Name: הערכת יעילותן של חומצות פרוקסי אורגניות למיגור ביופילמים חלביים בגישה המשלבת שיטות סטטיות ודינמיות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-12-09T13:50:00.000+00:00
Duration: 11 min 47 s
Description: למדו הערכת יעילות חומצות פרוקסי אורגניות נגד ביופילמים חלביים בשיטות סטטיות ודינמיות. השיטה משלבת ביוריאקטור ומסייעת לחוקרים לפתח אסטרטגיות חיטוי יעילות בתעשיית המזון.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך על ידי Consortium de Recherche et Innovations en Bioprocédés Industriels au Québec (CRIBIQ) (2016-049-C22), Agropur, Groupe Sani Marc ומועצת המחקר למדעי הטבע וההנדסה של קנדה (NSERC) (RDCPJ516460-17). אנו מודים לתרזה פניקוני על הביקורת על כתב היד.

<ol><li>Canada's dairy industry at a glance. Canadian Dairy Information Centre. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://agriculture.canada.ca/en/canadas-agriculture-sectors/animal-industry/canadian-dairy-information-centre/canadas-dairy-industry-glance">https://agriculture.canada.ca/en/canadas-agriculture-sectors/animal-industry/canadian-dairy-information-centre/canadas-dairy-industry-glance</a> (2017).</li>
<li>Oliver, S. P., Jayarao, B. M., Almeida, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Foodborne+pathogens+in+milk+and+the+dairy+farm+environment%3A+food+safety+and+public+health+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathogens+and+Disease%22%5BJournal%5D)">Foodborne pathogens in milk and the dairy farm environment: food safety and public health implications.</a> Foodborne Pathogens and Disease. 2 (2), 115-129 (2005).</li>
<li>Fondation de technologie laitière du Québec. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Science+et+technologie+du+lait.+3rd+edn%22">Science et technologie du lait. 3rd edn</a>. , Les Presses de l'Université Laval. Quebec. (2018).</li>
<li>Evanowski, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+communication%3A+Pseudomonas+azotoformans+causes+gray+discoloration+in+HTST+fluid+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+dairy+science%22%5BJournal%5D)">Short communication: Pseudomonas azotoformans causes gray discoloration in HTST fluid milk.</a> Journal of dairy science. 100, 7906-7909 (2017).</li>
<li>Bower, C. K., McGuire, J., Daeschel, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adhesion+and+detachment+of+bacteria+and+spores+on+food-contact+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Food+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">The adhesion and detachment of bacteria and spores on food-contact surfaces.</a> Trends in Food Science & Technology. 7 (5), 152-157 (1996).</li>
<li>Gupta, S., Anand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+pitting+corrosion+on+stainless+steel+%28grades+304+and+316%29+used+in+dairy+industry+by+biofilms+of+common+sporeformers%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Dairy+Technology%22%5BJournal%5D)">Induction of pitting corrosion on stainless steel (grades 304 and 316) used in dairy industry by biofilms of common sporeformers.</a> International Journal of Dairy Technology. 71 (2), 519-531 (2018).</li>
<li>Marchand, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofilm+formation+in+milk+production+and+processing+environments%3B+Influence+on+milk+quality+and+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Reviews+in+Food+Science+and+Food+Safety%22%5BJournal%5D)">Biofilm formation in milk production and processing environments; Influence on milk quality and safety.</a> Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 11 (2), 133-147 (2012).</li>
<li>Silva, H. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficiency+of+different+disinfectants+on+Bacillus+cereus+sensu+stricto+biofilms+on+stainless-steel+surfaces+in+contact+with+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Efficiency of different disinfectants on Bacillus cereus sensu stricto biofilms on stainless-steel surfaces in contact with milk.</a> Frontiers in Microbiology. 9, 2934(2018).</li>
<li>Sedlak, D. L., von Gunten, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemistry.+The+chlorine+dilemma%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Chemistry. The chlorine dilemma.</a> Science. 331 (6013), 42-43 (2011).</li>
<li>vander Veen, S., Abee, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mixed+species+biofilms+of+Listeria+monocytogenes+and+Lactobacillus+plantarum+show+enhanced+resistance+to+benzalkonium+chloride+and+peracetic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Mixed species biofilms of Listeria monocytogenes and Lactobacillus plantarum show enhanced resistance to benzalkonium chloride and peracetic acid.</a> International Journal of Food Microbiology. 144 (3), 421-431 (2011).</li>
<li>Saa Ibusquiza, P., Herrera, J. J., Cabo, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+to+benzalkonium+chloride%2C+peracetic+acid+and+nisin+during+formation+of+mature+biofilms+by+Listeria+monocytogenes%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Resistance to benzalkonium chloride, peracetic acid and nisin during formation of mature biofilms by Listeria monocytogenes.</a> Food Microbiology. 28 (3), 418-425 (2011).</li>
<li>Goetz, C., Larouche, J., Velez Aristizabal, M., Niboucha, N., Jean, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+organic+peroxyacids+for+eliminating+biofilm+preformed+by+microorganisms+isolated+from+dairy+processing+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+and+Environmental+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Efficacy of organic peroxyacids for eliminating biofilm preformed by microorganisms isolated from dairy processing plants.</a> Applied and Environmental Microbiology. 88 (4), 0188921(2022).</li>
<li>Vimont, A., Fliss, I., Jean, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+the+virucidal+potential+of+organic+peroxyacids+against+norovirus+on+food-contact+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Food+and+Environmental+Virology%22%5BJournal%5D)">Study of the virucidal potential of organic peroxyacids against norovirus on food-contact surfaces.</a> Food and Environmental Virology. 7 (1), 49-57 (2015).</li>
<li>ASTM International. ASTM E2562-17. Standard Test Method for Quantification of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Grown with High Shear and Continuous Flow using CDC Biofilm Reactor. ASTM International. , West Conshohocken, PA. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.astm.org/e2562-17.html">https://www.astm.org/e2562-17.html</a> (2017).</li>
