Name: אלקטרו-פנטרוגרפיה AC-DC לחקר התנהגויות בדיקה ובליעה של יתושי Culex tarsalis על ידי אדם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: חקור התנהגויות בדיקה ובליעה של יתושי Culex tarsalis באמצעות אלקטרו-פנטרוגרפיה AC-DC על ידי אדם. שיטה זו מאפשרת לחקור את מנגנוני העברת הנגיפים ללא פגיעה בחרקים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו אסירי תודה לפרופ' אסטרי וואיאדנדה מאוניברסיטת אוקלהומה סטייט על חלוץ הליך החיווט ליתושים, ולד"ר איליין באקוס מ-USDA-ARS בפרלייה, קליפורניה, ולמר אנדרו דואל מ-EPG Technologies Inc. בגיינסוויל, פלורידה, על הסיוע בפתרון בעיות בציוד ה-EPG. אנו מודים גם לד"ר דסטין סוונסון ולמר וויליאם יארנל מ-USDA-ARS Insectary במנהטן, קנזס, על אספקת יתושים, ולגברת מרים רוהינדה מאוניברסיטת קנזס סטייט במנהטן, קנזס על עזרתה בצילום הסרטונים הפרוצדורליים. עבודה זו התאפשרה הודות לגישה לליבת האנטומולוגיה המולקולרית המשולבת (IEMC) באוניברסיטת קנזס סטייט. מחקר זה נתמך על ידי הסכם פיתוח כוח העבודה למחקר, חינוך וכלכלה של משרד החקלאות האמריקאי (#58-3022-0-002) ופרויקט האץ' הרב-מדינתי (NE1943). כתב יד זה הוא תרומה מס' 24-194-J מתחנת הניסויים החקלאיים של קנזס, אוניברסיטת קנזס סטייט, מנהטן, קנזס, ארה"ב.

Non-invasive Electropenetrography to Study Mosquito Probing Behaviors

<ol><li>Becker, N., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBecker%2C+N+%22Medical+importance+of+mosquitoes+in+Mosquitoes+and+their+control%22">Medical importance of mosquitoes in Mosquitoes and their control</a>. , 2nd ed, Springer. Los Angeles, CA. 25-42 (2010).</li>
<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Vector-borne+diseases%22">Vector-borne diseases</a>. , (2024).</li>
<li>Woodstream Corporation, Inc. The economic cost of mosquito-borne diseases. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22AMosquito+Magnet%22">AMosquito Magnet</a>. , (2022).</li>
<li>Bartlow, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forecasting+zoonotic+infectious+disease+response+to+climate+change%3A+Mosquito+vectors+and+a+changing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Forecasting zoonotic infectious disease response to climate change: Mosquito vectors and a changing environment.</a> Vet Sci. 6 (2), 40(2019).</li>
<li>Naslund, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+mosquito-borne+viruses+linked+to+Aedes+aegypti+and+Aedes+albopictus%3A+Global+status+and+preventive+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Vector+Borne+Zoonotic+Dis%22%5BJournal%5D)">Emerging mosquito-borne viruses linked to Aedes aegypti and Aedes albopictus: Global status and preventive strategies.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 21 (10), 731-746 (2021).</li>
<li>Shaw, W. R., Catteruccia, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vector+biology+meets+disease+control%3A+Using+basic+research+to+fight+vector-borne+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Vector biology meets disease control: Using basic research to fight vector-borne diseases.</a> Nat Microbiol. 4 (1), 20-34 (2019).</li>
<li>Wilson, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+vector+control+for+the+control+and+elimination+of+vector-borne+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Negl+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">The importance of vector control for the control and elimination of vector-borne diseases.</a> PLoS Negl Trop Dis. 14 (1), e0007831(2020).</li>
<li>Dusfour, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+insecticide+resistance+in+the+major+Aedes+vectors+of+arboviruses%3A+Advances+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Negl+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">Management of insecticide resistance in the major Aedes vectors of arboviruses: Advances and challenges.</a> PLoS Negl Trop Dis. 13 (10), e0007615(2019).</li>
<li>Choumet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+non+infectious+and+infectious+Anopheles+gambiae+blood+feedings+in+na%C3%AFve+and+saliva-immunized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Visualizing non infectious and infectious Anopheles gambiae blood feedings in naïve and saliva-immunized mice.</a> PLoS ONE. 7 (12), e50464(2012).</li>
<li>Backus, E. A., Cervantes, F. A., Guedes, R. N. C., Li, A. Y., Wayadande, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AC-DC+electropenetrography+for+in-depth+studies+of+feeding+and+oviposition+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Entomol+Soc+Am%22%5BJournal%5D)">AC-DC electropenetrography for in-depth studies of feeding and oviposition behaviors.</a> Ann Entomol Soc Am. 112 (3), 236-248 (2019).</li>
<li>Hol, F. J., Lambrechts, L., Prakash, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BiteOscope%2C+an+open+platform+to+study+mosquito+biting+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">BiteOscope, an open platform to study mosquito biting behavior.</a> Elife. 9, e56829(2020).</li>
<li>Backus, E. A., Guedes, R. N., Reif, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AC-DC+electropenetrography%3A+Fundamentals%2C+controversies%2C+and+perspectives+for+arthropod+pest+management%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">AC-DC electropenetrography: Fundamentals, controversies, and perspectives for arthropod pest management.</a> Pest Manag Sci. 77 (3), 1132-1149 (2021).</li>
<li>Gordon, R. M., Lumsden, W. H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+of+the+behavior+of+the+mouthparts+of+mosquitoes+when+taking+up+blood+from+living+tissue%3B+together+with+some+observations+on+the+ingestion+of+microfilariae%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Trop+Med+Parasitol%22%5BJournal%5D)">A study of the behavior of the mouthparts of mosquitoes when taking up blood from living tissue; together with some observations on the ingestion of microfilariae.</a> Ann Trop Med Parasitol. 33, 259-278 (1939).</li>
<li>Janson, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+automated+biomaterial+platform+to+study+mosquito+feeding+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Development of an automated biomaterial platform to study mosquito feeding behavior.</a> Front Bioeng Biotechnol. 11, 1103748(2023).</li>
<li>Henriques-Santos, B. M., Xiong, C., Pietrantonio, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+analysis+of+feeding+behaviors+of+females+of+the+mosquito+Aedes+aegypti+using+a+modified+flyPAD+system%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Automated analysis of feeding behaviors of females of the mosquito Aedes aegypti using a modified flyPAD system.</a> Sci Rep. 13, 20188(2023).</li>
<li>Kashin, P., Wakeley, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+insect+%27Bitometer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">An insect 'Bitometer.</a> Nature. 208 (5009), 462-464 (1965).</li>
<li>Kashin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electronic+recording+of+the+mosquito+bite%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Electronic recording of the mosquito bite.</a> J Insect Physiol. 12, 281-286 (1966).</li>
