Name: דרוסופילה התנהגות הימנעות פסיבית כפרדיגמה חדשה לחקר למידה אסוציאטיבית מרתיעה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-10-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 20 s
Description: למד שיטה פשוטה וחסכונית לחקר למידה אסוציאטיבית מרתיעה בזבובי פירות. הפרוטוקול משתמש בהלם חשמלי לדיכוי התנהגות גיאוטקסיס שלילית ב-Drosophila melanogaster.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך בחלקים על ידי NIH R15ES029673 (AKM).

1. הכנת מנגנון הימנעות פסיבית
<ol><li>לקדוח חור 4 מ"מ בניצב על פני השטח הקיר של צינור תרבית פוליפרופילן 14 מ"ל ו 8 מ"מ הרחק מתחתית הצינור. הערה: השתמש במקדחה חשמלית ובקדחה של 5/32 לקבלת התוצאות הטובות ביותר.</li>
	<li>באמצעות סכין כלי פלדה, לחתוך את החלק העליון של צינור תרבית פוליפרופילן 14 מ"ל כדי ליצור שבר תחתון צינור באורך 45 מ"מ. החלק התחתון משמש כתא התחתון.</li>
	<li>חותכים את הקצה של קצה פיפטה כחולה 1,000 μL באמצעות סכין גילוח קצה יחיד כדי להפוך את הפתח רחב מספיק למעבר של זבוב יחיד. חותכים את החלק המצמצם של הקצה הכחול כדי ליצור שבר 12 מ"מ. הכנס שבר זה בחוזקה לתוך חור 4 מ"מ של התא התחתון. זה משמש כרציף טעינה להעברת הזבובים.</li>
	<li>חותכים חתיכה של 15 מ"מ של צינורות ויניל שקופים 5/8" מזהה (ראה טבלת חומרים) כדי ליצור צימוד. הכנס את התא העליון והתחתון לצימוד מקצוות מנוגדים כדי לחבר בבטחה את התא התחתון לתא העליון.</li>
	<li>בעזרת מהדק מתכוונן בעל שני שיניים, חברו את ההרכבה למעמד אנכי. כוון את ההרכבה אנכית עם צינור ההלם כתא עליון.</li>
	<li>חבר את חוטי צינור ההלם לגירוי חשמלי (ראה טבלת חומרים) כדי לספק שוקים חשמליים. משך תקופת האימונים הוא דקה אחת. הערה: כדי להקל על התצפית, מקם פיסת נייר לבן מאחורי צינור ההלם כדי לשמש כרקע לבן של המנגנון. שים מנורה עם נורה רכה שווה ערך 75 W מעל תא ההלם. מקם מנורת זכוכית מגדלת זרוע מתכווננת לפני ההתקנה. באיור 1 מוצג ייצוג של מנגנון ההימנעות הפסיבית.</li>
</ol>2. הכנת הזבובים להליך ההימנעות הפסיבית
<ol><li>לשתק 3-4 יום בן D. melanogaster או D. simulans זבובים באמצעות בלוק קר כקרח ולהעביר אותם בקבוקונים בודדים עם מזון 24 שעות לפני הניסוי (1 זבוב לכל בקבוקון) בעקבות ההליך שתואר קודם לכן 19. הערה: הניסויים המתוארים כאן השווה בין זכר בן 3-4 יום לעומת. נקבות עפות בד . מלנוגאסטר וד . סימולנס.</li>
	<li>לפני הניסויים ההתנהגותיים, קוד כל הבקבוקונים. לשם כך, הקצה לכל קבוצה אות, לדוגמה, "A", "B", "C" וכו ', וכל אחד מהם מטיס מספר. גלה קוד זה רק לאחר שכל הנתונים נרשמו ונותחו. השתמש לפחות 20 זבובים לכל גנוטיפ או טיפול כדי להתמודד עם וריאציות בודדות. הערה: ביצוע הניסויים והניתוחים "עיוורים" מאפשר להוציא הטיה בהערכת הביצועים של הזבוב וניתוח הנתונים.</li>
</ol>3. ביצוע הניסוי הראשון
<ol><li>באמצעות שאיפה לפה מעופף (ראה טבלת חומרים) המתוארת קודם לכן20, להעביר בעדינות זבוב מהבקבוקון הבודד לתא התחתון דרך רציף הטעינה. בעדינות למצוץ זבוב אחד לתוך השאיפה בפה על ידי שאיבת אוויר. להפקיד את הזבוב על ידי נשיפה קלה לתוך רציף הטעינה. הערה: יש להימנע מהדגשה על בעל החיים במהלך תפיסה וטעינה.</li>
	<li>מיד לאחר שהזבוב נטען לתא התחתון, התחל טיימר של דקה אחת ושעון עצר. הערה: שעון העצר משמש למדידת השהיות ומונה ספירה כדי לספור את מספר הזעזועים.</li>
	<li>לחץ על שעון העצר כדי לתעד את ההשהיה הראשונה כאשר הזבוב נכנס לצינור ההלם על-ידי הצבת כל כפות הרגליים ברשת. הפעל את הממריץ כדי לספק הלם חשמלי לזבוב. הפרמטרים גירוי הם 120 וולט, 1000 אלפיות השנייה משך, 1 פעימה / s (PPS), משך הרכבת 2000 ms.</li>
	<li>לספק זעזועים נוספים אם לטוס מחדש נכנס צינור הלם. רשום את מספר הזעזועים שהתקבלו במהלך ניסיון של דקה אחת עם מונה ספירה או מונה מבוסס Arduino (ראה טבלת חומרים). אם אתם משתמשים בדלפק המבוסס על Arduino, אנא בצעו את השלבים הבאים. הערה: ניתן להשתמש בהתקן אופציונלי מבוסס Arduino AKM-007 (ראה טבלת חומרים) כדי למדוד זמן, השהיה, מספר זעזועים, ואת התדירות ומשך הזמן של התקפי טיפוח עבור כל בעל חיים על-ידי לחיצה ושחרור של הכפתורים המתאימים במכשיר. הלחצנים בהתקן מוקצים כדי למדוד השהיה, לנהל ולתעד את מספר הזעזועים ולמדוד את התדירות ומשך הזמן של התקפי טיפוח.<ol>
<li>לחץ על לחצן התחל בשלב 3.2 ולחץ על לחצן הלם בשלב 3.3.</li>
		<li>כדי לתעד את משך הזמן של התקף טיפוח, לחץ על לחצן טיפוח בתחילת התקף טיפוח במכשיר ושחרר לחצן זה בסוף התקף הטיפוח. הערה: התקפי הטיפוח נמדדו לאורך 1 דקות ניסיון. טיפוח נרחב יכול להצביע על לחץ בעלי חיים21,22. ההתקן מבוסס Arduino שומר את כל הנתונים כקובץ CSV בכרטיס זיכרון.</li>
	</ol>
</li>
	<li>בתום ניסיון של דקה אחת, העבירו בעדינות את הזבוב בחזרה לבקבוקון בודד. רשום את ההשהיה, את מספר הזעזועים שהתקבלו, וכל שינוי בולט בהתנהגות.</li>
	<li>נקו את התא התחתון ואת התא עם 70% אתנול, נגבו עם רקמת ניקוי נטולת מוך (ראו טבלת חומרים) וייבשו עם מייבש השיער. חזור על המשפט עם הזבוב הבא.</li>
	<li>לאחר הניסויים ההתנהגותיים, נקו את התא התחתון במים וחומרי ניקוי חסרי ריח. נגב את התא התחתון ואת תא ההלם עם 70% אתנול, ואוויר יבש לילה.</li>
</ol>4. ביצוע המשפט השני
<ol><li>בצע את הניסוי השני על-ידי חזרה על ההליך המתואר לעיל (שלב 3) 24 שעות מאוחר יותר. בדוק את הזבובים באותו רצף כמו ביום הקודם.</li>
</ol>5. ניתוח התוצאות
<ol><li>חשב את ההשהיה הממוצעת, את המספר הממוצע של זעזועים ואת משך התקפי הטיפוח עבור ניסוי 1 וניסיון 2 עבור כל קבוצה ניסיונית של בעלי חיים. בצע מבחן t-test להשוואה בין שתי קבוצות או ANOVA עבור השוואות מרובות עם ניתוחים שלאחר הוק באמצעות המבחן של Tukey23.</li>
</ol>

