עכבר בטן מפרצת אבי העורקים מודל המושרה על ידי יישום פרי וסקולרי של אלסטאז
11 בפברואר 2022
הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה כירורגית מתוקננת עבור מודל AAA המושרה אלסטאז באמצעות יישום ישיר של אלסטאז להרפתקנטיה של אבי העורקים הבטן האינפרא-יותרת בעכברים.
זהו פרוטוקול מתוקנן עבור מפרצת אבי העורקים בבטן המושרה אלסטאז, אשר ישפר מאוד את רבייה ואת העקביות של מחקרים באמצעות מודל זה. טכניקה זו יש קצב אינדוקציה עקבי של מפרצת אבי העורקים בבטן. הוא גם הבעלים של היתרון של הוצאות נמוכות וזמן פעולה קצר, אשר יביא כוח סטטיסטי חזק יותר ואת רבייה.
אתה צריך להבטיח את רקמות החיבור המכסות את אבי העורקים הוסרו, כך elastase יהיה סיכוי טוב יותר של חדירה, אבל להיזהר לא לפגוע בכלי הדם. כדי להתחיל, לנהל חמישה מיליגרם לכל קילוגרמים של carprofen תת עורית, 30 דקות לפני אינדוקציה של הרדמה. בדוק את העכבר המרדים לחוסר תגובת צביטת בוהן לפני חתך בעור.
בצע חתך אורך 2.5 ס"מ על העור, לאורך קו האמצע של הבטן האמצעית והתחתונה. משכו בעדינות את השריר שמתחתיו ובצעו חתך אורך של 2.5 ס"מ לאורך לינאה אלבה. השתמש אפליקטורים כותנה רטובה הטה כדי להזיז את המעיים ואת הבטן לצד ימין של העכבר, ולגשת לחלל הבטן.
השתמש מלקחיים כדי להסיר בעדינות את רקמת החיבור המכסה את אבי העורקים בבטן ואת הווריד התחתון. השתמשו במלקחיים כדי לנתח בעדינות את החלק האחורי של אבי העורקים בבטן ואת הווריד התחתון מהשרירים שמתחת. מניחים חתיכה של ארבעה סנטימטרים על ארבעה מילימטרים כפפה פס דרך החלק האחורי של אבי העורקים בבטן ו vena cava נחות, וליישר את הפס.
מניחים את הפס במרחק של כ-0.5 ס"מ מעורק הכליה הימני. מעל הפס, מניחים חתיכה של שלושה סנטימטרים על שני מילימטרים כרית כותנה דרך החלק האחורי של אבי העורקים בבטן ו vena cava נחות. לאחר מכן, ליישר את כרית כותנה.
כדי לדגור על האלסטאז, השתמש בפיפטה כדי להפיל 30 מיקרוליטרים של אלסטאז לבלב חזירי על קטע אבי העורקים מעל כרית הכותנה. עוטפים את כרית הכותנה ומפשיטים סביב אבי העורקים והווריד התחתון. לשטוף חתיכה של 10 ס"מ על 10 ס"מ גזה עם סטרילי 0.9% מלוחים ומניחים אותו על הבטן.
לאחר 30 דקות, להסיר את הפס ואת כרית כותנה עם מלקחיים. להשקות את אבי העורקים ואת חלל הבטן עם 500 microliters של סטרילי 0.9% מלוחים. השתמש גזה לספוג את תמיסת המלח הנותרת.
משוער מחדש את שכבות השריר עם תפר מונופילמנט ריצה 6-0 שאינו נספג. לאחר מכן, סגור את העור עם שלושה עד ארבעה מופרעים ב 6-0 תפרים מונופילמנט לא נספג. שיעור השכיחות של פיתוח מפרצת אבי העורקים בבטן ביום שלאחר הניתוח 14 היה 91.7% עבור בעלי חיים נקבות, בעוד שיעור השכיחות של בעלי חיים זכרים היה 72.7% בין 19 בעלי החיים שבהם פותחה מפרצת אבי העורקים בבטן, נצפתה עלייה של פי 1.7 ופי 1.6 בקוטר אבי העורקים המקסימלי בבטן, אצל נקבות וזכרים בהתאמה, בהשוואה לבקרות שאינן ניתוחיות.
תמונות מייצגות של אבי העורקים מקבוצות שאינן ניתוח וניתוחים ביום 14 לאחר הניתוח מוצגות. טכניקה זו שימשה ככלי פוטנציאלי כדי לעזור לנתח את הפתופיזיולוגיה של טריפל A ולעזור בגילוי מטרות טיפוליות פוטנציאליות חדשות.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
סקירה כללית
מחקר זה מציג פרוטוקול כירורגי סטנדרטי להשראת מפרצת בעורק האבdominal (AAA) בעכברים באמצעות אלסטאז. השיטה מבטיחה שחזוריות גבוהה ועלויות ניתוח נמוכות, מה שהופך אותה לכלי רב-עוצמה לחקר AAA.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום מחקר
- ביולוגיה קרדיווסקולרית
- פתופיזיולוגיה של מחלות באורטה
- מידול ניסויי בעכברים
רקע
- מפרצת בעורק האבdominal (Abdominal aortic aneurysm) היא מצב רפואי חמור עם תחלואה משמעותית.
- המודלים הנוכחיים נבדלים ביניהם ברמת השחזור ובעלות.