<li>Kashin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+orally+effective+insect+repellent%5BTitle%5D)+AND+%22IIT+Research+Institute%22%5BJournal%5D)">Development of an orally effective insect repellent.</a> IIT Research Institute. , (1967).</li>
<li>Kashin, P., Arneson, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+automated+repellency+assay+system.+II.+a+new+electronic+%26%2334%3BBitometer-timer.%26%2334%5BTitle%5D)+AND+%22J+Econ+Entomol%22%5BJournal%5D)">An automated repellency assay system. II. a new electronic &#34;Bitometer-timer.&#34.</a> J Econ Entomol. 62 (1), 200-205 (1969).</li>
<li>Shieh, J. -N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Salivation+and+engorgement+parameters+of+sucking+insect+vectors%3A+Implications+in+pathogen+transmission%22">Salivation and engorgement parameters of sucking insect vectors: Implications in pathogen transmission</a>. , Oregon State University. (1994).</li>
<li>Kimsey, R. B. Measuring and recording arthropod blood feeding. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKimsey%2C+RB+%22History%2C+Development%2C+and+Applications+of+AC+Electronic+Insect+Feeding+Monitors%22">History, Development, and Applications of AC Electronic Insect Feeding Monitors</a>. , Entomological Society of America. 122-128 (1994).</li>
<li>Backus, E. A., Devaney, M. J., Bennett, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+signal+processing+circuits+among+seven+AC+electronic+monitoring+systems+for+their+effects+on+the+emf+and+R+components+of+aphid+%28Homoptera%3A+Aphididae%29+waveforms%5BTitle%5D)+AND+%22Principles+and+Applications+of+Electronic+Monitoring+and+Other+Techniques+in+the+Study+of+Homopteran+Feeding+Behavior%22%5BJournal%5D)">Comparison of signal processing circuits among seven AC electronic monitoring systems for their effects on the emf and R components of aphid (Homoptera: Aphididae) waveforms.</a> Principles and Applications of Electronic Monitoring and Other Techniques in the Study of Homopteran Feeding Behavior. Walker, G. P., Backus, E. A. , Entomological Society of America: Lanham, MD. 102-143 (2000).</li>
<li>Backus, E. A., Bennett, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+AC-DC+correlation+monitor%3A+New+EPG+design+with+flexible+input+resistors+to+detect+both+R+and+emf+components+for+any+piercing-sucking+hemipteran%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">The AC-DC correlation monitor: New EPG design with flexible input resistors to detect both R and emf components for any piercing-sucking hemipteran.</a> J Insect Physiol. 55 (10), 869-884 (2009).</li>
<li>Backus, E. A., Cline, A. R., Ellerseick, M. R., Serrano, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lygus+hesperus+%28Hemiptera%3A+Miridae%29+feeding+on+cotton%3A+New+methods+and+parameters+for+analysis+of+nonsequential+electrical+penetration+graph+data%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Lygus hesperus (Hemiptera: Miridae) feeding on cotton: New methods and parameters for analysis of nonsequential electrical penetration graph data.</a> Annals of the Entomological Society of America. 100, 296-310 (2007).</li>
<li>Ebert, T. A., Backus, E. A., Cid, M., Fereres, A., Rogers, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+SAS+program+for+behavioral+analysis+of+electrical+penetration+graph+data%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Electron+Agr%22%5BJournal%5D)">A new SAS program for behavioral analysis of electrical penetration graph data.</a> Comput Electron Agr. 116, 80-87 (2015).</li>
<li>Wayadande, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Waveforms+from+stylet+probing+of+the+mosquito+Aedes+aegypti+%28Diptera%3A+Culicidae%29+measured+by+AC-DC+electropenetrography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Entomol%22%5BJournal%5D)">Waveforms from stylet probing of the mosquito Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) measured by AC-DC electropenetrography.</a> J Med Entomol. 57 (2), 353-368 (2020).</li>
<li>Cooper, A. M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+electropenetrography+waveform+library+for+the+probing+and+ingestion+behaviors+of+Culex+tarsalis+on+human+hands%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">An electropenetrography waveform library for the probing and ingestion behaviors of Culex tarsalis on human hands.</a> Insect Sci. 31 (4), 1165-1186 (2024).</li>
<li>Reif, K. E., Backus, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AC-DC+electropenetrography+unmasks+fine+temporal+details+of+feeding+behaviors+for+two+tick+species+on+unsedated+hosts%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">AC-DC electropenetrography unmasks fine temporal details of feeding behaviors for two tick species on unsedated hosts.</a> Sci Rep. 11 (1), 2040(2021).</li>
<li>Vaughan, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electropenetrography+as+a+tool+to+quantify+probing+and+injection+behaviors+of+mosquitoes+%28Aedes+aegypti%29+in+mice+under+biocontainment+housing%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Electropenetrography as a tool to quantify probing and injection behaviors of mosquitoes (Aedes aegypti) in mice under biocontainment housing.</a> Comp Med. 73 (6), 25(2023).</li>
<li>Backus, E. A., Shugart, H. Electropenetrography (EPG) Online Workshop. Hosted by L. Diepenbrock at the University of Florida. Institute of Food and Agricultural Sciences Extension. , 
 <a target="_blank" href="https://ifas-crec-entomology.catalog.instructure.com/courses/epg-workshop-2022">https://ifas-crec-entomology.catalog.instructure.com/courses/epg-workshop-2022</a> (2022).</li>
<li>Dataq Instruments Inc. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22WinDaq+recording+and+playback+software%22">WinDaq recording and playback software</a>. , (2024).</li>
<li>Backus, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Our+own+jabberwocky%3A+clarifying+the+terminology+of+certain+piercing-sucking+behaviors+of+homopterans%5BTitle%5D)+AND+%22Principles+and+applications+of+electronic+monitoring+and+other+techniques+in+the+study+of+homopteran+feeding%22%5BJournal%5D)">Our own jabberwocky: clarifying the terminology of certain piercing-sucking behaviors of homopterans.</a> Principles and applications of electronic monitoring and other techniques in the study of homopteran feeding. Walker, G. P., Backus, E. A. , Entomological Society of America: Lanham, MD. 102-143 (2000).</li>
<li>Tjallingii, W. F. Comparison of AC and DC systems for electronic monitoring of stylet penetration activities by homopterans. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTjallingii%2C+WF+%22Principles+and+Applications+of+Electronic+Monitoring+and+Other+Techniques+in+the+Study+of+Homopteran+Feeding+Behavior%22">Principles and Applications of Electronic Monitoring and Other Techniques in the Study of Homopteran Feeding Behavior</a>. Walker, G. P., Backus, E. A. , Entomological Society of America. 41-69 (2000).</li>
<li>Mizrahi, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMizrahi%2C+J+%22Advances+in+Applied+Electromyography%22">Advances in Applied Electromyography</a>. , IntechOpen. Rijeka, Croatia. (2011).</li>
</ol>