<ol><li>Kandel, E. R., Dudai, Y., Mayford, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+systems+biology+of+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The molecular and systems biology of memory.</a> Cell. 157 (1), 163-186 (2014).</li>
<li>McGuire, S. E., Deshazer, M., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thirty+years+of+olfactory+learning+and+memory+research+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Thirty years of olfactory learning and memory research in Drosophila melanogaster.</a> Progress in Neurobiology. 76 (5), 328-347 (2005).</li>
<li>Livingstone, M. S., Sziber, P. P., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+calcium%2Fcalmodulin+responsiveness+in+adenylate+cyclase+of+rutabaga%2C+a+Drosophila+learning+mutant%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Loss of calcium/calmodulin responsiveness in adenylate cyclase of rutabaga, a Drosophila learning mutant.</a> Cell. 37 (1), 205-215 (1984).</li>
<li>Quinn, W. G., Sziber, P. P., Booker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+memory+mutant+amnesiac%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The Drosophila memory mutant amnesiac.</a> Nature. 277 (5693), 212-214 (1979).</li>
<li>Dudai, Y., Jan, Y. N., Byers, D., Quinn, W. G., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((dunce%2C+a+mutant+of+Drosophila+deficient+in+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">dunce, a mutant of Drosophila deficient in learning.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 73 (5), 1684-1688 (1976).</li>
<li>Busto, G. U., Cervantes-Sandoval, I., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+learning+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology%22%5BJournal%5D)">Olfactory learning in Drosophila.</a> Physiology. 25 (6), Bethesda, Md. 338-346 (2010).</li>
<li>Tully, T., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical+conditioning+and+retention+in+normal+and+mutant+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology.+A%3A+Sensory%2C+Neural%2C+and+Behavioral+Physiology%22%5BJournal%5D)">Classical conditioning and retention in normal and mutant Drosophila melanogaster.</a> Journal of Comparative Physiology. A: Sensory, Neural, and Behavioral Physiology. 157 (2), 263-277 (1985).</li>
<li>Wright, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+the+techniques+used+in+studying+associative+olfactory+learning+and+memory+in+adult+Drosophila+in+vivo%3A+A+historical+and+technical+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Invertebrate+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Evolution of the techniques used in studying associative olfactory learning and memory in adult Drosophila in vivo: A historical and technical perspective.</a> Invertebrate Neuroscience. 14 (1), 1-11 (2014).</li>
<li>Vogt, K., Yarali, A., Tanimoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversing+stimulus+timing+in+visual+conditioning+leads+to+memories+with+opposite+valence+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Reversing stimulus timing in visual conditioning leads to memories with opposite valence in Drosophila.</a> PloS One. 10 (10), 0139797(2015).</li>
<li>Koemans, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+courtship+conditioning+as+a+measure+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Drosophila courtship conditioning as a measure of learning and memory.</a> Journal of Visualized Experiments. (124), e55808(2017).</li>
<li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assaying+locomotor%2C+learning%2C+and+memory+deficits+in+Drosophila+models+of+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila models of neurodegeneration.</a> Journal of Visualized Experiments. (49), e2504(2011).</li>
<li>Bozler, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systems+level+approach+to+temporal+expression+dynamics+in+Drosophila+reveals+clusters+of+long+term+memory+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+Genetics%22%5BJournal%5D)">A systems level approach to temporal expression dynamics in Drosophila reveals clusters of long term memory genes.</a> Plos Genetics. 13 (10), 1007054(2017).</li>
<li>Atucha, E., Roozendaal, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inhibitory+avoidance+discrimination+task+to+investigate+accuracy+of+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The inhibitory avoidance discrimination task to investigate accuracy of memory.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 9, 60(2015).</li>
<li>Thiels, E., Hoffman, E. K., Gorin, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reliable+behavioral+assay+for+the+assessment+of+sustained+photophobia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">A reliable behavioral assay for the assessment of sustained photophobia in mice.</a> Current Eye Research. 33 (5), 483-491 (2008).</li>
<li>Detrait, E. R., Hanon, E., Dardenne, B., Lamberty, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inhibitory+avoidance+test+optimized+for+discovery+of+cognitive+enhancers%5BTitle%5D)+AND+%22Behavior+Research+Methods%22%5BJournal%5D)">The inhibitory avoidance test optimized for discovery of cognitive enhancers.</a> Behavior Research Methods. 41 (3), 805-811 (2009).</li>
<li>Piper, M. D. W., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+as+a+model+for+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta+-+Molecular+Basis+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Drosophila as a model for ageing.</a> Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Basis of Disease. 1864 (9), Pt A 2707-2717 (2018).</li>
<li>Chalmers, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multicomponent+screen+for+feeding+behaviour+and+nutritional+status+in+Drosophila+to+interrogate+mammalian+appetite-related+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Metabolism%22%5BJournal%5D)">A multicomponent screen for feeding behaviour and nutritional status in Drosophila to interrogate mammalian appetite-related genes.</a> Molecular Metabolism. 43, 101127(2021).</li>
<li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+iterative+negative+geotaxis+%28RING%29%3A+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Gerontology%22%5BJournal%5D)">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Experimental Gerontology. 40 (5), 386-395 (2005).</li>
