Name: מכרסם נחות Vena Cava Venoplasty בלון מודל (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-24T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 44 s
Description: חקור מודל שרידות מכרסם לטיפולי בלון ונופלסטי בורידי עומק, כולל תרחישים לא-טרומבוטיים וטרומבוטיים. השיטה מאפשרת הערכת יעילות טיפולית ותגובת מערכת החיסון בטרומבוזה ורידית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך על ידי מענק המחקר American Venous Forum (AVF) 2023 ו-Surmodics, Inc.

הפרוטוקול הבא עוקב אחר המדיניות וההנחיות של הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת מישיגן (UMICH), עקרונות ממשלת ארה"ב לשימוש וטיפול בבעלי חוליות המשמשים בניסויים, מחקר והכשרה, והנחיות ARRIVE 2.0. הסכם הבטחת רווחת בעלי החיים של UMICH תואם ל- OLAW ול- USDA ומוכר באופן מלא על ידי AAALAC International. פרוטוקול זה אושר עם מספר תעודת זהות PRO00010841. נעשה שימוש בחולדות ספראג דולי זכרים ממעבדות נהר צ'ארלס, במשקל 450 גרם ובגיל 15 שבועות.
1. הרדמת חולדות
<ol><li>הוציאו בעלי חיים מהכלוב שלהם והכניסו אותם לתא גזים אינדוקציה לפני הניתוח ב-5% איזופלורן ו-100% חמצן בקצב זרימה של 0.8 עד 1 ליטר/דקה (מבוקר וופורייזר) כדי לגרום להרדמה כללית.</li>
	<li>מרדימים חולדות בתא ההרדמה, מוציאים אותן מהחדר, שוקלות, משמנים את עיניהן במשחה אופתלמית סטרילית, ואז מניחים אותן בשכיבה גבית על מכשיר חימום במחזור מים חמים. ודא עומק הרדמה מספיק באמצעות רפלקס הדוושה (צביטת בוהן מוצקה).</li>
	<li>לגלח את הבטן הגחון עם קוצץ חשמלי. יש לשמור על הרדמה כללית ב-2.5% איזופלורן ו-100% חמצן ב-0.8 עד 1 ליטר/דקה עם מעגל חשמלי ללא נשימה דרך חרוט האף.</li>
</ol>2. סריקת אולטרסאונד חולדות
<ol><li>עקוב אחר הערכות פיזיולוגיות, כולל קצב נשימה, קצב לב וטמפרטורה, במהלך ההדמיה.</li>
	<li>להדמיית בטן של הווריד הוורידי התחתון (IVC), יש למרוח ג'ל מוליך ולכוון את המתמר במצב רוחבי. בעת הגדרה מראש של כלי הדם ההיקפיים, השתמש במצב הדמיה דו מימדי או במצב B, להוריד את הבדיקה ליניארית (10 MHz) על מרכז הבטן, התאמת עומק עם לחץ עד כלי הבטן לבוא לידי ביטוי.</li>
	<li>הבדיל בין IVC לאבי העורקים הבטני על ידי הערכת דחיסות ועל ידי הערכת זרימה הן באמצעות צבע והן באמצעות מצב דופלר גל פועם עם בדיקה ליניארית בתדר גבוה (10 MHz).<ol><li>בעת הפעלת דחיסה עם בדיקת אולטרסאונד, להבדיל בין השניים כמו IVC הוא דחיסה, בעוד אבי העורקים שומר על צורתו ופטנטיות.</li>
	</ol></li>
	<li>הערך את הכיוון והמהירות של זרימת הדם באמצעות דופלר צבע וגל פולסים. חלון דופלר בצבע מייצג את הזרימה לכיוון הגשושית באדום וזורם הרחק מהגשושית בכחול. העבר את המכשיר למצב דופלר גל דופק (מצב דופלקס) כדי להעריך את כיוון זרימת הדם ומהירותה לאורך זמן. קבל תמונות זרימה נחוצות באמצעות כלי לכידת התמונה האוטומטי של מכשיר האולטרסאונד (המפרטים המדויקים לרכישת תמונה עשויים להשתנות בין מערכות אולטרסאונד).<ol><li>השתמש בשיטת ההערכה הבאה: לאבי העורקים יש זרימת דם לכיוון הגשושית וצורת גל טריפאזית, ואילו ל- IVC יש זרימה ספונטנית הרחק מהגשושית עם משרעת נמוכה בהרבה.</li>
		<li>אם ה- IVC הפרוקסימלי מציג צורת גל נורמלית, אך צורת גל לא פאזית או נעדרת (שטוחה) מזוהה באופן דיסטלי, בדוק את האפשרות של חסימה ורידית בין נקודות בדיקה אלה.</li>
	</ol></li>
	<li>לאחר איתור ה- IVC, זהה את החלק האמצעי, שנמצא בחלק השלישי האמצעי, נחות מוורידי הכליה ועדיף על התפצלות IVC, ככל הנראה היכן נמצאים הורידים המותניים.</li>
	<li>מדדו בחתך האמצע IVC את הקוטר מקיר לקיר במבט הרוחבי באמצעות תמונת חתך B במצב רישום, תוך רישום הקוטר הרחב ביותר של כלי השיט. רכישת הדמיה עשויה להשתנות במכשירי אולטרסאונד שונים. אחסן נתונים באמצעות דיסקים קומפקטיים (תקליטורים) בקובצי DICOM.</li>
</ol>3. מיקרו-כירורגיה של חולדות והתאוששות
<ol><li>נקו את הבטן עם פילינג כלורהקסידין ספוג גזה ותמיסת כלורהקסידין 3x כדי להבטיח מצב כירורגי אספטי.</li>
	<li>הניחו סרט נצמד מעוקר כעטיפה כירורגית לכיסוי בית החזה ואזור הבטן של החולדה, ידיות מיקרוסקופ (הגדלה ומיקוד) ועינית.</li>
	<li>בצע חתך קו אמצע גחוני (3 ס"מ) כ 2 ס"מ מתחת לתהליך xiphoid עם מספריים קשתית דרך העור ואת דופן הבטן, לחשוף את התוכן הבטן. השתמש בגזה סטרילית ספוגה במי מלח בגודל 2 אינץ 'x 2 אינץ 'כדי לשקף את המעיים לצד ימין של החיה.</li>
	<li>לחשיפת IVC יש לבצע דיסקציה קהה באמצעות מוליך סטרילי מכותנה. הניחו ספקולום תיל בחתך, המאפשר הדמיה IVC.</li>
	<li>צרוב את כל ענפי המותניים IVC באמצעות צוואר קצה דק בטמפרטורה נמוכה, מוורידי הכליה ועד הביפורקציה האיליאקית, ולקשור ענפים צדדיים עם 7-0 תפרים פוליפרופילן שאינם נספגים.</li>
	<li>מניחים מיקרוקליפ כלי דם מעוקל פרוקסימלי על IVC, המופרד מאבי העורקים ופשוט נחות מוורידי הכליה. מניחים מיקרוקליפ ישר על IVC דיסטלי, אשר מופרד מאבי העורקים ועדיף על ביפורקציה IVC.</li>
	<li>מקום 8-0 תפר ניילון U תפר קאודלי לווריד הכליה השמאלי במרכז המשטח הקדמי של ה- IVC.</li>
	<li>הכנס חוט מנחה מושחז בקוטר 0.014 מ"מ כאשר בלון הווריד טעון לאחור, מדרדר לזרימת הדם לתוך IVC אינפרא כלייתי, קאודלי למיקרוקליפ המעוקל.</li>
	<li>מקדמים את הבלון לאמצע IVC בטכניקת סלינגר. הסר את חוט ההנחיה המושחז וניפח את בלון הווריד למשך 3 דקות עם מתיחת יתר IVC של 10% עד 15% באמצעות מזרק ניפוח של 20 מ"ל ליצירת לחץ חיובי בטווח של 0-30 אטמ. שטוף את כל המערכות במי מלח סטריליים לפני קנולציית IVC כדי למנוע תסחיף אוויר. הערה: IVC בקוטר 2.8 מ"מ יעבור מתן ארס עד 3.22 מ"מ (מתיחת יתר של 15%). לחץ הניפוח הנדרש כדי להגיע למתיחת היתר הרצויה נקבע על פי מאפייני הבלון וזמין על אריזת היצרן.</li>
