-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
הכנה איכותית של גרעיני מוח ומח עצם לבדיקות מולטיום של גרעינים בודדים
הכנה איכותית של גרעיני מוח ומח עצם לבדיקות מולטיום של גרעינים בודדים
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
High-Quality Brain and Bone Marrow Nuclei Preparation for Single Nuclei Multiome Assays

הכנה איכותית של גרעיני מוח ומח עצם לבדיקות מולטיום של גרעינים בודדים

Full Text
3,700 Views
07:59 min
December 22, 2023

DOI: 10.3791/65715-v

Carolina Moraes Cabé1, Sophie Novault1, Ana Jeemin Choi2, Valerie Seffer1, Laura Barrio Cano1, Valentina Libri1,3, Milena Hasan1

1Cytometry and Biomarkers UTechS, C2RT,Institut Pasteur, Université Paris Cité, 2Microenvironment and Immunity Unit,Institut Pasteur, Université Paris Cité, INSERM U1224, 3Istituto Superiore di Sanità

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study focuses on the optimization of nuclei isolation from brain and bone marrow tissues for downstream single-nuclei multiome assays. The importance of high-quality nuclei extraction is highlighted due to its impact on single-cell transcriptomics and multi-omics analyses.

Key Study Components

Research Area

  • Single-cell transcriptomics
  • Multi-omics
  • Nuclei isolation techniques

Background

  • The success of transcriptomics relies on the purity and quality of isolated cells/nuclei.
  • Recent advancements in flow cytometry and image-based technologies enhance cell sorting capabilities.
  • Special consideration is needed for fragile or rare cell populations, necessitating optimized protocols.

Methods Used

  • Modified nuclei preparation protocol for brain and bone marrow tissues
  • Mouse model system
  • Techniques include flow cytometry and automated cell counting

Main Results

  • Improved nuclei recovery rates with minimized stress during preparation.
  • Purity of brain nuclei increased from 36% to nearly 100% after sorting.
  • Established a reliable workflow to prepare nuclei for high-quality sequencing data.

Conclusions

  • This study demonstrates an effective protocol for isolating high-purity nuclei from specific tissues.
  • The findings have significant implications for enhancing single-cell multiomic analyses in health and disease research.

Frequently Asked Questions

What is the main goal of this study?
To optimize the protocol for nuclei isolation from brain and bone marrow tissues for improved single-nuclei multiome assays.
Why is nuclei purity important?
High nuclei purity is essential for accurate transcriptional profiling and reliable data in single-cell analyses.
What methods are used to isolate nuclei?
The study utilizes a modified nuclei preparation protocol that includes lysis buffer and flow cytometry.
What improvements were observed in nuclei recovery?
Nuclei recovery improved significantly, with brain nuclei purity rising from 36% to nearly 100% post-sorting.
Which tissues are focused on in this research?
The research specifically focuses on mouse brain and bone marrow tissues.
How does the new protocol affect sequencing data quality?
The optimized protocol aims to yield high-quality sequencing data by ensuring high viability and purity of isolated nuclei.
What are the implications of this study?
This study could significantly enhance research methodologies in the fields of genomics and single-cell biology.

ההצלחה של תעתיק חד-תאי/חד-גרעיני ומולטי-אומיקה תלויה במידה רבה באיכות התאים/גרעינים. לכן, בידוד תאים/גרעינים מרקמה וטיהורם חייבים להיות סטנדרטיים ביותר. פרוטוקול זה מתאר את הכנת הגרעינים מהמוח וממח העצם לבדיקת מולטיום-גרעינים חד-גרעיניים במורד הזרם.

היחידה לטכנולוגיות ציטומטריה וסמנים ביולוגיים תומכת בפרויקטים ביו-רפואיים באמצעות טכנולוגיות וצינורות מתקדמים לפנוטיפ תאים ופרופיל מולקולרי ברזולוציה של תא יחיד. בהקשר זה, אנו משתמשים בכלים שונים לניתוח מולטיומי של תא בודד כדי לקבל תובנות על ביטוי גנים ובקרת גנים בבריאות ובחולי. ציטומטריית זרימה מזהה ומקור תאים בודדים בהתבסס על מאפיין ייחודי.