למחברים אין ניגודי אינטרסים לחשוף. אזכור שמות מסחריים או מוצרים מסחריים בפרסום זה נועד אך ורק למטרת מתן מידע ספציפי ואינו מרמז על המלצה או תמיכה של משרד החקלאות האמריקאי. המסקנות בדוח זה הן של המחברים ואינן מייצגות בהכרח את עמדות ה-USDA.

בעת שימוש ב-AC-DC EPG, זה קריטי לקבל הבנה בסיסית של פעולת חומרה ותוכנה30 ולעקוב בקפידה אחר הפרוטוקולים המתוארים כאן כדי למנוע נזק לציוד. בעיקר, הימנע מלגעת במגבר הראש כאשר הוא מופעל אלא אם כן הוא מקורקע על כלוב פאראדיי. מומלץ להקליט כמה שיותר אחורה בכלוב פאראדיי30. אין צורך לסגור את דלתות הכלוב כדי לקבל צורות גל הניתנות לפירוש אלא אם כן הקלטה בסביבה עם רעש חשמלי סביבתי מוגזם. שום דבר ממונע לא יכול להיות בכלוב פאראדיי. חשוב לציין כי כלוב פאראדיי עצמו חייב להיות מוארק חשמלית אך ורק דרך מגבר הראש כדי שיפעל כראוי. זה מושג על ידי חיבור מגבר הראש למעמד מעבדה ממתכת כאשר הצבע משייף מרגל אחת של המעמד כדי לאפשר נתיב מוליך לחשמל שנלכד על ידי כלוב פאראדיי לזרום למעמד המעבדה, לתוך מעטפת המתכת של מגבר הראש, במורד הכבל לתיבת הבקרה, דרך אספקת החשמל לשקע קיר מוארק כהלכה, ולתוך האדמה דרך קרקע הבניין30. ניתן להשתמש במולטימטר כדי לבדוק את איכות החיבור בין הרכיבים בתוך הכלוב על ידי מדידת ההתנגדות (שהיא היפוך המוליכות) בין נקודות שונות. ניתן גם למקם רדיו AM אלחוטי בתוך כלוב פאראדיי כדי לוודא שהצליל מופחת משמעותית (או באופן אידיאלי) כאשר הדלתות סגורות, מה שמאשר שכלוב פאראדיי לוכד כראוי אותות חשמליים הנישאים באוויר (E. Backus per Comm.).
הכנה נכונה וסטנדרטית של דבק הכסף והצמדת אלקטרודות ההקלטה לחרקים הם קריטיים להשגת הקלטות שמישות. ציפורן חרקים היא מבודדת ופועלת כקבל אם דבק הכסף אינו חודר כראוי לנקבוביות הקוטיקולה כדי ליצור נתיב לחשמל לעבור מתוך החרק לחוט הזהב על פני השטח של הפרונוטום30. הכן את דבק הכסף במקביל לפני כל מפגש EPG, עבד עם דבק כסף טרי מהצינור והחלף אותו בדבק כסף מערבולת נמרצת לעתים קרובות במהלך הליך החיווט. ודא שלולאת הזהב ממוקמת כנגד בית החזה כך שהלולאה כולה תהיה במגע עם הקוטיקולה ולא מוטה לצד אחד או מופרדת על ידי שכבה עבה של דבק כסף וקשקשים כדי לסייע ביצירת חיבור חשמלי חזק וכן למנוע ניתוק ובריחה של היתוש מהחוט.
יש לייעל את הפרוטוקולים המתוארים כאן כאשר עובדים עם מיני יתושים שונים. יש לקבוע בניסוי את הגדרות ה-EPG האופטימליות (רמת Ri, כרךtagה, סוג זרם ורווח חומרה) להקלטה על פרוקי רגליים נתון12,30. עם זאת, לאחר התאמת הקיזוז, לא יהיה צורך להתאים אותו מחדש בעבודה עם יתושים דומים. נקבעו הגדרות אופטימליות עבור AC-DC EPG עם Ae. aegypti26 ו-Cx. tarsalis27. ספריות צורות גל (המוגדרות בטבלה 2) עבור מינים נוספים יקלו על אימוץ EPG עבור יתושים. כמו כן, יש צורך לייעל את ההרדמה עבור היתוש המעניין, שכן התנהגות הזנת הדם יכולה להיות מושפעת באופן דיפרנציאלי על סמך מיני היתושים ובחירת ההרדמה. לדוגמה, Cx. tarsalis דורש תקופת החלמה של 4 שעות לאחר 15 דקות של הרדמה עם CO2, בעוד שעבור Ae. aegypti, תקופת החלמה של 15 דקות מספיקה לאחר תקופת הרדמה של 15 דקות עם קרח. עם זאת, קשה להפיל את Culex tarsalis בחשיפה לקור, ולכן נעשה שימוש בעיקר ב-CO2 למרות תקופת ההחלמה הארוכה.
בעוד שצג AC-DC EPG פשוט לשימוש לאחר סקירת משאבים מקוונים30,31 או הדרכה עם משתמש מנוסה, נדרש פתרון בעיות מסוים. בתחילה, בהקלטות ה-EPG של המחבר של בדיקות יתושים היה גל סימן בלתי צפוי של 11 הרץ באות המקדים שלא נצפה או דווח על ידי Wayadande ועמיתיו26. התייעצות עם E. Backus הצביעה על כך שכלוב פאראדיי היה ככל הנראה הבעיה בגלל לולאות קרקע מפריעות. כלוב פאראדיי חדש הבנוי ממסך נחושת מוליך מאוד המחובר למסגרת אלומיניום המוברגת ללוחית רצפה גדולה מאלומיניום הנתמכת על ידי רגלי גומי כדי לבודד אותה מהטבלה למטה (איור 1B), פתר את אות הרעש של 11 הרץ (איור 3C, C'). בנוסף, מדי פעם, כאשר ספק הכוח של EPG הופעל לראשונה, האותות לפני ואחרי התיקון היו מופיעים כקווים עבים ומטושטשים במקום קווים ישרים, חלקים ודקים. זה תוקן בדרך כלל על ידי כיבוי המכשיר ובדיקת כל חיבורי הכבל. אם זה נכשל, ניתוק המכשיר למשך 1-3 דקות בדרך כלל עזר. לעתים רחוקות מאוד, האותות לפני ואחרי הופכים עבים ומטושטשים במהלך הפעולה, דבר שטופל על ידי כיבוי המכשיר וחיבורו לשקע אחר או שימוש בווסת מתח ומזגן חשמל כדי לחבר את ה-EPG לפני חיבורו לקיר. באופן אידיאלי, קו ייעודי לצג ה-EPG יבטל רעשי קו הנובעים ממקררים וציוד אחר המחובר לאותו מעגל חשמלי כמו ה-EPG30.
נכון לעכשיו, ישנן שתי מגבלות עיקריות לשימוש ב-EPG לחקר יתושים. ראשית, מעט מחקרי מתאם בוצעו כדי לאמת אילו התנהגויות בדיקה תואמות לצורות הגל. בעוד שישנן השערות חזקות לגבי מה שקורה במהלך כל משפחת צורות גל (טבלה 1) וחלק מסוגי צורות הגל (M1 ו-M2), מעט מההשערות הללו אושרו בניסוי, פרט לכך שבליעת דם נמצאת בקורלציה עם משפחת צורות הגל M26,27. והכי חשוב, יש לזהות צורות גל המתאימות לאירועי רוק מכיוון שפתוגנים רבים מועברים ברוק. מתאם של צורות גל EPG עם פעילויות ביולוגיות ביתושים יידרש כדי לפרש באופן משמעותי הבדלים משמעותיים במשך צורת הגל ובספירה בין קבוצות הטיפול. שנית, שיעורי הבדיקה והבליעה במהלך EPG יכולים להיות נמוכים בהרבה מהצפוי27. קשירת יתושים בנפרד לחוטים קצרים והנחתם ישירות על הפונדקאי יכולה למנוע התנהגויות חיפוש פונדקאי והזנה חברתית למרחקים ארוכים, שעלולות להשפיע על התנהגויות גישוש ובליעה. חרקים מחווטים כהלכה יכולים ללכת ולעוף כרגיל. ובכל זאת, יתושים לעתים קרובות מושכים בחוטים ולפעמים מסתבכים או מחזיקים את עצמם בזוויות לא טבעיות, מה שמצביע על כך שהחוטים משפיעים על התנהגותם במידה מסוימת. המחברים בדקו אסטרטגיות רבות להגברת שיעורי הבדיקה במהלך EPG, וצום היתושים במהלך הלילה, שימוש באנשים מבוגרים, חשיפתם לנשימה אנושית מיד לפני הנחתם על היד, ומריחת רוק אנושי על היד היו היעילים ביותר, כמו גם שימוש במארחים שביצעו כל הזמן התאמות בקנה מידה עדין למיקום היד שלהם כדי להבטיח שהיתוש נמצא במיקום האידיאלי לחקור27.
למרות מגבלות אלו, ל-AC-DC EPG יתרונות רבים על פני גישות אחרות לחקר התנהגויות גישוש ובליעה. מערכות כמו BiteOScope11, flyPAD15 ופלטפורמת ביו-חומרים אוטומטית14 שתוכננו לכמת התנהגויות בדיקה ובליעה והפרשות רוק במהלך הזנת דם משתמשות במצעים מלאכותיים שקופים ודיאטות נוזליות שחסרות מערכות רקמת מארח רגילות ורמזים מארחים. בעוד שפלטפורמות סינתטיות אלה שימושיות למטרות ניסוי רבות, יתרון ברור של AC-DC EPG הוא היכולת לחקור התנהגויות פרוקי רגליים אלה ומשתנים מעניינים בתוך מערכות מארחות טבעיות. יתר על כן, יכולת ההסתגלות המוגדרת על ידי המשתמש של מערכת AC-DC EPG מציעה יתרון נוסף על פני מכשירי EPG אחרים22,33 והתקני ניטור אלקטרוניים דמויי EPG16,21, שאין להם רמות Ri מתכווננות, סוגי זרם ורמות מתח הדרושות כדי להשיג צורות גל עם כמות המידע המקסימלית ולמזער השפעות שליליות על מגוון רחב של המארחים ופרוקי הרגליים22, 23. טכניקות אלקטרומיוגרפיה (EMG) משמשות גם לחקר הזנת דם. עם זאת, המעגל החשמלי כולל בדרך כלל רק את פרוקי הרגליים ורק פוטנציאל השריר הקרוב ביותר לאלקטרודה המקליט נרשמים, כך שצורות הגל אינן מספקות מידע על פעילויות מפורטות המתרחשות בממשק המארח-חרק כמו קרעים בתאים, מיקומים ופעילויות סטילט ופוטנציאל זרימה דרך חלקי הפה28,34. ניתן להשתמש בטכניקות מיקרוסקופיה תוך-חיוניות כדי לדמיין תנועות ופעילויות מפורטות של חלקי הפה ברקמות מארח חיות ישירות, אך טכניקות אלה כוללות הליכים פולשניים במודלים של בעלי חייםחיים 9. רק צג ה-AC-DC EPG יכול לספק מידע מפורט ביותר בזמן אמת על התנהגויות בדיקה, בליעה והפרשת רוק המתרחשות ברקמות מארח אטומות חיות ללא צורך בפרוצדורות פולשניות וניתן להתאמה לשימוש במגוון רחב של פרוקי רגליים10,12.
זהו ההליך המפורט הראשון שלב אחר שלב לחיווט יתושים, בניית שואב חרקים וביצוע EPG על מארחים אנושיים. פרוטוקולים אלה צפויים להקל על אימוץ AC-DC EPG על יתושים הניזונים ממארחים אנושיים. דוגמאות למאמצי מחקר עתידיים המשתמשים ב-AC-DC EPG עשויות לכלול מחקרים על מנגנונים בסיסיים של הזנת דם ונזק לרקמת המארח10, כולל זיהוי רצפים סטריאוטיפיים של התנהגויות בדיקה לפני בליעת דם, חקירת זרימת הדם דרך חלקי הפה, והשוואה של פלסטיות האכלה בתוך ובין מיני פרוקי רגליים/שלבי התפתחות26. ניתן להשתמש ב-EPG גם כדי לכמת את ההשפעות של קוטלי חרקים, נוגדי הזנה ודוחים12. הנהלים המוצגים כאן לשימוש ב-AC-DC EPG לחקר יתושים על ידי אדם יאיצו את המחקרים הללו ויאפשרו תובנות חדשות לגבי הביולוגיה של הזנת דם יתושים.