<li>Yang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+homemade+tools+to+handle+fruit+flies-Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Simple homemade tools to handle fruit flies-Drosophila melanogaster.</a> Journal of Visualized Experiments. (149), e59613(2019).</li>
<li>Barradale, F., Sinha, K., Lebestky, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+Drosophila+grooming+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Quantification of Drosophila grooming behavior.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), e55231(2017).</li>
<li>Denmark, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+chronic+social+defeat+stress+on+mouse+self-grooming+behavior+and+its+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">The effects of chronic social defeat stress on mouse self-grooming behavior and its patterning.</a> Behavioural Brain Research. 208 (2), 553-559 (2010).</li>
<li>Kalueff, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+rodent+self-grooming+and+its+value+for+translational+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%3A+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of rodent self-grooming and its value for translational neuroscience.</a> Nature Reviews: Neuroscience. 17 (1), 45-59 (2016).</li>
<li>Motulsky, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMotulsky%2C+H+%22Intuitive+biostatistics%3A+A+nonmathematical+guide+to+statistical+thinking.+Fourth+edition%22">Intuitive biostatistics: A nonmathematical guide to statistical thinking. Fourth edition</a>. , Oxford University Press. (2018).</li>
<li>Qiao, B., Li, C., Allen, V. W., Shirasu-Hiza, M., Syed, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+analysis+of+long-term+grooming+behavior+in+Drosophila+using+a+k-nearest+neighbors+classifier%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Automated analysis of long-term grooming behavior in Drosophila using a k-nearest neighbors classifier.</a> Elife. 7, 34497(2018).</li>
<li>Mu, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+limbic+circuitry+involved+in+emotional+stress-induced+grooming%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">A limbic circuitry involved in emotional stress-induced grooming.</a> Nature Communications. 11 (1), 2261(2020).</li>
<li>Song, C., Berridge, K. C., Kalueff, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stressing%27+rodent+self-grooming+for+neuroscience+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%3A+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Stressing' rodent self-grooming for neuroscience research.</a> Nature Reviews: Neuroscience. 17 (9), 591(2016).</li>
<li>Wang, C., Chan, J. S., Ren, L., Yan, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+reduces+cognitive+and+motor+functions+across+the+lifespan%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plasticity%22%5BJournal%5D)">Obesity reduces cognitive and motor functions across the lifespan.</a> Neural Plasticity. 2016, 2473081(2016).</li>
<li>Lewis, A. R., Singh, S., Youssef, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cafeteria-diet+induced+obesity+results+in+impaired+cognitive+functioning+in+a+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Cafeteria-diet induced obesity results in impaired cognitive functioning in a rodent model.</a> Heliyon. 5 (3), 01412(2019).</li>
<li>Yohn, S. E., Galbraith, J., Calipari, E. S., Conn, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shared+behavioral+and+neurocircuitry+disruptions+in+drug+addiction%2C+obesity%2C+and+binge+eating+disorder%3A+Focus+on+Group+I+mGluRs+in+the+mesolimbic+dopamine+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chemical+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Shared behavioral and neurocircuitry disruptions in drug addiction, obesity, and binge eating disorder: Focus on Group I mGluRs in the mesolimbic dopamine pathway.</a> ACS Chemical Neuroscience. 10 (5), 2125-2143 (2019).</li>
<li>Lopez-Taboada, I., Gonzalez-Pardo, H., Conejo, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Western+Diet%3A+Implications+for+brain+function+and+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Psychololgy%22%5BJournal%5D)">Western Diet: Implications for brain function and behavior.</a> Frontiers in Psychololgy. 11, 564413(2020).</li>
<li>Murashov, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preference+and+detrimental+effects+of+high+fat%2C+sugar%2C+and+salt+diet+in+wild-caught+Drosophila+simulans+are+reversed+by+flight+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Bioadvances%22%5BJournal%5D)">Preference and detrimental effects of high fat, sugar, and salt diet in wild-caught Drosophila simulans are reversed by flight exercise.</a> FASEB Bioadvances. 3 (1), 49-64 (2021).</li>
<li>Krypotos, A. M., Effting, M., Kindt, M., Beckers, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Avoidance+learning%3A+A+review+of+theoretical+models+and+recent+developments%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Avoidance learning: A review of theoretical models and recent developments.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 9, 189(2015).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Encyclopedia+of+Neuroscience%22">Encyclopedia of Neuroscience</a>. Binder, M. D., Hirokawa, N., Windhorst, U. , Springer Berlin Heidelberg. 3093(2009).</li>
<li>Mery, F., Belay, A. T., So, A. K., Sokolowski, M. B., Kawecki, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+polymorphism+affecting+learning+and+memory+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Natural polymorphism affecting learning and memory in Drosophila.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (32), 13051-13055 (2007).</li>
<li>Tan, Y., Yu, D., Pletting, J., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gilgamesh+is+required+for+rutabaga-independent+olfactory+learning+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Gilgamesh is required for rutabaga-independent olfactory learning in Drosophila.</a> Neuron. 67 (5), 810-820 (2010).</li>
<li>Ögren, S. O., Stiedl, O. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3a%C3%96gren%2C+SO+%22Encyclopedia+of+Psychopharmacology%22">Encyclopedia of Psychopharmacology</a>. Stolerman, I. P. , Springer Berlin Heidelberg. 960-967 (2010).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין ניגודי עניינים.

