Name: תרבית גליה אנטרית סוסים ויישום לחקר מנגנון דלקתי עצבי בקוליק סוסים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 7 s
Description: למד שיטה לבידוד תאי גליה אנטרית ממעי סוסים לחקר השפעתם על תפקוד מחסום מעי וסיבוכים דלקתיים לאחר ניתוח קוליק. פרוטוקול זה מסייע בפיתוח טיפולים אנטי-דלקתיים לשיפור בריאות סוסים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>חקר אינטראקציות גליה-אפיתל אנטרי בדלקת הקשורה לכאבי בטן

<ol><li>Tinker, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prospective+study+of+equine+colic+incidence+and+mortality%5BTitle%5D)+AND+%22Equine+Vet+J%22%5BJournal%5D)">Prospective study of equine colic incidence and mortality.</a> Equine Vet J. 29 (6), 448-453 (1997).</li>
<li>Morton, A. J., Blikslager, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+and+postoperative+factors+influencing+short-term+survival+of+horses+following+small+intestinal+resection%3A+92+cases+%281994-2001%29%5BTitle%5D)+AND+%22Equine+Vet+J%22%5BJournal%5D)">Surgical and postoperative factors influencing short-term survival of horses following small intestinal resection: 92 cases (1994-2001).</a> Equine Vet J. 34 (5), 450-454 (2002).</li>
<li>French, N. P., Smith, J., Edwards, G. B., Proudman, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Equine+surgical+colic%3A+risk+factors+for+postoperative+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Equine+Vet+J%22%5BJournal%5D)">Equine surgical colic: risk factors for postoperative complications.</a> Equine Vet J. 34 (5), 444-449 (2002).</li>
<li>Lisowski, Z. M., Lefevre, L., Mair, T. S., Clark, E. L., Hudson, N. P. H., Hume, D. A., Pirie, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+quantitative+real-time+PCR+to+determine+the+local+inflammatory+response+in+the+intestinal+mucosa+and+muscularis+of+horses+undergoing+small+intestinal+resection%5BTitle%5D)+AND+%22Equine+Vet+J%22%5BJournal%5D)">Use of quantitative real-time PCR to determine the local inflammatory response in the intestinal mucosa and muscularis of horses undergoing small intestinal resection.</a> Equine Vet J. 54 (1), 52-62 (2022).</li>
<li>Sheats, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+review+of+equine+SIRS%2C+sepsis%2C+and+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">A comparative review of equine SIRS, sepsis, and neutrophils.</a> Front Vet Sci. 6, 69(2019).</li>
<li>Mazzotta, E., Villalobos-Hernandez, E. C., Fiorda-Diaz, J., Harzman, A., Christofi, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postoperative+ileus+and+postoperative+gastrointestinal+tract+dysfunction%3A+pathogenic+mechanisms+and+novel+treatment+strategies+beyond+colorectal+enhanced+recovery+after+surgery+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharm%22%5BJournal%5D)">Postoperative ileus and postoperative gastrointestinal tract dysfunction: pathogenic mechanisms and novel treatment strategies beyond colorectal enhanced recovery after surgery protocols.</a> Front Pharm. 11, 583422(2020).</li>
<li>Stoffels, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postoperative+ileus+involves+interleukin-1+receptor+signaling+in+enteric+glia%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Postoperative ileus involves interleukin-1 receptor signaling in enteric glia.</a> Gastroenterology. 146 (1), 176-187 (2014).</li>
<li>Yu, Y. B., Li, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enteric+glial+cells+and+their+role+in+the+intestinal+epithelial+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Enteric glial cells and their role in the intestinal epithelial barrier.</a> World J Gastroenterol. 20 (32), 11273-11280 (2014).</li>
