רדיוסינתזה של 1-(2-[^18F]פלואורואתיל)-L-טריפטופן באמצעות סיר אחד, פרוטוקול דו-שלבי

המטרה הכללית של פרוטוקול זה היא radiosynthesize F18 radiolabeled טריפטופן מעקב על ידי סיר אחד, גישה דו-שלבית. רדיוטראקר עשוי למצוא יישום נרחב עבור חילוף החומרים טריפטופן הדמיה. הטכניקה משתמשת ברדיואיזוטופ עם זמן מחצית חיים ארוך יותר, פחות הקדמת תגובה, ופחות נפח תגובה, ושלב שפיר לסביבה לטיהור.

הרדיוטראקר עשוי לשמש לאבחון הפרעות שונות המשפיעות על המוח, כולל אך לא מוגבל לאפילפסיה, הפרעות נוירופסיכיאטריות ונוירו-אונקולוגיה. שיטה זו יכולה להיות מיושמת על מודולים אחרים הזמינים מסחרית radiolabeling. לאחר קבלת פתרון הפלואוריד F18, התחילו בסקר תיבת ההובלה על פני השטח, ובמרחק של מטר אחד, תיעדו את שיעורי החשיפה המרביים לקרינה.

לאחר ביצוע בדיקת ניגוב כדי להבטיח את תיבת המשלוח אינו מזוהם, להקליט את המינון F18 פלואוריד וזמן. העבר את פתרון פלואוריד F18 למערכת סינתזת רדיוכימיה. חבר את קו הארגון עם מחט קצרה ואת קו ההעברה פלואוריד F18 עם מחט ארוכה לבקבוקון פלואוריד F18.

לאחר מכן, סגור את דלת הזכוכית של התא החם ודלת העופרת. הפעל את קו האספקה של ארגון על-ידי לחיצה על ארגון אספקה. הגדל את לחץ הארגון והפעל את קו הדחיפה של פלואוריד F18 כדי לדחוף את פלואוריד F18 מימי דרך מחסנית האור QMA.

לאחר שכל הרדיואקטיביות לכודה במחסנית האור QMA, וקריאה של גלאי הרדיואקטיביות יציבה, הגבר את לחץ הארגון ופוצץ ארגון דרך המחסנית למשך חמש דקות נוספות כדי להסיר עודפי מים. לאחר כיבוי קו הדחיפה פלואוריד F18, להקטין את לחץ הארגון לאפס ולהחליף את שסתום שתי עמדות שש יציאות מעמדת השמנת פלואוריד F18 למצב ההמלטה. פתח את בקבוקון התגובה, הפעל את מיקום MVP הקלט קו ארגון אחד, ולדחוף את פתרון K222 ואשלגן פחמתי למיקום MVP הקלט בקבוקון אחד דרך מחסנית האור QMA כדי לחמוק הרדיואקטיביות לתוך בקבוקון התגובה.

החלף את מיקום ההמלטה פלואוריד F18 לתנוחת ההשמנה. לחץ על כפתור החום כדי לחמם את הכור ב 110 מעלות צלזיוס, להפעיל את הפלט MVP מיקום ארבע קו ארגון המתחבר לכור, ולאדות את הממס לתוך MVP הפלט עמדה ארבע בקבוקון. לחץ על כפתור Cool כדי לקרר את הכור לטמפרטורת החדר עם פחמן דו חמצני דחוס.

כבה את הקו הגורף, החלף את מיקום ה- MVP של הקלט 1 למיקום 2, והוסף את האצטוניטריל נטול המים בבקבוקון 2. שניים מפעילים את הקו הגורף ואת התנור לפלואוריד F18 יבש אזאוטרופית ב 110 מעלות צלזיוס. ברגע שהכור מגיע לטמפרטורת החדר, כבו את הקו הגורף, החליפו את מיקום ה-MVP של הקלט 2 למיקום שלוש, והוסיפו את סימן ההיכר של ה-tosylate radiolabeling בבקבוקון 3.

סגור את הכור וחום את תערובות התגובה ב 100 מעלות צלזיוס במשך 10 דקות. כדי לאדות את ממס התגובה, ברגע שהכור מתקרר, להפעיל את הקו הגורף ולאדות את ממס התגובה ב 100 מעלות צלזיוס. ברגע שהכור מתקרר, כבה את הקו הגורף והעבר את מיקום ה-MVP של הקלט שלוש למיקום 4.

כאשר מוסיפים את תערובת האצטוניטריile חומצה הידרוכלורית, לחמם את התגובה ב 100 מעלות צלזיוס במשך 10 דקות כדי להסיר את ההגנה על tert-butyl ו tert-butyloxycarbonyl הגנה על קבוצות מבשר radiolabeling. כדי לנטרל את התגובה, כאשר הכור מגיע לטמפרטורת החדר, החלף את מיקום ה- MVP של הקלט ארבע למיקום חמש והוסף שני נתרן הידרוקסיד טוחן לתערובת התגובה וכבה את קו ארגון MVP הקלט. לאחר מכן, התחל להעביר את תערובת התגובה לקובץ הביניים על ידי לחיצה על לחצן F ב- MVP הפלט כדי להחליף את ה- MVP של הפלט ממצב האוורור ארבע למיקום חמש, ולאחר מכן על ידי לחיצה על לחצן F ב- MVP של הקלט כדי להחליף את ה- MVP של הקלט ממיקום חמש למיקום שש.