יתושים גורמים לסבל ולהפסד כלכלי ברחבי העולם בשל תפקידם כמחוללי מחלות ומזיקים מטרידים1. יתושי אנופלס מעבירים מלריה, הגורמת מדי שנה לכ-219 מיליון מקרים ברחבי העולם, יותר מ-400,000 מקרי מוות2, ו-12 מיליארד דולר בעלויות ישירות3. יתושי אדס הם הווקטורים הבולטים ביותר של חשיבות לבריאות הציבור מכיוון שיש להם נוכחות כמעט גלובלית והם מעבירים חומרים של צ'יקונגוניה, קדחת דנגי, פילריאזיס לימפטי, קדחת עמק השבר, קדחת צהובה וזיקה, שגובים חיים, מציפים את מערכות הבריאות וגורמים לסבל כרוני, תחלואה לכל החיים ונכות4,5. בנוסף, יתושי קולקס מעבירים חומרים של דלקת מוח סוסים, דלקת מוח יפנית, פילריאזיס לימפטי, דלקת המוח של סנט לואיס וקדחת מערב הנילוס, המשפיעים על בריאות האדם ובעלי החיים כאחד3,4.
הדברת וקטור בגישות מבוססות קוטלי חרקים היא השיטה המובילה לשליטה במחלות הנישאות על ידי וקטור ברחבי העולם6,7. עם זאת, מספר קוטלי החרקים הזמינים להדברת יתושים מוגבל. בנוסף, עמידות לקוטלי חרקים מתפתחת במינים רבים, במיוחד ביתושי Aedes, מה שמשפיע על יכולתנו להילחם במחלות הנישאות על ידי וקטורים ומניע את הצורך באסטרטגיות הדברה חדשות6,8. הבנה טובה יותר של הביולוגיה של יתושים, אינטראקציות יתוש-מארח-פתוגן והתהליכים המווסתים את העברת הפתוגנים יכולה להקל על פיתוח כלים חדשים לבקרת וקטורים6.
התנהגויות בדיקה ובליעה ברקמות המארח יכולות להשפיע על העברת פתוגנים ופתולוגיה של מחלות9,10,11,12. לדוגמה, יותר מיקרופילאריות נבלעו כאשר Aedes aegypti ניזון ישירות מהנימים במקום להצטבר דם מחוץ לכלי דם קרועים13. לפיכך, מחקר בסיסי ויישומי בנושא זה יכול לסייע בפיתוח, חידוד והערכה של אסטרטגיות הדברת יתושים ואמצעי נגד אחרים להעברת פתוגנים. עם זאת, קיימים פערי ידע משמעותיים בפרטים של התנהגויות הזנת דם מוצפנות המתרחשות מתחת לפני השטח של עור הפונדקאי מכיוון שהתנהגויות אלה דורשות לעתים קרובות הליכים פולשניים במודלים של בעלי חיים חיים או משתמשות במצעים מלאכותיים שקופים או דיאטות נוזליות9,11,14,15. טכניקות אלקטרו-חדירה לא פולשניות (EPG; נקראת גם גרף חדירה חשמלי) שימשו לחקר התנהגויות האכלה של חרקים הניזונים מצמחים הקשורות להעברת פתוגנים בצמחים, עמידות צמחים מארחים ודרכי פעולה של קוטלי חרקים מכיוון שהן מאפשרות לחוקרים להתבונן, לתעד ולכמת בעקיפין תנועות והתנהגויות של חלקי הפה המתרחשות בתוך רקמות מארחות10,12.
מאז שנות ה-50 של המאה ה-20, טכניקות ניטור חדירה אלקטרוניות יושמו על פרוקי רגליים הניזונים מדם, כולל יתושים16,17,18,19,20. עם זאת, EPG מעולם לא אומץ באופן נרחב עבור פרוקי רגליים הניזונים מדם מכיוון שפעילויות ביולוגיות המתאימות לצורות הגל מעולם לא אומתו21. בנוסף, העיצובים והאלקטרוניקה של מכשירים מוקדמים הביאו להדגשת יתר של כמה אותות חשמליים, יחסי רעש לאות גבוהים, רזולוציה נמוכה ועיוות של צורות גל, וגירוי למארחי חוליות12,22. מכשיר עדכני יותר, AC-DC EPG MONITOR23, כולל הגדרות משתנות ועיבוד אותות משופר, מה שהופך אותו למתאים יותר לתיעוד פרוקי רגליים הניזונים מדם ולפענוח המקורות הביולוגיים של צורות הגל במחקרי מתאם ניסיוניים10,12.
עבור EPG, אות חשמלי מופעל על המארח דרך בדיקת מתח מצע (כלומר, אלקטרודת ייחוס). פרוקי הרגליים מחוברים לאלקטרודה מקליטה ומונחים על המארח. כאשר פרוקי הרגליים מכניסים את חלקי הפה שלהם (כלומר, סטיילטים) לתוך המארח, האות החשמלי מועבר למוניטור AC-DC EPG לעיבוד אותות. לאחר מכן, האותות החשמליים מוצגים במחשב כ"צורות גל" המתאימות להתנהגויות ספציפיות כגון תנועות של חלקי הפה, בליעה, רוק ורכישה/חיסון של פתוגנים10,12. לאחר מכן ניתן לחשב משתני תגובה עוקבים ולא רציפים הקשורים למשך ולספירה של צורות הגל24,25 ברמות היררכיות שונות (משפחות, סוגים ותתי סוגים) על סמך התדירות ומשך צורות הגל כדי לקבל תובנה לגבי התנהגויות האכילה המתרחשות בתוך ובין מינים, ובתגובה לגורמים ביוטיים ואביוטיים, כגון מארחים, פתוגנים, חומרי הדברה ותנאים סביבתיים10,12.
עד כה, נעשה שימוש במוניטור AC-DC EPG כדי לאפיין את התנהגויות הבדיקה והבליעה של Ae. aegypti26 ו-Culex tarsalis27 יתושים הניזונים מידיים אנושיות, וקרציות Dermacentor variabilis ו-Amblyomma americanum הניזונות מעגלי בקר28. בנוסף, מודל עכברים עבור EPG29 פותח לאחרונה כדי להקל על מחקרי פתוגנים באמצעות מכשיר זה. ידיים אנושיות אידיאליות לאפיון צורת הגל הראשונית של יתושים מכיוון שמארחים אנושיים יכולים לדווח מתי הם מרגישים את היתוש מגשש כמו גם התנהגויות אחרות, מה שמקל על המתאם בין צורות גל להתנהגויות (טבלה 1). בנוסף, הבנה טובה יותר של הפלסטיות בהתנהגויות האכלה בקרב יתושים באוכלוסיות אנושיות שונות יכולה לתרום לפיתוח התערבויות ניהול מיוחדות יותר עבור יתושים והפתוגנים שהם מעבירים.
טבלה 1: תיאור של משפחות צורות גל המשמשות לסיווג אותות חשמליים שנרשמו מטרסליס קולקס על ידיים אנושיות באמצעות AC-DC EPG. שלב הבדיקה והפעילויות הביולוגיות המתאימות לכל משפחת צורות גל. ראה Cooper et al.27 למידע נוסף. קיצור: AC = זרם חילופין, DC = זרם ישר, EPG = אלקטרו-חודרגרף. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66877/Table1_31July2024.xlsx" target="_blank">אנא לחץ כאן להורדת טבלה זו.</a>
כדי להקל על השימוש ב-EPG לחקר ביולוגיה של יתושים ואינטראקציות מארח-וקטור, מוצגת כאן מתודולוגיה לכימות התנהגויות האכילה של יתושי Cx. tarsalis על ידי אדם באמצעות צג AC-DC EPG. פרוטוקולים אלה מתבססים על נהלי AC-DC EPG הבסיסיים המתוארים במשאבים מקוונים30 ומניחים שלמשתמשים יש ידע בסיסי בעבודה של AC-DC EPG ותוכנה קשורה31. ניתן לשנות את הנהלים המתוארים עבור מיני יתושים ומארחים אחרים ולספק בסיס להקל על מחקר מונחה השערות של התנהגויות האכלת יתושים.
טבלה 2: הגדרות של טרמינולוגיה נפוצה של AC-DC EPG. ההגדרות מבוססות על אלה שניתנו במשאבים מקוונים30,31 וספרות מדעית32. קיצור: AC = זרם חילופין, DC = זרם ישר, EPG = אלקטרו-חודרגרף. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66877/66877_Table 2.xlsx" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד טבלה זו.</a>