<li>Savidge, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enteric+glia+regulate+intestinal+barrier+function+and+inflammation+via+release+of+S-nitrosoglutathione%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Enteric glia regulate intestinal barrier function and inflammation via release of S-nitrosoglutathione.</a> Gastroenterology. 132 (4), 1344-1358 (2007).</li>
<li>Stewart, A. S., Freund, J. M., Gonzalez, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+three-dimensional+culture+of+equine+intestinal+epithelial+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Equine+Vet+J%22%5BJournal%5D)">Advanced three-dimensional culture of equine intestinal epithelial stem cells.</a> Equine Vet J. 50 (2), 241-248 (2018).</li>
<li>Hellman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+equine+enteroids+and+enteroid-derived+2D+monolayers+that+are+responsive+to+microbial+mimics%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Generation of equine enteroids and enteroid-derived 2D monolayers that are responsive to microbial mimics.</a> Vet Res. 52 (1), 108(2021).</li>
<li>Al-Sadi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-6+modulation+of+intestinal+epithelial+tight+junction+permeability+is+mediated+by+JNK+pathway+activation+of+claudin-2+gene%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Interleukin-6 modulation of intestinal epithelial tight junction permeability is mediated by JNK pathway activation of claudin-2 gene.</a> PLoS One. 9 (3), e85345(2014).</li>
<li>Ochoa-Cortes, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enteric+glial+cells%3A+A+new+frontier+in+neurogastroenterology+and+clinical+target+for+inflammatory+bowel+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Inflamm+Bowel+Dis%22%5BJournal%5D)">Enteric glial cells: A new frontier in neurogastroenterology and clinical target for inflammatory bowel diseases.</a> Inflamm Bowel Dis. 22 (2), 433-449 (2016).</li>
<li>Ziegler, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enteric+glial+cell+network+function+is+required+for+epithelial+barrier+restitution+following+intestinal+ischemic+injury+in+the+early+postnatal+period%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Enteric glial cell network function is required for epithelial barrier restitution following intestinal ischemic injury in the early postnatal period.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 326 (3), G228-G246 (2024).</li>
<li>Grubišić, V., Gulbransen, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enteric+glia%3A+the+most+alimentary+of+all+glia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Enteric glia: the most alimentary of all glia.</a> J Physiol. 595 (2), 557-570 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 מ' מאגר HEPES</td><td>Gibco</td><td>15630-080</td><td></td></tr><tr><td>10 מ"מ HEPES</td><td>Life Technologies</td><td>15630-106</td><td></td></tr><tr><td>2 מ"מ GlutaMAX</td><td>Life Technologies</td><td>25050-061</td><td></td></tr><tr><td>4' 6-Diaminidino-2-Phenylindol</td><td>Invitrogen</td><td>D3571</td><td></td></tr><tr><td>Advanced DMEM/F12</td><td>Life Technologies</td><td>12634-010</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן אקטין שריר חלק</td><td>אלפא Abcam</td><td>7817</td><td></td></tr><tr><td>Amphotericin B</td><td>Sigma</td><td>AA9529</td><td>4.4 גרם/מ"ל מניות, ריכוז סופי 1.1 ומיקרו; גרם/מ"ל</td></tr><tr><td>אנטי אנטי-מיקרוקוטי 1x</td><td>Gibco</td><td>15240-096</td><td></td></tr><tr><td>B27</td><td>Gibco</td><td>12587010</td><td></td></tr><tr><td>בקר סרום אלבומין</td><td>סיגמא</td><td>AA3311</td><td></td></tr><tr><td>BSA 50 מ"ג/מ"ל תמיסת מלאי</td><td>סיגמא</td><td>A3311</td><td></td></tr><tr><td>CaCL2</td><td>ACROS אורגניים</td><td>206791000</td><td>רכיב של צלצול סוסים ' s מלאי 1: שלב עם מרכיבים אחרים, ואז הוסף 100 מ"ל מהציר הזה לגליל מדורג ודלל ל -1 ליטר במים נטולי יונים. התאימו את ה-pH ל-7.4 עם 5% CO2. שלבו עם צלצול סוסים' s מלאי 2 כדי להשלים " צלצול" s פתרון".