Name: בידוד ואפיון רצועות הרחם ואיברי רצפת האגן (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-03-03T13:25:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: למד פרוטוקול לבידוד רצועות הרחם ורקמות רצפת האגן בעכברים תוך שמירה על מבנה אנטומי. שיטה זו מאפשרת חקר השפעת הריון ומחלה על התנהגות מכנית של רקמות ומספקת מודל טרום-קליני למחקר בריאות האישה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענק CU Boulder Summer Underground Research Opportunities Program (UROP) (C.B.), מלגת המחקר לתארים מתקדמים של NSF (L.S.), מלגת המדע של שמידט (C.L.), תוכנית מענקי זרעי המחקר והחדשנות של אוניברסיטת קולורדו (פרס 2020 ל- V.F., S.C. ו- K.C.), ומענק זרעי Anschutz Boulder Nexus באוניברסיטת קולורדו (ל- V.F. ו- K.C). תודה מיוחדת מגיעה לד"ר טיילר טאטל על עזרתו בעיצוב תא ההעמסה, כמו גם לחברי מעבדת Calve על דיונים מועילים.

כל הניסויים וההליכים בבעלי חיים בוצעו על פי פרוטוקול #2705, שאושר על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת קולורדו בולדר. נקבות עכברי C57BL/6J בנות שישה שבועות שימשו במחקר הנוכחי. בעלי החיים התקבלו ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים).
1. הכנת בעלי חיים
<ol><li>יש להרדים את בעל החיים בשיטה שאושרה במוסד. הערה: המחקר הנוכחי השתמש בשאיפת CO 2 בהתאם להנחיות האגודה האמריקאית לרפואה וטרינרית (שיעור תזוזה של 30% עד 70% מנפח החדר עם CO2 לדקה), ואחריו פריקת צוואר הרחם, כדי להבטיח המתת חסד מוצלחת.<ol><li>עבדו מתחת למכסה המנוע, במידת האפשר, כדי למזער את התפשטות האלרגנים של עכברים. ברגע שהעכבר מפסיק לזוז ולנשום, המתן 2 דקות או יותר כדי לוודא את חוסר התגובה. הערה: אם העכבר בהריון או לאחר לידה, יש להרדים את הגורים בנפרד. יש לערוף את ראשיהם של גורים E15.5 ומעלה במהלך הנתיחה.</li>
	</ol></li>
	<li>הכינו את מערך הדיסקציה בעזרת כרית דיסקציה, אזמל בעל 11 להבים, מספריים חדים דקים ומעוקלים, שני זוגות מלקחיים, מלקחיים מעוקלים, תפר פוליגלקטין 5-0, מיקרוסקופ מנתח ושישה פינים (איור 1, ראו טבלת חומרים).</li>
	<li>הניחו את העכבר על הפד ונעצו את הגפיים הקדמיות כלפי מטה (איור 2A). בצעו חתך של כ-1-1.5 ס"מ בבטן בעזרת מספריים (איור 2B). השתמשו בעדינות במספריים כדי להפריד את העור בצד הגולגולתי, הקאודלי והצידי של החתך (איור 2C, D).</li>
	<li>הפכו את העכבר לצד הגבי שלו, וקילפו בעדינות את העור לכיוון הגפיים האחוריות כדי להסיר את העור מאתר הדיסקציה (איור 2E-H).</li>
	<li>הצמידו את העכבר לגפיים (איור 2I), ובצעו חתך של כ-1 ס"מ לתוך הבטן מבית החזה ועד האגן (איור 2J). הערה: הקפד לא לפגוע באיברים הבסיסיים.</li>
	<li>דחפו בעדינות את האיברים לכיוון בית החזה כדי לנקות את שדה הראייה (איור 2K). הערה: השקו את הרקמות עם PBS אחד כדי לשמור על הידרציה.</li>
	<li>נקו את כל רקמת השומן מרצפת האגן (איור 2L-N). הערה: השתמש במלקחיים כדי למשוך בעדינות ולנקות שומן מהאיברים והרקמות המעניינים.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65074/65074fig01.jpg"> איור 1: סביבת עבודה נקייה עם כל הכלים הדרושים לביצוע הנתיחות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65074/65074fig01large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65074/65074fig02.jpg"> איור 2: הסרת העור ופתיחת חללי האגן ובית החזה של העכבר. (A) הצמדת כל הגפיים. (B) חתך ראשוני. (C) הפרדת העור מהפאשיה שמתחתיו באמצעות מספריים. (ד) חיתוך העור והכנה להסרה. (ה-ג) משיכת העור על ידי סיבוב העכבר. (H) הסרה מלאה של העור מהצד הגבי. (I) הסרה מלאה של העור מפלג הגוף העליון, והצמדה מחדש של גפי העכבר. (י) פתיחת הבטן. (K) מבט על הבטן הפתוחה. (L) הזזת האיברים משדה הראייה. (יג) הסרת השומן. (N) מבט על רצפת האגן הפנויה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65074/65074fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
2. קציר USL
<ol><li>חתכו את קרני הרחם מהשחלות (איור 3B), התרחקו משדה הראייה וחתכו בחיבור הצווארי (איור 3C). הערה: ניתן לזהות את קרני הרחם לפי הסכמה באיור 3A. השקו את הרקמות עם PBS 1x כדי לשמור על הידרציה.</li>
	<li>חתכו את השופכנים מחיבור שלפוחית השתן (איור 3D). הערה: זאת כדי למנוע בלבול עם USL.</li>
	<li>חתכו את המעי הגס קרוב ככל האפשר לצוואר הרחם (איור 3E,F). הערה: השקו את הרקמות עם PBS אחד כדי לשמור על הידרציה.</li>
	<li>מקם את העכבר יחד עם משטח הנתיחה מתחת לטווח הניתוח כדי להמחיש את ה-USL (איור 3G).</li>
	<li>השתמשו בעדינות במלקחיים כדי לנקות את השומן שמסביב מה-USL. הערה: השתמש בזוג מלקחיים שני כדי להחזיק את צוואר הרחם למעלה בזווית קטנה כדי לשפר את ההדמיה של המקום שבו USL מצטלב עם צוואר הרחם. השקו את הרקמות עם PBS 1x כדי לשמור על הידרציה.</li>
	<li>קשרו תפר פוליגלקטין 5-0 סביב הקצה הצווארי של שני USL (איור 4B, C). הערה: ניתן לזהות את ה-USL באמצעות תמונות סכמות והגדלה (איור 4I-K)</li>
	<li>במחקר זה, USL אחד משמש לניתוחים מורפולוגיים או ביוכימיים (כלומר, מיקרוסקופ ראמאן, אימונוהיסטוכימיה, היסטולוגיה). חתכו את הקצה הצווארי של ה-USL, השאירו חתיכה מצוואר הרחם מחוברת, וחתכו חתיכת שריר מתחתית ה-USL (איור 4D). הניחו את הרקמה המנותחת באמבטיה עם PBS 1x כדי לשמור על לחות הרקמה (איור 4G, H).</li>
	<li>השתמש ב-USL הנותר לצורך בדיקות מכניות והדמיה. חתכו את הקצה הצווארי של USL, השאירו פיסת צוואר הרחם מחוברת, כדי להקל על ההתקנה המכנית (איור 4D). הערה: רקמת צוואר הרחם תשמש כעוגן לאבטחת USL במהלך הבדיקה המכנית.</li>
	<li>לאחר שכל הרקמות המעניינות נקצרות (שלבים 3-5), עקרו את עצם הירך מהאגן (איור 4E). הערה: יש לשמוע צליל נקישה קלוש כאשר ראש עצם הירך מנותק מהכוס האצטבולרית.</li>
	<li>חתכו את עצם האגן מהקצוות הדיסטליים והפרוקסימליים של עצם האגן, והותירו כ-10 מ"מ של רקמה כוללת (איור 4F). מניחים את הרקמה המנותחת ב-1x PBS.</li>
</ol><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65074/65074fig03.jpg"> איור 3: רצפת אגן פנויה לדיסקציה USL . (A) סכמה של האנטומיה. (B) חיתוך קרני הרחם בחיבור השחלות. (ג) כריתת קרני הרחם. (ד) חיתוך השופכנים. (E) חיתוך המעי הגס. (F) מבט ברור על פי הטבעת ושל USLs. (ז) הנחת העכבר ומשטח הנתיחה מתחת לטווח הניתוח. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65074/65074fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65074/65074fig04.jpg"> איור 4: מבט על ה-USL והרקמות הסובבות אותו ודיסקציה של ה-USLs . (A) סכמה של ציוני דרך אנטומיים סביב ה-USL. (B) קשירת תפר סביב קצות צוואר הרחם. (C) חיתוך הקצוות הצוואריים של USL. (D) חיתוך USL שישמש לניתוחים ביוכימיים בחיבור העצה. (E) חיתוך עצם הירך מעצם האגן. (F) חיתוך הקצה הפרוקסימלי של האגן. (G) ניתוח USL בצלחת פטרי 35 מ"מ. (H) USL עם האגן המחובר בצלחת פטרי 35 מ"מ. (I) USL ופי הטבעת בהגדלה של 0.75x. (J) הסרת שומן מה-USL. (K) ניקוי של USL בהגדלה של פי 1.0. סרגל קנה מידה = 2 מ"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65074/65074fig04large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
3. קצירת שלפוחית השתן
<ol><li>לאחר פינוי השומן, החזיקו את שלפוחית השתן עם המלקחיים, והרימו אותה בעדינות בזווית של כ-40° (איור 5A).</li>
	<li>בעזרת המספריים, חתכו את שלפוחית השתן מהצד הדיסטלי, ממש מעל צוואר הרחם (איור 5B).</li>
	<li>הניחו את הרקמה באמבטיה עם PBS 1x כדי לשמור על הרקמה רוויה בלחות (איור 5H).</li>
</ol>4. קציר פי הטבעת
