משלוח תוך-חינוכי והדמיה של רנטגן של פתרון אבלטיבי מבוסס אתנול למניעה וטיפול מקומי בסרטן השד במודלים של עכבר

סרטן השד הוא הסרטן הנפוץ ביותר והגורם המוביל השני למוות הקשור לסרטן לנשים בארה"ב. גישות מניעה נוכחיות מוגבלות ומגיעות עם מגוון רחב של תופעות לוואי שליליות. יש צורך בהתערבויות חדשות למניעה ראשונית. פיתחנו שיטה לאספקה תוך-דלקתית של פתרון אבלטיבי מבוסס אתנול לאפיתליה החלבית של העכבר למניעת סרטן השד.

הזרקה ישירות לתוך פתח הפטמה מאפשרת מיקוד תאי אפיתל רירית עץ דביק עם נזק מינימלי לרקמות משניות. שיטה זו מאפשרת הדמיה בו זמנית ויוו באמצעות חלקיקי תחמוצת טנטלום כסוכן ניגודיות ברזולוציה גבוהה. שיטה זו עשויה להיות מותאמת לשימוש עם סוכני ניגודיות רנטגן אחרים וטיפולים מונעים שונים עם פתרונות אבלטיביים כימיים או תרמיים שונים.

הצעד הראשון המעורב בשיטה זו של מניעת סרטן השד מונחה תמונה הוא לגרום לטיפול אנטי דלקתי מורחב באמצעות מינון אוראלי של carprofen ניצול כוסות ג'ל סוכרלוז מוכן במעבדה. אנו מכינים את החיה באמצעות קרם depilatory כדי להסיר את הפרווה מהאזור המקיף את הפטמות להיות מוזרק. לאחר מכן זריקות intraductal מבוצעים בעזרת סטריאוסקופ כדי לאתר ולדמיין בצורה הטובה ביותר את פתיחת הפטמה להכנסת מחט.

לאחר מתן הפתרון, בעלי חיים מצולמים על ידי מיקרו-CT או פלואורוסקופיה כדי לקבוע עד כמה מוצלח הזריקות היו. סריקות מיקרו-CT ניתן לעבד כדי ליצור שחזורים 3D של עץ צינור החלב מוזרק לניתוח נוסף של מילוי מוצלח ומדדים אחרים. ראשית, להכין carprofen בריכוז הנדרש.

אנחנו עושים פתרון עובד של שני מ"ג לכל מ"ל כדי להזריק 0.5 מ"ל ולהשיג מנה סופית של מ"ג אחד לכוס. אתה יכול להוסיף צבע מזון סטרילי לתערובת כדי לאשר טוב יותר ערבוב מלא של התרופה לתוך סוכרלוז של הכוס. לאחר מכן, מניחים את הכוסות לתוך אמבט מים ב 60 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות.

הסר את הכוסות ולייבש אותם כדי למזער את האפשרות של זיהום. השתמש 70% מגבוני אתנול או אתנול כדי לנקות את פני השטח של מכסה הכוס ולאפשר להתייבש. השתמש מזרק כדי להזריק כמות הכרחית של פתרון carprofen דרך המכסה.

במקרה זה, אנחנו צריכים להזריק 500 מיקרוליטרים לתוצאה הרצויה. מניחים מדבקה מעל החור מהמחט ומנערים את הכוס במשך 15 שניות לפני מערבולת במשך 15 שניות נוספות. בדוק את הכוס עבור ערבוב הומוגני על ידי מחפש גושים של כחול כהה.

לאחר מכן ניתן לשמור את הכוסות בקירור למשך עד חודש. הכנת החיה צריכה להתרחש יומיים עד שלושה ימים לפני ההליך התוך דלקתי. התחל על ידי המרדים את החיה באמצעות איזופלוריין.

מעבירים עכבר מורדם לקונוס האף שממשיך לספק איזופלוריין. החל חומר סיכה לעיניים על העכבר בעוד על חרוט האף ולאחר מכן מקם את העכבר על גבו. השתמש אפליקטור קצה כותנה כדי להחיל קרם depilatory על האזור של בלוטות החלב אתה מתכנן להזריק.

