יצירת פודוציטים שמקורם במטופל מביופסיות עור

כתב יד זה מתאר פרוטוקול דו-שלבי ליצירת פודוציטים ספציפיים למטופל מפיברובלסטים עוריים באמצעות תכנות מחדש אפיזומלי לתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם (hiPSCs) ולאחר מכן התמיינות לפודוציטים.

אנו מתארים פרוטוקול ליצירת פודוציטים אנושיים על ידי תכנות מחדש אפיזומלי של פיברובלסטים עוריים לתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם. תאים אלה דומים לפודוציטים in vivo הרבה יותר טוב מאשר פודוציטים אימורטליים במונחים של תהליכי מזון פודוציטים וביטוי של סמן ספציפי לפודוציטים. פודוציטים הם תאים ממוינים סופניים.

לכן, תאים אלה אינם מתרבים עוד וניתוח פודוציטים ראשוני בתרבית תאים מוגבל. אף על פי שהבעיה של מספר תאים מוגבל התגברה על ידי שימוש בפודוציטים אימורטליים מותנים, פודוציטים אלה מציגים פנוטיפ והתנהגות לא ממוינים, המטילים ספק בשימוש בהם במחקר בסיסי. בעזרת תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים, פודוציטים יכולים להיווצר במבחנה במספר תאים כמעט בלתי מוגבל עם מורפולוגיה טיפוסית של פודוציטים הכוללת תהליכי מזון מובחנים וביטוי של סמן ספציפי לפודוציטים.

כאשר משתמשים בתאי גזע ספציפיים למטופל כדי להתמיין לפודוציטים, ניתן ללמוד את השינויים הספציפיים למחלה של התא ex vivo. במקרה שהביופסיה הראשונית של העור נלקחה מחולה עם מחלת פודוציטים גנטית. פודוציטים הנוצרים באמצעות הפרוטוקול שלנו הם תאים חולים מותאמים אישית הנושאים את המוטציה של החולה.

לפיכך, תאים אלה מייצגים מודל אקס ויו משופר לחקר מחלות פודוציטים וחומרים טיפוליים פוטנציאליים בגישה אישית.