Name: דיסוציאציה בתפוקה גבוהה והשתלה אורתוטופית של קסנוגרפים שמקורם בסרטן השד (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 6 s
Description: למד שיטת דיסוציאציה אנזימטית להשתלה אורתוטופית של קסנוגרפים מסרטן שד בעכברים. פרוטוקול זה מאפשר מחקר בקנה מידה גבוה של תגובות מערכתיות לגידולים אנושיים ומנגנוני עייפות שרירית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>דיסוציאציה בתפוקה גבוהה והשתלה אורתוטופית של קסנוגרפים שמקורם בסרטן השד

<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cancer+statistics+2020%3A+GLOBOCAN+estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA Cancer J Clin. 3 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Hidalgo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models%3A+an+emerging+platform+for+translational+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models: an emerging platform for translational cancer research.</a> Cancer Discov. 4 (9), 998-1013 (2014).</li>
<li>DeRose, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+grafts+derived+from+women+with+breast+cancer+authentically+reflect+tumor+pathology%2C+growth%2C+metastasis+and+disease+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Tumor grafts derived from women with breast cancer authentically reflect tumor pathology, growth, metastasis and disease outcomes.</a> Nat Med. 17 (11), 1514-1520 (2011).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+renewable+tissue+resource+of+phenotypically+stable%2C+biologically+and+ethnically+diverse%2C+patient-derived+human+breast+cancer+xenograft+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A renewable tissue resource of phenotypically stable, biologically and ethnically diverse, patient-derived human breast cancer xenograft models.</a> Cancer Res. 73 (15), 4885-4897 (2013).</li>
<li>Yoshida, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+patient-derived+tumor+xenograft+models+and+tumor+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Applications of patient-derived tumor xenograft models and tumor organoids.</a> J Hematol Oncol. 13 (1), 1-16 (2020).</li>
<li>Wilson, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+breast+cancer+xenograft+model+implicates+peroxisome+proliferator-activated+receptor+signaling+as+driver+of+cancer-induced+muscle+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Human breast cancer xenograft model implicates peroxisome proliferator-activated receptor signaling as driver of cancer-induced muscle fatigue.</a> Clin Cancer Res. 25 (7), 2336-2347 (2019).</li>
<li>Wilson, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+reprogramming+by+breast+cancer+regardless+of+treatment+history+or+tumor+molecular+subtype%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Breast+Cancer%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle reprogramming by breast cancer regardless of treatment history or tumor molecular subtype.</a> NPJ Breast Cancer. 6 (1), 18(2020).</li>
<li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD%2FLtSz-scid+IL2R%CE%B3null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2Rγnull mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> J Immunol. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li>
<li>DeRose, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+models+of+human+breast+cancer%3A+Protocols+for+in+vitro+and+in+vivo+applications+in+tumor+biology+and+translational+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Patient-derived models of human breast cancer: Protocols for in vitro and in vivo applications in tumor biology and translational medicine.</a> Curr Protoc Pharmacol. 14, Unit14.23(2013).</li>
<li>Whittle, J. R., Lewis, M. T., Lindeman, G. J., Visvader, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models+of+breast+cancer+and+their+predictive+power%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models of breast cancer and their predictive power.</a> Breast Cancer Res. 17 (1), 17(2015).</li>
<li>Fleming, J. M., Miller, T. C., Meyer, M. J., Ginsburg, E., Vonderhaar, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+regulation+of+human+breast+xenograft+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Local regulation of human breast xenograft models.</a> J Cell Physiol. 224 (3), 795-806 (2010).</li>
<li>Okano, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+implantation+achieves+better+engraftment+and+faster+growth+than+subcutaneous+implantation+in+breast+cancer+patient-derived+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mammary+Gland+Biol+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Orthotopic implantation achieves better engraftment and faster growth than subcutaneous implantation in breast cancer patient-derived xenografts.</a> J Mammary Gland Biol Neoplasia. 25 (1), 27-36 (2020).</li>
<li>Ryu, A. H., Eckalbar, W. L., Kreimer, A., Yosef, N., Ahituv, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+antibiotics+in+cell+culture+with+caution%3A+Genome-wide+identification+of+antibiotic-induced+changes+in+gene+expression+and+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Use antibiotics in cell culture with caution: Genome-wide identification of antibiotic-induced changes in gene expression and regulation.</a> Sci Rep. 1 (1), 7533(2017).</li>
<li>Amens, J. N., Bahçecioglu, G., Zorlutuna, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+system+effects+on+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Immune system effects on breast cancer.</a> Cell Mol Bioeng. 14 (4), 279-292 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>מזרק טוברקולין 1 מ"ל</td><td>BD</td><td>305945</td><td>סטרילי</td></tr><tr><td>1x פוספט חוצץ מלח, pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>צינור מיקרוצנטריפוגה סטרילי 2.0 מ"ל</td><td>Eppendorf</td><td>0030123620</td><td>מחט סטרילית</td></tr><tr><td>26 גרם, &frac12; ב.</td><td>BD</td><td>305111</td><td>מיקרו-צינור סטרילי</td></tr><tr><td>5.0 מ"ל</td><td>Eppendorf</td><td>0030119401</td><td>NSG סטרילי</td></tr><tr><td>בן 8+ שבועות (NOD. עכברי Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ)</td><td>מעבדת ג'קסון</td> <td>#005557</td><td></td></tr><tr><td>רפידות הכנה לאלכוהול</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-363-750</td><td></td></tr><tr><td>תמצית קרום מרתף סטרילית (Matrigel)</td> <td>Cultrex</td><td>3632-005-02</td><td></td></tr><tr><td>אפליקטורים עם קצה כותנה, 6 אינץ'.</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-029-553</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מעוקלים סטריליים עם קצות בינוניים לא משוננים, 152 מ"מ</td><td>מדעי מיקרוסקופיית אלקטרונים</td><td>50-365-845</td><td></td></tr><tr><td>קרם הסרת שיער</td><td>סטרילי Nair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>gentleMACS C Tubes</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-093-237</td><td></td></tr><tr><td>gentleMACS Octo dissociator עם תנורי חימום</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-096-427</td><td></td></tr><tr><td>מס' 10 להבי אזמל</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>12-000-162</td><td></td></tr><tr><td>ספוגי גזה סטריליים לא ארוגים, 4x4 אינץ'</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-028-558</td><td></td></tr><tr><td>סטרילי RPMI 1640 1x + L-גלוטמין</td><td>Gibco</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>ערכת דיסוציאציה סטרילית של גידול</td>, <td>אנושי Miltenyi Biotec</td><td>130-095-929</td><td></td></tr></tbody></table>

