Production of High-Titer Recombinant Newcastle Disease Virus from Allantoic Fluid

Jacob G. E. Yates; Alexander Leacy; Phuc H. Pham; Nicole Zielinska; Emily A. Tusnadi; Leonardo Susta; Sarah K. Wootton

doi:10.3791/63817

ייצור של נגיף מחלת ניוקאסל רקומביננטי בעל טיטר גבוה מנוזל אלנטואי

JoVE Journal
Cancer Research

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Cancer Research

Production of High-Titer Recombinant Newcastle Disease Virus from Allantoic Fluid

ייצור של נגיף מחלת ניוקאסל רקומביננטי בעל טיטר גבוה מנוזל אלנטואי

Full Text

4,562 Views

07:24 min

May 25, 2022

DOI: 10.3791/63817-v

Jacob G. E. Yates¹, Alexander Leacy¹, Phuc H. Pham¹, Nicole Zielinska¹, Emily A. Tusnadi¹, Leonardo Susta¹, Sarah K. Wootton¹

¹Department of Pathobiology,University of Guelph

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

כאן אנו מספקים הליך מפורט לייצור, טיהור וכימות של נגיף מחלת ניוקאסל רקומביננטי בעל טיטר גבוה. פרוטוקול זה מניב באופן עקבי > 6 × 10⁹ יחידות יוצרות פלאק/מ"ל, ומספק כמויות נגיפיות המתאימות למחקרים בבעלי חיים in vivo . מתוארים מבחני בקרת איכות נוספים להבטחת בטיחות in vivo .

פרוטוקול זה מתווה את הטכניקות המשמשות לייצור וירוס מחלת ניוקאסל, כך שניתן יהיה לתת אותו בבטחה לעכברים ולבעלי חיים אחרים כגון אוגרים וכבשים. השימוש בסינון זרימה משיק מאפשר עיבוד יעיל יותר של נפחי התחלה גדולים בהשוואה להליכים קיימים המשתמשים בתהליכי צנטריפוגה בלבד. זהו הליך ארוך הכולל מספר שלבים מורכבים, כלומר ניהול זמן עשוי להוות בעיה.

הייתי ממליץ לזהות את כל שלבי ההשהיה הפוטנציאליים כך שניתן יהיה לפצל את הטכניקה כראוי, ולמזער את הלחץ. מי שידגים את ההליך הזה יהיה אלכס, עוזר מחקר מהמעבדה שלי. עבור טיהור של וירוס מחלת ניוקאסל או NDV, ראשית, ראש מערכת הניסוי שנקבעה בעבר על ידי הפעלת 50 מיליליטרים של PBS דרכה.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos