-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
הדמיה של מיטופגיה עם צבעים פלואורסצנטיים למיטוכונדריה וליזוזום
הדמיה של מיטופגיה עם צבעים פלואורסצנטיים למיטוכונדריה וליזוזום
JoVE Journal
Biology
Author Produced
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Visualizing Mitophagy with Fluorescent Dyes for Mitochondria and Lysosome

הדמיה של מיטופגיה עם צבעים פלואורסצנטיים למיטוכונדריה וליזוזום

Full Text
6,254 Views
07:56 min
November 30, 2022

DOI: 10.3791/64647-v

Bilin Liu1,2, Anqi Li1, Yuan Qin3, Lei Chen1, Meng Gao1, Guohua Gong1,2

1Institute for Regenerative Medicine, Shanghai East Hospital, School of Life Sciences and Technology,Tongji University, 2Key Laboratory of Laboratory Medicine, Ministry of Education, School of Laboratory Medicine and Life Sciences,Wenzhou Medical University, 3Department of Pharmacy, Shanghai East Hospital,Tongji University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study investigates mitophagy, the process of mitochondrial quality control, using a live-cell imaging approach. A protocol utilizing green-fluorescent mitochondria dye and red-fluorescent lysosome dye is outlined to observe mitophagy in mouse embryonic fibroblast cells.

Key Study Components

Research Area

  • Cell biology
  • Mitophagy and mitochondrial dynamics
  • Mitochondria-related diseases

Background

  • Mitophagy plays a crucial role in maintaining mitochondrial homeostasis.
  • Reliable quantitative assays for mitophagy in vivo are lacking.
  • This technique may pave the way for new treatments of mitochondria-related diseases.

Methods Used

  • Live-cell imaging using confocal microscopy
  • Mouse embryonic fibroblast (MEF) cells
  • Cell-permeant fluorescent dyes for staining mitochondria and lysosomes

Main Results

  • Clear imaging revealed colocalization of mitochondria and lysosomes, indicating active mitophagy.
  • The technique allows quantification of mitophagy by counting yellow co-localized structures.
  • Demonstrated potential to analyze mitochondrial number and morphology.

Conclusions

  • This method enhances the ability to study mitophagy in living cells.
  • It provides insights into the role of mitophagy in various human diseases.

Frequently Asked Questions

What is mitophagy?
Mitophagy is the selective degradation of damaged or surplus mitochondria via autophagy, crucial for mitochondrial quality control.
What is the significance of observing mitophagy?
Studying mitophagy is important for understanding its role in maintaining cellular health and its implications in mitochondrial dysfunction-related diseases.
How are live cells prepared for the mitophagy assay?
Cells are cultured in DMEM, treated with trypsin for dissociation, and resuspended in a diluted cell suspension for imaging.
What dyes are used in this method?
A cell-permeant green-fluorescent dye for mitochondria and a red-fluorescent dye for lysosomes are utilized.
What are the imaging conditions required?
Cells need to be imaged at 37 degrees Celsius using confocal microscopy with specific excitation wavelengths for dual-channel detection.
What can be inferred from the overlap of green and red fluorescence?
The overlap indicates active mitophagy, revealing the interaction between damaged mitochondria and lysosomes.
How does this technique contribute to disease research?
This method can uncover the relationship between mitophagy and various human diseases, facilitating the exploration of new treatments.

מיטופגיה היא המנגנון העיקרי של בקרת איכות מיטוכונדריאלית. עם זאת, ההערכה של mitophagy in vivo הוא הפריע על ידי היעדר בדיקות כמותיות אמין. מוצג כאן פרוטוקול לתצפית על מיטופגיה בתאים חיים באמצעות צבע מיטוכונדריה ירוק-פלואורסצנטי המיועד לתאים וצבע ליזוזום אדום-פלואורסצנטי.

שיטה זו מסייעת לצפות במיטופגיה בתאים חיים באמצעות צבע מיטוכונדריה ירוק-פלואורסצנטי וצבע ליזוזום אדום-פלואורסצנטי. מיטופגיה ממלאת תפקיד חשוב בשמירה על הומאוסטזיס של המיטוכונדריה ועל היבטים שונים של תפקוד התא. טכניקה זו עשויה לספק גישה חדשה לטיפול במחלות הקשורות למיטוכונדריה.

הליך זה אינו מסובך מאוד. לכידת תמונות ברורות חשובה מאוד לספירת שכבת העל של המיטוכונדריה והליזוזומים. כדי להתחיל, עכבר תרבית פיברובלסט עוברי או תאי MEF בצלחת תרבית תאים בגודל 10 ס"מ עם 10 מיליליטר של מדיום הנשר המתוקן של דולבקו או DMEM.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

ביולוגיה גיליון 189

Related Videos

Assay מיקרוסקופ פלואורסצנטי עבור Mitophagy ניטור השמרים Saccharomyces cerevisiae

10:27

Assay מיקרוסקופ פלואורסצנטי עבור Mitophagy ניטור השמרים Saccharomyces cerevisiae

Related Videos

26.2K Views

זמן לשגות מיקרוסקופית וידאו עבור הערכת EYFP-פרקין Aggregation כסמן לסלולאריות Mitophagy

09:29

זמן לשגות מיקרוסקופית וידאו עבור הערכת EYFP-פרקין Aggregation כסמן לסלולאריות Mitophagy

Related Videos

7.6K Views

במבחנה and In Vivo זיהוי של Mitophagy ב תאים אנושיים, C. Elegansועכברים

08:40

במבחנה and In Vivo זיהוי של Mitophagy ב תאים אנושיים, C. Elegansועכברים

Related Videos

18.4K Views

מדידה רגיש של Mitophagy מאת Flow Cytometry באמצעות תלויי-pH הכתב פלורסנט mt-Keima

09:13

מדידה רגיש של Mitophagy מאת Flow Cytometry באמצעות תלויי-pH הכתב פלורסנט mt-Keima

Related Videos

15.8K Views

כימות מבוססי Cytometry זרימה ססגוניות של המיטוכונדריה, Lysosomes בתאי T

06:22

כימות מבוססי Cytometry זרימה ססגוניות של המיטוכונדריה, Lysosomes בתאי T

Related Videos

13.9K Views

איתור מיטופגיה בתאי Caenorhabditis elegans ובתאי יונקים באמצעות צבעים ספציפיים לאברונים

11:59

איתור מיטופגיה בתאי Caenorhabditis elegans ובתאי יונקים באמצעות צבעים ספציפיים לאברונים

Related Videos

3.2K Views

גישות משלימות לחקירת שטף מיטופגיה בתאי β הלבלב

07:04

גישות משלימות לחקירת שטף מיטופגיה בתאי β הלבלב

Related Videos

2.2K Views

מיקרוסקופ אור ואלקטרונים בקורלציה דו-צבעונית להדמיית אינטראקציות בין מיטוכונדריה לליזוזומים

10:25

מיקרוסקופ אור ואלקטרונים בקורלציה דו-צבעונית להדמיית אינטראקציות בין מיטוכונדריה לליזוזומים

Related Videos

1.2K Views

תיוג בתאי גזע עם צבעי ניאון על איתור פולשני עם דימות אופטי

07:42

תיוג בתאי גזע עם צבעי ניאון על איתור פולשני עם דימות אופטי

Related Videos

13.9K Views

לדמיין את חיים תסיסנית גליה-neuromuscular צומת עם צבעי ניאון

10:53

לדמיין את חיים תסיסנית גליה-neuromuscular צומת עם צבעי ניאון

Related Videos

11.4K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code