<li>ASTM International. ASTM E2871-19. Standard Test Method for Evaluating Disinfectant Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa Biofilm Grown in CDC Biofilm Reactor Using Single Tube Method. ASTM International. , West Conshohocken, PA. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.astm.org/e2871-19.html">https://www.astm.org/e2871-19.html</a> (2019).</li>
<li>Niboucha, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+different+sampling+methods+of+biofilm+formed+on+stainless-steel+surfaces+in+a+CDC+biofilm+reactor%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Comparative study of different sampling methods of biofilm formed on stainless-steel surfaces in a CDC biofilm reactor.</a> Frontiers in Microbiology. 13, 892181(2022).</li>
<li>ASTM International. ASTM E2799-17. Standard Test Method for Testing Disinfectant Efficacy against Pseudomonas aeruginosa Biofilm using the MBEC Assay. ASTM International. , West Conshohocken, PA. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.astm.org/e2799-17.html">https://www.astm.org/e2799-17.html</a> (2022).</li>
<li>Parker, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ruggedness+and+reproducibility+of+the+MBEC+biofilm+disinfectant+efficacy+test%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microbiological+Methods%22%5BJournal%5D)">Ruggedness and reproducibility of the MBEC biofilm disinfectant efficacy test.</a> Journal of Microbiological Methods. 102, 55-64 (2014).</li>
<li>Stewart, P. S., Parker, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+antimicrobial+efficacy+against+biofilms%3A+A+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Measuring antimicrobial efficacy against biofilms: A meta-analysis.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 63 (5), 00020(2019).</li>
<li>Lindsay, D. K., Fouhy, K., Loh, M., Malakar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CDC+biofilm+bioreactor+is+a+suitable+method+to+grow+biofilms%2C+and+test+their+sanitiser+susceptibilities%2C+in+the+dairy+context%5BTitle%5D)+AND+%22International+Dairy+Journal%22%5BJournal%5D)">The CDC biofilm bioreactor is a suitable method to grow biofilms, and test their sanitiser susceptibilities, in the dairy context.</a> International Dairy Journal. 126, 105264(2022).</li>
<li>Buckingham-Meyer, K., Goeres, D. M., Hamilton, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+evaluation+of+biofilm+disinfectant+efficacy+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microbiological+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparative evaluation of biofilm disinfectant efficacy tests.</a> Journal of Microbiological Methods. 70 (2), 236-244 (2007).</li>
<li>Goeres, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Statistical+assessment+of+a+laboratory+method+for+growing+biofilms%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiology+%28Reading%29%22%5BJournal%5D)">Statistical assessment of a laboratory method for growing biofilms.</a> Microbiology (Reading). 151, 757-762 (2005).</li>
<li>Williams, D. L., Woodbury, K. L., Haymond, B. S., Parker, A. E., Bloebaum, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+CDC+biofilm+reactor+to+produce+mature+biofilms+on+the+surface+of+peek+membranes+for+an+in+vivo+animal+model+application%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A modified CDC biofilm reactor to produce mature biofilms on the surface of peek membranes for an in vivo animal model application.</a> Current Microbiology. 62 (6), 1657-1663 (2011).</li>
<li>Pieranski, M. K., Rychlowski, M., Grinholc, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+Streptococcus+agalactiae+biofilm+culture+in+a+continuous+flow+system+for+photoinactivation+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pathogens%22%5BJournal%5D)">Optimization of Streptococcus agalactiae biofilm culture in a continuous flow system for photoinactivation studies.</a> Pathogens. 10 (9), 1212(2021).</li>
<li>Mendez, E., Walker, D. K., Vipham, J., Trinetta, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+a+CDC+biofilm+reactor+to+grow+multi-strain+Listeria+monocytogenes+biofilm%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">The use of a CDC biofilm reactor to grow multi-strain Listeria monocytogenes biofilm.</a> Food Microbiology. 92, 103592(2020).</li>
<li>Salgar-Chaparro, S. J., Lepkova, K., Pojtanabuntoeng, T., Darwin, A., Machuca, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutrient+level+determines+biofilm+characteristics+and+subsequent+impact+on+microbial+corrosion+and+biocide+effectiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+and+Environmental+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Nutrient level determines biofilm characteristics and subsequent impact on microbial corrosion and biocide effectiveness.</a> Applied and Environmental Microbiology. 86 (7), 02885(2020).</li>
<li>Goeres, D. M., et al. Design and Fabrication of Biofilm Reactors. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGoeres%2C+DM+%22Recent+Trends+in+Biofilm+Science+and+Technology%22">Recent Trends in Biofilm Science and Technology</a>. Simoes, M., Borges, A., Chaves Simoes, L. , Academic Press. Cambridge, MA. 71-88 (2020).</li>
<li>Fjeld, C. S., Schüller, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofilm+formation+during+hexadecane+degradation+and+the+effects+of+flow+field+and+shear+stresses%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Transactions+-+The+Nordic+Rheology+Society%22%5BJournal%5D)">Biofilm formation during hexadecane degradation and the effects of flow field and shear stresses.</a> Annual Transactions - The Nordic Rheology Society. 21, 341-346 (2013).</li>
<li>Gilmore, B. F., Hamill, T. M., Jones, D. S., Gorman, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+the+CDC+biofilm+reactor+as+a+dynamic+model+for+assessment+of+encrustation+formation+on+urological+device+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Materials+Research+Part+B%3A+Applied+Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Validation of the CDC biofilm reactor as a dynamic model for assessment of encrustation formation on urological device materials.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part B: Applied Biomaterials. 93 (1), 128-140 (2010).</li>
<li>Picioreanu, C., van Loosdrecht, M. C., Heijnen, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-dimensional+model+of+biofilm+detachment+caused+by+internal+stress+from+liquid+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Two-dimensional model of biofilm detachment caused by internal stress from liquid flow.</a> Biotechnology and Bioengineering. 72 (2), 205-218 (2001).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי אין להם ניגודי עניינים.

