות עקבי במשך 4 שעות לאורך EVLP ולספק לתעשייה פרטי יישום שיציע שיטה יציבה ליישום EVLP על מודלים של מכרסמים.

הקמת מערכת זילוף ריאות ex vivo חדשה לריאות חולדות לאחר מוות במחזור הדם

מאמר זה מתאר כיצד ליצור ריאות עכבר מהונדסות ביולוגית באמצעות שיטות דה-סלולריזציה ורה-סלולריזציה. הוא גם מפרט השתלת ריאות אורתוטופית לאחר מכן.

השתלת ריאות מהונדסות ביולוגית באמצעות ריאות עכבר נטולות תאים ותאי אנדותל אנושיים ראשוניים

פרוטוקול זה מתאר טכניקה משופרת להשתלת ריאה שמאלית אורתוטופית בחולדות, תוך התמקדות בהפחתת קושי תפעולי ושיפור שיעורי ההישרדות.

השתלת ריאה שמאלית אורתוטופית בחולדות

עכברים שימשו כמודל לחקר צורות רבות של השתלה, כולל השתלת קרנית.  אנו מתארים בדוח זה מודל עכברי להשתלת קרנית חריפה ומאוחרת כאחד.

השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של Solid השתלות איברים

חקור מודלים ניסיוניים לתרומת איברים להשתלת ריאות בעכברושים. השיטה משווה תהליכי דלקת ומחלות פתולוגיות בין מודלי מוות מוחי, מוות מחזורי והלם המורגי.

חקר מודלים ניסיוניים לתרומת איברים להשתלת ריאות

גלה סרטונים נוספים