	<li>הדקו את תפר ה-U בעת ניפוח והסרת בלון הווריד. הסר את המיקרוקליפים.</li>
	<li>סגור את אתר הלפרטומיה בצורה דו שכבתית. השתמש בתפר סינתטי 5-0 פוליגלקטין נספג בתבנית רציפה כדי לסגור הן את דופן הבטן והן את העור.</li>
	<li>מתן תרחיף הזרקה בופרנורפין בשחרור מורחב, 0.65 מ"ג / ק"ג תת עורית (SC) לאחר הניתוח כמשכך כאבים לחולדות מכיוון שהוא אינו מפריע ללוחות הסמנים הביולוגיים של מולקולות דלקתיות לניתוח חלבונים.</li>
	<li>לשחזר חולדות בכלוב בודד, לצפות לאחר הניתוח (30 דקות) תחת מנורת חימום (מרחק מינימלי - 24 אינץ 'מהכלוב), ולאחר מכן לחזור ליחידות הדיור המקוריות שלהם.</li>
	<li>עבור חיות דמה מכל קבוצת ניסוי, יש לבצע רק את הדיסקציה, ללא קשירת ענפי IVC, צריבה וקנולציה.</li>
	<li>עבור תנאים פוסט-טרומבוטיים, מניחים מיקרוקליפ כלי דם ישר פרוקסימלי על IVC, המופרד מאבי העורקים, רק נחות מוורידי הכליה, למשך 24 שעות. השתמש באותן טכניקות דיסקציה וסגירה.<ol><li>בדוק את סימני האולטרסאונד של חסימת IVC, הכוללים הדמיה של קליפ IVC, אישור של IVC דיסטלי ללא זרימה, ורידים iliac משותף נפוח. ניתן להתאים אישית את נקודות הזמן למעקב כך שיתאימו לדרישות המחקר.</li>
		<li>כדי לבחון את השינויים הפיזיולוגיים המודלים, בחר נקודות זמן ב -72 השעות הראשונות להיווצרות תרומבי מוקדמת ומ- 3 עד 7 ימים לאחר הפרוצדורל לפתרון טרומבי מאוחר יותר. נקודות זמן מאוחרות יותר שנבדקו במודל זה כוללות 7 עד 28 ימים 5,13.</li>
	</ol></li>
	<li>השתמש בטכניקות בשלבים 3.5-3.9 עבור ארס בלון פוסט-טרומבוטי עם האזהרות הבאות: לחץ אינסופלטור גבוה יותר עשוי להידרש כדי להשיג את מתיחת היתר הרצויה מכיוון שקוטר IVC גדל בתנאים פוסט-טרומבוטיים.</li>
	<li>לבצע המתת חסד על פי ההמלצות שנקבעו על ידי ההנחיות הנוכחיות של האגודה הרפואית הווטרינרית האמריקאית על המתת חסד עבור מכרסמים על ידי ביצוע שתי שיטות אישור (הסרת דם והסרת איברים חיוניים) כדי להבטיח את בעל החיים לא להחיות.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig01.jpg"> איור 1: התפלגות מדידות דופלקס טרנס-בטני בקוטר IVC רוחבי (חתך אינפרא-כלייתי אמצעי). המדידה נעשתה לפי משקל בעלי חיים. לא נמצא קשר מובהק בין המשקל לקוטר IVC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
4. הכנת מדגם
<ol><li>בצע העברת רקמות מאשרת של בלוני וריד מצופים בתרופות באמצעות טכניקת בדיקת כרומטוגרפיה נוזלית (HPLC) בעלת ביצועים גבוהים.</li>
	<li>מנתחים את IVC ואבי העורקים ומסירים את en bloc לצורך הטמעת פרפין קבוע פורמלין וניתוח היסטולוגי.</li>
	<li>לניתוח חלבונים, יש להשתמש במאגר RIPA בריכוז מדלל של 60,000 מיקרוגרם/גרם דגימה, לעבד עם הומוגנייזר רקמה בתנאי חדר בטמפרטורה נמוכה ב-4°C, ולאחסן בטמפרטורה של -80°C לאחר העיבוד.</li>
</ol>