בדיקת MBEC (בדיקת מיקרו-צלחות ביופילם) הייתה השיטה הראשונה שהוכרה כבדיקת ביעור ביופילם סטנדרטית על ידי ASTM17. המחקר שלנו ואחרים הראו כי ישנם שני שלבים קריטיים בעת שימוש בבדיקה זו: שלב הסוניקציה (זמן ועוצמה) וזמן הטיפול בחומר חיטוי18. סטיוארט ופרקר הציעו גם פרמטרים אחרים שיכולים להשפיע על תוצאות הבדיקה, כגון מיני מיקרוביאליים, גיל הביופילם, יחס שטח פנים / נפח וכו '. 19. לבסוף, חשוב לציין כי היווצרות ביופילמים סביב היתדות על מכסי המיקרו-צלחות עשויה לה...

תעשיית החלב היא מגזר תעשייתי מרכזי ברחבי העולם, כולל בקנדה, שם יש יותר מ -10,500 רפתות המייצרות כמעט 90 מיליון hL חלב מדי שנה1. למרות דרישות ההיגיינה המחמירות המוטלות בתעשיית החלב, כולל במפעלי עיבוד, החלב מהווה מדיום תרבית נהדר למיקרואורגניזמים, ולכן מוצרי חלב עשויים להכיל מיקרואורגניזמים, כולל קלקול או מיקרואורגניזמים פתוגניים. פתוגנים אלה יכולים לגרום למחלות שונות; לדוגמה, Salmonella sp. ו Listeria monocytogenes יכול לגרום גסטרואנטריטיס ודלקת קרום המוח, בהתאמה2. מיקרואורגניזמים מקולקלים יכולים להשפיע על האיכות והתכונות האורגנולפטיות, של מוצרי חלב על ידי ייצור גזים, אנזימים חוץ-תאיים או חומצות3. המראה והצבע של החלב עשויים גם להשתנות, למשל על ידי Pseudomonas spp.4.
חלק מהמיקרואורגניזמים האלה יכולים ליצור ביופילמים על משטחים שונים, כולל נירוסטה. ביופילמים כאלה מאפשרים התמדה וכפל של מיקרואורגניזמים על פני השטח של הציוד, ובכך זיהום של מוצרי חלב5. ביופילמים בעייתיים גם בשל יכולתם לעכב מעבר חום ולהאיץ את הקורוזיה של הציוד, מה שמוביל להחלפה מוקדמת של הציוד ובכך להפסדים כלכליים6.
נהלי ניקוי במקום (CIP) מאפשרים לתעשיית המזון לשלוט בצמיחת מיקרואורגניזמים. הליכים אלה כוללים שימוש רציף של נתרן הידרוקסידי, חומצה חנקתית, ולפעמים חומרי חיטוי המכילים חומצה היפוכלורית וחומצה פראצטית 7,8. למרות חומצה hypochlorous יעיל מאוד נגד מיקרואורגניזמים, זה גם מגיב עם חומר אורגני טבעי, גרימת היווצרות של תוצרי לוואי רעילים9. חומצה פראצטית אינה מייצרת תוצרי לוואי מזיקים10; עם זאת, יעילותו נגד ביופילמים בתעשיית המזון משתנה מאוד10,11. לאחרונה, חומצות פרוקסי אחרות, כולל חומצות פרפרופיוניות ופרלקטיות, נחקרו בזכות הפעילות האנטי-מיקרוביאלית שלהן, ונראה שהן חלופה טובה לשליטה בגדילה מיקרוביאלית בביופילמים12,13.
לכן, מחקר זה נועד להעריך את יעילותן של חומצות פרוקסי אורגניות (חומצות פראצטיות, פרפרופיוניות ופרלקטיות וחומר חיטוי מבוסס חומצה פראצטית) לחיסול ביופילמים של מוצרי חלב באמצעות גישה המשלבת את בדיקת ריכוז מיגור הביופילם המינימלי (MBEC), שיטת סינון סטטית בתפוקה גבוהה, וכור ביופילם של המרכז לבקרת מחלות (CDC), שיטה דינמית המחקה באתרה תנאים. בדיקת MBEC מכונה להלן "לוחות מיקרוטיטר ביופילם" בפרוטוקול. הפרוטוקול המוצג כאן והתוצאות המייצגות מדגימים את יעילותן של חומצות פרוקסי אורגניות ואת יישומן הפוטנציאלי לשליטה בביופילמים מיקרוביאליים בתעשיית החלב.