<ol><li>לאחר ניתוק צוואר הרחם וכריתת שלפוחית השתן, הרימו את צוואר הרחם בזווית של כ-40 מעלות בעזרת המלקחיים. יש את הפאשיה הרקטובגינלית המחברת בין פי הטבעת לצוואר הרחם. בעזרת האזמל, חתכו בעדינות את החיבור הזה (איור 5C, D).</li>
	<li>חותכים את עצם הערווה בסימפיזת הערווה באמצעות מספריים. הרחב בעדינות את סביבת העבודה כדי להגביר את הגישה החזותית להחדרות הרקמות.</li>
	<li>בעזרת המלקחיים, משכו בעדינות את פי הטבעת לכיוון בית החזה, והשתמשו במספריים כדי לעקוב אחר פי הטבעת מצידו האחורי ועד לפי הטבעת. חתכו את פי הטבעת בפי הטבעת (איור 5E).</li>
	<li>הניחו את הרקמה ב-PBS 1x כדי לשמור על הרקמה רוויה בלחות (איור 5I).</li>
</ol>5. קצירת קומפלקס צוואר הרחם-נרתיק
<ol><li>לאחר הסרת USL מצוואר הרחם, השתמש במלקחיים כדי להחזיק את צוואר הרחם. גזרו את צוואר הרחם קרוב ככל האפשר לפות בעזרת מספריים (איור 5F, G). הערה: הקפד לחתוך את סימפיזיס הערווה כדי לראות את הקצה הדיסטלי של הנרתיק חזותית.</li>
	<li>הניחו את הרקמה ב-PBS 1x כדי לשמור על הרקמה רוויה בלחות (איור 5J).</li>
</ol><img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65074/65074fig05.jpg"> איור 5: דיסקציות שלפוחית השתן, פי הטבעת וצוואר הרחם/הנרתיק. (A) החזקת שלפוחית השתן בזווית. (B) חיתוך שלפוחית השתן. (C) חיתוך הגיד המחבר בין צוואר הרחם ופי הטבעת. (D) הגיד בהגדלה של פי 1.0. (E) חיתוך פי הטבעת. (F) החזקת צוואר הרחם במלקחיים. (G) חיתוך בקצה הדיסטלי של הנרתיק. (H) שלפוחית השתן בצלחת פטרי בקוטר 35 מ"מ. (I) פי הטבעת בכלי פטרי בקוטר 35 מ"מ. (J) קומפלקס רקמת צוואר הרחם-נרתיק בצלחת פטרי 35 מ"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65074/65074fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
6. הכנת דגימה לאפיון רקמות
<ol><li>ניתוחים מכניים וחזותיים של USL<ol><li>הניחו את ה-USL עם חיבור האגן מעל קיר בצורת T בתוך באר צביעה מותאמת אישית כדי להבטיח טבילה מלאה בתמיסת הצביעה (שרטוטי CAD של הבאר ניתן למצוא בקובץ קידוד משלים 1 ובקובץ קידוד משלים 2). הערה: השתמש בתפר ומלקחיים כדי לעזור עם המיקום.</li>
		<li>לדלל צבע זמין מסחרית שמכתים קבוצות אמין חופשיות (5 μL, ראה טבלת חומרים) ב 2.5 מ"ל של 1x PBS, להוסיף את התמיסה לצביעה מותאמת אישית היטב, ולהכתים את הרקמה במשך 2 שעות על נדנדה ב 4 ° C. הערה: מערבבים את התמיסה לפני הוספתה לבאר הצביעה.</li>
		<li>במהלך 15 הדקות האחרונות של הצביעה, הוסף 2.5 μL של כתם גרעיני תאים מתים זמין מסחרית (ראה טבלת חומרים) לתמיסה. הערה: מערבלים את התמיסה לפני הוספה לבאר הצביעה.</li>
	</ol></li>
	<li>ניתוח ראמאן של USLs<ol><li>הצמד את USL בקו ישר על בלוק polydimethylsiloxane (PDMS) הכלול בבאר מותאמת אישית. הערה: PDMS משמש כמצע רך כדי לאפשר את הצמדת הדגימה בתצורה הרצויה. ניתן ליצור בלוקים בממדים שונים על ידי ערבוב שני הרכיבים בהתאם להוראות היצרן (ראה טבלת חומרים), יציקה בצלחת פטרי, ולאחר פילמור, חיתוך PDMS לגיאומטריה הנדרשת עם להב אזמל.</li>
		<li>סיכה עם סיכות חרקים בלולאת התפר ובשריר האגן. לחות את הרקמה עם 1x PBS.</li>
	</ol></li>
	<li>רקמות נותרות<ol><li>יש להקפיא את הרקמות הנותרות בחנקן נוזלי או בתרכובת הטבעה מתאימה, בהתאם לניתוחים הרצויים.</li>
		<li>שמור את הרקמות ב -80 מעלות צלזיוס עד לניתוחים הבאים (למשל, בדיקות אימונוהיסטוכימיות או ביוכימיות).</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Maldonado, P. A., Wai, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Pelvic organ prolapse.</a> Obstetrics and Gynecology Clinics of North America. 43 (1), 15-26 (2016).</li>
<li>Drewes, P. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pelvic+organ+prolapse+in+fibulin-5+knockout+mice%3A+Pregnancy-induced+changes+in+elastic+fiber+homeostasis+in+mouse+vagina%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Pelvic organ prolapse in fibulin-5 knockout mice: Pregnancy-induced changes in elastic fiber homeostasis in mouse vagina.</a> American Journal of Pathology. 170 (2), 578-589 (2007).</li>
<li>Barber, M. D., Maher, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+and+outcome+assessment+of+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22International+Urogynecology+Journal+and+Pelvic+Floor+Dysfunction%22%5BJournal%5D)">Epidemiology and outcome assessment of pelvic organ prolapse.</a> International Urogynecology Journal and Pelvic Floor Dysfunction. 24 (11), 1783-1790 (2013).</li>
<li>Becker, W. R., De Vita, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biaxial+mechanical+properties+of+swine+uterosacral+and+cardinal+ligaments%5BTitle%5D)+AND+%22Biomechanics+and+Modeling+in+Mechanobiology%22%5BJournal%5D)">Biaxial mechanical properties of swine uterosacral and cardinal ligaments.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 14 (3), 549-560 (2015).</li>
<li>Donaldson, K., Huntington, A., De Vita, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanics+of+uterosacral+ligaments%3A+Current+knowledge%2C+existing+gaps%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Mechanics of uterosacral ligaments: Current knowledge, existing gaps, and future directions.</a> Annals of Biomedical Engineering. 49 (8), 1788-1804 (2021).</li>
<li>Amundsen, C. L., Flynn, B. J., Webster, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomical+correction+of+vaginal+vault+prolapse+by+uterosacral+ligament+fixation+in+women+who+also+require+a+pubovaginal+sling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Anatomical correction of vaginal vault prolapse by uterosacral ligament fixation in women who also require a pubovaginal sling.</a> Journal of Urology. 169 (5), 1770-1774 (2003).</li>
<li>Jelovsek, J. E., Maher, C., Barber, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Pelvic organ prolapse.</a> The Lancet. 396 (9566), 1027-1038 (2007).</li>
<li>Blomquist, J. L., Muñoz, A., Carroll, M., Handa, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+delivery+mode+with+pelvic+floor+disorders+after+childbirth%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Association of delivery mode with pelvic floor disorders after childbirth.</a> Journal of the American Medical Association. 320 (23), 2438-2447 (2018).</li>
<li>Iwanaga, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+histology+of+mouse%2C+rat%2C+and+human+pelvic+ligaments%5BTitle%5D)+AND+%22International+Urogynecology+Journal%22%5BJournal%5D)">Comparative histology of mouse, rat, and human pelvic ligaments.</a> International Urogynecology Journal. 27 (11), 1697-1704 (2016).</li>
<li>Zhu, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+extracellular+matrix+protein+expression+and+apoptosis+in+the+uterosacral+ligaments+of+patients+with+or+without+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22International+Urogynecology+Journal%22%5BJournal%5D)">Evaluation of extracellular matrix protein expression and apoptosis in the uterosacral ligaments of patients with or without pelvic organ prolapse.</a> International Urogynecology Journal. 32 (8), 2273-2281 (2021).</li>
