Name: הדמיה וסקולרית עמוקה בעין עם אולטרסאונד משופר בזרימה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-10-04T14:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: למד הדמיה וסקולרית תלת-ממדית בעין באמצעות אולטרסאונד משופר בזרימה ללא חומרי ניגוד. השיטה מאפשרת צפייה במבנים עמוקים מאחורי הרשתית המפיגמנטית בדגי זהב ובמינים בעלי תאי דם אדומים גרעיניים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו קיבלה מימון מקרן קרלסברג (CF17-0778; CF18-0658), קרן לונדבק (R324-2019-1470; R346-2020-1210), קרנות Velux (00022458), קרן A.P. Møller לקידום מדעי הרפואה, תוכנית המחקר והחדשנות Horizon 2020 של האיחוד האירופי במסגרת הסכם המענקים מארי סקודובסקה-קירי (מס ' 754513) וקרן המחקר של אוניברסיטת ארהוס.

הפרוטוקול שלהלן בוצע באישור הפיקוח הדני לניסויים בבעלי חיים בתוך משרד המזון, החקלאות והדיג הדני, מינהל הווטרינריה והמזון הדני (היתר מספר 2016-15-0201-00835).
1. אמצעי הרדמה ואולטרסאונד
<ol><li>להרדים את חיית המחקר. הערה: סוג ומינון של הרדמה מתאימה תלויים מאוד במינים. באופן כללי, הרדמה מבוססת טבילה כגון MS-222 (אתיל 3-aminobenzoate מתנסולפוניק חומצה), בנזוקאין (אתיל 4-aminobenzoate), ו propofol (2,6-diisopropyl פנול) שימושיים דגים ודו-חיים אשר סופג בקלות את ההרדמה על זימים או עור (למשל, 0.05 מ"ג· L-1 בנזוקאין פורל קשת בענן). מגוון של תרכובות מומסות שניתן לנהל דרך הווריד, תוך שרירית, תוך שרירית, תוך-אפריטוני זמין עבור מי שפיר, כמו גם הרדמה על בסיס גז. אלפקסלון מנוהל תוך שרירית שימושי בזוחלים (למשל, 30 מ"ג-ק"ג-1 בלטאות), ואיזופלוראן המנוהל כגז שימושי בציפורים (למשל, 2% באוויר ליונים). עיין בספרות שפורסמה30,31,32 לקבלת סקירה מלאה של הרדמה זמינה בין מינים.</li>
	<li>בדוק רפלקסים בבעלי החיים כדי לאשר רמה אופטימלית של הרדמה. ודא כי החיה היא ללא תנועה לחלוטין במהלך ההליך כמו הליך אולטרסאונד משופרת זרימה רגישה רעש תנועה.<ol>
<li>הרדמה עמוקה מדי יכולה לשנות את דפוסי זרימת הדם, אז לנהל טיטרציה מינון בשלב ההפעלה של ניסוי.</li>
		<li>הגדל את מינון ההרדמה בשלבים ולבחון את זרימת הדם בעין בסיוע מצב בהירות פשוט (B-mode) אולטרסאונד. הערה: רמה אופטימלית של הרדמה מתקבלת כאשר החיה היא ללא תנועה (למעט נשימה) עם זרימת דם עינית גלויה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>אם סוג /מינון של הרדמה אינו מתירני לתנועות נשימה, אז להבטיח אוורור נאות של החיה, למשל, באמצעות משאבת אוויר כדי לחמצן את המים עבור מינים מימיים או מכונת הנשמה עבור מינים נושמי אוויר.</li>
	<li>מקם את החיה בתנוחה המאפשרת גישה ישירה מלמעלה לעין. הערה: בהתאם למינים, זה יכול להיות במצב סופי או לרוחב. זה יכול להיות שימושי כדי לבנות התקן החזקה פשוט באמצעות חתיכה קטנה של מתכת לא תגובתית (למשל, נירוסטה) וגומיות רופפות (ראה איור 1).</li>
	<li>מניחים מדיום אולטרסאונד מתאים על העין של החיה. אם העפעפיים קנה המידה (אולטרסאונד אטום) לכסות את העין, ואז להזיז אותם בעדינות עם צמר גפן ספוגית. הערה: עבור מינים ימיים, אמצעי האולטרסאונד הטוב ביותר הוא מי טנק נקיים שבהם החיה בדרך כלל חיה. עבור מינים יבשתיים, כמות נדיבה של ג'ל אולטרסאונד מבטיח תנועות חופשיות והדמיה של מתמר אולטרסאונד (כלומר, בדיקה מערך ליניארי) על פני השטח כולו של העין. משחה וטרינרית על העין הנגדית נדרשת עבור מינים יבשתיים.</li>
</ol>2. רכישת תמונה אולטרסאונד עינית 2D ו 3D
<ol><li>מקם את המדיאלי מתמר אולטרסאונד לעין בכיוון הגב / הגחון או rostral / caudal בהתאם לכיוון התמונה הרצוי.</li>
	<li>במצב B, עם עומק שדה מרבי, דמיינו את החלק המדיאלי והעמוק ביותר של העין וודאו שכל מבני העניין גלויים בשדה התמונה. הערה: במינים מסוימים, העדשה הגבישית תופסת חלק גדול יחסית של הומור זגוגית, אשר עשוי לספוג את אולטרסאונד, במיוחד בתדרים גבוהים יותר.</li>