הימנעות מגירויים מאיימים היא מאפיין מכריע של התנהגות הסתגלותית במינים שונים מ C. אלגנטיות לאדם32. הליכי למידה הימנעות אשר בדרך כלל כרוכים בבריחה של אירוע מרתיע, משמשים בדרך כלל משימות התנהגותיות לחקור תהליכי למידה וזיכרון במכרסמים מעבדה13 מאז 1970 של 32. בהליכי הימנעות פעילים, גירוי אדיש או אות מותנה (CS) מלווה באירוע מרתיע או אות ללא תנאי (ארה"ב), שבעלי חיים לומדים להימנע ממנו על ידי ביצוע משימה התנהגותית ספציפית. בהליכי הימנעות פסיביים, בע...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/63163">Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning</a>. The Representative Results and Discussion&#160;sections were&#160;updated.
In the Representative Results, the legend for Figure 5 was updated from:
Figure 5: Comparison of passive avoidance and grooming behavior in D. simulans males and females. (A)&#160;Average latency (s) per trial. The graph shows no statistically significant differences between males and females in the latencies. (B) An average number of received shocks per trial. The graph shows no statistically significant differences between males and females in the number of received shocks. (C) The total duration of grooming bouts in trials 1-3. While there were no statistically significant differences between males and females, the female flies showed a considerable increase in grooming behavior during trials 2 and 3 compared to trial 1. Abbreviations: *- P&#60;0.05. One-way ANOVA with Tukey&#39;s multiple comparisons test.
to:
Figure 5: Comparison of passive avoidance and grooming behavior in D. simulans males and females. (A)&#160;Average latency (s) per trial. The graph shows no statistically significant differences between males and females in the latencies. (B) An average number of received shocks per trial. The graph shows no statistically significant differences between males and females in the number of received shocks. (C) The total duration of grooming bouts in trials 1-3. While there were no statistically significant differences between males and females, the female flies showed a considerable decrease in grooming behavior during trials 2 and 3 compared to trial 1. Abbreviations: *- P&#60;0.05. One-way ANOVA with Tukey&#39;s multiple comparisons test.
In the Discussion, the third paragraph&#160;was updated from:
The assay worked equally well in D. melanogaster and D. simulans male and female flies, demonstrating that the paradigm could be adapted to different D. species. The changes in fly behavior characterized by increased latencies and decreased number of shocks were statistically significant in the second trial and would strengthen with subsequent trials. Interestingly, if na&#239;ve flies were habituated to the apparatus without electric shock, they would enter the upper compartment a little faster on the second and the third trials. However, the decrease in latencies was not statistically significant (data not shown). No statistically significant differences were observed between sexes, although female flies had somewhat longer latencies and received slightly more shocks. This difference could be due to a combination of factors, including females&#39; failure to associate the shock with the upper compartment, a stronger geotaxis, or possibly because females are slightly larger and slower than males. The total duration of grooming bouts was significantly higher in the second and third trials in female flies, which draws a parallel between D. and rodent anxiety-like behaviors26.
to:
The assay worked equally well in D. melanogaster and D. simulans male and female flies, demonstrating that the paradigm could be adapted to different D. species. The changes in fly behavior characterized by increased latencies and decreased number of shocks were statistically significant in the second trial and would strengthen with subsequent trials. Interestingly, if na&#239;ve flies were habituated to the apparatus without electric shock, they would enter the upper compartment a little faster on the second and the third trials. However, the decrease in latencies was not statistically significant (data not shown). No statistically significant differences were observed between sexes, although female flies had somewhat longer latencies and received slightly more shocks. This difference could be due to a combination of factors, including females&#39; failure to associate the shock with the upper compartment, a stronger geotaxis, or possibly because females are slightly larger and slower than males. The total duration of grooming bouts was significantly lower&#160;in the second and third trials in female flies, which draws a parallel between D. and rodent anxiety-like behaviors26.