</td></tr><tr><td>קולגנאז</td><td>סיגמא</td><td>9891</td><td></td></tr><tr><td>DMEM-F12 מדיה</td><td>תרמו פישר</td><td>11320033</td><td></td></tr><tr><td>חמור נגד ארנב IgG Alexa Fluor 594</td><td>Invitrogen</td><td>21207</td><td></td></tr><tr><td>EVOM EndOhm תא מדידת אלקטרודה כפולה תא מדידת TEER</td><td>World Precision Instruments</td><td>EVM-EL-03-01</td><td></td></tr><tr><td>EVOM מדריך למדידת TEER</td><td>מכשירי דיוק עולמיים</td><td>EVM-MT-03-01</td><td></td></tr><tr><td>G5</td><td>Gibco</td><td>17503012</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת Gentamicin</td><td>Sigma</td><td>G1272</td><td>ריכוז סופי 20 ומיקרו; g/mL</td></tr><tr><td>נוגדן GFAP</td><td>Abcam</td><td>4674</td><td></td></tr><tr><td>עיזים נגד עכבר IgG Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>28175</td><td></td></tr><tr><td>IL-1&beta; ELISA</td><td>Thermo Fisher</td><td>ESIL1B</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Thermo Fisher</td><td>P330-500</td><td>רכיב של Equine Ringer' s מלאי 1: שלב עם מרכיבים אחרים, ואז הוסף 100 מ"ל מהציר הזה לגליל מדורג ודלל ל -1 ליטר במים נטולי יונים. התאימו את ה-pH ל-7.4 עם 5% CO2. שלבו עם צלצול סוסים' s מלאי 2 כדי להשלים " צלצול" s פתרון".</td></tr><tr><td>תמיסת L-גלוטמין</td><td>Corning</td><td>25-00-Cl</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>BD Bioscience</td><td>354277</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2</td><td>Thermo Fisher</td><td>M33-500</td><td>רכיב של Equine Ringer' s מלאי 1: שלב עם מרכיבים אחרים, ואז הוסף 100 מ"ל מהציר הזה לגליל מדורג ודלל ל -1 ליטר במים נטולי יונים. התאימו את ה-pH ל-7.4 עם 5% CO2. שלבו עם צלצול סוסים' s מלאי 2 כדי להשלים " צלצול" s פתרון".</td></tr><tr><td>N2</td><td>Gibco</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>Thermo Fisher</td><td>BP332-1</td><td>רכיב של צלצול סוסים' s מלאי 2: שלב עם מרכיבים אחרים, ואז הוסף 100 מ"ל מהציר הזה לגליל מדורג ודלל ל -1 ליטר במים נטולי יונים. התאימו את ה-pH ל-7.4 עם 5% CO2. שלבו עם צלצול סוסים' s מלאי 1 כדי להשלים " צלצול" s פתרון".</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Thermo Fisher</td><td>S271-10</td><td>רכיב של Equine Ringer' s מלאי 1: שלב עם מרכיבים אחרים, ואז הוסף 100 מ"ל מהציר הזה לגליל מדורג ודלל ל -1 ליטר במים נטולי יונים. התאימו את ה-pH ל-7.4 עם 5% CO2. שלבו עם צלצול סוסים' s מלאי 2 כדי להשלים " צלצול" s פתרון".</td></tr><tr><td>NaH2PO4</td><td>Thermo Fisher</td><td>BP329-500</td><td>רכיב של Equine Ringer' s מלאי 2: שלב עם מרכיבים אחרים, ואז הוסף 100 מ"ל מהציר הזה לגליל מדורג ודלל ל -1 ליטר במים נטולי יונים. התאימו את ה-pH ל-7.4 עם 5% CO2. שלבו עם צלצול סוסים' s מלאי 1 כדי להשלים " צלצול" s פתרון".</td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Thermo Fisher</td><td>S637-212</td><td>רכיב של Equine Ringer' s מלאי 2: שלב עם מרכיבים אחרים, ואז הוסף 100 מ"ל מהציר הזה לגליל מדורג ודלל ל -1 ליטר במים נטולי יונים. התאימו את ה-pH ל-7.4 עם 5% CO2. שלבו עם צלצול סוסים' s מלאי 1 כדי להשלים " צלצול" s פתרון".</td></tr><tr><td>תמיסת עט/סטרפטוקוקוס</td><td>ג'מיני</td><td>400-109</td><td></td></tr><tr><td>פולי-L-ליזין</td><td>סיגמא</td><td>P2636</td><td>0.5 מ"ג/מ"ל במאגר בוראט 1x</td></tr><tr><td>תוכנת פריזמה</td><td>GraphPad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פרוטאז</td><td>סיגמא</td><td>P4630</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת נתרן ביקרבונט</td><td>סיגמא</td><td>S8761</td><td>7.5% תמיסת מלאי</td></tr></tbody></table>

