זילוח כירורגי ובידוד הלבלב החזירי לבידוד האי
7 ביוני 2024
פרוטוקול זה מספק מדריך שלב אחר שלב לרכישת לבלב חזירי לבידוד וטיהור איונים.
המעבדה שלנו מתמקדת במיקרואנקפסולציה להשתלת איון הלבלב. זה דורש בידוד וטיהור איים אמינים. אנו מתמודדים עם אתגר זה על ידי בידוד הלבלב מבלי לפגוע בו מאיסכמיה חמה או פגיעה מכנית.
וזה מציע אסטרטגיות לעיכול יעיל ותשואת אי גבוהה. בידוד איי הלבלב מאתגר מאוד. הן היבול והן הטוהר תלויים בכך שכל שלב בתהליך יבוצע ביעילות וביעילות, החל מרכישת איברים ועיכול ועד לטיהור האיונים.
יתר על כן, שיקולים אתיים והומניים חשובים בעת תכנון הליכים בבעלי חיים שיאפשרו תוצאות מיטביות תוך הפחתת סבלם של בעלי חיים. אז כאן אנו מראים כי אנו יכולים מלעורי cannulate אבי העורקים כדי לחורר באופן סלקטיבי את הלבלב. טכניקה זו מאפשרת לנו לשמר ביעילות את הלבלב ולאחר מכן לבודד את האיים.
אז יתרון גדול של הפרוטוקול שלנו הוא השימוש בטכניקת סלדינגר לקנולציה של אבי העורקים. זה עוזר לשמור על שדה אופרטיבי ללא דם ומשמר את מטוסי הנתיחה. טכניקה זו יכולה גם להיות מותאמת בקלות עבור חזירים קטנים פשוט על ידי שימוש נדן קטן יותר.
המעבדה שלנו חוקרת כיום שיטות ליצירת היצע לפי דרישה של איי לבלב. באופן ספציפי, אנו מעוניינים לראות אם עטיפת איים בהידרוג'ל יכולה להאריך את תוחלת החיים שלהם ולשפר את תפקודם במבחנה ובתרבית. המטרה הסופית היא לבודד באופן אמין איים חזיריים כדי להשתמש בהם במחקר השתלות, או אפילו להשתלת קסנו.
סקירה כללית
פרוטוקול זה מספק מדריך שלב אחר שלב להשגת לבלב חזיר לצורך בידוד וניקוי של איים לבלביים. המעבדה שלנו מתמקדת במיקרו-כמוסה עבור טרנסיפלנטציה קסנוגנאית של איים לבלביים, תוך דגש על החשיבות של בידוד וניקוי אמינים של האיים.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום המדע
- מדעי המוח
- ביולוגיה של השתלה
- טכניקות לבידוד איים
רקע
- בידוד של איי לבלב הוא מאתגר בשל הסיכון לנזק כתוצאה מאיסכמיה חמה או מפגיעה מכנית.
- התנובה והטוהר של האיים תלויים ביעילותם של כל אחד משלבי תהליך הבידוד.
- אסטרטגיות לעיכול יעיל הן קריטיות להשגת תנובת איים גבוהה.
- הבנת תהליך ההשגה חיונית להצלחת השתלת איי לבלב.
מטרת המחקר
- מתן שיטה מהימנה להשגת לבלב חזיר לצורך בידוד איים.
- שיפור התפוקה והטוהר של האיים המבודדים.
- פיתוח אסטרטגיות למזעור הנזקים במהלך תהליך הבידוד.
שיטות שנעמדו בהן
- פרוטוקול רכש שלב-אחר-שלב עבור לבלב חזיר.
- טכניקות למניעת איסכמיה חמה ופגיעה מכנית.
- שיטות עיכול יעילות לבידוד איים.
- תהליכי טיהור לשיפור איכות האיים.
תוצאות עיקריות
- בידוד מוצלח של איים לבלט עם נזק מינימלי.
- השגת תנובה וטוהר גבוהים של איים באמצעות שיטות מותאמות.
- אסטרטגיות מוכחות לעיכול וטיהור יעילים.
מסקנות
- הפרוטוקול מספק גישה אמינה להשגת איים.
- צמצום הנזקים במהלך הבידוד הוא קריטי לחיוניות האיים.
- שיטות יעילות יכולות לשפר משמעותית את תנובת האיים ואת איכותם.