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/63163">Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning</a>. The Representative Results and Discussion&#160;sections were&#160;updated.

Erratum: Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning

למידה וזיכרון הוא מנגנון הסתגלות עתיק אבולוציוני לסביבה, שנשמר מדרוזופילה (D. ) לאנושות1. זבוב הפירות הוא אורגניזם מודל חזק ללמוד עקרונות בסיסיים של למידה וזיכרון כפי שהוא מציע מגוון רחב של כלים גנטיים רבי עוצמה לנתח מנגנונים מולקולריים מהותיים2. מחקרי ההקרנה הגנטית החלוציים, שזיהו גנים rutabaga3, אמנזיה4 ו- dunce5 החיוניים ללמידה ולזיכרון2, ניצלו את ההתניה הריחית כאשר זבובי הפירות מסתמכים על חוש הריח החריף שלהם כדי למצוא מזון, בני זוג פוטנציאליים, ולהימנע מטורפים6.
מיזוג חוש הריח הפך לפרדיגמה פופולרית ללמוד את מנגנון הלמידה והזיכרון, הודות להכנסת חוש הריח T-maze על ידי טולי וקווין 7,8. לאחר מכן, הוצעו שיטות אחרות למדידת סוגים שונים של למידה וזיכרון, כולל התניה חזותית9, מיזוג חיזור10, בדיקת דיכוי פוטוקסי מרתיעה11, ומיזוג חשיפה לצרעות12. עם זאת, לרוב הבדיקות הללו יש התקנה מורכבת שיש לבנות בהתאמה אישית בסדנה באוניברסיטה או לרכוש אותה באמצעות ספק. הפרדיגמה המתוארת כאן מבוססת על בדיקה התנהגותית פשוטה לחקר למידה אסוציאטיבית מרתיעה בזבובים שניתן להרכיב בקלות עם כמה אספקה זמינה.
הפרדיגמה המתוארת שקולה להתנהגות הימנעות פסיבית (או מעכבת) בעכברים וחולדות מעבדה שבה בעלי חיים לומדים להימנע מתא שבו הם קיבלו בעבר הלם רגל חשמלי13. ב murids, ההליך מבוסס על הימנעות מולדתם של אור בהיר והעדפה לאזורים כהים יותר14. בניסוי הראשון, החיה ממוקמת לתוך התא הבהיר, שממנו החיה יוצאת במהירות, צועדת לתוך תא חשוך, שבו הלם רגל חשמלי מועבר. בדרך כלל, ניסיון יחיד מספיק כדי ליצור זיכרון מוצק לטווח ארוך, וכתוצאה מכך השהיה מוגברת באופן משמעותי 24 שעות מאוחר יותר. ההשהיה משמשת לאחר מכן כמדד ליכולתו של בעל החיים לזכור את הקשר בין הגירוי המרתיע לסביבה הספציפית15.
עבודה זו מתארת הליך אנלוגי באמצעות D. כמערכת מודל המציעה מספר יתרונות על פני מודלים מכרסמים כולל עלות-תועלת, גודל מדגם גדול יותר, היעדר פיקוח רגולטורי, וגישה לכלים גנטיים רבי עוצמה16,17. ההליך מבוסס על התנהגות גיאוטקסית שלילית, המתבטאת בדחף של זבובים לטפס למעלה כאשר הם ממוקמים על משטח אנכי18. ההתקנה מורכבת משני תאים אנכיים. בניסוי הראשון, זבוב פירות ממוקם בתא תחתון. משם, הוא בדרך כלל יוצא בתוך 3-15 שניות, נכנס לתא העליון שבו הוא מקבל הלם חשמלי. במהלך ניסוי של דקה אחת, זבובים מסוימים עשויים מדי פעם להיכנס מחדש לתא העליון, מה שגורם להלם חשמלי נוסף. במהלך שלב הבדיקה, 24 שעות מאוחר יותר, ההשהיה גדלה באופן משמעותי. יחד עם זאת, מספר הזעזועים יורד בהשוואה ליום הראשון המציין כי זבובים יצרו זיכרון אסוציאטיבי מרתיע על התא העליון. ההשהיה, מספר הזעזועים, ומשך ותדירות התקפי הטיפוח משמשים לאחר מכן לניתוח התנהגות בעלי החיים והיכולת ליצור ולזכור את הקשר בין הגירוי המרתיע לסביבה הספציפית. התוצאות הייצוגיות מגלות כי חשיפה לתזונה המערבית (WD) פוגעת באופן משמעותי בהתנהגות ההימנעות הפסיבית בזבובים זכרים, דבר המצביע על כך ש-WD משפיע עמוקות על התנהגות הזבוב ועל הקוגניציה שלו. לעומת זאת, תרגיל טיסה הקל על ההשפעה השלילית של WD, ושיפר את התנהגות ההימנעות הפסיבית.

<table><tbody><tr><td>דיאטת בלומינגטון פורמולציה</td><td>Nutri-Fly</td><td>&nbsp; 66-112</td><td>זמין מ-Genesee Scientific Inc., סן דייגו, קליפורניה</td></tr><tr><td>1000 ומיקרו; L קצה כחול</td><td>פישר</td><td>NC9546243</td><td></td></tr><tr><td>17 x 100 מ"מ 14 מ"ל צינור תרבית פוליפרופילן</td><td>VWR</td><td>&nbsp; 60818-689</td><td></td></tr><tr><td>מודול Kontrol אוטומטי מבוסס Aduino</td><td></td><td>בתוך הבית AKM-007</td><td>יחידה זו היא אופציונלית. תיאור מלא, סכמות, תרשים חיווט וקוד מסופקים בשוק הדיגיטלי של ECU - https://digitalmarket.ecu.edu/akmmodule</td></tr><tr><td>תצוגה כפולה 2 ערוצים&nbsp; שעון/טיימר דיגיטלי</td><td>Digi-Sense</td><td>AO-94440-10</td><td>https://www.amazon.com/Cole-Parmer-AO-94440-10-Dual-Display-2-Channel-Jumbo-Digit/dp/B00PR0809G/ref=sr_1_5?dchild=1&keywords=Dual-Display+timer+jumbo&qid=1627660660&sr= 8-5#customerReviews</td></tr><tr><td>מונה אצבעות אלקטרוני</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>https://www.amazon.com/gp/product/B01M8IRK6F/ref=ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8&psc=1</td></tr><tr><td>Fisherbrand Sparkleen 1 חומר ניקוי</td><td>Fisher Scientific</td><td>04-320-4</td><td></td></tr><tr><td>שואב פה זבוב</td><td>מוכן</td><td></td><td>כמתואר בהתייחסות 19.</td></tr>ניתן להחליף את <tr><td>ממריץ Grass S88</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>בכל ממריץ שיכול לספק פרמטרים מתוארים</td></tr><tr><td>Kim-wipes</td><td>Fisher Scientific</td><td>06-666</td><td>Kimberly-Clark Professional 34120</td></tr><tr><td>בלוק מתכת לקיבוע זבובים</td><td>בבית</td><td></td><td>4 x 13 x 23.5 ס"מ בלוק אלומיניום</td></tr><tr><td>Nutiva מאושר על ידי USDA אורגני, ללא GMO, שמן דקלים אדום</td><td>Nutiva</td><td>N/A</td><td>https://www.amazon.com/Nutiva-Certified-Cold-Filtered-Unrefined-Ecuadorian/dp/B00JJ1E83G/ref=sxts_rp_s1_0?cv_ct_cx=Nutiva+USDA+Certified+Organic%2C+non-GMO%2C+Red+Palm+Oil&dchild=1&keywords=Nutiva+USDA+Certified+Organic%2C+non-GMO%2C+Red+Palm+Oil&pd_rd_i=B00JJ1E83G&pd_ rd_r=f35e9d2f-afe4-44b6-afc2-1c9cd705be18& pd_rd_w= R3Zb4& pd_rd_wg=eUv1m& pf_rd_ p=c6bde456-f877-4246-800f-44405f638777& pf _rd_r=M94N11RC7NH333EMJ66Y & psc=1& qid=1627661533& sr=1-1-f0029781-b79b-4b60-9cb0-eeda4dea34d6</td></tr><tr><td>צינור הלם</td><td></td><td>CelExplorer TMA-201</td><td></td></tr><tr><td>https://www.celexplorer.com/product_detail.asp?id=217&MainType=110&SubType=8 שעון עצר</td><td>Accusplit</td><td>A601XLN</td><td>https://www.amazon.com/gp/product/B0007ZGZYI/ref=ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8&psc=1</td></tr><tr><td>צינורות ויניל שקופים (3/4 אינץ' OD, 5/8 אינץ' ID)</td> <td>Lowes</td><td></td><td>זמין מ- Lowes</td></tr></tbody></table>