<li>Jimenez, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiscale+mechanical+characterization+and+computational+modeling+of+fibrin+gels%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Multiscale mechanical characterization and computational modeling of fibrin gels.</a> bioRxiv. , (2022).</li>
<li>Fischenich, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+articular+cartilage+is+orthotropic+where+microstructure%2C+micromechanics%2C+and+chemistry+vary+with+depth+and+split-line+orientation%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Human articular cartilage is orthotropic where microstructure, micromechanics, and chemistry vary with depth and split-line orientation.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 28 (10), 1362-1372 (2020).</li>
<li>Luetkemeyer, C. M., Neu, C. P., Calve, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+defining+tissue+injury+criteria+reveals+ligament+deformation+thresholds+are+multimodal%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">A method for defining tissue injury criteria reveals ligament deformation thresholds are multimodal.</a> bioRxiv. , (2023).</li>
<li>O'Brien, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+Raman+spectroscopy+for+biochemical+monitoring+of+the+human+cervix+throughout+pregnancy%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">In vivo Raman spectroscopy for biochemical monitoring of the human cervix throughout pregnancy.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 218 (5), 1-18 (2018).</li>
<li>Louwagie, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((et+al.+ultrasonic+dimensions+and+parametric+solid+models+of+the+gravid+uterus+and+cervix%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">et al. ultrasonic dimensions and parametric solid models of the gravid uterus and cervix.</a> PLoS One. 16 (1), 0242118(2021).</li>
<li>Drewes, P. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pelvic+organ+prolapse+in+fibulin-5+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Pelvic organ prolapse in fibulin-5 knockout mice.</a> The American Journal of Pathology. 170 (2), 578-589 (2007).</li>
<li>Rahn, D. D., Ruff, M. D., Brown, S. A., Tibbals, H. F., Word, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+properties+of+the+vaginal+wall%3A+Effect+of+pregnancy%2C+elastic+fiber+deficiency%2C+and+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Biomechanical properties of the vaginal wall: Effect of pregnancy, elastic fiber deficiency, and pelvic organ prolapse.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 198 (5), 1-6 (2008).</li>
<li>Roman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+alternative+materials+for+the+treatment+of+stress+urinary+incontinence+and+pelvic+organ+prolapse%3A+A+comparison+of+the+in+vivo+response+to+meshes+implanted+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Evaluating alternative materials for the treatment of stress urinary incontinence and pelvic organ prolapse: A comparison of the in vivo response to meshes implanted in rabbits.</a> Journal of Urology. 196 (1), 261-269 (2016).</li>
<li>Couri, B. M., Lenis, A. T., Borazjani, A., Paraiso, M. F., Damaser, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+female+pelvic+organ+prolapse%3A+Lessons+learned%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Obstetrics+%26+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Animal models of female pelvic organ prolapse: Lessons learned.</a> Expert Review of Obstetrics & Gynecology. 7 (3), 49(2012).</li>
<li>Abramowitch, S. D., Feola, A., Jallah, Z., Moalli, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+mechanics%2C+animal+models%2C+and+pelvic+organ+prolapse%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Obstetrics+%26+Gynecologyand+Reproductive+Biology%22%5BJournal%5D)">Tissue mechanics, animal models, and pelvic organ prolapse: A review.</a> European Journal of Obstetrics & Gynecologyand Reproductive Biology. 144, S146-S158 (2009).</li>
<li>Tan, T., Cholewa, N. M., Case, S. W., De Vita, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-structural+and+biaxial+creep+properties+of+the+swine+uterosacral-cardinal+ligament+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Micro-structural and biaxial creep properties of the swine uterosacral-cardinal ligament complex.</a> Annals of Biomedical Engineering. 44 (11), 3225-3237 (2016).</li>
<li>Tan, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histo-mechanical+properties+of+the+swine+cardinal+and+uterosacral+ligaments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Mechanical+Behavior+of+Biomedical+Materials%22%5BJournal%5D)">Histo-mechanical properties of the swine cardinal and uterosacral ligaments.</a> Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 42, 129-137 (2015).</li>
<li>Baah-Dwomoh, A., Alperin, M., Cook, M., De Vita, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+analysis+of+the+uterosacral+ligament%3A+Swine+vs.+human%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Mechanical analysis of the uterosacral ligament: Swine vs. human.</a> Annals of Biomedical Engineering. 46 (12), 2036-2047 (2018).</li>
<li>Vardy, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+hormone+replacement+on+the+biomechanical+properties+of+the+uterosacral+and+round+ligaments+in+the+monkey+model%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">The effects of hormone replacement on the biomechanical properties of the uterosacral and round ligaments in the monkey model.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 192 (5), 1741-1751 (2005).</li>
<li>Shahryarinejad, A., Vardy, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+human+to+macaque+uterosacral-cardinal+ligament+complex+and+its+relationship+to+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Pathology%22%5BJournal%5D)">Comparison of human to macaque uterosacral-cardinal ligament complex and its relationship to pelvic organ prolapse.</a> Toxicological Pathology. 36 (7), 101(2008).</li>
<li>Smith, T. M., Luo, J., Hsu, Y., Ashton-Miller, J., DeLancey, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+to+measure+in+vivo+uterine+suspensory+ligament+stiffness%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">A novel technique to measure in vivo uterine suspensory ligament stiffness.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 209 (5), 1-7 (2013).</li>
<li>Vandamme, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+rodents+as+models+for+human+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacy+and+Bioallied+Sciences%22%5BJournal%5D)">Use of rodents as models for human diseases.</a> Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences. 6 (1), 2-9 (2014).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