<table><tbody><tr><td>0.2 ומיקרו; m מסננים&nbsp;</td><td>קורנינג</td><td>09-754-28</td><td>קוטר: 50 מ"מ, PTFE- ממברנה</td></tr><tr><td>316 קופון דיסק נירוסטה</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>RD128-316</td><td></td></tr><tr><td>316 קופון שקופיות נירוסטה</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CBR 2128-316</td><td></td></tr><tr><td>צלחת 96 מיקרוטיטר</td><td>קורנינג</td><td>07-200-89</td><td>תרבית תאים מטופלת, מיקרופלטה תחתונה שטוחה&nbsp;</td></tr><tr><td>חומצה אצטית</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>27225</td><td>חנות ב RT</td></tr><tr><td>דודי אלומיניום אלקטרונים</td><td>מיקרוסקופיה מדע</td><td>75830-10</td><td>32x5 מ"מ</td></tr><tr><td>גלוטארלדהיד מימי EM כיתה 25%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>16220</td><td>חנות ב -20 & deg; C</td></tr><tr><td>AB204-S/FACT איזון אנליטי</td><td>מטלר טולדו</td><td>AB204-S</td> מסנן אוורור חיידקי <td></td></tr><tr><td>(0.45 ומיקרו; m)</td> <td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>BST 02915</td><td></td></tr><tr><td>BioDestroy</td><td>Groupe Sani Marc</td><td>09-10215</td><td>חומר חיטוי מסחרי מבוסס חומצה פראצטית, אחסן ב- RT</td></tr><tr><td>Carboy LDPE 20 L</td><td>Cole Parmer</td><td>06031-52</td><td></td></tr><tr><td>CDC כור ביופילם</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CRB 90</td><td>ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>Cerium (IV) סולפט</td><td>Thermo Scientific</td><td>חנות 35650-K2</td><td></td></tr><tr><td>במיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי RT&nbsp; LSM 700</td><td>Zeiss</td><td>LSM 700</td><td></td></tr><tr><td>Dey-Engley מרק מנטרל</td><td>Millipore</td><td>D3435-500G</td><td>חנות ב-4 מעלות; C</td></tr><tr><td>EMS950x + 350s זהב מתיז&nbsp;</td>מדעי <td></td><td></td><td>מיקרוסקופיה אלקטרונית</td></tr><tr><td>שרף אפוקסי</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>14121</td><td>עם אלכוהול אתילי BDMA</td></tr><tr><td>95%, USP</td><td>Greenfield חנות P016EA95</td><td></td><td>גלובלית בפתרון מחוון RT</td></tr><tr><td>Ferroin</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>318922-100ML</td><td>חנות ב</td></tr><tr><td>RT כובע מילוי/אוורור</td><td>קול פארמר</td><td>RK-06258-00</td><td></td></tr><tr><td>ערכת כדאיות ביופילם FilmTracer LIVE/DEAD ערכת כדאיות</td> תאים פלואורסצנטיים <td>Invitrogen</td><td>L10316</td><td>(SYTO 9: כתם פלואורסצנטי ירוק, פרופידיום יודיד: כתם פלואורסצנטי אדום), יש לאחסן בטמפרטורה של - 20 מעלות; </td></tr><tr><td>C זכוכית שבירת זרימה</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>FB 50</td><td></td></tr><tr><td>זהב עם צבע כסף&nbsp;</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>12684-15</td><td></td></tr><tr><td>סט צלחות חימום</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>110V מברג משושה צלחת</td><td></td></tr><tr><td></td><td>ערבוב Biosurface Technologies Corporation</td><td>CBR 5497</td><td></td></tr><tr><td>מי חמצן</td><td>סיגמא</td><td>חנות 216763</td><td>ב-4 מעלות; C</td></tr><tr><td>לולאות חיסון</td><td>VWR</td><td>12000-812</td><td>סטריליות, 10 ומיקרו; l</td></tr><tr>חנות <td>Laboratoire MAT</td><td>LU-0200</td> של<td>חומצה לקטית</td><td>ב-RT</td></tr><tr><td>MASTERFLEX L/S 7557-04 W/ 7557-02 עם משאבה פריסטלטית EASY-LOAD II ו-77200-50 Head</td><td>Cole Parmer</td><td>77200-60</td><td></td></tr><tr><td>MBEC (ריכוז מיגור ביופילם מינימלי) בדיקת חיסון ביופילם עם בסיס 96 בארות</td><td>Innovotech</td><td>19111</td><td>צלחת מיקרוטיטר ביופילם</td></tr><tr><td>בסיס אגר אוקספורד</td><td>Thermo Scientific</td><td>חנות OXCM0856B</td><td>בטמפרטורה של 4 מעלות; </td></tr><tr><td>מחזיק קופון C פלסטיק</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CBR 2203</td><td></td></tr><tr><td>מוט מחזיק שקופיות מפלסטיק</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CBR 2203-GL</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן יודיד</td><td>פישר כימיקל</td><td>P410-500</td><td>חנות ב RT</td></tr><tr><td>מברג מחורץ דיוק (1.5 מ"מ x 40 מ"מ)</td> <td>Wiha</td><td>26015</td><td></td></tr><tr><td>מעבדת חומצה פרופיונית</td><td> חנות MAT</td><td>PF-0221</td><td>ב-RT</td></tr><tr><td>Sartorius BCE822-1S Entris&reg; II איזון טעינה עליונה בסיסי חיוני</td><td>קול פרמר</td><td>&nbsp; UZ-11976-3</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ אלקטרונים סורק JSM-6360LV דגם</td><td>JEOL</td><td>JSM-6360LV</td><td>SEM וממשק בקרת משתמש</td></tr><tr><td>צינור מכסה בורג, 15 מ"ל</td><td>Sarstedt</td><td>62.554.205</td> <td>(Lx&Oslash;): 120 x 17 מ"מ, חומר: PP, בסיס חרוטי, שקוף, HD-PE</td></tr><tr><td>צינור מכסה בורג, 50 מ"ל</td><td>Sarstedt</td><td>62.547.205</td> <td>(Lx&Oslash;): 114 x 28 מ"מ, חומר: PP, בסיס חרוטי, שקוף, HD-PE</td></tr><tr><td>נתרן קקודילאט טריהידרט</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>&nbsp; חנות 12300</td><td>ב-20 מעלות; C</td></tr><tr><td>נתרן תיוסולפט</td><td>Thermo Scientific</td><td>AC124270010</td><td>חנות באמבט RT</td></tr><tr><td>סוניקציה</td><td>פישר</td><td>15-336-122</td><td>5,7 ליטר</td></tr><tr><td>תמיסת עמילן</td><td>חנות Anachemia</td><td>AC8615</td><td>בחנות RT</td></tr><tr><td>חומצה גופרתית</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>258105-500 מ"ל</td><td>בחנות RT</td></tr><tr><td>סויה טריפטית BD</td><td>Bacto</td><td>DF0369-17-6</td><td>בחנות RT</td></tr><tr><td>מרק סויה טריפטי</td><td>BD Bacto</td><td>DF0370-17-3</td><td>חנות ב RT</td></tr><tr><td>Tubing Masterflex L / S 16 25'Cole</td> <td>Parmer</td><td>MFX0642416</td><td></td></tr><tr><td>Tubing Masterflex L / S 18 25'Cole</td> <td>Parmer</td><td>MFX0642418</td><td></td></tr><tr><td>Tygon SPT-3350 צינורות סיליקון&nbsp;</td><td>Saint-Gobain</td><td>ABW18NSF</td><td>IDx OD: 1/4 אינץ' x 7/16 אינץ'.</td></tr><tr><td>וורטקס</td><td>קול פארמר</td><td>UZ-04724-00</td><td></td></tr><tr><td>אמבט מים&nbsp;</td><td>VWR</td><td>89202-970</td><td></td></tr><tr><td>תוכנת Zen</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

הערכת יעילותן של חומצות פרוקסי אורגניות למיגור ביופילמים חלביים בגישה המשלבת שיטות סטטיות ודינמיות

Evaluation of the Efficacy of Organic Peroxyacids for Eradicating Dairy Biofilms Using an Approach Combining Static and Dynamic Methods

נוכחותם של ביופילמים בתעשיית החלב מעוררת דאגה רבה, שכן הם עלולים להוביל לייצור מוצרי חלב לא בטוחים ומשתנים בשל עמידותם הגבוהה לרוב נהלי הניקיון במקום (CIP) המשמשים לעתים קרובות במפעלי עיבוד. לכן, הכרחי לפתח אסטרטגיות חדשות לבקרת ביופילם עבור תעשיית החלב. פרוטוקול זה נועד להעריך את יעילותן של חומצות פרוקסי אורגניות (חומצות פראצטיות, פרפרופיוניות ופרלקטיות וחומר חיטוי מסחרי על בסיס חומצה פראצטית) להשמדת ביופילמים חלביים באמצעות שילוב של שיטות סטטיות ודינמיות. כל חומרי החיטוי נבדקו על החיידקים החזקים ביותר מייצרי ביופילם בביופילם יחיד או מעורב באמצעות בדיקת ריכוז מיגור הביופילם המינימלי (MBEC), שיטת סינון סטטית בעלת תפוקה גבוהה. זמן מגע של 5 דקות עם חומרי החיטוי בריכוזים המומלצים הצליח לחסל הן את הביופילמים הבודדים והן את הביופילמים המעורבים. מחקרים נמשכים כעת כדי לאשר תצפיות אלה באמצעות כור ביופילם של המרכז לבקרת מחלות (CDC), שיטה דינמית לחיקוי תנאים באתרם . סוג זה של ביוריאקטור מאפשר שימוש במשטח נירוסטה, המהווה את רוב הציוד והמשטחים התעשייתיים. נראה כי התוצאות הראשוניות מהכור מאשרות את יעילותן של חומצות פרוקסי אורגניות כנגד ביופילמים. הגישה המשולבת המתוארת במחקר זה עשויה לשמש לפיתוח ובדיקה של פורמולציות ביולוגיות או כימיות חדשות לשליטה בביופילמים ולחיסול מיקרואורגניזמים.

ניתוח SEM מראה נוכחות של ביופילמים המיוצרים על-ידי P. azotoformans PFl1A על יתדות המיקרו-לוחות של הביופילם (איור 2A). ניתן להבחין במבנה ביופילם תלת מימדי. P. azotoformans PFl1A זוהה בעבר כיצרן ביופילם חזק (A570 &gt; 1.5) באמצעות לוחות מיקרוטיטר96 בארות 12.
נוסף על כך, הביופילם P. azotoformans PFl1A שנוצר על שקופית מפלדת אל-חלד באמצעות הביוריאקטור נראה צפוף מאוד והציג את המאפיינים המורפולוגיים של ביופילם...

פרוטוקול זה מתאר גישה המשלבת שיטות סטטיות ודינמיות להערכת יעילותן של חומצות פרוקסי אורגניות למיגור ביופילמים בתעשיית החלב. גישה זו עשויה לשמש גם לבדיקת יעילותן של פורמולציות ביולוגיות או כימיות חדשות לשליטה בביופילמים.

The presence of biofilms in the dairy industry is of major concern, as they may lead to the production of unsafe and altered dairy products due to their ...

מיקרואורגניזמים יוצרי ביופילם הם נושא מרכזי בתעשיית המזון, כולל תעשיית החלב. בגלל ההשפעה השלילית שלהם על איכות המוצרים, אז חשוב לפתח אסטרטגיות בקרת ביופילם. גישה זו משלבת שיטת סינון סטטית בתפוקה גבוהה ושיטה דינמית המחקה תנאים באתרם.שתי שיטות אלה משלימות זו את זו לחקר יעילותם של חומרי חיטוי נגד ביופילמים. ניתן להשתמש בגישה זו כדי לבחון פורמולציות ביולוגיות או כימיות חדשות לבקרת ביופילמים במגזרי המזון, הרפואה או הסביבה. התחל על ידי מערבול צינורות תרבית חיידקים Pseudomonas azotoformans.להעביר באופן אספטי 100 מיקרוליטר של תרבית חיידקים לתוך 10 מיליליטר של מרק סויה טריפטי סטרילי או TSB בינוני כדי להשיג את הריכוז הסופי של כ פעמיים 10 עד CFU השביעי למיליליטר. מערבול צינור התרבית. לאחר מכן באמצעות פיפטה רב ערוצית, להעביר 150 מיקרוליטר של תרבית חיידקים מדולל בארות צלחת microtiter biofilm ב triplicate.עומס 150 מיקרוליטר של TSB בינוני לתוך שלוש בארות חדשות כבקרה. לאחר מכן, לדגור על צלחת microtiter biofilm ב 30 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות ללא תסיסה. נקו וייבשו באוויר את חלקי הביוריאקטור לפני שתניחו את הלהב השטוח בתוך זכוכית של ליטר אחד המחוברת למחזיק באמצעות מוט מגנטי.שמרו על התקנה זקופה באמצעות מוט הפלסטיק המחובר לצד הפנימי של מכסה הביוריאקטור. השתמש במברג כדי להניח את הקופונים או שקופיות הנירוסטה על מוטות הפוליפרופילן שלהם. הכניסו קופונים או מחליקים לתוך החורים במכסה מבלי להניח את פיני היישור שלהם בחריצים המאפשרים לאדים לברוח במהלך העיקור.כסו את כל פתחי האוורור בנייר אלומיניום ועטפו את שאר הציוד, כלומר צינורות בגודל 18 וצינורות בגודל 16, בלם זרימת הזכוכית, מכסי המיכלים, המברגים, המלקחיים ומסנני 0.2 מיקרומטר ברדיד אלומיניום. Autoclave, הביוריאקטור שהוקם במחזור יבש בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. כדי לבצע את השלב הראשון של היווצרות הביופילם בביוריאקטור במצב אצווה, בתוך ארון בטיחות ביולוגי, חבר קצה אחד של צינורות בגודל 18 לפיית היציאה של הביוריאקטור ושמור את הקצה השני עטוף ברדיד אלומיניום.הסר קופון אחד או מחזיק שקופיות אחד ממכסה הביוריאקטור והכנס אותו לצינור סטרילי של 50 מיליליטר. לאחר מכן באמצעות פיפטה סרולוגית של 50 מיליליטר, ממלאים את הביוריאקטור ב 340 מיליליטר של 300 מיליגרם למיליליטר TSB בינוני דרך החור שנכבש על ידי המוט. כדי לחסן את מדיום התרבית בביוריאקטור, הוסף מיליליטר אחד של 10 ל- CFU השמיני למיליליטר Pseudomonas azotoformans תמיסה חיידקית דרך הפתח באמצעות פיפטה של חמישה מיליליטר והחזיר את המוט למקומו המקורי.מקם את המוטות שכבר הונחו בחורי המכסה כדי שהפינים יתאימו לחריצים המתאימים. לאחר מכן מניחים מסנן טיהור אוויר חיידקי 0.2 מיקרומטר בקצה הצינור בקוטר הקטן ביותר הממוקם על מכסה הביוריאקטור. הצינור השני באותו קוטר נשאר מחובר באופן קבוע עם מכסה בורג מתכת או תקע סיליקון שנסגר בחוזקה.מניחים את הביוריאקטור למשך 24 שעות מעל פלטת החימום המוגדרת לטמפרטורה של 30 מעלות צלזיוס ומערבבים במהירות של 130 סל"ד. לאחר 24 שעות, בצע את השלב השני של היווצרות הביופילם בביוריאקטור במצב זרימה רציפה. הניחו קארבוי המכיל 18 ליטר מים מזוקקים סטריליים בארון הבטיחות הביולוגית.לאחר מכן להוסיף שני ליטר של 1000 מיליגרם לליטר TSB תרבית בינוני כדי לקבל ריכוז סופי של 100 מיליגרם לליטר. מכסים את המיכל במכסה הסטרילי שלו שאליו מחוברים שני צינורות. הראשון הוא צינור סיליקון המקובע בממשק הפקק כדי לשאוב את המדיום.השני, צינור בגודל 16, מחובר ליציאה החיצונית ומאפשר לנוזל לזרום לכיוון הביוריאקטור. לאחר חיבור הצינור בגודל 16 לקצה בלם זרימת הזכוכית, הכנס את האחרון לצינור הגדול ביותר על מכסה הביוריאקטור בקצה השני שלו ולאחר מכן התקן את הצינור בגודל 16 במשאבה הפריסטלטית. השתמש עוד 20 ליטר carboy כדי לאסוף את השפכים מן bioreactor.חבר את קצה הצינור המחובר לפיית מוצא הביוריאקטור למכסה מיכל הפסולת. הכנס מסנן 0.2 מיקרומטר לתוך הצינור הנוכחי על המכסה של מיכל זה. לאחר שתסיים, הפעל את המשאבה הפריסטלטית בקצב זרימה של 11.3 מיליליטר לדקה והשאר את המערכת פועלת למשך 24 שעות.לאחר 24 שעות, כבו את המשאבה הפריסטלטית והפסיקו לערבב ולחמם את הביוריאקטור. כדי לשחזר את הביופילם החיידקי, שטפו את הקופונים או השקופיות ב-40 מיליליטר של PBS כדי לחסל חיידקים פלנקטוניים. לאחר מכן שחררו אותם לתוך צינור חרוטי סטרילי של 50 מיליליטר המכיל 40 מיליליטר של PBS.