שאלות נפוצות
רלוונטיות תעשייתית למנהלים
השגה ושימור מהימנים של לבלבים חזירים הם קריטיים ליצירת איים באיכות גבוהה לתמיכה במחקר קסנו-טרנספלנטציה ובאספקה ניתנת להרחבה של איים. מזעור של איסכמיה חמה ופגיעה מכנית במהלך בידוד האיברים משפיע ישירות על חיוניות האיים, על הנבחרות ועל הפוטנציאל התרגומי בהמשך. פרוטוקול זה נותן מענה לצוואר בקבוק מרכזי בנתיב הפרה-קליני לחדשנות והרחבת פורטפוליו של טיפולים תאיים לסוכרת.
יישומים אסטרטגיים במו"פ בביופארמה
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- מאפשר בחינה מעמיקה של ביולוגיית האיים באספקט של מערכת מבוקרת ו可שחזרת.
- תומך בתיקוף תפקודי של איים חזירים עבור מחקרי היתכנות להשתלה זנוגנטית (xenotransplantation).
- מסייע בהפחתת סיכונים מנגנוניים על ידי שמירה על שלמות האיים עבור בדיקות המשך.
סריקה ופיתוח בדיקות
- מספק איים בעלי חיוניות גבוהה ובסטנדרט אחיד לצורך פיתוח בדיקות וסריקת תרכובות.
- משפר את השחזוריות ואת ההערכה הכמותית של תפקוד וחיוניות האיים.
- מאפשר הכנה בקנה מידה משתנה של חומר ביולוגי עבור תהליכי עבודה ניסיוניים חוזרים.
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- תואם למודלים רלוונטיים למחלות לצורך מחקר על סוכרת וטיפול תאי.
- מבטיח המשכיות משלב השגת האי-ריס (islet) ועד למחקרי השתלה פרה-קליניים.
- מפחית שונות ביולוגית, ובכך תומך בהחלטות קידום מותאמות סיכון.
שילוב תהליכי עבודה וצנרת עיבוד
פרוטוקול הפרפוזיה הכירורגית והבידוד זה מציב את השגת איים של חזירים בממשק שבין גילוי מוקדם לפיתוח מודלים פרה-קליניים למחקר סוכרת.
- ביולוגיה של גילוי: תומך בבדיקת היפותזות על חיות ותפקוד של איים לבלב תחת תנאי השגה מבוקרים.
- סריקה: מספק איים לבלב איכותיים ובעלי הדירות גבוהה עבור בדיקות תפקודיות והערכת תרכובות.
- אנליטיקה: מאפשר מדידה כמותית של תנובת האיים, טהרותם וחיוניותם לצורך השוואה בין תנאים שונים.
- מחקר תרגומי: מספק בסיס למחקרי קסנו-טרנספלנטציה (השתלה מזן אחר) וכמיסה פרה-קליניים.
- שימוש חוזר בארגון: קובע פרוטוקול סטנדרטי הניתן להתאמה בין צוותי מחקר ומערכות מודל שונות.
השפעה תפעולית וארגונית
- ערך מדעי: מגביר את הביטחון החזוי במודלים תרגומיים מבוססי איים ובתיקוף של מטרות.
- ערך תפעולי: משפר את הסטנדרטיזציה, השחזוריות והסקלאביליות של תהליכי השגת איים.
- ערך אסטרטגי: משפר את איכות קבלת ההחלטות לגבי המשך או הפסקת פיתוח (go/no-go) ומפחית סיכונים ביולוגיים בשלבים מאוחרים בקווי פיתוח של תרפיה תאית.
- השפעה על הפורטפוליו: מאפשר תיעדוף מותאם-סיכון של תוכניות לסוכרת ולהשתלה קסנוגנית.
שיקולי יישום
- דורש מומחיות כירורגית בקנולציה של כלי דם ובניתוח איברים.
- מחייב גישה לציוד פרפוזיה, לתא ריקורדי (Ricordi chamber) ולתשתית לעיבוד תאים.
- מצריך סטנדרטיזציה בין צוותים כדי להבטיח תוצאות הניתנות לשחזור בבידוד איים.
- ניתן להתאמה לגדלי חזירים שונים באמצעות בחירת נדן והתאמות פרוצדורליות.
- מזעור זמן איסכמיה חמה הוא קריטי להשגת תנובה וחיוניות מיטביות של האיים.