תרבית גליה אנטרית סוסים ויישום לחקר מנגנון דלקתי עצבי בקוליק סוסים

Equine Enteric Glial Culture and Application to the Study of a Neural Inflammatory Mechanism in Equine Colic

מיקרודיסקציה של סוסים ג'ג'ונום לשכבה התת-רירית (איור 1) עם עיכול אנזימטי ומכני נוסף, יכולה לייצר תרביות תאים בנות קיימא של גליה אנטרית של סוסים. התאים הדגימו פלומורפיזם עם דומיננטיות של תאים בצורת ציר התואמים את הגליה האנטרית של מינים אחרים (איור 2A). התרביות היו חיוביות עבור סמן גליה סלקטיבי, חלבון גליה פיברילרי חומצי (GFAP), עם זיהום פיברובלסטים נמוך (אלפא SMA, איור 2B). במקרים מסוימים, מיקרודיסקציה של השכבות התת-ריריות לא נשלטה במידה גבוהה מספיק, ותרביות היו מזוהמות באחוזים גבוהים של פיברובלסטים שנצפו באמצעות אימונופלואורסנציה של סמן פיברובלסט אקטין שריר חלק (איור 3).
לאחר מכן, כדוגמה לתועלת של תרבית גליה אנטרית סוסים, הוערכה ההשפעה של גליה אנטרית החשופה ל- IL-1β על תפקוד מחסום האפיתל של המעי. חשיפה בזולטרלית למדיה מתרבית גליה אנטרית תת-רירית של סוסים שנחשפה ל-10 ננוגרם ו-25 ננוגרם IL-1β במשך 24 שעות הגדילה משמעותית את החדירות (p = 0.05 ו-0.04, בהתאמה, ממוצע מדיית בקרה = 0.9, ממוצע קבוצת גליה 10 ng IL-1β = 0.8, רווח בר-סמך 95% = -0.2 עד 0.02, ממוצע קבוצת גליה 25 ng IL-1β = 0.8, רווח בר-סמך של 95% = -0.1995 עד 0.01060, n = 3-4) (איור 4A). עם זאת, חשיפה של חד-שכבות אפיתל של סוסים ל-IL-6 של סוסים בזולטרליים של 10-25 ננוגרם, ציטוקין דלקתי שהודגם גם כמיוצר על-ידי גליה אנטרית שנחשף ל-IL-1β וגם כגורם לחדירות מוגברת של אנטרוציט במודלים של מכרסמים12, לא הגדילה באופן משמעותי את החדירות החד-שכבתית של אנטרוציט סוסים (איור 4B)
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67244/67244fig01.jpg"> איור 1: בידוד של גליה אנטרית מג'ג'ונום של סוסים על-ידי מיקרודיסקציה ועיכול אנזימטי ומכני. (A) הג'ג'ונום נחתך לאורך הגבול האנטיאנטרי ונעץ את הרירית כלפי מעלה. (B) וילי המעי הודגם במיקרוסקופ והוסר עם גירוד עדין עד להדמיה של למינה פרופריה דקיקה. (C) שכבת הלמינה פרופריה הוסרה עד שסיבי השריר החלקים נראו רק דרך הרירית השקופה. (D) התת-רירית אוהלה וקולפה בחזרה מהשכבה השרירית, תוך ביצוע חתכים לתגים סיביים לפי הצורך. התמונות התקבלו במיקרוסקופ דיסקציה 10x (B,C). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67244/67244fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67244/67244fig02.jpg"> איור 2: הדמיה של תרביות גליה אנטרית תת-רירית של סוסים. (A) המורפולוגיה של הסטלט (חיצים), פוזיפורם (ראש חץ פתוח) והגנגליונים (ראש חץ סגור) של הגליה האנטרית של הסוסים הוערכה באמצעות מיקרוסקופ ניגודיות פאזה. (B) טוהר התרביות הוערך על ידי צביעה עבור GFAP, ועבור סמן פיברובלסט, אקטין שריר חלק מוטות סולם = 100 מ"מ (A), 400 מ"מ (B). קיצורים: GFAP = חלבון גליה פיברילרי חומצי; DAPI = 4',6-diamidino-2-phenylindole. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67244/67244fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67244/67244fig03.jpg"> איור 3: הדמיה של תרביות גליה אנטרית תת-רירית של סוסים שלא הצליחו. טוהר התרביות הוערך על ידי צביעה עבור GFAP (אדום), ועבור סמן פיברובלסט, אקטין שריר חלק (ירוק), המדגים אחוז גדול של זיהום פיברובלסט. ראש חץ צהוב מציין GFAP ואקטין שריר חלק של ראש חץ לבן. סרגל קנה מידה = 400 מ"מ. קיצור: GFAP = חלבון גליה פיברילרי חומצי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67244/67244fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67244/67244fig04.jpg"> איור 4: שכבת TEER חד-שכבתית של אפיתל סוסים בעקבות חשיפה לציטוקינים דלקתיים ולתוצרי גלייה דלקתיים. (A) חשיפה בזולטרלית למדיה מתרבית גליה אנטרית תת-רירית של סוסים, שנחשפה ל-10 ננוגרם ו-25 ננוגרם של IL-1β במשך 24 שעות, הגדילה משמעותית את החדירות (*p = 0.05 ו-0.04, בהתאמה, n = 3-4). (B) חשיפה חד-שכבתית של סוסים אנטרוציט ל-25 ננוגרם של IL-1β ו-10-25 ננוגרם של סוס IL-6 לא הגדילה באופן משמעותי את החדירות החד-שכבתית של אפיתל הסוסים (n = 2-4). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67244/67244fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
טבלה 1: ריאגנטים לבידוד ולתרבות. הריאגנטים הבאים שימשו לגיבוש מדיה לבידוד גליה אנטרית של סוסים, תרבית גליה אנטרית ותרבית תאי גזע אפיתל של מעי סוסים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67244/67244_Table%201_rev.xlsx" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד טבלה זו.</a>