דיסוציאציה בתפוקה גבוהה והשתלה אורתוטופית של קסנוגרפים שמקורם בסרטן השד

High-Throughput Dissociation and Orthotopic Implantation of Breast Cancer Patient-Derived Xenografts

מחקר זה מתאר גישה יעילה ולא כירורגית להשתלה אורתוטופית של השתלות סרטן שד שמקורן בחולה בעכברים. רקמת גידול השד פורקה באמצעות אנזימים ספציפיים לאדם ותסיסה מכנית, הושעה מחדש ביחס של 1:1 v/v של Matrigel: RPMI 1640, והוזרקה אורתוטופית לתוך כריות השומן המפשעתי של עכברי NSG (איור 1 ואיור 2). כדי להבטיח את נאמנות המודלים של PDX, ההתאמה של דגימת הגידול המקורית של המטופל עם הגידולים העוברים אומתה בטכניקות היסטופתולוגיות וגנומיות מבוססות. ביטוי הקולטן נבדק באמצעות צביעה אימונוהיסטוכימית (IHC) של קולטנים סטנדרטיים לסרטן השד, כולל קולטן אסטרוגן (ER), קולטן פרוגסטרון (PR) וקולטן גורם גדילה אפידרמלי אנושי 2 (HER2) (איור 3). המורפולוגיה התאית הוערכה באמצעות צביעת המטוקסילין ואאוזין (H&amp;E) של פרוסות גידול חתוכות ופרשנות פתולוגית מומחית של החלקים המוכתמים. שימור הנוף הגנטי ושימור תאים אנושיים אומתו באמצעות ריצוף RNA בתפזורת ואימות חוזר טנדם קצר (STR) (איור 4 וטבלה 1). בנוסף, בדיקות פתוגנים לא זיהו זיהום של המטופל או דגימות גידול מעבר, וזהו שלב אימות חיוני בהתחשב בשימוש בעכברים חסרי חיסון.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67607/67607fig1.jpg"> 
איור 1: סקירה כללית של הפרוטוקול. ייצוג של דיסוציאציה של גידול וזרימת עבודה בהזרקה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67607/67607fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
עכברי NSG הוכנו להזרקה באמצעות קרם הסרת שיער שנמרח בתנועות לסירוגין עם כיוון השעון ונגד כיוון השעון כדי להסיר ביסודיות פרווה מאזור כרית השומן המפשעתי (איור 2A). עודפי קרם להסרת שיער ניגבו מעור בטן חשוף באמצעות גזה סטרילית, והאזור חוטא באמצעות פד אלכוהול (איור 2B). מחט סטרילית עמוסה בתאי גידול מנותקים הוצבה בזווית של כ-45 מעלות של 0.5-1 מ"מ זנב לרפידות השומן של פטמת החלב המפשעתית הרביעית (איור 2C). תאי הגידול הוזרקו בצורה מבוקרת לתוך כריות השומן של פטמת החלב המפשעתית הרביעית (איור 2D). גידול הגידול זוהה בתחילה על ידי מישוש דיגיטלי של רפידות השומן. לאחר מכן, התקדמות נפח הגידול הייתה במעקב כמותי באמצעות הדמיית תהודה מגנטית (MRI) (איור 2E). גם משקל הגוף (איור 2F) וגם נפחי הגידול (איור 2G) נמדדו מדי שבוע כדי לעקוב אחר תנודות במשקל והתקדמות נפחי הגידול. הגידולים נבדקו ויזואלית כדי לעקוב אחר פצעים כגון כיב שיחייב הפסקה מוקדמת. השתלה דו-צדדית מוצלחת של ה-PDX ברפידות השומן המפשעתיות מוצגת באיור 2H, וכריות השומן לאחר כריתת הגידולים מוצגות באיור 2I.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67607/67607fig2.jpg"> 
