הקמת מודל ריפוי שקע מיצוי מולארי מנדיבולרי מורין
13 בינואר 2023
פרוטוקול זה מדגים שלב אחר שלב פרטים כיצד לחלץ את הטוחנת הראשונה המנדיבולרית בעכבר. הוא מספק שיטה חלופית לחוקרים המתמקדים בריפוי והתחדשות עצם הלסת.
פרוטוקול זה מספק מודל מיצוי טוחנת מנדיבולרית מורין שמוצג לעתים רחוקות במחקרי התחדשות עצם זמינים. פיתוח מודל מיצוי טוחנת מנדיבולרית מורין הוא הכרחי כלסת תחתונה שהיא דומה ועקבית יותר בין קבוצות התערבות שונות. ההשלכות של טכניקה זו אינן מתרחבות לטיפול במחלה כלשהי.
עם זאת, הוא עשוי לסייע בריפוי קליני ובהתחדשות עצם הלסת בטווח הארוך על ידי סיוע בסקירת המנגנונים העומדים בבסיס תהליך זה. טכניקה זו פותחה כדי לסייע למחקרים, לחשוף את מנגנוני הריפוי וההתחדשות הזמינים. למרבה הצער, שיטה זו אינה יכולה להיות מיושמת במערכות אחרות.
התחל לבטל את ההתנגדות הדיסטלית של העכבר המרדים על ידי החזקת הטוחנת בפינצטה מדיאלית. לאחר מכן דחפו מחט של 23 מד לתוך עצם מכתשית buccal של השורש הדיסטלי ולהפוך מרווח. לאחר מכן, שנה למחט מד 25 כדי להמשיך את הרחבת המרווח.
התקדמו בעדינות לכיוון האזור הפריאפיקלי תוך סיבוב איטי של המחט קדימה ובאופן לנגואלי כדי ללחוץ את השורש החוצה מהפוסה הנאדית. כדי לבטל את ההתנגדות המזיאלית, הכנס מחט 23 מד לתוך מזלג השורש והרים את הטוחנת של מוסתר. לאחר החזקת הטוחנת בחוזקה לקחת עוד מחט 23 מד ולדחוף אותו לתוך קרום חניכיים mesial שפה כדי ליצור מרווח.
לאחר מכן השתמש במחט של 25 מד וסובב לאט קדימה ובוקלי. אם חלק מהמכשולים הבסיסיים מעכבים את הלוקסציה של הטוחנת, השתמש במחט מד 26 כדי לחדור את קודקוד השורש ולחזור על הפעולות. במהלך העקירה הסופית, יש לעקור את השן ולוודא שהכתר עולה מעל מישור החסימה ושניתן לראות בבירור שני שורשים שלמים.
לאחר חילוץ מוצלח של הטוחנת הראשונה המנדיבולרית, יש למרוח כותנה יבשה כדי לעצור את הדימום, למקם מחדש את הלשון, לנהל שיכוך כאבים ולהניח את העכבר על כרית חימום בטמפרטורה קבועה עד שהוא מתאושש מהרדמה. שקע השן התמלא מיד בעקירת קריש דם. תהליך הריפוי של השקע נצפה במשך שבוע.
נוצרו כמה עצמות טרבקולריות דמויות ספוג אך הקריש נשאר. בתהליך הריפוי, השקע התמלא בעצמות ספוג לאחר שבועיים המעידים על השלמת התחדשות. וסת ראשי בהתמיינות אוסטאובלסטים Sp7 בא לידי ביטוי נרחב בתאי מח העצם בשוליים שהם חזית יצירת העצם.
תחת מצב ההומאוסטזיס עצמות הטרבקולר היו עקביות ומשתלבות עם גושי תאי מח עצם מפוזרים כמו איים. שבוע לאחר הניתוח, תאים רבים המבטאים Sp7 מילאו את שקע המיצוי בעצם טרבקולרית שזה עתה נוצרה מפוזרת מסביב. ארבעה שבועות לאחר הניתוח, המצב התהפך והפך במידה רבה לעצם טרבקולרית.
הפעילות של תאי ביטוי Sp7 ירדה לרמה המתקרבת למצב הומאוסטזיס. ניתן לבצע את זה גם כדי להדגים את תהליך התחדשות היילוד. טכניקה זו יכולה לסייע לחוקרים לפענח את המנגנונים הבסיסיים של תהליך ריפוי והתחדשות זמין על ידי מתן מודל מורין חדש.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
סקירה כללית
פרוטוקול זה מציג שיטה מפורטת לעקירה של השן הטחון הראשונה בלסת התחתונה בעכברים, המספקת מודל עכברי חדש למחקר של ריפוי והתחדשות של עצם הלסת. המחקר בוחן את תהליך הריפוי לאחר העקירה ואת המנגנונים התאיים המעורבים בהתחדשות העצם.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום מחקר
- התחדשות עצם
- מודלים של עכברים במחקר דנטלי
- מנגנוני ריפוי של עצם הלסת
רקע
- הצורך במודלים עקביים במחקרי רגנרציה של עצם
- הבנת ההשלכות הקליניות של ריפוי עצם הלסת
- תובנות לגבי מנגנוני הריפוי והרגנרציה
שיטות שהשתמשו בהן
- עקירה של השן הראשונה בטוחן התחתון בעכברים תחת הרדמה
- שימוש במחטים בעוביים שונים לצורך הרחפה של השן
- הערכת הריפוי לאורך תקופה של ארבעה שבועות
תוצאות עיקריות
- טכניקת עקירה מוצלחת שהובילה לריפוי שנצפה לאורך שבועיים
- היווצרות עצם טרבכולרית חדשה וביטוי של Sp7 בתאי מחית העצם
- ירידה בביטוי Sp7 המעידה על חזרה להומאוסטזיס
מסקנות
- המחקר מדגים שיטת מיצוי מהימנה המסייעת בהבנת תהליכי התחדשות העצם
- מודל זה תורם תובחנות בעלות ערך לגבי מנגנוני ריפוי עצם הלסת, הרלוונטיים למחקר ביולוגי עתידי.