Inflammatory postoperative conditions of equine colic (acute abdomen) contribute not only to increased client cost, patient discomfort, and ...

equine-enteric-glial-culture-application-to-study-neural-inflammatory

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנחנו מציגים את שיטה חדשה לשמירה על רירית מעי אנושית בתרבות ובניטור של התגובה לסוגים שונים של גירויים על פני לפחות 24 שעות. בשיטה שלנו, את הקוטביות של הרקמה נשמר, מה שמאפשר לגירוי פיסיולוגי דרך מסלול הפסגה.

שיטה חדשה לתרבות והמקוטבת גירוי של רירית המעי Explants אדם

סרטון זה מדגים שיטה לבידוד תאי גליה אנטריים מהתת-רירית והלמינה פרופריה של מעי העכבר. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בחילוץ רקמה תת-רירית ולמינה פרופריה, בידוד תאי הגליה האנטרית מהם, וטיפוח התאים על צלחת באר מצופה כדי להקים תרבית תאי גליה אנטריים.

בידוד תאי גליה אנטריים מהתת-רירית והלמינה פרופריה של עכבר

אנו מדגימים פרוטוקול תרבית תאים למחקר הישיר של רכיבים עצביים וגליה של מערכת העצבים enteric. נוירון / תרבות מעורבת גליה על coverslips מוכן ממקלעת myenteric של עכבר בוגר מתן היכולת לבחון נוירון בודד ופונקציה על ידי גליה electrophysiology,...