<table><tbody><tr><td>Instrumentation</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>AC-DC 4-channel electropenetrograph</td><td>EPG Technologies, Inc.</td><td></td><td>עבור EPG, כולל את ספק הכוח, תיבת הבקרה, תיבת ממשק המתגים, ארבעה ראשי tagamplifiers, ארבעה בדיקות מתח מצע וכבלים נלווים</td></tr><tr><td>כריות אוויר</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>למארח האנושי להניח את ידו/זרועו במהלך חומרת רכישת נתונים EPG</td></tr><tr><td>DI-710 (לוח AD)</td><td>DATAQ Instruments Inc.</td><td></td><td>לדיגיטציה של אותות ה-EPG האנלוגיים כך שניתן יהיה להמחיש אותם במחשב</td></tr><tr><td>מנורת מגדלת לד הניתנת לעמעום, זכוכית מגדלת גדולה 5X ללא ידיים עם אור ומעמד לקריאת תחביבים מלאכת יד תפירה</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>לתצפית התנהגותית במהלך EPG; השתמש רק במנותק מהחשמל במהלך EPG או רעש עלול לגרום</td></tr><tr><td>למיקרוסקופ דיגיטלי Dino-Lite Edge (הגדלה פי 250)</td><td>Dino-Lite</td><td>AF4915ZT</td><td>לתצפית התנהגותית במהלך EPG</td></tr><tr><td>Dino-Lite Flex-arm Desktop</td><td>Stand Dino-Lite</td><td>MS22B</td><td>לאחיזה ומניפולציה של המצלמה</td></tr><tr><td>Eisco Steel Retort Base Stand and Rod Set</td><td>Fisher Scientific</td><td>S41740</td><td>להחזקת מגבר הבמה הראשי והארקת כלוב פאראדיי (חייב להיות עשוי מתכת)</td></tr> <tr><td>סדנה מקוונת EPG</td><td>UF IFAS Extension</td><td>https://ifas-crec-entomology.catalog.instructure.com/courses/epg-workshop-2022</td><td>AKA, "משאבים מקוונים" ללימוד EPG (הגדרת מכשירים, איסוף וניתוח נתונים, בניית פאראדיי, הכנת דבק כסף, בניית בדל חרקים וכו')</td></tr><tr><td>Furman P-1800 AR ווסת כוח/מרכך כוח</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>להפחתת רעשי הקו</td></tr><tr><td>עטיפת ריפוד בועות קטנה</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>לשימוש כמחסום בין המארח לכלוב פאראדיי</td></tr><tr><td>Troemner Talboys Labjaws מחזיק מהדק רגיל</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>02-217-121</td><td>להחזקת מגבר הבמה הראשי והארקת כלוב פאראדיי (חייב להיות עשוי מתכת ולא מצופה בפלסטיק)</td></tr><tr><td>מחשב Windows</td><td>Best Buy</td><td></td><td>עבור EPG וניתוח סטטיסטי</td></tr><tr><td>Software</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Backus 2.0 ניתוח נתונים תוכנית SAS&nbsp;</td><td>הרחבת UF IFAS</td><td>https://crec.ifas.ufl.edu/extension/epg/data-analysis/</td> <td>לניתוח סטטיסטי של נתוני צורות גל</td></tr><tr><td>Ebert 1.0 מניפולטור קבצים ובודק שגיאות תוכניות SAS</td><td>הרחבת UF IFAS</td><td>https://crec.ifas.ufl.edu/extension/epg/data-analysis/</td> <td>להכנת קבצים לניתוח סטטיסטי של נתוני צורות גל</td></tr><tr><td>SAS גרסה 9.4</td><td>SAS Institute, Inc.</td><td></td><td>לניתוח סטטיסטי של נתוני צורות גל</td></tr><tr><td>WinDaq Lite&nbsp;</td><td>DATAQ אינסטרומנטס בע"מ</td><td></td><td>להקלטה וסקירה של נתוני EPG.&nbsp; כולל את תוכנת WinDaq Hardware Manager (AKA, "תוכנת ניהול חומרה") ואת תוכנת WinDaq Waveform Browser (AKA, "תוכנה לסקירת צורות גל"). לשימוש במחשבי Windows בלבד.&nbsp;</td></tr><tr><td>Faraday Cage</td><td></td><td></td><td></td>מסגרת</tr> <tr><td>מסך אלומיניום</td><td>הום דיפו</td><td>MSCF5167</td><td>עבור&nbsp; קירות גיליון האלומיניום של כלוב פאראדיי</td></tr><tr><td>, 0.125 (1/8) 3003-H14</td><td>מחסן מתכות</td><td>S318</td><td>עובי לבסיס כלוב פאראדיי</td></tr><tr><td>פלטות פינתיות, 1 אינץ'&nbsp;</td><td>הום דיפו</td><td>339547</td><td>עבור &nbsp; קירות כלוב פאראדיי</td></tr><tr><td>ברגי מכונת פיליפס עם ראש שטוח, #6-32 x 1 אינץ'</td> <td>הום דיפו</td><td></td><td>459999 לבניית כלוב פאראדיי</td></tr><tr><td>מכונות כביסה שטוחות, #6&nbsp;</td><td>638977 הום דיפו</td><td></td><td>לבניית כלובי פאראדיי</td></tr><tr><td>מולטימטר דיגיטלי Fluke 15B+, ליישומים חשמליים, מודד מדידות מתח וזרם AC/DC עד 1000V ו-10A, יחד עם יכולות התנגדות, המשכיות, דיודה וקיבול</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>לבדיקת כלוב</td></tr> <tr><td>פאראדיירדיו נייד AM FM, רדיו טרנזיסטור גודס עם רמקול חזק, שקע אוזניות, רדיו המופעל על ידי סוללה 2AA לקליטה לטווח ארוך, רדיו כיס לשימוש פנימי, חיצוני וחירום</td><td>Amazon.com</td><td></td> לבדיקת מסך הנחושת <td>הטהור של Faraday Cage</td></tr><tr><td>, רשת 16 x 16 בקוטר חוט 0.11, 36 אינץ' x 12'Metro</td> <td>Screenworks</td><td></td><td>עבור&nbsp; קירות כלוב פאראדיי</td></tr><tr><td>ברגי מכונה משולבת ראש עגול, #6-32 x 3/4 אינץ'</td> <td>הום דיפו</td><td>528466</td><td>לבניית כלוב פאראדיי</td></tr><tr><td>נייר חול, 1/2 אינץ' על 1 אינץ', 150 Grit</td><td>Home Depot</td><td>19036-20-CC</td><td>להסרת הצבע מתחתית מעמד המעבדה</td></tr><tr><td>פינות מסגרת מסך, 5/16 אינץ'&nbsp;</td><td>WCORN516</td> <td>הום דיפו</td><td>עבור&nbsp; קירות כלוב פאראדיי</td></tr><tr><td>ספליין מסך, 0.14 אינץ'&nbsp;</td><td>הום דיפו</td><td>3034719</td><td>עבור&nbsp; קירות כלוב פאראדיי</td></tr><tr><td><חזק>בדל חרקים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Brass Escutcheon Pins</td><td>הום דיפו</td><td>801294</td><td>לבניית בדלי-חרקים&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>חוטי נחושת,</td><td>Amazon.com</td><td></td> 20 AWG <td>לבניית בדלי-חרקים&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>שפעת מסיסה במים של האריס&nbsp;</td><td>הום דיפו</td><td>355398</td><td>לסיוע בהלחמה בציפוי חוט בדל החרקים ויצירת חיבור חזק</td></tr><tr><td>צבת אף מחט</td><td>הום דיפו</td><td></td><td>לכיפוף חוט בעת בניית בדלי חרקים</td></tr><tr><td>ערכת Pro 900-015 עזרה לידיים עזר הלחמה</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>להחזקת סיכות אסכוך במהלך הלחמה</td></tr><tr><td>הלחמה (עם ליבת רוזין)</td><td>הום דיפו</td><td>296497</td><td>לבניית בדלי-חרקים&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>כלי חשפנית חותך תיל</td><td>הום דיפו</td><td></td><td>להפשטה וחיתוך חוטי נחושת בעת בניית בדלי חרקים</td></tr><tr><td>YIHUA 928D-III ברזל הלחמה, הספק גבוה 110W, תצוגה דיגיטלית מלאה ברזל הלחמה</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>לבניית בדלי חרקים; מגיע עם מעמד, ספוג וצמר פלדה לניקוי</td></tr><tr><td><חזק>שואב חרקים</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Accuris ASPIRE מעבדה שואב</td><td>מכשירי Accuris</td><td>V0020</td><td>להפעלת יניקה על שואב החרקים; כולל את בקר הוואקום הידני, מתאם הנירוסטה בעל הקצה העדין (40 מ"מ), ומתאם קצה הפיפטה</td></tr><tr><td>Chemglass Life Sciences Pasteur פיפטות,</td><td>NC0230004</td><td>פישר סיינטיפיק</td> באורך 5 3/4 אינץ' <td>לשימוש כשואב חרקים בעת חיווט יתושים</td></tr><tr><td>סרט חשמלי מסחרי ויניל חשמלי קלטת חשמל</td><td>הום דיפו</td><td></td><td>לחיבור פיפטת פסטר שהשתנתה לקו הוואקום</td></tr><tr><td>בד שירות כילה נגד יתושים, 10 x 10 ס"מ</td><td>מרובע Joann Fabrics</td><td>16651622</td><td>למניעת שאיבת יתושים לתוך משאבת הוואקום</td></tr><tr><td>Saint Gobain Performance Plastics Tube Tygon 1/4 x 7/16</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-206-8914</td><td>למעבר מהיר וקל בין פיפטות פסטר שונות ששונו</td></tr><tr><td>Thermo Scientific Nalgene HDPE ניתוקים מהירים (3/8 עד 7/16 אינץ'. תעודת זהות)</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>15-315B</td><td>למעבר מהיר וקל בין פיפטות פסטר שונות ששונו</td></tr> <tr><td>Silver Glue&nbsp; </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Elmer's דבק לבן רב תכליתי</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>להכנת דבק כסף</td></tr><tr><td>פתית כסף 99.9% טהור,&nbsp; 4-8 ומיקרו; m</td><td>ThermoFisher</td><td>786.09</td><td>להכנת דבק כסף</td></tr><tr><td>פתית כסף 99.95% טהור, 8-10 ומיקרו; m</td><td>Inframat Advanced Materials</td><td>47MR-12F</td><td>להכנת דבק כסף</td></tr> <tr><td>הרדמת חרקים</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2 