לאחר 30 שניות של מערבולת, סוניק את הצינורות במהירות של 40 קילוהרץ למשך 30 שניות. חזור על פעולה זו שלוש פעמים. לאחר שתסיים, אסוף את 40 מיליליטר של תרחיף ביופילם בצינור חרוטי סטרילי של 50 מיליליטר ושטוף את הקופונים או המגלשות עם שניים של תמיסת PBS סטרילית.לשחזר את נוזל שטיפה זה ולהוסיף אותו השעיה biofilm כבר נאסף. מוציאים את צלחת המיקרוטיטר מ-30 מעלות צלזיוס. הוסף 200 מיקרוליטר של PBS לשלוש בארות של מיקרו-צלחת של 96 בארות.כדי לשטוף את הביופילמים ולחסל חיידקים פלנקטוניים, העבירו את מכסה המיקרו-צלחת של הביופילם עם ביופילמים שנוצרו על היתדות למיקרו-צלחת בת 96 בארות המכילה את PBS למשך 10 שניות. הכינו את חומרי החיטוי בריכוזים הנדרשים והוסיפו 200 מיקרוליטר מכל ריכוז חומר חיטוי לבארות של צלחת מיקרוטיטר חדשה בת 96 בארות במשולש. מעבירים את מכסה צלחת המיקרוטיטר של הביופילם על צלחת 96 המכילה את חומרי החיטוי ודגרים על הצלחת בטמפרטורת החדר לזמן החשיפה הרצוי.לאחר מכן, הוסף 200 מיקרוליטר של מרק מנטרל Dey-Engley לבארות של צלחת מיקרוטיטר חדשה של 96 בארות. מעבירים את המכסה של צלחת מיקרוטיטר הביופילם לצלחת מיקרוטיטר 96 בארות המכילה את המרק המנטרל. אטמו את צלחת המיקרוטיטר עם פרפילם והניחו אותה בסוניקטור האמבטיה ב 40 קילוהרץ למשך 30 דקות.לאחר 30 דקות, מהעמודה הראשונה של הצלחת הסוניקטיבית, העבירו 100 מיקרוליטר של ביופילמים מנותקים לשורה הראשונה של צלחת מיקרוטיטר חדשה בת 96 בארות. לאחר מכן הוסף 180 מיקרוליטר של PBS סטרילי לצלחת 96 באר למעט השורה הראשונה. לאחר מכן, להעביר 20 מיקרוליטר של תמיסת ביופילם מהשורה הראשונה לבארות בשורה השנייה המכילה 180 מיקרוליטר של PBS כדי להשיג דילול 10 למינוס אחד.לאחר מכן להעביר 20 מיקרוליטר מהשורה השנייה לבארות בשורה הבאה כדי להשיג דילול של 10 למינוס שתיים. חזור על כך כדי לקבל דילול בין 10 למינוס חמש ו -10 למינוס שבע. לחסן 100 מיקרוליטר של הדילול הרצוי על TSA ולדגור על הצלחות בהתאם לפרמטרי הגידול של החיידק.צור את Pseudomonas azotoformans PFLA 1 biofilms על הקופונים בביוריאקטור, להסיר את המוט מחזיק את הקופונים ולשטוף את המוט בתוך צינור חרוטי המכיל 30 מיליליטר של PBS כדי להסיר תאים פלנקטוניים. זרקו כל קופון לתוך צינור חרוטי סטרילי של 50 מיליליטר באמצעות מברג. לאחר מכן הוסף ארבעה מיליליטר של תמיסת peroxyacid אורגנית המתאימה או PBS עבור הבקרה.לאחר חמש דקות של דגירה, מוסיפים 36 מיליליטר של מרק מנטרל Dey-Engli. לאחר ערבול הצינור החרוטי במשך 30 שניות, סוניק אותם במהירות של 40 קילוהרץ למשך 30 שניות. חזור על התהליך שלוש פעמים כדי לקבל את השעיית הביופילם.חזור על אותו הליך עם המוטות האחרים, הכין אשליות סדרתיות של השעיית הביופילם, ולוחית את המתלה על מדיום TSA כפי שתואר קודם לכן. ניתוח SCM הראה את נוכחותו של הביופילם על ידי Pseudomonas azotoformans PFL1A על יתדות מיקרו-לוחות הביופילם. הביופילם Pseudomonas azotoformans PFL1A שנוצר על מגלשת נירוסטה באמצעות ביוריאקטור נראה צפוף מאוד והציג את המאפיינים המורפולוגיים של ביופילם תלת ממדי בוגר.תוצאות ספירת החיידקים של הביופילמים שפותחו על ידי מבודד זה במערכת הדינמית הראו צפיפות תאים משמעותית המתאימה ל-8.74 לוג CFU לסנטימטר רבוע בתווך תרבית TSB ו-7.86 לוג CFU סנטימטר רבוע בחלב רזה סטרילי. התוצאות שהתקבלו עם B.vesicularis isolate הראו כי העלייה בריכוז החומרים המזינים מ 100 ל 900 מיליגרם לליטר הביאה לעלייה בספירת החיידקים של הביופילמים מ 6.11 ל 8.71 לוג CFU סנטימטר מרובע. כמו כן, צמיחה משמעותית בביופילם נצפתה כאשר קצב הזרימה הופחת ל -6.0 מיליליטר לדקה, מה שמצביע על כך שגורמים מסוימים יכולים להשפיע על היווצרות ביופילם בביוריאקטור.אף אחד מהביופילמים לא הכיל תאים ברי קיימא הניתנים לזיהוי בזמן מגע של חמש דקות ב-500 חלקים למיליון עם חומצות פרוקסי אורגניות ו-100,000 חלקים למיליון עם ריכוזי מי חמצן של חומרי חיטוי המיושמים בדרך כלל במפעלי חלב. ה-SCM הראה את המבנה התלת-ממדי של ריכוז מיגור ביופילם מינימלי לא מטופל או ביופילמים של MBEC, בעוד שהביופילמים של MBEC שטופלו איבדו את הקונפורמציה התלת-ממדית שלהם. חיוני להישאר במצב סטרילי בעת ביצוע פרוטוקול זה.כמו כן, על המשתמש לזכור כי התוצאה שנוצרה קשורה לבידוד וחיטוי ייחודיים. שילוב של חומר חיטוי עם רטט מכני, אולטרסאונד או טיפולים אנזימטיים יכול להיות מוערך כדי לשפר את היעילות של מיגור ביופילם. גישה זו, תוך שימוש בשיטות סטטיות ודינמיות ליצירת ביופילמים, סללה את הדרך לחוקרים לסנן ולחקור נוסחאות אנטי-ביופילם חדשות כדי לשלוט טוב יותר בביופילמים במגזרים שונים.

