Name: התערבות RNA זחל בתולעי משי Bombyx mori באמצעות Chitosan/dsRNA אספקת ננו-חלקיקים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T14:55:00.000+00:00
Duration: 5 min 36 s
Description: למדו שיטת RNAi חדשנית להשתקת גנים בזחלי תולעי משי Bombyx mori באמצעות ננו-חלקיקי chitosan/dsRNA בהאכלה. השיטה החסכונית והיעילה מאפשרת מחקרי רגולציה גנטית וסקרינינג גנים בקנה מידה רחב.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>הזנת dsRNA בתיווך ננו-חלקיקים להשתקת גנים בזחלי תולעי משי

<ol><li>Xia, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+draft+sequence+for+the+genome+of+the+domesticated+silkworm+%28bombyx+mori%29%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A draft sequence for the genome of the domesticated silkworm (bombyx mori).</a> Science. 306 (5703), 1937-1940 (2004).</li>
<li>Kawamoto, M., Kiuchi, T., Katsuma, S. Silkbase: An integrated transcriptomic and genomic database for bombyx mori and related species. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKawamoto%2C+M+%22Database+%28Oxford%29%22">Database (Oxford)</a>. 2022, (2022).</li>
<li>Yokoi, K., Tsubota, T., Jouraku, A., Sezutsu, H., Bono, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reference+transcriptome+data+in+silkworm+bombyx+mori%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Reference transcriptome data in silkworm bombyx mori.</a> Insects. 12 (6), (2021).</li>
<li>Mita, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+construction+of+an+est+database+for+bombyx+mori+and+its+application%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">The construction of an est database for bombyx mori and its application.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (24), 14121-14126 (2003).</li>
<li>Zhou, Q. Z., Zhang, B., Yu, Q. Y., Zhang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bmncrnadb%3A+A+comprehensive+database+of+non-coding+rnas+in+the+silkworm%2C+bombyx+mori%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Bmncrnadb: A comprehensive database of non-coding rnas in the silkworm, bombyx mori.</a> BMC Bioinformatics. 17 (1), 370(2016).</li>
<li>Prasad, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silksatdb%3A+A+microsatellite+database+of+the+silkworm%2C+bombyx+mori%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Silksatdb: A microsatellite database of the silkworm, bombyx mori.</a> Nucleic Acids Res. 33 (Database issue), D403-D406 (2005).</li>
<li>Ding, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rna-based+antiviral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Rna-based antiviral immunity.</a> Nat Rev Immunol. 10 (9), 632-644 (2010).</li>
<li>Yu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+dsRNA+for+RNAi+in+insects%3A+An+overview+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Delivery of dsRNA for RNAi in insects: An overview and future directions.</a> Insect Sci. 20 (1), 4-14 (2013).</li>
<li>Liang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+the+immune+gene+bmpgrp-l4+in+the+midgut+affects+the+growth+of+silkworm+%28bombyx+mori%29+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Silencing of the immune gene bmpgrp-l4 in the midgut affects the growth of silkworm (bombyx mori) larvae.</a> Insect Mol Biol. 32 (4), 340-351 (2023).</li>
<li>Tian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+control+of+a+lepidopteran+pest+Spodoptera+exigua+by+ingestion+of+bacteria+expressing+dsrna+of+a+non-midgut+gene%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Developmental control of a lepidopteran pest Spodoptera exigua by ingestion of bacteria expressing dsrna of a non-midgut gene.</a> PLoS One. 4 (7), e6225(2009).</li>
<li>Kamath, R. S., Martinez-Campos, M., Zipperlen, P., Fraser, A. G., Ahringer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effectiveness+of+specific+rna-mediated+interference+through+ingested+double-stranded+rna+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Effectiveness of specific rna-mediated interference through ingested double-stranded rna in Caenorhabditis elegans.</a> Genome Biol. 2 (1), RESEARCH0002(2001).</li>
<li>Arimatsu, Y., Kotani, E., Sugimura, Y., Furusawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+characterization+of+a+cdna+encoding+extracellular+dsrnase+and+its+expression+in+the+silkworm+Bombyx+Mori%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochem+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Molecular characterization of a cdna encoding extracellular dsrnase and its expression in the silkworm Bombyx Mori.</a> Insect Biochem Mol Biol. 37 (2), 176-183 (2007).</li>