יש למרוח את המוליך למעלה ולמטה על פני עור החיה באזור הרצוי כדי לסייע בהתרופפות מהירה יותר של הפרווה. חשוב להשאיר את הקרם על העכבר במשך זמן קצר ככל האפשר כדי למנוע שריפת העור. לאחר 10 עד 30 שניות של יישום, להשתמש במים חמים על גזה כדי להסיר לחלוטין את הקרם.

השתמש בשתיים עד ארבע שטיפות כדי להבטיח הסרה מלאה לפני ייבוש העור עם גזה נקייה. בדוק את האזורים של הסרת פרווה כדי לאשר ראות טובה וגישה לפטמות. חזור על הליך depilatory במידת הצורך.

מניחים את העכבר בכלוב התאוששות נקי על כרית התחממות כדי להתאושש מהרדמה. תן carprofen אחת להכין עכברים בכלוב הבית שלהם לאחר ההתאוששות. אתה תתחיל שוב על ידי המרדים את החיה באמצעות הרדמה איזופלוריין ולהעביר את העכבר לקונוס האף ברגע שהוא הושרה במלואו.

חומר סיכה לעיניים יוחל לפני הנחת החיה על גבו לזריקות. זה יכול להיות מועיל כדי להדביק את הרגליים ליד בלוטות החלב שיוזרקו, אבל אין צורך. הכן את המזרק עם הנפח הרצוי של פתרון הזרקה בתוספת מיקרוליטר אחד במקרה כמה נשפך החוצה לאחר הסרת מחט.

זה יכול להיות מועיל למלא עם נפח נוסף כדי לבדוק את המחט לזרימה חופשית של הפתרון מיד לפני ההזרקה. אם הזרקת יותר מבלוטת חלב אחת, זה יכול לחסוך זמן למלא מראש מזרקים מרובים אם זמין. היזהר לא לעשות את זה מוקדם מדי אם הפתרון נוטה סתימה כאשר עזב לשבת.

הכן את הפטמה על ידי הסרת כל עור מת גלוי באמצעות מלקחיים טיפ דק במידת האפשר. אין צורך להסיר את כל העור המת אם זה לא חוסם את פתיחת הפטמה והוא עמיד בפני משיכה. זה יכול לפעמים לגרום לפציעה ונפיחות לפטמה אם עור מת מודבק לעור חי חזק מדי.

עם השיפוע של המחט גלוי, להכניס את המחט לתוך הפתיחה של הפטמה בעזרת הדרכה מן המלקחיים הטה בסדר. בהתאם לאורך ומוצקות של הפטמה, זה לא תמיד יכול להיות אפשרי להחזיק את הפטמה בעת הנחיה במחט. לפעמים יש צורך לתמרן את הפטמה עם המחט כדי לאפשר את מלקחיים למשוך את הפטמה מעל המחט במקום להנחות את המחט למטה לתוך הפטמה.

ברגע שהמחט משופעת מוקפת במלואה בפטמה ובצינור הראשי, התחל להזריק באיטיות את הפתרון. התעריף הרצוי הוא כ-40 מיקרוליטר לדקה. הימנע הזרקה מהר יותר מזה כדי למנוע נזק אפשרי לעץ דביק.

לאחר הזרקה מלאה, המתן 30 שניות לפני הסרת המחט מהפטמה בסיוע המלקחיים. זה ימזער כל דליפה מהפטמה. להעריך את האזור עבור כל סימנים של זריקה לא מוצלחת.

מראה כיפה עשוי להצביע על הזרקת כרית שומן או טראומה לאזור. לעתים קרובות ניתן לראות כי זריקה לתוך כרית השומן מתרחשת אם הפתרון מכיל צבע או אם אתה מחפש בזהירות עבור דום באתר ההזרקה כפי שניתן לראות כאן. המשך להזריק את בלוטות החלב הנותרות הנדרשות לניסוי שלך בצורה דומה, וציין נפחי הזרקה וכל מקרים של דליפה.

אזורים מסוימים של העכבר עשוי להיות קשה יותר להזריק עקב בעיות כגון מיקום יד מביך או הפרעות נשימה. לדוגמה, מזרק ימני יהיה כנראה הקשה ביותר הזרקת הבלוטות בצד הימני העליון של העכבר לראות כאן. אלה נעים יותר בשל קרבה לריאות וזה יכול להיות קשה למצוא מיקום יד טוב עם הגוף של החיה בדרך של הנחת פרק כף היד על פני השטח.