שאלות נשאלות השכיחות
רלוונטיות תעשייתית לדרג ניהולי
מודל ריפוי שקית עקירת שן טוחנת תחתית בעכבר מספק פלטפורמה סטנדרטית in vivo לחקירת התחדשות עצם הלועקה והסתיידות תוך-קרומיים. מודל זה מאפשר הפחתת סיכונים מכניסטית ותיקוף מטרות עבור נתיבי ריפוי עצם, ובכך תומך בשלבי גילוי מוקדמים ובמחקר תרגומי של התחדשות רקמה שלדית. השחזוריות והרלוונטיות הביולוגית שלו מקלות על קבלת החלטות קידום מותאמות סיכונים בתיקי מו"פ פרה-קליניים של רפואת שיניים וכירורגיה קראניו-פציאלית.
יישומים אסטרטגיים במו"פ של ביו-פארמה
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- מאפשר בדיקה של מסלולים אוסטאוגניים ושל רגולטורים תאיים כגון Sp7 בהקשר מבוקר in vivo.
- תומך בהפחתת סיכונים ביולוגיים על ידי אספקת מודל עקבי לתיקוף פונקציונלי של מטרות במחקרי רגנרציה של עצם.
- מסייע בביסוס ביטחון חיזוי בבחירת מסלולים מועמדים לתיקון רקמת שלד.
סריקה ופיתוח בדיקה
- מספק מערכת ביולוגית מתוּקפת להערכת התערבויות לריפוי עצם ומסמנים מולקולריים.
- תומך בסטנדרטיזציה ובשחזור של הבדיקה באמצעות נקודות סוף כירורגיות והיסטולוגיות עקביות.
- מאפשר הערכה כמותית של היווצרות עצם ופעילות תאית לאחר עקירה.
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- מתכתב עם מנגנונים רלוונטיים למחלה של ריפוי פגמים בעצם הלסת לצורך חקירה של ביומרקרים תרגומיים.
- תומך ברציפות משלב הגילוי ועד לאישור פרה-קליני של אסטרטגיות להסבה של עצם.
- מפחית עמימות מנגנונית בבחירת מודלים פרה-קליניים ליישומים דנטיים וקרניו-פציאליים.
שילוב בצינור עיבוד ובזרימת עבודה
מודל זה ממוקם בממשק שבין שלב הגילוי המוקדם לתיקוף פרה-קליני, ומאפשר בדיקת השערות ומחקרים מכניסטיים בתהליכי עבודה של רגנרציה של עצם.
- ביולוגיה של גילוי: תומך בחקירה מונחית-השערה של רגולטורים של אוסטאוגנזה וריפוי עצם.
- סריקה: מספקת נקודות סוף הניתנות לשחזור להערכת התערבויות מועמדות וסמנים מולקולריים.
- אנליזה: מספקת תוצאות היסטולוגיות ואימונופלואורסצנטיות כמותיות לצורך ניתוח השוואתי.
- מחקר תרגומי: מגשר בין ממצאי הגילוי למודלים פרה-קליניים הרלוונטיים לתיקון עצם הלסת.
- שימוש חוזר ארגוני: מכונן פלטפורמה הניתנת לשימוש חוזר in vivo למחקרים שוטפים ברגנרציה של עצם.
השפעה תפעולית וארגונית
- ערך מדעי: מגביר את הביטחון בניבוי ומפחית עמימות מכניסטית במחקר על ריפוי עצם.
- ערך תפעולי: סטנדרטיזציה של הליכים in vivo והערכות היסטולוגיות לצורך הדירות.
- ערך אסטרטגי: מספק בסיס לקבלת החלטות go/no-go עבור יעדים ומסלולים של רגנרציה של עצם.
- השפעה על תיק הפרויקטים: מאפשר תיעדוף מותאם סיכונים של תוכניות לתיקון רקמות שלד.
שיקולי יישום
- דורש מומחיות בטכניקות ניתוח בעכברים ובהיסטולוגיה של העצם.
- נדרשת גישה לתשתית של מיקרוסקופיה סטריאומטרית, צביעה היסטולוגית ופלואורסצנציה עקיפה (Immunofluorescence).
- מחייב סטנדרטיזציה בין-צוותית של פרוטוקולי ניתוח ואנליזה.
- מוגבל למודלים של לסת תחתית בעכברים; לא ניתן להתאמה למערכות אחרות על פי התיקוף הנוכחי.
- מגבלות מעשיות כוללות דרישות למיומנות טכנית ואילוצים ספציפיים למודל.