<li>Liu, J., Swevers, L., Iatrou, K., Huvenne, H., Smagghe, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bombyx+mori+DNA%2Frna+non-specific+nuclease%3A+Expression+of+isoforms+in+insect+culture+cells%2C+subcellular+localization+and+functional+assays%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Bombyx mori DNA/rna non-specific nuclease: Expression of isoforms in insect culture cells, subcellular localization and functional assays.</a> J Insect Physiol. 58 (8), 1166-1176 (2012).</li>
<li>Christiaens, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+rnai+efficacy+in+Spodoptera+exigua+via+the+formulation+of+dsrna+with+guanylated+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Increased rnai efficacy in Spodoptera exigua via the formulation of dsrna with guanylated polymers.</a> Front Physiol. 9, 316(2018).</li>
<li>Dass, C. R., Choong, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+chitosan+formulations+in+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microencapsul%22%5BJournal%5D)">The use of chitosan formulations in cancer therapy.</a> J Microencapsul. 25 (4), 275-279 (2008).</li>
<li>Zhang, X., Zhang, J., Zhu, K. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan%2Fdouble-stranded+RNA+nanoparticle-mediated+RNA+interference+to+silence+chitin+synthase+genes+through+larval+feeding+in+the+African+malaria+mosquito+%28Anopheles+gambiae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Chitosan/double-stranded RNA nanoparticle-mediated RNA interference to silence chitin synthase genes through larval feeding in the African malaria mosquito (Anopheles gambiae).</a> Insect Mol Biol. 19 (5), 683-693 (2010).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan%2Finterfering+rna+nanoparticle+mediated+gene+silencing+in+disease+vector+mosquito+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Chitosan/interfering rna nanoparticle mediated gene silencing in disease vector mosquito larvae.</a> J Vis Exp. (97), e52523(2015).</li>
<li>Sandal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticle-shielded+dsrna+delivery+for+enhancing+rnai+efficiency+in+cotton+spotted+bollworm+Earias+vittella+%28lepidoptera%3A+Nolidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Nanoparticle-shielded dsrna delivery for enhancing rnai efficiency in cotton spotted bollworm Earias vittella (lepidoptera: Nolidae).</a> Int J Mol Sci. 24 (11), 9161(2023).</li>
<li>Zhou, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan%2Fdsrna+polyplex+nanoparticles+advance+environmental+rna+interference+efficiency+through+activating+clathrin-dependent+endocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Macromol%22%5BJournal%5D)">Chitosan/dsrna polyplex nanoparticles advance environmental rna interference efficiency through activating clathrin-dependent endocytosis.</a> Int J Biol Macromol. 253 (Pt 4), 127021(2023).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+function+of+bombyx+toll9-2+in+the+silkworm+%28Bombyx+mori%29+larval+midgut%3A+Activation+by+escherichia+coli%2Flipopolysaccharide+and+regulation+of+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Insect+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Immunological function of bombyx toll9-2 in the silkworm (Bombyx mori) larval midgut: Activation by escherichia coli/lipopolysaccharide and regulation of growth.</a> Arch Insect Biochem Physiol. 116 (4), e22130(2024).</li>
<li>Cheng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+silkworm+larvae+growth+and+properties+of+silk+fibres+after+direct+feeding+of+copper+or+silver+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Mater+Design%22%5BJournal%5D)">Characterization of silkworm larvae growth and properties of silk fibres after direct feeding of copper or silver nanoparticles.</a> Mater Design. 129, 125-134 (2017).</li>
<li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+efficacy+of+rnai+mediated+by+various+nanoparticles+in+the+rice+striped+stem+borer+%28Chilo+suppressalis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Pestic+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of efficacy of rnai mediated by various nanoparticles in the rice striped stem borer (Chilo suppressalis).</a> Pestic Biochem Physiol. 165, 104467(2020).</li>
<li>Gurusamy, D., Mogilicherla, K., Palli, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan+nanoparticles+help+double-stranded+rna+escape+from+endosomes+and+improve+rna+interference+in+the+fall+armyworm%2C+Spodoptera+frugiperda%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Insect+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chitosan nanoparticles help double-stranded rna escape from endosomes and improve rna interference in the fall armyworm, Spodoptera frugiperda.</a> Arch Insect Biochem Physiol. 104 (4), e21677(2020).</li>