	<li>תרגם באיטיות את המתמר לכל צד בעת בדיקת התמונות בזמן אמת. ודא שכל מבני העניין גלויים בשדה התמונה; אם לא, עבור למתמר עם תדירות נמוכה יותר ועומק שדה גדול יותר. הערה: התדרים המרכזיים הבאים מאפשרים את עומק השדה המרבי הבא: 21 מגה-הרץ: 3 ס"מ, 40 מגה-הרץ: 1.5 ס"מ, 50 מגה-הרץ: 1 ס"מ (ראו טבלה 1). עם זאת, עומק מרבי זה של ערכי שדה יכול להיות נמוך משמעותית אם העין מכילה מסוידים או מבנים אטומים אולטרסאונד אחרים.</li>
	<li>התאם עומק תמונה, היסט עומק (מרחק מראש התמונה למבנה העניין), רוחב התמונה, כמו גם מספר ומיקום של אזורי מוקד כדי לכסות את אזור העניין הרצוי בכל שלושת הממדים המרחביים (לדוגמה, עומק תמונה של 1 ס"מ, היסט עומק 2 מ"מ, רוחב תמונה של 1 ס"מ, אזור מוקד אחד). הערה: למרות שמות ספציפיים של לחצנים המתאימים פרמטרים אלה עשוי להשתנות בין מערכות אולטרסאונד, רוב המערכות יהיו לחצנים עם שמות לוגיים עבור התאמות אלה. הגדרות פרמטר תמונה אלה משפיעות בדרך כלל על הטווח של רזולוציות זמניות אפשריות של רכישת אולטרסאונד.</li>
	<li>הגדר קצב פריימים בטווח של 50-120 מסגרות·s-1. הערה: הרזולוציה הזמנית (כלומר, מרווח הזמן בין סריקות B רצופות) חייבת להיות מספקת כדי להציג שונות גדולה בעוצמת הפיקסלים בכלי הדם המדומיים, כלומר, הרזולוציה הזמנית אינה יכולה להיות גבוהה מדי. מצד שני, כדי להשלים הקלטה תלת-ממדית מלאה של העין בזמן סביר, הרזולוציה הזמנית לא יכולה להיות נמוכה מדי. רזולוציה זמנית הנעה בין 50-120 מסגרות-1 מתאימה בדרך כלל להליך המשופר בזרימה ברוב המינים. על כמה מערכות אולטרסאונד, רזולוציה זמנית רצויה זו ניתן להשיג על ידי מעבר בין "הדמיה כללית" (רזולוציה מרחבית גבוהה / נמוכה זמנית) ו "קרדיולוגיה" (רזולוציה מרחבית נמוכה / רזולוציה זמנית גבוהה) מצבים.</li>
	<li>התאם רווח דו-ממדי לרמה (~ 5 dB), כך שמבנים אנטומיים נראים רק ברכישת מצב B רק כדי להגדיל את יחס האות לרעש בשחזור המשופר בזרימה הבאה.</li>
	<li>כדי להשיג תמונה דו-ממדית משופרת בזרימה במיקום פרוסה יחיד, תרגם את המתמר למיקום זה והמשיך בשלב 3.1.</li>
	<li>כדי לרכוש הקלטה תלת-ממדית של אזור מעניין שלם, למשל, הרשתית, תרגם את המתמר לקיצוניות אחת של אזור העניין.<ol>
<li>כדי לקבוע את המיקום המדויק של הקצה הקיצוני של אזור העניין, הגדל את הרווח הדו-ממדי בקצרה.</li>
		<li>לאחר השלמת מיקום המתמר הנכון, הפחת את הרווח הדו-ממדי לפני ההקלטה כדי להבטיח יחס אות לרעש מרבי בשחזור המשופר בזרימה לאחר מכן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>עבור כל שלב (פרוסה) בהקלטה התלת-ממדית, רכשו ≥100 מסגרות (באופן מיטבי ≥1000 פריימים).</li>
	<li>באמצעות מיקרו-מניפולטור או מנוע מתמר מובנה, תרגם את המתמר על פני כל אזור העניין בשלבים של, למשל, 25 מיקרומטר או 50 מיקרומטר (זכור לציין את גודל הצעד) ולחזור על רכישת המסגרות ≥100 עבור כל שלב.</li>
	<li>המתת חסד של חיית המחקר על פי הנחיות הטיפול בבעלי חיים של המוסד.</li>
</ol>3. שחזור תמונה משופר בזרימה
<ol><li>יצא את ההקלטות להדמיה דיגיטלית ולתקשורת בפורמט קובץ של רפואה (DICOM) (מעט-אנדיאן).</li>
	<li>כדי להפיק תמונה אחת משופרת בזרימה המבוססת על ≥100 מסגרות (T) הקלטה של סינים, חשב את סטיית התקן ברמת הפיקסלים (STD(x,y)) באמצעות הנוסחה: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62986/62986eq01.jpg"> כאשר It(x,y) הוא עוצמת הפיקסל בקואורדינטת הפיקסלים (x,y) בזמן t, ו- Īt(x,y) הוא הערך הממוצע האריתמטי של I לאורך זמן.</li>
	<li>חזור על שלב 3.2 עבור כל פרוסה בהקלטה התלת-ממדית.</li>
	<li>כדי להפוך את תהליך חישוב STD ושחזור התמונה לאוטומטי עבור פרוסות מרובות בהקלטה תלת-ממדית, בצע פעולה זו במצב אצווה באמצעות, לדוגמה, ImageJ וקובץ המאקרו המשלים (קובץ משלים 1).</li>
	<li>שלבו את כל הפרוסות המשוחזרות למחסנית תמונה אחת (הפקודה 'תמונות לערימה ' ב-ImageJ).</li>
	<li>ציין עובי פרוסה מגודל השלב המשמש במהלך הרכישה (הפקודה מאפיינים ב- ImageJ).</li>
	<li>שמור את מחסנית התמונות כקובץ TIF תלת-ממדי. הערה: הקלטות תלת מימדיות משוקלל זרימה של כלי דם עיניים יכולות לשמש לאחר מכן ליצירת עיבודי נפח ולבניית מודלים אנטומיים דיגיטליים ופיזיים של מבני כלי דם של העין. אפשרויות עיבוד תמונה אלה חורגות מהטווח של פרוטוקול זה; עיין במאמרים שפורסמו בעבר לקבלת פרטים נוספים33,34,35.</li>
</ol>