חלקם עשויים למצוא את זה קל יותר למקם מחדש את העכבר אם חרוט האף מאפשר. בעת הזרקת פתרון המכיל אתנול, יש לנקוט בזהירות כדי למנוע שיכרון אלכוהול מערכתי. זה דורש לדעת כמה אתנול ניתן להזריק בפגישה אחת וניהול קניין רוחני פתרון המכיל סוכרוז במהלך ההליך כדי לנטרל את ההשפעות.

לאחר הליך תוך-דלקתי, בעלי חיים עשויים להיות התאושש בכלוב נקי על כרית חימום או עבר למערכת micro-CT להדמיה של עצי רקיע מלאים. יש לשחזר את העכבר גם לאחר כל הפעלת הדמיה. לאחר העברת החיה המוזרקת למערכת מיקרו-CT, המשך לתת איזופלוריין כדי לשמור על הרדמה במהלך הדמיה.

זה יכול להיות מועיל לתקנן מיקום הדמיה על ידי הדבקת הרגליים ליד האתר כדי להיות בתמונה. לדוגמה, הדבקת הרגליים האחוריות למטה בתנוחה מורחבת יכולה לשמור על עצם הרגליים מלעכב את הנוף של הבלוטות המוזרקות. הדבקת הרגליים הקדמיות בתנוחה מורחבת כלפי מעלה יכולה לסייע באופן דומה בצפייה בבלוטות העליונות.

מצאנו גם כי הדבקה על פני הבטן של העכבר יכול לסייע בהפחתת חפץ נשימה עבור הבלוטות התחתונות. ישנם פרמטרי סריקה מקובלים רבים להדמיה חזותית של עץ הרקיע. תמיד יש לנקוט בזהירות כדי להבטיח את מינון הקרינה הנובעת סריקות אלה אינו עולה על מגבלות הקרינה עבור זן נתון של עכברים.

מינון קרינה יכול להיות מופחת מאוד על ידי צפייה פלואורוסקופיה וציון הצלחה משלוח במקום לרכוש תמונות עם זמני חשיפה ארוכים יותר. פרמטרי הסריקה הסטנדרטיים שלנו מקובלים להדמיה חוזרת אם רק רוכשים סריקות סטנדרטיות קצרות של שתי דקות. סריקות ברזולוציה גבוהה יותר עד 14 דקות מקובלות כהליך סופני לפני המתת חסד.

סריקות ארוכות יותר אלה אינן מקובלות על מחקרים אורכיים כפי שהם יכולים לגרום למחלת קרינה בבעלי החיים. בעל חיים זה הוזרק עם תמיסת אתנול המכילה 100 מילימולרי תחמוצת טנטלום ניגודיות בבלוטות ארבע ותשע. הרכישה הנוכחית היא סריקה ברזולוציה גבוהה של 14 דקות ברזולוציה גבוהה של הבלוטות התחתונות המוזרקות.

פלואורוסקופיה של החיה מאפשרת לנו לראות את ארכיטקטורת עץ הרקיע מודגשת על ידי הניגוד בתוך פתרון ההזרקה. מערכת המיקרו-CT בה אנו משתמשים כוללת תוכנה מובנית המאפשרת יצירת עיבודים מהירים להערכת הצלחת ההזרקה ללא ניתוח רשמי. תכונה זו כוללת מחוון ניגודיות פשוט המאפשר הפחתת אות לרעש סבירה.

המגבלה של עיבודים אלה היא שאותם סף אותו אות מוחל על התמונה כולה. זה מאפשר אותות בהירים כי הם בבירור לא חלק מעץ דביק, כגון ברזל בתזונה, להישאר בביצוע. עיבודים רשמיים טובים יותר יכולים להתבצע באמצעות תוכנת ניתוח מתוחכמת יותר המאפשרת פילוח של תחום העניין.