<li>Qi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rational+design+of+ros+scavenging+and+fluorescent+gold+nanoparticles+to+deliver+sirna+to+improve+plant+resistance+to+Pseudomonas+syringae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnol%22%5BJournal%5D)">Rational design of ros scavenging and fluorescent gold nanoparticles to deliver sirna to improve plant resistance to Pseudomonas syringae.</a> J Nanobiotechnol. 22 (1), 446(2024).</li>
<li>Laisney, J., Loczenski Rose, V., Watters, K., Donohue, K. V., Unrine, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+short+hairpin+rna+in+the+neotropical+brown+stink+bug%2C+Euschistus+heros%2C+using+a+composite+nanomaterial%5BTitle%5D)+AND+%22Pestic+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Delivery of short hairpin rna in the neotropical brown stink bug, Euschistus heros, using a composite nanomaterial.</a> Pestic Biochem Physiol. 177, 104906(2021).</li>
<li>Terenius, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rna+interference+in+Lepidoptera%3A+An+overview+of+successful+and+unsuccessful+studies+and+implications+for+experimental+design%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rna interference in Lepidoptera: An overview of successful and unsuccessful studies and implications for experimental design.</a> J Insect Physiol. 57 (2), 231-245 (2011).</li>
<li>Kolge, H., Kadam, K., Ghormade, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan+nanocarriers+mediated+dsrna+delivery+in+gene+silencing+for+Helicoverpa+armigera+biocontrol%5BTitle%5D)+AND+%22Pestic+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chitosan nanocarriers mediated dsrna delivery in gene silencing for Helicoverpa armigera biocontrol.</a> Pestic Biochem Physiol. 189, 105292(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>צינור צנטריפוגה 1.5 מ"ל</td><td>F601620 סנגון</td><td></td><td>לתגובת dsRNA או ננו-חלקיקים</td></tr><tr><td>10 &mu; l פיפטה</td><td>אפנדורף</td><td>P13473G</td><td>לשאוב או להשעות נוזל</td></tr><tr><td>100 &mu; l פיפטה</td><td>אפנדורף</td><td>Q12115G</td><td>לשאוב או להשעות נוזל</td></tr><tr><td>2.5 &mu; l פיפטה</td><td>אפנדורף</td><td>P20777G</td><td>לשאוב או להשעות נוזל</td></tr><tr><td>20 &mu; l פיפטה</td><td>Eppendorf</td><td>H19229E</td><td>לשאוב או להשעות נוזל</td></tr><tr><td>200 &mu; l פיפטה</td><td>אפנדורף</td><td>H20588E</td><td>לשאיבה או השעיה מחדש של נוזל</td></tr><tr><td>6 בארות שקופות TC שטופלו צלחות מרובות</td><td>Costar</td><td>3516</td><td>לגידול תולעי משי בנפרד</td></tr><tr><td>חומצה אצטית</td><td>אלאדין</td><td>A116165</td><td>להכנת TAE</td></tr><tr><td>Agarose M</td><td>BBI Life Sciences</td><td>A610013</td><td>לאלקטרופוזיס ג'ל אגרוז</td></tr><tr><td>איזון אנליטי</td><td>Sartorius</td><td>BSA224S</td><td>למשקל מרכיבים</td></tr><tr><td>צנטריפוגה&nbsp;</td><td>Sartorius</td><td>Centrisart A-14C</td><td>לצנטריפוגה ליצירת dsRNA או ננו-חלקיקים</td></tr><tr><td>Chitosan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3646</td><td>לשילוב עם dsRNA להכנת ננו-חלקיקים</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sangon</td><td>A500895</td><td>להכנת TAE</td></tr><tr><td>אתנול</td><td>אלאדין</td><td>E130059</td><td>לייצור TAE, או למשקעי dsRNA</td></tr><tr><td>מקפיא</td><td>סימנס</td><td>iQ300</td><td>לאחסון dsRNA או ננו-חלקיקים</td></tr><tr><td>GoTaq Green Master Mix</td><td>Promega</td><td>M712</td><td>לתגובת PCR</td></tr><tr><td>GoTaq qPCR Master Mix</td><td>Promega</td><td>A6002</td><td>לתגובת qRT-PCR</td></tr><tr><td>איזופרופנול&nbsp;</td><td>I112011 אלאדין</td><td></td><td>למשקעי dsRNA</td></tr><tr><td>NanoDrop מיקרונפח UV-Vis ספקטרופוטומטר</td><td>ThermoFisher</td><td>One</td><td>לקביעת ריכוז מד ה-pH dsRNA</td></tr><tr><td></td><td>Sartorius</td><td>&nbsp; PB-10</td><td>להכנת מאגרים</td></tr><tr><td>SanPrep טור PCR ערכת טיהור מוצר</td><td>סנגון</td><td>B518141</td><td>לטיהור מוצר PCR</td></tr><tr><td>נתרן אצטט</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2889</td><td>להכנת 100 מ"מ מאגר נתרן אצטט</td></tr><tr><td>נתרן סולפט&nbsp;</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>239313</td><td>לייצר 100 מ"מ נתרן גופרתי מאגר</td></tr><tr><td>T7 RiboMAX Express RNAi System</td><td>Promega</td><td>P1700</td><td>לסינתזת dsRNA</td></tr><tr><td>ThermoMixer</td><td>Eppendorf</td><td>C</td><td>לייצור dsRNA או חימום ננו-חלקיקים</td></tr><tr><td>Tris</td><td>Sangon</td><td>A501492</td><td>לייצור TAE</td></tr><tr><td>Vortex&nbsp;</td><td>IKA</td><td>Vortex 3</td><td>להכנת ננו-חלקיקי צ'יטוזן/dsRNA</td></tr></tbody></table>