<ol><li>Yu, C. Q., Schwab, I. R., Dubielzig, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feeding+the+vertebrate+retina+from+the+Cambrian+to+the+Tertiary%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Zoology%22%5BJournal%5D)">Feeding the vertebrate retina from the Cambrian to the Tertiary.</a> Journal of Zoology. 278 (4), 259-269 (2009).</li>
<li>Yu, D. Y., Cringle, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxygen+distribution+and+consumption+within+the+retina+in+vascularised+and+avascular+retinas+and+in+animal+models+of+retinal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Oxygen distribution and consumption within the retina in vascularised and avascular retinas and in animal models of retinal disease.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 20 (2), 175-208 (2001).</li>
<li>Country, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+metabolism%3A+A+comparative+look+at+energetics+in+the+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Retinal metabolism: A comparative look at energetics in the retina.</a> Brain Research. 1672, 50-57 (2017).</li>
<li>Damsgaard, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+oxygen+supply+shaped+the+functional+evolution+of+the+vertebrate+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Retinal oxygen supply shaped the functional evolution of the vertebrate eye.</a> Elife. , 8(2019).</li>
<li>Buttery, R. G., Hinrichsen, C. F. L., Weller, W. L., Haight, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+thick+should+a+retina+be%3F+A+comparative+study+of+mammalian+species+with+and+without+intraretinal+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">How thick should a retina be? A comparative study of mammalian species with and without intraretinal vasculature.</a> Vision Research. 31 (2), 169-187 (1991).</li>
<li>Ames, A., Li, Y., Heher, E., Kimble, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Energy+metabolism+of+rabbit+retina+as+related+to+function%3A+high+cost+of+Na%2B+transport%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Energy metabolism of rabbit retina as related to function: high cost of Na+ transport.</a> The Journal of Neuroscience. 12 (3), 840-853 (1992).</li>
<li>Chase, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Evolution+of+retinal+vascularization+in+mammals%3A+A+comparison+of+vascular+and+avascular+retinae%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">The Evolution of retinal vascularization in mammals: A comparison of vascular and avascular retinae.</a> Ophthalmology. 89 (12), 1518-1525 (1982).</li>
<li>Johnson, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ophthalmoscopic+studies+on+the+eyes+of+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Philosophical+Transactions+of+the+Royal+Society+of+London.+Series+B%2C+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Ophthalmoscopic studies on the eyes of mammals.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological Sciences. 254 (794), 207-220 (1968).</li>
<li>Johnson, G. L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contributions+to+the+comparative+anatomy+of+the+mammalian+eye%2C+chiefly+based+on+ophthalmoscopic+examination%5BTitle%5D)+AND+%22Philosophical+Transactions+of+the+Royal+Society+of+London.+Series+B%2C+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Contributions to the comparative anatomy of the mammalian eye, chiefly based on ophthalmoscopic examination.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological Sciences. 194 (194-206), 1-82 (1901).</li>
<li>Rodriguez-Ramos Fernandez, J., Dubielzig, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+comparative+anatomy+of+the+family+Rodentia%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Ocular comparative anatomy of the family Rodentia.</a> Veterinary Ophthalmology. 16, 94-99 (2013).</li>
<li>Copeland, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+vascularization+of+the+teleost+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Topics+in+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Functional vascularization of the teleost eye.</a> Current Topics in Eye Research. 3, 219-280 (1980).</li>
<li>Meyer, D. B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMeyer%2C+DB+%22The+Visual+System+in+Vertebrates.+Handbook+of+Sensory+Physiology%22">The Visual System in Vertebrates. Handbook of Sensory Physiology</a>. Crescitelli, F. 7, Springer. Berlin, Heidelberg. (1977).</li>
<li>Potier, S., Mitkus, M., Kelber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+adaptations+of+diurnal+and+nocturnal+raptors%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Cell+%26+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Visual adaptations of diurnal and nocturnal raptors.</a> Seminars in Cell & Developmental Biology. 106, 116-126 (2020).</li>
<li>Wittenberg, J. B., Wittenberg, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+secretion+of+oxygen+into+the+eye+of+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Active secretion of oxygen into the eye of fish.</a> Nature. 194, 106-107 (1962).</li>
<li>Damsgaard, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+and+evolution+of+oxygen+secreting+mechanism+in+the+fisheye%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Biochemistry+and+Physiology%22%5BJournal%5D)">Physiology and evolution of oxygen secreting mechanism in the fisheye.</a> Comparative Biochemistry and Physiology. 252, 110840(2021).</li>
<li>Damsgaard, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+acidification+mechanism+for+greatly+enhanced+oxygen+supply+to+the+fish+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A novel acidification mechanism for greatly enhanced oxygen supply to the fish retina.</a> Elife. 9, (2020).</li>
<li>Wittenberg, J. B., Haedrich, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+choroid+rete+mirabile+of+the+fish+eye.+II.+Distribution+and+relation+to+the+pseudobranch+and+to+the+swimbladder+rete+mirabile%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">The choroid rete mirabile of the fish eye. II. Distribution and relation to the pseudobranch and to the swimbladder rete mirabile.</a> Biological Bulletin. 146 (1), 137-156 (1974).</li>
<li>Wittenberg, J. B., Wittenberg, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+choroid+rete+mirabile+of+the+fish+eye.+I.+Oxygen+secretion+and+structure%3A+comparison+with+the+swimbladder+rete+mirabile%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">The choroid rete mirabile of the fish eye. I. Oxygen secretion and structure: comparison with the swimbladder rete mirabile.</a> Biological Bulletin. 146 (1), 116-136 (1974).</li>
<li>Berenbrink, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+reconstructions+of+evolving+physiological+complexity%3A+O2+secretion+in+the+eye+and+swimbladder+of+fishes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Historical reconstructions of evolving physiological complexity: O2 secretion in the eye and swimbladder of fishes.</a> Journal of Experimental Biology. 210, Pt 9 1641-1652 (2007).</li>
<li>Berenbrink, M., Koldkjaer, P., Kepp, O., Cossins, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+oxygen+secretion+in+fishes+and+the+emergence+of+a+complex+physiological+system%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Evolution of oxygen secretion in fishes and the emergence of a complex physiological system.</a> Science. 307 (5716), 1752-1757 (2005).</li>
<li>Keane, P. A., Sadda, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+imaging+in+the+twenty-first+century%3A+State+of+the+art+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Retinal imaging in the twenty-first century: State of the art and future directions.</a> Ophthalmology. 121 (12), 2489-2500 (2014).</li>
<li>Yung, M., Klufas, M. A., Sarraf, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+applications+of+fundus+autofluorescence+in+retinal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Retina+and+Vitreous%22%5BJournal%5D)">Clinical applications of fundus autofluorescence in retinal disease.</a> International Journal of Retina and Vitreous. 2 (1), 12(2016).</li>
<li>Ang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+coherence+tomography+angiography%3A+a+review+of+current+and+future+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+Archive+for+Clinical+and+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Optical coherence tomography angiography: a review of current and future clinical applications.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 256 (2), 237-245 (2018).</li>
<li>Spaide, R. F., Koizumi, H., Pozonni, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+depth+imaging+spectral-domain+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Enhanced depth imaging spectral-domain optical coherence tomography.</a> American Journal of Ophthalmology. 146 (4), 496-500 (2008).</li>
<li>Shen, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging+of+tissue+and+vascular+layers+in+the+cat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Magnetic+Resonance+Imaging%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging of tissue and vascular layers in the cat retina.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 23 (4), 465-472 (2006).</li>
<li>Tan, G. X., Jamil, M., Tee, N. G., Zhong, L., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+reconstruction+of+chick+embryo+vascular+geometries+using+non-invasive+high-frequency+ultrasound+for+computational+fluid+dynamics+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">3D reconstruction of chick embryo vascular geometries using non-invasive high-frequency ultrasound for computational fluid dynamics studies.</a> Annals of Biomedical Engineering. 43 (11), 2780-2793 (2015).</li>
<li>Ho, S., Tan, G. X. Y., Foo, T. J., Phan-Thien, N., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+dynamics+and+fluid+dynamics+of+the+HH25+chick+embryonic+cardiac+ventricle+as+revealed+by+a+novel+4D+high-frequency+ultrasound+imaging+technique+and+computational+flow+simulations%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Organ dynamics and fluid dynamics of the HH25 chick embryonic cardiac ventricle as revealed by a novel 4D high-frequency ultrasound imaging technique and computational flow simulations.</a> Annals of Biomedical Engineering. 45 (10), 2309-2323 (2017).</li>
<li>Dittrich, A., Thygesen, M. M., Lauridsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2D+and+3D+echocardiography+in+the+Axolotl+%28Ambystoma+Mexicanum%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">2D and 3D echocardiography in the Axolotl (Ambystoma Mexicanum).</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (141), e57089(2018).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Split-spectrum+amplitude-decorrelation+angiography+with+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Split-spectrum amplitude-decorrelation angiography with optical coherence tomography.</a> Optics Express. 20 (4), 4710-4725 (2012).</li>
<li>Clarke, K. W., Trim, C. M., Trim, C. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aClarke%2C+KW+%22Veterinary+Anaesthesia+E-Book%22">Veterinary Anaesthesia E-Book</a>. , Elsevier Health Sciences. (2013).</li>
<li>Flecknell, P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFlecknell%2C+P+%22Laboratory+Animal+Anaesthesia%22">Laboratory Animal Anaesthesia</a>. , Elsevier Science & Technology. (2015).</li>
<li>West, G., Heard, D., Caulkett, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWest%2C+G+%22Zoo+Animal+and+Wildlife+Immobilization+and+Anesthesia%22">Zoo Animal and Wildlife Immobilization and Anesthesia</a>. , John Wiley & Sons, Inc. (2014).</li>
<li>Lauridsen, H., Hansen, K., Nørgård, M. Ø, Wang, T., Pedersen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+tissue+to+silicon+to+plastic%3A+three-dimensional+printing+in+comparative+anatomy+and+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22Royal+Society+Open+Science%22%5BJournal%5D)">From tissue to silicon to plastic: three-dimensional printing in comparative anatomy and physiology.</a> Royal Society Open Science. 3 (3), 150643(2016).</li>
<li>Lauridsen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inside+out%3A+Modern+imaging+techniques+to+reveal+animal+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Inside out: Modern imaging techniques to reveal animal anatomy.</a> PLoS One. 6 (3), 17879(2011).</li>
<li>Ruthensteiner, B., Heß, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embedding+3D+models+of+biological+specimens+in+PDF+publications%5BTitle%5D)+AND+%22Microscopy+Research+and+Technique%22%5BJournal%5D)">Embedding 3D models of biological specimens in PDF publications.</a> Microscopy Research and Technique. 71 (11), 778-786 (2008).</li>
<li>Damsgaard, C., Lauridsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+vascular+imaging+in+the+eye+with+flow-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Deep vascular imaging in the eye with flow-enhanced ultrasound.</a> bioRxiv. , 447055(2021).</li>
<li>Mueller, R. L., Ryan Gregory, T., Gregory, S. M., Hsieh, A., Boore, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+size%2C+cell+size%2C+and+the+evolution+of+enucleated+erythrocytes+in+attenuate+salamanders%5BTitle%5D)+AND+%22Zoology%22%5BJournal%5D)">Genome size, cell size, and the evolution of enucleated erythrocytes in attenuate salamanders.</a> Zoology. 111 (3), 218-230 (2008).</li>
<li>Greis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+evaluation+of+microvascular+blood+flow+by+contrast-enhanced+ultrasound+%28CEUS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Hemorheology+and+Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Quantitative evaluation of microvascular blood flow by contrast-enhanced ultrasound (CEUS).</a> Clinical Hemorheology and Microcirculation. 49, 137-149 (2011).</li>
<li>Urs, R., Ketterling, J. A., Tezel, G., Silverman, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrast-enhanced+plane-wave+ultrasound+imaging+of+the+rat+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Contrast-enhanced plane-wave ultrasound imaging of the rat eye.</a> Experimental Eye Research. 193, 107986(2020).</li>
<li>Walls, G. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWalls%2C+GL+%22The+vertebrate+eye+and+its+adaptive+radiation%22">The vertebrate eye and its adaptive radiation</a>. , Cranbrook Institute of Science. Michigan. (1942).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי לא קיימים אינטרסים משלימים.