כדי לקבל את העיבוד הטוב ביותר של עץ הרקיע הבלעדי, אנו ממליצים לפלח את כרית השומן החלב לעיבוד תמונה נוסף. תהליך זה דורש קוו מעקב אחר גבולות כרית השומן לאורך כל העובי של החיה. מצאנו כי מעקב אחר כל פרוסה שלישית והפצת האובייקט מספיקים כדי ללכוד את כל הצינור.

זה יכול להיות תהליך סובייקטיבי, הדורש הקפדה על תקני מעבדה למעקב כדי להבטיח תפוקה דומה מכל האנשים המנתחים סריקות. היכרות עם אנטומיה יכולה לעזור עם שיפוט קורא על אילו תחומים לכלול. לאחר הפצת עקבות, אז ניתן לסף את הביצוע בתוך טווח מסוים כדי להציג רק את הניגוד הכלול בתוך בלוטת החלב.

זה צריך להיות הפתרון בתוך עץ הרקיע, כמו גם כל דליפה בסביבה הקרובה. טווח של 300 עד 3, 000 HU נוטה לעבוד היטב במקרה של פתרונות המכילים תחמוצת טנטלום. דוגמה לביצוע מעובד במלואו ניתן לראות כאן בהיבטים מרובים.

בהתאם לאופן שבו החיה מכוונת במיקרו-CT, ייתכן שיהיה צורך לכוון מחדש קבצי DICOM בתוכנת הניתוח כדי לייצג מיקום אנטומי אינטואיטיבי עם ראש החיה בחלק העליון של התמונה. זה עשוי להיות גם קשה לקבוע איזו בלוטה נצפתה אם אתה לא דואג לסובב את התמונה בצורה דומה בכל פעם. מדידות נוספות כגון נפח או אורך ניתן לבצע לאחר שיצרת שחזור של עץ הרקיע.

אימות למסירה מוצלחת באמצעות הליך זה ניתן להדגים לא רק על ידי עיבודי מיקרו-CT תלת-ממדיים כמתואר כאן, אלא גם באמצעות תושבות שלמות עם כתם כפול כתם שלם עם כחול אוונס מוזרק החופף את כל עץ הרקיע מודגש עם בוגר קרמיין. מיקרוסקופיה קונפוקלית תלת-ממדית יכולה להדגיש את הארכיטקטורה של עץ הרקיע בבלוטה מנוקה מוכתמת ב- e-cadherin. מאמץ למתח ושונות עכבר לעכבר ואנטומיה של הפטמה יכולים להקשות פחות או יותר על הזרקת בלוטות.

זוהי דוגמה של פטמה אידיאלית להזרקה עם פרופיל גבוה כדי להקל על אחיזה. פטמות עם פרופילים נמוכים יותר, כגון זה, יכול להיות קשה יותר למנות בהצלחה. הבדלים אלה יכולים לעשות את זה יותר סביר להשיג זריקה מוצלחת ללא טראומה או דום כפי שניתן לראות כאן או סביר יותר להיות לא מוצלח כפי שמוצג על ידי המראה הכיפה של הזרקת כרית שומן זו.

כשמדובר במניעת סרטן השד, יש כיום שתי טקטיקות עיקריות בשימוש. ההמתנה הראשונה, הפקוחה, אינה כרוכה בהתערבות אמיתית. אנשים הרודפים אחר נתיב זה מנוטרים באופן קבוע עבור כל גושים ברקמת השד שלהם שיצביעו על היווצרות סרטן מתרחשת.

גילוי מחלות יזרז את הטיפול. כריתת שד מניעתית היא הליך פולשני יותר אשר מסיר את כל תאי האפיתל שממנו סרטן השד עשוי להתעורר יחד עם הסטרומה שמסביב. ניתוח זה יכול להיות תופעות לוואי חמורות והוא נבחר לעתים רחוקות כאפשרות מניעתית עבור אנשים עם סיכון נמוך או בינוני למחלה.

הגישה שלנו כוללת אבלציה אפיתל מקומית באמצעות הזרקה של פתרון אבלטיבי ישירות לתוך עץ צינור החלב. שיטה זו מפחיתה נזק משני וסביר להניח שתהיה אפשרות מושכת יותר עבור אנשים שאינם בסיכון חמור למחלה. תוספת הניגודיות להדמיה מיידית לאחר ההזרקה גם הופכת את זה לתרגום קל למרפאה.