טכניקה שונה להתכווצות רוחבית של אבי העורקים בעכברים
18 באוגוסט 2022
הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה שונה ופשוטה עם הליך היצרות אבי העורקים הרוחבי (TAC) זעיר פולשני באמצעות retractor מתוצרת עצמית. הליך זה יכול להתבצע ללא מכונת הנשמה או מיקרוסקופ ומציג עומס לחץ, המוביל בסופו של דבר היפרטרופיה לבבית או אי ספיקת לב.
פרוטוקול זה מספק טראומה כירורגית מהירה מוגבלת, לא מסובכת וזולה לביצוע ניתוח TAC. מודל זה מתקרב לקשת אבי העורקים באמצעות משחזר מתוצרת עצמית ואינו זקוק לסולם מיקרוכירורגי או הנשמה מכנית, ובכך מגביל משמעותית את הטראומה הניתוחית. כדי להתחיל, להכין מזרק חמישה מיליליטר.
לאחר מכן הפוך את המחט לקהה על ידי צביטת קצהו עם מחזיק מחט. הכינו מחט 27 מד קהה עם מחזיק מחט וכופפו את קצהו ב 90 מעלות. השתמש בחוט ברזל שהושג מסחרית וקשר אותו סביב המחט.
יוצרים חוטם קטן או לולאה בקצה הקהה של המחט. לעקר את כל הכלים הכירורגיים לפני הניתוח על ידי autoclaving. יש לוודא את עומק ההרדמה עם צביטת בוהן כדי למנוע יובש בזמן ההרדמה.
יש למרוח משחה אופתלמית על שתי העיניים. לאחר מכן הניחו את העכבר במצב שכיבה על כרית חימום מכוסה בוילון סטרילי כשראשו מצביע על המפעיל. לתקן את הגפיים שלה עם סרט דבק חותכות עם תפר 4-0.
כעת, הכנס בדיקה רקטלית כדי לפקח על טמפרטורת הגוף במהלך הניתוח. בעזרת מספריים עיניים מעוקרות, חותכים חור בשפריץ סטרילי חדש וחד פעמי. הניחו את הווילון הסטרילי מעל העכבר וודאו ששדה הניתוח נטול השיער נראה דרך החור.
לאחר ביצוע חתך להפריד את העור ואת fascia שטחי ולחשוף את קנה הנשימה ואת עצם החזה הפרוקסימלי. לאחר מכן בצע בזהירות חתך קו אמצע אורכי של שלושה עד ארבעה מילימטרים עד עצם החזה מהקצה העליון לזווית החזה והרים בעדינות את עצם החזה בעזרת מלקחיים. באמצעות מלקחיים ישרים לנתח בבוטות את כלי המטרה ואת הרקמות סביבו.
עכשיו, להחזיק את retractor תוצרת עצמית בעבר עם חוט חוט ביד ימין. בזהירות להעביר את החוטם של retractor מתחת אבי העורקים בין עורק התרדמה המשותף השמאלי לבין המקור של עורק המלים הימני. העבר את המשחזר ליד שמאל.
החזיקו את הפינצטה המיקרוסקופית ביד ימין והעבירו תפר משי 7-0 דרך לולאת הסנר בקצה. משוך את המשחזר. מניחים מחט 27 מד במקביל לאבי העורקים וקושרים את התפר סביב המחט ואבי העורקים.
לאחר מכן החזיקו את מחט מד 27 עם מלקחיים אופתלמיים ואת הקשר קשור למחט מד 27 ואבי העורקים עם מלקחיים נוספים. משוך במהירות אך בעדינות את מחט מד 27 מהקשירה. תפרו את העור בתפר מונופילמנט סינתטי 4-0 בתבנית תפר קטוע.
הניחו את העכבר על כרית חמה וחכו שהוא יתחדש. בדרך כלל, העכבר מתעורר לחיים תוך כ -60 דקות. לאחר ארבעה שבועות של ניתוח.
מקטע פליטה וקיצור שברים הופחתו באופן משמעותי בעכברי התכווצות אבי העורקים הרוחבית בהשוואה לעכברי דמה. עם זאת, מסת החדר השמאלי והקוטר הפנימי של החדר השמאלי היו גבוהים באופן משמעותי בעכברי התכווצות אבי העורקים הרוחבית. השלב החשוב ביותר בחלקיק זה הוא מעבר תפר מתחת לקשת אבי העורקים.
כל הסרטים חייבים להיות עדינים כדי להפחית מתיחה מיותרת לעורק. בעקבות הליך זה, החוקרים יכולים ליישם טיפול רפואי במודל החייתי על מנת לחקור מטרות טיפוליות פוטנציאליות לחולים עם היפרטרופיה לבבית או אי ספיקת לב.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
סקירה כללית
פרוטוקול זה מפרט הליך של היצרות אורטלית רוחבית (TAC) מזעפר-פולשני באמצעות רטרקטור (מסיח) בהכנה עצמית, שנועד להשרות עומס לחץ ולחקור היפרטרופיה של הלב או אי-ספיקת לב. ההליך הוא פשוט ואינו דורש הנשמה מכנית או מיקרוסקופיה מתקדמת.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום מחקר
- קרדיולוגיה
- מודלים חייתיים של מחלות לב
- טכניקות כירורגיות
רקע
- מודל ה-TAC הוא קריטי לחקר היפרטרופיה של הלב ואי-ספיקת לב.
- צמצום הטראומה הכירורגית הוא חיוני לשיפור ההחלמה ותוצאות הניסוי.
- שיטות TAC מסורתיות דורשות לרוב ציוד מורכב, שפרוטוקול זה שואף לפשט.
שיטות שנעשה בהן שימוש
- נעשה שימוש ברטראקטור (מסיח) שהוכן באופן עצמאי ובמחטים קהות לביצוע ה-TAC.