הדמיה וסקולרית באמצעות אולטרסאונד משופר בזרימה מספקת שיטה חדשה להדמיה לא פולשנית של כלי הדם של העין המציעה מספר יתרונות על פני הטכניקות הנוכחיות אך יש לה מגבלות מהותיות. היתרון העיקרי של אולטרסאונד משופר זרימה הוא היכולת ליצור אנגיוגרפיות עינית עם עומק של שדה העולה על אפיתל הפיגמנט הרשתית, אשר מגביל את עומק השדה בטכניקות אופטיות. בהדמיית אולטרסאונד, רזולוציה מרחבית ועומק השדה נקבעים בסופו של דבר על ידי תדר מתמר אולטרסאונד, שבו תדרים גבוהים יותר להגדיל את הרזולוציה המרחבית, אבל על חשבון עומק רדוד יותר של שדה, ובכך הבחירה ...

חילוף החומרים הגבוה ברשתית החוליות מטיל טרייד-אוף מהותי בין שני צרכים מנוגדים; קצבי זרימת דם גבוהים ונתיב אור נטול כלי דם. כדי למנוע הפרעה חזותית של זלוף תאי דם אדומים, הרשתית של כל בעלי החוליות מקבלת חמצן וחומרים מזינים באמצעות גיליון של נימים מאחורי קולטני האור, choriocapillaris1,2,3. עם זאת, מקור יחיד זה של חומרים מזינים וחמצן מטיל מגבלה דיפוזיה לעובי של הרשתית 4,5, כל כך הרבה מינים פעילים חזותית יש מגוון רחב של רשתות כלי דם משוכללים כדי לספק אספקת דם נוספת זה איבר פעיל מטבולית6. מיטות כלי דם אלה כוללות כלי דם המזיפים את שכבות הרשתית הפנימית ביונקים וכמה דגים4,7,8,9,10, כלי דם בצד הפנימי (הפונה לאור) של הרשתית הנמצאים בדגים רבים, זוחלים וציפורים4,11,12,13, וסידורי כלי דם נגד של כורואיד הדגים, רט הכורואידית mirabile, המאפשרת ייצור של לחצים חלקיים חמצן סופר אטמוספרי14,15,16,16,17,18,19,20. למרות זאת, נתיבים לא-כרוידליים נוספים אלה לאספקת חומרים מזינים ברשתית ממלאים תפקיד חיוני בתדלוק הדרישות המטבוליות של ראייה מעולה4, האנטומיה התלת-ממדית של מבני כלי דם אלה מובנת היטב, ומגבילה את הבנתנו את האבולוציה המורפולוגית של העין החוליתנית.
באופן מסורתי, אספקת הדם ברשתית נחקרה באמצעות טכניקות אופטיות, כגון פונדוס עיניים. קטגוריה זו של טכניקות מספקת מידע לא הרסני בעל תפוקה גבוהה על אנטומיה של כלי דם שאינם כרוידיאליים ברזולוציה גבוהה21 ולכן משמשת בקלות לאבחון קליני של חריגות במבנה כלי הרשתית22. עם זאת, אפיתל הפיגמנט הרשתית סופג את האור המועבר ומגביל את עומק הראייה בטכניקות אופטיות אלה, ומספק מידע מופחת על מבנה ותפקוד choroidal ללא שימוש בחומר ניגודיות21. מגבלות עומק דומות מנוסות בטומוגרפיה של קוהרנטיות אופטית (OCT). טכניקה זו יכולה ליצור אנגיוגרפיות fundus ברזולוציה גבוהה באמצעות גלי אור על חשבון טכני של חדירת עומק23, בעוד הדמיית עומק משופרת OCT יכול לדמיין את הכורואיד על חשבון איכות הדמיה ברשתית24. הדמיית תהודה מגנטית מתגברת על המגבלות האופטיות של עיניים ו- OCT ויכולה למפות שכבות כלי דם ברשתית, אם כי ברזולוציה נמוכה25. היסטולוגיה וטומוגרפיה מיקרו-מחשבתית (μCT) שומרות על הרזולוציה הגבוהה של הטכניקות האופטיות ומספקות מידע על מורפולוגיה של כלי דם שלם-עין4, אך שתי הטכניקות דורשות דגימת עיניים ולכן אינן אפשריות במרפאה או במינים נדירים או בסכנת הכחדה. כדי להתגבר על חלק מהמגבלות של טכניקות הדמיית רשתית מבוססות אלה, המחקר כאן מציג פרוטוקול אולטרסאונד על בעלי חיים מרדימים, שבו תנועת הדם ממופה בסיליקו על סדרה של סריקות אולטרסאונד דו מימדיות מרווחות באותה מידה המשתרעות על פני עין שלמה על ידי יישום טכניקה דומה כפי שתואר בעבר להדמיה עוברית ולב וכלי דם26,27, 28 ובאנגיוגרפיה OCT29. גישה זו מאפשרת יצירת אנגיוגרפיות עיניים עמוקות תלת-ממדיות לא פולשניות ללא שימוש בחומר ניגודיות ופותחת אפיקים חדשים למיפוי התפלגות זרימת הדם בעין על פני מינים שונים.