דרוסופילה התנהגות הימנעות פסיבית כפרדיגמה חדשה לחקר למידה אסוציאטיבית מרתיעה

Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning

פרוטוקול זה מתאר פרדיגמה חדשה לניתוח למידה אסוציאטיבית מרתיעה בזבובים בוגרים (Drosophila melanogaster). הפרדיגמה מקבילה להתנהגות הימנעות פסיבית במכרסמים במעבדה שבה בעלי חיים לומדים להימנע מתא שבו הם קיבלו בעבר הלם חשמלי. הבדיקה מנצלת גיאוטקסי שלילי בזבובים, המתבטא כדחף לטפס למעלה כאשר הם ממוקמים על משטח אנכי. ההתקנה מורכבת ממתאים עליונים ותחתונים בעלי כיוון אנכי. בניסוי הראשון, זבוב ממוקם בתא תחתון שממנו הוא יוצא בדרך כלל בטווח של 3-15 שניות, ונכנס לתא העליון שם הוא מקבל הלם חשמלי. במהלך המשפט השני, 24 שעות מאוחר יותר, ההשהיה גדלה באופן משמעותי. יחד עם זאת, מספר הזעזועים יורד בהשוואה לניסוי הראשון, מה שמצביע על כך שזבובים יצרו זיכרון לטווח ארוך על התא העליון. ההקלטות של השהיות ומספר הזעזועים יכולות להתבצע עם מונה ספירה ושעון עצר או עם מכשיר פשוט מבוסס Arduino. כדי להמחיש כיצד ניתן להשתמש בבדיקה, התנהגות ההימנעות הפסיבית של ד' מלנוגסטר ו - D. simulans זכר ונקבה אופיינו כאן. השוואה של השהיות ומספר זעזועים גילתה כי הן D. melanogaster ו D. simulans זבובים למדו ביעילות את התנהגות ההימנעות הפסיבית. לא נצפו הבדלים סטטיסטיים בין זבובים זכריים ונקביים. עם זאת, הזכרים היו קצת יותר מהירים בעת הכניסה לתא העליון בניסוי הראשון, בעוד הנקבות קיבלו מספר מעט גבוה יותר של זעזועים בכל משפט שמירה. הדיאטה המערבית (WD) פגעה באופן משמעותי בלמידה ובזיכרון בזבובים זכרים בזמן שתרגילי טיסה איזנו את האפקט הזה. יחד, התנהגות ההימנעות הפסיבית בזבובים מציעה בדיקה פשוטה וניתנת לשחזור שיכולה לשמש ללימוד מנגנונים בסיסיים של למידה וזיכרון.

ההימנעות הפסיבית נחקרה ב - D. melanogaster (קנטון-S) ו- D. סימולנים. הניסויים השוו את ההשהיה ואת מספר הזעזועים שהתקבלו בין ניסויים רצופים. בתחילה, הניסויים בוצעו עם זבובים זכרים בני 3-4 יום D. melanogaster . זבובים נשמרו על הדיאטה הסטנדרטית בלומינגטון ניסוח בסביבה מבוקרת אקלים ב 24 °C (50 °F) תחת מחזור כהה בהיר 12 שעות, 70% לחות, וצפיפות אוכלוסין מבוקרת. הצפיפות נשלטה על ידי שמירה על תנאי הרבייה קבועים עבור כל הקבוצות. 15 זכרים ו -15 נקבות גודלו במשך 48 שעות בבקבוק בטמפרטורה של 24 °C (...

עבודה זו מתארת פרדיגמה התנהגותית פשוטה המאפשרת ניתוח של למידה אסוציאטיבית מרתיעה בזבובי פירות בוגרים. השיטה מבוססת על דיכוי ההתנהגות הגיאוטקסית השלילית המולדת בשל הקשר שנוצר בין הקשר סביבתי מסוים להלם חשמלי.

This protocol describes a new paradigm for analyzing aversive associative learning in adult flies (Drosophila melanogaster). The paradigm is analogous to ...

