בדיקת מולקולות קטנות ובדיקת רעילות בזחלי דגי זברה בשלב מוקדם

כדי להתחיל, לאסוף עוברים בשלב מוקדם של דגי זברה שלושה ימים לאחר ההפריה בצלחת פטרי. עם פיפטה מיקרו 1000 מיקרוליטר מוגדר לנפח 100 מיקרוליטר, להעביר עובר אחד בריא למראה בקע לתוך כל באר של צלחת 96 באר. עכשיו, פיפטה את הכמות הדרושה של כימיקל הבדיקה לתוך כל באר של צלחת 12 באר.

לאחר מכן, התאם את עוצמת הקול הכוללת ל- 2.4 מיליליטר עם מדיום E3. הכינו את בקרת הרכב בהתאם לממס המשמש להמסת כימיקל בדיקת המלאי. עם פיפטה של 200 מיקרוליטר, הסר כל פתרון E3 קיים מכל באר של צלחת באר 96.

השתמש במיקרו פיפטה בת שמונה ערוצים כדי להחליף אותה ב -100 מיקרוליטר של מדיום הבדיקה המוכן עבור כל ריכוז. יש לוודא כי בסך הכל נבדקים 24 זחלים בכל ריכוז. לאחר 24 שעות, השתמש במיקרוסקופ אור סטריאופוני כדי לבצע ניקוד מורפולוגי.

ניקוד המורפולוגיה בשיטה בינארית, כאשר היעדר מציין מורפולוגיה נורמלית והווה מציין חריגה מורפולוגית. כאשר הניקוד הושלם, להסיר 50 מיקרוליטר של המדיום מכל באר. החלף אותו עם 50 מיקרוליטר של אמצעי בדיקה מוכן טרי.

הסר ותעד את כל הזחלים המתים, ולאחר מכן דגר על הזחלים ב 28.5 מעלות צלזיוס עם מחזור אור של 14 שעות ומחזור חושך של 10 שעות. דגי זברה חמישה ימים לאחר ההפריה הציגו פנוטיפים מגוונים לאחר יומיים של חשיפה לסמים. דגי זברה שלא נפגעו נצפו כנורמליים, בעוד בצקת קרום הלב קלה ניכרה בחלק מהדגים.

בצקת חמורה של קרום הלב, מלווה בדימום חלמון והארכת חלמון נצפתה אצל אחרים. כמו כן נצפתה התפתחות מאוחרת עם פיגמנטציה מופחתת, שלפוחית השחייה והאורך הכולל. פנוטיפים נוספים כללו דגי זברה עם חלמון נפוח וסנפיר קאודלי מעוקם, סנפיר קאודלי נעדר ונוטוכורד מעוקל.

מקרים חמורים הציגו קטיעה ומוות עם נמק.