<table><tbody><tr><td>MS-222</td><td>Sigma</td><td>E10521-50G</td><td></td></tr><tr><td>בנזוקאין</td><td>סיגמא</td><td>E-1501</td><td></td></tr><tr><td>פרופופול</td><td>B בראון</td><td> 12260470_0320</td><td></td></tr><tr><td>Alfaxalon</td><td>Jurox</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Zoetis</td><td>50019100</td><td></td></tr><tr><td>סורק אולטרסאונד</td><td>VisualSonics</td><td>Vevo 2100</td><td></td></tr></tbody></table>

הדמיה וסקולרית עמוקה בעין עם אולטרסאונד משופר בזרימה

Deep Vascular Imaging in the Eye with Flow-Enhanced Ultrasound

הרשתית בתוך העין היא אחת הרקמות התובעניות ביותר בגוף ולכן דורשת שיעורים גבוהים של אספקת חמצן מאספקת דם עשירה. הלמינה הנימית של הכורואיד קוים את פני השטח החיצוניים של הרשתית והוא המקור השולט של חמצן ברוב הרשתיות החוליות. עם זאת, מיטת כלי דם זו מאתגרת לתמונה עם טכניקות אופטיות מסורתיות בשל מיקומה מאחורי הרשתית סופגת האור. כאן אנו מתארים טכניקת אולטרסאונד בתדר גבוה עם שיפור זרימה עוקב למיטות כלי דם עמוקות תמונה (0.5-3 ס"מ) של העין עם רזולוציה מרחבית גבוהה. שיטה לא פולשנית זו פועלת היטב במינים עם תאי דם אדומים מגורענים (מודלים שאינם יונקים ובעלי חיים עובריים). זה מאפשר דור של אנגיוגרפיות תלת מימדיות לא פולשניות ללא שימוש בחומרי ניגודיות, והוא אינו תלוי בזוויות זרימת הדם עם רגישות גבוהה יותר מאשר טכניקות הדמיית אולטרסאונד מבוססות דופלר.

טכניקת האולטרסאונד המשופרת בזרימה כדי לדמות מיטות וסקולריות של העין יכולה להיות מיושמת במגוון מינים וכיום נעשה בה שימוש ב-46 מינים שונים של בעלי חוליות (איור 1, טבלה 1). נוכחותם של תאי דם אדומים מגורענים בחולייתנים שאינם בוגרים-יונקים מספקת ניגודיות חיובית של דם זורם בהשוואה לרקמה סטטית בהקלטות סינים (קובץ משלים 2). עם זאת, כאשר מנתחים אותם על בסיס פריים אחר פריים, ההבחנה הברורה בין דם לרקמה הסובבת פחות ברורה (איור 2A). הליך שיפ...

אנו מציגים טכניקת אולטרסאונד לא פולשנית ליצירת אנגיוגרפיות תלת מימדיות בעין ללא שימוש בחומרי ניגודיות.

The retina within the eye is one of the most energy-demanding tissues in the body and thus requires high rates of oxygen delivery from a rich blood ...