מודל בלון ורידי מכרסמים למחקרים לטיפול בורידים עמוקים

<ol><li>Prandoni, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+long-term+clinical+course+of+acute+deep+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Inter+Med%22%5BJournal%5D)">The long-term clinical course of acute deep venous thrombosis.</a> Ann Inter Med. 125 (1), 1-7 (1996).</li>
<li>Prandoni, P., Kahn, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-thrombotic+syndrome%3A+prevalence%2C+prognostication+and+need+for+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Haematol%22%5BJournal%5D)">Post-thrombotic syndrome: prevalence, prognostication and need for progress.</a> Br J Haematol. 145 (3), 286-295 (2009).</li>
<li>Gloviczki, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+2023+Society+for+Vascular+Surgery%2C+American+Venous+Forum%2C+and+American+Vein+and+Lymphatic+Society+clinical+practice+guidelines+for+the+management+of+varicose+veins+of+the+lower+extremities.+Part+II%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vas+Surg+Venous+Lymph+Diso%22%5BJournal%5D)">The 2023 Society for Vascular Surgery, American Venous Forum, and American Vein and Lymphatic Society clinical practice guidelines for the management of varicose veins of the lower extremities. Part II.</a> J Vas Surg Venous Lymph Diso. 12 (1), 101670(2024).</li>
<li>Henke, P., Sharma, S., Wakefield, T., Myers, D., Obi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+from+experimental+post-thrombotic+syndrome+and+potential+for+novel+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Res%22%5BJournal%5D)">Insights from experimental post-thrombotic syndrome and potential for novel therapies.</a> Transl Res. 225, 95-104 (2020).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choosing+a+mouse+model+of+venous+thrombosis%3A+A+consensus+assessment+of+utility+and+application%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscl+Thrombo+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Choosing a mouse model of venous thrombosis: A consensus assessment of utility and application.</a> Arterioscl Thrombo Vasc Biol. 39 (3), 311-318 (2019).</li>
<li>Lee, Y. U., Lee, A. Y., Humphrey, J. D., Rausch, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+and+biomechanical+changes+in+a+mouse+model+of+venous+thrombus+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Biorheology%22%5BJournal%5D)">Histological and biomechanical changes in a mouse model of venous thrombus remodeling.</a> Biorheology. 52 (3), 235-245 (2015).</li>
<li>Xie, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correspondence+of+ultrasound+elasticity+imaging+to+direct+mechanical+measurement+in+aging+DVT+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Correspondence of ultrasound elasticity imaging to direct mechanical measurement in aging DVT in rats.</a> Ultrasound Med Biol. 31 (10), 1351-1359 (2005).</li>
<li>Moini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venoplasty+and+stenting+in+post-thrombotic+syndrome+and+non-thrombotic+iliac+vein+lesion%5BTitle%5D)+AND+%22Minim+Invasive+Ther+Allied+Technol%22%5BJournal%5D)">Venoplasty and stenting in post-thrombotic syndrome and non-thrombotic iliac vein lesion.</a> Minim Invasive Ther Allied Technol. 29 (1), 35-41 (2020).</li>
<li>Chaitidis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+post-thrombotic+syndrome%3A+A+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Pharma+Des%22%5BJournal%5D)">Management of post-thrombotic syndrome: A comprehensive review.</a> Curr Pharma Des. 28 (7), 550-559 (2022).</li>
<li>Dangas, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-stent+restenosis+in+the+drug-eluting+stent+era%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">In-stent restenosis in the drug-eluting stent era.</a> J Am Coll Cardiol. 56 (23), 1897-1907 (2010).</li>
<li>Neglén, P., Berry, M. A., Raju, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endovascular+surgery+in+the+treatment+of+chronic+primary+and+post-thrombotic+iliac+vein+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Euro+J+Vas+Endovas+Surg%22%5BJournal%5D)">Endovascular surgery in the treatment of chronic primary and post-thrombotic iliac vein obstruction.</a> Euro J Vas Endovas Surg. 20 (6), 560-571 (2000).</li>
<li>Sharifi, M., Mehdipour, M., Bay, C., Smith, G., Sharifi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endovenous+therapy+for+deep+venous+thrombosis%3A+The+TORPEDO+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Catheter+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Endovenous therapy for deep venous thrombosis: The TORPEDO trial.</a> Catheter Cardiovasc Interv. 76 (3), 316-325 (2010).</li>
<li>Nicklas, J. M., Gordon, A. E., Henke, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolution+of+deep+venous+thrombosis%3A+Proposed+immune+paradigms%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Resolution of deep venous thrombosis: Proposed immune paradigms.</a> Int J Mol Sci. 21 (6), 2080(2020).</li>
<li>Li, J., Kim, S. G., Blenis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin%3A+One+drug%2C+many+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabol%22%5BJournal%5D)">Rapamycin: One drug, many effects.</a> Cell Metabol. 19 (3), 373-379 (2014).</li>
<li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin+regulates+Akt+and+ERK+phosphorylation+through+mTORC1+and+mTORC2+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Carcinogen%22%5BJournal%5D)">Rapamycin regulates Akt and ERK phosphorylation through mTORC1 and mTORC2 signaling pathways.</a> Mol Carcinogen. 49 (6), 603-610 (2010).</li>
<li>Diaz, J. A., Farris, D. M., Wrobleski, S. K., Myers, D. D., Wakefield, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inferior+vena+cava+branch+variations+in+C57BL%2F6+mice+have+an+impact+on+thrombus+size+in+an+IVC+ligation+%28stasis%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemo%22%5BJournal%5D)">Inferior vena cava branch variations in C57BL/6 mice have an impact on thrombus size in an IVC ligation (stasis) model.</a> J Thromb Haemo. 13 (4), 660-664 (2015).</li>
<li>Schönfelder, T., Jäckel, S., Wenzel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+deep+vein+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Gef%C3%A4sschirurgie%22%5BJournal%5D)">Mouse models of deep vein thrombosis.</a> Gefässchirurgie. 22 (1), 28-33 (2017).</li>
<li>de Barros, R. S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphometric+analysis+of+rat+femoral+vessels+under+a+video+magnification+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Bras%22%5BJournal%5D)">Morphometric analysis of rat femoral vessels under a video magnification system.</a> J Vasc Bras. 16 (1), 73-76 (2017).</li>
</ol>

לא הוכרז על ניגוד עניינים.

