-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
בידוד דו-שלבי ללא תגים של מיטוכונדריה לשיפור גילוי וכימות חלבונים
בידוד דו-שלבי ללא תגים של מיטוכונדריה לשיפור גילוי וכימות חלבונים
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Two-Step Tag-Free Isolation of Mitochondria for Improved Protein Discovery and Quantification

בידוד דו-שלבי ללא תגים של מיטוכונדריה לשיפור גילוי וכימות חלבונים

Full Text
8,456 Views
09:04 min
June 2, 2023

DOI: 10.3791/65252-v

Joan Blanco-Fernandez1, Alexis A. Jourdain1

1Department of Immunobiology,University of Lausanne

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a two-step protocol for high-quality mitochondria isolation, aimed at enhancing the understanding of mitochondrial function and energy metabolism in various biological contexts, including immune activation and cancer. The method's compatibility with primary cells and tissues allows for broader application in protein discovery and quantification.

Key Study Components

Research Area

  • Mitochondrial function
  • Energy metabolism
  • Pathological processes like cancer and immune activation

Background

  • Investigating how mitochondrial changes influence health and disease
  • Advancing therapeutic strategies through improved molecular understanding
  • Utilizing mass spectrometry and other tools for proteomic analysis

Methods Used

  • Two-step purification protocol using differential centrifugation and immune capture
  • Primary cells and tissues for mitochondrial isolation
  • Proteomics and metabolomics technologies

Main Results

  • Enhanced mitochondrial purification leading to better identification of mitochondrial proteins
  • Insights into mitochondrial composition affecting immune responses
  • Potential implications for targeted drug development, such as anti-inflammatory treatments

Conclusions

  • The study establishes a novel protocol for mitochondrial analysis without genetic manipulation
  • Findings have significant implications for understanding and treating various disorders related to mitochondrial dysfunction

Frequently Asked Questions

What is the main focus of the research?
The research focuses on mitochondrial function and energy metabolism in health and disease.
How does the protocol differ from existing methods?
The protocol uses a two-step purification process which improves contaminant removal compared to other methods.
What types of biological systems can this protocol be applied to?
This protocol is compatible with any primary cells and tissues.
What technologies were utilized in this study?
Mass spectrometry-based proteomics and metabolomics were key technologies used in the study.
What are the potential implications of this research?
The findings could lead to new drug developments targeting inflammatory processes and mitochondrial dysfunction.
Is genetic engineering required for this protocol?
No, the protocol does not require any genetic engineering.
What diseases might benefit from this research?
The research may provide insights applicable to cancer, metabolic disorders, and immune-related conditions.

אנו מציגים פרוטוקול דו-שלבי לבידוד מיטוכונדריה באיכות גבוהה התואם לגילוי וכימות חלבונים בקנה מידה של פרוטאום. הפרוטוקול שלנו אינו דורש הנדסה גנטית ולכן מתאים לחקר מיטוכונדריה מכל תא ורקמות ראשוניים.

המעבדה שלנו חוקרת שינויים במיטוכונדריה ובמטבוליזם של אנרגיה, וכיצד הם משפיעים על תהליכים בריאים ופתולוגיים כמו הפעלת מערכת החיסון, סרטן או הפרעות מטבוליות. מטרתנו היא לעזור לפתח טיפולים חדשים למגוון רחב של הפרעות על ידי מתן הבנה טובה יותר של תפקוד המיטוכונדריה ומטבוליזם של אנרגיה. כלים כגון פרוטאומיקה מבוססת ספקטרומטריית מסות, מטבולומיקה ומסכים גנטיים מסוג CRISPR-Cas9 הופכים פופולריים יותר לזיהוי מנגנונים מולקולריים הן בתפקוד המיטוכונדריה והן במטבוליזם של אנרגיה בסוגי תאים ובסביבות ספציפיות.

בניגוד לשיטות אחרות, הפרוטוקול שלנו משתמש בשני שלבי טיהור, צנטריפוגה דיפרנציאלית ולכידת מערכת החיסון לבידוד מיטוכונדריאלי. זה מציע כמה יתרונות, כמו סילוק משופר של מזהמים, וזה גם כלי רב עוצמה לזיהוי חלבונים מיטוכונדריאליים חדשים. הפרוטוקול שלנו מספק תובנה לגבי הרכב, ולכן תפקוד המיטוכונדריה בסוגי תאים וסביבות שונות.

זה יכול לעזור לנו להבין טוב יותר תהליכים נורמליים כמו הפעלת מערכת החיסון, אבל גם תהליכים פתולוגיים כמו סרטן. נתמקד במקרופאגים מיטוכונדריאליים. נבדוק כיצד הרכב המיטוכונדריה משתנה במהלך התגובה החיסונית כדי להבין טוב יותר את תפקודם.

הממצאים שלנו יכולים להוביל לפיתוח תרופות עם, למשל, השפעות אנטי דלקתיות.

Explore More Videos

החודש ב-JoVE גיליון 196

Related Videos

בידוד של mRNAs הקשורים למיטוכונדריה שמרים לחקר מנגנונים מקומי תרגום

14:44

בידוד של mRNAs הקשורים למיטוכונדריה שמרים לחקר מנגנונים מקומי תרגום

Related Videos

13.4K Views

בידוד מהיר וטיהור של מיטוכונדריה להשתלה על ידי דיסוציאציה רקמות ודיפרנציאל סינון

10:35

בידוד מהיר וטיהור של מיטוכונדריה להשתלה על ידי דיסוציאציה רקמות ודיפרנציאל סינון

Related Videos

39.9K Views

Immunodetection של החלבונים בממברנה חיצוניים על ידי cytometry הזרימה של מיטוכונדריה מבודדת

11:53

Immunodetection של החלבונים בממברנה חיצוניים על ידי cytometry הזרימה של מיטוכונדריה מבודדת

Related Videos

16.2K Views

בידוד וניתוח פונקציונלי של המיטוכונדריה מתאים בתרבית ורקמות עכבר

09:27

בידוד וניתוח פונקציונלי של המיטוכונדריה מתאים בתרבית ורקמות עכבר

Related Videos

40.8K Views

בידוד של המיטוכונדריה מכמויות מינימליות של שרירי שלד עכבר למדידות תפוקה גבוהה microplate נשימה

10:12

בידוד של המיטוכונדריה מכמויות מינימליות של שרירי שלד עכבר למדידות תפוקה גבוהה microplate נשימה

Related Videos

13.4K Views

בידוד, מדידות הנשימה של המיטוכונדריה מ תודרנית לבנה

09:54

בידוד, מדידות הנשימה של המיטוכונדריה מ תודרנית לבנה

Related Videos

16K Views

בידוד מהיר של Mitoribosome מתאי HEK

09:33

בידוד מהיר של Mitoribosome מתאי HEK

Related Videos

11.8K Views

בדיקות שאינן תלויות בחמצן למדידת תפקוד המיטוכונדריה ביונקים

05:59

בדיקות שאינן תלויות בחמצן למדידת תפקוד המיטוכונדריה ביונקים

Related Videos

3.6K Views

שיטה משופרת לבידוד אתרי מגע מיטוכונדריאליים

07:55

שיטה משופרת לבידוד אתרי מגע מיטוכונדריאליים

Related Videos

2.1K Views

בידוד מיטוכונדריה לניתוח סופר-קומפלקס מיטוכונדריאלי מדגימות רקמה קטנה ותרביות תאים

05:45

בידוד מיטוכונדריה לניתוח סופר-קומפלקס מיטוכונדריאלי מדגימות רקמה קטנה ותרביות תאים

Related Videos

2.2K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code