טכניקת אולטרסאונד משופרת זרימה מאפשרת לנו לדמיין את כלי הדם של העין בשלושה ממדים, ללא שימוש של סוכני ניגודיות. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא היציבות שלה לדמיין את vesture, מאחורי הרשתית פיגמנטית, אשר מאתגר עם מספר טכניקות הדמיה אופטית. אנו מדגימים טכניקה זו בדגי זהב, אך ניתן ליישם אותה על כל המינים עם תאי דם אדומים מגורענים, מה שמאפשר לחוקרים לקבל תובנה על האבולוציה התפקודית של העיניים.טכניקה זו יכולה להיות מיושמת על ידי חוקרים עם הכשרה בסיסית בהדמיית אולטרסאונד, וטיפול בבעלי חיים. לאחר אישור רמה אופטימלית של הרדמה, מקם את החיה בתנוחה המאפשרת גישה ישירה מלמעלה, לעין. מניחים מדיום אולטרסאונד מתאים על העין של החיה.אם העפעפיים קנה המידה מכסים את העין, אז, להזיז אותם בעדינות עם צמר גפן. עבור בעלי חיים ימיים, מים עובדים היטב כמו מדיום אולטרסאונד, הבא, למקם את מתמר אולטרסאונד, מדיאלי לעין, או גחון הגב או אוריינטציה caudal rostral, בהתאם לכיוון התמונה הרצוי. במצב B, עם עומק מרבי של שדה, דמיינו את החלק האמצעי והעמוק ביותר של העין, כדי לוודא שכל מבני העניין גלויים בשדה התמונה.תרגם לאט את המתמר לכל צד, תוך בדיקת התמונות בזמן אמת. ודא שכל מבני העניין גלויים בשדה התמונה. אם לא, עבור למתמר בתדירות נמוכה יותר ובעומק שדה גדול יותר.התאם את עומק התמונה, היסט העומק, רוחב התמונה ומספר המיקום של אזורי המוקד, כדי לכסות את אזור העניין הרצוי בכל שלושת הממדים המרחביים. לאחר מכן, הגדר את קצב הפריימים בטווח של 50 עד 120 פריימים לשניה. לאחר מכן, התאם את הרווח הדו-ממדי לרמה, כך שהמבנים האנטומיים נראים רק ברכישת B-Mode כדי להגדיל את יחס האות לרעש בשחזור המשופר בזרימה לאחר מכן.לרכישת תמונה דו-ממדית משופרת בזרימה במיקום פרוסה יחיד, תרגם את המתמר למיקום זה והמשיך לשחזור תמונה משופר בזרימה. כדי לרכוש הקלטה תלת-ממדית של אזור מעניין שלם, תרגם את המתמר לקיצוניות אחת של אזור העניין. כדי לקבוע את המיקום המדויק של הקצה הקיצוני, להגדיל את הרווח 2D, בקצרה.לאחר שהמתמר ממוקם כראוי, הנמיך את הרווח הדו-ממדי לפני ההקלטה, כדי להבטיח יחס אות מרבי לרעש בשחזור המשופר בזרימה שלאחר מכן. עבור כל שלב או פרוסה בהקלטה התלת-ממדית, רכשו יותר מ-100 פריימים. לאחר מכן, באמצעות מיקרו מניפולטור או מנוע מתמר מובנה, לתרגם את המתמר על פני כל אזור העניין, בשלבים של 25 או 50 מיקרומטר, ולחזור על הרכישה של יותר מ 100 מסגרות עבור כל צעד.לבניית תמונות משופרות בזרימה, יצא את ההקלטות לתבנית הקובץ DICOM. להפקת תמונה אחת משופרת בזרימה המבוססת על הקלטה של יותר מ-100 סצינות פריימים, חשבו את סטיית התקן ברמת הפיקסלים באמצעות נוסחה זו וחזרו על החישוב עבור כל פרוסה בהקלטה התלת-ממדית. כדי להפוך את חישוב סטיית התקן ואת תהליך שחזור התמונה לאוטומטי עבור פרוסות מרובות בהקלטה בתלת-ממד, בצע פעולה זו במצב אצווה באמצעות ImageJ וקובץ ה- Script של המאקרו, המופיע בכתב היד של הטקסט.שלב את כל התמונות המשוחזרות למחסנית תמונות אחת באמצעות הפקודה 'תמונות לערום' ב-ImageJ. לאחר מכן, באמצעות הפקודה מאפיינים, מציין את עובי הפרוסה מגודל השלב המשמש במהלך הרכישה, ושמור את מחסנית התמונה כקובץ TIFF תלת-ממדי. נוכחותם של תאי דם אדומים מגורענים בחולייתנים בוגרים שאינם מודעים, מספקת ניגודיות חיובית של דם זורם, בהשוואה לרקמה סטטית בהקלטות סצינה.עם זאת, כאשר מנותחים כעת פריים אחר פריים, ההבחנה הברורה בין דם לרקמה שמסביב פחות ברורה. הליך זה של שיפור זרימת הדם, בעצם, אוסף הקלטה של נקודה רב-פעמית בחלל דו-ממדי, לתמונה אחת, כאשר בתנודות ערך האות הטבועות בפיקסלים, הממוקמות בדם זורם, ציון סטיית תקן גבוהה יותר, מאשר רקמה סטטית שמסביב, המייצרת ניגודיות חיובית. ברכישות תלת-ממדיות, ניתן לשלב פרוסות מקביליות מרובות עם ריווח ידוע בנתוני תמונה תלת-ממדיים.זה יכול לשמש לעיבוד נפח תלת מימדי ומידול אנטומי. הדמיית אולטרסאונד מבוססת דופלר מספקת גם את האפשרות לתמונת זרימת דם ספציפית, עם זאת, עם פחות רגישות מאשר שיטה זו. הליך אולטרסאונד משופר זרימה זה מאפשר הדמיה זרימת הדם במגוון של מינים עם תאי דם אדומים מגורענים.מיטות כלי דם עיני עמוק, כגון choroid rete mirabile בדגים מסוימים, ניתן לדמיין אם קיים במין. השיטה מוגבלת על ידי היעדר תאי דם אדומים מגורענים ביונקים, שבהם הליך שיפור הזרימה מייצר מידה מסוימת של ניגודיות זרימת הדם, אך לא ברור כמו במינים עם תאי דם אדומים מגורענים. אולטרסאונד משופר זרימה רגיש רעש תנועה.תנועות נשימה יכולות לגרום לטשטוש תמונה וחפצים, כגון שיפור גבול הרקמה. ניתן להשתמש בגאטינג פוטנציאלי או רטרוספקטיבי כדי להתאים לרעש תנועה. עבור רכישות דו-ממדיות ותלת-ממדיות, חיוני להגביל את תנועת החפצים הנגרמים על ידי בעל החיים הנע, עקב הרדמה לקויה על מתמר לא יציב להגדיר.התפתחותה של טכניקה זו, סללה את הדרך לבדיקה לא פולשנית של vivo של רשתות כלי דם עמוקים בעיני הרוב המכריע של בעלי החוליות, אשר בעלי אריתרוציטים גרעיניים.

deep-vascular-imaging-in-the-eye-with-flow-enhanced-ultrasound

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

זרימת דם ברשתית סה"כ נמדדה על ידי טומוגרפיה דופלר קוהרנטיות אופטית ותוכנה לדירוג אוטומטי למחצה.