ההתקדמות האחרונה כוללת ממיינים ספקטרליים מבוססי תמונה בעלי תפוקה גבוהה, וטכנולוגיות אלה מציעות גמישות בעיצוב פאנלים, מאפשרות שימוש סימולטני בצבעים דומים וניהול אוטופלואורסצנטיות. אתגר ניסיוני מרכזי בשימוש בטכנולוגיות חד-תאיות חדשניות הוא עבודה עם אוכלוסיות תאים שבריריות או נדירות במיוחד. כל רקמה או סוג תא צריכים לעבור אופטימיזציה של פרוטוקולים מכווננים היטב כדי להשיג מספיק תאים בני קיימא המתורגמים לנתוני רצף באיכות גבוהה.

פרוטוקול הכנת הגרעינים הבודדים המותאם שלנו משפר את התאוששות הגרעינים וממזער את הלחץ על הגרעינים. הוא מותאם במיוחד לרקמות המוח ומח העצם ומכסה את כל השלבים מדיסוציאציה של דגימות לטיהור גרעינים.

Explore More Videos

החודש ב-JoVE גיליון 202

Related Videos

בידוד גרעינים מגידולים טריים במוח קפוא ל-RNA-seq חד-גרעיני ו-ATAC-seq

06:22

בידוד גרעינים מגידולים טריים במוח קפוא ל-RNA-seq חד-גרעיני ו-ATAC-seq

Related Videos

13.6K Views

פרוטוקול פשוט, מהיר ואוטומטי חלקית לבידוד גרעינים בודדים מרקמות יונקים קפואים לצורך ריצוף גרעין יחיד

07:12

פרוטוקול פשוט, מהיר ואוטומטי חלקית לבידוד גרעינים בודדים מרקמות יונקים קפואים לצורך ריצוף גרעין יחיד

Related Videos

5.2K Views

בידוד גרעינים אופטימלי מדגימות גידול מוצק טרי וקפוא לריצוף מולטיומי

03:49

בידוד גרעינים אופטימלי מדגימות גידול מוצק טרי וקפוא לריצוף מולטיומי

Related Videos

1.9K Views

גרעינים בידוד עצבי שלאחר המוות של רקמת מוח האדם

10:58

גרעינים בידוד עצבי שלאחר המוות של רקמת מוח האדם

Related Videos

22.6K Views

הכנת ראשי בתרביות תאים hematopoietic ממח העצם Murine עבור electroporation

08:15

הכנת ראשי בתרביות תאים hematopoietic ממח העצם Murine עבור electroporation

Related Videos

26.6K Views

ביות של תאים hematopoietic אל מח העצם

10:40

ביות של תאים hematopoietic אל מח העצם

Related Videos

30.1K Views

קבלת RNA איכות גבוהה מאוכלוסיות תא בודד בתוך רקמות המוח האנושי שלאחר המוות

18:17

קבלת RNA איכות גבוהה מאוכלוסיות תא בודד בתוך רקמות המוח האנושי שלאחר המוות

Related Videos

31.1K Views

בידוד מבוסס זיקה של תייג גרעינים מ דרוזופילה רקמות לניתוח ביטוי גנים

12:48

בידוד מבוסס זיקה של תייג גרעינים מ דרוזופילה רקמות לניתוח ביטוי גנים

Related Videos

15.4K Views

גזירה האוסטאוקלסטים מעכבר מח עצם

06:17

גזירה האוסטאוקלסטים מעכבר מח עצם

Related Videos

25K Views

ניצול הדמיה בשידור חי על המסלול גרעינים במהלך התמיינות Myoblast, פיוז'ן

09:03

ניצול הדמיה בשידור חי על המסלול גרעינים במהלך התמיינות Myoblast, פיוז'ן

Related Videos

8.7K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code