איור 2: הכנת עכברים, הזרקת PDX ומעקב אחר התקדמות הגידול. (A) רפידות שומן החלב הוסרו ביסודיות. (ב) הצגת אתר ההזרקה עם נראות ברורה של אזורי הזרקת המטרה. (C) מיקום המזרק על כרית השומן, בדרך כלל 0.5-1 מ"מ זנב לכרית השומן כתלות באורך המחט. החץ הלבן מציין את אזור המטרה של המחט בעת ההחדרה. (D) תיאור של הזרקת תאים מנותקים לתוך כרית השומן של פטמת החלב המפשעתית הרביעית השמאלית. יש להחזיק את המחט בזווית של כ-45 מעלות כפי שמוצג להזרקה. (E) תמונת MRI מייצגת של גידולים שהושתלו דו-צדדית באתר ההזרקה. הגידולים מודגשים בירוק. (F) התקדמות מייצגת של משקל הגוף בגרמים לאחר הזרקת תאי גידול (n = 5). הקו הכחול הכהה מייצג רגרסיה ליניארית פשוטה, שאינה אפס באופן משמעותי (p &lt; 0.0001); עכברים העלו בממוצע 22 מ"ג.יום-1. הצללה בכחול כהה היא רווח בר-סמך של 95%, הצללה בצבע תכלת היא מרווח חיזוי של 95%, וקווים כתומים הם מדידות משקל גוף אורכיות. (G) התקדמות מייצגת של נפחי גידול בודדים במ"מ3 לאחר הזרקת תאי גידול (n = 10). הקו הכחול הכהה מייצג רגרסיה אקספוננציאלית; זמן הכפלת נפח הגידול היה 19.08 ימים. הצללה בכחול כהה היא רווח בר-סמך של 95%, הצללה בצבע תכלת היא מרווח חיזוי של 95%, וקווים כתומים הם נפחי גידול אורכיים. (H) השתלה דו-צדדית מוצלחת של תאי PDX לתוך רפידות השומן המפשעתיות. שימו לב שניתן לראות כלי דם המספקים כל גידול. החצים הלבנים מזהים את הגידולים. (I) אזור כרית השומן המפשעתי לאחר כריתת הגידולים. (ח,י) היחידות על הסרגל הן בס"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67607/67607fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
ה-PDX המייצג (PEN_056) מקורו בנקבה קווקזית בת 31 עם קרצינומה פולשנית של שד שלב 3A. הגידול הראשוני, שנאסף מהשד הימני, היה בעל סטטוס קולטן של ER ו-PR שלילי, HER2 חיובי (ER-PR-HER2+). צביעת IHC עבור קולטני ER, PR ו-HER2 הראתה התאמה בין המטופל לגידולי PDX (איור 3). עם זאת, ה-PDX מראה ביטוי גדול יותר של HER2, שעשוי לנבוע מגידול סלקטיבי של תאי HER2+. הערכה פתולוגית של חתכים מוכתמים ב-H&amp;E אישרה קרצינומה מובחנת בצורה גרועה עם מורפולוגיה וציטולוגיה עקביות הן בדגימות המטופל והן בדגימות PDX (איור 3).
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67607/67607fig3.jpg"> 
איור 3: קולטן IHC וצביעה של H&amp;E. (עמודה שמאלית) צביעת IHC של קולטני ER, PR ו-HER2 וצביעה של H&amp;E בגידול המטופל. כתמי ER ו-PR אינם מראים כתמים חיוביים ברורים, כצפוי. כתמי HER2 מראים חיוביות ל-HER2 (חום). (עמודה ימנית) צביעת IHC של קולטני ER, PR ו-HER2 וצביעת H&amp;E בדגימת PDX המועברת. צביעת קולטנים דומה מאוד לזו שנראית בדגימת המטופל, אם כי HER2 מראה ביטוי גדול יותר לאחר המעבר. סרגל קנה מידה: 50 מיקרומטר; הגדלה: פי 20. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67607/67607fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