התערבות rna זחל בתולעי משי bombyx mori באמצעות chitosan/dsrna אספקת ננו-חלקיקים

Larval RNA Interference in Silkworm Bombyx mori through Chitosan/dsRNA Nanoparticle Delivery

כדי להעריך את יעילות ה-RNAi, נבחר לניתוח גן חיסוני המכוון ל-BmToll9-2 . הגן BmToll9-2 מאופיין היטב במעבדה, והשתקת גנים על ידי הזרקת dsRNA גורמת לזחלים קלים וקטנים יותר בפרסום האחרון שלנו20. כדי לאשר את יעילות ה-RNAi על ידי בליעה באמצעות ננו-חלקיקי chitosan/dsRNA, ננו-חלקיקי צ'יטוזן שימשו כבקרה, ו-dsRNA עירום הושווה באותו הזמן.
בהשוואה לקבוצת הביקורת, ננו-חלקיקי צ'יטוזן ללא dsRNA, dsRNA עירום המכוון לגן BmToll9-2 אינו מראה אפקט השתקה. הזנה של ננו-חלקיקי chitosan/dsRNA בתולעי המשי מעכבת באופן משמעותי את התעתיק עם הפלה של 79% (איור 1). עיכוב התמליל היחסי מצביע על כך שהגן BmToll9-2 הושתק בהצלחה באמצעות בליעת chitosan/dsRNA.
הפלת הגן BmToll9-2 משפיעה באופן משמעותי על צמיחת טוואי המשי. כשמתבוננים בזחלים, הזחלים המושתקים BmToll9-2 קטנים יותר מזחלי הביקורת (איור 2A). כאשר משווים בין הפקעות, הפקעות המושתקות BmToll9-2 גם קטנות יותר (איור 2B). ננו-חלקיקי Chitosan/dsRNA מראים השפעות RNAi מוצלחות הן בתעתיק והן בפנוטיפ בתולעת המשי.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67360/67360fig01v2.jpg"> איור 1: תעתיק יחסי של BmToll9-2 לאחר בליעת ננו-חלקיקים מסוג chitosan/dsBmToll9-2 בזחלי B. mori 5th instar. רמות ה-mRNA היחסיות של BmToll9-2 בזחלים הניזונים מננו-חלקיקי צ'יטוזן כביקורת, dsRNA עירום, וננו-חלקיקים chitosan/dsRNA. הנתונים הוצגו כאמצעים ± סטיית תקן של שלוש שכפולים ביולוגיים. עבור כל שכפול ביולוגי, היו שלושה שכפולים טכניים. אותיות שונות על הסורגים מצביעות על הבדלים משמעותיים בהתבסס על ניתוח ANOVA חד-כיווני. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67360/67360fig01largev2.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67360/67360fig02v2.jpg"> איור 2: תצפית פנוטיפ לאחר הזנה בננו-חלקיקים chitosan/dsBmToll9-2. ננו-חלקיקי צ'יטוזן משמשים כבקרה. (A) הופעתם של זחלי תולעי משי לאחר בליעה של ננו-חלקיקים. (B) הופעתם של פקעות תולעי משי לאחר בליעה של ננו-חלקיקים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67360/67360fig02largev2.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

התערבות RNA זחל בתולעי משי Bombyx mori באמצעות Chitosan/dsRNA אספקת ננו-חלקיקים

The silkworm, Bombyx mori, is an important economic insect with thousands of years of history in China. Meanwhile, the silkworm is the model insect of ...

larval-rna-interference-silkworm-bombyx-mori-through-chitosandsrna

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

טכניקות גן מציאה מבוססות התערבות RNA (RNAi) נמצאות בליבה של מחקר Tribolium. כאן, אנו מספקים סקירה של טכניקת RNAi הזחל שלנו בcastaneum Tribolium. הזחל RNAi הוא טכניקה פשוטה, אך רבת עוצמה המספקת גישה מהירה לפנוטיפים פסד של פונקציה, המאפשר לחוקרים ללמוד פונקציות גן בהקשרים מגוונים.