פרוטוקול זה מתאר בדיקה התנהגותית פשוטה המאפשרת ללמוד למידה אסוציאטיבית שלילית ואיחוד זיכרון בזבובים, כולל השפעות של אינטראקציות בסביבת הגנים. הבדיקה המוצגת כאן היא הליך פשוט, ניתן לשחזור וחסכוני לחקר מנגנוני זיכרון שניתן להרכיב בקלות עם כמה אספקה זמינה. בדיקה זו יכולה לספק תובנה לגבי מנגנונים בסיסיים העומדים בבסיס ליקויי למידה וזיכרון הנובעים ממניפולציות גנטיות, פרמקולוגיות ותזונתיות שונות.מי שידגימו את ההליך הזה יהיו מורגן טדר וסטיבן בראדלי, סטודנטים לתואר ראשון מהמעבדה שלי. כדי להתחיל, לקדוח חור ארבעה מילימטרים בניצב כארבעה מילימטרים מלמטה בתוך צינור תרבית פוליפרופילן 14 מיליליטר. הסר את החלק העליון של צינור התרבות כדי להפוך שבר תחתון 45 מילימטר מנוצל כתא התחתון.חותכים את החלק העליון של קצה פיפטה 1000 מיקרוליטר כדי ליצור שבר 12 מ"מ. הכנס את השבר לתוך החור ארבעה מילימטר של צינור התרבות כרציף טעינה כדי להעביר את הזבובים. חותכים חתיכה 15 מילימטר של צינורות ויניל שקופים ולהכניס את התא התחתון והעליון מקצוות מנוגדים לתוך הצינורות.חבר את ההרכבה אנכית באמצעות מהדק מתכוונן דו-ראשי. אתר את התא העליון המחובר אנכית עם צינורות הלם. חבר את צינורות ההלם עם ממריץ חשמלי כדי ליצור זעזועים חשמליים.באמצעות בלוק קר כקרח, לשתק זבובים בני שלושה עד ארבעה ימים ולהעביר אותם לבקבוקונים נפרדים עם מזון 24 שעות לפני הניסוי. הקצה קוד לכל הבקבוקונים כמתואר בכתב היד של הטקסט. בעדינות למצוץ זבוב אחד לתוך השאיפה בפה על ידי ציור אוויר.הפקד את הזבוב על ידי נשיפה קלה לתוך רציף הטעינה ומיד התחל טיימר של דקה אחת ושעון עצר. הפעל את הממריץ ולספק הלם חשמלי כאשר הזבוב נכנס צינור ההלם. לחץ על שעון העצר כדי להקליט את ההשהיה הראשונה.אם הזבוב נכנס שוב לצינור ההלם, לספק זעזועים נוספים. באמצעות ספירה או מונה מבוסס Arduino, להקליט את מספר הזעזועים במהלך משפט של דקה אחת. מעבירים בעדינות את הזבוב בחזרה לבקבוקון בסוף משפט של דקה אחת.רשום את ההשהיה, את מספר הזעזועים שהתקבלו, וכל שינוי בולט בהתנהגות. באמצעות 70% אתנול, נקה את התא התחתון ואת התא ההלם. יש לנגב עם רקמת ניקוי ללא מוך ולייבש אותה באמצעות מייבש שיער.חזור על המשפט עם הזבוב הבא. נקו את התא התחתון במים וחומר ניקוי חסר ריח לאחר השלמת הניסוי. באמצעות 70% אתנול, לנגב את התא התחתון ואת תא ההלם ואוויר יבש לילה.על-ידי חזרה על התהליך שלעיל לאחר 24 שעות, בצע ניסוי שני. ברצף דומה, בדוק את הזבובים. לאחר ביצוע בדיקת הימנעות פסיבית בזבובים זכרים Drosophila melanogaster, התוצאות הראו כי ההשהיה עולה, מספר הזעזועים פוחתת, מה שמוכיח כי זבובים למדו קשר בין התא העליון להלם חשמלי.התפלגות התדרים חשפה כי רוב הזבובים נכנסים לתא העליון ומקבלים זעזוע אחד עד שלושה זעזועים בניסוי הראשון. עד המשפט הרביעי, רוב הזבובים לא נכנסים לתא העליון ומקבלים אפס זעזועים. בניסויים הבאים, משך הניסוי צומצם לדקה אחת מכיוון שהתפלגות התדירות עבור השהיות הראתה בבירור שאם הזבוב אינו נכנס לתא העליון תוך 60 שניות בניסוי הראשון, הוא בדרך כלל אינו נכנס כלל.ניסויי בדיקת ההימנעות הפסיבית חזרו על עצמם בזבובים זכרים ונקבות של דרוזופילה. התוצאות הראו כי הזבובים היו יעילים בלימוד התנהגות ההימנעות הפסיבית כפי שניתן לראות מהשינויים בהתפלגות התדרים עבור השהיות וזעזועים בזבובים זכריים ונקביים. השוואת השהיות ומספר הזעזועים בין זכר לנקבה לא חשפה הבדלים מובהקים סטטיסטית.עם זאת, זבובים נקבות קיבלו מעט יותר זעזועים בכל משפט. ניתוח של התקפי טיפוח בניסויים 2 ו -3 גילה כי משך הזמן הכולל של טיפוח פוחת באופן משמעותי זבובים נשיים מניסוי אחד למשפט שלוש. זה מצביע על כך זבובים לחוות מתח התנהגותי אשר מקביל התנהגויות כמו חרדת מכרסמים.השוואה של ההשפעות של דיאטה מערבית ופעילות גופנית טיסה על התנהגות הימנעות פסיבית להראות כי הדיאטה המערבית מקטינה את ההשהיה ומגדילה את מספר הזעזועים המצביעים על כך שהתזונה המערבית פוגעת בלמידה אסוציאטיבית מרתיעה בזבובים. לעומת זאת, פעילות גופנית בטיסה הקלה על ההשפעה השלילית של הדיאטה המערבית. בעת ניסיון הליך זה, זכור לא להדגיש זבובים.זבובים לחוצים היו נכנסים לתא העליון מהר מדי או לא נכנסים בכלל. כל הניסויים צריכים להתבצע באותם תנאים סביבתיים ובאותו הזמן של היום. טכניקה זו מעניקה לחוקרים בדיקה פשוטה חדשה שניתן להשתמש בה כדי לנתח מנגנונים מהותיים של למידה ואיחוד זיכרון בזבובים.

drosophila-passive-avoidance-behavior-as-new-paradigm-to-study

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

מבחני התנהגות למדידת פונקציות של תנועה, למידה, ויכולות...