- המערכת הביולוגית שנעשה בה שימוש היא מודל עכבר.
- הטכנולוגיות המרכזיות כוללות כלי ניתוח בסיסיים עם דרישה מוגבלת למיקרו-כירורגיה.
תוצאות עיקריות
- בעקבות הליך ה-TAC, נצפו שינויים משמעותיים במסתה של החדר השמאלי ובfracציה של הפליטה במודלים של היפרטרופיה של הלב לאחר ארבעה שבועות.
- התוצאות מאשרות השראה מוצלחת של עקה לבבית והיפרטרופיה בתגובה להליך.
- דבר זה מתקף את התועלת של המודל עבור חקירות טיפוליות נוספות.
מסקנות
- מחקר זה מציג בהצלחה שיטה מפושטת לסימולציה של עומס על הלב בעכברים.
- הטכניקה רלוונטית לחוקרים הלומדים מחלות לב וטיפולים פוטנציאליים.
שאלות נפוצות
רלוונטיות תעשייתית למנהלים
היצרות אורטלית רוחבית (TAC) בעכברים היא מודל פרה-קליני בסיסי לחקר היפרטרופיה של הלב ואיסף לב תחת עומס לחץ. טכניקת TAC זו, המהווה גרסה שופרה ופולשנית באופן מינימלי, מפחיתה את הטראומה הכירורגית ואת המורכבות התפעולית, ובכך מאפשרת מידול מחלה הניתן לשחזור ובקנה מידה רחב יותר לצורך גילוי תרופות קרדיווסקולריות בשלבים מוקדמים. הגישה תומכת בהחלמה מהירה וברלוונטיות פיזיולוגית, ובכך מגבירה את הביטחון החזוי עבור מחקרים תרגומיים והערכת מטרות טיפוליות.
יישומים אסטרטגיים במו"פ של ביו-פרמה
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- מאפשר מידול חסון של היפרטרופיה לבבית המושרית על ידי עומס לחץ לצורך מחקרים מכניסטיים.
- מקל על תיקוף תפקודי של מטרות קרדיו-וסקולריות במערכת in vivo מבוקרת.
- תומך בבחינה מבוססת-השערות של מסלולי עקה לבבית הרלוונטיים למחלה בבני אדם.
סריקה ופיתוח בדיקה
- מספקת פלטפורמה סטנדרטית וניתנת לשחזור להערכת התערבויות מועמדות in vivo.
- מפחיתה שונות פרוצדורלית, ובכך תומכת בקבלת תוצאות כמותיות עקביות כגון ejection fraction ומסת החדרים.
- מייעלת את הכנת המודל, ובכך מגדילה את התפוקה עבור קמפיינים של סריקה פרה-קלינית.
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- מתואם עם נקודות קצה רלוונטיות למחלה לצורך פיתוח ביומרקרים תרגומיים במחקר של אי-ספיקת לב.
- מאפשר רציפות משלב הגילוי המוקדם ועד להערכת יעילות פרה-קלינית של טיפולים חדשניים.
- תומך בהחלטות קידום מותאמות סיכון באמצעות מידול של פנוטיפים לבביים רלוונטיים מבחינה קלינית.
שילוב תהליכי עבודה ומסלולי עיבוד
מודל TAC פולשני-מינימלי זה משתלב בקו המחקר של גילויים קרדיווסקולריים, החל ממחקרים מכניסטיים מוקדמים ועד להערכה פרה-קלינית של מועמדים טיפוליים.
- ביולוגיה של הגילוי: תומך בבדיקת השערות ובבירור מסלולים במודלים של עומס לבבי.
- סריקה: מספק מדידות כמותיות וניתנות לשחזור של תפקוד הלב לצורך הערכת תרכובות.
- אנליטיקה: מאפשר השוואה סטטיסטית של פרמטרים לבביים בין קבוצות ניסוייות.
- מחקר תרגומי: מספק גשר לרלוונטיות קלינית על ידי מידול פנוטיפים מרכזיים של אי-ספיקת לב.
- שימוש חוזר ארגוני: מציע פלטפורמה סטנדרטית וניתנת להרחבה לשימוש חוזר בתוכניות מחקר ופיתוח קרדיווסקולריות.
השפעה תפעולית וארגונית
- ערך מדעי: מגביר את הביטחון בחיזוי ומפחית עמימות מכניסטית בתיקוף של מטרות לבביות.
- ערך תפעולי: ממזער את המורכבות הכירורגית, סטנדרטיזציה של פרוצדורות ומאיץ את לוחות הזמנים של ההחלמה.
- ערך אסטרטגי: משפר את איכות קבלת ההחלטות לגבי המשך התקדמות (go/no-go) ואת יעילות ההון על ידי הפחתת סיכון ביולוגי בשלבים מאוחרים.
- השפעה על הפורטפוליו: מאפשר תיעדוף של נכסים קרדיו-וסקולריים מותאם סיכונים, המבוסס על נתונים פרה-קליניים חסונים.
שיקולי יישום
- דורש מומחיות בניתוחים בבעלי חיים קטנים ובפיזיולוגיה קרדיווסקולרית.
- נדרש סט מכשירים כירורגיים בסיסיים ורטרקטור (מפריח) בהכנה עצמית למניפולציה של כלי דם.
- דורש סטנדרטיזציה בין-צוותית של פרוטוקולים כירורגיים ופרוטוקולי ניטור לאחר ניתוח.
- ניתן להתאמה לזני עכברים שונים, אך עשוי לדרוש אופטימיזציה עבור רקעים גנטיים ספציפיים.
- מגבלות פוטנציאליות כוללות שונות טכנית בכיווץ כלי הדם ובמדידת נקודת הסיום.
