בידוד חצי אוטומטי של מקטע כלי הדם הסטרומלי מרקמת השומן הלבנה באמצעות דיסוציאטור רקמות

פרוטוקול זה מתאר את הבידוד החצי-אוטומטי של מקטע כלי הדם סטרומה (SVF) מרקמת השומן של מורין כדי להשיג קדם-אדיפוציטים ולהשיג התמיינות אדיפוציט במבחנה. שימוש בדיסוציאטור רקמות לעיכול קולגנאז מפחית את השונות הניסיונית ומגביר את יכולת הרבייה.

אנו מתעניינים בתת-סוגים חומים ובז' של אדיפוציט אשר מפזרים אנרגיה בצורה של חום, בעוד אדיפוציט לבן בדרך כלל מאחסן אנרגיה כמו המטרה שלנו היא לפתח טיפול חדש להשמנת יתר וסוכרת המבוסס על קידום הוצאת אנרגיה, ולא דיכוי צריכת אנרגיה. זיהינו גורם שעתוק, NFI, כמווסת קריטי של התמיינות אדיפוציט חום על ידי ניתוח כרומטין פתוח לרווחת הגנום. NFI ומווסת התמלול הראשי של אדיפוגנזה, PPAR-gamma, לוקליזציה משותפת כמשפרים ספציפיים לשומן חום.

בתהליך של בידוד מקטע כלי דם סטרומה מרקמת השומן של עכבר, טחינה ידנית ועיכול collagenase של רקמת השומן יכולים להוביל לשונות ניסיונית וזיהום. השיטה שלנו משתמשת בדיסוציאטור רקמות לעיכול קולגן, המאפשר בידוד SVF, מפחית שונות וזיהום ניסיוני ומשפר את יכולת השחזור. ניסויים באמצעות אדיפוציט מובחן בנפרד הם הכרחיים למחקר בתחום שלנו.

הפרוטוקול שלנו יציע בידוד SVF קל וניתן לשחזור עבור התמיינות אדיפוציטים לאחר מכן ויאיץ את המחקר בקהילה שלנו. כיום, אנו חוקרים את התפקיד של NFI של חילוף החומרים בכל הגוף, כגון משקל גוף וגלוקוז, באמצעות מודלים של עלייה ואובדן של עכברי תפקוד. אנו גם נחקור הפעלה פרמקולוגית אחרת של NFI עבור כל מסלול במורד הזרם בעתיד הקרוב.