ההשפעה של נזק מבני על רקמות הרבייה הנשיות אינה נחקרת, ויש צורך במודל נגיש של בעלי חיים למחקר POP. העכבר הוא מודל חסכוני שיכול לחקות מחקרי רבייה אנושיים16. בשל העניין הגובר בחקר מערכת הרבייה הנשית, יש צורך בשיטות המסייעות לחקר רקמות אלה. כדי לענות על צורך זה, בעבודה זו, נקבעה שיטה לנתח ולהכין רקמות רצפת אגן מורין לניתוחים מבניים ופונקציונליים.
להצלחת הדיסקציה נדרשים זמן וטיפול נאותים. רקמות הרבייה של מורין קטנות ושבריריות. תשומת לב לפרטים נדרשת, במיוחד בעת ניקוי השומן סב...

כ-50% מהנשים סובלות מצניחת איברי האגן (POP)1,2. כ -11% מנשים אלה מתאימות לקריטריונים לעבור תיקון כירורגי, שיש לו שיעור הצלחה נמוך (~ 30%)3,4. POP מאופיין בירידה של כל או כל איברי האגן (כלומר, שלפוחית השתן, הרחם, צוואר הרחם ופי הטבעת) ממקומם הטבעי עקב כישלון של USL ושרירי רצפת האגן לספק תמיכה נאותה5. מצב זה כרוך בתפקוד אנטומי ושיבוש של רקמת החיבור, כמו גם פגיעה עצבית-שרירית, בנוסףלגורמים 3,6. POP קשור למספר גורמים כגון גיל, משקל, זוגיות וסוג הלידה (כלומר, לידות נרתיקיות או קיסריות). גורמים אלה נחשבים כמשפיעים על השלמות המכנית של כל רקמות רצפת האגן, כאשר הריון וזוגיות נחשבים למניעים העיקריים של POP 5,7,8.
רצועות הרחם (USLs) הן מבנים תומכים חשובים לרחם, לצוואר הרחם ולנרתיק וקושרות את צוואר הרחם לעצה4. נזק ל-USLs מציב נשים בסיכון מוגבר לפתח POP. הוא האמין כי הריון ולידה להטיל עומס נוסף על USL, אשר עלול לגרום לפציעה ומגדיל את הסיכויים של POP. USL היא רקמה מורכבת המורכבת מתאי שריר חלקים, כלי דם ולימפה המפוזרים באופן הטרוגני לאורך הרצועה, אותם ניתן לחלק לשלושה חלקים נפרדים: צוואר הרחם, אזור הביניים ואזור העצה9. השלמות המכנית של USL נגזרת מרכיבי מטריצה חוץ-תאיים (ECM) כמו קולגן, אלסטין ופרוטאוגליקנים 5,9,10. סיבי קולגן מסוג I ידועים כמרכיב מתיחה עיקרי נושא עומס ברקמות רצועתיות, ולכן סביר להניח שהם מעורבים בכשל USL וב-POP11.
קיים חוסר ידע לגבי הסיבות, השכיחות וההשפעות של POP אצל נשים. פיתוח מודל חייתי מתאים של POP נחוץ כדי לקדם את הבנתנו את רצפת האגן הנשית. לעכברים ולבני אדם יש ציוני דרך אנטומיים דומים בתוך האגן, כגון השופכנים, פי הטבעת, שלפוחית השתן, השחלות והרצועות העגולות9, כמו גם נקודות הצטלבות דומות של USL עם הרחם, צוואר הרחם והעצה. יתר על כן, עכברים מציעים קלות של מניפולציה גנטית ויש להם פוטנציאל להיות מודל נגיש וחסכוני לחקר POP9. 
מחקר זה פיתח שיטה לגשת ולבודד את USL ואת רקמות רצפת האגן השונות מעכברות Nulliparous (כלומר, מעולם לא בהריון). ה-USL שחולצו עברו עיכול אנזימטי (כלומר, כדי להסיר קולגן וגליקוזאמינוגליקנים), נבדקו כדי לקבוע את התגובה המכנית תחת עומס מתיחה, והוערכו להרכב ביוכימי במחקר הוכחת היתכנות. היכולת לבודד רקמות שלמות תאפשר אפיונים מכניים וביוכימיים נוספים של מרכיבי רצפת האגן, המהווה צעד ראשון חיוני לשיפור הבנתנו את סיכוני הפגיעה הקשורים ללידה, הריון ו- POP.