גנוטיפ חוזר טנדם קצר (STR) אישר דמיון של &gt;80% על פני 13 הלוקוסים האוטוזומליים שהוגדרו על ידי הנחיות הקונצנזוס של American Type Cell Culture Collection (ATCC) ASN-0002-2022 בתוספת 3 אתרים נוספים (טבלה 1). ריצוף RNA בתפזורת (RNA-seq) של דגימת הגידול של המטופל ו-PDX אישר רמות שוות ערך של יישור לגנום הייחוס האנושי העדכני ביותר (T2T CHM13v2.0), עם 82.3% ו-79.1% מהקריאות מיושרות, בהתאמה. יתר על כן, הגידול של החולה ו-PDX הראו מתאם חיובי חזק עם ערך פירסון r של 0.9559 (איור 4A). ניתוח העשרת מערך גנים המשווה PDX לעומת גידול מטופל גילה כי 10 המסלולים המועשרים באופן משמעותי מתהליכים ביולוגיים של אונטולוגיה גנטית היו בעיקר מערכי גנים אימונולוגיים, מה שמצביע על כך שרוב שונות השעתוק בין PDX לגידול החולה נובעת מהיעדר תאים חיסוניים בדגימת PDX (איור 4B).
<table border="1" fo:font-size="7px" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>D5S818</td>
			<td>D13S317</td>
			<td>D7S820</td>
			<td>VWA</td>
			<td>ת'01</td>
			<td>AM</td>
			<td>TPOX</td>
			<td>CSF1PO</td>
			<td>D3S1358</td>
			<td>D21S11</td>
			<td>D18S51</td>
			<td>Penta_E</td>
			<td>Penta_D</td>
			<td>D8S1179</td>
			<td>FGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>גידול בחולה</td>
			<td>12 13</td>
			<td>8 8</td>
			<td>8 9</td>
			<td>17 17</td>
			<td>9 9.3</td>
			<td>X X</td>
			<td>8 10</td>
			<td></td>
			<td>15 16</td>
			<td>29 31.2</td>
			<td>16 19</td>
			<td>12 13</td>
			<td>14 14</td>
			<td>10 14</td>
			<td>21 25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>גידול PDX</td>
			<td>13 14</td>
			<td>8 8</td>
			<td>8 9</td>
			<td>17 17</td>
			<td>9 9.3</td>
			<td>X X</td>
			<td>10 10</td>
			<td></td>
			<td>15 15</td>
			<td>29 29</td>
			<td>16 19</td>
			<td>12 13</td>
			<td>14 14</td>
			<td>10 14</td>
			<td>21 25</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
טבלה 1: אימות חזרה כפולה קצרה (STR).
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67607/67607fig4.jpg"> 
איור 4: מתאם ריצוף RNA והעשרת מערך גנים. (A) תרשים פיזור שמדמה את הספירה המנורמלת של log2 למיליון (CPM) עבור כל הגנים מהגידול של המטופל (ציר x) ו-PDX (ציר y). נמצא מתאם חיובי חזק, עם ערך פירסון r של 0.9559. (B) תרשימי רכס עבור 10 מערכי הגנים הביולוגיים של אונטולוגיה של גנים מועשרים כאשר משווים PDX לעומת PDX. גידול המטופל. עקומות מתארות את התפלגות ניקוד ההעשרה עבור כל קבוצת גנים; צבע מייצג את ערך ה-Q של FDR עבור כל קבוצת גנים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67607/67607fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