ערכת בועות, 1000 מ"ל, #9 פקק גומי</td><td>FlyStuff</td><td>59-181</td><td>למניעת ייבוש חרקים בזמן השימוש במשטח הזבובים</td></tr><tr><td>Flypad&nbsp; מסגרת, גודל סטנדרטי</td><td>FlyStuff</td><td>59-118</td><td>למניעת נפילת יתושים ממשטח הזבובים</td></tr><tr><td>מברשת Flystation</td><td>FlyStuff</td><td>59-205</td><td>להפחתת חשמל סטטי בעת עבודה על משטח זבוב</td></tr><tr><td>Flystuff&nbsp; Flypad&nbsp; גודל סטנדרטי</td><td>FlyStuff</td><td>59-114</td><td>AKA "כרית הרדמה" להרדמת יתושים</td></tr><tr><td>משפך (קוטר 4 אינץ')Amazon.com</td><td></td><td></td> <td>לגז כוסות יתושים לפני העברתו לכרית הזבובים</td></tr><tr><td>זכוכית פלקסי או מכסה פלסטיק שטוח (חתוך לגודל)</td><td>הום דיפו</td><td>MC-27</td><td>לכיסוי כרית הזבובים אם היתושים מתחילים להתעורר</td></tr><tr><td>כיבוי צינור צינורות פלסטיק מהדקים במיקום יחיד ופתוח מתכוונן (מגוון 1/8 אינץ' עד 1/2 אינץ')</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>להפניית גז בין משטח הזבוב למשפך</td></tr><tr><td>חד שלבי וסת CO2</td><td>FlyStuff</td><td>59-142</td><td>לוויסות זרימת הגז מה-CO2 tank</td></tr><tr><td>" T&rdquo; מתאים לצינורות זיהוי 1/8 אינץ'</td><td>FlyStuff</td><td>59-123</td><td>לחיבור משטח הזבוב והמשפך למיכל CO2</td></tr><tr><td>צינורות, שקוף&nbsp;</td><td>FlyStuff</td><td>59-124C</td><td>לחיבור המשפך ומשטח הזבוב לווסת על מיכל ה-CO2 tank</td></tr><tr><td>חיווט חרקים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>שחור, (65 ליברות, 176 גרם/מ2) 8.5 אינץ' x 11 אינץ'</td> <td>Michael's Stores Inc.</td><td>327826</td><td>כדי להקל על הדמיית חוט זהב</td></tr><tr><td>נייר בנייה שחור מרובע 3.5 אינץ' x 4.0 אינץ'</td> <td>סיכות</td><td>956221</td><td>כדי להקל על הדמיית חוטי</td></tr><tr><td>זהב כדורי כותנה</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>לצום יתושים</td></tr><tr><td>קצף מלאכה #12 בלוק (3.1 ס"מ x 17.2 ס"מ x 30.2 ס"מ)</td> <td>ג'ואן בד וחנות יצירה</td><td>1941079</td><td>להחזקת יתושים חוטיים</td></tr><tr><td>סרט סטייה מתקן,</td><td>Amazon.com</td><td></td> שקוף <td>לאחסון חוטי זהב</td></tr><tr><td>מלקחיים אנטומולוגיה במשקל נוצה</td><td>Fisher Scientific</td><td>S72110</td><td>למניפולציה של חרקים</td></tr><tr><td>מלקחיים עדינים (FST by Dumont: #5 91150-20, Inox-Electronic)</td> <td>Fine Science Tools</td><td>91150-20</td><td>להכנת לולאת זהב בעת חיווט יתושים</td></tr><tr><td>מברשת צבע עדינה</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>למניפולציה של יתושים במהלך חיווט ו- EPG; חייב להיות בעל ידית פלסטיק או עץ אם משתמשים בו עבור EPG</td></tr><tr><td>צנרת העברה סטנדרטית עם קצה עדין, צרה, 5.8 מ"ל</td><td>תומאס סיינטיפיק</td><td>7761D21</td><td>להכנת דבק כסף</td></tr><tr><td>חוט זהב, 99.99% טהור, עובי 0.025 מ"מ</td><td>Goodfellow</td><td>AU005121</td><td>לחיווט יתושים</td></tr><tr><td>סיכות Minutien, קצה 0.2 מ"מ, 1 ס"מ</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9681411</td><td>למריחת דבק על היתושים</td></tr><tr><td>כוסות נייר&nbsp;</td>צינור <td></td><td>נייר קשיח</td><td>לצום יתושים&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>סגן סיכה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>50-996-811</td><td>להחזקת סיכת הזבובים במהלך חיווט חרקים</td></tr><tr><td>קופסת אחסון מפלסטיק עם מכסה (7 אינץ' x 9 אינץ' x 14 אינץ')</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>להובלת יתושים קוויים</td></tr><tr><td>זכוכית פלקסי או מכסה פלסטיק שטוח (חתוך לגודל)</td><td>הום דיפו</td><td>MC-27</td><td>לכיסוי כרית הזבובים אם היתושים מתחילים להתעורר</td></tr><tr><td>מלקחיים לסגירה עצמית</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>08-906</td><td>להחזקה ומניפולציה של חוטי זהב</td></tr><tr><td> גז דחוס</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2 </תת>גז</td><td>Matheson Gas</td><td></td><td>להרדמת יתושים עם משטח זבוב</td></tr><tr><td>פריטי מעבדה נפוצים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>שקיות חיטוי חד פעמיות Biohazard, 8 1/2 אינץ' x 11 אינץ'</td> <td>פישר סיינטיפיק</td><td>03-410-591</td><td>לסילוק יתושים הניזונים מדם</td></tr><tr><td>מבער בונסן או לפיד פרופאן</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>לשינוי פיפטות פסטר</td></tr><tr><td>סרט מעבדה צבעוני</td><td>דייגר מספק</td><td>EF9763R</td><td>לתיוג, הכנת דבק כסף ומלקחיים מיסוך</td></tr><tr><td>קצות פיפטות חד פעמיות, 1000 ומיקרו; ל</td>. <td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td></td><td>לציון מים בעת הכנת דבק כסף</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ דיסקציה</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td>לחיווט יתושים</td></tr><tr><td>בדיקת דיסקציה</td><td>NC9109673</td><td>מדעי פישר לערבוב&nbsp; ומריחת דבק כסף</td><td></td></tr><tr><td>בקבוק Erlenmeyer, 1000 מ"ל</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td></td><td>למניעת ייבוש חרקים בזמן השימוש</td></tr><tr><td>באתנול Flypad, 70%&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>04-355-122</td><td>לשיקום יתושים שנמלטו</td></tr><tr><td>צלחות פטרי מזכוכית</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>08-747B</td><td>להרדמת יתושים עם כפפות קרח</td></tr><tr><td></td><td>פישר סיינטיפיק</td><td></td><td>להגנה אישית</td></tr><tr><td>Kimwipes KimTech Science מותג מגבים עדינים למשימות&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>06-666</td><td>לריסוק יתושים</td></tr><tr><td>מעילי מעבדה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td></td><td>להגנה אישית</td></tr><tr><td>בקבוקי ספריי LiBa, בקבוקי ריסוס ריקים למילוי חוזר (אלכוהול בטוח)Amazon.com</td><td></td><td></td> <td>לשחזור יתושים שנמלטו</td></tr><tr><td>מוט ערבוב מגנטי, באורך 2 ס"מ</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td></td><td>לערבוב דבק כסף</td></tr><tr><td>פיפטה מכנית חד-ערוצית, 1000 ומיקרו; ל</td>. <td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td>13-690-032</td><td>להצעת מחיר מים בעת הכנת צינורות</td></tr><tr><td>מיקרוצנטריפוגה דבק כסף, 1.5 מ"ל</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td>780420</td><td>לאחסון דבק כסף</td></tr><tr><td>Parafilm M&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>50-998-944</td><td>לאיטום צינורות דבק</td></tr><tr><td>כסף ניילון נצמד</td><td>Amazon.com</td><td></td><td>לכיסוי בלוק הקצף</td></tr><tr><td>פיירקס 20 מ"ל</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td>07-250-051</td><td>לערבוב דבק כסף</td></tr><tr><td>חצי מיקרו איזון</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td>10-919-370</td><td>לשקילת דבק ופתית כסף</td></tr><tr><td>עט שארפי, Amazon.com</td><td></td><td></td> עדין <td>לתיוג</td></tr><tr><td>סכין גילוח חד קצה</td> מדעי <td>מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>71980</td><td>לניקוי דודי חרקים</td></tr><tr><td>פיפטות העברה חד פעמיות סטנדרטיות</td><td>פישר מדעי&nbsp;</td><td>133-711-7 מ"ל</td><td>להעברת דבק כסף לצינור אחסון&nbsp;</td></tr><tr><td>צלחת מוקפץ</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td></td><td>לערבוב דבק כסף</td></tr><tr><td>טיימר/שעון עצר</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td></td><td>לתזמון כמה זמן המארח נחשף לכל חרק</td></tr><tr><td>Ultrapure (18 M&Omega;) מים</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td></td><td>להכנת דבק כסף</td></tr><tr><td>מספריים שימושיים</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>08-945</td><td>לחיתוך חוטי זהב</td></tr><tr><td>מערבל מערבולת</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td></td><td>לערבוב דבק כסף</td></tr><tr><td>מחקר אורגניזמים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Culex tarsalis יתושים</td><td>USDA ARS Center for Grain and Animal Health Research במנהטן, KS</td><td></td><td>לשימוש כנבדקי מחקר</td></tr></tbody></table>