Assaying של תנועה, למידה, וזיכרון גירעונות תסיסנית מודלים של ניוון מוחיים

זחלי תסיסנית מסוגלים לשייך גירויי ריח בתגמול בטעם. כאן אנו מתארים הפרדיגמה התנהגות פשוטה המאפשרת הניתוח של למידה אסוציאטיבית אפטטיבית הרחה.

למידה אסוציאטיבית הרחה באפטטיבית<em&gt; דרוזופילה</em&gt; זחלים

סרטון זה מתאר בדיקת התניה קלאסית שבוחנת למידה וזיכרון בדרוזופילה, הנקראת התניה של חיזור. הבדיקה מבוססת על הפחתת החיזור הגברי לאחר שחווה דחייה על ידי נקבה לא פתוחה מראש. הפרוטוקול לדוגמה מציג הגדרה עבור ההליך שניתן להשתמש בה כדי להעריך זיכרון לטווח קצר וארוך.

דרוזופילה התניות חיזור: שיטה לבדיקת למידה וזיכרון בזבובים

תוקפנות היא התנהגות מולדת וניסיון לחימה קודם משפיע על אסטרטגיית הלחימה ועל התוצאה של תחרויות מאוחרות יותר בזבובים. סרטון זה מתאר בדיקה ששימשה לחקר התנהגותה התוקפנית של דרוזופילה. הפרוטוקול לדוגמה כולל את הבדיקה המבוצעת במערך שמבטל את הטיפול בזבובים ולכן מפחית את הלחץ עבור בעלי החיים, מה שאחרת היה משפיע על ביצועי הנבדקים.

דרוזופילה בדיקת תוקפנות: שיטה לבדיקת פלסטיות התנהגותית בזבובים

השיטה למדידה למבוגרים זיכרון אסוציאטיבי דרוזופילה מתוארת. Assay מבוסס על היכולת של הזבוב לשייך ריח מוצג עם (שוק חשמלי) חיזוק שלילי ולאחר מכן לאחזר את המידע הזה במועד מאוחר יותר, ומאפשר זיכרון כדי להימדד.

דרוזופילה מבוגרים חוש הריח הלם למידה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לכימות ההימנעות של אנשים לחוצים. פרדיגמה זו היא עוצמתית אך ידידותית למשתמש וניתן להשתמש בה כדי להעריך את ההשפעה של גנים וסביבה על סוג אחד של אינטראקציה חברתית ב-Drosophila melanogaster.

Assay הפשוט לכימות חברתיות הימנעות ב Melanogaster דרוזופילה

במהלך זבוב פירות קרבות, דפוסי ההתנהגות שנצפו, להילחם דינמיקה, והלמידה וזיכרון הקשורים מושפעות תנאי ניסוי. הפרוטוקול המובא כאן מתאר הליך רומן שלגמרי מבטל טיפול בזבובים במהלך ניסויים. זה משפר את דינמיקת קרב ומאפשר היווצרות של תופעות "לוזר" חזקות.

גישה חדשה שמבטל טיפול לחקר תוקפנות והשפעת &quot;לוזר&quot; ב<em&gt; תסיסנית melanogaster</em

פרוטוקול זה מתאר לימוד תסיסנית זיכרון assay שנקרא מיזוג חיזור. זה assay קלאסי מבוסס על צמצום התנהגות החיזור הגברי לאחר דחייה מינית על ידי נקבה לא נקלט מראש. צורה טבעית זו של גמישות התנהגותית יכולה לשמש לבחינת למידה, זיכרון לטווח קצר וזיכרון לטווח ארוך.

תסיסנית חיזור התניה כמדד למידה וזיכרון

כאן אנו מציגים פרוטוקול שבו ניתן לדמיין את הסידן הטרום ו/או הפוסט-סינפטיות בהקשר של למידה וזיכרון של דרוזוהילה . בשנת הדמיה vivo סידן באמצעות synaptically חיישנים סידן מקומי משולב עם הפרדיגמה הקלאסית מיזוג ריח כגון הפלסטיות הסינפטית הבסיסית בבסיס סוג זה של למידה אסוציאטיבית עשוי להיקבע.

ב-Vivo סידן הדמיה אופטית של למידה הנגרמת הפלסטיות הסינפטית בדרוזופילה מלאנוסטר

הפרעת הספקטרום האוטיסטי (ASD) קשורה להתנהגות חברתית ותקשורתית לקויה ולהופעתה של התנהגות חזרתית. לצורך חקר הקשר בין גנים אוטסיים וליקויים התנהגותיים במודל דרוזופילה , מתוארות במאמר זה חמש פרדיגמות התנהגותיות להערכת ריווח חברתי, תוקפנות, חיזור, טיפוח והתנהגות הרגלה.

פרדיגמות להערכה התנהגותית במודל דרוזופילה של הפרעת הספקטרום האוטיסטי

מחסום משמעותי לחקר הפעילות התאית במהלך תהליכים קוגניטיביים כמו למידה וזיכרון הוא השימוש בחומרי הרדמה להכנת הדמיה in vivo . הרדמה פוגעת בזיכרון לטווח קצר ובקוגניציה במספר מודלים, כולל דרוזופילה. מחקר זה מציג שיטה ייחודית להכנת דרוזופילה בוגרת להדמיה in vivo ללא הרדמה.

ב Vivo הדמיה של פעילות עצבית בזבובים בוגרים של דרוזופילה לא מורדמת

למד שיטה פשוטה וחסכונית לחקר למידה אסוציאטיבית מרתיעה בזבובי פירות. הפרוטוקול משתמש בהלם חשמלי לדיכוי התנהגות גיאוטקסיס שלילית ב-Drosophila melanogaster.

דרוסופילה התנהגות הימנעות פסיבית כפרדיגמה חדשה לחקר למידה אסוציאטיבית מרתיעה

גלה סרטונים נוספים