<table><tbody><tr><td>11 להב</td><td>פישר</td><td>3120030</td><td>להב נשלף</td></tr><tr><td>1x PBS</td><td>Fisher</td><td>BP399-1</td><td>מדולל מריכוז 10x</td></tr><tr><td>כונדרואיטינאז ABC</td><td>Sigma</td><td>C3667-10UN</td><td>אנזים&nbsp;</td></tr><tr><td>קולגנאז סוג I</td><td>וורת'ינגטון LS004194 אנזים ביוכימי</td><td></td>&<td>nbsp;</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ קונפוקלי</td><td>Leica</td><td>STELLARIS 5</td><td>תצורה זקופה</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ דיסקציה</td><td>Leica</td><td>S9E</td><td>עם מצלמה</td></tr><tr><td>Dumont #5 מלקחיים</td><td>פישר</td><td>NC9626652</td><td>קצה דק</td></tr><tr><td>נקבה C57BL/6J עכברי</td><td>מעבדה ג'קסון</td><td>#: 000664</td><td></td></tr><tr><td>FemtoTools מיקרומניפולטור</td><td>FemtoTools</td><td>FT-RS1002</td><td>תא עומס 100 mN</td></tr><tr><td>FST מלקחיים מעוקלים</td><td>פישר</td><td>NC9639443</td><td>קצה מעוקל</td></tr><tr><td>FST חד 9 מ"מ מספריים&nbsp;</td><td>פישר</td><td>NC9639443</td><td>מספריים לדיסקציה</td></tr><tr><td>צבע רפאים 780&nbsp;</td><td>Tonbo</td><td>13-0865-T500</td><td>כתם אמין חינם</td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Fisher</td><td>06-666</td><td>קופסה של 50 מגבונים</td></tr><tr><td>OCT</td><td>Tissue Tek</td><td>4583</td><td>משמש לשימור רקמות</td></tr><tr><td>PDMS</td><td>Thermo Fisher</td><td>044764.AK</td><td>עקוב אחר הוראות היצרן</td></tr><tr><td>צלחות פטרי 35 מ"מ</td><td>פישר</td><td>FB0875711A</td><td>משמש לרקמות מנותחות</td></tr><tr><td>פוליגלקטין 5-0 תפר</td><td>וטר.VS385VL</td><td></td><td>עם מחט</td></tr><tr><td>Renishaw InVia Raman מיקרוסקופ</td><td>Renishaw</td><td>PN192(EN)-02-A</td><td>עם מטרות קונפוקליות</td></tr><tr><td>פלטפורמת נדנדה</td><td>VWR</td><td>10127-876</td><td>פלטפורמה דו-שכבתית</td></tr><tr><td>כפפות כירורגיות</td><td>פישר</td><td>52818</td><td>לדיסקציה&nbsp;</td></tr><tr><td>Sytox</td><td>Thermo Fisher</td><td>S11381</td><td>כתם גרעיני&nbsp;</td></tr><tr><td>סיכות</td><td>T פישר</td><td>S99385</td><td>לדיסקציה&nbsp;</td></tr><tr><td>העברת פיפטס</td><td>פישר</td><td>13-711-7M</td><td>לדיסקציה&nbsp;</td></tr><tr><td>רפידות תחתונות</td><td>פישר</td><td>22037950</td><td>לכיסוי כרית חיתוך</td></tr></tbody></table>