VBM יכול להתבצע על חולדות ≥ 250 גרם באמצעות בלונים בטווח 2.5-3.5 מ"מ. עבור חולדות העולות על 750 גרם, הטכניקה מוגבלת על ידי כמות גבוהה יותר של רקמת שומן בחלל הבטן וגודל האיבר ולא על ידי שינויים בקוטר IVC. מניסיוננו, מצאנו כי נדרשים 10 בעלי חיים או יותר בכל קבוצה כדי לקבל מובהקות סטטיסטית בין הקבוצות לצורך ניתוח חלבון דופן הווריד או בדיקות פעילות והיסטולוגיה. בקרת טמפרטורה תקופתית ומעקב אחר קצב הנשימה במהלך התערבויות כירורגיות חשובים ביותר כדי להבטיח את הצלחת ההליך, כמו גם ניהול חרוץ לאחר הניתוח.
VBM בטוח (שיעור הישרדות של 91.2%, 83/91 הליכים שבוצעו) וניתן לשחזור עם זמן הליך ממוצע של 30 דקות. התחלואה הקשורה לפרוצדורה כוללת סיבוכי הרדמה (1%, 1/91), תופעות לוואי אופיואידים (1%, 1/91), דימום (2.1%, 2/91) ופקקת (4.3%, 4/91). דימום IVC הופחת משמעותית במהלך פיתוח המודל על ידי שימוש בגישת קנולציית IVC מדרדרית עם נקודת ההחדרה ליד IVC אינפרא כלייתי, המציעה זווית רחבה יותר להחדרת חוטים עם פחות הפרעות על ידי איברי הבטן. כמו כן, בשלבי ההחדרה והאינספלציה, אנו ממליצים על עוזר כירורגי כדי להבטיח את הלחץ המנוהל הנכון, זמן ניפוח ונסיגה מחודדת של חוט הנחיה. בעת דפלציה יש לוודא שליפה נכונה של בלון הווריד כדי למנוע קריעה של דופן ה-IVC בנקודת ההחדרה. מדידות לחץ מבוצעות על ידי היצרן כדי למנוע היפר-ניפוח בלון וקרע. מדידות אלה תורמות בסך הכל לגישה יציבה יותר, מפחיתות סיבוכי דימום ומשפרות את הישרדות בעלי החיים.
דימום IVC ניתן גם להקל על ידי אמצעי הזהירות הבאים. ראשית, לוודא את הצריבה המלאה של ענפים אחוריים וקשירת ענפים צדדיים. זה גם מבטיח את השחזור של הממצאים בהתבסס על ניתוח קשירת IVC קודם מכרסם 5,16,17. שנית, ודא את החסימה הנכונה עם הקליפסים הפרוקסימליים והדיסטליים כדי להבטיח שליטה המוסטטית מלאה. לבסוף, יש לוודא את החסימה המלאה של תפר ה-U בעת הסרת הבלון לפני הסרת תפסי ה-IVC. אם קיים דימום, לחץ עדין על ה- IVC עם מוליך צמר גפן עד להשגת שליטה המוסטטית בדרך כלל יעצור את הדימום. ניתן להשתמש בחומרי בקרה המוסטטיים נוספים, כגון אבקת ג'לטין נספגת, במקרה של דימום.
סיבוכים טרומבוטיים צריכים להיות מינימליים אם ניפוח הבלון, דפלציה וזמן סגירת תפר U הוא פחות מ -5 דקות. ניתן לתת נוגדי קרישה במידת הצורך. נכון להיום, אין הליך מלעורי לחלוטין המחקה את ארסי הבלון הזעיר פולשניים המבוצעים כיום בבני אדם. גודלו של כלי הגישה (וריד הירך של חולדה) קטן משמעותית (0.81 מ"מ בממוצע)18 מהקוטר החיצוני של נדן 4F הקטן ביותר הזמין מסחרית (1.61 מ"מ) שיידרש להליך אנדוסקולרי לחלוטין. המגבלות כוללות את הצורך במיקרוכירורגים מיומנים ואת הצורך בציוד מיוחד.
לסיכום, מודל VBM מדמה באופן הדוק את התרחיש הקליני של ארס ורידי עמוק בעקבות DVT. זהו כלי רב ערך לחקר ההשפעה האנדו-וסקולרית של בלוני ורידי על IVC עם חלופות תרופתיות שונות בנקודות זמן מרובות. יישומים עתידיים לטכניקה זו כוללים בדיקות פרה-קליניות של מכשירים רפואיים אחרים, כולל סטנטים, צנתרי טרומבקטומיה, ציפויי בלון וטיפולים פרמקולוגיים חדשניים.

חסימות ורידים עמוקים כתוצאה מפקקת ורידים לא פתורה הן תוצאה נפוצה של פקקת ורידים עמוקים (DVT) והן אחד הגורמים לתסמונת פוסט-טרומבוטית (PTS), שעלותה מיליארדי דולרים בתחום הבריאות ומשפיעה באופן משמעותי על איכות החיים 1,2,3. PTS היא פתולוגיה דלקתית ייחודית עם פיברוזיס4 בדופן הווריד שלא נלכדה במלואה במודלים 5,6,7 של בעלי חיים קטנים, וחשוב מכך, מודלים קודמים אינם יכולים להעריך את התגובה להתערבויות טיפוליות. חסימות ורידים טרומבוטיות מטופלות לעתים קרובות על ידי stenting ו venoplastyבלון 8,9; התערבויות כאלה נפגעות על ידי שיעור התערבות חוזרת גבוה עקב רסטנוזיס וחסימה 10,11,12.
למרות זמינותם של בלונים מצופים תרופות לטיפול בהיצרות / חסימות ספציפיות לעורקים, אף אחד מהם לא קיים עבור ורידים עמוקים. המנגנון המולקולרי מאחורי רסטנוזיס אינו מובן היטב בוורידים ואין לו טיפול ישיר4. לכן, המטרה שלנו היא להציג מודל של בעלי חיים שיכול לבחון טיפולים מקומיים באמצעות בלוני ורידים המדמים חסימות פוסט-טרומבוטיות של ורידים עמוקים. מודל זה משחזר את המצב הפוסט-טרומבוטי ומעריך כיצד סוגים שונים של בלוני ארס משפיעים על דופן הווריד in vivo.