evaluation-efficacy-organic-peroxyacids-for-eradicating-dairy

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

מקור: טיי, ס. ב., et.al. הפרעה אנטי-וירולנטית של ביופילמים פתוגניים באמצעות לקטונאזות מהונדסות לכיבוי קוורום.  J. Vis. Exp. (2016)הסרטון הזה מדגים את תהליך עיכוב היווצרות ביופילם על ידי הכנסת אנזים שמפריע לאיתות תאי חיידקים. האנזים מונע מהחיידקים לייצר חומרים פולימריים חוץ-תאיים, ובכך מפחית את התפתחות הביופילם על מיקרודיסה עם תחתית זכוכית. לבסוף, מבנה הביופילם מוצג באמצעות לקטין פלואורסצנטי ומיקרוסקופ סורקת לייזר קונפוקלי.

הערכה מיקרוסקופית של עיכוב היווצרות ביופילם בתיווך אנזימים

מקור: בוכר, ט. ואחרים. שיטות לחקר ביופילמים של B. subtilis כמודל לאפיון מעכבי ביופילם של מולקולות קטנות. J. Vis. Exp. (2016).הסרטון הזה מדגים כיצד שלמות מטריצת הביופילם משפיעה על עמידות חיידקים לאתנול על ידי השוואת יחידות יוצרות מושבות בביופילמים לא מטופלים ומופרעים על ידי מעכבים. הפחתת CFU בדגימות שטופלו במעכבים מראה כי מטריצת החוץ-תאית חיונית להגנה על תאים מוטמעים בביופילם מפני לחץ אנטימיקרוביאלי.

בדיקת עמידות לאתנול להערכת שלמות מטריצת הביופילם

סרטון זה מדגים שיטה מבוססת פלואורסצנטיות לכימות היווצרות ביופילם המושרה על ידי מלח מרה. עם הוספת מלחי מרה בתרבית של חיידק אנטרי פתוגני, ייצור ביופילם מזוהה באמצעות לקטין פלואורסצנטי הנקשר לרב-סוכרים במטריצת החומר הפולימרי החוץ תאי (EPS) של הביופילם.

בדיקה לחקר היווצרות ביופילם המושרה על ידי מלח מרה באמצעות זיהוי מטריצת EPS

הסרטון מציג בדיקת פיזור ביופילם באמצעות צלחת מרובת בארות. חיץ וטיפול בגלוקוז מפרקים את הביופילם, משחררים חיידקים, בעוד מלחי מרה גורמים ללחץ, ושומרים על חיידקים בחומר הפולימרי החוץ תאי המגן. פיזור גבוה יותר עם חיץ וגלוקוז מאשר פירוק מוצלח של ביופילם, המוערך על ידי מדידת יחידות יוצרות מושבה.

איתור פירוק ביופילם באמצעות בדיקת פיזור

מחקר זה מציג את הפיתוח של מתודולוגיות הניתנות לשחזור לחקר מעכבי ביופילם והשפעותיהם על Bacillus subtilis multicellularity.

מתודולוגיות לימוד<em&gt; B. subtilis</em&gt; Biofilms כמודל לאפיון מולקולה קטנה Biofilm מעכבי

פרוטוקול זה מתאר שיטה חדשה לגדול ואיכותי לנתח biofilms חיידקים על עובש פטרייתי על ידי מיקרוסקופ confocal אלקטרונים.

שיטה חדשה לניתוח איכותי רב היקף של Biofilms חיידקית על פילמנטיות פטרייתיים המושבות Confocal שימוש במיקרוסקופ אלקטרונים

ניתן להסיר ביופילמים על משטחים ביעילות ובמהירות על ידי שימוש בסילון תקופתי של אירוסולים של פחמן דו חמצני ללא טיהור חנקן.

הסרת biofilm באמצעות אירוסולים פחמן דו-חמצני ללא חנקן טהר

מוצרים טבעיים מייצגים נקודות התחלה מבטיחות לפיתוח תרופות חדשות וסוכנים טיפוליים. עם זאת, בשל המגוון הכימי הגבוה, מציאת תרכובות טיפוליות חדשות מצמחים היא משימה מאתגרת וגוזלת זמן. אנו מתארים גישה פשוטה לזיהוי מולקולות מיקרוביאלית ואנטיביופילם מתמציות צמחים ושברים.

גישה שיטתית לזיהוי מולקולות אנטי-מיקרוביאליות ואנטיביופילם חדשניות מתמציות ושברים של צמחים למניעת עששת שיניים

מאמר זה מפרט שיטות הממחישות שלוש טכניקות נפוצות של קצירת ביופילם ופירוק חומרים על שני סוגי משטחים, בדיקות מחוספסות של שיטת קציר ומידע מינימלי שיש לקחת בחשבון בעת בחירה ואופטימיזציה של טכניקות קצירה ופירוק כדי להגביר את הרבייה.

קציר ופיזור: צעד מתעלם במחקר שיטות ביופילם

פרוטוקול זה מציג מתודולוגיה לביצוע צמיחת ביופילם ומדידות ביומסה באמצעות התקני לוח PCR עמוקים בהרכבה עצמית עבור הקרנת ביופילם סטטית של מכסה 96-היטב.

ייצור ביופילם ביומסה חיידקית גדולה יותר באמצעות מכשירי מיקרופלאט עמוק באר עמוקה צלחת PCR

למדו הערכת יעילות חומצות פרוקסי אורגניות נגד ביופילמים חלביים בשיטות סטטיות ודינמיות. השיטה משלבת ביוריאקטור ומסייעת לחוקרים לפתח אסטרטגיות חיטוי יעילות בתעשיית המזון.

הערכת יעילותן של חומצות פרוקסי אורגניות למיגור ביופילמים חלביים בגישה המשלבת שיטות סטטיות ודינמיות

גלה סרטונים נוספים