Patient-derived xenografts (PDXs) provide a clinically relevant method for recapitulating tumor-involved cell types and the tumor microenvironment, which ...

high-throughput-dissociation-orthotopic-implantation-breast-cancer

Research

JoVE Journal

Cancer Research

מחקר סרטן

בסרטון זה, תאי מלנומה שמקורם בבני אדם מושתלים באופן תת-עורי באזור האגף של עכבר מדוכא חיסון. מודל PDX מאפשר חקירה פרה-קלינית של תאי מלנומה המשחזרים טוב יותר את ההטרוגניות של הגידול ואת אגרסיביות המלנומה שנצפתה בתנאי in vivo.

מידול Xenograft הנגזר מהמטופל: טכניקה ליצירת מודלים של עכברי מלנומה

הטכניקה המבוססת לחסן xenografts orthotopic פולשנית העיקרית לסרטן שלפוחית ​​השתן דורשת laparotomy והתגייסות של שלפוחית ​​השתן. הליך זה גורם תחלואה משמעותית בעכברים, הוא מאתגר מבחינה טכנית ודורש זמן רב. לפיכך, אנו פיתחנו דיוק גבוה, בגישה מלעורית ניצול הנחיית אולטרסאונד.

פולשנית הקמת Murine Orthotopic שלפוחית ​​השתן xenografts

אנו מתארים שיטת תיוג יציב של xenografts נגזרות החולות (PDXs) עם חלקיקי lentiviral להביע כתבי חלבון בלוציפראז ירוקים-ניאון. שיטה זו מאפשרת מעקב צמיחת PDXs המצוי באתר הראשי, כמו גם באיתור גרורות ספונטניות ניסיון באמצעות במערכות הדמית vivo.

תיוג של xenografts הנגזר חולה סרטן השד עם כתבים לעקיבים עבור צמיחת גידולים וגרורים מחקרים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לנצל מונחה אולטרה סאונד הזרקה של נוירובלסטומה (NB) ותאים של יואינג סרקומה (ES) (שהוקמה שורות תאים ותאים סרטניים נגזר החולה) באתרים הרלוונטיים ביולוגית ליצירת במודלים פרה אמין עבור סרטן מחקר.