התערבות RNA הזחל בחיפושית האדומה הקמח, Tribolium castaneum

כאן אנו מתארים הליך לעיכוב תפקוד גן ביתושי וקטור מחלה באמצעות chitosan / מפריע חלקיקי RNA המעובדים על ידי זחלים.

Chitosan / השתקת הגנים RNA Nanoparticle המתווכת להתערב במחלת וקטור כילה נגד זחלים

כתב יד זה מדגים דלדול של ביטוי גנים ב פיתול של המקק הגרמני באמצעות בליעה דרך הפה של זוגיות גדילי RNA במארז ליפוזומים.

שימוש מעשי של RNA הפרעה: משלוח אוראלי של זוגיות גדילי RNA ב ליפוזום ספקים עבור ג ' וקים

מאמר זה מדגים טכניקות הרומן שפותחו עבור משלוח אוראלי של זוגיות גדילי RNA (dsRNA) דרך הרקמות וסקולריים הצמחים עבור התערבות RNA (RNAi) מהצינורות האכלה חרקים.

שיטות משלוח כפול גדילי RNA אוראלי לזירוז התערבות RNA שיפה וחרקים Hemipteran צמח sap-האכלה

הפרעות RNA היא טכניקה ישימה ורבת עוצמה למניפולציה ביטוי גנים בשלבים התפתחותיים ספציפיים. כאן, אנו מתארים את הצעדים הדרושים ליישום טכניקה זו חיפושית הצלילה הימית תרמונקטוס מרמורטוס, מרכישת רצפי גנים ועד לחיסול גנים המשפיעים על מבנה או התנהגות.

הפרעות RNA בחפשיות מימיות ככלי רב עוצמה למניפולציה ביטוי גנים בנקודות זמן התפתחותיות ספציפיות

הפרוטוקול מתאר את היווצרותן של מיקרו-קפסולות חזקות ועמוסות DNA תואמות ביולוגית כחיישנים ביולוגיים מרובי מבחנה המסוגלים לעקוב אחר מספר ליגנדות.

הכנת מיקרוקפסולות רב תכליתיות על בסיס משי עמוסות בפלסמידים DNA המקודדים RNA Aptamers ו-Riboswitches

כאן, אנו מציגים שיטת השרייה מפורטת של הפרעת RNA ב Bursaphelenchus xylophilus כדי להקל על המחקר של תפקודי גנים.

יישום של הפרעת RNA בנמטודת אורן, בורסהפלנצ'וס קסילופילוס

המניפולציה של הפרעות RNA (RNAi) מהווה אתגר עצום במינים רבים של טפילים בעלי גודל זעיר, כגון צרעות טריכוגרמה . מחקר זה התווה שיטת RNAi יעילה ב - Trichogramma denrolimi. המתודולוגיה הנוכחית מספקת מודל חזק לחקר בקרת גנים בצרעות טריכוגרמה .

הפרעות RNA בפרזיטואיד ביצה, Trichogramma dendrolimi Matsumura

במאמר זה אנו מדגימים כיצד לנתח את מערכת העצבים המרכזית של הזחלים third תסיסנית instar.

Dissection של מערכת העצבים המרכזית הזחל ב תסיסנית melanogaster

פרוטוקול זה מדגים כיצד לבצע אימונוהיסטוכימיה על הזחל תסיסנית גזור.

תסיסנית הזחל NMJ אימונוהיסטוכימיה

למדו שיטת RNAi חדשנית להשתקת גנים בזחלי תולעי משי Bombyx mori באמצעות ננו-חלקיקי chitosan/dsRNA בהאכלה. השיטה החסכונית והיעילה מאפשרת מחקרי רגולציה גנטית וסקרינינג גנים בקנה מידה רחב.

התערבות RNA זחל בתולעי משי Bombyx mori באמצעות Chitosan/dsRNA אספקת ננו-חלקיקים

גלה סרטונים נוספים