<table><tbody><tr><td>3-0 DemeCRYL</td><td>DemeTech</td><td>G183019F4P</td><td>12 לקופסה</td></tr><tr><td>5-0 DemeCRYL</td><td>DemeTech</td><td>G285017B0P</td><td>12 לקופסה</td></tr><tr><td>7-0 DemeLENE</td><td>DemeTech</td><td>PM197011F13M</td><td>12 לקופסה</td></tr><tr><td>8-0 DemeLON</td><td>DemeTech</td><td>NL868007C7P</td><td>12 לקופסה</td></tr><tr><td>Angled Clip Applier</td><td>SCANLAN</td><td>3795-01A</td><td>7-1/4&Prime; (18.5 ס"מ)</td></tr><tr><td>בקסטר 0.9% נתרן כלוריד בקבוק השקיה</td><td>בקסטר</td><td>מק"ט: 195-7124</td><td>1000 מ"ל בקבוק</td></tr><tr><td>Bovie Cautery טמפרטורה נמוכה קצה עדין</td><td>סימטריה כירורגית בע"מ</td><td>AA00</td><td>10/bx</td></tr><tr><td>בופרנורפין</td><td>פידליס בריאות בעלי חיים</td><td>מק"ט- 099114</td><td>1.3 מ"ג/מ"ל, 3 מ"ל</td></tr><tr><td>CD (Sprague Dawley) חולדות</td><td>צ'ארלס נהר</td><td>זן קוד 001</td><td>זכר, 400 גרם</td></tr><tr><td>טיימר ניתן למעקב Clip-It</td><td>מוצרים הניתנים למעקב</td><td>חתול. מס' 5046</td><td></td></tr><tr><td>מוליך קצה כותנה 3 אינץ'</td> <td>Dukal Corporation</td><td>922-00037BX100</td><td>1000/BOX</td></tr><tr><td>חומר ניקוי ו-Presoak</td><td>Medline</td><td>MDS88000B9</td><td>1 גל</td></tr><tr><td>סיכה לעיניים</td><td>Optixcare</td><td>מק"ט-065441</td><td>20 גרם&nbsp;</td></tr><tr><td>Gaymar T/Pump Stryker מערכת טיפול בחימום/קירור מקומית</td><td>Stryker</td><td>TP700</td><td></td></tr><tr><td>Heifetz Microclips 12mmx2.25mm</td><td>SCANLAN</td><td>3795-20</td><td>Straight</td></tr><tr><td>Heifetz Microclips 12mmx2.25mm</td><td>SCANLAN</td><td>3795-28</td><td></td></tr><tr><td>Curved Heifetz Microclips 8mmx1.75mm&nbsp;</td><td>SCANLAN</td><td>3795-14</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוקליפסים ישרים של חפץ 8 מ"מx1.75 מ"מ&nbsp;</td><td>SCANLAN</td><td>3795-18</td><td></td></tr><tr><td>מכשיר ניפוח מעוקל&nbsp;</td><td>Merit Medical</td><td>IN4130</td><td>BasixCOMPAK עם תצוגה אנלוגית</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>MFR VETONE</td><td>SKU-501017</td><td>100 מ"ל, נוזל לשאיפה</td></tr><tr><td>ערכת מיקרוכירורגיה המכילה פינצטה ומלקחיים</td> חמצן <td>מותאם אישית</td><td></td><td></td></tr><tr><td>, מיכל אלקטרוני</td><td>Medline</td><td>MDM1630</td><td></td></tr><tr><td>חוט מנחה מושחז</td><td>מותאם אישית</td><td></td><td></td></tr><tr><td>סטרילי שמח Press-n-Seal</td><td>Glad</td><td>SKU # PSS-140</td><td>ETO חשוף</td></tr><tr><td>סטרילי לא ארוגים ספוגי גזה 2 שניות 4 שכבות 4x4&nbsp;</td>מק"ט <td>Medline</td><td>PRM21444H</td> מיקרוסקופ כירורגי <td>100Ct</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Zeiss</td><td>S100 / OPMI pico</td><td></td></tr><tr><td>פילינג כירורגי & שטיפת ידיים</td><td>Vetoquinol</td><td>NDC: 17030-003-16 16</td><td>oz</td></tr><tr><td>אולטרסאונד ג'ל</td><td>Medline</td><td>CTR001305</td><td>8.5 אונקיות,</td></tr><tr><td>מערכת אולטרסאונד</td> 12/CS <td>סימנס</td><td>ACUSON Antares</td><td>3-D, צבע, גל רציף (CW), גל פועם (PW), הספק CW/CW</td></tr><tr><td>בלון ורידים</td> ספקטרלי <td>מותאם אישית</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

מכרסם נחות vena cava venoplasty בלון מודל

Rodent Inferior Vena Cava Venoplasty Balloon Model

ארס בלון הוא טכניקה קלינית נפוצה לטיפול בהיצרות ורידים עמוקים וחסימה כתוצאה מטראומה, הפרעות אנטומיות מולדות, פקקת ורידים עמוקים חריפה (DVT) או סטנט. חסימה ורידית עמוקה כרונית מאופיינת היסטופתולוגית בפקקת, פיברוזיס או שניהם. נכון לעכשיו, אין טיפול ישיר זמין כדי להתמקד בתהליכים פתולוגיים אלה. לכן, יש צורך במודל אמין של בעלי חיים in vivo לבדיקת התערבויות חדשניות. מודל בלון הווריד הנחותים של הווריד הנבוב (IVC) (VBM) מאפשר לחקור את ארס הבלון בתנאים שאינם טרומבוטיים ופוסט-טרומבוטיים על פני נקודות זמן מרובות. ניתן לכמת את ההשפעה המקומית והמערכתית של בלוני וריד מצופים ולא מצופים באמצעות בדיקות רקמות, פקקת ודם כגון תגובת שרשרת פולימראז בזמן אמת (RT-PCR), כתם מערבי, בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזימים (ELISA), זימוגרפיה, אנליזה תאית של דופן ורידים ופקקת, בדיקות דם ופלזמה שלמות וניתוח היסטולוגי. ה-VBM ניתן לשחזור, משכפל התערבויות כירורגיות בבני אדם, יכול לזהות שינויים מקומיים בחלבון תרומבי בדופן הוורידים, ומאפשר ניתוחים מרובים מאותה דגימה, מה שמקטין את מספר בעלי החיים הנדרשים לכל קבוצה.