ניצול של אולטרסאונד מודרכת מכוון רקמות השרשה הסלולר להקמתה של גידול גרורתי רלוונטי מבחינה ביולוגית Xenografts

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להשתיל תאים סרטניים בשד אל תוך כרית שומן החלב פשוטה, פחות פולשנית, אחיזה נוחה בדרך, והוא מודל סרטן השד זה העכבר orthotopic עם סביבה נאותה כרית שומן החלב יכול לשמש כדי לחקור היבטים שונים של סרטן.

הזרקת Orthotopic של תאים סרטניים בשד אל תוך כרית שומן החלב עכברים

עבודה זו מוגדרות מראש פרוטוקול מתקדם כדי להעריך במדויק את טעינת הגידול על ידי זיהוי של חלבון פלורסנט ירוק אותות biלומינסנציה, כמו גם שילוב של טכניקת גילוי מולקולרי כמותי.

לומדת משולשת סרטן השד שלילי באמצעות אורתובנושא שד סרטן השד מודל

כאן אנו מציגים פרוטוקול כדי לבדוק את היעילות של טיפולים ייעודיים שנבחרו על בסיס האיפור גנומית של הגידול. הפרוטוקול מתאר זיהוי ואימות של הסדרים מבניים של ה-DNA, חרט גידולים של חולים לתוך עכברים והתגובות בדיקה לתרופות המתאימות.

בדיקת טיפולים ייעודיים בסרטן באמצעות ניתוח שינוי DNA מבנית והמטופל נגזר Xenografts

מודלים של קסנוגרפט (PDX) שמקורם בחולה ומודלים של עכברים מהונדסים גנטית הניתנים להשתלה מחדשים בנאמנות מחלות אנושיות והם מודלים מועדפים לחקר בסיסי ותרגום של סרטן השד. כאן, שיטה מתוארת להשתלה אורתוטופית שברי גידול השד לתוך כרית השומן הממארי כדי ללמוד ביולוגיה של הגידול ולהעריך את תגובת התרופה.

השתלה אורתוטופית של גידולי שד כמודלים פרה-אקליניים לסרטן השד

מודלים של גרורות בעצמות אינם מפתחים גרורות באופן אחיד או בשכיחות של 100%. הזרקה ישירה של תאי גידול תוך אוסאוסיים עלולה לגרום לתסחיף של הריאה. אנו מציגים את הטכניקה שלנו מידול גידולי עצם ראשוניים וגרורות עצם באמצעות השתלת גידול מוצק לתוך העצם, המוביל לקליטה וצמיחה הניתנים לשחזור.

מידול גידולי עצם ראשוניים וגרורות עצם עם השתלת גידול מוצק השתלת עצם לעצם

פיתוח מודלים אורתוטופיים של גידולי מוח בילדים דורש דיוק קפדני, תוך שימוש במכשיר סטריאוטקסי להשתלת תאים סרטניים בצורה מדויקת. המתודולוגיה המוצגת כאן מתארת את השלבים הכרוכים בהכנת תאי גידול במוח, ביצוע זריקות תוך גולגולתיות ויישום מערכת ניטור לאחר ניתוח להערכת השתלת גידול מוח.

הקמת מודלים אורתוטופיים של קסנוגרפט שמקורם בחולה לגידולי מוח באמצעות מכשיר סטריאוטקסי

מטרת פרוטוקול זה היא לספק לחוקרים טכניקה שניתנת לשחזור גבוה להשתלות תוך-גולגולתיות.

השתלה תוך-גולגולתית סטריאוטקטית של גליובלסטומה קווי תאי זנוגרפט שמקורם בחולה בעכברים

למד שיטת דיסוציאציה אנזימטית להשתלה אורתוטופית של קסנוגרפים מסרטן שד בעכברים. פרוטוקול זה מאפשר מחקר בקנה מידה גבוה של תגובות מערכתיות לגידולים אנושיים ומנגנוני עייפות שרירית.

דיסוציאציה בתפוקה גבוהה והשתלה אורתוטופית של קסנוגרפים שמקורם בסרטן השד

גלה סרטונים נוספים