טומוגרפיה אופטית קוהרנטיות דופלר של Circulation רשתית

במאמר זה, אנו מציגים שיטה לניתוח microvessels גידול in vivo באמצעות videomicroscopy הקרינה משופרת ניגודיות דינמי. שני פרמטרים כמותיים נרכשו: צפיפות תפקודית נימים המשקפת את כלי הדם של הגידול, וזליגת מדד המשקפת את הדליפות של קיר אנדותל.

בהדמית vivo של אנגיוגנזה גידול באמצעות הקרינה Confocal Videomicroscopy

ניתן להשתמש במיקרוסקופיה תוך-חיונית בבעלי חיים כדי להמחיש ולמדוד את קוטר כלי הדם ברשתית, מהירויות זרם הדם וזרימת הדם הכוללת ברשתית.

מדידות מיקרוסקופ וידאו תוך-חיוני של זרימת הדם ברשתית בעכברים

העבודה הנוכחית מתארת פרוטוקול חדש לביצוע אולטרסאונד לא פולשני בתדר גבוה והדמיה פוטו-אקוסטית מבוססת על מוח חולדה, כדי לדמיין ביעילות אזורים תת-קורטיקליים עמוקים ואת דפוסי כלי הדם שלהם על ידי הכוונת אותות על נקבי הגולגולת הנמצאים באופן טבעי בגולגולת בעלי חיים.

רקמת ריאה, כלי דם וחילוף חומרים בתדר גבוהים לא פולשני אולטראסאונד וphotoacoustic עכברוש Deep Brain Imaging

פרוטוקול זה מראה כיצד ליישם הדמיית דופלר אולטרה מהיר כדי לכמת את זרימת הדם. לאחר רכישה ארוכה של 1, לנסיין יש גישה לסרט של שדה הראייה המלא עם ערכי מהירות צירית עבור כל פיקסל בכל ≈0.3 אלפיות השנייה (בהתאם לזמן האולטרסאונד של הטיסה).

הדמיית זרימת דם עם דופלר אולטרה מהיר

פרוטוקול זה מתאר את ההליכים הניתוחיים והטכניים המאפשרים הדמיית פלואורסצנטיות מולטי-פוטונית בזמן אמת של מוח המכרסמים במהלך טיפולים ממוקדים באולטרסאונד ובמיקרו-חלוק כדי להגביר את חמיצוץ מחסום הדם - מוח.

מיקרוסקופיה מולטי-פוטונית תוך-וינטלית בזמן אמת להדמיית טיפולים ממוקדים באולטרסאונד ובמיקרו-חלוק כדי להגביר את חדחול מחסום הדם-מוח

אולטרסאונד דופלר מהיר במיוחד (UFUS) עם רזולוציה מרחבית גבוהה (100 מיקרומטר) ורגישות מייצג שיטת הדמיה לא פולשנית מתאימה להשגת סקירה איכותית מקיפה של כלי הדם בכבד. UFUS גם מקל על מדידות כמותיות של המיקרו-כלי דם, במטרה לשפר את ההבנה שלנו לגבי מנגנוני מחלות כלי דם.

הדמיה וכימות של כלי הדם בכבד של עכברים באמצעות אולטרסאונד דופלר מהיר במיוחד

כאן, אנו מתארים פרוטוקול למיקרוסקופ לוקליזציה של אולטרסאונד (ULM), שמשיג רזולוציה מרחבית של 12.5 מיקרומטר כדי לדמות את המיקרו-כלי דם במוח בחולדות. הוא מאפשר הדמיה מפורטת של כיוון ומהירות זרימת הדם, ומציע כלי רב עוצמה לקידום מחקרים על זרימת המוח והפרעות בכלי הדם.

הדמיה דו-ממדית ברזולוציה גבוהה של מיקרו-כלי דם במוח חולדה באמצעות מיקרוסקופ לוקליזציה של אולטרסאונד

מיקרוסקופ לוקליזציה אולטרסאונד (ULM) היא טכניקה שפותחה לאחרונה המאפשרת רמה חסרת תקדים של רזולוציה בהדמיית המיקרו-כלי דם in vivo. בעבודה זו, אנו מתארים בפירוט כיצד להשיג תמונות סופר-רזולוציה של כלי הדם במוח במכרסמים באמצעות פלטפורמת הדמיית אולטרסאונד פונקציונלית סטנדרטית המיועדת למחקר פרה-קליני.

מיקרוסקופ לוקליזציה אולטרסאונד למיפוי ברזולוציה גבוהה של מיקרו-כלי דם במוח המכרסמים

להערכת טיפולים בתאי גזע חדש חשוב הלא פולשני המסלול התאים מוזרקים in vivo. סרט הווידאו הזה יראה לכם כיצד לתייג אדם בתאי גזע mesenchymal ו עובריים עם סוכני תחמוצת ברזל מבוסס בניגוד in vivo עבור הבאים MR הדמיה in vivo.

תיוג hESCs ו hMSCs עם ברזל אוקסיד חלקיקים עבור פולשני של מעקב vivo עם MR Imaging

למד הדמיה וסקולרית תלת-ממדית בעין באמצעות אולטרסאונד משופר בזרימה ללא חומרי ניגוד. השיטה מאפשרת צפייה במבנים עמוקים מאחורי הרשתית המפיגמנטית בדגי זהב ובמינים בעלי תאי דם אדומים גרעיניים.

הדמיה וסקולרית עמוקה בעין עם אולטרסאונד משופר בזרימה

גלה סרטונים נוספים