בידוד ואפיון רצועות הרחם ואיברי רצפת האגן

Isolation and Characterization of the Murine Uterosacral Ligaments and Pelvic Floor Organs

צניחת איברי האגן (POP) היא מצב המשפיע על שלמות, מבנה ותמיכה מכנית של רצפת האגן. האיברים ברצפת האגן נתמכים על ידי מבנים אנטומיים שונים, כולל שרירים, רצועות ופאשיה של האגן. הרצועה הרחם (USL) היא מבנה קריטי הנושא עומס, ופגיעה ב-USL גורמת לסיכון גבוה יותר לפתח POP. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את הדיסקציה של USL מורין ואיברי רצפת האגן, לצד קבלת נתונים ייחודיים על ההרכב והתפקוד הביוכימי של USL באמצעות ספקטרוסקופיית ראמאן והערכת התנהגות מכנית. עכברים הם מודל רב ערך למחקר פרה-קליני, אך ניתוח USL הוא תהליך קשה ומורכב. הליך זה מציג גישה להנחיית דיסקציה של רקמות רצפת האגן, כולל USL, כדי לאפשר הערכות ואפיון מרובים. עבודה זו נועדה לסייע בנתיחת רקמות רצפת האגן על ידי מדענים ומהנדסים בסיסיים, ובכך להרחיב את הנגישות של מחקר על תנאי USL ורצפת האגן ואת המחקר הפרה-קליני של בריאות האישה באמצעות מודלים עכבריים.

כל שלב בדיסקציה של עכבר מסוג פרא מפורט בסרטון ובדמויות הקשורות לפרוטוקול. במחקר זה נעשה שימוש בנקבות עכברי C57BL/6J בנות 6 שבועות (טבלה משלימה 1). שלוש קבוצות מדגם עם USL שטופלו באנזימים שונים נותחו: קבוצת ביקורת (ללא טיפול), קבוצות שטופלו בקולגנאז וקבוצות שטופלו בכונדרויטינאז. השריר החלק, העצבים והלימפה ב-USL מוקפים ב-ECM עשיר בקולגן פיברילרי וגליקוזאמינוגליקנים (GAGs)5, אשר נחשבים כמספקים שלמות מכנית לרקמה. טיפולי האנזימים נבחרו כדי לשבש רכיבי ECM אלה ולהדגים את ההיתכנות לפתרון ...

מאמר זה מציג פרוטוקול מפורט לניתוח רצועות הרחם ורקמות אחרות של רצפת האגן, כולל צוואר הרחם, פי הטבעת ושלפוחית השתן בעכברים, כדי להרחיב את המחקר של רקמות הרבייה הנשיות.

Pelvic organ prolapse (POP) is a condition that affects the integrity, structure, and mechanical support of the pelvic floor. The organs in the pelvic ...

