מודל מתח חברתי משולב מרובה להפרעות פסיכיאטריות בעכברי C57BL/6J נקבות

מחקר זה נועד להבין כיצד לחץ חברתי כרוני מוביל לתסמינים פסיכיאטריים אצל עכברים נקבות על ידי ביסוס מודל לחץ חברתי רב-משולב. רוב המודלים הקיימים כיום להפרעות פסיכיאטריות הוקמו באמצעות בעלי חיים זכרים. פרוטוקול זה מציג מודל עכבר חדש שנועד לחקור הפרעות אלה בעכברים נקבות. מחקר זה פיתח מודל אמין של בעלי חיים המאפשר לנו לחקור את המנגנונים הנוירופיזיולוגיים העומדים בבסיס הפרעות פסיכיאטריות בעכברים נקבות.

[קריין] כדי להתחיל, הניחו צינור אקרילי באורך 10 ס"מ ובקוטר פנימי של 26 מילימטר בכל כלוב של עכברי נבדק ומועמדים לזכייה כדי לאפשר להם להתאקלם וללמוד לעבור דרכו במשך שלושה ימים. כדי לאמן עכברים לתחרות צינורות, תפסו בעדינות את הזנב של כל עכבר והניחו אותו על השולחן. לאחר מכן, החזק את העכבר בזנב והנח אותו בקצה אחד של הצינור. שחרר את הזנב ברגע שהעכבר נכנס לצינור ואפשר לו לעבור מרצון. כעת, הנח את העכבר בקצה הנגדי של הצינור וחזור על אותו הליך. לאחר חזרה על כל התהליך פעם נוספת, החזר את העכבר לכלוב הביתי שלו. להקרנה מנצחת, הכינו צינור אקרילי באורך 30 ס"מ ובקוטר פנימי של 26 מילימטר וציירו קו אמצעי גלוי על הצינור. החזיקו את שני העכברים המועמדים המנצחים בזנבותיהם והניחו אותם בקצוות מנוגדים של הצינור. אפשרו להם להיכנס ולהיפגש בנקודת האמצע, ואז שחררו אותם בו זמנית והפעילו את הטיימר. זהה את המנצח כעכבר שדוחף את השני החוצה מהצינור והעניק לו נקודה אחת. החזירו את שני העכברים לכלוב הביתי שלהם. דרג את העכברים על סמך הציונים הכוללים שלהם. לבדיקת תוקפן CD1, הנח עכבר זכר C57 ישירות לכלוב הביתי של זכר CD1 למשך שלוש דקות. רשום את ההשהיה להתקפה הראשונה, את מספר ההתקפים ואת משך ההתנהגויות התוקפניות בפרק הזמן של שלוש הדקות כאינדיקטורים לאגרסיביות, וחזור על הליך הסינון למשך יומיים נוספים. עבור כישלון התחרות החברתית, הצב עכבר מתח חברתי משולב מרובה או עכבר MISS ועכבר מנצח בקצוות מנוגדים של הצינור, כך שהם ילכו קדימה ויפגשו בנקודת האמצע. עכבר ה-MISS יידחף החוצה מהצינור על ידי המנצח. החלף את המיקומים של שני העכברים וחזור על האינטראקציה. לאחר מכן, החזירו גם את עכברי ה-MISS וגם את העכברים הזוכים לכלובי הבית שלהם. עבור מודלים של תבוסה חברתית עקיפה, הניחו עכבר מיס נקבה בתוך כלוב של תוקף CD1, מוגבל מתחת לכיסוי אקרילי מחורר כדי לאפשר התבוננות עקיפה באינטראקציות אגרסיביות. הכניסו עכבר פולש C57 זכר לכלוב כדי להיות מותקף פיזית על ידי עכבר CD1 למשך 10 דקות. לאחר 10 דקות, הסר את הפולש הזכר ואפשר לעכבר ה-MISS הנקבה וחמש דקות נוספות של חשיפה חושית לעכבר CD1. לאחר חמש דקות, החלף את עכבר ה-CD1 בעכבר פולש C57 זכר חדש, וחזור על כל ההליך שלוש פעמים. לאחר מכן, החזר את עכבר ה-MISS לכלוב הביתי שלו. לאחר מכן, כדי להדגים מתח צפיפות בלתי נמנע, הניחו שרוול אטום בתוך כלוב סטנדרטי המכיל מצעים. הכניסו לשרוול 12 עד 15 עכברים, כולם עכברי MISS או מעורבבים עם נקבות אחרות למשך 30 דקות מדי יום. לבידוד חברתי, יש לשכן עכברי MISS בנפרד כאשר הם אינם עוברים כישלון בתחרות חברתית, לחץ תבוסה עקיפה או לחץ צפיפות למשך שארית תקופת הדוגמנות של 10 ימים. מבחן העדפת הסוכרוז, המעריך אנהדוניה על ידי מדידת העדפה לתמיסה מתוקה על פני מים, הראה כי העדפת הסוכרוז הייתה נמוכה משמעותית בעכברים שנחשפו ל-MISS בהשוואה לבקרות נאיביות. צריכת הנוזלים הכוללת במבחן העדפת הסוכרוז, כולל מים וסוכרוז, לא הייתה שונה באופן משמעותי בין MISS לעכברים נאיביים, מה שמצביע על כך שהעדפת הסוכרוז המופחתת לא נבעה מצריכת נוזלים שונה. מבחן השעיית הזנב, המעריך ייאוש התנהגותי על ידי מדידת חוסר תנועה פסיבי, גילה כי לעכברים שנחשפו ל-MISS היו זמני חוסר תנועה ארוכים משמעותית מאשר לעכברים נאיביים. בנוסף, מבחן השדה הפתוח ששימש להערכת חרדה על ידי מדידת הזמן ששהו במרכז זירה פתוחה הראה שעכברים שנחשפו ל-MISS בילו פחות זמן באזור המרכזי בהשוואה לעכברים נאיביים. מבוך הפלוס המוגבה, המודד חרדה באמצעות הימנעות מזרועות פתוחות, הראה כי עכברים שנחשפו ל-MISS בילו פחות זמן בזרועות פתוחות מאשר קבוצת ביקורת נאיבית.