VBM הוא מודל המעריך את ההשפעה של בלוני venoplasty בשליטה מלאה hemostasis. ראשית, כימתנו את קוטר ה-IVC (חתך אינפרא-כלייתי אמצעי), כפי שמוצג באיור 1, עבור גודל נכון של הבלון. שנית, הטכניקה המיקרוכירורגית שפותחה שלב אחר שלב מודגמת באיור 2, ואנו גם מראים דוגמאות לשלבים הקריטיים באיור 3. שימו לב לגישה הנסוגה המשמשת לקנולציית IVC עם חוט ההנחיה המושחז.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig02.jpg"> איור 2: טכניקה מיקרוכירורגית לבדיקת בלוני ארס בחולדות. הטכניקה בה נעשה שימוש מתוארת כאן. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig03.jpg"> איור 3: תמונות In vivo של טכניקת הפריסה. (A) בקרה המוסטטית. (B) תפר פרסה על IVC אינפרא כלייתי. (C) החדרת חוט דרך תפר U עם בלון מצופה סירולימוס 3 מ"מ. (D) פריסת ארס בלון (מצופה סירולימוס). קיצורים: IVC = ורידי נבוב נחות; AO = אבי העורקים; CBV = ארס בלון מצופה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
מדידות אחרות של כלי דם ורידיים נורמליים והבחנות בין IVC לבין אבי העורקים מודגשים באיור 4. ממצאי אולטרסאונד טרומבוטי כלולים באיור 5. לבסוף, ניתן לראות השוואה בין קוטר האולטרסאונד לפני הניתוח לבין מדידות פוסט-טרומבוטיות באיור 6. מהירות זרימת דופלר פעימה ממוצעת (mm/s) בווריד הנבוב התחתון לפני ואחרי מיקום הקליפ של כלי הדם מוצגת באיור 7.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig04.jpg"> איור 4: תמונות דופלקס טרנס-בטני מייצגות, עם דוגמאות לחישוב קוטר IVC רוחבי. (A) IVC פרוקסימלי. (B) IVC אינפרא-כלייתי בינוני. (ג) IVC דיסטלי. ניתוח דופלר צבע של (D) IVC אמצע אינפרא כלייתי ו (E) אבי העורקים הבטן. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig05.jpg"> איור 5. תמונות המציגות תמונות מיקום לפני ואחרי הקליפ. (A) ממצאי אולטרסאונד לאחר מיקום קליפ המאשרים את חסימת IVC. (B) זרימת אבי העורקים הפרוקסימלי והדיסטלי. (C) זרימת IVC פרוקסימלית. (D) ורידים איליאק נפוצים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig06.jpg"> איור 6. תמונות אולטרסאונד. אולטרסאונד משתנה לפני ואחרי 15 דקות, 30 דקות ו -45 דקות, ומאשר חסימת IVC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig06large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig07.jpg"> איור 7: מהירות זרימת דופלר ממוצעת של גל פועם. מהירות זרימה ממוצעת (mm/s) בווריד הנבוב התחתון לפני ואחרי מיקום הקליפ (**: P ≤ 0.01, בוצעה בדיקת מאן-ויטני). קווי שגיאה מציגים שגיאה סטנדרטית. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig07large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
כדי לנתח את התוצאות של התערבויות שונות venoplasty עם ציפויים חדשים, אנו ממליצים על מדידה של חלבונים יעילים אשר יכולים להדגים את ההשפעה על המטרה של התרופה המעניינת. עבור בלון הווריד המצופה סירולימוס המשמש כאן, מדדנו את רמות חלבון AKT זרחני (p-AKT) של ליזה IVC של חולדה, מה שאישר עיכוב מסלול mTOR מאחר ש-p-AKT הוא חלבון במורד הזרם שיורד בתגובה לסירולימוס14,15. אנו יכולים לראות באיור 8 כיצד, לאחר ורידי בלון מצופה (CBV), p-AKT יורד באופן משמעותי בהשוואה לקבוצת הדמה.
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig08.jpg"> איור 8: רמות p-AKT של חלבון. רמות חלבונים של ליזטים IVC של ארס דמה לעומת בלון מצופה (CBV) בתנאים רגילים מאשרים את השפעת המטרה עם עיכוב מסלול mTOR באמצעות בלונים מצופים סירולימוס ונוס. (**: P ≤ 0.01, בוצע מבחן מאן-ויטני). קווי שגיאה מציגים שגיאה סטנדרטית. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig08large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

הפרוטוקול מציג מודל הישרדות של מכרסמים לבדיקת התערבויות של בלון ארסי (VB) בוורידים עמוקים שאינם טרומבוטים, טרומבוטיים ופוסט-טרומבוטיים.