אלקטרו-פנטרוגרפיה ac-dc לחקר התנהגויות בדיקה ובליעה של יתושי culex tarsalis על ידי אדם

AC-DC Electropenetrography for the Study of Probing and Ingestion Behaviors of Culex tarsalis Mosquitoes on Human Hands

יתושים מעבירים פתוגנים המשפיעים לרעה על בריאות האדם ובעלי החיים. ניתן לנצל הבנה טובה יותר של הביולוגיה של הזנת הדם שלהם והאינטראקציות עם פונדקאים ופתוגנים כדי לפתח מטרות חדשות לשליטה במחלות המועברות על ידי יתושים. לרוע המזל, התנהגויות גישוש (כלומר, עקיצה) של יתושים אינן מובנות היטב מכיוון שהן מתרחשות בתוך רקמות המארח. כאן, מתואר הליך לא פולשני לשימוש באלקטרו-חדירה AC-DC (EPG) כדי לדמיין ולכמת בעקיפין התנהגויות האכלת יתושים על ידי רישום שינויים באותות חשמליים הנוצרים בעת חיטוט ובליעה על ידי אדם. חוטי זהב דקים מחוברים ליתושים באמצעות דבק כסף מוליך ומחוברים למכשיר ה- EPG. המארח האנושי מחזיק ביד בדיקת מתח מצע. גישוש המארח על ידי היתוש החוטי משלים את המעגל החשמלי, ואותות חשמליים נרשמים במחשב כ"צורות גל" שניתן למדוד ולספור לניתוח. מתודולוגיה זו שימשה לאפיון התנהגויות החיטוט והבליעה של יתושי Aedes aegypti ו-Culex tarsalis וניתן ליישם אותה על מיני יתושים אחרים. ניתן להשתמש ב-EPG כדי לחקור את ההשפעות של פתוגנים, קוטלי חרקים וגורמים אחרים על התנהגויות האכלת יתושים.