פרוטוקול זה ירחיב את הנגישות של מחקר על הרצועה הרחם ותנאי רצפת האגן, כמו צניחת איברי האגן, או POP, ויקל על דיסקציה של רקמת רצפת האגן המשוקפת. טכניקה זו מאפשרת בידוד של שתי רצועות הרחם מעכבר תוך שמירה על חיבורים אנטומיים ושליפת איברי רצפת האגן שמסביב. השיטה שלנו קובעת מודל פרה-קליני המאפשר מחקר זה של האופן שבו הריון או מחלה משפיעים על ההתנהגות המכנית של הרקמות.שיטה זו יוצרת כלי חדש למחקר הקשור לבריאות האישה. המאבק העיקרי הוא זיהוי וטיפול ברצועה הרחם. העצה שלי היא לקחת מספיק זמן וטיפול כי רקמות אלה קטנות ושבריריות.התחילו בהנחת עכבר שעבר המתת חסד על פד והצמדת ארבעת הגפיים כלפי מטה. בצע חתך באורך של 1 עד 1.5 ס"מ על הבטן עם מספריים. יש להפריד בעדינות את העור בצד הגולגולתי, הקאודלי והצידי של החתך.הפוך את העכבר כך שיפנה לצד הגבי כלפי מעלה וקילף בעדינות את העור בחזרה לכיוון הגפיים האחוריות. הצמידו את הגפיים ובצעו חתך באורך סנטימטר לתוך הבטן מבית החזה לאגן. דחפו בעדינות את האיברים לכיוון בית החזה לקבלת מבט ברור.לאחר השקיה עם PBS באמצעות זוג מלקחיים, למשוך ולנקות את רקמת שומן האגן. לזהות את קרני הרחם ולאחר מכן לחתוך אותם מן השחלות. עכשיו, לשלוף אותם משדה הראייה ולנתק את הקשר הצווארי.נתקו את השופכנים מחיבור שלפוחית השתן. חותכים את המעי הגס קרוב ככל האפשר לצוואר הרחם. מקם את העכבר עם הפד תחת טווח ניתוח כדי לדמיין את הרצועות הרחם.השתמש במלקחיים כדי לנקות בעדינות את כל השומן שמסביב מרצועות הרחם. קשרו תפר 5-0 סביב הקצה הצווארי של שתי הרצועות. חותכים את הקצה הצווארי של הרצועה הרחם, ומשאירים חתיכה מצוואר הרחם מחוברת.עכשיו, לחתוך חתיכת שריר מתחתית הרצועה. הניחו את הרקמה המנותחת באמבטיה המכילה PBS כדי לשמור על לחות הרקמות. חותכים את הקצה הצווארי של הרקמה הנותרת, ומשאירים חתיכת צוואר הרחם מחוברת לבדיקה מכנית והדמיה.לאחר פינוי השומן, החזיקו את שלפוחית השתן במלקחיים והרימו אותה בעדינות בזווית של כ-40 מעלות. השתמש במספריים כדי לחתוך את שלפוחית השתן בצד הדיסטלי ממש מעל צוואר הרחם. הניחו את שלפוחית השתן באמבטיה עם PBS כדי לשמור על הידרציה.כעת, השתמש במלקחיים כדי להרים את צוואר הרחם בזווית משוערת של 40 מעלות. לזהות את הפאשיה הרקטובגינלית המחברת בין פי הטבעת לצוואר הרחם ולנתק את הקשר עם האזמל. השתמש מספריים לחתוך את עצם הערווה בסינתזה הערווה.הרחיבו בעדינות את רצפת האגן כדי להגביר את הנראות של החדרות הרקמות. החזיקו את צוואר הרחם במלקחיים וחתכו אותו קרוב ככל האפשר לפות. הניחו את הרקמה ב-PBS כדי לשמור על הידרציה.השתמש במלקחיים כדי למשוך בעדינות את פי הטבעת לכיוון בית החזה. זהה את פי הטבעת וחתך אותו בפי הטבעת. מקם את פי הטבעת ב- PBS כדי לשמור על הידרציה.לאחר שכל הרקמות המעניינות נקצרות, נקעו את עצם הירך מהאגן. חותכים את עצם האגן מהקצוות הדיסטליים והפרוקסימליים. הניחו את הרקמה המנותחת ב-PBS.נראה כי הטיפול באנזים הפחית את השיא הצירי הממוצע ואת גורמי הלחץ המרגיעים שהרצועה הרחם חווה בתזוזות גלובליות שנקבעו, מה שמצביע על כך שקולגן וגליקוזאמינוגליקנים תרמו לנוקשות צירית של הרצועות. הזנים הציריים הממוצעים עבור כל דגימה שנבדקה מכנית מצביעים על כך שהזן הצירי העולמי בדגימות שטופלו באנזים היה דומה או גדול יותר מהמדגם המבוקר, דבר המצביע על כך שהירידה בעקה המקרוסקופית נבעה מטיפול באנזימים, ולא מזנים קטנים יותר. ספקטרוסקופיית ראמאן של קטע הביניים של הרצועה הרחם מצביעה על כך שטיפולי אנזימים שינו את ההרכב הביוכימי של רצועות הרחם של מורין.ברצועות הרחם שטופלו בקולגנאז נרשמה ירידה בתכולת הקולגן, כמו גם ירידה במים ובחומצה היאלורונית. ברצועות הרחם שטופלו בכונדרוטינאז הייתה פחות חומצה היאלורונית, כמו גם תכולת מים וקולגן נמוכה יותר. תשומת לב לפרטים חשובה מאוד, במיוחד כאשר מנקים את העובדה שיש צורך במשקעים סביב USL ואיברי האגן כאן כדי למנוע פגיעה ב- USL וברקמות הסובבות אותו.מחקר נוסף יכול להתבצע על USL ורקמות רצפת אגן אחרות באמצעות עכברים שיש להם וריאציות גנטיות ששיערו להשפיע על POP. הפרוטוקול שלנו כבר מאפשר מגוון מחקרים חדשים, כולל חקירה כיצד ההתנהגות המכנית של USL משנה תפקוד של הריון, שהוא גורם סיכון מרכזי ל- POP.

isolation-characterization-murine-uterosacral-ligaments-pelvic-floor

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

בידוד גזע בוגרים תאים ברקמות הרכות השלד מבוסס על מהירות הדבקות של התא בקבוק.