<em&gt; חוץ גופייה</em&gt; הכנה של נוירונים enteric המבודדים וגליה ממקלעת Myenteric של העכבר הבוגר

פלסטיות עצבית היא תכונה מוכרת יותר ויותר, אבל הבינה מספיק של מערכת העיכול (GI). כאן, בדוגמא של הפרעות לבלב אנושיות, אנו מציגים assay neuroplasticity במבחנה לחקר פלסטיות עצבית במערכת העיכול ברמה שני מורפולוגיים ופונקציונלית.

הדמיית הלבלב Neuroplasticity:<em&gt; במבחנה</em&gt; Dual-נוירון פלסטיות Assay

תאים גלובואידים הם מאפיין פתולוגי מגדיר של מחלת קראב, לויקודיסטרופיה שכיום חסר טיפול יעיל לטווח ארוך. פיתחנו מודל תרבית תאים כדי לחקור את הביולוגיה המולדת והפוטנציאל הפתוגני של מיקרוגליה מופעלת והפיכתם לתאים גלובואידים.

במבחנה דגם לחקר נייד פתופיזיולוגיה בLeukodystrophy הסלולרי Globoid

מערכת העצבים המעי (ENS) היא רשת של נוירונים וגליה הממוקמת בדופן המעי ושולטת ברפלקסים של המעי. פרוטוקול זה מתאר שיטות לרישום הפעילות של נוירונים מעיים וגליה בתכשירים חיים של ENS באמצעות הדמיית Ca2+.

בהדמיה 2 + Ca Situ של מערכת העצבים המעיים

מערכת העצבים המעי נוצרת על ידי תאי פסגה עצבית שמתרבים, נודדים ומתיישבים במעיים. תאי פסגה עצבית מתמיינים לנוירונים עם סמנים ספציפיים לפנוטיפ המוליך העצבי שלהם. פרוטוקול זה מתאר טכניקה לניתוח, קיבוע וצביעה חיסונית של מערכת העיכול העוברית של העכברים כדי להמחיש ביטוי נוירוטרנסמיטר של מערכת העצבים המעי.

Immunostaining לדמיין פיתוח מערכת עצבים Murine מעיים

מאמר זה מתאר טכניקת הדמיית וידאו ומיפוי מרחבי-זמני ברזולוציה גבוהה לזיהוי שינויים בוויסות העצבי של תנועתיות המעי הגס בעכברים בוגרים. ניתן לזהות השפעות עדינות על תפקוד מערכת העיכול באמצעות גישה זו בתכשירי רקמות מבודדים כדי לקדם את ההבנה שלנו לגבי מחלות מערכת העיכול.

הדמיה וידאו ומפות Spatiotemporal לנתח תנועתיות מערכת העיכול של עכברים

תפקוד חושי חריג ביסוד הקרביים כאב ותסמינים אחרים של מחלות מעיים דלקתיות פונקציונלי. פרוטוקול עבור ההקלטה אלקטרופיזיולוגיות של העצבים מביא חוקן בהכנה ex-vivo עכברוש colorectum מוצג כאן.

במבחנה אפיון של המאפיינים אלקטרופיזיולוגיות של סיבי מביא שטיפת המעי הגס בחולדות

כאן, אנו מתארים את ניתוקה של המעית-גלייה מ המעי-submucosa באמצעות incubations EDTA רציפים כדי chelate קטיונים דו ערכיים ולאחר מכן הדגירה ב פתרון שחזור תאים שאינם אנזימטיות. ציפוי התליה תא תוצאות על פולי-D-ליזין ו- laminin תוצאות בתרבות מועשר של תאי גליה submucosal לניתוח פונקציונלי.

בידוד תאי גליה המעית מן Submucosa פרופריה. מוסקולריס של העכבר למבוגרים

למד שיטה לבידוד תאי גליה אנטרית ממעי סוסים לחקר השפעתם על תפקוד מחסום מעי וסיבוכים דלקתיים לאחר ניתוח קוליק. פרוטוקול זה מסייע בפיתוח טיפולים אנטי-דלקתיים לשיפור בריאות סוסים.

תרבית גליה אנטרית סוסים ויישום לחקר מנגנון דלקתי עצבי בקוליק סוסים

גלה סרטונים נוספים