מכרסם נחות Vena Cava Venoplasty בלון מודל

Balloon venoplasty is a commonly used clinical technique to treat deep vein stenosis and occlusion as a consequence of trauma, congenital anatomic ...

rodent-inferior-vena-cava-venoplasty-balloon-model

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אינדוקציה אלקטרוליטי של הפעלת האנדותל אל פני השטח הפנימי של תוצאות הנבוב נחותים קאווה להיווצרות סוג ורידי פקיק עקב הפעלת האנדותל בדם קיפאון חלקי, שני מרכיבים של השלישיה של וירצ'וב.

אלקטרוליטי נחותים הווריד הנבוב Model (EIM) של פקקת ורידים

המודל להשלים עכבר קיפאון של פקקת נחות הווריד הנבוב התשואות כמויות מדידים של רקמת עורק בקיר פקיק. זה הוכיח שימושי להערכת אינטראקציות בין הקיר וריד ואת פקיק occlusive והן להערכת התקדמות של דלקת כרונית חריפה.

עכבר דגם השלם הקיפאון של פקקת נחותים הווריד הנבוב

כדי לשפר את הידע של היווצרות neotissue תאית ומולקולרית שלנו, מודל עכברי של TEVG פותח לאחרונה. השתלים הושתלו שתלי כחציצת וריד נבוב infrarenal בעכברי C57BL / 6. מודל זה משיג תוצאות דומות לאלה שהושגו בחקירה הקלינית שלנו, אבל לאורך זמן כמובן הרבה מקוצר.

השתלה של וריד נבוב חציצת שתל נחותה בעכבר דגם

פרוטוקול זה משתמש קטטר בלון כדי לגרום לפציעה intraluminal על העורק הראשי חולדה ולהלן לעורר hyperplasia neointimal. זהו מודל מבוסס היטב לחקר המנגנונים של שיפוץ של כלי דם בתגובה לפציעה. כמו כן הוא משמש באופן נרחב כדי לקבוע את תוקפו של גישות טיפוליות פוטנציאליות.

כלי דם בלון פגיעה וIntraluminal מנהל בעורקי תרדמת העכברוש

יתר לחץ דם ריאתי (PAH) היא מחלה של עורקי ריאה המובילה להכחדתם ולהתפתחות אי ספיקת חדר ימין. מודלים של מכרסמים של PAH הם קריטיים להבנת הפתופיזיולוגיה של PAH. כאן אנו מדגימים אפיון המודינמי, עם צנתור לב ימין ואקו לב, בעכבר ובחולדה.

אפיון המודינמי של מודלים מכרסמים של יתר לחץ דם ריאתי עורקי

הקמנו מודל של אנגיופלסטיקה של טלאי קרום הלב שניתן להשתמש בו בוורידים או בעורקים בקוטר קטן. ניתן להשתמש במודל זה להשוואת היווצרות היפרפלזיה ניאו-אינטימית ורידית ועורקית.

תיקון אנגיופלסטיקה בחולדת אב העורקים או נחות Vena Cava

נתאר כאן היצרות ב הכלילי התחתון כמודל מאתר של פקקת ורידים עמוקה. מודל זה recapitulates הגבלת זרימת דם, אחד הגורמים המפעילים העיקריים של פקקת ורידים בבני אדם.

היצרות של הכלילי התחתון: מודל מאתר של פקקת ורידים עמוקה

השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

Aortocaval פיסטולה נוצר על ידי לפרוץ את העורקים מורנה אינפרא כליות באמצעות שני הקירות לתוך הורקאווה הנחותים ולאחר מכן הבריאה של היצרות בתוך הזרימה שלה באמצעות הארכה חלקית של האובורד הנחותים. מודל זה ניתן לשימוש כדי ללמוד היצרות הורידים המרכזי.

מודל מורנה של היצרות הורידים המרכזית באמצעות Aortocaval פיסטולה עם היצרות זרימה יוצאת

הפרוטוקול הנוכחי שואפת ניסויים ליצור היפרפלזיה של הוורידים ורידים על ידי הקרבת ורידים ללחץ דם עורקי לפיתוח אסטרטגיות להחליש את היפרפלזיה בתוך ורידים בעקבות ניתוח revascularization באמצעות שתלי וריד.

ורידי ארנב מודל האינטרפוזיציה מחקה ניתוח מחדש באמצעות שתלי וריד כדי להעריך את היפרפלזיה באמצעות לחץ דם עורקי

מתוארת מתודולוגיה מפורטת להקמת מודל חולדה זעיר פולשני של תסחיף ריאתי באמצעות קרישי דם אוטולוגיים. ניתנות גם שיטות נוספות לכימות האזור האוטם ולהמחשת עץ העורקים הריאתי.

הקמת מודל חולדה זעיר פולשני של תסחיף ריאתי באמצעות קרישי דם אוטולוגיים

חקור מודל שרידות מכרסם לטיפולי בלון ונופלסטי בורידי עומק, כולל תרחישים לא-טרומבוטיים וטרומבוטיים. השיטה מאפשרת הערכת יעילות טיפולית ותגובת מערכת החיסון בטרומבוזה ורידית.

מכרסם נחות Vena Cava Venoplasty בלון מודל

גלה סרטונים נוספים