בידוד בתאי גזע רקמות השלד והשרירים Soft

אנו מודדים הפעלת perigenital מכאנית רגישות ותורן תא בערמונית של C57BL / 6 עכברי זכרים שעברו הפרדיגמה מתח בתחילת חיים - הפרדה אימהית יילודים, על מנת לגרום למודל פרה-קליני של תסמונת ערמונית כרונית / כרוני כאבים באגן.

הערכה של הפעלת תא Perigenital רגישות וערמונית תורן במודל עכבר של הפרדה אימהית עובריים

פרוטוקול זה מתאר השתלת רשת מחיצת rectovaginal ovine באמצעות טכניקה אחת חתך בנרתיק, עם וללא ההכנסה המנחה מונחה של הזרוע של זרועות עיגון.

רשת שינוי דרכי השתן במודל

כאן אנו מציגים פרוטוקול לתקנן את המדידה של מרים ani סרעפתי בגודל על ידי תהודה מגנטית. המטרה היא לחלץ biomechanical מסקנות מתוך ניתוח תמונות על-ידי השוואת נח ולא מתאמצת ערכים בחולים משני המינים עם צניחת הרחם והנרתיק, תוך שימוש עקבי ציוני גרמית אנטומי.

כימות של מרים Ani היאטוס הגדלה על ידי תהודה מגנטית של זכרים ונקבות עם צניחת אברי האגן

פרוטוקול זה מציג שיטה סטנדרטית לגדל תאים VX2 בתרבות וכלה ליצור מודל אורתוטופית VX2 של סרטן רירית הרחם עם הלימפה הצפק הצומת גרורות בארנבים. אורתובנושא מודלים סרטן רירית הרחם חשובים למחקר טרום קליני של הדמיה הרומן שיטות לאבחון של הלימפה הצומת גרורות.

מודל הסרטן רירית הרחם אורתוטופית עם לימפדנופתיה הצפק מתוצרת ב Vivo מופץ ומתורבת VX2 תאים

התכווצויות הרחם חשובים לרווחתם של הנקבות. עם זאת, באופן פתולוגי הגדילה הפתולוגית עלולה לגרום לדיסנוריאה, במיוחד לנשים צעירות. כאן, אנו מתארים הכנה vivo ex פשוטה המאפשרת הערכה מהירה של היעילות של מרפה שרירים חלקה שניתן להשתמש בהם לטיפול בדינוריאה.

שיטה Vivo Ex להערכת בדרכי הרבייה של העכבר לתנועתיות ספונטנית מעקב הרחם MATLAB מבוסס על התנועה אלגוריתם לניתוח נתונים

הגנגליה הגדולה מכילה נוירונים. מעוררי חמלה וסימפטיים שinnervate איברי אגן כאן אנו מתארים שיטת הניתוח ולספק תרשימים לזיהוי גנגליה אלה ואת העצבים המשויכים שלהם. שיטות אלה ניתן להחיל על מניפולציה ניסויית של גרעינים אלה ב vivo או להסרת לאחר המוות למחקר נוסף.

חיתוך של האגן האוטונומי האגליה והעצבים המשויכים בחולדות זכר ונקבה

הטכניקה הרובוטית המתוארת כאן נועדה לפרט גישה צעדית לניתוק מוחלט של רובוטים וסיוע בלוטות לימפה לרוחב באגן לסרטן פי הטבעת המתקדם המקומי (T3/T4) הממוקם מתחת להשתקפות הצפקית.

כריתה מזורצית בסיוע רובוט וריצוף בלוטות לימפה לרוחב האגן לסרטן רקטלי בינוני-נמוך מתקדם מקומי

צניחת איברי האגן משפיעה על מיליוני נשים ברחבי העולם, ובכל זאת כמה התערבויות כירורגיות נפוצות יש שיעורי כישלון גבוהים עד 40%. היעדר מודלים סטנדרטיים של בעלי חיים כדי לחקור מצב זה מעכב את ההתקדמות. אנו מציעים את הפרוטוקול הבא כמודל להשעיית רצועות הרחם ולבדיקת מתיחה in vivo .

פיתוח מודל חולדה של תרחיף רצועה רחמית

כאן אנו מציגים גישה חדשנית הידועה בשם laparoscopic non-mesh cerclage pectopexy עם שימור הרחם עבור צניחת איברי האגן (LNMCPUP) עבור חולים המעוניינים לשמר את הרחם שלהם. תפרים צרקלאז' קבועים משמשים להשעיית הרחם לרצועה האיליופקטינאלית דרך הרצועה העגולה.

פקטוקסיה לפרוסקופית ללא רשת עם שימור רחם לצניחת איברי האגן

הידבקויות תוך רחמיות (IUAs), התוצאה הפתולוגית השכיחה ביותר של פגיעה ברירית הרחם, פוגעות קשות בתפקוד הרבייה. טראומה וזיהום מוכרים כגורמי סיכון מרכזיים להתפתחות IUA. ביססנו בהצלחה מודל חולדות הניתן לשחזור של IUAs על ידי שילוב של שתי שיטות פציעה קריטיות: גרידה מכנית ואינדוקציה זיהומית עם ליפופוליסכריד.

הקמת מודל חולדות להידבקויות תוך רחמיות באמצעות פגיעה כפולה: גרידה וזיהום

למד פרוטוקול לבידוד רצועות הרחם ורקמות רצפת האגן בעכברים תוך שמירה על מבנה אנטומי. שיטה זו מאפשרת חקר השפעת הריון ומחלה על התנהגות מכנית של רקמות ומספקת מודל טרום-קליני למחקר בריאות האישה.

בידוד ואפיון רצועות הרחם ואיברי רצפת האגן

גלה סרטונים נוספים