- גישה סטנדרטית עשויה לשפר את תוצאות המחקר.
שיטות שנעשה בהן שימוש
- יישום ישיר של elastase מהלבלב של חזיר על ה-adventitia של האורטה.
- מודל עכבר (C57BL/6 או זנים דומים).
- טכניקות של דיסקציה כירורגית והערכות מעקב.
תוצאות עיקריות
- שכיחות של 91.7% ל-AAA בעכברים נקבות ו-72.7% בזכרים עד היום ה-14 לאחר הניתוח.
- נצפו עליות משמעותיות בקוטר המקסימלי של אבי העורקים הבטני.
- תומך בישימות המודל להבנה מעמיקה יותר של AAA ולגילוי מטרות טיפוליות.
מסקנות
- פרוטוקול זה מדגים שיטה אמינה להשראת AAA.
- יש לו פוטנציאל לשפר את המחקר בביולוגיה קרדיווסקולרית ובפיתוח טיפולי.
שאלות נפוצות
רלוונטיות תעשייתית למנהלים
מודלים סטנדרטיים של עכברים עבור מפרצת בעורק האבdominal (AAA) הם קריטיים להפחתת סיכונים בשלבים מוקדמים של גילוי מטרות קרדיו-וסקולריות ולאפשר מחקרים מכניסטיים הניתנים לשחזור. פרוטוקול יישום האלסטאז הפרי-וסקולרי מספק עקביות גבוהה ועוצמה סטטיסטית, התומכות בבדיקת השערות חסונה ובהשוואה בין מחקרים. מודל זה מחזק את הביטחון בפורטפוליו על ידי אספקת מערכת פרה-קלינית מהימנה לבחינת הפתוגנזה של AAA והערכת מטרות טיפוליות.
יישומים אסטרטגיים במחקר ופיתוח ביו-פרמצבטיים
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- מאפשר חקירה של הפתופיזיולוגיה של AAA וזיהוי מנגנונים המניעים את המחלה.
- תומך בתיקוף פונקציונלי של מטרות מועמדות בהקשר של in vivo הניתן לשחזור.
- מספק ביטחון חיזוי עבור תוכניות לב-כלי דם בשלבים מוקדמים.
סריקה ופיתוח בדיקה
- מספק מערכת in vivo מתוקפת להערכת התערבויות פרמקולוגיות המכוונות ל-AAA.
- מספק מדדים כמותיים סטנדרטיים, כגון שינויים בקוטר האורטה, לצורך פיתוח בדיקות.
- מאפשר הדירות ויכולת הרחבה לסריקת תרכובות במחקרים פרה-קליניים.
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- מתואם עם נקודות סיום רלוונטיות למחלה לצורך חקירת סמנים ביולוגיים תרגומיים.
- תומך ברציפות מהגילוי המכניסטי ועד להערכת יעילות פרה-קלינית.
- מפחית את הסיכון הביולוגי על ידי מידול מאפיינים מרכזיים של AAA אנושי בעכברים.
שילוב תהליכי עבודה וצינורות עיבוד (Pipeline)
מודל זה משתלב ברצף שבין שלב הגילוי לשלב הפרה-קליני, ובכך הוא מגשר בין מחקרים מכניסטיים לבין זיהוי מועמדים לתרופות לטיפול ב-AAA.
- ביולוגיה של תגליות: תומך בבדיקה מונחית-השערה של מנגנוני AAA ותפקידי המטרות.
- סריקה: מספקת תוצאות כמותיות הניתנות לשחזור לצורך הערכת יעילות של תרכובות.
- אנליטיקה: מאפשרת השוואה סטטיסטית של הרחבת האורטה ושיעורי השכיחות בין קבוצות ניסוי.
- מחקר תרגומי: מקל על התאמה למאפיינים קליניים של AAA לצורך פיתוח סממנים ביולוגיים ונקודות סיום.
- שימוש חוזר ארגוני: מציע מודל סטנדרטי וחסכוני הניתן להתאמה בין צוותי מחקר קרדיווסקולריים.
השפעה תפעולית וארגונית
- ערך מדעי: מגביר את הביטחון החזוי ומפחית עמימות מכניסטית במחקרי AAA.
- ערך תפעולי: משפר את השחזוריות, הסטנדרטיזציה והתפוקה עבור מחקרי in vivo.
- ערך אסטרטגי: משפר את איכות קבלת ההחלטות לגבי המשך הפיתוח (go/no-go) ואת הקצאת ההון בקווי פיתוח קרדיווסקולריים מוקדמים.
- השפעה על הפורטפוליו: מאפשר תיעדוף מותאם סיכונים של מטרות AAA ומועמדים טיפוליים.
שיקולי יישום
- דורש מומחיות כירורגית והכשרה פרוצדורלית סטנדרטית להשגת תוצאות עקביות.
- דורש גישה לסביבות ניתוח לבעלי חיים ולכלים למדידה או لديמות כמותית.
- מחייב הקפדה קפדנית על הפרוטוקול בין צוותים שונים כדי לצמצם שונות בין מחקרים.
- ייתכן שיהיה צורך בהתאמה עבור זני עכברים שונים או נקודות סיום ניסיוניות שונות.
- מגבלות פוטנציאליות כוללות שונות טכנית ומאפיינים פתופיזיולוגיים ספציפיים למודל.