הקלטות AC-DC EPG של יתוש Cx. tarsalis במהלך הזנת דם מידיים של בני אדם (איור 4) הפיקו צורות גל ניתנות לפירוש המתאימות לניתוח ולפרסום27. צורות גל ניתנות לפירוש הכילו דפוסים חוזרים מובחנים שניתן היה לסווג למשפחות של צורות גל (טבלה 1 ו-איור 4), סוגים ותתי-סוגים, כאשר הדחיסה (המוגדרת ב-טבלה 2) והגבר התוכנה הותאמו בתוכנה לבדיקת צורות גל27,31. כל משפחות צורות הגל (J, K, L, M, N) והסוגים (L1, L2, M1, M2) שתוארו בעבר בהזנה של Ae. aegypti מידיים של בני אדם26 זוהו בצורות הגל שהופקו מהזנה של Cx. tarsalis מידיים של בני אדם, ובכך אומת תוקפן של השיטות המתוארות כאן. בנוסף, זוהו שלושה סוגי צורות גל חדשים (M3, N1, N2) ותתי-סוגים רבים של L1, L2, M1 ו-M227. בנוסף, נפילת המתח חזרה לקו הבסיס בעת נסיגת חלקי הפה מהמארח נקראה משפחת צורות גל W27.
שינוי שיטתי של הגדרות המכשיר (סוג הזרם ורמות Ri) תוך כדי ביצוע הפרוטוקולים המפורטים כאן, אפשר לקבוע את ההגדרות האופטימליות להקלטת הזנה של Cx. tarsalis על ידיים אנושיות, את המקורות החשמליים של כל גל, את משך הזמן הממוצע בשניות של בדיקות (probes) מלאות ולא מלאות לכל יתוש, ולביצוע השוואה סטטיסטית של משך הגל בשניות לכל חרק (WDI), מספר אירועי הגל לכל חרק (NWEI), ומשך הגל בשניות לכל אירוע לכל חרק (WDEI) בין ההגדרות השונות27. כמו כן, הופסקו יתושים במהלך גלים שונים ונבצעו להם נתיחות כדי לקבוע איזה גל נמצא במתאם עם בליעת דם27. מחקר דומה בוצע עבור Ae. aegypti תוך שימוש במתודולוגיה מקבילה26.
בשל טבעם הרגיש והמורכב של EPG, לא כל ההקלטות היו נקיות כמו אלה המוצגות ב-איור 4. חריגות גובה (Peaking out) (איור 3A,C), שינויים בהגברה של החומרה (איור 3A,C), חיווט לקוי (איור 3B), קיפול מיישר (rectifier foldover) בצורה J (איור 3C,C'), ורעש חשמלי (איור 3C,C') עוותו והסתירו לעיתים את גלי הwaveform, מה שהפך אותם לבלתי מתאימים לשימוש באיורים באיכות פרסום והקשה על הדירוג והניתוח. לפיכך, מומלץ להשקיע מאמץ מקדים בליטוש מיומנויות החיווט, אופטימיזציה של הגדרות ההגברה והמתח, כיוון ההיסט (offset) ובקרת רעשים חשמליים. באופן מעניין, קיפול מיישר נצפה רק במשפחת גלי הwaveform J עבור Cx. tarsalis (איור 3C,C') ולא חזר לאחר שההיסט כוון בתחילה, גם כאשר נעשה שימוש במיני יתושים אחרים (Ae. aegypti ו- Culex quinquefasciatus) (נתונים לא מוצגים). בנוסף, פתרון תקלות העלה כי הרעש החשמלי הבלתי נשלט המוצג ב-איור 3 (פאנלים C ו-C') נבע מכלוב פאראדיי פגום. ההקלטות שבוצעו בכלוב הפאראדיי הפגום עדיין היו שמישות, אך בעיות הרעש נפתרו כאשר נבנה כלוב פאראדיי משופר (איור 1B).
גם כאשר ננקטו כל אמצעי הזהירות והאופטימיזציות המוקדמות, שינויים קלים באיכות הצמדת האלקטרודה ליתוש וגורמים לא ידועים אחרים שעוותו את האות ושינו את יחס אות-רעש, הפכוו מדי פעם את התאמת הגבר החומרה (hardware gain) במהלך ההקלטה לנחוצה, וזאת כדי להבטיח שהאות יהיה בטווח הנראה ושרזולוציית הפסגות בכל צורת גל תהיה מספיקה לזיהוי ואפיון צורת הגל. למשך, התאמת הגבר החומרה במהלך ההקלטה עלולה להוביל לשינויי מתח פתאומיים (איור 3A, C), מה שהופך את צורות הגל לפחות מתאימות לפרסום, אך עדיין שמישות (במלואן או בחלקן) למדידה ולניתוח.
<img alt="דיאגרמות של שיווי משקל סטטי המראות ניתוח כוחות; הגרפים מדגישים את המשוואות ΣFx=0, ΣFy=0." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66877/66877fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="איור 4"> 
איור 4: צורות גל מייצגות מProbe של Culex tarsalis על יד אנושית, שהוקלטו עם Ri של 107 Ω תוך שימוש באות מופעל של 250 mV AC. שמות צורות הגל ברמת המשפחה (NP, J, K, L, M, W) מוצגים לאורך החלק העליון של כל פאנל. הפאנלים התחתונים מראים הגדלות של אזורים נבחרים בפאנל A. פאנלים מוכנסים מראים הגדלות של אזורים מצוינים. קנה המידה של הזמן וההגבר של התוכנה הם (A) 7.0 s/div,16x; (B) 1.0 s/div, 64x; (B') 0.2 s/div, 64x; (C) 1.0 s/div, 64x; (C') 0.2 s/div, 32x; (D) 1.0 s/div, 64x; (D') 0.2 s/div, 64x. קיצורים: AC = זרם חילופין, Ri = התנגדות כניסה, mV = מיליוולט, Ω = Ohms, s/div = שניות לחלוקה. איור זה הוכנה באמצעות נתונים מ-Cooper et al.27. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66877/66877fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

מתוארים נהלים לחקר התנהגויות החיטוט והבליעה של יתושי Culex tarsalis על ידי אדם באמצעות אלקטרו-חדירה AC-DC.

אלקטרו-פנטרוגרפיה AC-DC לחקר התנהגויות בדיקה ובליעה של יתושי Culex tarsalis על ידי אדם

Mosquitoes transmit pathogens that negatively affect human and animal health. A greater understanding of their blood-feeding biology and interactions with ...

ac-dc-electropenetrography-for-study-probing-ingestion-behaviors

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

התגובות של אלקטרו עצב סנסורי חוש הריח כדי odorants ניתן למדוד חרקים באמצעות הקלטות sensillum יחיד. במאמר זה הווידאו נדגים כיצד לבצע הקלטות sensillum אחת האנטנות של זבוב החומץ...

Sensillum הקלטות סינגל חרקים תסיסנית melanogaster ו אנופלס gambiae</em

השיטה במהירות המארחות נדיפים מסך צמחים ידי מדידת התגובה של אלקטרו orangeworm הטבור מבוגר...

המבדק Electroantennographic ככלי מיון עבור נדיפים צמחים מארח

באמצעות שתי שיטות להערכת ביטוי גנים בנספחים התעוררו אצל הגדולים של Aedes aegypti, זיהינו הקבוצה של גני putatively בסיס התגובות עצביות לתרכובות מרות ודוחות, כפי שנקבע על ידי בדיקת אלקטרו.

הקלטות פיסיולוגיות וRNA רצף של האיברים התעוררו אצל של יתוש הקדחת הצהובה Aedes aegypti

עבור שליטה יעילה של יתוש נישאים וירוס שידור, הידע של פוטנציאל וקטורי של יתושים בהתאמה הוא עניין מיוחד. אנו מתארים ריור בכפייה כשיטה לנתח מיומנות וקטור של אדס , שלושה taxa כולכית שונים להעברת Zika וירוס.

הכריחו ריור כשיטה לנתח מיומנות וקטור של יתושים

הפרוטוקול המוצג יכול לקבוע את היכולת הווקטורית של אוכלוסיות יתושים Aedes aegypti עבור וירוס נתון, כגון זיקה, במסגרת בלימה.

וקטור יכולת ניתוחים על יתושים Aedes aegypti באמצעות וירוס זיקה

פרוטוקול זה מתאר מתודולוגיות מאחורי בדיקת רמזי, מיקרואלקטרודים סלקטיביים יונים, סריקת טכניקת אלקטרודה סלקטיבית יון (SIET) ובדיקות התכווצות במבחנה, המיושמים לחקר מערכת הפרשת היתושים הבוגרת, המורכבת מצינורות Malpighian והינדגוט, כדי למדוד באופן קולקטיבי שיעורי הפרשת יונים ונוזלים, פעילות התכווצות והובלת יונים טרנס-אפיתל.

חקר הפעילות של נוירופפטידים ורגולטורים אחרים של מערכת ההפרשה יתוש למבוגרים

המאמר הנוכחי מפרט פרוטוקול שלב אחר שלב לאלקטרואנטנוגרמות מוצלחות ובעלות רעש נמוך במספר סוגים של יתושים, כולל נקבות וזכרים כאחד.

מדריך שלב אחר שלב לאלקטרואנטנוגרפיה של יתושים

מחקרים כמותיים ומבוקרים של התנהגויות עקיצת חרקים חיוניים לגיבוש אסטרטגיות יעילות למאבק במחלות המועברות על ידי וקטורים. בהקשר זה מוצגת שיטה לייצור מיקרוסקופ כוח אטומי ביו-היברידי (AFM).

פיתוח גשושית ביו-היברידית מבוססת מיקרוסקופ כוח אטומי מבוסס יתושים

בדיקת רגישות חזותית לטאות באמצעות פרדיגמה התניה אופרנטית המעסיקה וידאו השמעה אקראית של נקודה kinematograms ו ממוחשבת חסרי חוליות.

בדיקת רגישות חזותית על מהירות ועל כיוון התנועה של לטאות

מחשב שנוצר באמצעות גירויים הדרקון ג'קי כמודל.

מחשב שנוצר מודל החיה גירויים

חקור התנהגויות בדיקה ובליעה של יתושי Culex tarsalis באמצעות אלקטרו-פנטרוגרפיה AC-DC על ידי אדם. שיטה זו מאפשרת לחקור את מנגנוני העברת הנגיפים ללא פגיעה בחרקים.

אלקטרו-פנטרוגרפיה AC-DC לחקר התנהגויות בדיקה ובליעה של יתושי Culex tarsalis על ידי אדם

גלה סרטונים נוספים