לאחר הפעלת קו ארגון ה- MVP של הפלט, דחוף את תערובת התגובה דרך תחמוצת האלומיניום הניטרלית הערומה ומחסניות C8 לבקבוקון הביניים המותקן לפני לולאת הדגימה של HPLC. לשטיפת הכור, החליפו את מיקום ה-MVP של הפלט חמש למיקום שש, דחפו את פתרון השטיפה בבקבוקון של מיקום ה-MVP של היציאה שש דרך בקבוקון התגובה, המחסניות והבקבוקון הבינוני, ברציפות. לאחר מכן, התחל בטיהור התערובת על-ידי החלפת לולאת HPLC מעמדת הזרקה למיקום טעינה והפעלת קו ארגון ה- MVP של הקלט.

כאשר התערובת נטענת ללולאת HPLC של חמישה מיליליטר, העבר את לחצן טען להזרקה, לחץ על הזרק HPLC כדי להפעיל את כרומטוגרמה של HPLC בקצב זרימה של שלושה מיליליטר לדקה ולאחר מכן לחץ על לחצן צג HPLC כדי לגשת לכרומטוגרמה של HPLC בזמן אמת. לחץ על לחצן MVP של הסחת דעת כדי להסיט את שבר HPLC היעד לעמודת C18 הקצרה כ- 12 דקות. לאחר שהרדיואקטיביות של היעד נאספה בעמודה C18, החלף את שסתום ההסחה הדו-מצבי בעל ארבע היציאות לתנוחת איסוף הפסולת, ושטוף את עמודת הכיראליות בקצב של ארבעה מיליליטרים לדקה למשך שש דקות כדי להסיר את enantiomer D F18 FETrp המשני וזיהומים אולטרה סגולים אחרים.

לחץ על לחצן MVP של הסחת דעת כדי להסיט את שלב ה- HPLC למכשירים ניידים בחזרה למיקום ה- MVP של הניסוח אחד בשלושה מיליליטר לדקה. שים לב שהשלב הנייד עובר דרך העמודה כיראלית ועמודת C18 כדי לטהר את L-F18 FETrp שנשמר בעמודה C18. בערך 32 עד 34 דקות, לאסוף את שבר היעד לתוך מיקום MVP ניסוח שני בקבוקון.

לאחר מכן לדחוף את MVP ניסוח מיקום שני פתרון בקבוקון דרך קו המסירה מסנן סטרילי לתוך בקבוקון המינון הסופי. בדוק את פעילות המינון הסופי ואת נפח לאחר הסרת המסנן הסטרילי. לשטוף את המערכת עם מים טהורים במיוחד ואחריו אתנול בקצב זרימה של ארבעה מיליליטר לדקה לפחות 15 דקות לכל שטיפה.

כבה את משאבת HPLC ואת תיבת PLC, סגור את התוכנית, כבה את חברת התעופה הדחוסה, קו ארגון, קו דו תחמוצת הפחמן, ואת הכוח העיקרי של המודול. למשוך כ 0.1 מיליליטר של המנה הסופית לתוך 0.2 מיליליטר להוסיף של בקבוקון QC. הפעל את המדגם החם כפי שתוכנית הרצף החלקי מתוארת בכתב היד של הטקסט.

נתח את נתוני QC על ידי חישוב הטוהר הכימי והרדיוכימי בערך עודף enantiomeric ופעילות טוחנות. לאחר קביעת ערך ה- pH, שחררו את המינון אם כל תוצאות הבדיקה עוברות את הטווח המקובל. הכרומטוגרמה הייצוגית של HPLC עבור QC מוצגת.

הפסגות חסרות המשמעות בין נפח הריק ב 10 דקות של התוכנית זוהו בכרומטוגרמה הריקה. ההתייחסות הסטנדרטית ללא רדיוליבל L-פלואורואתיל-טריטופן הראתה את נוכחותו של איזומר יחיד מופרד היטב מן ההתייחסות הסטנדרטית של עמיתו D. המינון הסופי של L-F18 טריפטופן הראה טוהר כימי גבוה וטוהר רדיוכימי.

בדיקת היציבות של המוצר הסופי בריכוז המינון הגבוה ביותר במשך עד שמונה שעות הראתה כי L-F18 טריפטופן היה יציב במונחים של טוהר כימי, טוהר רדיוכימי, עודף enantiomeric, וערך pH. הטוהר הכימי והרדיוכימי הגדול מ-95% הושגו באמצעות פרוטוקול זה. שתי עמודות משמשות לטיהור נותב.

זכור לעבור לעמודה C18 כדי להסיר את זיהומים כימיים. אנו יכולים להתאים במהירות שיטה זו לייצור קליני של רדיוטרייקר טריפטופן פלואור-18 תווית.